一種沙蠶的超高壓提取方法及其制備得到的沙蠶提取物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種沙蠶的超高壓提取方法及其制備得到的沙蠶提取物。
【背景技術(shù)】
[0002]氧化應激(Oxidative stress)是機體細胞內(nèi)促氧化成分與抗氧化成分之間平衡失調(diào)引起的一系列適應性的反應，氧化應激及其介導的氧化損傷是機體不同系統(tǒng)疾病發(fā)生與發(fā)展的一個基礎(chǔ)病理代謝過程，鑒于氧化應激與許多慢性疾病密切相關(guān)，因此人們一直在不斷尋找開發(fā)高效的抗氧化劑，但目前食品中常用的化學合成抗氧化劑已被證明具有潛在的危害，而來源于生物體中的天然抗氧化劑具有更高的安全性，且對人體健康有更多好處，因此，近年來從生物體中尋找安全高效的天然抗氧化劑成為研究熱點。
[0003]目前，世界各國已研發(fā)出大量的天然抗氧化劑產(chǎn)品，這些產(chǎn)品也已得到廣泛應用，但這些產(chǎn)品多數(shù)來源于陸生植物，如胡蘿卜素、番茄紅素、花青素、白藜蘆醇、黃酮類等，而對大量具有生物活性功效的水產(chǎn)品的研發(fā)率較低，因此從水產(chǎn)品中尋找具有抗氧化功效的產(chǎn)品進行抗氧化劑的研發(fā)具有十分重要的意義。
[0004]沙蠶屬于環(huán)節(jié)動物門、多毛綱動物，是一種營養(yǎng)豐富，味道鮮美的海產(chǎn)食品，同時也是一種食療兼優(yōu)的藥膳。沙蠶的蛋白質(zhì)含量高，且其氨基酸組成基本齊全，并含有豐富的多不飽和脂肪酸。多項研究表明沙蠶具有很強的富集重金屬及其他污染物的作用，且沙蠶在耐受重金屬及有機質(zhì)污染時呈現(xiàn)出強大的抗氧化活性，因此沙蠶可能是制備天然可食用抗氧化劑的理想原料。
[0005]沙蠶目前主要作為培育海水魚、蝦、蟹的親體及魚、蝦、蟹的重要食物來源，在養(yǎng)殖旺季，沙蠶供不應求；但水產(chǎn)養(yǎng)殖存在季節(jié)性，在養(yǎng)殖淡季，沙蠶出現(xiàn)滯銷現(xiàn)象，因此沙蠶養(yǎng)殖企業(yè)迫切尋求沙蠶深加工途徑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中沙蠶深加工技術(shù)所存在的不足，提供一種沙蠶的超高壓提取方法。
[0007]本發(fā)明的第二個目的是提供上述方法制備得到的沙蠶提取物。
[0008]本發(fā)明的第三個目的是提供含有上述沙蠶提取物的天然抗氧化劑。
[0009]本發(fā)明的第四個目的是提供上述沙蠶提取物作為天然抗氧化劑的應用。
[0010]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的:
一種沙蠶的超高壓提取方法，是將凍干后的沙蠶磨粉，溶于丙酮中，在壓力300?400MPa、溫度10?30°C下提取20?40min后經(jīng)離心、濃縮即得。
[0011]本發(fā)明所選用的沙蠶為雙齒圍沙蠶屬于環(huán)節(jié)動物門(Annelida)，圍沙蠶屬動物?？寡趸镔|(zhì)本身性質(zhì)不穩(wěn)定，易受外界環(huán)境的影響而導致活性降低或消失，因此提取沙蠶抗氧化活性成分需嚴格保護其活性不受影響，超高壓提取是在常溫下對原料液迅速施加流體靜壓力，溶劑在超高壓作用下迅速滲透到固體原料內(nèi)部，溶解性增加，在短時間內(nèi)達到溶解平衡；同時在超高壓作用下，細胞壁、細胞膜以及細胞內(nèi)液泡等結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，滲透性增加，從而達到快速、高效地提取而不破壞小分子有效成分生理活性的目的。因此選擇超高壓提取技術(shù)作為沙香抗氧化物質(zhì)的提取技術(shù)可提尚提取效率。
[0012]超高壓提取已被廣泛應用，但針對具體的原料，需要研發(fā)一套合適的超高壓提取方案，本發(fā)明首先將沙蠶進行冷凍干燥制成粉狀，冷凍干燥可以保證沙蠶有效成分不受環(huán)境影響，同時也可以多批次使用，沙蠶為動物體，要想提取其有效成分，有機溶劑的篩選顯得尤為重要，發(fā)明人在根據(jù)沙蠶的特性，選取具有合適極性范圍的有機溶劑，并通過實驗，明確了將丙酮作為有機溶劑，可以達到沙蠶提取物的高效提取。
[0013]優(yōu)選地，所述濃縮為減壓蒸餾濃縮，濃縮后除去有機溶劑。
[0014]優(yōu)選地，所述沙蠶粉與丙酮的質(zhì)量體積比為Ig:30?50ml。
[0015]優(yōu)選地，所述有機溶劑為丙酮。
[0016]以沙蠶提取物中總酚含量作為評價沙蠶提取物有效成分含量大小的指標，發(fā)明人通過優(yōu)化出超高壓提取的最優(yōu)條件，并進行了響應面分析，結(jié)果表明超高壓提取溫度為28.08°C、提取壓力為378.72MPa、提取時間為20min時，沙蠶提取物中總酚含量最高。
[0017]本發(fā)明還提供上述方法獲得的沙蠶提取物。
[0018]本發(fā)明還提供含有上述沙蠶提取物的天然抗氧化劑。
[0019]本發(fā)明所得到的沙蠶提取物抗氧化能力強，因此，本發(fā)明還提供所述沙蠶提取物作為抗氧化劑的應用。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
本發(fā)明提供了一種沙蠶的超高壓提取方法，是將凍干后的沙蠶磨粉，溶于丙酮中，在壓力300?400MPa、溫度10?30°C下提取20?40min后經(jīng)離心、濃縮即得；該方法獲得的沙蠶提取物為粗提取，不用經(jīng)過純化，直接使用，發(fā)現(xiàn)6.25mg/mL時對DPPH清除率高達87.28%，100mg/mL時對超氧陰離子自由基的清除率達71.32%，250mg/mL時對羥自由基的清除率達62.18%，所獲得的沙蠶提取物具有極佳的抗氧化能力。
【附圖說明】
[0021]圖1為本發(fā)明沙蠶提取的流程圖。
[0022]圖2為提取時間和提取壓力的交互作用對總酚含量影響的響應面及等高線圖。
[0023]圖3為提取溫度和提取時間的交互作用對總酚含量影響的響應面及等高線圖。
[0024]圖4為提取溫度和提取壓力的交互作用對總酚含量影響的響應面及等高線圖。
[0025]圖5為沙蠶提取物對超氧陰離子的清除作用。
[0026]圖6為沙蠶提取物對羥自由基的清除作用。
【具體實施方式】
[0027]下面結(jié)合說明書附圖和具體實施例進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容，但不應理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本發(fā)明精神和實質(zhì)的情況下，對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的簡單修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍；若未特別指明，實施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。
[0028]實施例1
選用湛江地區(qū)養(yǎng)殖的雙齒圍沙蠶為原料，洗凈凍干，然后研磨成粉末備用，具體提取操作步驟如下:
(I)確定提取溶劑:分別稱取沙蠶于聚乙烯袋中，按1:30 (質(zhì)量:體積)的比例分別加入正己烷、環(huán)己烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5種有機溶劑，封口機封口，超高壓提取條件為:300MPa、室溫、20min，在此條件下分別進行提取，提取完成后離心得到的上清液經(jīng)減壓蒸餾濃縮除去有機溶劑，得到沙蠶提取物，用乙醇溶出沙蠶提取物，分別測定各沙蠶提取物中的總酚含量，選擇提取得到總酚含量最高有機溶劑作為沙蠶的提取溶劑，所述的質(zhì)量單位為克，體積單位為暈升。
[0029]以Folin-C1calteu比色法分別對5種有機溶劑提取物進行抗氧化物質(zhì)一總酸含量的測定(以沒食子酸作為含量衡量標準)。結(jié)果顯示，正己烷、環(huán)己烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5種有機溶劑提取物中抗氧化物質(zhì)一總酚的含量分別是3.39,3.61,4.22,6.09和5.04mg沒食子酸當量/g沙蠶干品，說明利用丙酮作為提取溶劑的沙蠶提取物抗氧化物質(zhì)一總酚含量最高。
[0030]同時還對5種有機溶劑所得到的沙蠶提取物的總抗氧化能力進行了檢測，采用磷鉬酸銨一紫外分光光度法，其吸光度的變化與還原物質(zhì)的含量呈比例關(guān)系，可根據(jù)吸光度大小計算樣品還原能力的強弱。結(jié)果表明，正己燒、環(huán)己燒、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5種有機溶劑提取物在相同濃度時(lmg/mL)總抗氧化能力分別相當于0.585,0.615,0.783、1.053、0.534沒食子酸濃度(mg/g)，說明丙酮提取獲得的沙蠶提取物的抗氧化能力最強。