α-乳糖在制備防治急性胰腺炎的保健食品中的應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及α -乳糖在制備防治急性胰腺炎的保健食品中的應用，屬醫(yī)藥和保健食品領域。
【背景技術】
[0002]乳糖是由一分子葡萄糖和一分子果糖通過糖苷鍵結合形成的一種二糖，其主要存在于哺乳動物乳汁當中，是維持嬰幼兒營養(yǎng)健康的必要成分之一。研究表明，乳糖能夠誘導上皮細胞抗菌肽LL-37的表達，揭示了乳糖的免疫調節(jié)功能。另外，低發(fā)酵寡聚糖、二糖、多元醇飲食可有效減少腸易激綜合征患者功能性胃腸癥狀，這說明乳糖在提供營養(yǎng)的同時對炎癥也具有一定的調節(jié)作用。
[0003]急性胰腺炎作為常見的消化疾病之一，其具體的發(fā)病機制尚未完全明確。為更有效地預防疾病的發(fā)生、開發(fā)在臨床上能更有效地治療急性胰腺炎的藥物，使急性胰腺炎避免發(fā)展成重癥急性胰腺炎甚至胰腺癌，從而減少胰腺炎的病死率以及并發(fā)癥發(fā)生率，開發(fā)防治急性胰腺炎的新藥物或保健食品顯得尤為重要。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明提供了防治急性胰腺炎的藥物或保健食品，有效成分是α -乳糖。
[0005]在本發(fā)明的一種實施方式中，α -乳糖的質量分數為1_10%。
[0006]在本發(fā)明的一種實施方式中，α -乳糖的質量分數為10%。
[0007]在本發(fā)明的一種實施方式中，所述保健食品是一種五谷雜糧營養(yǎng)保健食品，由小米粉、玉米淀粉、水解蛋白粉、α-乳糖、蜂蜜、乳清蛋白混合得到，按質量比計，各組分含量為:小米粉20份、玉米淀粉10份、水解蛋白粉12份、α -乳糖2份、蜂蜜I份、乳清蛋白10份。食用時加開水沖泡即可。
[0008]所述藥物的劑型可以是片劑、顆粒劑、膠囊劑、溶液劑、乳劑、混懸劑等。
[0009]所述α -乳糖通過降低胰腺組織水腫、血清淀粉酶、胰腺組織髓過氧化物酶的水平而降低急性胰腺炎的炎癥反應。
[0010]所述α -乳糖通過抑制炎癥介質，如MCP-1和TNF- α，的釋放而發(fā)揮抗急性胰腺炎的作用。
[0011 ] 所述α -乳糖通過抑制ERK1/2-NF- κ B炎癥信號通路相關信號通路的激活從而發(fā)揮抗急性胰腺炎的作用。
[0012]所述α -乳糖通過減少炎癥細胞的浸潤而發(fā)揮抗急性胰腺炎的作用。
[0013]所述α -乳糖通過調節(jié)免疫細胞如中性粒細胞、巨噬細胞在胰腺組織中浸潤發(fā)揮抗急性胰腺炎的作用。
[0014]本發(fā)明中α -乳糖對雨蛙素誘導的急性胰腺炎小鼠發(fā)揮保護作用，降低雨蛙素誘導的小鼠胰腺炎癥反應。該物質能夠通過降低急性胰腺炎過程中胰腺組織水腫、血清淀粉酶、胰腺組織髓質過氧化物酶MPO水平從而降低炎癥反應；同時，該物質可以降低胰腺組織和胰腺腺泡細胞中炎癥介質，如MCP-1和TNF- α水平；此外，該物質具有抑制細胞外調節(jié)蛋白激酶(ERK1/2MAPK)及核因子kB(NF-kB)蛋白信號通路的激活，減少免疫細胞如中性粒細胞、巨噬細胞在胰腺組織中浸潤，對急性胰腺炎具有顯著的保護作用，該物質可用于制備保健食品用于急性胰腺炎的防治，降低臨床急性胰腺炎的發(fā)生率和炎癥程度。
【附圖說明】
[0015]圖1采用血清淀粉酶試劑盒和髓過物氧化酶試劑盒分別測定的小鼠血清中的淀粉酶(AMY)和胰腺組織中髓過物氧化酶(MPO)水平，比較α-乳糖處理組與炎癥模型組的炎癥程度。其中，AMY表示血清淀粉酶，MPO表示髓過物氧化酶，CON表示對照組，AP表示炎癥模型組，Pro表示α-乳糖預防處理組，The表示α-乳糖治療處理組。*:炎癥模型組與對照組相比P < 0.05，#: α -乳糖處理組與炎癥模型組相比P < 0.05。
[0016]圖2采用HE染色的方法觀察胰腺組織的病理變化。其中，CON表示對照組，AP表示炎癥模型組，Pro表示α -乳糖預防處理組，The表示α -乳糖治療處理組。
[0017]圖3采用酶聯免疫吸附法測定小鼠胰腺組織勻漿上清液中的炎癥因子釋放水平，比較α-乳糖處理組與炎癥模型組的炎癥程度。其中，MCP-1表示趨化蛋白，TNF-α表示腫瘤壞死因子，CON表示對照組，AP表示炎癥模型組，Pro表示α -乳糖預防處理組，The表示α -乳糖治療處理組。*:炎癥模型組與對照組相比P < 0.05，#: α -乳糖處理組與炎癥模型組相比P <0.05。
[0018]圖4采用Western Blot方法檢測α -乳糖抑制雨蛙素刺激的胰腺腺泡細胞中ERK1/2MAPK及NF- κ B的表達。其中，CON表示未經處理的細胞，Cae表示雨蛙素處理的細胞，Cae+lac表示同時用雨蛙素和α -乳糖處理細胞，Lac表示用α -乳糖單獨處理細胞。
[0019]圖5采用酶聯免疫吸附法測定小鼠胰腺腺泡細胞，血液中提取的中性粒細胞及腹腔中提取的巨噬細胞中的炎癥因子釋放水平，比較α-乳糖處理組與炎癥模型組的炎癥程度。其中，MCP-1表示趨化蛋白，TNF-α表示腫瘤壞死因子，CON表示未經處理的細胞，Cae表不雨娃素處理的細胞，Cae+lac表不同時用雨娃素和α -乳糖處理的細胞；LPS表不LPS分別處理的中性粒細胞和巨噬細胞，LPS+Lac表示LPS與α -乳糖分別處理的細胞。*:炎癥模型組與對照組相比P < 0.05，#: α -乳糖處理組與炎癥模型組相比P < 0.05。
[0020]圖6采用免疫組化方法檢測小鼠胰腺組織中的中性粒細胞和巨噬細胞的浸潤水平。其中，CON表示對照組，AP表示炎癥模型組，Pro表示α -乳糖預防處理組，The表示α-乳糖治療處理組。
【具體實施方式】
[0021]實施例1急性胰腺炎模型建立
[0022]將8周齡雌性BALB/C小鼠隨機分成對照組(CON)、急性胰腺炎組(AP)、α -乳糖預防組(Pro)和α-乳糖治療組(The)，采用腹腔注射的方式給對照組小鼠注射生理鹽水(0.85%),注射量200 μ L/20g小鼠體重，采用腹腔注射的方式給急性胰腺炎組、α -乳糖預防組、α -乳糖治療組小鼠注射雨蛙素，注射量50 μ g/kg ;生理鹽水和雨蛙素都是每小時注射一次，連續(xù)注射10次。預防組在注射雨蛙素前三天飲用100mg/kg的α -乳糖水溶液并在第一次注射雨蛙素前0.5h腹腔注射100mg/kg的α -乳糖溶液，α -乳糖溶液濃度約為lOmg/mL ;治療組在最后一次注射雨娃素后Ih腹腔注射100mg/kg的α -乳糖溶液。最后一次注射完成I小時后，將小鼠處死，快速提取胰腺組織并將其平均分成三份，一份包在錫紙中稱量其濕重，另外兩份分別置于滅菌的EP管中并置于液氮罐中，最后放置在-80°C冰箱保存。采用摘眼球的方式進行取血，室溫下靜置2h后3000g，4°C離心15min，小心吸取血清并保存至-80°C冰箱用于測血清淀粉酶。
[0023]實施例2 α -乳糖降低急性胰腺炎過程中血清淀粉酶(AMY)的水平
[0024]淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麥芽糖及糊精，在底物濃度已知并且過量的情況下，加入碘液與未水解的淀粉生成藍