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      一種藍莓壓片糖及其制備方法_5

      文檔序號:9530522閱讀:來源:國知局
      實施例2 制備的壓片糖3周后,膚色正常,魚尾紋、抬頭紋幾乎完全消失。
      [0152] 5.女,魏某,由于使用彩妝或化妝品,臉上干燥起皮、黯黃粗糙,并且隨著年齡增 長,皮膚問題越來越多,經(jīng)服用本發(fā)明實施例2制備的壓片糖3周后,膚色潤滑,細膩,上述 癥狀徹底消失。
      [0153] 6.女,黃某,由于經(jīng)常晚睡、熬夜或出差,臉部出現(xiàn)色斑、毛孔粗大、起痘、油脂分泌 旺盛,經(jīng)服用本發(fā)明實施例2制備的壓片糖周后,上述癥狀完全消失。
      [0154] 7.女,高某,由于使用彩妝或化妝品,臉上干燥起皮、黯黃粗糙,并且隨著年齡增 長,皮膚問題越來越多,經(jīng)服用本發(fā)明實施例2制備的壓片糖3周后,膚色潤滑,細膩,上述 癥狀徹底消失。
      [0155] 8.男,韓某,經(jīng)常皮膚缺水、干燥,雖然每月做皮膚專業(yè)護理1次,但肌膚仍然松 弛,缺乏彈性。經(jīng)服用本發(fā)明實施例2制備的壓片糖3周后,膚色潤滑,細膩,上述癥狀徹底 消失。
      [0156] 9.女,申某,由于經(jīng)常晚睡、熬夜或出差,臉部出現(xiàn)色斑、毛孔粗大、起痘、油脂分泌 旺盛,經(jīng)服用本發(fā)明實施例2制備的壓片糖3周后,上述癥狀完全消失。
      [0157] 10.女,賈某,經(jīng)常皮膚缺水、干燥,魚尾紋、抬頭紋等逐步顯現(xiàn),經(jīng)服用本發(fā)明實施 例2制備的壓片糖3周后,膚色正常,魚尾紋、抬頭紋幾乎完全消失。
      [0158] 以上試驗結(jié)果表明,本發(fā)明具有美容養(yǎng)顏及抗菌功效的壓片糖對由不同原因造成 的皮膚松弛、無彈性、色斑增多、抬頭紋魚尾紋增多等癥狀均具有顯著治愈效果,具有較好 的美容養(yǎng)顏效果,并且本發(fā)明產(chǎn)品口感好,易于服用,無異味,真正實現(xiàn)以食養(yǎng)顏。
      [0159] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-4同樣具有上述實驗效果,各實施例之間及與上 述實驗效果差異性不大。
      [0160] 實施例8本發(fā)明壓片糖保質(zhì)期內(nèi)乳酸菌活菌含量穩(wěn)定性試驗
      [0161] 取本發(fā)明實施例2制備的壓片糖于室溫22-25Γ、通風條件下分別儲藏3個月、6 個月、12個月、24個月、36個月并測定乳酸菌活菌含量,結(jié)果如表3 :
      [0162] 表3 :保質(zhì)期內(nèi)乳酸菌活菌含量檢測結(jié)果
      [0164] 以上結(jié)果表明:本發(fā)明壓片糖的儲存穩(wěn)定性較好,抗環(huán)境(溫度、適度、氧氣、光 照、水分等)影響因素能力大,保質(zhì)期內(nèi)乳酸菌活菌含量損失率最大(36個月)為15%,比 現(xiàn)有的同類產(chǎn)品活菌含量高、損失率低、保質(zhì)期長,同時發(fā)映出壓片糖的其它生物活性成分 具有同樣的儲存穩(wěn)定性。
      [0165] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-4同樣具有上述實驗效果,各實施例之間及與上 述實驗效果差異性不大。
      [0166] 實施例9本發(fā)明壓片糖的感官品評試驗
      [0167] 邀請24名人員對本發(fā)明實施例2制備的壓片糖與市售兩種同類相同生產(chǎn)日期的 壓片糖進行品評,感官打分,其中專業(yè)和非專業(yè)人員各12名,專業(yè)人員青年、中年、老年各4 名,男女各半,非專業(yè)人員少年、青年、中年、老年各3名,男女各半;打分包括外觀(20分)、 質(zhì)地(25分)、風味(30分)、口感(25分)四個方面,打分人員獨立進行,互不影響,以保證 品評結(jié)果準確。對品評結(jié)果進行了統(tǒng)計,均分值取近似值,保留整數(shù),具體見表4 :
      [0168] 表4:感官品評統(tǒng)計結(jié)果
      [0170] 注:同一行內(nèi)標不同小寫字母表示差異顯著(P < 0.05),標不同大寫字母表示差 異極顯著(P < 0. 01),標有相同字母表示差異不顯著(P > 0. 05)。
      [0171] 以上結(jié)果表明,本發(fā)明制備的壓片糖從外觀、質(zhì)地、風味和口感任何一方面都要明 顯優(yōu)于市售壓片糖,特別是外觀、風味和口感極好,同時也適合不同年齡段、不同消費層次 的消費者食用。
      [0172] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-4制備的壓片糖同樣具有上述實驗效果,各實施 例之間及與上述實驗效果差異性不大。
      [0173] 實施例10本發(fā)明壓片糖益生性試驗
      [0174] 將本發(fā)明實施例2制備的壓片糖,用無菌水制備成活菌數(shù)為2 X K^CFU/mL的益生 菌溶液,于4°C保存?zhèn)溆茫?br>[0175] 1、取保存好的10mL益生菌溶液注入到試管1中,采用十倍逐級稀釋至10 8,取lmL 稀釋液在平板上,將滅菌后冷卻至45°C的MRS瓊脂培養(yǎng)基傾注在平板(滅菌)上,迅速搖 勻。再將裝有10mL益生菌溶液的試管2置于80-90°C水浴鍋中加熱15-25min,取加熱后的 益生菌溶液進行十倍逐級稀釋至10 8,取lmL稀釋液在平板上,將滅菌后冷卻至45°C的MRS 瓊脂培養(yǎng)基傾注在平板(滅菌)上并迅速搖勻。最后將加熱前和加熱后的平板均在35°C條 件下培養(yǎng)24h,計算加熱前后的數(shù)量。
      [0176] 結(jié)果表明,活菌存活率達到了 88%以上。
      [0177] 2、模擬胃液及腸液的耐受試驗:取100g/L的鹽酸16. 4mL加蒸餾水稀釋,使pH值 分別為1. 5、2. 5和3. 5,取100mL稀鹽酸溶液,分別加入lg胃蛋白酶,使其充分溶解,得模擬 胃液,微孔濾膜除菌(0. 22 μ m)備用。取磷酸二氫鉀6. 8g,加水500mL使溶解,用0.1 moL/ L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6. 8 ;另取胰蛋白酶10g,加水100mL使溶解,將兩液混合后, 加水稀釋至l〇〇〇ml,得模擬腸液,微孔濾膜除菌(0.22μπι)備用。取lmL保存好的益生菌 溶液加入到9mL的模擬胃液中(即十倍逐級稀釋),并迅速在振蕩器上充分混勻,然后置于 30-45°C靜置培養(yǎng)2-4h。分別在lh、2h、3h、4h的時候取出培養(yǎng)液并立即計數(shù)殘存活菌數(shù),與 原活菌數(shù)進行比較,結(jié)果表明,活菌存活率為98%。然后取在人工胃液中消化不同時間的培 養(yǎng)液各lmL,分別接種于9mL pH值為6. 8的人工腸液中,置于3〇-45°C靜置培養(yǎng)2-4h,并分 別在0、3、6、24h取樣,測定其活菌數(shù),與原活菌數(shù)進行比較,結(jié)果表明活菌存活率為99%。
      [0178] 3、模擬膽鹽的耐受試驗:用胰液素制成lg/L的溶液,并在溶液中加入0. 8%的豬 膽鹽,用10%的NaOH調(diào)整pH為8. 0,然后用0. 45 μ m微濾膜過濾并除菌。將0. 5mL保存好 的益生菌溶液接種到4. 5mL模擬膽鹽中,培養(yǎng)24h后得到培養(yǎng)液,計數(shù)殘存的活菌數(shù)。將培 養(yǎng)液在滅菌生理鹽水中十倍逐級稀釋至10 8,并用MRS傾注,然后置于35°C靜置培養(yǎng)24h。 結(jié)果表明活菌存活率為99%。
      [0179] 以上試驗結(jié)果表明,本發(fā)明壓片糖中的益生菌益生性(耐熱性、耐pH性、耐膽鹽) 較強,非常適合人體胃腸環(huán)境,在模擬胃腸環(huán)境中存活率大,可有效改善胃腸功能。
      [0180] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-4制備的壓片糖同樣具有上述實驗效果,各實施 例之間及與上述實驗效果差異性不大。
      [0181] 實施例11本發(fā)明壓片糖小鼠腸道性能試驗
      [0182] 將本發(fā)明實施例2制備的壓片糖,用無菌水制備成活菌數(shù)為2 X K^CFU/mL的益生 菌溶液,于4°C保存?zhèn)溆茫?br>[0183] 選取普通昆明小白鼠60只,雌雄各半,18_20g,常規(guī)詞養(yǎng)。從中隨機挑選40只,每 天早晨9:00灌胃鹽酸林可霉素0. 2mL (20mg) /只,其它作為對照組,每天同一時間灌胃等量 滅菌生理鹽水,連續(xù)一周,制備腸道菌群失調(diào)的小鼠模型。模型組小鼠飲食下降,未出現(xiàn)死 亡和明顯的腹瀉現(xiàn)象,排軟糞,外形正常含水分較多,墊料潮濕。將40只腸道菌群失調(diào)小 鼠,隨機分為2組,一組20只作為治療組,每天灌胃保存好的益生菌溶液0. 5ml (2 X lO^fu/ ml) /只,另20只作為自然恢復組,每天同一時間灌胃等量滅菌生理鹽水,連續(xù)兩周。整個試 驗期21天,每天觀察小白鼠的生長和排便情況,于第8、21天對壓片糖治療組和自然恢復組 的小鼠進行稱重,計算各組體重平均增長率,結(jié)果如表5 ;每5天測各組小鼠糞便大腸桿菌 數(shù)量,計算平均數(shù),結(jié)果如表6。取小鼠糞便約0. lg,于無菌操作臺內(nèi)加入3粒玻璃珠(以 〇. lg糞樣加〇. 5mL稀釋液),稀釋并接種麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,計算每克濕便中的大腸桿菌 數(shù)。
      [0184] 表5:小鼠增重情況
      [0186] 表6 :小鼠奠便中大腸桿菌數(shù)的情況
      [0188] 壓片糖治療組小鼠體重平均增長率(67. 96% )顯著高于自然恢復組(32. 14% ); 飼喂溶液后腸道大腸桿菌數(shù)量顯著下降,降低97. 07%,顯著低于自然恢復組(24. 78% ), 表明本發(fā)明壓片糖中的益生菌在小白鼠腸道內(nèi)迅速定植,形成優(yōu)勢菌群,并有效抑制大腸 桿菌等病原菌的生長繁殖,并且定植時間長,持續(xù)、有效改善了腸道性能。
      [0189] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-4制備的壓片糖同樣具有上述實驗效果,各實施 例之間及與上述實驗效果差異性不大。
      [0190] 實施例12本發(fā)明壓片糖對機體免疫力的影響
      [0191] 1實驗目的
      [0192] 通過運動耐力測試(小鼠游泳試驗),驗證本發(fā)明壓片糖的提高免疫力、抗疲勞作 用。
      [0193] 2實驗材料與試劑
      [0194] 2.1供試藥物:
      [0195] 市售美容養(yǎng)顏壓片糖(G1);市售美容養(yǎng)顏壓片糖(G2);本發(fā)明實施例2-4制備的 壓片糖(G3-G5)。
      [0196] 2. 2 試劑:
      [0197] 肝/肌糖原測試盒,購自南京建成生物制品研究所;濃硫酸(AR),南京化學試劑有 限公司;生理鹽水,山東長富潔晶藥業(yè)有限公司。
      [0198] 3.實驗動物
      [0199] ICR小鼠,?,清潔級,體重18_22g,由北京醫(yī)科大學比較醫(yī)學中心提供,實驗期間 小鼠自由飲食。
      [0200] 4.主要儀器
      [0201] 錯制游泳箱(50cmX50cmX40cm),鉛絲,低溫高速離心機:5804R型,Eppendrof公 司;水浴鍋:DK-S26型,上海精宏實驗設備有限公司;電子稱:BS224S型,Sartorius公司; 秒表,溫度計
      [0202] 5.實驗分組
      [0203] 5. 1劑量分組及受試樣品給予時間:隨機將小鼠分為8組,每組10只,第1組至第 5組分別給G1~G5的藥物,第6組為空白對照組,給予等體積的雙蒸水,每組每日均灌胃1 次,灌胃體積為〇. 2ml/10g,連續(xù)給予受試樣品30天。
      [0204] 5. 2樣品配制:第1組至第5組:稱取2. 25g藥物樣品,用蒸餾水配至150ml ;空白 對照組(第6組):雙蒸水150ml。
      [0205] 6.實驗方法
      [0206] 6. 1負重游泳實驗末次給藥30min后,置小鼠于游泳箱中,水深不少于30cm,水溫 25±1°C,鼠尾根部負荷5%體重的鉛皮,記錄小鼠游泳開始至死亡的時間,作為小鼠游泳時 間。
      [0207] 6. 2小鼠血清尿素測定末次給藥30min后,在溫度為30 °C的水中不負重游泳 90min,休息60min后摘眼球采血0. 5mL (不加抗凝劑),置4°C冰箱3h,血凝固后2000r/ min離心15min,取血清送北京醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科檢測。
      [0208] 6. 3肝糖原的測定末次給藥30min后,在溫度為25± 1°C的水中不負重游泳90min, 頸椎脫臼處死小鼠,用生理鹽水洗凈,并用濾紙吸干水分后,準確稱取肝臟l〇〇mg,肝糖原檢 測試劑盒檢測小鼠肝糖原含量。
      [0209] 6. 4血乳酸的測定末次給藥30min后采血,然后不負重在溫度為30°C的水中游泳 lOmin后停止。乳酸儀測定方法:分別在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20 μ L 加入40yL破膜液中,立即充分振蕩破碎細胞用乳酸儀測定。(血乳酸曲線下面積=5Χ (游 泳前血乳酸值+3Χ游泳后Omin的血乳酸值+2Χ游泳后20min的血乳酸值)
      [0210] 7.觀察指標負重游泳時間,血乳酸、尿素、肝糖原值
      [0211] 8.統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)用表示,采用t檢驗進行組間比較
      [0212] 9.實驗結(jié)果
      [0213] 9. 1本發(fā)明壓片糖對小鼠體重的影響
      [0214] 各組小鼠在給予G1~G5藥物后,前、中,后期體重分別見下表所示,各組小鼠的 初始體重和增重體重與對照組比較均無統(tǒng)計學差異(P > 0. 05),表明G1~G5藥物均無明 顯的毒性。實驗結(jié)果詳見表7。
      [0215] 表7負重游泳實驗小鼠的初始體重、中期體重和結(jié)束體重([±方)
      [0216]
      [0217] 9. 2本發(fā)明壓片糖對小鼠負重游泳時間的影響
      [0218] 經(jīng)口給予小鼠 G1~G5藥物后,G1~G2藥物與空白對照組比較,可以明顯延長小 鼠負重游泳時間,具有顯著性差異(P < 0. 05),本發(fā)明壓片糖G3~G5藥物與空白對照組比 較,可以顯著延長小鼠負重游泳時間,具有極顯著性差異(P < 0.01),且明顯優(yōu)于G1~G2 藥物。結(jié)果詳見表8。
      [0219] 表8壓片糖對小鼠負重游泳時間的影響(s )
      [0221] "*"p〈0. 05vs 空白對照;
      [0222] Olvs 空白對照;
      [0223] 9. 3本發(fā)明壓片糖對小鼠運動前后血乳酸的影響
      [0224] 經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明的壓片糖后,本發(fā)明壓片糖G3~G5藥物對小鼠運動后血乳 酸曲線下面積與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P < 0. 05),G1~G2藥物組小鼠血乳酸曲線下 面積與對照組比較雖有所降低,但并無統(tǒng)計學差異(P > 0. 05)。結(jié)果見表9。
      [0225] 表9本發(fā)明壓片糖對小鼠運動前后血乳酸水平的影響)
      [0226]
      [0227] "*"ρ〈0· 05vs 空白對照;
      [0228] 9. 4本發(fā)明壓片糖對小鼠肝糖原的影響
      [0229] 經(jīng)口給予小鼠 G1~G5藥物后,G1~G2藥物與空白對照組比較,小鼠肝糖原含量 均有明顯的升高,具有顯著性差異(P < 〇. 05),本發(fā)明壓片糖G3~G5藥物與與空白對照組 比較,小鼠肝糖原含量均有明顯的升高,具有極顯著性差異(P < 0. 01),且明顯優(yōu)于G1~ G2藥物。結(jié)果詳見表10。
      [0230] 表10本發(fā)明壓片糖對小鼠肝糖原含量的影響Gts )
      [0232] "*"ρ〈0· 05vs 空白對照;
      [0233] Olvs 空白對照;
      [0234] 9. 5本發(fā)明壓片糖對小鼠血清尿素的影響
      [0235] 經(jīng)口給予小鼠 G1~G5藥
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