一種抗疲勞的蛹蟲草哈密瓜酵素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物制劑技術(shù)領(lǐng)域，特別是設(shè)及一種抗疲勞的蛹蟲草哈密瓜酵素的制 備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 酵素又稱為"酶"，是具有生物催化功能的高分子物質(zhì)。幾乎所有的細胞活動進程 都需要酵素的參與。現(xiàn)代社會，隨著人們生活節(jié)奏的加快和環(huán)境污染的加劇，人們體內(nèi)酵素 的含量日益減少，進而降低了人體免疫力和代謝速率，使人們患病的幾率大增。目前，日常 食品中的酵素含量太低，無法滿足人們的正常需要。為了符合現(xiàn)代人對營養(yǎng)需要的多樣性、 平衡性和易于吸收性，高效的酵素產(chǎn)品的生產(chǎn)迫在眉睫。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種抗疲勞的蛹蟲草 哈密瓜酵素的制備方法。
[0004] 本發(fā)明所采用的技術(shù)解決方案是一種抗疲勞的蛹蟲草哈密瓜酵素的制備方法，所 需步驟如下： 步驟1:制備酵母菌種液： 種液罐擴大培養(yǎng)基:YTO液體培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分數(shù)為1%酵母提取物，2%蛋白腺，2%葡萄 糖，2%瓊脂，其余為水，將Yro液體培養(yǎng)基放入0.5M3種子罐內(nèi)，115°C的30-50分鐘高溫滅菌； 無菌操作條件下將1.5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，形成菌液，將所述的菌液裝 入血清瓶并接種到0.5M 3種子罐，在28-30°C下通入無菌壓縮空氣，通氣量為0.2-0.3立方 米/分鐘，培養(yǎng)20-30 h，待菌體生長至對數(shù)期末期時停止培養(yǎng)，重復(fù)上述步驟可制得所需質(zhì) 量的酵母菌液的種液； 步驟2:制備乳酸菌種液： 種液罐擴大培養(yǎng)基:麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分數(shù)為10%麥芽汁，0.5%大豆蛋 白腺，0.5%酵母膏，1%牛肉膏，0.2% K2HPO4,其余為水，將麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基放入0.5M3 種子罐內(nèi)，115°C的30-50分鐘高溫滅菌;無菌操作條件下將1.5公斤乳酸菌的干菌粉溶于3 倍的無菌水中，菌液裝入血清瓶并接種到0.5M 3種子罐，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24-36 h，待菌體 生長至對數(shù)期末期時停止培養(yǎng)，可重復(fù)上述步驟可制得所需乳酸菌的種液； 步驟3:培養(yǎng)發(fā)酵液： 先將質(zhì)量比為117:3:50:15:5:1000的哈密瓜:番茄:蘋果:葡萄:巧樣:水混合打碎過濾 取濾液，用所述濾液制成培養(yǎng)基，在115°C下高溫滅菌30-50分鐘，將所述培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐 中，然后按質(zhì)量為所述濾液的5%-10%的接種量接種步驟1制得的酵母菌的種液，在28°C的溫 度下培養(yǎng)4她，所述的發(fā)酵罐的體積為V立方米，通氣量為(0.4-0.6)V立方米/分鐘，攬拌轉(zhuǎn) 速100-120 rpm/min;然后按質(zhì)量為所述濾液的5%-10%的接種量接種步驟2制得的乳酸菌種 液，在37°C的溫度下繼續(xù)培養(yǎng)5-7d(靜置培養(yǎng)，無攬拌，讓罐保持正壓W防染菌）至發(fā)酵結(jié) 束，得到發(fā)酵液； 步驟4:將發(fā)酵液離屯、處理獲得酵素原液： 將步驟3得到的發(fā)酵液導(dǎo)入離屯、機，經(jīng)6000 rpm離屯、lOmin，所得上清液即為酵素原液； 步驟5: 將質(zhì)量比為:蛹蟲草提取物:酵素原液=80:1000的蛹蟲草提取物和步驟4得到的酵素原 液混合，在115°C環(huán)境下維持30-50分鐘，進行高溫滅菌，然后進行分裝。
[0005] 所述的步驟2中的乳酸菌為1.5公斤地衣芽抱桿菌。
[0006] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所具有的有益效果為： 蛹蟲草具有和冬蟲夏草相似的活性成分和藥理作用，被稱為可人工培養(yǎng)的"冬蟲夏 草"。2009年，蛹蟲草被批準為新資源食品，且其價格遠低于冬蟲夏草，因而越來越受到廣大 消費者的青睞。中醫(yī)認為，蛹蟲草入肺腎二經(jīng)，既補肺陰，又補腎陽，功能主治為補肺益腎， 止咳化疲?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究其具有細胞免疫和體液免疫調(diào)節(jié)作用，還具有抗疲勞作用。因此， 若能開發(fā)W蛹蟲草為主要原料的產(chǎn)品，不僅能推動蛹蟲草產(chǎn)業(yè)的進一步發(fā)展，更能為廣大 人民群眾的健康帶來福祉。盡管市場上已有蛹蟲草相關(guān)的產(chǎn)品，但市場規(guī)模小，附加值低， 功效不明確，亟需開發(fā)高效的、高附加值的蛹蟲草系列產(chǎn)品。
[0007] 本發(fā)明結(jié)合酵素和蛹蟲草的各自特點，將兩者進行混合發(fā)酵或復(fù)配，再配W其它 活性成分，創(chuàng)新性地開發(fā)出蛹蟲草酵素產(chǎn)品。該發(fā)明集合酵素和蛹蟲草的功效于一身，具有 抗疲勞的功效。
[0008] 蛹蟲草酵素受試物能明顯對抗疲勞，增強肌肉耐力，抵抗運動性疲勞，對抗疲勞， 增強精力、體力，改善貧血癥狀。使膚色看起來更年輕，精氣神更足。
【具體實施方式】
[0009] 實施例1: 步驟1:制備酵母菌種液： 種液罐擴大培養(yǎng)基:YTO液體培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分數(shù)為1%酵母提取物，2%蛋白腺，2%葡萄 糖，2%瓊脂，其余為水，將YTO液體培養(yǎng)基放入0.5M3種子罐內(nèi)，115°C的30分鐘高溫滅菌;無 菌操作條件下將1.5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的無菌水中，形成菌液，將所述的菌液裝入 血清瓶并接種到0.5M 3種子罐，在28°C下通入無菌壓縮空氣，通氣量為0.2立方米/分鐘，培 養(yǎng)20 h，待菌體生長至對數(shù)期末期時停止培養(yǎng)，重復(fù)上述步驟可制得所需質(zhì)量的酵母菌液 的種液； 步驟2:制備乳酸菌種液： 種液罐擴大培養(yǎng)基:麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基，其質(zhì)量百分數(shù)為10%麥芽汁，0.5%大豆蛋 白腺，0.5%酵母膏，1%牛肉膏，0.2% K2HPO4,其余為水，將麥芽復(fù)合汁增菌培養(yǎng)基放入0.5M3 種子罐內(nèi)，115°C的30分鐘高溫滅菌;無菌操作條件下將1.5公斤乳酸菌的干菌粉溶于3倍的 無菌水中，菌液裝入血清瓶并接種到0.5M 3種子罐，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24 h，待菌體生長至 對數(shù)期末期時停止培養(yǎng)，可重復(fù)上述步驟可制得所需乳酸菌的種液;所述的步驟2中的乳酸 菌為1.5公斤地衣芽抱桿菌。
[0010] 步驟3:培養(yǎng)發(fā)酵液： 先將質(zhì)量比為117:3:50:15:5:1000的哈密瓜:番茄:蘋果:葡萄:巧樣:水混合打碎過濾 取濾液，用所述濾液制成培養(yǎng)基，在115°C下高溫滅菌30分鐘，將所述培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐中， 然后按質(zhì)量為所述濾液的5%的接種量接種步驟1制得的酵母菌的種液，在28°C的溫度下培 養(yǎng)4她，所述的發(fā)酵罐的體積為V立方米，通氣量為0.4V立方米/分鐘，攬拌轉(zhuǎn)速100 rpm/ min;然后按質(zhì)量為所述濾液的5%的接種量接種步驟2制得的乳酸菌種液，在37°C的溫度下 繼續(xù)培養(yǎng)5d(靜置培養(yǎng)，無攬拌，讓罐保持正壓W防染菌)至發(fā)酵結(jié)束，得到發(fā)酵液； 步驟4:將發(fā)酵液離屯、處理獲得酵素原液： 將步驟3得到的發(fā)酵液導(dǎo)入離屯、機，經(jīng)6000 rpm離屯、lOmin，所得上清液即為酵素原液； 步驟5: 將質(zhì)量比為:蛹蟲草提取物:酵素原液=80:1000的蛹蟲草提取物和步驟4得到的酵素原 液混合，在