[0043]按重量份計(jì)取lg細(xì)胞色素P450酶、100gNADPNa2、1200g檸檬酸三鈉、60g氯化鎂， 加10kg水溶解配成生物酶減害劑。細(xì)胞色素P450酶選自細(xì)胞色素P450同工酶P450 1A、 P450 2A、P450 2B、P450 2C、P450 2D、P450 2E、P450 3A、P450 11A、P450 11B中任意一種 或多種組合。
[0044] 待濃縮液溫度降至40°C以下后，將上述生物酶減害劑施加于含114kg濃縮液的濃 縮液罐中，攪拌均勻，反應(yīng)后，再進(jìn)行后續(xù)加工工序。其中，生物酶減害劑施加于濃縮液中的 量為濃縮液重量的10%。
[0045] 實(shí)施例2
[0046] 按重量份計(jì)取lg細(xì)胞色素P450酶、200gNADPNa2、2400g檸檬酸三鈉、120g氯化 鎂，加50kg水溶解配成生物酶減害劑。細(xì)胞色素P450酶選自細(xì)胞色素P450同工酶P450 1A、P450 2A、P450 2B、P450 2C、P450 2D、P450 2E、P450 3A、P450 11A、P450 11B中任意一 種或多種組合。
[0047] 待濃縮液溫度降至40°C以下后，將上述生物酶減害劑施加于含1054kg濃縮液的 濃縮液罐中，攪拌均勻，反應(yīng)后，再進(jìn)行后續(xù)加工工序。其中，生物酶減害劑施加于濃縮液中 的量為濃縮液重量的5%。
[0048] 實(shí)施例3
[0049] 將實(shí)施例1中施加了生物酶減害劑的濃縮液樣品，反應(yīng)24h后，稀釋20倍，進(jìn)行 NNK含量檢測(cè)，重復(fù)測(cè)定5次，并取平均值。同時(shí)，取未施加生物酶減害劑的濃縮液樣品，進(jìn) 行相同步驟后，測(cè)定NNK含量。施加樣品和對(duì)照樣品中NNK含量檢測(cè)結(jié)果見表1。并以對(duì)照 組為參考，計(jì)算施加生物酶體系后NNK降低率。其中，采用高效液相-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用 儀測(cè)定濃縮液中的NNK含量。
[0050] 具體計(jì)算公式為：
[0051] NNK降低率（％ )=((對(duì)照組NNK含量-生物酶施加組NNK含量）/對(duì)照組NNK 含量）X100%
[0052] 由表1中結(jié)果可以看出，與對(duì)照組比較，施加了生物酶減害劑的濃縮液樣品，其 NNK含量平均降低了 48. 1%。
[0053] 表1生物酶減害劑降低濃縮液中NNK含量的結(jié)果
[0054]
[0055] 實(shí)施例4
[0056] 將實(shí)施例1中施加了生物酶減害劑的濃縮液樣品，反應(yīng)10h后，進(jìn)行后續(xù)加工如加 香加料和涂布工序等，加工制成再造煙葉。再將再造煙葉經(jīng)在22°C恒溫、60%RH恒濕的條 件下平衡后，切成煙絲，卷制成卷煙，測(cè)定卷煙煙氣中NNK釋放量。同時(shí)，取未施加生物酶減 害劑的濃縮液樣品，進(jìn)行相同步驟后，測(cè)定卷煙煙氣中NNK釋放量。具體檢測(cè)結(jié)果如表2所 示。并以對(duì)照組為參考，計(jì)算施加生物酶體系后NNK降低率。其中，采用高效液相-三重四 極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定卷煙煙氣中的NNK釋放量。具體計(jì)算公式同實(shí)施例1。
[0057] 由表2中數(shù)據(jù)可以看出，與對(duì)照組比較，煙氣中NNK釋放量選擇性降低了 23. 2%， 焦油釋放量略有升高，煙堿，抽吸口數(shù)、C0釋放量和巴豆醛釋放量均變化不大。從煙氣檢測(cè) 結(jié)果中可以看出，生物酶減害劑僅選擇性的降低了NNK，從而實(shí)現(xiàn)了卷煙的選擇性降害。
[0058] 表2生物酶減害劑降低再造煙葉卷煙煙氣中NNK及其它有害成分釋放量的結(jié)果
[0059]
[0060] 實(shí)施例5
[0061] 以濃縮液為基質(zhì)，添加純品NNK，配制不同濃度的NNK(0. 1、0. 5、5、50、500μmol/ L)，進(jìn)行NNK降低實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證本發(fā)明中生物酶減害劑對(duì)不同濃度NNK的降低效果。
[0062] 將實(shí)施例1中制備的生物酶減害劑施加到不同NNK濃度的濃縮液中，反應(yīng)24h后， 稀釋20倍，進(jìn)行NNK含量檢測(cè)。同時(shí)，取未施加生物酶減害劑的不同NNK濃度的濃縮液樣 品，進(jìn)行相同步驟后，測(cè)定NNK含量。施加樣品和對(duì)照樣品中NNK含量檢測(cè)結(jié)果見表3。由 表3中結(jié)果可以看出，與對(duì)照組比較，生物酶減害劑使不同濃度組的NNK含量分別降低了 30. 6%~56. 6%，表明生物酶減害劑在降低NNK方面，具有非常寬泛的濃度范圍，可適用于 不同的再造煙葉（如，烤煙型和混合型）。
[0063] 表3生物酶減害劑降低濃縮液中不同濃度組的NNK含量的結(jié)果
[0064]
[0065] 上述實(shí)施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟 悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行修飾或改變。因 此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識(shí)者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完 成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑，包括有效成分和水，所述有效成分以重 量份計(jì)，包括以下組分： 生物酶 1份； NADPNa：100-200 份： 檸檬酸三鈉1200-2400份； 氯化鎂 60-120份； 所述水的加入量為：適量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑，其特征在于，所述水與所 述生物酶加入量的重量之比為：10000-50000 :1。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑，其特征在于，所述生物酶 為細(xì)胞色素P450酶。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑，其特征在于，所述細(xì)胞 色素P450 酶選自細(xì)胞色素P450 同工酶P4501A、P4502A、P4502B、P4502C、P4502D、P4502E、 P4503A、P45011A、P45011B中任意一種或多種組合。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑的制備方法， 包括以下步驟： 1) 按重量份計(jì)分別取相應(yīng)質(zhì)量的生物酶、NADPNa2、檸檬酸三鈉、氯化鎂； 2) 將步驟1)獲得的各組分，溶解于水，即得所需生物酶減害劑。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑的使用方法， 包括如下步驟：將制備的生物酶減害劑施加于濃縮液中的煙葉上進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)后再進(jìn)行 后續(xù)加工工序制成卷煙。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑的使用方法，其特征 在于，所述生物酶減害劑施加于濃縮液中的量為濃縮液重量的5-11% ;所述生物酶減害劑 施加于濃縮液中的反應(yīng)時(shí)間多l(xiāng)〇h。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑的使用方法，其特征 在于，所述生物酶減害劑施加于濃縮液時(shí)，濃縮液的溫度低于40°C。9. 根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑用于選擇性降 低卷煙中NNK的用途。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑的用途，其特征在于，所 述用途為選擇性降低再造煙葉中NNK含量或再造煙葉加工制成卷煙的煙氣中NNK釋放量的 用途。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑，包括有效成分和水，所述有效成分以重量份計(jì)，包括以下組分：生物酶1份；NADPNa2100-200份；檸檬酸三鈉1200-2400份；氯化鎂60-120份；所述水的加入量為：適量。本發(fā)明還進(jìn)一步提供了一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑的制備及其使用方法。本發(fā)明提供一種選擇性降低再造煙葉中NNK的減害劑，通過采用生物酶減害劑，可以選擇性降低再造煙葉中NNK含量，并進(jìn)一步降低再造煙葉制成的卷煙煙氣中的NNK釋放量，其無毒無害，對(duì)人體和環(huán)境均無不良影響，非常值得推廣應(yīng)用。
【IPC分類】A24B15/20
【公開號(hào)】CN105249525
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510621067
【發(fā)明人】劉興余, 周駿, 張馨予, 張 杰, 白若石, 楊振東, 易小麗, 張晨, 劉冬燁, 蔣成勇, 曹伏軍
【申請(qǐng)人】上海煙草集團(tuán)有限責(zé)任公司, 上海煙草集團(tuán)北京卷煙廠
【公開日】2016年1月20日
【申請(qǐng)日】2015年9月25日