本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及青皮的新用途，尤其是青皮或醋青皮在制備抑制腫瘤新生血管生成的藥物中的用途。

背景技術(shù)：

血管生成(angiogenesis)是從已有血管發(fā)芽生成新血管的過程。這一過程與血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖相關(guān)。胚胎發(fā)育過程伴隨著血管生成。但除了傷口愈合、女性經(jīng)期及一些病理過程(如癌癥)外，成人很少出現(xiàn)血管生成。

血管生成對(duì)惡性實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移乃至預(yù)后都有著極其重要的意義。血管生成是惡性實(shí)體腫瘤突破上皮基底膜后進(jìn)一步生長(zhǎng)所必須的。腫瘤中新形成的血管具有其自身獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，表現(xiàn)為管壁不完整，無平滑肌成分，僅由有孔的內(nèi)皮細(xì)胞和片狀的基膜構(gòu)成。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，新生血管的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使惡性腫瘤組織發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移成為可能。因此，惡性實(shí)體腫瘤中新生血管的定量被認(rèn)為是一種重要的獨(dú)立的預(yù)后標(biāo)志。

青皮為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥幼果或未成熟果實(shí)的果皮。味苦、辛，性溫。有疏肝破氣，消積化滯的功效。用于胸脅脹痛，疝氣疼痛，乳癖，乳癰，食積氣滯，脘腹脹痛。用法用量3～l0g。青皮的炮制品有青皮和醋青皮兩種。

雖然亦有報(bào)道稱其具有抗腫瘤作用，但是并未發(fā)現(xiàn)其具有抑制腫瘤新生血管生成的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所解決的第一個(gè)技術(shù)問題是提供一種青皮的藥物新用途。

本發(fā)明所提供的青皮的藥物新用途是青皮或醋青皮在制備抑制腫瘤新生血管生成的藥物中的新用途。

所述藥物是以有效劑量的青皮或醋青皮為活性成分，按照藥學(xué)常規(guī)方法，加入藥學(xué)上的輔料制備而成的藥劑。具體的可以制成口服制劑或者注射劑，通過口服、肌肉注射、靜脈輸入或腹腔注射等方式給藥。

本發(fā)明所解決的第二個(gè)技術(shù)問題是提供一種抑制腫瘤新生血管生成的藥物組合物，尤，其主要活性成分為青皮或醋青皮，按照藥學(xué)常規(guī)方法制備而成的藥劑。制備時(shí)還可以加入藥學(xué)上的常規(guī)輔料制備?；钚猿煞诌€可以配加其他抗腫瘤藥增加協(xié)同增效的效果。

所述常規(guī)輔料包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。

以青皮或醋青皮為活性成分制備的抑制腫瘤新生血管生成的藥物可以制成口服劑、注射 液等多種形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。

本發(fā)明所解決的第三個(gè)技術(shù)問題是提供上述抑制腫瘤新生血管生成的藥物組合物的制備方法。

優(yōu)選的方法之一：包括如下步驟：

A、青皮或醋青皮加水煎煮，過濾得煎煮液；

B、干燥煎煮液即得。

進(jìn)一步的，步驟B干燥煎煮液至含水量低于5％。

優(yōu)選的方法之一：包括如下步驟：

A、青皮或醋青皮加水煎煮，過濾得煎煮液；

B、煎煮液按照藥學(xué)常規(guī)方法，加入藥學(xué)上的常規(guī)輔料制備而得。

具體的可以制成口服制劑或者注射劑，可加入的常規(guī)輔料包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。

綜上，本發(fā)明采用青皮或醋青皮抑制腫瘤新生血管生成作用顯著，為臨床抑制腫瘤新生血管生成以及治療腫瘤提供了一種全新的選擇。

附圖說明

圖1青皮干預(yù)的幼魚光鏡圖。

圖2青皮干預(yù)的幼魚熒光顯微鏡顯示圖的灰度格式圖。

圖3青皮干預(yù)的幼魚高倍熒光顯微鏡顯示圖的灰度格式圖。

圖4陽性對(duì)照-PTK787干預(yù)的幼魚光鏡圖。

圖5陽性對(duì)照-PTK787干預(yù)的幼魚熒光顯微鏡顯示圖的灰度格式圖。

圖6陽性對(duì)照-PTK787干預(yù)的幼魚高倍熒光顯微鏡顯示圖的灰度格式圖。

圖7陰性對(duì)照-Vehicle Control(0.1％DMSO)干預(yù)的幼魚光鏡圖。

圖8陰性對(duì)照-Vehicle Control(0.1％DMSO)干預(yù)的幼魚熒光顯微鏡顯示圖的灰度格式圖。

圖9陰性對(duì)照-Vehicle Control(0.1％DMSO)干預(yù)的幼魚高倍熒光顯微鏡顯示圖的灰度格式圖。

具體實(shí)施方式

下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。

考察青皮藥用新用途的試驗(yàn)如下：

實(shí)施例：

1.材料與方法

1.1材料

中藥均購(gòu)自四川回春堂醫(yī)藥有限公司。所有試劑均購(gòu)自Sigma-Aldrich Co.(St.Louis,MO)，PTK787(vatalanib)購(gòu)自Selleckchem。采用fli1a-EGFP轉(zhuǎn)基因斑馬魚進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。斑馬魚按照標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境飼養(yǎng)。

1.2試劑配制

稱取中藥450g，8倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，將3次水煎液合并于800W電爐上濃縮至約400ml，過100目篩網(wǎng)(濾渣留樣)后，均勻涂布于蒸發(fā)皿中，將蒸發(fā)皿置于電熱鼓風(fēng)干燥箱中，于60℃下間斷干燥62小時(shí)后，繼續(xù)于玻璃干燥器中室溫干燥直至制成水分含量<5％(烘干法測(cè)定)的浸膏。

1.3實(shí)驗(yàn)過程

將受精后22小時(shí)的胚胎放入12孔板中(每孔30個(gè)胚胎)，采用中藥干預(yù)26小時(shí)。中藥水提物溶解于0.1％二甲亞砜(DMSO)中，每孔加入中藥水提物濃度為200μg/ml。陽性對(duì)照組為5μg/ml PTK787(瓦他拉尼vatalanib,一種血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體拮抗劑)，陰性對(duì)照組為0.1％DMSO。受精后48小時(shí)，三卡因麻醉幼魚，使用Nikon SMZ 1500熒光顯微鏡分析拍照。節(jié)間血管形成是評(píng)價(jià)藥效的主要指標(biāo)，同時(shí)也用于評(píng)價(jià)其毒性。

1.4結(jié)果及結(jié)論

采用青皮、陽性對(duì)照-PTK787、陰性對(duì)照-Vehicle Control干預(yù)的幼魚光鏡圖、熒光顯微鏡顯示圖(灰度格式圖)、高倍熒光顯微鏡顯示圖(灰度格式圖)分別見圖1-9。

采用青皮和PTK787干預(yù)的幼魚均出現(xiàn)了血管生成的缺陷。光鏡和熒光顯微鏡顯示，與0.1％DMSO陰性對(duì)照比較，采用青皮干預(yù)的幼魚，形成了較少的完整的節(jié)間血管。高倍鏡顯示，只能夠偶爾觀察到背主動(dòng)脈苗。5μg/ml PTK787陽性對(duì)照則能夠完全抑制節(jié)間血管和背部縱向血管。青皮沒有導(dǎo)致斑馬魚死亡或者致畸，沒有發(fā)現(xiàn)青皮的神經(jīng)毒性或者器官毒性。

綜上，本發(fā)明采用青皮或醋青皮抑制腫瘤新生血管生成作用顯著，為臨床抑制腫瘤新生血管生成以及治療腫瘤提供了一種全新的選擇。