本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種包含青錢柳葉、桑白皮和石斛的保健組合物及其制劑和用途。
背景技術(shù)：
：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一種常見的多病因的有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病，隨著生活水平的提高，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，成為繼癌癥、心腦血管疾病之后危害人體健康的第三殺手，糖尿病以高血糖為主要標(biāo)志，并導(dǎo)致一系列臨床表現(xiàn)。我國(guó)1997年完成的有關(guān)糖尿病流行病學(xué)調(diào)查課題顯示，全國(guó)糖尿病發(fā)病率從1980年的1％上升到3.2％，更為嚴(yán)重的是60歲以上的老年人中糖尿病的發(fā)病率超過(guò)11％。2012年的最新研究報(bào)告顯示，我國(guó)糖尿病人位居全球第一。糖尿病屬中醫(yī)的“消渴”或“消癉”范疇?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)將糖尿病主要分為兩種類型：一類是I型的胰島素依賴型(TDDM)，以遺傳因素為主，多發(fā)生于青少年。另一類為II型的非胰島素依賴型(NIDDM)，因胰島素抵抗及胰島素分泌相對(duì)不足或延遲，導(dǎo)致血糖升高，病程長(zhǎng)者可出現(xiàn)糖尿病的并發(fā)癥，多發(fā)于成年或中老年人。在所有糖尿病患者中，90％以上是患II型糖尿病。目前，糖尿病的治療除用胰島素外還配用一些口服降糖藥物，如：磺酰脲類、二甲雙胍類、α-葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷酮等。西藥治療效果雖然比較明顯，但副作用大，如易造成低血糖、乳酸中毒、腸道不適等。該病如得不到控制，將會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重慢性并發(fā)癥進(jìn)而致殘致死。因此，加強(qiáng)糖尿病的防治措施已受到世界各國(guó)的重視，研究防治糖尿病的新型藥物和保健食品是國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的前沿課題。非藥物性治療糖尿病已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、食品科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。盡管國(guó)內(nèi)外很多大的企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)，爭(zhēng)相研究和開發(fā)降糖藥物或者替代產(chǎn)品，但大多都因價(jià)格昂貴、載體不理想、效果不穩(wěn)定或者服用麻煩而不被人們認(rèn)可和接受。此外，高血壓、高血脂也是近年來(lái)困擾人們的“現(xiàn)代文明病”，對(duì)人體健康的危害極大，對(duì)其防治的困難與糖尿病類似。高血壓(hypertension)是一種以動(dòng)脈壓異常升高為主要特征的心血管疾病。病因分為原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓。前者占高血壓的90％，稱為高血壓病。本病屬于中醫(yī)的“眩暈”、“頭痛”等范疇。高脂血癥(hyperlipemia)又稱高脂蛋白血癥，可表現(xiàn)為膽固醇血癥、高三酰甘油血癥或兩者兼有，它與動(dòng)脈粥樣性硬化、糖尿病、脂肪肝、腎病等關(guān)系十分密切。尤其在心腦血管病的發(fā)病中有重要的地位而日益引起人們的重視。中醫(yī)認(rèn)為高脂血癥屬“濁阻”、“痰濕”、“肥胖”、“濕熱”等范疇。高血糖、高血壓、高血脂(“三高”)病因復(fù)雜，目前病因尚不完全明確。目前雖然西醫(yī)治療的療效比較肯定，但對(duì)合并癥及其并發(fā)癥的治療困難較大，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致程度不同的副作用，患者往往難以忍受，不能堅(jiān)持治療。中醫(yī)對(duì)上述疾病的認(rèn)識(shí)和防治，則是從整體調(diào)理、辨證論治入手，雖然沒有西藥快速，但通過(guò)整體調(diào)理，癥狀和指標(biāo)都會(huì)得到有效控制，同時(shí)能夠有效保護(hù)靶器官等。從臨床上看，往往是高血脂、高血糖、高血壓合并出現(xiàn)，互為因果。最近，更多的研究結(jié)果證實(shí)，為了達(dá)到防止和延緩并發(fā)癥發(fā)生和發(fā)展的目的，應(yīng)該十分強(qiáng)調(diào)多種因素的控制，例如在II型糖尿病中，除了嚴(yán)格控制血糖、血壓水平之外，還應(yīng)該采取嚴(yán)格控制血脂水平，嚴(yán)格控制體重，常規(guī)抗凝治療等措施，以進(jìn)一步降低大血管病變的風(fēng)險(xiǎn)。但截至目前能夠同時(shí)預(yù)防或治療“三高”的中藥組合物了了無(wú)幾，能夠取得滿意的療效且患者依從性高的藥物組合物更是鮮有報(bào)道，因此，研究開發(fā)能夠同時(shí)預(yù)防和治療“三高”的安全有效的藥物，是當(dāng)務(wù)之急，迫在眉睫。近些年來(lái)，從天然產(chǎn)物中尋找新的有生理活性的成分或先導(dǎo)化合物以開發(fā)新藥或保健食品基科已成為全球關(guān)注和研究的熱點(diǎn)。尋求降糖、降壓和降脂食物資源并對(duì)其功能因子進(jìn)行剖析，進(jìn)而開發(fā)生產(chǎn)出降血糖、降血壓、降血脂食品的保健食品基料可望成為治療這些疾病的好途徑。青錢柳(cyclocaryapaliurus(Batal.)Ijinsk)屬胡桃科青錢柳屬的喬木植物?，F(xiàn)僅存一種，為我國(guó)特有，是國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)的瀕危植物之一，廣泛分布于長(zhǎng)江流域各省，江西省北部及中部丘陵山地分布較多。據(jù)《中華本草》記載，青錢柳具有祛風(fēng)、消炎止痛和殺蟲止瘁等功效。其主要成分有皂苷、黃酮、萜類、多糖、微量元素等。研究表明青錢柳葉具有多種功效，例如青錢柳葉能明顯抑制脂肪酶活性、減少脂肪的消化吸收，并能促進(jìn)脂類物質(zhì)的代謝分解，能有效降低血糖、明顯改善糖耐量，抗氧化、抗疲勞等。青錢柳葉系列保健產(chǎn)品的開發(fā)，必將豐富我國(guó)的保健品市場(chǎng)，提高人民的健康生活水平。桑白皮為桑科植物桑(MorusalbaL.)的干燥根皮。別名桑根白皮、桑根皮、桑皮、白桑皮。主產(chǎn)于安徽、河南、浙江、江蘇、湖南等地。秋末落葉時(shí)至次春發(fā)芽前采挖根部，刮去黃棕色粗皮，縱向剖開，剝?nèi)「?，曬干。桑白皮具有瀉肺平喘，利水消腫之功效，可用于肺熱咳喘，面目浮腫，小便不利等癥。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明桑白皮具有降壓、利尿、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌和降血糖等活性。石斛(DendrobiumnobileLindl)，又名萬(wàn)丈須、吊蘭、林蘭、金釵華等。莖直立，肉質(zhì)狀肥厚，稍扁的圓柱形，長(zhǎng)10～60厘米，粗達(dá)1.3厘米。藥用植物，性味甘淡微咸，寒，歸胃、腎，肺經(jīng)。益胃生津，滋陰清熱。用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。石斛花姿優(yōu)雅，玲瓏可愛，花色鮮艷，氣味芳香，被喻為“四大觀賞洋花”之一。雖然目前生產(chǎn)具有降糖功能的藥物及替代產(chǎn)品種類繁多，但兼具降血糖、降血壓和降血脂功能的主要包含青錢柳葉、桑白皮和石斛的保健品至今未見報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的研究和實(shí)踐，意外的獲得了一種兼具降血糖、降血壓和降血脂功能、包含青錢柳葉、桑白皮和石斛的保健組合物，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷。本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種包含青錢柳葉、桑白皮和石斛的保健組合物，其中三者的重量百分比為10-80％∶10-80％∶10-80％。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，青錢柳葉、桑白皮和石斛的重量百分比為20-60％∶20-60％∶20-60％。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述保健組合物中還可以包含玉竹、山藥、枸杞子、人參、當(dāng)歸、葛根、茯苓、陳皮、紅景天、桑葉、綠茶和羅漢果中的一種或其任意組合。優(yōu)選的，所述保健組合物中還包含玉竹、葛根、陳皮、桑葉、綠茶和羅漢果。進(jìn)一步優(yōu)選的，所述保健組合物中各味藥的重量百分比為青錢柳葉20-30％、桑白皮20-30％、石斛20-30％、玉竹5-10％、葛根5-10％、陳皮5-10％、桑葉5-10％、綠茶5-10％和羅漢果5-10％。最優(yōu)選的，所述保健組合物中各味中藥的重量百分比為青錢柳葉20％、桑白皮20％、石斛20％、玉竹5％、葛根5％、陳皮5％、桑葉5％、綠茶10％和羅漢果10％。在本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施方案中，上述保健組合物中還可包含選自由黃精、昆布、烏梅、三七、女貞子、山茱萸、川芎、蒼術(shù)、玄參、生地黃、白芍、西洋參、蘆薈、五味子、麥門冬、制大黃、知母、蒺藜、銀杏葉、黃芪、絞股藍(lán)、苦瓜、苦蕎麥、南瓜、魔芋、芹菜、玉米須、銀耳、猴頭菇和大蒜所組成的組中的一種或更多種。在本發(fā)明中，所述保健組合物可以通過(guò)本領(lǐng)域任何常規(guī)的制備方法進(jìn)行制備。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供了所述保健組合物在制備輔助治療高血糖、高血壓或高血脂保健組合物方面的應(yīng)用。本發(fā)明的又一個(gè)目的在于提供了一種含有所述保健組合物的藥物制劑。本發(fā)明的保健組合物可以根據(jù)需要和藥學(xué)上可接受的輔料制備成任何合適的口服制劑用于降血糖、降血壓或降血脂的治療。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述口服制劑可以為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、泡騰劑、袋泡劑等劑型。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述藥學(xué)上可接受的輔料例如可以選自預(yù)膠化淀粉、β-環(huán)糊精、卡波姆、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、聚乙二醇(PEG)、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、甘露醇、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、阿斯巴甜、碳酸氫鈉、碳酸鈉中的一種或更多種。本發(fā)明中各主要原料藥的功效活性青錢柳葉：味微苦、辛，性平。具有健脾化濕、清熱通腑、疏肝理氣、滋陰補(bǔ)腎的作用，對(duì)因脾運(yùn)不健、痰濁、嗜食肥甘厚味、懶動(dòng)、腹?jié)M積食、肝淤氣滯而致的肥胖，有良好的改善。桑白皮：瀉肺平喘，利水消腫，可用于肺熱咳喘，面目浮腫，小便不利等癥。具有降壓、利尿、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌和降血糖等活性。石斛：性味甘淡微咸，寒，歸胃、腎，肺經(jīng)；具有益胃生津，滋陰清熱 之功效，用于陰傷津虧、口干煩渴、食少干嘔、病后虛熱、目暗不明。玉竹：養(yǎng)陰、潤(rùn)燥、清熱、生津、止咳，可用作滋補(bǔ)藥品，主治熱病傷陰、虛熱燥咳、心臟病、糖尿病、結(jié)核病等癥。陳皮：味苦、辛，性溫；歸肺、脾經(jīng)；具有理氣健脾，燥濕化痰之功效，用于脘腹脹滿、食少吐瀉、咳嗽痰多等癥。山藥：味甘、性平，歸脾、肺、腎經(jīng)；具有補(bǔ)脾養(yǎng)胃，生津益肺，補(bǔ)腎澀精之功效，用于治療脾虛、久瀉、肺虛、腎虛、帶下、尿頻等癥。葛根：味甘、辛，性涼。歸肺、胃經(jīng)。具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽(yáng)止瀉之功效，用于表證發(fā)熱、項(xiàng)背強(qiáng)痛、麻疹不透、熱病口渴、陰虛消渴、熱瀉熱痢、脾虛泄瀉等癥。綠茶：具有醒腦提神、利尿解乏、緩解疲勞、抗衰老之功效，適用于油膩食品食用過(guò)多者、高血壓、小便不利、發(fā)熱口渴的人群。羅漢果：具有醒腦提神、利尿解乏、緩解疲勞、抗衰老之功效，適用于油膩食品食用過(guò)多者、高血壓、小便不利、發(fā)熱口渴的人群。桑葉：氣淡，味微苦澀。具有降壓利尿、降血脂等功效，能抑制α-葡萄糖苷酶，并能競(jìng)爭(zhēng)性地阻斷小腸粘膜細(xì)胞刷狀緣內(nèi)的麥芽糖酶和蔗糖酶等雙糖水解酶，具有降糖作用。枸杞子：甘，平。歸肝、腎經(jīng)。滋補(bǔ)肝腎，益精明目。用于肝腎陰虛證。本品甘平質(zhì)潤(rùn)，平補(bǔ)肝腎，有滋補(bǔ)強(qiáng)壯作用，凡肝腎陰虛諸證均可應(yīng)用。人參：性平、味甘、微苦，微溫。歸脾、肺經(jīng)。功效：大補(bǔ)元?dú)?，?fù)脈固脫，補(bǔ)脾益肺，生津止渴，安神益智。主治：勞傷虛損、食少、倦怠、反胃吐食、大便滑泄、虛咳喘促、自汗暴脫、驚悸、健忘、眩暈頭痛、陽(yáng)痿、尿頻、消渴、婦女崩漏、小兒慢驚及久虛不復(fù)，一切氣血津液不足之證。當(dāng)歸：性溫，味甘辛。歸心、肝、脾經(jīng)。補(bǔ)血和血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)燥滑腸。治月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉腹痛，癥瘕結(jié)聚，崩漏；血虛頭痛，眩暈，痿痹；腸燥便難，赤痢后重；癰疽瘡竊，跌撲損傷。紅景天：甘，苦，平。歸肺、心經(jīng)。益氣活血，通脈平喘。用于氣虛血瘀，胸痹心痛，中風(fēng)偏癱，倦怠氣喘。本發(fā)明的技術(shù)方案具有如下優(yōu)勢(shì)：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的保健組合物以天然藥物為基礎(chǔ)，本發(fā)明人在眾多中藥和食品中進(jìn)行了大量篩選，從而意外的獲得了一種包含青錢柳葉、桑白皮和石斛等中藥的保健組合物，所述保健組合物兼具降血糖、降血壓和降血脂的優(yōu)異效果，并在降血糖、降血壓和降血脂功能方面產(chǎn)生了明顯的協(xié)同作用。具有療效明確、無(wú)毒副作用、使用方便、協(xié)同作用明顯和易于大眾服用等優(yōu)點(diǎn)。具體實(shí)施方式下面將進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。需要指出的是，以下說(shuō)明僅僅是對(duì)本發(fā)明要求保護(hù)的技術(shù)方案的舉例說(shuō)明，并非對(duì)這些技術(shù)方案的任何限制。本發(fā)明的保護(hù)范圍以所附權(quán)利要求書記載的內(nèi)容為準(zhǔn)。實(shí)施例1配方組成：青錢柳葉8.0kg、桑白皮1.0kg、石斛1.0kg。制備方法：2.1按照上述配方準(zhǔn)確稱取各味中藥，用清水清洗干凈，煮沸提取2次；第一次加12倍量水，提取2小時(shí)，第二次加10倍量水，提取1小時(shí)，100目過(guò)濾；2.2合并提取液，過(guò)濾，濾液濃縮至60℃熱測(cè)相對(duì)密度1.05-1.08，備用；2.3濾液中加入配方比例量β-環(huán)狀糊精，加熱至85℃，攪拌混合均勻后，恒溫30分鐘，2.4將濾液加入噴霧干燥機(jī)中，首先預(yù)熱塔溫，待進(jìn)風(fēng)溫度達(dá)210℃±10℃后開始進(jìn)料；進(jìn)料后要進(jìn)行流量、風(fēng)速的調(diào)節(jié)，將出風(fēng)溫度控制在95℃±5℃，得提取物粉末，用雙層潔凈塑料袋包裝密封粉末；2.4按配方比例量稱取微晶纖維素、磷酸氫鈣、二氧化硅、硬脂酸鎂混合3-5分鐘至均勻，得混合物料；2.5將混合物料用80％食用酒精進(jìn)行制軟材，過(guò)14目，得濕顆粒；濕顆粒干燥至水分≤5.0％。將干顆粒過(guò)16目整粒，得干顆粒；2.6將總混合物料以1號(hào)膠囊按每粒0.3g填充。實(shí)施例21、配方組成：青錢柳葉6.0kg、桑白皮2.0kg、石斛2.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例31、配方組成：玉竹3.0kg、葛根3.0kg、桑葉3.0kg、陳皮1.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例41、配方組成：青錢柳葉5.0kg、山藥2.0kg、枸杞子1.5kg、人參0.5kg、當(dāng)歸0.5kg、葛根0.5kg、。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例51、配方組成：青錢柳葉3.0kg、桑白皮1.0kg、石斛2.0kg、玉竹1.0kg、葛根1.0kg、陳皮0.5kg、桑葉0.5kg、綠茶0.5kg和羅漢果0.5kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例61、配方組成：青錢柳葉2.0kg、桑白皮2.0kg、石斛2.0kg、玉竹0.5kg、葛根0.5kg、陳皮0.5kg、桑葉0.5kg、綠茶1.0kg和羅漢果1.0kg2、制備方法：同實(shí)施例1。對(duì)比例1選取桑白皮10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例1。對(duì)比例2選取玉竹10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例2。對(duì)比例3選取葛根10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例3。本發(fā)明的范圍并不局限于以上實(shí)施例，上述實(shí)施例中的各組分均可選自市售商品，通過(guò)本領(lǐng)域常規(guī)的制劑工藝，可以制成藥劑學(xué)上所說(shuō)的多種劑型，例如膠囊劑、顆粒劑、粉劑、片劑、口服液、袋泡茶等。實(shí)驗(yàn)例1：降血糖實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1樣品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；鏈脲佐菌素，SIGMA公司產(chǎn)品，規(guī)格：1g/支，批號(hào)：SLBJ7785V；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，苦味酸等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號(hào)：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀(強(qiáng)生(中國(guó))醫(yī)療器材有限公司)；BECKMANSynchronCX5全自動(dòng)血液生化分析儀(美國(guó))；酶標(biāo)儀，bio-rad(美國(guó))，型號(hào)：iMark；其他：臺(tái)秤、固定籠等。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(粵)2011-0015。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1方法2.1.1大鼠飼料普通飼料：玉米粉80％，面粉15％，黃豆粉5％；高脂飼料：79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油。2.1.2造模：取160-180gSPF級(jí)SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對(duì)照組，以正常飼料喂養(yǎng)，其它各組先用高脂飼料喂養(yǎng)1個(gè)月，抽查血脂指標(biāo)明顯升高后，腹腔注射STZ35mg/kg誘發(fā)糖尿病模型(STZ臨用前用0.1mmol/LpH＝4.5的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液配成6mg/mL的溶液，且在60min內(nèi)用完)。于注射后第7d，斷尾采集空腹靜脈血，以血糖儀測(cè)定血糖，將血糖值大于等于16.7mmol/L視為建模成 功。模型穩(wěn)定后，根據(jù)血脂血糖高低分組，口服給予受試藥物以及對(duì)照藥物，觀察各項(xiàng)指標(biāo)。2.1.3分組與給藥：選取狀態(tài)較好的100只造模成功動(dòng)物按照血糖值和體重均勻分成10組：每組10只，即II型糖尿病模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。正常不造模的SD大鼠10只為正常對(duì)照組(給予蒸餾水)。各組按相應(yīng)劑量口服給藥，每天給藥1次，給藥周期：4周(4W)。2.2測(cè)定指標(biāo)2.2.1使用血糖儀分別測(cè)定給藥前以及給藥后4W血糖值。2.2.2糖耐量試驗(yàn)：于實(shí)驗(yàn)結(jié)束前兩天進(jìn)行檢測(cè)；糖耐量檢測(cè)：動(dòng)物禁食約6小時(shí)，各組給予不同濃度受試樣品，15-20分鐘后經(jīng)口給予葡萄糖2.0g/kg，測(cè)定給葡萄糖后0、0.5、2小時(shí)的血糖值，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組給葡萄糖后各時(shí)間點(diǎn)血糖曲線下面積的變化。血糖曲線下面積＝1/2×(0小時(shí)血糖值+0.5小時(shí)血糖值)×0.5+1/2×(2小時(shí)血糖值+0.5小時(shí)血糖值)×1.5＝0.25×(0小時(shí)血糖值+4×0.5小時(shí)血糖值+3×2小時(shí)血糖值)。2.3結(jié)果2.3.1對(duì)II型糖尿病大鼠血糖的影響由表1可見，與正常對(duì)照組比較，給藥前糖尿病造模各組大鼠血糖顯著升高，表明糖尿病模型造模成功。給藥4w后，S1-S6組血糖均有下降。表1.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠血糖的影響組別n給藥前血糖(mmol/L)給藥4W血糖(mmol/L)正常對(duì)照組105.54±1.175.60±1.24模型對(duì)照組1018.12±4.16##22.65±3.68##S1組1017.98±3.7415.87±3.26*S2組1018.25±4.1715.94±3.52*S3組1018.04±3.7416.08±3.74*S4組1018.30±4.2816.13±4.01*S5組1018.16±4.2215.64±3.64*S6組1018.19±3.9815.32±3.18*D1組1017.95±3.9019.04±5.16D2組1018.10±3.9618.86±5.20D3組1018.15±3.7919.29±6.14注：與正常對(duì)照組比較：##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.052.3.2對(duì)II型糖尿病大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果由表2可見，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組的血糖曲線下面積均有下降。表2.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果組別n血糖曲線下面積正常對(duì)照組1016.13±3.67模型對(duì)照組1037.85±6.30##S1組1025.64±5.72*S2組1026.85±5.57*S3組1024.10±5.06**S4組1026.19±5.82*S5組1026.47±6.01*S6組1025.90±6.46*D1組1033.15±6.52D2組1034.64±6.88D3組1034.96±6.32注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對(duì)照組比較：p均大于0.05.3.結(jié)論：S1-S6對(duì)糖尿病模型大鼠具有明顯的降血糖作用，且S1-S6的組合物在降血糖方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實(shí)驗(yàn)例2：降血脂實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1藥品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，蒸餾水、苦味酸，等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號(hào)：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；BECKMANSynchronCX5全自動(dòng)血液生化分析儀(美國(guó))；其他：臺(tái)秤、固定籠等。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(粵)2011-0015。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1分組與方法取SPF級(jí)SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對(duì)照組，以正常飼料喂養(yǎng)；剩余給予高脂飼料喂養(yǎng)。連續(xù)喂養(yǎng)4周(通過(guò)定時(shí)抽血檢測(cè)血脂四項(xiàng)來(lái)確定造模是否成功)后，選取狀態(tài)較好的100只造模成功動(dòng)物按照血脂數(shù)值和體重均勻分成10組：每組10只，即高脂血癥模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。高脂飼料喂養(yǎng)4周后按以上分組情況開始給藥并繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料(正常對(duì)照組喂養(yǎng)普通飼料)，每天1次，連續(xù)給藥4w。末次給藥后，隔夜禁食，次日稱量體重后，水合氯醛麻醉，下腔靜脈采血后處死。離心后取上清液測(cè)血清中的生化指標(biāo)。2.2檢測(cè)指標(biāo)：(1)一般狀況觀察，并記錄每周體重。(2)各組大鼠血清脂質(zhì)指標(biāo)：每?jī)芍苎劭綮o脈叢取血，分離血清檢測(cè)：總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。2.3結(jié)果2.3.1對(duì)血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響表3.造模成功均勻分組后大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)組別nTCTGHDL-CLDL-C(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)正常對(duì)照組101.12±0.101.71±0.370.61±0.080.35±0.06模型對(duì)照組101.95±0.42##2.38±0.40##0.59±0.080.50±0.08##S1組101.96±0.452.47±0.480.62±0.110.50±0.09S2組101.93±0.502.48±0.490.61±0.100.51±0.09S3組101.94±0.392.41±0.450.60±0.080.52±0.08S4組102.01±0.442.37±0.420.58±0.090.50±0.10S5組101.89±0.362.41±0.430.59±0.100.49±0.08S6組101.91±0.402.38±0.490.61±0.110.51±0.09D1組101.95±0.392.40±0.450.60±0.090.50±0.08D2組102.00±0.382.38±0.460.59±0.080.51±0.09D3組102.03±0.422.43±0.480.61±0.100.50±0.08注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對(duì)照組比較：p均大于0.05.表4.給藥4W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01由表3可見，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組喂高脂飼料4W后，大鼠血清TC、LDL-C顯著升高(p＜0.01)，TG明顯升高(p＜0.05)，表明高脂血癥大鼠模型造模成功。根據(jù)血脂水平均勻分成4組。由表4可見，給藥4W后，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組能降低血清中TC、TG、LDL-C水平(p＜0.05或p＜0.01)。3.結(jié)論：S1-S6對(duì)高脂血癥模型大鼠有明顯的降血脂作用，且S1-S6的組合物在降血脂方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實(shí)驗(yàn)例3：降血壓實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1藥品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；蒸餾水，苦味酸，等。1.2儀器DKB-501A型超級(jí)恒溫水槽，為上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司產(chǎn)品；電熱恒溫干燥箱，為長(zhǎng)沙醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；Powlab/4spML125型無(wú)創(chuàng)測(cè)壓系統(tǒng)(ML125/RNIBP，MLT1199BPTrans-ducer/CableKit)，澳大利亞埃德儀器有限公司產(chǎn)品；MP120-1電子天平，為上海第二天平儀器廠產(chǎn)品。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SHR大鼠，體重190～230g，雄性，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)：SCXK(京)2012-0001。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081，SPF級(jí)WISTAR雄性大鼠，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為：SCXK(京)2012-00011。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果將9-10周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機(jī)分10組，每組10只，即高血壓模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。另取正常WISTAR大鼠10只為正常對(duì)照組(給予蒸餾水)。各組動(dòng)物分別灌胃給予各種劑量藥物，每天1次，共給藥4周。分別于給藥前以及給藥后4周以無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈測(cè)壓系統(tǒng)檢測(cè)大鼠尾動(dòng)脈血壓值(收縮壓，SAP，mmHg)。無(wú)創(chuàng)尾套法(NIBP)：將大鼠放入大鼠固定器內(nèi)，露出鼠尾。用紅外取暖器，溫度設(shè)置為38℃，照射加熱鼠尾大約10min后，鼠尾變軟，鼠尾動(dòng) 脈充分?jǐn)U張。將其穿過(guò)加壓尾套并固定在鼠尾的根部，使大鼠尾動(dòng)脈與PowerlabML125/R無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)定分析系統(tǒng)的脈搏傳感器緊密接觸，同時(shí)觀測(cè)系統(tǒng)的脈搏波形，出現(xiàn)穩(wěn)定的脈搏波時(shí)即可開始測(cè)定血壓。待動(dòng)物安靜后，選擇90～420BPM(大鼠加壓檔)給尾套充氣加壓，可見脈搏波逐漸減小至消失，然后尾套開始放氣，鼠套壓力降低，當(dāng)壓力等于收縮壓時(shí)，開始出現(xiàn)脈搏波，此點(diǎn)的血壓值即為鼠尾收縮壓。重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。計(jì)算壓降值(血壓下降值)，給藥后SAP減去給藥前SAP得。結(jié)果見表5：表5樣品對(duì)SHR大鼠血壓(SAP，mmHg)的影響注：與正常對(duì)照組比較：#為P＜0.01；與模型對(duì)照組比較：＊為P＜0.05.結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠血壓顯著升高，可見自發(fā)性高血壓大鼠模型成功。與模型對(duì)照組，S1-S6組在給藥4W能顯著降低SHR大鼠的血壓(P＜0.05)。3.結(jié)論：S1-S6樣品有顯著的降血壓作用，且S1-S6的組合物在降血壓方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同作用。本
發(fā)明內(nèi)容僅僅舉例說(shuō)明了要求保護(hù)的一些具體實(shí)施方案，其中一個(gè)或更多個(gè)技術(shù)方案中所記載的技術(shù)特征可以與任意的一個(gè)或多個(gè)技術(shù)方案相組合，這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案也在本申請(qǐng)保護(hù)范圍內(nèi)，就像這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案已經(jīng)在本發(fā)明公開內(nèi)容中具體記載一樣。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3