本發(fā)明涉及一種功能保健品及其制作方法

發(fā)明背景

苦丁茶在我國(guó)南方應(yīng)用由來(lái)悠久，具有千年歷史。據(jù)記載，多種植物可用于苦丁茶的制作，其中包括：木樨科(Oleaceae)植物、冬青科(Aquifoliaceae)植物、藤黃科(Guttiferae)植物、紫草科(Boraginaceae)植物和馬鞭草科(Verbenacae)植物等。根據(jù)目前記載，其主要植物包括女貞類、冬青類、枸骨、闊葉十大功勞等?？喽〔璧墓πП容^復(fù)雜，主要包括：消炎解毒、殺菌止癢、清咽、止咳等?？喽〔璧乃幚碜饔冒ǎ阂种蒲ㄐ纬珊涂寡“寰奂饔茫徽{(diào)節(jié)血壓作用；調(diào)節(jié)血脂作用；減肥作用、調(diào)節(jié)血糖作用、抗氧化作用、抗炎鎮(zhèn)痛作用、免疫調(diào)節(jié)作用、抗菌作用、止咳祛痰作用等。臨床上，口服苦丁茶用以調(diào)節(jié)血壓、調(diào)節(jié)血脂、防治靜脈炎、口腔護(hù)理和皮膚病治療等。目前苦丁茶的服用方式主要包括：常規(guī)水泡茶葉、袋泡茶、苦丁茶沖劑、苦丁茶含片、苦丁茶啤酒、苦丁茶膠囊、苦丁茶飲料。其中，苦丁茶飲料主要是茶葉的水提取物，并經(jīng)簡(jiǎn)單提取、功效成分富集(皂苷>20％；多酚>16％；黃酮>13％)，應(yīng)用于飲料中的量為0.25克/公斤。苦丁茶原料來(lái)源復(fù)雜，與功效的關(guān)系也不明確，限制了苦丁茶的應(yīng)用?？喽〔栉稑O苦、澀，口感欠佳，影響了苦丁茶的推廣應(yīng)用。如何改善苦丁茶的口感、明確其功效是苦丁茶研究的重要課題。本發(fā)明描述了一種霧化苦丁茶的制備方法以及其用途。該霧化苦丁茶具有清香、無(wú)澀、使用方便的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)止咳具有明確的功效，非常適合家庭、隨身、和醫(yī)院的口腔、肺部疾病的輔助治療，可進(jìn)行批量工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

1、本發(fā)明的目的是提供一種霧化苦丁茶及其制備方法。

2、本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供上述霧化苦丁茶的用途。

技術(shù)方案

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，其特征在于：

選擇冬青科植物原料：選用冬青科植物部位，包括葉、根、莖、皮、果。冬青科植物主要包括：大葉冬青、小葉冬青、苦丁茶冬青、毛冬青、鐵冬青、矮冬青浙江冬青、四川冬青、廣東冬青、梅葉冬青、灰冬青、榕葉冬青、細(xì)花冬青、毛冬青、大果冬青以及其他冬青科植物。

霧化苦丁茶提取方法：其特征包括以下步驟：

稱取干燥的原料植物：優(yōu)先選擇苦丁茶冬青、大葉冬青、毛冬青、鐵冬青等冬青科植物的葉。為提高溶出率，植物的干燥葉或苦丁茶成品可先粉碎，然后浸泡。酒精浸泡：酒精浸泡應(yīng)在4-72小時(shí)或更長(zhǎng)。為提高溶出效率，可輔用超聲波處理或循環(huán)蒸餾等。也可用其他食品級(jí)或藥用有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解。酒精推薦濃度為40-100％。

樹(shù)脂脫色：為改善口感、外觀和功效，可進(jìn)一步進(jìn)行脫色處理，推薦用大孔樹(shù)脂。制備水溶液：蒸干液體，得固定粉末，用水溶解后，過(guò)濾、調(diào)整濃度至5-50克/升，裝瓶分裝。

成分測(cè)定：組成苦丁茶的成分重量百分比特征為，三萜及三萜類皂苷(0.5-70％)、多酚類(0.01-30％)、黃酮類(0.01-30％)、可溶性多糖(0.01-10％)。

霧化苦丁茶的制作方法：其特征包括至少三種霧化劑型的制作步驟：

1、將提取的苦丁茶溶液與輔料混合、過(guò)濾，制作噴霧劑。

2、將提取的苦丁茶溶液加入拋射劑，制作氣霧劑。

3、將提取的苦丁茶制成粉末并加入附加劑，制成粉霧劑。

霧化苦丁茶的服用方式：其特征在采用噴霧的方式，通過(guò)口鼻服用。

霧化苦丁茶的用途：

苦丁茶的功用非常復(fù)雜，根據(jù)目前的臨床報(bào)道，口服苦丁茶用以調(diào)節(jié)血壓、調(diào)節(jié)血脂、防治靜脈炎、口腔護(hù)理和皮膚病治療等。由于苦丁茶的制作原料常不盡相同，原料與功效的關(guān)系也不清楚。本發(fā)明提供的霧化苦丁茶具有原料和功效的關(guān)系。本發(fā)明描述的苦丁茶功效，其特征在于由冬青科植物制作的苦丁茶具有 明顯的止咳功效，由霧化吸入的服用方式效果更為明顯。

有益效果

由于本發(fā)明只選用冬青科植物為原料，并制備了以霧化形式服用的苦丁茶，該霧化苦丁茶具有很明確的止咳通氣功效。本發(fā)明通過(guò)以有機(jī)溶劑為基本提取方法，輔以脫色處理，加強(qiáng)了苦丁茶的功效、改善了口感。本發(fā)明的有益效果在于克服了普通水提取苦丁茶口感差、止咳功效弱的缺點(diǎn)，同時(shí)發(fā)明了一種新的苦丁茶服用方式，對(duì)苦丁茶的推廣應(yīng)用具有廣泛的價(jià)值。

附圖說(shuō)明

圖1.苦丁茶原料制備過(guò)程的效率

圖2.苦丁茶原料的化學(xué)成分(w/w)

圖3苦丁茶口感評(píng)價(jià)結(jié)果

圖4.霧化苦丁茶對(duì)小鼠咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期的影響

圖5.不同植物來(lái)源苦丁茶的止咳效果比較

圖6.三種霧化苦丁茶的止咳效果比較

具體實(shí)施方式

實(shí)施實(shí)例1 霧化苦丁茶原料的制備

目前苦丁茶的制作主要為水泡法，有直接水泡飲用、水泡后蒸干(烘干)制成粉末沖服、將茶葉粉碎后用水沖服。為改善口感及提高功效，本發(fā)明采用不同濃度的有機(jī)溶劑進(jìn)行提取，由于目前最常用的食用有機(jī)溶劑為酒精，這里我們以酒精提取為例。在此基礎(chǔ)上，通過(guò)脫色處理，改善外觀和進(jìn)一步提高功效。

材料與方法

苦丁茶原料：市購(gòu)苦丁茶冬青(安徽惠隆)、大葉冬青苦丁茶(安徽)。

化學(xué)試劑：乙醇(化學(xué)純)、正丁醇(化學(xué)純)、大孔樹(shù)脂

酒精提取液的制備：稱取苦丁茶原料1000克，用粉碎機(jī)粉碎。按1：1-10的比例加入70％乙醇，浸泡72小時(shí)，蒸干后用按1：50-200(w/v)的比例加入蒸餾 水充分溶解、過(guò)濾。

脫色提取物的制備：將酒精提取物以1：20-100(v/v)的比例上樣與大孔樹(shù)脂，20-60％酒精洗脫脫色后，再用60-100％酒精洗脫，將洗脫液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干后可得白色或微黃色固體茶。

結(jié)果與結(jié)論

采用上述方法，每公斤茶葉可以得到乙醇浸膏200-300克。在此基礎(chǔ)上，經(jīng)脫色處理可得到20-30克脫色提取物?？喽〔瓒嗯c大葉冬青的提取效率基本相當(dāng)，兩種冬青制備的總得率約1-4％，詳細(xì)數(shù)據(jù)見(jiàn)圖1.

實(shí)施實(shí)例2 苦丁茶原料的化學(xué)成分分析

材料與方法

苦丁茶原料：包括未脫色和脫色兩種原料，由南京沐賽生物技術(shù)公司提供，植物原料為大葉冬青。其生產(chǎn)工藝同實(shí)施實(shí)例1.兩種苦丁茶原料的濃度均為100毫克/毫升。

分析方法：均參照藥典記載的經(jīng)典測(cè)定方法。三萜皂苷定量：以苦丁皂苷F為標(biāo)準(zhǔn)品，將待測(cè)樣品(3mg/mL)稀釋100倍，然后測(cè)定含量?？傸S酮定量：以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，將待測(cè)樣品稀釋50倍，然后測(cè)定含量。多酚定量：福-林酚法測(cè)定?？扇苄远嗵嵌浚洪g接法測(cè)定。

結(jié)果與結(jié)論

通過(guò)常規(guī)定量方法測(cè)定，未脫色苦丁茶溶液主要含三萜及三萜類皂苷、黃酮、多酚類及可溶性多糖，其含量均在10-20％之間。脫色后苦丁茶主要為三萜皂苷類，總含量在50-90％之間，多酚類、黃酮、可溶性多糖等物質(zhì)含量較少，含量均小于2％。詳細(xì)結(jié)果如圖2所示。

實(shí)施實(shí)例3 霧化苦丁茶的口感改善

由常規(guī)水泡法制備的苦丁茶含有大量的鞣質(zhì)、雜蛋白、色素等，味苦、芳香持續(xù)時(shí)間短，水溶液擱置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)沉淀和顏色改變。為克服這一問(wèn)題，我們采用乙醇浸泡的方法進(jìn)行提取，并進(jìn)行口感測(cè)定。醇提浸膏用蒸餾水溶解過(guò)濾，配制成濃度為5mg/mL的醇提苦丁茶(茶I)，加入吐溫-80和氯化鈉輔料制 成噴霧劑。以相同的方法配制相同濃度(5mg/mL)的脫色后醇提苦丁茶(茶II)，制成噴霧劑。作為對(duì)照，我們制備了水提苦丁茶。取100克大葉冬青苦丁茶葉，用1000毫升90-100℃熱水浸泡30-60分鐘，將茶水蒸干、稱重。用水配制成5mg/mL的水提苦丁茶(茶III)，也制成噴霧劑。采用雙盲法進(jìn)行口感測(cè)試，主要步驟包括：

1、挑選20名受試志愿者，年齡20-55歲，男性10名、女性10名，均身體健康，無(wú)代謝性疾病、口腔疾病，除1名為吸煙者外，其余均為非吸煙者。

2、測(cè)試方法：測(cè)試者先用清水(農(nóng)夫山泉)漱口一次，1分鐘內(nèi)接受口腔噴霧一次(按一次溶液量約為100微升)，然后填寫(xiě)問(wèn)卷。在接受第二次噴霧前，再漱口一次，以此類推。

口感測(cè)試問(wèn)卷/答卷(舉例)

結(jié)果

20份答卷統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下圖3。茶II的澀度得分最高，而茶III的澀度最大；茶II與茶I的芳香度相似，但明顯高于茶III；茶II的苦度略有降低；茶II的回甘度較茶I和茶II為好。

結(jié)論

醇提法制備的苦丁茶可提高芳香度、降低澀度，而通過(guò)脫色處理后，澀度進(jìn)一步降低，苦度也略有降低，但后甘都明顯提高。醇提處理后的苦丁茶的綜合口感明顯優(yōu)于水提苦丁茶。

實(shí)施實(shí)例4 霧化苦丁茶的止咳功效評(píng)價(jià)

通過(guò)不斷摸索，我們發(fā)現(xiàn)本發(fā)明制備的霧化苦丁茶對(duì)人的氣管炎所引起的咳嗽有很好的效果，推測(cè)該茶具有止咳功效。為系統(tǒng)研究其功效，我們?cè)谛∈竽Ｐ蜕线M(jìn)行了評(píng)價(jià)。

材料與方法

試劑：濃氨水(分析純)(25-28％)(成都科龍)，每次實(shí)驗(yàn)前將濃氨水配成13％的溶液。

方法：將50毫升現(xiàn)配的13％氨水加入超聲霧化器中，將小鼠(C57BL/6J)(購(gòu)于南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所)置于密閉的鼠籠中，將霧化出口接入籠內(nèi)，并持續(xù)通氣60秒，然后停止并呈密閉狀態(tài)。在通氣的同時(shí)，用秒表計(jì)時(shí)，記錄3分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期。藥物治療組是將霧化苦丁茶溶液5mg/mL與26％濃氨水等量混合，在加入超聲霧化器中，以相同的方法計(jì)算咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期。每分鐘咳嗽次數(shù)小于10次或大于80次，我們認(rèn)為是非正常變異，不列入統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)；咳嗽潛伏期小于10秒或大于50秒的小鼠不列入統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。

結(jié)果

以水為對(duì)照，小鼠在用氨水刺激后，三分鐘內(nèi)咳嗽次數(shù)為20-30次，平均25±11次，咳嗽潛伏期約30秒，于以往的報(bào)道相當(dāng)，由此表明我們建立的咳嗽測(cè)定模型是可行的。分別用茶I、茶II、茶III進(jìn)行治療，三分鐘咳嗽次數(shù)均明顯少于對(duì)照組(p<0.05或p<0.01),而咳嗽潛伏期則明顯延長(zhǎng)(p<0.05)。茶II可將3分鐘的咳嗽次數(shù)降低50％以上(11±4vs 25±11)效果明顯優(yōu)于茶I或茶III，咳 嗽潛伏期時(shí)間亦延長(zhǎng)約17秒(詳見(jiàn)圖4)。

實(shí)施實(shí)例5 不同植物來(lái)源苦丁茶的功效比較

可用作苦丁茶的植物成分復(fù)雜，其功效亦多種多樣。為尋找苦丁茶植物與止咳功效的關(guān)系，我們比較了不同植物的止咳效應(yīng)。

方法

植物的提取方法與茶I的提取方法相同，即先用酒精浸泡、蒸干、水重新溶解。用氨水刺激法，測(cè)定各提取物的止咳效果。

結(jié)果

通過(guò)比較3分鐘咳嗽次數(shù)，我們發(fā)現(xiàn)冬青類科植物可以明顯降低咳嗽次數(shù)，抑制效率約40-50％，而其它類植物無(wú)明顯的止咳效果。

實(shí)施實(shí)例6 不同劑型霧化苦丁茶的制備和功效比較

目前霧化的常用方法主要通過(guò)三種劑型完成，即噴霧劑、氣霧劑和粉霧劑。為比較三種劑型的優(yōu)劣，我們制備了三種劑型的霧化苦丁茶(統(tǒng)稱霧化苦丁茶)，通過(guò)功效效果評(píng)價(jià)其優(yōu)劣。由于未脫色苦丁茶原料呈浸膏形式，很難同時(shí)制備三種形式的霧化劑型，因此，我們用脫色處理的苦丁茶(茶II)為茶原料，分別制成三種霧化劑型。

噴霧劑苦丁茶的制備

將脫色處理的苦丁茶(茶II)為茶原料，以蒸餾水、2.8％吐溫-80(w/w)、氯化鈉(0.75mg/mL)為輔料配制成不同濃度(0.5-50mg/mL)的苦丁茶溶液，用0.22μm微膜濾器過(guò)濾濾菌后，灌裝。

氣霧劑苦丁茶的制備

按氣霧劑配方(不同量的苦丁茶、蒸餾水5克、無(wú)水乙醇150克)配制藥液，將其濃度配為每噴一次0.05-5mg(相當(dāng)于0.5-50mg/mL的液體濃度)。在室溫下灌入容器內(nèi)，在將閥門(mén)裝上并扎緊，然后通過(guò)壓裝機(jī)壓入定量HFA-134a

粉霧劑苦丁茶的制備

先將苦丁茶粉碎，粒度小于10μm加入木糖醇作附加劑，然后加入儲(chǔ)庫(kù)型給藥裝置。

實(shí)驗(yàn)治療方法

將50毫升現(xiàn)配的13％氨水加入超聲霧化器中，將小鼠(C57BL/6J)(購(gòu)于南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所)置于密閉的鼠籠中，將霧化出口接入籠內(nèi)，并持續(xù)通氣60秒，然后停止并呈密閉狀態(tài)。在開(kāi)始霧化時(shí)，向籠內(nèi)用連續(xù)噴射茶溶液60秒，每次間隔2秒鐘，共噴射約20次。噴射完畢后使鼠籠呈密閉狀態(tài)，在噴射開(kāi)始即由另一實(shí)驗(yàn)者用秒表計(jì)數(shù)咳嗽次數(shù)。在霧化開(kāi)始即開(kāi)始用秒表計(jì)數(shù)3分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)。噴射完畢后使鼠籠呈密閉狀態(tài)，在噴射開(kāi)始即由另一實(shí)驗(yàn)者用秒表計(jì)數(shù)咳嗽次數(shù)。測(cè)定拋射劑苦丁茶功效的方法與噴霧器苦丁茶的方法相同。

結(jié)果

采用超聲霧化氨水的方法制造咳嗽模型，同時(shí)用霧化水(苦丁茶含量為0mg/ml)模擬治療，每3分鐘的咳嗽次數(shù)為25±11。當(dāng)用0.5mg/mL的噴霧劑苦丁茶治療時(shí)，咳嗽次數(shù)明顯降低至18±8(p<0.05),當(dāng)劑量達(dá)到5mg/mL時(shí)，咳嗽次數(shù)減少至11±5(p<0.05),繼續(xù)增加劑量至50mg/mL時(shí)，抑制效果不能進(jìn)一步提高(12±7,p<0.05)。氣霧劑苦丁茶在劑量為5mg/mL時(shí)，開(kāi)始呈現(xiàn)一定的止咳效果(13±7)，略弱于噴霧劑苦丁茶，但沒(méi)有明顯的差別。粉霧劑苦丁茶在5mg/mL時(shí)，止咳效率達(dá)到50％，加大劑量還可以進(jìn)一步提高效果(圖6)。

根據(jù)以上結(jié)果可以看出，噴霧劑苦丁茶、氣霧劑苦丁茶和粉霧劑苦丁茶均有明顯的止咳效果。雖然氣霧劑苦丁茶和粉霧劑苦丁茶的效果略低于噴霧劑，可能是由于這種形式的霧化苦丁茶的霧化效果較差，小鼠吸入量偏少的原因，也可能是實(shí)驗(yàn)誤差的原因。