本發(fā)明涉及含有石墨烯納米結(jié)構(gòu)體(graphene nanostructure)作為有效成分的用于預(yù)防或治療神經(jīng)退行性疾病的藥物組合物。

背景技術(shù)：

已知蛋白質(zhì)的錯誤折疊(misfolding)不僅引起蛋白質(zhì)的功能喪失，而且由于非正常蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)蓄積而產(chǎn)生毒性，由此引發(fā)阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓病、肌萎縮側(cè)索硬化癥、癌、囊包性纖維癥、II型糖尿病等多種疾病。即，由于蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)(proteostasis)失衡，而導(dǎo)致蛋白質(zhì)的錯誤折疊和細胞內(nèi)的非正常蓄積。

目前為止，神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病原因還沒有百分之百地被揭曉，但是已知神經(jīng)蛋白質(zhì)的聚集是其主要原因。纖絲結(jié)構(gòu)構(gòu)成的蛋白質(zhì)逐漸轉(zhuǎn)移(transmission)至周邊的神經(jīng)元，最終使大腦特定部位的神經(jīng)元全部壞死，從而使得該部分負責(zé)的功能無法執(zhí)行。至于帕金森病，病情隨著產(chǎn)生叫做多巴胺的神經(jīng)遞質(zhì)的神經(jīng)元逐漸壞死而發(fā)展。現(xiàn)在給帕金森病患者開出的處方中最常見的藥物是叫做信尼麥(Sinemet)的藥物，諸如此類的其他帕金森病治療劑僅僅是通過投入在神經(jīng)細胞內(nèi)變?yōu)槎喟桶返淖笮喟?Levodopa，L-DOPA)而暫時緩解癥狀而已，并不具有從根本上治療或延緩的功能。最終藥物的效果隨著病情的發(fā)展而減少，直至死亡。

所進行的蛋白質(zhì)的錯誤折疊相關(guān)的研究中，作為抗淀粉樣蛋白化合物(anti-amyloid compound)的種類中的一種的剛果紅(Congo Red)等雖然具有防止由蛋白質(zhì)的錯誤折疊引起的纖絲形成的效果，但是具有如下缺陷：對人體的毒性大，且不具有抑制錯誤折疊的蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移以延緩疾病的發(fā)展的效果。此外，現(xiàn)有的藥物具有尺寸均勻的一種特定形態(tài)，因此從熱力學(xué)方面(熵)來講對疾病的治療并不表現(xiàn)出特別的好處。

從而，雖然為治療蛋白質(zhì)的錯誤折疊而進行了很多研究(韓國公開專利第10-2009-0019790號)，但是就無人體毒性且表現(xiàn)出優(yōu)異的抑制性能的治療劑而言，還沒有顯著成果。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

技術(shù)問題

本發(fā)明旨在提供一種含有石墨烯納米結(jié)構(gòu)體作為有效成分的用于神經(jīng)退行性疾病或治療的藥物組合物。

但是本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題不限于以上所述的技術(shù)問題，本領(lǐng)域技術(shù)人員通過下面的記載能夠明確地理解沒有記載的其他技術(shù)問題。

技術(shù)方案

本發(fā)明的一方面，提供一種含有石墨烯納米結(jié)構(gòu)體作為有效成分的用于預(yù)防或治療神經(jīng)退行性疾病的藥物組合物。

發(fā)明效果

根據(jù)本發(fā)明實施方式的含有石墨烯納米結(jié)構(gòu)體作為有效成分的用于預(yù)防或治療神經(jīng)退行性疾病的藥物組合物，是將石墨烯納米結(jié)構(gòu)體用于神經(jīng)退行性疾病的預(yù)防和治療的首次嘗試。石墨烯納米結(jié)構(gòu)體對人體無毒性，也不會在體內(nèi)蓄積，還表現(xiàn)出對蛋白質(zhì)的錯誤折疊引起的纖絲形成抑制80％等卓越的效果，在抑制錯誤折疊的蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移以延緩病情的發(fā)展的方面也很有效。此外，于現(xiàn)有的治療劑不同，石墨烯納米結(jié)構(gòu)體不局限于一種特定形態(tài)，各個石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的分子量、分子式、形態(tài)等均不同，從熱力學(xué)方面來說從根本上阻礙結(jié)晶的形成，因此使得疾病的根本性的治療變得可能。不僅如此，石墨烯納米結(jié)構(gòu)體在UV-vis(紫外-可見)區(qū)域產(chǎn)生熒光，且具有如下優(yōu)點：當(dāng)適當(dāng)調(diào)節(jié)這種熒光強度時，能夠追蹤(tracking)待作用為藥物的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體在體內(nèi)如何移動。此外，由于在與石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的末端結(jié)合的功能團上連接以神經(jīng)蛋白質(zhì)為靶標的物質(zhì)，因此具有能夠追蹤神經(jīng)蛋白質(zhì)的優(yōu)點。當(dāng)通過上述方法將石墨烯納米結(jié)構(gòu)體誘導(dǎo)至神經(jīng)蛋白質(zhì)附近后照射對細胞損害較小的遠紅外激光時，可以通過石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的光熱效應(yīng)來抑制纖絲化和聚集現(xiàn)象。

附圖說明

圖1是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯量子點的TEM(透射電子顯微鏡)和AFM(原子力顯微鏡)圖像。

圖2是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯量子點的PL(光致發(fā)光)分析結(jié)果圖表。

圖3是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯量子點的FT-IR(傅里葉變換紅外)分析結(jié)果圖表。

圖4是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯量子點的ZETA(界達)電位測定結(jié)果圖表。

圖5是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯量子點抑制纖絲化的效果的示意圖。

圖6a和圖6b分別是根據(jù)本發(fā)明實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的神經(jīng)元存活率的分析結(jié)果的圖像(a)和圖表(b)。

圖7a和圖7b分別是表示根據(jù)本發(fā)明實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體對活性氧簇生成的抑制活性的8-OHG(核算氧化8-羥基鳥苷)染色分析結(jié)果的圖像(a)和圖表(b)。

圖8a和圖8b分別是用于確認根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體對a-syn(α-突觸核蛋白)轉(zhuǎn)移的抑制的實驗?zāi)M圖(a)及其結(jié)果的圖像(b)。

圖9是根據(jù)本發(fā)明實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體對纖絲化的抑制的TEM分析結(jié)果的示意圖。

圖10是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯量子點對纖絲化的抑制的AFM分析結(jié)果的示意圖。

圖11a和圖11b分別是根據(jù)本發(fā)明實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體對纖絲化的抑制的高清晰TEM分析結(jié)果示意圖。

圖12是采用BN-PAGE(藍綠溫和膠聚丙烯酰胺凝膠電泳)分析注入根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體后的PFFs(預(yù)形成的纖絲)狀態(tài)的結(jié)果示意圖。

圖13是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體和和剛果紅的發(fā)光特性的示意圖。

圖14是根據(jù)本發(fā)明一實施例的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的光熱特性的圖表。

圖15是根據(jù)本發(fā)明一實施例制備的樣品的FT-IR圖譜。

圖16是根據(jù)本發(fā)明一實施例制備的樣品的熒光發(fā)光測定結(jié)果的示意圖。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖詳細說明本發(fā)明的實施方式和實施例，以使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易實施本發(fā)明。

但是本發(fā)明能夠以各種不同形態(tài)實施，并不限于在此說明的實施方式和實施例。此外，為了明確說明本發(fā)明，在附圖中省略了與說明無關(guān)的部分，且在說明書全文中對類似的部分使用了類似的附圖標記。

本發(fā)明說明書全文中，記載某一部件位于其他部件之“上”時，不僅包括該部件與其他部件相接的情況，還包括這兩個部件之間存在另一其他部件的情況。

本發(fā)明說明書全文中，記載某一部分“包含”某一構(gòu)成要素時，在沒有特別的相反說明的情況下，意味著還可以包含其他構(gòu)成要素，而不是排除其他構(gòu)成要素。本說明書中使用的表示程度的“約”、“實質(zhì)上”等用語，在已給出所提及的含義所固有的制造及物質(zhì)允許誤差的情況下，解釋為該數(shù)值或接近該數(shù)值的含義，以防止某些非善意的侵權(quán)人對為了幫助理解本發(fā)明而提及準確或絕對的數(shù)值的公開內(nèi)容的不當(dāng)使用。此外，本發(fā)明說明書全文中“～的步驟”不表示“為～的步驟”。

本發(fā)明說明書全文中，馬庫什形式的表達中包含的用語“它們的組合”表示在馬庫什形式表達所記載的構(gòu)成要素組成的組中選擇的一個以上的混合或組合，即表示包含從上述構(gòu)成要素組成的組中選擇的一個以上。

本發(fā)明說明書全文中，“石墨烯量子點(graphene quantum dots，GQDs)”是指氧化石墨烯(graphene oxides)或還原的氧化石墨烯(reduced graphene oxides)的納米尺寸的片段。

本發(fā)明說明書全文中，用語“石墨烯”表示復(fù)數(shù)個碳原子相互通過共價鍵連接而形成多環(huán)芳香族分子，上述共價鍵連接的碳原子形成6元環(huán)的基本重復(fù)單元，但是也可以進一步包括5元環(huán)和/或7元環(huán)。

本發(fā)明說明書全文中，用語“氧化石墨烯”還可以稱為石墨烯氧化物(graphene oxides)，可簡稱為“GOs”。石墨烯上可以包括結(jié)合有羧基、羥基或環(huán)氧基等含氧功能團的結(jié)構(gòu)，但不限于此。

本發(fā)明說明書全文中，用語“還原氧化石墨烯”是指經(jīng)過還原過程而氧比重減少的氧化石墨烯，也稱為還原的石墨烯氧化物(reduced graphene oxides)，可簡稱為“rGOs”，但不限于此。

下面，詳細說明本發(fā)明的實施方式，但本發(fā)明可不限于此。

本發(fā)明的第一方面提供含有石墨烯納米結(jié)構(gòu)體(graphene nanostructure)作為有效成分的用于預(yù)防或治療神經(jīng)退行性疾病的藥物組合物。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述藥物組合物可以進一步包含藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，但可不限于此。所述藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑只要能夠用于藥物組合物就不受限制，例如，可以包含選自由凡士林、綿羊油、聚乙二醇、醇及它們的組合組成的組中的一種，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述神經(jīng)退行性神經(jīng)疾病是有關(guān)蛋白質(zhì)的錯誤折疊的疾病，例如，可以選自由阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓病、艾滋病癡呆癥、腦卒中、老年全身性淀粉樣變病、原發(fā)性全身性淀粉樣變病、繼發(fā)性全身性淀粉樣變病、II型糖尿病、肌萎縮性淀粉樣變病、血液透析-相關(guān)淀粉樣變病、傳染性海綿狀腦病及多發(fā)性硬化癥組成的組中，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體可以包括石墨、石墨烯或石墨烯量子點，但可不限于此。

所述石墨烯量子點例如可以為約1～20nm、約5～20nm、約10～20nm、約15～20nm、約1～15nm、約1～10nm或約1～5nm范圍的大小，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體例如可以包括約1～100nm、約10～100nm、約30～100nm、約50～100nm、約70～100nm、約90～100nm、約1～90nm、約1～70nm、約1～50nm、約1～30nm或約1～10nm范圍的不同尺寸的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體能夠抑制蛋白質(zhì)的錯誤折疊(misfolding)引起的纖絲形成，此外，還能夠抑制錯誤蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移(transmission)，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體不會在體內(nèi)蓄積，對人體不顯示毒性。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體可以通過防止纖絲狀態(tài)的蛋白質(zhì)引起的線粒體功能障礙的機制，抑制神經(jīng)元內(nèi)的活性氧簇生成，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明以實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的末端的官能團可以結(jié)合以神經(jīng)蛋白質(zhì)為靶標的物質(zhì)，例如作為抗淀粉樣變病的物質(zhì)的剛果紅或作為淀粉樣變病探測染料(detecting dye)的硫黃素(thioflavin)T或S等，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明的所述官能團可以是含有氧原子的官能團，例如-OH、-COOH、-C＝O等，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，所述石墨烯納米結(jié)構(gòu)體可以在遠紅外激光照射下產(chǎn)生光熱效應(yīng)，但可不限于此。

根據(jù)本發(fā)明一實施方式，本發(fā)明的藥物組合物由于在石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的末端結(jié)合的官能團上連接以神經(jīng)蛋白質(zhì)為靶標的物質(zhì)，因此具有能夠追蹤神經(jīng)蛋白質(zhì)的優(yōu)點。當(dāng)通過上述方式將石墨烯納米結(jié)構(gòu)體誘導(dǎo)至神經(jīng)蛋白質(zhì)附近后，照射對細胞損害較小的遠紅外激光時，能夠通過石墨烯納米結(jié)構(gòu)體的光熱效應(yīng)抑制纖絲化和聚集現(xiàn)象。

實施本發(fā)明的形式

下面通過實施例進一步具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不限于這些實施例。

[實施例]

制備例1

參考2012年發(fā)表于納米快報(Nano Letters)上的論文[Nano lett，12，844-849(2012)]制備了GQDs。將碳纖維加入到以3:1的比例混合有硫酸和硝酸的溶液中，在80℃下加熱24小時(熱氧化工藝，thermo-oxidation process)。反應(yīng)完成后，經(jīng)透析過程、真空過濾等進行純化，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀最終獲得粉末形態(tài)的GQDs。由此獲得的GQDs的形態(tài)為在結(jié)構(gòu)上具有非常多樣的尺寸(約5～20nm)的粒子(參照圖1)。制備的GQDs的其他特征還有：在UV(紫外光)燈下產(chǎn)生了熒光(發(fā)射：490nm和550nm)(JASCO FP-8300熒光分光儀)(參照圖2)，且當(dāng)照射808nm NIR激光時，產(chǎn)生了光熱(photothermal)效應(yīng)。通過觀察FT-IR分析圖譜(Thermo Scientific Nicolet iS 10FT-IR分光儀)，GQDs末端的羧基(-COOH)在1724cm^-1，芳香族C＝C峰在1614cm^-1被觀測到(參照圖3)。最后，通過ZETA電位(Malvern Zetasizer Nano ZS)分析的表面電荷顯示為在約-20mV(參照圖4)。

制備例2

通過下列反應(yīng)式的反應(yīng)，制備了在上述制備的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體(GQDs)末端的官能團上結(jié)合有作為以神經(jīng)蛋白質(zhì)為靶標的物質(zhì)的剛果紅的物質(zhì)。通過將所述剛果紅的量分別設(shè)置為不同(100微克/m、250微克/ml和500微克/ml)而制備了樣品1、2和3。

試驗例1

使用叫做PFFs(pre-formed fibrils)的α-突觸核蛋白(alpha-synuclein)實驗?zāi)Ｐ痛_定石墨烯量子點對纖絲化的抑制效果。具體地，在神經(jīng)元中注入PFFs后經(jīng)一周的時間就會形成纖絲，這最終導(dǎo)致了神經(jīng)元的壞死。纖絲化會引起α-突觸核蛋白的磷酸化，這可以通過如圖5中所示的染色的圖像來確認?？纱_認到，向神經(jīng)元僅注入PFFs(1微克/ml)時茂密的p-α-syn(磷酸化的α-突觸核蛋白)在注入GQDs(1微克/ml)之后消失到幾乎沒有注入任何試劑的水平(參照圖5)。如圖5所示，將p-α-syn減少了約80％，實際上這可以被解釋為達到了完全抑制了纖絲化的水平。此外，神經(jīng)元的存活率也增加了約20％(參照圖6b)。僅注入GQDs時的神經(jīng)元的存活率(用TUNEL(末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿苷三磷酸缺口末端標記)檢測分析)相比僅注入PBS(磷酸鹽緩沖液)培養(yǎng)基的情況，反而顯示更好的效果，從而確認GQDs對神經(jīng)元沒有毒性(參照圖6a及圖6b)。圖6a中左側(cè)表示受損細胞染色為紅色的TUNEL檢測，中間部分是細胞核內(nèi)的DNA染色為藍色的DAPI(4′,6-二脒基-2-苯基吲哚)染色，右側(cè)是它們的定量(quantification)。

此外，作為有關(guān)所使用的石墨烯納米結(jié)構(gòu)體通過防止纖絲狀態(tài)蛋白質(zhì)所引起的線粒體功能障礙的機制而抑制神經(jīng)元內(nèi)的活性氧簇的生成的實驗，用8-OHG(作為DNA氧化的主要產(chǎn)物的核酸氧化8-羥基鳥苷(8-oxo-2’-deoxyguanosine))對預(yù)培養(yǎng)的神經(jīng)元染色后進行分析(參照圖7a)。如圖7a所示，由于加入石墨烯納米結(jié)構(gòu)體，受活性氧簇的影響而生成的8-OHG的量顯著降低。有關(guān)線粒體功能障礙的實驗是通過細胞的基礎(chǔ)呼吸速率(basal respiratory rate)、最大呼吸速率(maximal respiratory rate)和線粒體的Complex I(復(fù)合物-I)活性分析而確認的(參照圖7b)。如圖7b的圖表所示，向神經(jīng)元僅注入PFFs時的線粒體的呼吸速率顯著降低，且Complex I活性也減少；但是GQDs和PFFs一同注入到神經(jīng)元時，恢復(fù)到正常水平。在該試驗例中的對線粒體功能障礙的分析結(jié)果被認為是與圖6a的神經(jīng)元存活率相符合的重要結(jié)果。

試驗例2

雖然單純地抑制纖絲化并提高神經(jīng)元的存活率也重要，但是為了神經(jīng)退行性疾病的治療及緩解疾病的發(fā)展速度，防止向周邊的神經(jīng)元轉(zhuǎn)移(transmission)也非常重要。為了確認這一事實，安裝微流控裝置(microfluidic device)，觀察在將GQDs放入哪一腔室時能夠阻斷轉(zhuǎn)移過程。圖8a是簡單的實驗的模擬圖，圖8b示出該實驗的結(jié)果。至于C1(腔室1)，向第一個腔室的神經(jīng)元注入GQDs；至于C2(腔室2)，向第二個腔室的神經(jīng)元注入GQDs，然后確認到α-突觸核蛋白的纖絲化向周邊的神經(jīng)元擴散。至于僅有PFFs而沒有GQDs的陽性對照組，觀察到已纖絲化的α-突觸核蛋白從第一個腔室轉(zhuǎn)移至第三個腔室。至于向第一個腔室的神經(jīng)元加入GQDs的第二個裝置，觀察到纖絲化程度一開始就不大，由此在第二和第三腔室的神經(jīng)元中也幾乎沒有α-突觸核蛋白的纖絲化。至于向中間的腔室的神經(jīng)元加入GQDs的最后一個裝置，觀察到雖然在第一個腔室中進行了一定程度的纖絲化，但是加入GQDs的第二個腔室的神經(jīng)元開始其纖絲化的量顯著減少，接下來的最后的腔室的神經(jīng)元中幾乎沒有發(fā)生纖絲化。在該裝置中初期的纖絲化程度與作為陽性對照組僅加入PFFs的裝置不同的原因被認為在于，由于設(shè)備自身的誤差而在設(shè)備中無法為各神經(jīng)元完全分離GQDs。

試驗例3

按照與細胞內(nèi)實驗相同的方式進行取樣(在37℃對1微克/ml的GQDs和1微克/ml的PFFs進行孵化后在二氧化硅基材上點樣)，并通過OM(optical microscope，光學(xué)顯微鏡)分析GQDs對纖絲化的抑制，結(jié)果僅孵化PFFs時觀察到推測為纖絲聚集的大團塊(參照圖9的(a)和(b))，相反與GQDs一同孵化時觀察到了疑似GQDs和α-突觸核蛋白的低聚體聚集的圖像(參照圖9的(c)和(d))。上述結(jié)果中的總α-突觸核蛋白和GQDs的量有些過量，且沒有獲得能夠明確他們的結(jié)構(gòu)的清晰圖像，但是可以確認的是上述兩個樣品的結(jié)果明顯不同。

按照與OM分析相同的取樣方式準備樣品，通過AFM(atomic force microscope，原子力顯微鏡)分析GQDs對纖絲化的抑制，結(jié)果僅孵化PFFs時觀察到纖絲和PFFs聚集的路易小體(lewy body)的形成(參照圖10的(b))，相反與GQDs一同孵化時觀察到了疑似GQDs和α-突觸核蛋白的低聚體聚集的圖像(參照圖10的(d))。

按照與上述OM和AFM分析相同的方法，在TEM(transmission electron microscopy，透射電子顯微鏡)格子(grid)上點樣，通過高分辨率電子顯微鏡(high resolution-transmission electron microscope)進行分析。圖11a是在TEM格子上僅點樣PFFs后分析的數(shù)據(jù)。從圖像中可以看出，形成了又厚又長的纖絲束。相反一同放入GQDs的樣品中，如AFM圖像中所示，可以獲得疑似GQDs和α-突觸核蛋白聚集的圖像(參照圖11b)。

雖然如圖9至圖11所示的圖像中顯示在PFFs中注入GQDs時和沒有注入GQDs時的顯著的差異，但是這些圖像是在干燥的狀態(tài)下所獲得的，因此在顯示注入GQDs后的準確的PFFs狀態(tài)方面具有局限性。為了更詳細的分析而進行了BN-PAGE(blue native polyacrylamide gel electrophoresis，藍綠溫和膠聚丙烯酰胺凝膠電泳)分析的結(jié)果，確認到驚人的事實(參照圖12)。在圖12中，1號列是空白對照組，即僅加入GQDs的情況；2號和4號列是僅加入PFFs的情況；3號和5號列是將作為同時加入PFFs和GQDs的樣品的凝膠放入的情況，結(jié)果可確認到，加入GQDs時在對應(yīng)于α-突觸核蛋白單體(14.46kDa)的區(qū)域中檢測到的量較多。這是表明在PFFs中加入GQDs的話不僅能夠阻斷PFFs纖絲化，而且還使其返回為單體的重要數(shù)據(jù)。

試驗例4

對在上述制備例1中制備的GQDs和剛果紅溶液(對照組)照射紅外線激光后在暗處拍攝了熒光發(fā)光現(xiàn)象，其結(jié)果如圖13所示。

此外，如圖14所示，當(dāng)照射NIR(近紅外線)激光時，相比剛果紅或蒸餾水(distilled water)表現(xiàn)出更高的光熱效應(yīng)，并且隨著GQDs的濃度(500微克/ml、250微克/ml、100微克/ml)增加，溫度也增加。

試驗例5

使用多種樣品(上述制備例1和2中制備的GQDs、樣品1、樣品2、樣品3和作為比較例的剛果紅溶液)，進行了FT-IR分析、熒光發(fā)光測定實驗。

參照示出FT-IR分析圖譜的圖15，可以看到在與剛果紅(congo red,CR)的-NH²對應(yīng)的峰3419cm^-1處，峰值隨著剛果紅的濃度增加而減少；在與GQDs末端的羧基(-COOH)對應(yīng)的峰1710cm^-1處，峰值也是隨著剛果紅的濃度增加而減少；與肽鍵(-CONH)對應(yīng)的峰1660cm^-1是隨著GQDs和剛果紅的結(jié)合而逐漸生成；與芳香族C＝C對應(yīng)的峰1614cm^-1按照預(yù)想的那樣在所有的樣品中維持。

另外，測定了根據(jù)上述樣品的波長的熒光發(fā)光特性后示于圖16中。其中，剛果紅作為對照組使用，樣品1的熒光發(fā)光峰值顯示為最高。

上述的本發(fā)明的說明僅是示例性的，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是，在不變更本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思和必要特征的情況下，也可以容易地變型為其他具體形態(tài)。因此記載的實施例應(yīng)當(dāng)被理解為在任何方面都是示例性的而不是限定性的。例如，以單一型態(tài)說明的各個構(gòu)成要素也可以分布實施，同樣，分布說明的構(gòu)成要素也可以以結(jié)合的形態(tài)實施。

本發(fā)明的范圍應(yīng)由隨附的權(quán)利要求書來呈現(xiàn)而不是由上述的詳細說明來呈現(xiàn)，由權(quán)利要求書的含義、范圍及其等同概念導(dǎo)出的所有的變更或變形的形態(tài)，均應(yīng)理解為包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。