本發(fā)明涉及是公認的抗腫瘤藥物吉西他濱的單磷酸酯衍生物的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯(化學名：2'-脫氧-2',2'-二氟-D-胞苷-5'-O-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯)的藥物制劑。特別地，本發(fā)明涉及包含極性非質子溶劑，優(yōu)選二甲基乙酰胺(DMA)的制劑。包含這些溶劑的制劑提供治療有效量的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯。本發(fā)明的制劑可以在施用前稀釋到所需的濃度。
背景技術：
：吉西他濱(1；商品名)是一種有效的核苷類似物，目前已被證實可治療乳腺癌、非小細胞肺癌、卵巢癌和胰腺癌，并廣泛用于治療各種其它癌癥，包括膀胱癌、膽道癌、結腸直腸癌和淋巴瘤。吉西他濱的臨床效果受到多種固有耐藥機制和獲得性耐藥機制的限制。細胞水平的耐藥取決于三個參數：(i)激活成磷酸化基團所必需的脫氧胞苷激酶的下調；(ii)核苷轉運體特別是通過癌細胞攝取所需的hENT1的降低的表達，和(iii)催化酶尤其是降解吉西他濱的胞苷脫氨酶的上調。WO2005/012327描述了吉西他濱的一系列磷酸酯衍生物和相關的核苷藥物分子。其中吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯(NUC-1031；2)被認為是特別有效的化合物。這些化合物似乎避免了很多限制吉西他濱的效果的固有耐藥機制和獲得性耐藥機制(‘ApplicationofProTideTech否logytoGemcitabine:ASuccessfulApproachtoOvercometheKeyCancerResistanceMechanismsLeadstoaNewAgent(NUC-1031)inClinicalDevelopment’；Slusarczyketall；J.Med.Chem.；2014,57,1531-1542)。遺憾的是，NUC-1031非常親脂，因此難溶于水(通過計算：<0.1mg/mL)，此外，可電離基團嘧啶氮和酚羥基的計算所得的pKa值在適于腸胃外施用的pH范圍之外。無論鹽含量和pH值如何，它基本不溶于水，這對以足以實現有效治療的高劑量遞送化合物的臨床可接受方法的發(fā)展產生嚴重影響。有時，可以實現如NUC-1031般親脂的藥物分子的遞送，但其疼痛水平于患者來說難以接受。NUC-1031以在磷酸酯中心差向異構的兩種非對映異構體的混合物存在：本發(fā)明的某些實施方案旨在提供遞送有效劑量的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的藥物制劑。本發(fā)明的某些實施方案旨在提供吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的穩(wěn)定藥物制劑。對于靜脈內施用，合適的輸注制劑通常應在大于30分鐘，并達到48小時內穩(wěn)定。特別說明的是，對于靜脈內施用，制劑的穩(wěn)定包括對吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的沉淀和吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯的降解兩方面穩(wěn)定。本發(fā)明的某些實施方案旨在提供靜脈內遞送有效劑量的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯的藥物制劑。本發(fā)明的某些實施方案旨在提供可以在外周靜脈中或經中心管線(centralline)施用的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的腸胃外制劑。因此，本發(fā)明的某些實施方案旨在提供這樣一種制劑，所述制劑的同滲容摩對于經外周靜脈施用來說是可接受的。本發(fā)明的某些實施方案滿足一些或全部上述目的。技術實現要素：根據本發(fā)明的第一方面，提供了一種藥物制劑，其包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；極性非質子溶劑；和任選的一種或多種藥學上可接受的賦形劑。極性非質子溶劑可以選自二甲基乙酰胺(DMA)，二甲基亞砜(DMSO)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)。優(yōu)選地，極性非質子溶劑是DMA。DMA提供了所測試的那些的最佳溶解度曲線。極性非質子溶劑(例如DMA，DMSO或NMP)可以是藥物級的。極性非質子溶劑(例如DMA)可以是施用載體，或者可以是在制劑使用前稀釋所使用的提供所需特征的施用載體。因此，制劑可以準備用于輸注并且具有極性非質子溶劑(例如DMA)作為主要組分；或者其可以是極性非質子溶劑(例如DMA)作為主要組分并且在施用前稀釋以產生準備用于輸注并且極性非質子溶劑(例如DMA)僅作為次要組分的制劑的制劑；或者其可以是準備用于輸注，具有僅作為次要組分的極性非質子溶劑(例如DMA)，并且是由其中極性非質子溶劑(例如DMA)是主要組分的制劑的稀釋產生的制劑。因此，極性非質子溶劑(例如DMA)可以占制劑的0.1％v/v至100％v/v。很少的藥學上可接受的溶劑溶解足夠量的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯以靜脈內遞送治療有效劑量。在那些中，許多是不穩(wěn)定的，即吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯將傾向于從溶液中沉淀析出。發(fā)明人驚奇地發(fā)現，確實產生穩(wěn)定溶液的溶劑通常是極性非質子溶劑，例如DMA，DMSO和NMP。在已經發(fā)現能夠溶解吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯的那些溶劑中，本發(fā)明人已經發(fā)現某些極性非質子溶劑，特別是DMA，當以水性載體稀釋溶液時特別能夠以遞送所需劑量所必需的濃度將其保持在該溶液中。因此，使用極性非質子溶劑，特別是DMA，提供了優(yōu)于其它制劑溶劑的雙重優(yōu)點，令人驚訝地，這使其成為將吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯以實用和治療有效的方式遞送至患者的優(yōu)良介質。吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯可以作為磷酸酯非對映異構體的混合物存在，或其可以以基本上非對映異構純的形式作為(S)-差向異構體或作為(R)-差向異構體存在。對于本發(fā)明的目的，“基本上非對映異構純的”被定義為大于約90％的非對映異構純度。如果以基本上非對映異構純的形式存在，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯可以具有大于95％，98％，99％或甚至99.5％的非對映異構純度。吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯可以作為磷酸酯非對映異構體的混合物存在。因此，以非對映異構體的混合物施用NUC-1031提供了遞送有效治療的實用且經濟的方法。非臨床證據表明兩種差向異構體之間的生物學效力沒有差異。或者，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯2可以以基本上非對映異構純的形式作為(S)-差向異構體3存在。(S)-差向異構體相對于(R)-差向異構體顯示令人驚訝和顯著的溶解度增加，其允許更方便的配制，增加制劑的穩(wěn)定性并降低在施用設備(givingset)或中心管線中沉淀的風險。它還可以允許藥物以這樣的方式遞送，即以經稀釋的制劑經由外周靜脈施用時減少患者不適。本發(fā)明的制劑可以在施用前不久稀釋預定量，即在施用前長達48小時(例如長達24、12或2小時)。所述制劑還可以包含一種或多種藥學上可接受的增溶劑，例如，藥學上可接受的非離子增溶劑。增溶劑也可以被稱為表面活性劑。示例性增溶劑包括聚乙氧基化脂肪酸和脂肪酸酯及它們的混合物。合適的增溶劑包括聚乙氧基化蓖麻油(例如以商品名ELP出售的)；或聚乙氧基化硬脂酸(例如以商品名或HS15出售的)；或聚乙氧基化(例如聚氧乙烯(20))失水山梨醇單油酸酯(例如以商品名80銷售的那些)。在某些優(yōu)選的實施方案中，制劑包含多于一種的藥學上可接受的增溶劑。所述制劑還可以包含水性載體。本發(fā)明的制劑可以是準備好施用的，在這種情況下，其通常包含水性載體。該制劑可以用于胃腸外，例如用于靜脈內、皮下或肌內施用。優(yōu)選地，該制劑用于靜脈內施用。施用可以通過中心靜脈或其可以通過外周靜脈。適合于施用的制劑中的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的總劑量通常為250mg至3g，例如1g至2g，例如約1.5g?？赡艿氖牵瑯O性非質子溶劑(例如DMA)占制劑體積的30％或更多。因此，極性非質子溶劑(例如DMA)占制劑體積的50％或更多，例如60％或更多。極性非質子溶劑(例如DMA)可以占制劑體積的95％或更少，例如90％或更少。制劑還可以包含水性載體(例如鹽水)。水性載體可以占制劑體積的50％或更少，例如30體積％或更少。通常，水性載體(例如鹽水)將占制劑體積的5％或更多，例如10％或更多?？赡艿氖?，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在(多種)制劑溶劑中的濃度為每mL500mg或更少?？梢允敲縨L100mg或更多的濃度。優(yōu)選地，濃度為每mL200mg至300mg，例如225mg至275mg，例如約250mg。某些優(yōu)選的制劑包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。更優(yōu)選的制劑包含：70體積％至90體積％的DMA；10體積％至30體積％的水性載體(例如鹽水)；和每mL200mg至300mg的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。前四個段落中描述的制劑，其中極性非質子溶劑(例如DMA)作為主要組分存在，可以例如用于施用磷酸酯非對映異構體混合物形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。它們還可用于施用基本上非對映異構純形式的(S)-磷酸酯差向異構體的形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。在這些段落中描述的制劑可以通過施用(例如通過輸注或注射)制劑使用，而不用在施用前稀釋。它們可以通過中心靜脈施用。或者，可以稀釋這些制劑以形成適于通過外周靜脈施用的制劑?？赡艿氖牵瑯O性非質子溶劑(例如DMA)占制劑體積的10％或更多，例如20％或更多。因此，可能的是極性非質子溶劑(例如DMA)占制劑體積的80％或更少，例如60％或更少。極性非質子溶劑(例如DMA)可占制劑體積的40％或更少。制劑還可以包含一種或多種增溶劑(例如一種或多種聚乙氧基化脂肪酸)。一種或多種增溶劑可占制劑體積的90％或更少，例如80％或更少。通常，一種或多種增溶劑將占制劑體積的30％或更多，例如50％或更多或60％或更多。一種優(yōu)選的制劑包含作為在30％:70％DMA：增溶劑混合物中的溶液的藥物?？赡艿氖牵魉麨I-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在(多種)制劑溶劑中的濃度為每mL200mg或更少，例如150mg或更少或120mg或更少?？赡艿氖牵瑵舛葹槊縨L40mg或更多，例如60mg或更多。優(yōu)選地，濃度為每mL70mg至110mg，例如約75mg或約100mg。某些優(yōu)選的制劑包含：20體積％至80體積％的DMA；30體積％至80體積％的增溶劑或多種增溶劑；和50mg/mL至150mg/mL的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。所述制劑還可以包含水性載體，例如其量為1體積％至15體積％。某些特別優(yōu)選的制劑包含：20體積％至80體積％的DMA；20體積％至60體積％的第一增溶劑；5體積％至40體積％的第二增溶劑；2％至12％的水性載體；和50mg/mL至150mg/mL的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。第一增溶劑可以是聚乙氧基化蓖麻油(例如以商品名ELP出售的那些)。第二增溶劑可以是聚乙氧基化脫水山梨糖醇單油酸酯(例如以商品名80銷售的那些)。制劑還可以包含水性載體，例如其量為3體積％至15體積％。所述制劑可以包含：50體積％至60體積％的DMA；20體積％至30體積％的第一增溶劑；8體積％至15體積％的第二增溶劑；4體積％至10體積％的水性載體；和75mg/mL至125mg/mL的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。前五個段落中描述的制劑，其中極性非質子溶劑(例如DMA)作為主要組分存在，可用于例如施用基本上非對映異構純形式的(S)-磷酸酯差向異構體形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。它們也可以用于施用R和S差向異構體的混合物或R差向異構體。在這些段落中描述的制劑通常在施用之前用水性載體稀釋。一旦稀釋，它們可以通過外周靜脈施用。這些制劑可以通過稀釋不含任何增溶劑的制劑來形成。吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯可以在某些增溶劑的存在下降解?？赡艿氖?，極性非質子溶劑(例如DMA)占制劑體積的0.1％或更多，例如0.5％或更多或1％或更多。因此，可能的是DMA占制劑體積的10％或更少，例如5％或更少或3％或更少。極性非質子溶劑(例如DMA)可以占制劑體積的8％或更少或2％或更少。制劑還可以包含水性載體(例如WFI)。水性載體可以以占制劑體積的99.5％或更少存在，例如占制劑體積的99％或98％或更少。通常，水性載體將占制劑體積的85％或更多，例如90％或更多或95％或更多。制劑還可以包含一種或多種增溶劑(例如一種或多種聚乙氧基化脂肪酸)。一種或多種增溶劑可占制劑體積的10％或更少，例如7.5％或更少或5％或更少或3％更少。通常，一種或多種增溶劑將占制劑體積的0.1％或更多，例如0.5％或更多或1％或更多或2％或更多?？赡艿氖?，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在(多種)制劑溶劑中的濃度為每mL12.0mg或更少或每mL10.0mg或更少，例如每mL7.0mg或更少或4.5mg或更少?？赡艿氖?，濃度為每mL1.0mg或更多，例如2.0mg或更多。優(yōu)選地，濃度為2.5mg至11mg/mL，例如3mg至7mg/mL，例如約4.5mg/mL。某些優(yōu)選的制劑包含：0.1體積％至15體積％(例如0.5至5體積％)的DMA；0.1體積％至15體積％(例如0.1％至7.5體積％)的增溶劑或多種增溶劑；85體積％至99體積％的水性載體；和每mL2.0mg至12.0mg(例如2.0mg至10.0mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。某些特別優(yōu)選的制劑包含：0.5體積％至10體積％的DMA；0.2體積％至4體積％的第一增溶劑；0.1體積％至2體積％的第二增溶劑；85體積％至99體積％的水性載體；和每mL2.0mg至12.0mg(例如2.0mg至10.0mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。第一增溶劑可以是聚乙氧基化蓖麻油(例如以商品名ELP出售的那些)。第二增溶劑可以是聚乙氧基化脫水山梨糖醇單油酸酯(例如以商品名80銷售的那些)。所述制劑可以包含：0.5體積％至6體積％的DMA；0.5體積％至6體積％的第一增溶劑；0.2體積％至4體積％的第二增溶劑；85體積％至99體積％的水性載體；和每mL2.0mg至12.0mg(例如2.0mg至10.0mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。前四個段落中描述的制劑，其中極性非質子溶劑(例如DMA)作為主要組分存在，可用于例如施用基本上非對映異構純形式的(S)-磷酸酯差向異構體形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。它們也可以用于施用R和S差向異構體的混合物或R差向異構體。在這些段落中描述的制劑通常通過在施用前長達48小時用水性載體稀釋濃縮的極性非質子溶劑(例如DMA)制劑或濃縮的極性非質子溶劑(例如DMA)和增溶劑制劑來制備。所得到的制劑可以通過外周靜脈施用。雖然本發(fā)明的制劑優(yōu)選用于腸胃外施用，但是本發(fā)明的某些實施方案也可以口服施用。在本發(fā)明的第二方面，提供了藥物制劑，其包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；極性非質子溶劑(例如DMA)；和任選的一種或多種藥學上可接受的賦形劑；其中所述制劑用于醫(yī)療用途。在本發(fā)明的第三方面，提供了藥物制劑，其包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；極性非質子溶劑(例如DMA)；和任選的一種或多種藥學上可接受的賦形劑；其中所述制劑用于治療癌癥。在本發(fā)明的第四方面，提供了治療癌癥的方法，所述方法包括對有需要的受試者施用藥物制劑，所述藥物制劑包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；極性非質子溶劑(例如DMA)；和任選的一種或多種藥學上可接受的賦形劑。該方法可以包括以下步驟：用水性載體稀釋包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，極性非質子溶劑(例如DMA)和任選的一種或多種藥學上可接受的賦形劑的溶液，以提供用于輸注或注射的制劑；和通過輸注或注射對受試者施用用于輸注或注射的制劑。該方法可以包括以下步驟：用包含極性非質子溶劑(例如DMA)和一種或多種增溶劑的第二溶液稀釋包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯和極性非質子溶劑(例如DMA)和任選的水性載體的第一溶液以形成第三溶液；用水性載體稀釋所述第三溶液以提供用于輸注或注射的制劑；和通過輸注或注射對受試者施用用于輸注或注射的制劑。第二制劑可以包含多于一種增溶劑。通常，第二制劑不包含活性成分。所述稀釋或各稀釋可以以預定量。起始溶液可以是第一方面的制劑。同樣地，用于輸注或注射的制劑可以是第一方面的制劑?？梢允窃谙♂尣襟E例如第一或第二稀釋步驟后長達48小時(例如長達12或2小時)進行施用步驟。癌癥可以是選自以下的癌癥：胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、結腸直腸癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌、膽管癌、腎癌、子宮頸癌、胸腺癌、未知原發(fā)位點的癌癥、淋巴瘤或白血病。該方法可以包括：用第一制劑的第一部分沖洗中心管線靜脈內施用裝置，所述第一制劑包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和經由所述施用裝置對所述患者施用第二制劑，所述第二制劑包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；和任選地用第一制劑的第二部分沖洗施用裝置。通常，第一制劑不包含活性成分。在本發(fā)明的第五方面，提供了制備用于輸注或注射的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的藥物制劑的方法，所述方法包括：用水性載體稀釋包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，極性非質子溶劑(例如DMA)和任選的一種或多種藥學上可接受的賦形劑的溶液，以提供用于輸注或注射的制劑。稀釋可以是預定量的。起始溶液可以是第一方面的制劑。同樣地，用于輸注或注射的制劑可以是第一方面的制劑?？梢允窃谙♂尣襟E后長達48小時(例如長達12或2小時)進行施用步驟。水性載體可選自鹽水(例如0.9％鹽水或0.45％鹽水)，葡萄糖溶液和輸注用水(WFI)。優(yōu)選地，水性載體是WFI。WFI的使用提供了與血液基本上等滲的制劑。水性載體可以包含一種或多種藥學上可接受的增溶劑(也稱為表面活性劑)，例如，藥學上可接受的非離子增溶劑。示例性增溶劑是聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯(以80銷售)。在本發(fā)明的第六方面，提供了制備吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的藥物制劑的方法，所述方法包括：將吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯溶解在極性非質子溶劑(例如DMA)中以形成溶液；向溶液中加入一種或多種其它藥物賦形劑以形成吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的藥物制劑。發(fā)明人已經發(fā)現更有效的方法產生于在極性非質子溶劑(例如DMA)中預溶解吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯，然后加入所需的賦形劑，例如增溶劑。一種或多種藥物賦形劑可以包括增溶劑。在本發(fā)明的第七方面，提供了包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物和至少一種藥學上可接受的賦形劑的藥物制劑。優(yōu)選地，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯基本上是非對映異構純的形式。該制劑可以用于胃腸外，例如用于靜脈內，皮下或肌內施用。優(yōu)選地，所述制劑用于靜脈內施用。制劑可以是任選還包含極性有機溶劑的水性制劑。在腸胃外(例如靜脈內)施用的情況下，制劑優(yōu)選還包含極性有機溶劑。該制劑可以包含DMSO或NMP。制劑還可以包含環(huán)糊精。在本發(fā)明的第八方面，提供了包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰基-L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物和至少一種藥學上可接受的賦形劑的藥物制劑。優(yōu)選地，吉西他濱-[苯基-苯甲?；?L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯是基本上非對映異構純的形式。在本發(fā)明的第九方面，提供了一種試劑盒，所述試劑盒包括：第一制劑，其包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和第二制劑，其包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。第一制劑通常不包含活性成分。因此，其通常不包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。第一制劑可以在兩個分開的容器中或在單個容器中提供。本發(fā)明第九方面的試劑盒可用于通過中心管線靜脈內施用吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。在施用第二制劑之前用第一制劑沖洗中心管線。通過避免活性制劑與水性介質(例如鹽水沖洗溶液)的直接接觸，這減輕了吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在靜脈內施用裝置(即中心管線)中或入口處沉淀的風險。在施用第二制劑后，也可以用第一制劑沖洗中心管線。這進一步防止沉淀。在本發(fā)明的第十方面，提供了一種試劑盒，所述試劑盒包括：第一制劑，其包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯；和第二制劑，其包含：20體積％至80體積％的DMA；20體積％至60體積％的第一增溶劑；10體積％至40體積％的第二增溶劑。通常第二制劑不包含任何活性劑。該試劑盒可用于制備適合于外周施用的制劑。施用前長達48小時，例如長達24小時，用第二制劑稀釋第一制劑以形成第三制劑。在施用前將第三制劑進一步用水性載體稀釋至所需濃度以形成通過輸注或注射對患者施用的制劑。為了實現在吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的沉淀方面穩(wěn)定的外周施用制劑，通常希望包括增溶劑。然而，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在這種增溶劑的存在下可能易于降解。因此，在本發(fā)明的某些實施方案中，兩階段稀釋法是實現用于外周施用的制劑的優(yōu)選方法。具體實施方式在本說明書中，術語S-差向異構體或S-非對映異構體是指吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯。同樣，在本說明書中，術語R-差向異構體或R-非對映異構體是指吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯。術語“鹽水”旨在表示氯化鈉的水溶液。本發(fā)明的鹽水溶液通常是無菌的，并且通常將是適合于用于腸胃外施用的濃度。合適的濃度為高達2w/v％或高達1w/v％。為了優(yōu)化滲透壓，可以在本發(fā)明的制劑中使用不同濃度的鹽水，例如0.9％或0.45％。本發(fā)明的制劑可用于治療人體。它們可以用于治療動物體。特別地，本發(fā)明的化合物可用于治療商業(yè)動物例如家畜?；蛘?，本發(fā)明的化合物可用于治療伴侶動物，例如貓、狗等。本發(fā)明的制劑中的化合物可以以藥學上可接受的鹽的形式獲得、儲存和/或施用。合適的藥學上可接受的鹽包括但不限于藥學上可接受的無機酸如鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氫溴酸的鹽，或藥學上可接受的有機酸例如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、乳酸、粘酸、葡萄糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水楊酸、磺胺酸、天冬氨酸、谷氨酸、依地酸(edeticacid)、硬脂酸，棕櫚酸，油酸、月桂酸、泛酸、單寧酸、抗壞血酸和戊酸的鹽。合適的堿鹽由形成無毒鹽的堿形成。實例包括鋁、精氨酸、芐星、鈣、膽堿、二乙胺、二醇胺、甘氨酸、賴氨酸、鎂、葡甲胺、乙醇胺、鉀、鈉、氨基丁三醇和鋅鹽。也可以形成酸和堿的半鹽，例如半硫酸鹽、半草酸鹽和半鈣鹽。在某些實施方案中，特別是適用于s-差向異構體的那些實施方案，化合物是HCl鹽或半草酸鹽的形式。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物不是鹽的形式，即它們是游離堿/游離酸的形式。對于本發(fā)明的上述制劑，所施用的劑量當然將隨所使用的化合物，精確的施用模式，所需的治療和所示的病癥而變化。預期本發(fā)明化合物的劑量水平，劑量頻率和治療持續(xù)時間根據制劑和患者的臨床適應癥，年齡和共病態(tài)醫(yī)學病癥而不同。根據眾所周知的藥物原理，用于本發(fā)明的化合物的治療目的的劑量大小將根據病癥的性質和嚴重程度，動物或患者的年齡和性別以及施用途徑，而自然變化。藥物制劑通常采取組合物的形式，其中活性化合物或其藥學上可接受的鹽與藥學上可接受的佐劑，稀釋劑或載體聯合。本發(fā)明的制劑中的一種這樣的藥學上可接受的佐劑，稀釋劑或載體是極性非質子溶劑。用于選擇和制備合適的藥物制劑的常規(guī)方法描述于例如“Pharmaceuticals-TheScienceofDosageFormDesigns”，M.E.Aulton，ChurchillLivingstone，1988中。所述制劑可以適合于局部施用(例如皮膚或膀胱)，用于口服施用或用于腸胃外(例如靜脈內施用)。本發(fā)明的藥物制劑中使用的任何溶劑應當是藥物級的，這意味著它們具有使得它們適于對人施用(例如靜脈內施用)的雜質分布。對于口服施用，本發(fā)明的制劑可以包括與佐劑或載體混合的活性化合物，所述佐劑或載體例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如馬鈴薯淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉；纖維素衍生物；粘合劑，例如明膠或聚乙烯吡咯烷酮；和/或潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蠟、石蠟等，然后壓制成片劑。如果需要包衣片劑，可以用濃縮的糖溶液包衣如上所述制備的芯，所述濃縮的糖溶液可以含有例如阿拉伯樹膠、明膠、滑石粉和二氧化鈦?；蛘?，片劑可以用溶解在易揮發(fā)的有機溶劑中的合適的聚合物包衣。對于軟明膠膠囊的制備，活性化合物可以與例如植物油或聚乙二醇混合。硬明膠膠囊可以含有使用上述片劑賦形劑的化合物顆粒。也可將活性化合物的液體或半固體制劑填充入硬明膠膠囊中。用于口服應用的液體制劑可以是糖漿或懸浮液的形式，例如含有本發(fā)明化合物的溶液，其余是糖以及乙醇、水、甘油和丙二醇的混合物。任選地，這樣的液體制劑可以含有著色劑、調味劑、甜味劑(例如糖精)、防腐劑和/或羧甲基纖維素作為增稠劑或本領域技術人員已知的其它賦形劑。然而，優(yōu)選地，本發(fā)明的制劑用于腸胃外(例如靜脈內)施用或用于稀釋以形成用于胃腸外(例如靜脈內)施用的制劑。對于腸胃外(例如靜脈內)施用，活性化合物可以作為無菌水性或油性溶液施用。優(yōu)選地，活性化合物作為無菌水溶液施用。本發(fā)明的藥物組合物將優(yōu)選包含0.05-99％w(重量百分比)的吉西他濱-[苯基-苯甲?；?L-丙氨酰基)]-磷酸酯，更優(yōu)選0.05-80％w吉西他濱-[苯基-苯甲酰基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，還更優(yōu)選0.10至70％w吉西他濱-[苯基-苯甲?；?L-丙氨酰基)]-磷酸酯，甚至更優(yōu)選0.10至50％w吉西他濱-[苯基-苯甲酰基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，所有重量百分比均基于總組合物。已經顯示環(huán)糊精在藥物遞送中具有廣泛的應用(Rasheed等人，Sci.Pharm.，2008,76,567-598)。環(huán)糊精是環(huán)狀寡糖的家族。它們充當“分子籠”，其封裝藥物分子并改變那些藥物分子的性質，例如溶解性。環(huán)糊精包含(α-1,4)-連接的α-D-吡喃葡萄糖單元。環(huán)糊精可以含有6,7或8個吡喃葡萄糖單元(分別稱為α-，β-和γ-環(huán)糊精)。用于藥物制劑中的環(huán)糊精通常是β-環(huán)糊精。側掛羥基可以用C1-C6取代或未取代的烷基烷基化。環(huán)糊精的實例是α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、2-羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)、磺丁基醚β-環(huán)糊精鈉鹽、部分甲基化的β-環(huán)糊精。本發(fā)明的制劑還可以包括至少一種環(huán)糊精。本發(fā)明還包括化合物的所有藥學上可接受的同位素標記形式的制劑，其中一個或多個原子被具有相同原子序數但原子質量或質量數不同于自然界中通常存在的主要同位素的原子質量或質量數的原子替換。適合包括在本發(fā)明化合物中的同位素的實例包括氫的同位素，例如2H和3H，碳的同位素，例如11C、13C和14C，氯的同位素，例如36Cl，氟的同位素，例如18F，碘的同位素，例如123I和125I,，氮的同位素，例如13N和15N，氧的同位素，例如15O、17O和18O，磷的同位素，例如32P，和硫的同位素，例如35S。某些同位素標記的化合物，例如摻入放射性同位素的那些可用于藥物和/或底物組織分布研究。放射性同位素氚，即3H，和碳-14，即14C，鑒于其易于摻入和現成的檢測手段，特別可用于此目的。用更重的同位素例如氘，即2H，進行的取代可以提供由更大的代謝穩(wěn)定性例如增加的體內半衰期或降低的劑量需求帶來的某些治療優(yōu)勢，因此在一些情況下可能是優(yōu)選的。同位素標記的化合物通常可以通過本領域技術人員已知的常規(guī)技術或通過類似于使用適當的同位素標記的試劑代替之前使用的非標記試劑所描述的那些方法的方法制備。除了本發(fā)明的制劑之外，用于治療癌癥、淋巴瘤或白血病的治療方法或制劑可以涉及常規(guī)外科手術或放射療法或化療。這種化療可以包括施用一種或多種其它活性劑。當另外的活性劑作為本發(fā)明的治療方法的一部分施用時，這種組合治療可以通過各個治療組分的同時，相繼或分開配量來實現。這種組合產品使用在上文所述的治療有效劑量范圍內的本發(fā)明化合物和在其批準的劑量范圍內的一種或多種其它藥物活性劑。因此，本發(fā)明的藥物制劑可以包含另一種活性劑。一種或多種其他活性劑可以是一種或多種以下類別的抗腫瘤劑：(i)抗增殖/抗腫瘤藥及其組合，例如烷化劑(例如環(huán)磷酰胺、氮芥、苯達莫司汀(bendamustin)、美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥、白消安(busulphan)、替莫唑胺(temozolamide)和亞硝基脲)；抗代謝藥(例如吉西他濱和抗葉酸藥如氟嘧啶如5-氟尿嘧啶和喃氟啶、雷替曲塞、甲氨蝶呤、培美曲塞、阿糖胞苷和羥基脲)；抗生素(例如蒽環(huán)類藥物如阿霉素、博來霉素、多柔比星、道諾霉素、表柔比星、伊達比星、絲裂霉素-C、更生霉素和光神霉素)；抗有絲分裂劑(例如長春花生物堿如長春新堿、長春花堿、長春地辛和長春瑞濱和紫杉烷類如紫杉醇和泰素帝和polo激酶(polokinase)抑制劑)；蛋白酶體抑制劑，例如卡非佐米和硼替佐米；干擾素治療；和拓撲異構酶抑制劑(例如表鬼臼毒素如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、拓撲替康、米托蒽醌和喜樹堿)；(ii)細胞靜止素如抗雌激素(例如他莫昔芬，氟維司群，托瑞米芬，雷洛昔芬，屈洛昔芬和碘氧芬(iodoxyfene))，抗雄激素(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特和乙酸環(huán)丙孕酮)，LHRH拮抗劑或LHRH激動劑(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)，孕激素(例如醋酸甲地孕酮)，芳香酶抑制劑(例如阿那曲唑、來曲唑、伏羅唑和依西美坦)和5α-還原酶抑制劑如非那雄胺；(iii)抗侵入劑，例如達沙替尼和博舒替尼(SKI-606)，和金屬蛋白酶抑制劑，尿激酶纖溶酶原激活物受體功能抑制劑或類肝素酶抗體；(ⅳ)生長因子功能的抑制劑：例如此類抑制劑包括生長因子抗體和生長因子受體抗體，例如抗erbB2抗體曲妥單抗[赫賽汀TM]，抗EGFR抗體帕尼單抗，抗erbB1抗體西妥昔單抗，酪氨酸激酶抑制劑，例如表皮生長因子家族的抑制劑(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制劑，例如吉非替尼、厄洛替尼和6-丙烯酰胺基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉代丙氧基)-喹唑啉-4-胺(CI1033)、erbB2酪氨酸激酶抑制劑如拉帕替尼)；肝細胞生長因子家族的抑制劑；胰島素生長因子家族的抑制劑；細胞凋亡的蛋白質調節(jié)器的調節(jié)劑(例如Bcl-2抑制劑)；血小板衍生生長因子家族的抑制劑如伊馬替尼和/或尼羅替尼(AMN107)；絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑(例如Ras/Raf信號傳導抑制劑如法尼基轉移酶抑制劑，例如索拉非尼、替吡法尼和洛那法尼)，細胞通過MEK和/或AKT激酶信號傳導的抑制劑，c-kit抑制劑，abl激酶抑制劑，PI3激酶抑制劑，Plt3激酶抑制劑，CSF-1R激酶抑制劑，IGF受體，激酶抑制劑；極光激酶抑制劑和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑如CDK2和/或CDK4抑制劑；(v)抗血管生成劑，例如抑制血管內皮生長因子的作用的那些，[例如抗血管內皮細胞生長因子抗體貝伐單抗(AvastinTM)]；沙利度胺；來那度胺；和例如，VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑如凡德他尼、瓦他拉尼、舒尼替尼、阿西替尼和帕唑帕尼；(vi)基因治療方法，包括例如替代異?；蛉绠惓53或異常BRCA1或BRCA2的方法；(vii)免疫治療方法，包括例如抗體治療，例如阿侖珠單抗、利妥昔單抗、替伊莫單抗(ibritumomabtiuxetan)和奧法木單抗；干擾素如干擾素α；白細胞介素如IL-2(阿地白介素)；白細胞介素抑制劑，例如IRAK4抑制劑；癌癥疫苗，包括預防和治療疫苗，例如HPV疫苗，例如加德西、希瑞適(Cervarix)、Oncophage和Sipuleucel-T(普羅文奇(Provenge))；和toll樣受體調節(jié)劑，例如TLR-7或TLR-9激動劑；(viii)細胞毒性劑，例如氟達拉濱(fludara)、克拉屈濱、噴司他丁(NipentTM)；(ⅸ)類固醇例如皮質類固醇，包括糖皮質激素和鹽皮質激素，例如阿氯米松(aclometasone)、二丙酸阿氯米松、醛固酮、安西奈德、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、倍他米松、二丙酸倍他米松、倍他米松磷酸鈉、戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他松、丁酸氯倍他松、丙酸氯倍他索、氯潑尼醇、可的松、醋酸可的松、可的伐唑(cortivazol)、去氧皮甾酮、地奈德、去羥米松(desoximetasone)、地塞米松、地塞米松磷酸鈉、地塞米松異煙酸酯、二氟可的松、氟氯奈德(fluclorolone)、氟甲松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松(fluocinoloneacetonide)、氟輕松醋酸酯(fluocinonide)、氟可丁(fluocortinbutyl)、氟可的松、氟可龍(fluorocortolone)、氟可龍己酸酯、氟可龍三甲基乙酸酯、氟米龍、氟潑尼定、醋酸氟潑尼定、氟氫縮松、氟替卡松、丙酸氟替卡松、哈西奈德、氫化可的松、醋酸氫化可的松、丁酸氫化可的松、醋丙氫可的松、氫化可的松丁丙酸酯、戊酸氫化可的松、艾可米松、醋丁艾可米松、甲潑尼松、甲基強的松龍、莫米松、帕拉米松、糠酸莫米松一水合物、潑尼卡酯、潑尼松龍、潑尼松、替可的松、新戊酸替可的松、曲安西龍(triamcinolone)、曲安奈德(triamcinoloneacetonide)、曲安西龍醇和它們各自的藥學上可接受的衍生物?？梢允褂妙惞檀嫉慕M合，例如兩種或更多種本段落中提及的類固醇的組合；(x)靶向治療，例如PI3Kd抑制劑，例如伊達利塞(idelalisib)和哌立福辛；或抑制PD-1，PD-L1和CART的化合物。一種或多種其它活性劑也可以是抗生素。作為說明性實例，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯的非對映異構體混合物可以根據WO2005/012327中描述的合成方法或在‘ApplicationofProTideTech否logytoGemcitabine:ASuccessfulApproachtoOvercomethKeyCancerResistanceMechanismsLeadstoaNewAgent(NUC-1031)inClinicalDevelopment’；Slusarczyketall；J.Med.Chem.；2014,57,1531-1542中描述的那些制備。在以下條件下通過HPLC分離吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯的(R)和(S)同分異構體：設備：Agilent1200TM系列，帶DAD檢測器流速：1.0mL/min柱：ChiralpakADTM；250x4.6mmID(正相)溫度：環(huán)境粒徑：20μm進料：溶于MeOH；10g/L溶劑：正庚烷/IPA10->50％IPA(S)-差向異構體在8.6分鐘洗脫，(R)-差向異構體在10.3分鐘洗脫。使用下面的表征方法可以表征各個同分異構體：在BrukerAvance500光譜儀上在25℃下記錄質子(1H)，碳(13C)，磷(31P)和氟(19F)NMR光譜。將光譜自動校準到氘代溶劑峰，并且所有13CNMR和31PNMR都是質子去耦的。通過HPLC分析，使用VarianPolarisC18-A(10μM)作為分析柱，在35分鐘內進行從100/0至0/100的H2O/MeOH梯度洗脫，證實最終化合物的純度>95％。HPLC分析通過VarianProstar(LCWorkstation-Varianprostar335LC檢測器)進行。2'-脫氧-2′,2′-二氟-D-胞苷-5'-O-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯3(ES+)m/z，實測值：(M+Na+)603.14。C25H27F2N4O8NaP理論值：(M+)580.47。31PNMR(202MHz,MeOD):δP3.661HNMR(500MHz,MeOD):δH7.58(d,J＝7.5Hz,1H,H-6),7.38–7.32(m,7H,ArH),7.26–7.20(m,3H,ArH),6.24(t,J＝7.5Hz,1H,H-1’),5.84(d,J＝7.5Hz,1H,H-5),5.20(AB系統(tǒng),JAB＝12.0Hz,2H,OCH2Ph),4.46–4.43(m,1H,H-5’),4.36–4.31(m,1H,H-5’),4.25–4.19(m,1H,H-3’),4.07–4.00(m,2H,H-4’,CHCH3),1.38(d,J＝7.2Hz,3H,CHCH3)。19FNMR(470MHz,MeOD):δF–118.0(d,J＝241Hz,F),–120.24(寬d,J＝241Hz,F)。13CNMR(125MHz,MeOD):δC174.61(d,3JC-P＝5.0Hz,C＝O,酯),167.63(C-NH2),157.74(C＝O基),152.10(d,2JC-P＝7.0Hz,C-Ar),142.40(CH-基),137.22(C-Ar),130.90,129.63,129.39,129.32,126.32(CH-Ar),124.51(d,1JC–F＝257Hz,CF2),121.47,121.43(CH-Ar),96.67(CH-基),85.92(寬信號,C-1′),80.31(C-4′),71.27(明顯t,2JC–F＝23.7Hz,C-3′),68.03(OCH2Ph),65.73(d,2JC–P＝5.30Hz,C-5’),51.66(CHCH3),20.42(d,3JC–P＝6.25Hz,CHCH3)。反相HPLC，用H2O/MeOH從100/0至0/100在35分鐘內洗脫，顯示非對映異構體的一個峰，tR＝22.53min。2'-脫氧-2′,2′-二氟-D-胞苷-5'-O-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯4。(ES+)m/z，實測值：(M+Na+)603.14。C25H27F2N4O8NaP理論值：(M+)580.47。31PNMR(202MHz,MeOD):δP3.831HNMR(500MHz,MeOD):δH7.56(d,J＝7.5Hz,1H,H-6),7.38–7.31(m,7H,ArH),7.23–7.19(m,3H,ArH),6.26(t,J＝7.5Hz,1H,H-1’),5.88(d,J＝7.5Hz,1H,H-5),5.20(s,2H,OCH2Ph),4.49–4.46(m,1H,H-5’),4.38–4.34(m,1H,H-5’),4.23–4.17(m,1H,H-3’),4.07–4.01(m,2H,H-4’,CHCH3),1.38(d,J＝7.2Hz,3H,CHCH3).19FNMR(470MHz,MeOD):δF–118.3(d,J＝241Hz,F),–120.38(寬d,J＝241Hz,F).13CNMR(125MHz,MeOD):δC174.65(d,3JC-P＝5.0Hz,C＝O,酯),167.65(C-NH2),157.75(C＝O基),152.10(d,2JC-P＝7.0Hz,C-Ar),142.28(CH-基),137.50(C-Ar),130.86,129.63,129.40,129.32,126.31(CH-Ar),124.50(d,1JC–F＝257Hz,CF2),121.44,121.40(CH-Ar),96.67(CH-基),85.90(寬信號,C-1′),80.27(C-4′),71.30(明顯t,2JC–F＝23.7Hz,C-3′),68.02(OCH2Ph),65.50(C-5’),51.83(CHCH3),20.22(d,3JC–P＝7.5Hz,CHCH3)。反相HPLC，用H2O/MeOH從100/0至0/100在35分鐘內洗脫，顯示非對映異構體的一個峰，tR＝21.87min在本說明書的整個說明書和權利要求書中，詞語“包括”和“含有”及其變體意味著“包括但不限于”，并且它們不旨在(并且不)排除其他部分、添加劑、組分、整數或步驟。在本說明書的整個說明書和權利要求書中，單數包括復數，除非上下文另有要求。特別地，在使用不定冠詞時，除非上下文另有要求，否則說明書應被理解為考慮復數以及單數。結合本發(fā)明的特定方面、實施方案或實施例描述的特征、整數、特性、化合物、化學部分或基團應理解為可應用于本文所述的任何其它方面、實施方案或實施例，除非與其不相容。在本說明書(包括任何所附權利要求，摘要和附圖)中公開的所有特征，和/或如此公開的任何方法或過程的所有步驟可以以任何組合進行組合，除了其中至少一些這樣的特征和/或步驟是相互排斥的組合。本發(fā)明不限于任何前述實施方案的細節(jié)。本發(fā)明延伸到本說明書(包括任何所附權利要求，摘要和附圖)中公開的特征的任何新穎的一個或任何新穎的組合，或如此公開的任何方法或過程的步驟的任何新穎的一個或任何新穎的組合。讀者的注意力指向與本申請所關聯的本說明書同時或先于本說明書提交的，并且用本說明書對公眾公開的所有論文和文獻，并且所有這些論文和文獻的內容通過引用并入本文。在本說明書中使用以下縮寫：API-活性藥物成分，即吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯DMA-二甲基乙酰胺DMF-N,N-二甲基甲酰胺DMSO-二甲基亞砜IPA-異丙醇NMP-N-甲基吡咯烷酮PEG-聚乙二醇實施例1-開發(fā)第一代制劑通過WO2005/012327中描述的方法獲得作為磷酸酯非對映異構體的混合物的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯(NUC-1031；2)。實施例1的實驗都使用作為磷酸酯非對映異構體的混合物的NUC-1031進行。在一系列藥學上可接受的溶劑系統(tǒng)中測定NUC-1031的溶解度。采用的方案如下：制備小體積，1-2mL的每種溶劑體系，并加入一定量的所述化合物。將溶液攪拌約4小時，然后0.45μL膜過濾。然后通過HPLC測定確定濾液中所述化合物的濃度?；谟糜谥委熞认侔┑募魉麨I劑量方案，NUC-1031的分子量調整劑量為約3200mg，每周一次輸注。作為所需溶解度水平的指示，采用500mL輸注體積的名義目標，NUC-1031的所需溶解度在輸注液中將>6mg/ml。然而，這種溶解度水平僅僅是一種指示，并且較低的溶解度仍然可以提供有效的療法。表1顯示了吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯2在適于靜脈內施用的一系列溶劑內的溶解度。DMSO，DMA和NMP，所有這些都是極性非質子溶劑，提供穩(wěn)定的溶液。用水或鹽水稀釋1:1后，NMP和DMA沒有顯示任何沉淀的跡象。附錄1顯示NUC-1031在一系列稀釋溶劑中的溶解度。DMA提供了足夠的溶解性以施用所需的劑量。表2顯示了在稀釋時NUC-1031在一系列溶劑中的溶解度*含有0.13％Tween80的0.9％鹽水稀釋對DMA溶解度的影響表2給出了水稀釋對DMA溶解度的影響表2進一步在更長時間內評價這些DMA溶液的物理穩(wěn)定性，結果在表2a中給出表2a在0.9％鹽水中的溶液含量測定(mg/ml)沉淀(2周)80:20DMA304是80:20DMA272No80:20DMA315是80:20DMA270是85:15DMA338否在上述實驗之后，在臨床測試中使用在5ml小瓶中的250mgNUC-1031在80:20DMA：0.9％鹽水溶液中的制劑。該制劑在臨床研究中提供了成功的治療，但由于注射時疼痛，需要通過中心管線施用。然后尋求允許通過外周靜脈施用的制劑。實施例2實施例2至6的實驗都使用NUC-1031的(S)-差向異構體進行?；旌鲜褂萌绫?所述的DMA和共賦形劑將NUC-1031混合成九種不同的制劑。表3：NUC-1031制劑使用以下方法混合API：1.將DMA加入到在玻璃閃爍小瓶中的NUC-1031中。觀察到API的即時溶解。2.隨后加入共賦形劑并使用渦旋混合器(Whirlmixer，Fisherbrand)短暫混合(小于1分鐘)。發(fā)現這提供了比將NUC-1031溶解在DMA和共賦形劑的混合物中更有效的混合API的方法。在混合物中溶解NUC-1031仍然提供混合的API，但是該方法效率較低。所有制劑是澄清的溶液，其保持穩(wěn)定(通過眼睛)幾天(>7天)。觀察到API有助于制劑體積。本研究中的典型制劑的體積為10.6-10.7mL(API濃度93-94mg/mL)。實施例3-輸注溶液研究研究了NUC-1031制劑在輸注溶液中的溶解度。在臨床中，其旨在將2g的API溶解在500mL的輸注溶液(4mg/mL)中。將上述制劑稀釋以產生具有稍高的API濃度(4.6-4.7mg/mL)的輸注溶液，以表示最壞的情況。結果示于表4中。表4：NUC-1031制劑在輸注溶液中的溶解度(p＝沉淀；c＝澄清溶液)選擇制劑B和F用于輸注袋研究。實施例4-輸注袋研究將制劑B和F(各5mL)注射到100mLWFIBaxter袋中。袋由無PVC塑料制成。這消除了浸出有毒鄰苯二甲酸酯化合物的風險。表5：WFI輸注袋中制劑B和F的溶解度(p＝沉淀；c＝澄清溶液)上述結果顯示可以產生包含DMA的制劑，其在用水性載體稀釋時能夠保持穩(wěn)定足夠長時間以施用于患者?？梢韵♂屩苿┲钡紻MA是相對較少的組分(1-2％)，其中溶劑的大部分剩余物是水，而沒有吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯從溶液中沉淀出來。實施例5-進一步的制劑穩(wěn)定性研究制備和研究吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的(S)-同分異構體的一系列其他制劑(表6)。表6.其它(S)-同分異構體制劑*API的效力99.1％時作為因素考慮的實際API重量對于每種制劑，API最初溶解在DMA中，然后用ELP或80在容量瓶中補足體積。通過施加實現熔融所需的最小量的熱量熔化ELP(50℃烘箱，10分鐘)。過濾和填充將制劑通過注射器過濾器手動過濾到2mL透明玻璃小瓶中。所述制劑在過濾期間提供背壓，使得物理上難以使溶液通過給定的過濾器并且導致樣品損失。制劑中的ELP的濃度越大，在過濾期間經歷的背壓越大。在用13mmWest塞密封之前用氮氣沖洗填充的小瓶的頂部空間，并用鋁外殼卷邊。所有小瓶在2-8℃下儲存3天，之后進行T＝0測試并進入穩(wěn)定狀態(tài)。在任何小瓶中沒有觀察到沉淀形成或膠凝。穩(wěn)定性對于每種制劑，在25℃下評價四個小瓶的穩(wěn)定性，在2-8℃下評價四個小瓶的穩(wěn)定性。外觀-批次1-3和5-7在所有儲存條件下在T＝0和1個月符合描述“澄清無色溶液，不含可見顆?！?。批次4和8在所有儲存條件下在T＝0和1個月符合描述“澄清的黃色溶液，不含可見顆?！薄：繙y定和相關物質-使用NUC-1031的含量測定和相關物質方法ADP173vs.04分析樣品。對于100mg/mL樣品，使用容積式移液器將200μl轉移至20mL容量瓶中，并用稀釋劑稀釋至體積。對于75mg/mL樣品，使用容積式移液器將250μl轉移到20mL容量瓶中，并用稀釋劑稀釋至體積。表7含量測定2-8℃表8含量測定25℃/60％相對濕度然后將制劑稀釋在0.45％鹽水中，如表9所示評價穩(wěn)定性。表9制劑在0.45％鹽水中的穩(wěn)定性結果表明，在0.45％鹽水中稀釋至3mg/mL的75mg/mL制劑(J-M)物理穩(wěn)定24小時。在0.45％鹽水中稀釋至5mg/mL的100mg/mL制劑(N-Q)物理穩(wěn)定長達6小時。通過不同的操作者在不同的日子評價制劑L和O，并且獲得相同的結果。輸注溶液評價在制劑如表10所示儲存1個月后，通過用0.45％鹽水稀釋來評價制劑的長期穩(wěn)定性。表10.在0.45％鹽水中的制劑T＝1個月結果表明，已經儲存1個月，然后在0.45％鹽水中稀釋至3mg/mL的75mg/mL制劑(J-M)和100mg/mL制劑(N-Q)在24小時后是物理穩(wěn)定的。以表11所示的多種濃度在過濾的0.45％鹽水中評價已經在25℃儲存(2個月)和含有KolliphorELPTM的制劑。表11在0.45％鹽水中的NUC-1031制劑，T＝2個月，25℃結果表明，在0.45％鹽水中稀釋的制劑直至4.5mg/mL的濃度是物理穩(wěn)定的。實施例7-增溶劑的組合制備其中存在增溶劑的組合的樣品。首先，通過將S-差向異構體溶解在DMA中，制備S-差向異構體在DMA中的250mg/mL溶液。然后根據表12通過加入所需的增溶劑組合將其稀釋至100mg/mL溶液。將制劑各自在0.45％鹽水(pH5.9)中稀釋，得到4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL和10mg/mL的溶液。攪拌后和在環(huán)境溫度下儲存3小時，6小時和24小時后檢查溶液的外觀。所有溶液，包括10mg/mL的溶液，在24小時后保持澄清無色溶液。然而，制劑3的10mg/mL溶液在26小時后顯示出一些渾濁和顆粒形成。其它10mg/mL溶液的HPLC分析顯示活性物質在溶液中的濃度和活性物質的純度保持在預期水平。因此，使用多于一種增溶劑的組合可以允許在更高濃度下形成NUC-1031的穩(wěn)定溶液。實施例8用于配制NUC-1031的優(yōu)選制劑系統(tǒng)如下：在DMA和0.9％鹽水的80:20(體積)混合物中形成NUC-1031(S-差向異構體，R差向異構體或其混合物)的250mg/mL溶液。該系統(tǒng)對于NUC-1031的長期儲存和運輸是足夠穩(wěn)定的。該制劑可以經由中心管線(例如Hickman管線，PICC管線，Portacath)對患者靜脈內施用。在施用包含NUC-1031的制劑之前和之后，通常用80:20(按體積)的DMA和0.9％鹽水的混合物沖洗靜脈內施用裝置。這有助于減輕在與鹽水沖洗接觸時靜脈內施用裝置中NUC-1031的任何潛在沉淀的風險?；蛘?，當靜脈內施用到外周靜脈中是優(yōu)選的施用方法時，將該第一制劑用DMA：80：ELP的40％:40％:20％混合物稀釋至100mg/mL(例如將6.9mL的在80:20DMA：0.9％鹽水中的250mg/mLNUC-1031加入到10.35mL的DMA:80:ELP稀釋劑中)。對于S-差向異構體和R和S差向異構體的混合物，所得(第二)制劑已顯示穩(wěn)定長達5天。然后通過用鹽水將該第二制劑稀釋至所需濃度來制備最終施用制劑。在pH范圍(4.5,6.0和7.0)下在0.45％和0.9％鹽水中稀釋該制劑后48小時，4、8和10mg/mL的R和S差向異構體的混合物的溶液已經顯示出穩(wěn)定(對于NUC-1031的沉淀和對于NUC-1031的降解兩者)，條件是不攪拌混合物。所有這些溶液的摩爾滲透壓濃度也已顯示對于外周施用是可接受的。當前第1頁1 2 3