本發(fā)明涉及新型蛋白質(zhì)制劑。具體地，本發(fā)明涉及阿達(dá)木單抗的液體藥物組合物、制造該組合物的方法、包含該組合物的試劑盒、包含該組合物的包裝、制造該包裝的方法、和使用該組合物和/或包裝的治療方法。背景腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病和其他自身免疫疾病的治療已通過(guò)使用FDA批準(zhǔn)的藥物例如阿達(dá)木單抗(雅培公司(AbbottCorporation))來(lái)實(shí)現(xiàn)。阿達(dá)木單抗是人單克隆抗體，其抑制人TNF-α活性從而阻止其活化TNF受體，繼而下調(diào)與自身免疫疾病相關(guān)的炎癥響應(yīng)。阿達(dá)木單抗的批準(zhǔn)醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎。阿達(dá)木單抗通常通過(guò)皮下注射遞送至患者，并且因此以液體形式提供，通常為包裝例如藥瓶、預(yù)裝注射器或預(yù)裝“筆式裝置”。市售可得的筆式裝置(Pen)通常包含1mL預(yù)填充的玻璃注射器，其預(yù)裝有0.8mL40mg阿達(dá)木單抗的無(wú)菌制劑(見(jiàn)下)，具有固定針頭(灰色天然橡膠或無(wú)膠乳形式)和針套。阿達(dá)木單抗的市售制劑含有下述成分：阿達(dá)木單抗及其制備方法參見(jiàn)WO97/29131(BASF)的D2E7以及本領(lǐng)域他處。雖然前述阿達(dá)木單抗市售制劑是穩(wěn)定的(至少在某種程度上)，但相關(guān)抗體可能并非長(zhǎng)期或在應(yīng)力條件下穩(wěn)定，因此妨礙了該制劑的長(zhǎng)期儲(chǔ)存。制劑的此類(lèi)降解可由于各種原因，包括：·物理效應(yīng)，例如：o對(duì)相關(guān)蛋白分子的聚集的抑制不足(本應(yīng)由吐溫80行使的功能)；o對(duì)沉淀的抑制不足；o對(duì)相關(guān)蛋白分子在水氣界面或任何包裝材料的接觸表面的吸收的抑制不足(本應(yīng)由吐溫80行使的功能)；o滲透壓調(diào)節(jié)不足(本應(yīng)由甘露醇行使的功能)；·化學(xué)效應(yīng)，例如：o氧化調(diào)節(jié)不足(本應(yīng)由甘露醇行使的功能，可能受到吐溫80的損害，其可促進(jìn)雙鍵氧化)；o對(duì)光氧化的抑制不足；o對(duì)酯鍵水解的抑制不足，該水解會(huì)產(chǎn)生酸、醛和過(guò)氧化產(chǎn)物，從而影響抗體穩(wěn)定性；o穩(wěn)定和維持pH不足；o對(duì)蛋白質(zhì)片段化的抑制不足；o對(duì)蛋白質(zhì)解折疊的抑制不足；任何、一些或所有上述因素均可導(dǎo)致無(wú)活性的藥物產(chǎn)品(這對(duì)醫(yī)學(xué)治療來(lái)說(shuō)可能不安全)或活性可變并且無(wú)法預(yù)測(cè)的藥物產(chǎn)品，尤其是考慮到不同批次的藥物產(chǎn)品在制造、運(yùn)輸和儲(chǔ)存中可能接觸到的多變的應(yīng)力(攪動(dòng)、熱、光)。在阿達(dá)木單抗的物理和化學(xué)穩(wěn)定性方面，前述市售制劑的組分的復(fù)合物陣列似乎表現(xiàn)低于預(yù)期，尤其是考慮到大量組分。雖然賦形劑的這種具體組合毫無(wú)疑問(wèn)代表了“良好平衡”(考慮各種技術(shù)因素之間的相互作用)并且是廣泛研究和開(kāi)發(fā)的結(jié)果，考慮到表現(xiàn)不佳的風(fēng)險(xiǎn)，使用如此大量的不同賦形劑是否合理是值得商榷的，特別是考慮到這必然增加了加工和成本負(fù)擔(dān)、毒性風(fēng)險(xiǎn)和組分之間可能影響制劑的有害相互作用的風(fēng)險(xiǎn)。即使市售制劑的總體表現(xiàn)不能被超過(guò)，但至少基于前述原因，具有相當(dāng)表現(xiàn)但含有的組分更少的替代制劑是市售制劑的非常理想的替代。為了確保基于蛋白質(zhì)的藥物產(chǎn)品的可重復(fù)臨床表現(xiàn)，此類(lèi)產(chǎn)品必須為長(zhǎng)期穩(wěn)定且一致的形式。已知在制造過(guò)程中的每個(gè)階段均可發(fā)生分子變化，包括最終制劑的生產(chǎn)期間和儲(chǔ)存期間。分子變化會(huì)改變生物藥物產(chǎn)品的質(zhì)量屬性，導(dǎo)致產(chǎn)品的特征、強(qiáng)度或純度發(fā)生不想要的變化。一些此類(lèi)問(wèn)題如上所述。制劑開(kāi)發(fā)的首要目的是提供能在生產(chǎn)、儲(chǔ)存、運(yùn)輸和使用的所有階段支持生物藥物蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的藥物組合物。創(chuàng)新的生物藥物蛋白質(zhì)或生物上相似的單克隆抗體(mAb)的制劑開(kāi)發(fā)對(duì)其安全性、臨床功效和市場(chǎng)成功來(lái)說(shuō)非常關(guān)鍵。因此需要提供替代或改良的阿達(dá)木單抗液體制劑。理想地，任何新型制劑可解決至少一個(gè)前述問(wèn)題和/或至少一個(gè)本領(lǐng)域固有的問(wèn)題，并且可合適地解決一個(gè)或多個(gè)所述問(wèn)題。理想地，可解決本領(lǐng)域的問(wèn)題同時(shí)降低制劑復(fù)雜性。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明第一方面提供一種液體藥物組合物，其包含阿達(dá)木單抗(適當(dāng)?shù)匕ㄆ淙我馍锓轮扑?；檸檬酸鹽緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；和糖穩(wěn)定劑；其中所述組合物任選包含(或不包含)本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任意一種或多種其他組分(例如，包含表面活性劑，不包含精氨酸，等等)，任選以本文規(guī)定的任意含量、濃度或形式；并且其中所述組合物任選表現(xiàn)本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種參數(shù)或特性(例如pH、滲透壓、聚集性、片段化、蛋白質(zhì)解折疊、濁度、整體穩(wěn)定性、保質(zhì)期等)。本發(fā)明第二方面提供一種液體藥物組合物，其包含阿達(dá)木單抗；檸檬酸鹽緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；和糖穩(wěn)定劑；其中當(dāng)受到光應(yīng)力時(shí)(適當(dāng)?shù)?65W/m2下7小時(shí)，適當(dāng)?shù)匕凑諝W洲藥品管理局的當(dāng)前ICHQ1B指南，適當(dāng)?shù)貫槲募﨏PMP/ICH/279/95)，組合物中的阿達(dá)木單抗的異構(gòu)體譜，如參照在等電聚焦(適當(dāng)?shù)厝绫疚乃龅拿?xì)管等電聚焦，或本領(lǐng)域公知的任選其他標(biāo)準(zhǔn)等電聚焦方案)產(chǎn)生的電泳圖譜中涉及阿達(dá)木單抗的“主峰”的積分面積測(cè)量，變化不超過(guò)20％。本發(fā)明第三方面提供一種液體藥物組合物，其包含阿達(dá)木單抗；檸檬酸鹽緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；和糖穩(wěn)定劑；其中所述組合物(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉)，或以至多0.1mM的濃度包含磷酸鹽緩沖系統(tǒng)(包括一個(gè)或多個(gè)磷酸鹽緩沖劑和/或?qū)?yīng)的酸/堿共軛物)。本發(fā)明第四方面提供一種液體藥物組合物，其包含阿達(dá)木單抗；檸檬酸鹽緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；和糖穩(wěn)定劑；其中所述組合物的pH大于或等于pH5.4。本發(fā)明第五方面提供含本文所述液體組合物的包裝(例如預(yù)填充注射器、筆、靜脈袋、或含任何前述的包裝/容器)。本發(fā)明第六方面提供含本文所述液體組合物的藥物遞送裝置(例如預(yù)填充注射器或筆、或靜脈袋)。本發(fā)明第七方面提供一種多部分試劑盒，其包括藥物遞送裝置、本文所述液體藥物組合物(任選包含在包裝或容器中)以及任選的說(shuō)明組，其具有關(guān)于液體組合物給藥(例如皮下)的指導(dǎo)。本發(fā)明第八方面提供制備液體藥物組合物的方法，所述方法包括混合阿達(dá)木單抗；檸檬酸鹽緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；糖穩(wěn)定劑；和任選的本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種其他組分，任選以本文規(guī)定的任何含量、濃度或形式；以及任選調(diào)節(jié)本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種參數(shù)(例如pH、滲透壓)。本發(fā)明第九方面提供可獲自、獲自或直接獲自本文所述制造液體藥物組合物的方法的液體藥物組合物。本發(fā)明第十方面提供制造包裝或藥物遞送裝置的方法，其中所述方法包括將本文所述液體藥物組合物納入所述包裝或藥物遞送裝置。本發(fā)明第十一方面提供可獲自、獲自或直接獲自本文所述制造包裝或藥物遞送裝置的方法的包裝或藥物遞送裝置。本發(fā)明第十二方面提供治療有此類(lèi)治療需要的患者中的疾病或醫(yī)學(xué)紊亂的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的本文所述液體藥物組合物。本發(fā)明第十三方面提供本文所述液體藥物組合物，其用于治療。本發(fā)明第十四方面提供本文所述液體藥物組合物在制造用于治療疾病或紊亂的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明第十五方面提供治療有此類(lèi)治療需要的患者中的腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的本文所述液體藥物組合物。本發(fā)明第十六方面提供本文所述液體藥物組合物，其用于治療腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病。本發(fā)明第十七方面提供本文所述液體藥物組合物在制造用于治療腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明第十八方面提供治療有此類(lèi)治療需要的患者中的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和/或幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的本文所述液體藥物組合物。本發(fā)明第十九方面提供本文所述液體藥物組合物，其用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和/或幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎。本發(fā)明第二十方面提供本文所述液體藥物組合物在制造用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和/或幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。在其他方面，本發(fā)明提供液體藥物組合物、包裝、藥物遞送裝置、多部分試劑盒、制造液體藥物組合物的方法、制造包裝或藥物遞送裝置的方法、治療方法、用于使用的液體藥物組合物、液體藥物組合物在制造藥物中的用途，尤其如本文所述(包括前述二十方面中的任一)，但并非具體限定“阿達(dá)木單抗”(和其生物仿制藥)，本發(fā)明可替代應(yīng)用(因此限定為相關(guān))任何TNF-α-抑制抗體(抗TNF-α抗體)(或其任何生物仿制藥)，盡管合適地為抑制人TNF-α活性的抗體，并且最合適地抑制人TNF-α活性的人單克隆抗體。合適地，抗TNF-α抗體是治療有效藥物(至少在以合適量給予需要其的患者時(shí))(或其生物仿制藥-參見(jiàn)下述對(duì)與阿達(dá)木單抗有關(guān)的生物仿制藥的定義，其與所有抗TNF-α抗體等同使用)，合適地其已得到FDA批準(zhǔn)。因此，本文有關(guān)“阿達(dá)木單抗”的任何引用可(除非與之不一致)解釋為涉及任何抗TNF-α抗體用于本發(fā)明這些其他方面的目的(無(wú)論這涉及絕對(duì)或相對(duì)含量、濃度、參數(shù)或特性，或無(wú)論其涉及某些定義，例如哪些構(gòu)成生物仿制藥)。本發(fā)明的其他方面之一提供含抗TNF-α抗體(合適地包括其任何生物仿制藥)；檸檬酸鹽緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；和糖穩(wěn)定劑的液體藥物組合物；其中所述組合物任選包含(或不包含)本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種其他組分(例如包含表面活性劑，不包含精氨酸，等等)，任選以本文規(guī)定的任何含量、濃度或形式；并且其中所述組合物任選表現(xiàn)本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種參數(shù)或特性(例如pH、滲透壓、聚集性、片段化、蛋白質(zhì)解折疊、濁度等)。在具體實(shí)施方式中，抗TNF-α抗體選自阿達(dá)木單抗、英利昔單抗、賽妥珠單抗、戈利木單抗。與本發(fā)明任何具體方面相關(guān)描述的任何特征，包括任選、合適、和優(yōu)選特征也可為本發(fā)明任何其他方面相關(guān)描述的特征，包括任選、合適、和優(yōu)選特征。附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明為了更好地理解本發(fā)明，并且顯示其實(shí)施方式如何有效，現(xiàn)以示例方式參考下述附圖，其中：圖1顯示OD所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的蛋白質(zhì)含量(mg/mL)的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和4周后(紅色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖2顯示SE-HPLC所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的聚集％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(綠色柱)和4周(橙色柱)后，制劑經(jīng)40℃加熱。圖3顯示SE-HPLC所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的片段％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(深色柱，時(shí)間＝0)以及2周(粉色柱)和4周(淺綠柱)后，制劑經(jīng)40℃加熱。圖4顯示DSF所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的解折疊溫度(℃)的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)。圖5顯示SE-HPLC所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的聚集％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(紅色柱，時(shí)間＝0)以及2周(綠色柱)和4周后(紫色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖6顯示Bioanalyzer所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的片段％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖7顯示iCE280分析所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的主峰異構(gòu)體譜的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖8顯示iCE280分析所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的酸性簇異構(gòu)體譜的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖9顯示比濁法所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的濁度的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖10顯示SE-HPLC所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的聚集％的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及24小時(shí)(紅色柱)和48小時(shí)后(綠色柱)，制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)。圖11顯示Bioanalyzer所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的片段化％的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及24小時(shí)(紅色柱)和48小時(shí)后(綠色柱)，制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)。圖12顯示比濁法所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的濁度的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及24小時(shí)(紅色柱)和48小時(shí)后(綠色柱)，制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)。圖13顯示SE-HPLC所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的聚集％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。圖14顯示Bioanalyzer所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的片段％的柱狀圖，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。圖15顯示iCE280分析儀所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的主峰異構(gòu)體譜的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。圖16顯示iCE280分析儀所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的酸性簇異構(gòu)體譜的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。圖17顯示比濁法所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的濁度的柱狀圖，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。發(fā)明詳述定義除非另有說(shuō)明，說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求所用下述術(shù)語(yǔ)具有下述含義。本文所述“阿達(dá)木單抗”包括原始藥物(如市售)，WO97/29131(BASF)所述阿達(dá)木單抗(特別是其中D2E7)和本領(lǐng)域他處定義的阿達(dá)木單抗，及其生物仿制藥。WO97/29131的D2E7“具有含氨基酸序列SEQIDNO:3的輕鏈CDR3結(jié)構(gòu)域和含氨基酸序列SEQIDNO:4的重鏈CDR3結(jié)構(gòu)域”。優(yōu)選地，D2E7抗體具有含氨基酸序列SEQIDNO:1的輕鏈可變區(qū)(LCVR)和含氨基酸序列SEQIDNO:2的重鏈可變區(qū)(HCVR)。WO97/29131給予這些序列各自的詳細(xì)信息。本文所述“阿達(dá)木單抗”可包括生物仿制藥，其可例如與WO97/29131(具體關(guān)于D2E7)或他處有關(guān)“阿達(dá)木單抗”中公開(kāi)的任一蛋白質(zhì)序列具有至少75％、合適地至少80％、合適地至少85％、合適地至少90％、合適地至少95％、合適地至少96％、合適地至少97％、合適地至少98％或最合適地至少99％的蛋白質(zhì)序列相同性?；蛘呋虼送?，本文所述“阿達(dá)木單抗”可包括生物仿制藥，其表現(xiàn)出與WO97/29131(具體關(guān)于D2E7)或他處有關(guān)“阿達(dá)木單抗”中公開(kāi)的任一蛋白質(zhì)序列具有至少75％、合適地至少80％、合適地至少85％、合適地至少90％、合適地至少95％、合適地至少96％、合適地至少97％、合適地至少98％或最合適地至少99％的蛋白質(zhì)序列同源性?；蛘呋虼送猓锓轮扑幙删哂?稍稍)不同的糖基化概況，即使蛋白質(zhì)序列基本相同或具有上述程度的不同。術(shù)語(yǔ)“生物仿制藥”(還稱(chēng)為后續(xù)生物品)本領(lǐng)域熟知，并且當(dāng)藥物應(yīng)被認(rèn)為是阿達(dá)木單抗的生物仿制藥時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解。此外，“生物仿制藥”在所述“生物仿制藥”市售之前需要官方批準(zhǔn)作為市場(chǎng)化的“生物仿制藥”。術(shù)語(yǔ)“生物仿制藥”通常用于描述先前已正式授予銷(xiāo)售授權(quán)的“創(chuàng)新生物制藥產(chǎn)品”(“生物制劑”，其藥物物質(zhì)是由活生物體制成或源自活生物體或通過(guò)重組DNA或受控基因表達(dá)的方法制成)的后續(xù)版本(通常從不同的來(lái)源)。因?yàn)樯镏苿┚哂懈叨鹊姆肿訌?fù)雜性，并且對(duì)在制造過(guò)程中的變化(例如，如果在生產(chǎn)中使用不同的細(xì)胞系)通常敏感，并且因?yàn)楹罄m(xù)制造商一般沒(méi)有獲得原始的分子克隆、細(xì)胞庫(kù)、不知曉發(fā)酵和純化過(guò)程中的訣竅，也沒(méi)有獲得活性藥物物質(zhì)本身(僅創(chuàng)新者的商業(yè)化藥物產(chǎn)品)，任何“生物仿制藥”不太可能與創(chuàng)新藥物產(chǎn)品完全一樣。對(duì)于各種摩爾計(jì)算的目的(如對(duì)阿達(dá)木單抗和本發(fā)明的液體藥物組合物的其他組分之間的摩爾比)，阿達(dá)木單抗的分子量可基于CAS數(shù)據(jù)庫(kù)中CAS#331731-18-1，阿達(dá)木單抗，所公開(kāi)的細(xì)節(jié)而取為144190.3克/摩爾(參考分子量)，其中分子式取為C6428H9912N1694O1987S46。因此，含有50mg/mL阿達(dá)木單抗的液體藥物組合物可以認(rèn)為是0.347mM(或347μΜ)的阿達(dá)木單抗溶液。這并非意在以任何方式限制由本發(fā)明的范圍所涵蓋的阿達(dá)木單抗的任何生物仿制藥的性質(zhì)或是糖基化水平，其中任一均可影響實(shí)際分子量。然而，在生物仿制藥確實(shí)有不同的分子量時(shí)，上述參考分子量應(yīng)當(dāng)適當(dāng)用于評(píng)估這樣的生物仿制藥是否落在本說(shuō)明書(shū)內(nèi)所規(guī)定的任何摩爾定義的范圍內(nèi)。所以，只是為了本發(fā)明的目的，應(yīng)使用上述基準(zhǔn)的分子量計(jì)算所述的已知重量生物仿制藥的摩爾數(shù)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“緩沖劑”或“緩沖溶液”是指包含酸(通常是弱酸，例如乙酸，檸檬酸，組氨酸的咪唑鎓形式)及其共軛堿(如乙酸或檸檬酸鹽，例如，乙酸鈉，檸檬酸鈉，或組氨酸)的混合物，或者是指堿(通常是弱堿，例如組氨酸)和其共軛酸的(如質(zhì)子化組氨酸鹽)的混合物的通常水溶液。在加入少量強(qiáng)酸或堿之后，“緩沖液”的pH值會(huì)由于由“緩沖劑”賦予了“緩沖作用”而只是稍微變化。這里，“緩沖系統(tǒng)”包括一個(gè)或多個(gè)緩沖劑和/或酸/堿共軛物，更合適地包括它們的一個(gè)或多個(gè)緩沖劑和酸/堿共軛物，并且最合適地僅包括一種緩沖劑及其酸/堿共軛物。除非另有說(shuō)明，本文規(guī)定的有關(guān)“緩沖系統(tǒng)”的任何濃度(即緩沖液濃度)適當(dāng)?shù)刂傅氖蔷彌_劑和/或其酸/堿共軛物的組合濃度。換言之，此處規(guī)定的有關(guān)“緩沖系統(tǒng)”的濃度適當(dāng)?shù)刂傅氖撬械南嚓P(guān)緩沖物質(zhì)的組合濃度(即所述物質(zhì)與另一物質(zhì)處于動(dòng)態(tài)平衡，例如檸檬酸鹽/檸檬酸)。因此，檸檬酸鹽緩沖液系統(tǒng)的給定濃度通常涉及檸檬酸鹽(或多種檸檬酸鹽，例如檸檬酸鈉)和檸檬酸的組合濃度。包括相關(guān)緩沖系統(tǒng)的組合物的總體pH通常反映每個(gè)相關(guān)緩沖物質(zhì)的平衡濃度(即，緩沖劑與其酸/堿共軛物平衡)。本文中，術(shù)語(yǔ)“緩沖劑”是指緩沖或緩沖溶液的酸或堿成分(通常是弱酸或弱堿)。緩沖劑幫助保持給定溶液的pH值處于或接近預(yù)定值，并且緩沖劑通常選擇為補(bǔ)充該預(yù)定值。緩沖劑合適地是單一化合物，它產(chǎn)生需要的緩沖作用，尤其是當(dāng)所述緩沖劑與適當(dāng)量(取決于所需的預(yù)定pH值)的其相應(yīng)的“酸/堿共軛物”混合(和適當(dāng)?shù)啬軌蚺c其質(zhì)子交換)，或者如果所需量的相應(yīng)“酸/堿共軛物”原位形成-這可通過(guò)，加入強(qiáng)酸或堿直到達(dá)到所需的pH值來(lái)實(shí)現(xiàn)。示例如下：·檸檬酸“緩沖劑”適當(dāng)?shù)厥桥c酸/堿共軛物檸檬酸適當(dāng)混合的檸檬酸鹽，例如檸檬酸鈉。這樣的緩沖系統(tǒng)可通過(guò)簡(jiǎn)單地混合給定量的檸檬酸鈉和給定量的檸檬酸來(lái)形成。但或者，這樣的緩沖液可通過(guò)添加給定量的堿，合適地為強(qiáng)堿(如氫氧化鈉)至檸檬酸直到達(dá)到所需pH值(以及因此所需的檸檬酸鈉/檸檬酸平衡)。在此，除非有相反說(shuō)明，有關(guān)檸檬酸鹽緩沖液或檸檬酸鹽緩沖劑的任何濃度適當(dāng)?shù)刂傅氖蔷彌_劑(例如檸檬酸鈉)和/或其酸/堿共軛物(例如檸檬酸)的組合濃度。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易地計(jì)算這樣的濃度。這種濃度可以通過(guò)參照緩沖劑和酸/堿共軛物的組合濃度來(lái)計(jì)算，其中緩沖系統(tǒng)通過(guò)簡(jiǎn)單地混合緩沖劑和酸/堿共軛物而形成。或者，在緩沖系統(tǒng)通過(guò)混合緩沖劑或酸/堿共軛物與pH調(diào)節(jié)劑(例如，強(qiáng)酸或強(qiáng)堿)以產(chǎn)生各自的混合物來(lái)形成時(shí)，適當(dāng)?shù)卦摑舛瓤梢酝ㄟ^(guò)分別參考緩沖劑或酸/堿共軛物的起始量/濃度來(lái)計(jì)算。例如，當(dāng)使用已知量/濃度的檸檬酸并將其與pH調(diào)節(jié)劑(例如氫氧化鈉)混合直到達(dá)到所需pH來(lái)形成緩沖系統(tǒng)時(shí)，所述緩沖系統(tǒng)的濃度可以通過(guò)參考初始量的檸檬酸來(lái)計(jì)算。本文中，“酸/堿共軛物”指的是特定“緩沖劑”的共軛酸或共軛堿(無(wú)論哪個(gè)與特定的pH相關(guān)-本發(fā)明中通常是共軛酸)。檸檬酸鹽緩沖劑(例如檸檬酸鈉)的酸/堿共軛物適當(dāng)?shù)厥菣幟仕?。本文中，術(shù)語(yǔ)“緩沖物質(zhì)”是指給定緩沖系統(tǒng)的特定物種(不包括任何相關(guān)的抗衡陰離子(counteranion)或抗衡陽(yáng)離子(countercation)-即忽略檸檬酸鈉/檸檬酸系統(tǒng)的鈉離子)，它們互相動(dòng)態(tài)平衡(并發(fā)生質(zhì)子交換)。例如，檸檬酸根陰離子和檸檬酸一起構(gòu)成“檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)”的“檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)”。因?yàn)殡y以參考重量界定緩沖系統(tǒng)的(無(wú)論絕對(duì)或相對(duì))數(shù)量(由于總重量將取決于所需pH值，這將影響存在的抗衡離子(counterion)的量)，在此基于重量的數(shù)量可替代地通過(guò)參考相關(guān)的“緩沖物質(zhì)”的理論重量來(lái)確定。至少兩種物質(zhì)存在于任何給定的“緩沖物質(zhì)”組中(其相對(duì)量?jī)H能通過(guò)參考pH值來(lái)確定)，每個(gè)具有不同的分子量(通常僅存在1的差異)。因此，為了可進(jìn)行重量計(jì)算和參考，出于本發(fā)明目的，對(duì)于任何給定的“緩沖物質(zhì)”組的重量定為基于僅一種所述緩沖物質(zhì)，即緩沖物質(zhì)的最酸性物(即在任何給定的pH下最質(zhì)子化的形式)的理論重量。給定的“緩沖物質(zhì)”組的重量以酸物質(zhì)當(dāng)量的重量引用。示例地，在檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)中的檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)可由檸檬酸陰離子(忽略抗衡陽(yáng)離子)和檸檬酸組成。因此，“緩沖物質(zhì)”的重量計(jì)算為好像檸檬酸是緩沖系統(tǒng)中存在的唯一物質(zhì)(即使檸檬酸鹽顯然伴隨檸檬酸)。因此，涉及“檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)”的重量或重量比的任何參考適當(dāng)?shù)刂傅氖蔷彌_系統(tǒng)內(nèi)的檸檬酸當(dāng)量的理論重量。因此，當(dāng)組合物是通過(guò)添加pH調(diào)節(jié)(例如氫氧化鈉)至固定量的檸檬酸而形成時(shí)，檸檬酸的原重量可被認(rèn)為是“緩沖物質(zhì)”的重量而不管最終pH值?；蛘?，如果緩沖系統(tǒng)的濃度(即摩爾濃度)已知，則這可以通過(guò)參照相關(guān)緩沖物質(zhì)的最酸性形式(如檸檬酸)的分子量而轉(zhuǎn)換成“緩沖物質(zhì)”的重量，并忽略檸檬酸陰離子也存在的事實(shí)。除非另外指出，在本文中引用的“氨基酸”，無(wú)論特定的(如精氨酸，組氨酸)或一般(例如任何氨基酸)，在其存在或在組合物中(特別是本發(fā)明的藥物液體組合物)時(shí)，涉及相應(yīng)的游離氨基酸(無(wú)論其質(zhì)子化狀態(tài)和/或鹽形式，雖然為了一致性，含量適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)參考游離氨基酸本身而計(jì)算)。其可以適當(dāng)?shù)匕ㄌ烊缓?或人造的氨基酸。除非相反說(shuō)明，這樣的引用不旨在涉及共價(jià)結(jié)合作為更大化合物(而不是包括多個(gè)化合物的組合物)的部分的氨基酸殘基，如肽或蛋白(其中所述氨基酸殘基通過(guò)肽鍵連接)。因此，雖然阿達(dá)木單抗(作為蛋白質(zhì))含有氨基酸殘基，其不被認(rèn)為包括任何“游離氨基酸”。示例地，定義為“不含精氨酸”的組合物不含有任何游離精氨酸，但它仍可能包括本身包含精氨酸殘基的一個(gè)或多個(gè)蛋白質(zhì)(例如阿達(dá)木單抗)。除非另有說(shuō)明，本文中的任何一個(gè)或多個(gè)“氨基酸”，無(wú)論特定或一般，合適地涉及的L-立體異構(gòu)體或其外消旋體，最適宜地為L(zhǎng)-氨基酸。在應(yīng)用于組合物的給定組分時(shí)，術(shù)語(yǔ)“基本不含”(例如，“液體藥物組合物基本不含精氨酸”)是指基本不添加所述組分的組合物。如上所述，這種參考與氨基酸殘基在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在無(wú)關(guān)。當(dāng)組合物“基本不含”給定組分，所述組合物適當(dāng)?shù)匕ú怀^(guò)0.001重量％所述組分、合適地不超過(guò)0.0001重量％的所述組分、合適地不超過(guò)0.00001重量％，合適地比不更0.000001重量％時(shí)，合適地不超過(guò)0.0000001重量％，最合適地每十億不超過(guò)0.0001份(以重量計(jì))。在應(yīng)用于組合物的給定組分時(shí)，術(shù)語(yǔ)“完全不含”(例如“液體藥物組合物完全不含精氨酸”)是指不含所述組分的組合物。如上所述，這種參考與氨基酸殘基在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在無(wú)關(guān)。在本說(shuō)明書(shū)中，“強(qiáng)酸”合適地是pKa為-1.0或更低的酸，而“弱酸”合適地是pKa為2.0或更高的酸。在本說(shuō)明書(shū)中，“強(qiáng)堿”合適地是其共軛酸的pKa為12或更高(合適地14或更高)的堿，而“弱堿”合適地是其共軛酸的pKa為10或更低的堿。本文中，“穩(wěn)定劑”是指促進(jìn)維持生物藥品的結(jié)構(gòu)完整性的組分，特別是在冷凍和/或冷凍干燥和/或存儲(chǔ)時(shí)(尤其是當(dāng)暴露于應(yīng)力時(shí))。此穩(wěn)定化效果可能由各種原因引起，雖然通常這種穩(wěn)定劑可以作為緩解蛋白質(zhì)變性的滲透物質(zhì)而起作用。典型的穩(wěn)定劑包括氨基酸(即不是肽或蛋白的部分的游離氨基酸-例如甘氨酸、精氨酸、組氨酸、天冬氨酸、賴(lài)氨酸)和糖穩(wěn)定劑，如糖醇(如甘露醇，山梨醇)，和/或二糖(例如海藻糖、多量蔗糖(sucros)、麥芽糖、乳糖)，盡管本發(fā)明的液體藥物組合物包含穩(wěn)定劑，其中至少一種是糖穩(wěn)定劑(即糖醇或二糖)。最適宜的至少一種糖穩(wěn)定劑是非還原性糖(糖醇或二糖)。本文中，“非還原性糖”通常是沒(méi)有任何醛部分或不具備形成醛部分的能力(例如通過(guò)異構(gòu))的糖。本文中，“張力調(diào)節(jié)劑”或“等張劑”是指包括在組合物內(nèi)的適宜地有助于(或增加)的組合物的總滲透壓和克分子滲透壓濃度的試劑。合適地，本文所用等張劑包括使溶液的滲透特征與生理液體相似的試劑。本文中，對(duì)特定量的組合物的給定成分(特別是緩沖劑、穩(wěn)定劑、氨基酸，表面活性劑、或等張劑)的參考適當(dāng)?shù)厣婕跋嚓P(guān)組分的純無(wú)水形式(或通過(guò)使用純無(wú)水形式的量形成的組合物)的量，即使這樣的組分在形成組合物時(shí)可以為非無(wú)水形式。任何相應(yīng)的非無(wú)水形式(例如一水合物，二水合物等)的量可容易地通過(guò)簡(jiǎn)單使用合適乘數(shù)來(lái)計(jì)算。例如，除非另有說(shuō)明(根據(jù)實(shí)施例，當(dāng)數(shù)量涉及海藻糖二水合物時(shí))，關(guān)于海藻糖的規(guī)定的量指海藻糖的無(wú)水形式(或通過(guò)使用規(guī)定量/濃度的無(wú)水海藻糖形成的組合物)，其具有342.296克/摩爾的分子量，因此，為了計(jì)算形成相同組合物所需的海藻糖二水合物的相應(yīng)量(必須加入較少的水)，必須用規(guī)定的量乘以378.33/342.296，因?yàn)?78.33是海藻糖二水合物的分子量。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易理解如何根據(jù)所使用的組分的形式審慎調(diào)整稀釋劑/水的量，以便得出目標(biāo)濃度。本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”指的是藥物活性物制劑，藥物活性物使得活性成分的生物活性治療上有效，但其不包括對(duì)旨在給予該制劑的對(duì)象具有明顯毒性的其他成分。本文所用的術(shù)語(yǔ)“穩(wěn)定”通常是指組分(通常是其活性物或組合物)在保存/儲(chǔ)存期間的物理穩(wěn)定性和/或化學(xué)穩(wěn)定性和/或生物穩(wěn)定性。應(yīng)理解，提及“處理”或“治療”包括預(yù)防以及病癥的確定癥狀的減輕。狀態(tài)、紊亂或病癥的“處理”或“治療”包括：(1)預(yù)防或者延遲的在人體中發(fā)展的狀態(tài)、紊亂或病癥的臨床癥狀的出現(xiàn)，所述人體可能患有或易患有該狀態(tài)、紊亂或病癥但尚未經(jīng)歷或顯示該狀態(tài)、紊亂或病癥的臨床或亞臨床癥狀，(2)抑制狀態(tài)、紊亂或病癥，即阻止、減少或延遲疾病的發(fā)展或(在維持治療情況下)復(fù)發(fā)或其至少一種臨床或亞臨床癥狀，或者(3)減輕或減緩疾病，即引起所述狀態(tài)、紊亂或病癥或其至少一種臨床或亞臨床癥狀發(fā)生消退。在本發(fā)明中，抗體的“治療有效量”或“有效量”是指，當(dāng)施用給哺乳動(dòng)物用于治療疾病或紊亂時(shí)，在預(yù)防和治療方面有效的量，并且該抗體在治療相關(guān)疾病中有效?！爸委熡行Я俊皩⒏鶕?jù)化合物、疾病及其嚴(yán)重性以及需要治療的哺乳動(dòng)物的年齡、體重等因素而變化。術(shù)語(yǔ)“人TNF-α”是指以17kD分泌形式存在的和以26kD膜相關(guān)形式存在生物活性形式的人細(xì)胞因子，TNF-α可以作為共價(jià)結(jié)合的17kD分子的三聚體而被觀察到。其結(jié)構(gòu)參見(jiàn)Pennica,D.等(1984)Nature312:724-729；Davis,J.M.等(1987)Biochemistry26:1322-1326；和Jones,E.Y.等(1989)Nature338:225-228。術(shù)語(yǔ)“重組人抗體”意在包括使用重組方法制備、表達(dá)、產(chǎn)生或分離的人抗體。本文中，除非另有說(shuō)明，組分和成分的規(guī)定的量旨在按重量計(jì)，無(wú)論以術(shù)語(yǔ)“份”、ppm(每百萬(wàn)中的份)、百分?jǐn)?shù)(％，例如重量％)、或比率表述。當(dāng)給定組合物的特定組分的量或濃度指定為重量百分比(％重量或％重量/重量)時(shí)，所述重量百分比是指所述組分的重量相對(duì)整個(gè)組合物的總重量的百分比。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，組合物(不論是否指定)的所有組分的重量百分比的總和將總計(jì)100重量％。然而，在并非所有組分都列出(例如，其中組合物被稱(chēng)為“包括”一個(gè)或多個(gè)特定成分)的情況中，重量百分比平衡可任選由未指定的成分(例如稀釋劑，例如水，或其它非基本但合適的添加劑)補(bǔ)足到100重量％。本文中，除非另外指出，在涉及到多種成分/組分時(shí)，術(shù)語(yǔ)“份”(例如重量份，pbw)指的是所述多種成分/組分之間的相對(duì)比例。表示兩個(gè)、三個(gè)或更多組分的摩爾或重量比產(chǎn)生同樣的效果(如x,y和z的摩爾比分別是x1:y1:z1，或x1-x2:y1-y2:z1-z2的范圍)。雖然在許多實(shí)施方式中，組合物中各組分的量可以作為“重量％”值，在替代實(shí)施方式中，任何或所有這樣的重量％值可以轉(zhuǎn)化成重量份(或相對(duì)比率)以定義多組分組合物。這是因?yàn)樵诒景l(fā)明的液體藥物組合物中，組分之間的相對(duì)比例通常比其絕對(duì)濃度更重要。在包括多個(gè)成分的組合物以單獨(dú)重量份術(shù)語(yǔ)描述時(shí)(即，僅指示成分的相對(duì)比率)，沒(méi)有必要規(guī)定所述成分的絕對(duì)量或濃度(不論總體或單獨(dú))，因?yàn)楸景l(fā)明的優(yōu)點(diǎn)可基于各成分的相對(duì)比例而不是其絕對(duì)量或濃度。然而，在某些實(shí)施方式中，這些組合物基本由或由規(guī)定的成分和稀釋劑(例如水)組成。當(dāng)組合物(任選地以濃度的規(guī)定量)包括多個(gè)規(guī)定的成分時(shí)，所述組合物可任選包括除那些規(guī)定之外的其他成分。然而，在某些實(shí)施方式中，組合物包括多個(gè)規(guī)定成分可能實(shí)際上基本由或由所有規(guī)定的成分組成。本文中，當(dāng)組合物“基本由”具體組分“組成”時(shí)，所述組合物適當(dāng)?shù)匕ㄖ辽?0重量％的所述組分，合適地至少90重量％，合適地至少95重量％，最合適的至少99重量％。合適地，“基本由”具體組分“組成”的組合物由所述組分組成，除了一種或多種痕量雜質(zhì)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“顆粒尺寸”或“孔尺寸”分別是指給定顆?；蚩椎淖铋L(zhǎng)尺寸的長(zhǎng)度。兩種尺寸都可以用激光粒度分析儀和/或電子顯微鏡(例如，隧道電子顯微鏡TEM或掃描電子顯微鏡SEM)來(lái)測(cè)定。可以使用實(shí)施例中概述的方案和設(shè)備獲得顆粒數(shù)(對(duì)于任何給定尺寸)，這涉及亞可見(jiàn)粒子的顆粒數(shù)。液體藥物組合物本發(fā)明提供適當(dāng)?shù)厝缟纤龅囊后w藥物組合物。該組合物適當(dāng)?shù)匕藛慰寺】贵w，適當(dāng)?shù)貫橐种迫薚NF-α活性的抗體，適當(dāng)?shù)匾苑乐蛊浼せ頣NF受體。最適當(dāng)?shù)兀后w藥物組合物包含阿達(dá)木單抗，其本身適當(dāng)?shù)匕ㄆ淙魏紊锓轮扑?。組合物適當(dāng)?shù)匕幟仕猁}緩沖劑(或檸檬酸鹽緩沖液系統(tǒng))。組合物適當(dāng)?shù)匕欠€(wěn)定劑。當(dāng)受到光應(yīng)力時(shí)(適當(dāng)?shù)?65W/m2下7小時(shí)，適當(dāng)?shù)匕凑諝W洲藥品管理局的當(dāng)前ICHQ1B指南，適當(dāng)?shù)貫槲募﨏PMP/ICH/279/95)，組合物中的阿達(dá)木單抗的異構(gòu)體譜，如參照在等電聚焦(適當(dāng)?shù)厝绫疚乃龅拿?xì)管等電聚焦，或本領(lǐng)域公知的任選其他標(biāo)準(zhǔn)等電聚焦方案)產(chǎn)生的電泳圖譜中涉及阿達(dá)木單抗的“主峰”的積分面積測(cè)量，變化不超過(guò)20％。所述組合物適當(dāng)?shù)?基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉)，或以至多0.1mM的濃度包含磷酸鹽緩沖系統(tǒng)(包括一個(gè)或多個(gè)磷酸鹽緩沖劑和/或?qū)?yīng)的酸/堿共軛物)。所述組合物的pH大于或等于pH5.4。組合物適當(dāng)?shù)?基本或完全)不含精氨酸或以濃度至多0.1mM含有精氨酸?；蛘呋虼送猓M合物可適當(dāng)?shù)匕ū疚乃雠c液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種其他組分(例如包括表面活性劑，不包括精氨酸等)，任選以本文規(guī)定的任何含量、濃度或形式；并且其中所述組合物任選表現(xiàn)本文所述與液體藥物組合物有關(guān)的任何一種或多種參數(shù)或特性(例如pH、滲透壓)。優(yōu)選地，本發(fā)明提供替代的和改進(jìn)的液體藥物組合物，其通常表現(xiàn)出與現(xiàn)有技術(shù)相近或比現(xiàn)有技術(shù)更好的穩(wěn)定性和活力。如本文所示(參見(jiàn)實(shí)施例)，與阿達(dá)木單抗的常規(guī)制劑(例如商購(gòu)制劑)相比，本發(fā)明的液體藥物制劑在經(jīng)受不同應(yīng)力條件(熱，機(jī)械和光)時(shí)具有相當(dāng)?shù)幕蚋倪M(jìn)的特性。其性能也通常與經(jīng)受相同應(yīng)力測(cè)試的許多其它比較制劑相當(dāng)或更好。由于這些應(yīng)力條件是此類(lèi)制劑在制造、運(yùn)輸和貯存過(guò)程中經(jīng)受的極具代表性的應(yīng)力種類(lèi)，它們提供對(duì)本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)的優(yōu)良指示。參考現(xiàn)有技術(shù)的一般教導(dǎo)，可以用具有較少賦形劑的不太復(fù)雜的配方實(shí)現(xiàn)這樣的良好穩(wěn)定性能是令人驚訝的。阿達(dá)木單抗阿達(dá)木單抗(市售可得制劑)及其制備方法參見(jiàn)WO97/29131(BASF)的D2E7以及本領(lǐng)域他處。其具有含氨基酸序列SEQIDNO:3的輕鏈CDR3結(jié)構(gòu)域和含氨基酸序列SEQIDNO:4的重鏈CDR3結(jié)構(gòu)域(WO97/29131)。此外，D2E7抗體具有含氨基酸序列SEQIDNO:1的輕鏈可變區(qū)(LCVR)和含氨基酸序列SEQIDNO:2的重鏈可變區(qū)(HCVR)。阿達(dá)木單抗的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥和功能，如上文闡明。在本發(fā)明中“阿達(dá)木單抗”包括生物仿制藥，如本文之前定義，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地理解本發(fā)明中術(shù)語(yǔ)“阿達(dá)木單抗”的范圍。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含的阿達(dá)木單抗為約5至約150mg/mL的濃度，適當(dāng)?shù)貫榧s25至約75mg/mL。例如，阿達(dá)木單抗可以約25、約30、約35、約40、約45、約50、約55、約60、約65、約70或約75mg/ml的濃度存在于所述制劑中。在一個(gè)實(shí)施方式中，阿達(dá)木單抗以約45至約55mg/mL的濃度存在。在一個(gè)實(shí)施方式中，阿達(dá)木單抗以約50mg/mL的濃度存在。緩沖液、緩沖劑和pH適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物是緩沖溶液，其pH值由適當(dāng)?shù)嘏c緩沖劑的酸/堿共軛物組合的緩沖劑(或緩沖液系統(tǒng))來(lái)穩(wěn)定。因此，該液體藥物組合物適當(dāng)?shù)匕绫疚乃x的緩沖劑。優(yōu)選地，該液體藥物組合物還包含酸/堿共軛物，其中所述酸/堿共軛對(duì)應(yīng)于所述緩沖劑的共軛酸或共軛堿，這取決于緩沖劑本身分別是堿還是酸。緩沖劑和其酸/堿共軛物可以統(tǒng)稱(chēng)“緩沖系統(tǒng)”。因此，該液體藥物組合物適當(dāng)?shù)匕ā熬彌_系統(tǒng)”(適當(dāng)?shù)睾芯彌_劑和酸/堿共軛物體)，并且相對(duì)于緩沖系統(tǒng)規(guī)定的任何濃度一般涉及緩沖劑和其任何的酸/堿共軛物體的組合濃度。任何“緩沖系統(tǒng)”適當(dāng)?shù)匕ㄈ跛岷腿鯄A(參見(jiàn)上文定義)。適當(dāng)?shù)?，所述緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑。合適的檸檬酸鹽緩沖劑是檸檬酸鹽，適當(dāng)?shù)匕瑱幟仕岣庪x子和一種或多種藥學(xué)上可接受的抗衡陽(yáng)離子。合適的檸檬酸鹽可包括金屬檸檬酸鹽(例如堿金屬檸檬酸鹽或堿土金屬檸檬酸鹽)，或者非金屬檸檬酸鹽(例如檸檬酸銨，檸檬酸三乙銨)。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，緩沖劑(和檸檬酸鹽)是檸檬酸鈉。適當(dāng)?shù)兀撘后w藥物組合物包含緩沖劑的酸/堿共軛物，最適當(dāng)?shù)赜脵幟仕嶙鳛闄幟仕猁}的共軛酸。緩沖劑和其酸/堿共軛物的組合構(gòu)成了緩沖系統(tǒng)。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物包含緩沖劑和其對(duì)應(yīng)的酸/堿共軛物，適當(dāng)?shù)厥沟盟鼍彌_劑和其酸/堿共軛物一起以足以提供組合物所需的pH的水平(即絕對(duì)量或濃度)和相對(duì)量(或濃度)存在。緩沖系統(tǒng)可通過(guò)簡(jiǎn)單地混合所述緩沖劑與酸/堿共軛物來(lái)形成或可通過(guò)酸或堿與緩沖劑或其酸/堿共軛混合來(lái)形成，從而原位形成的緩沖劑和酸/堿共軛物的所需混合物。例如，緩沖系統(tǒng)可通過(guò)簡(jiǎn)單地混合檸檬酸鹽緩沖劑(例如檸檬酸鈉)與其酸/堿共軛物(即檸檬酸)來(lái)形成，適當(dāng)?shù)匾赃m合于提供所需的pH的比率混合?；蛘?，緩沖系統(tǒng)可通過(guò)向檸檬酸鹽緩沖劑的酸/堿共軛物(即檸檬酸)中加入堿(如氫氧化鈉)來(lái)形成，加入的量適當(dāng)?shù)剡m合提供所需pH以及緩沖劑(例如檸檬酸鈉)與對(duì)應(yīng)的酸/堿共軛物(即檸檬酸)的混合物?；蛘撸梢圆捎眯纬伤鼍彌_系統(tǒng)的任一方法，并且pH值可以通過(guò)添加其他酸(適當(dāng)?shù)貫閺?qiáng)酸，如HCl)或其他堿(適當(dāng)?shù)貫閺?qiáng)堿，如氫氧化鈉)來(lái)審慎調(diào)整。最適當(dāng)?shù)?，該緩沖系統(tǒng)是檸檬酸鹽緩沖液系統(tǒng)，適當(dāng)?shù)匕幟仕猁}和檸檬酸。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物包含至多一種緩沖劑。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物的pH大于或等于5.0，更適當(dāng)?shù)卮笥诨虻扔趐H5.4。適當(dāng)?shù)兀撘后w藥物組合物的pH小于或等于6.7，更適當(dāng)?shù)匦∮?.5。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，特別是在緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑時(shí)，該液體藥物組合物具有5.2-6.2的pH，更適當(dāng)?shù)鼐哂?.4-6.0的pH。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，液體藥物組合物具有5.7-5.9的pH。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，液體藥物組合物的pH為約5.8。適當(dāng)?shù)兀撘后w藥物組合物包含濃度約2至約50mM的緩沖系統(tǒng)(適當(dāng)?shù)厥菣幟仕猁}緩沖系統(tǒng)，包括檸檬酸鹽緩沖劑)。在一個(gè)實(shí)施方式中，緩沖系統(tǒng)以5-14mM的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s10mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，緩沖系統(tǒng)以10mM的濃度存在。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含濃度為10mM的檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)。這包括其中“緩沖劑”(例如，檸檬酸鈉)通過(guò)在緩沖劑的共軛酸(例如檸檬酸)中加入強(qiáng)堿(例如氫氧化鈉)來(lái)形成。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物包含濃度約0.38mg/mL至約9.6mg/mL的緩沖物質(zhì)(適當(dāng)?shù)貫闄幟仕猁}緩沖物質(zhì))。在一個(gè)實(shí)施方式中，緩沖物質(zhì)以0.96mg/mL-2.69mg/mL的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s1.9mg/mL。這包括其中“緩沖劑”(例如，檸檬酸鈉)通過(guò)在緩沖劑的共軛酸(例如檸檬酸)中加入強(qiáng)堿(例如氫氧化鈉)來(lái)形成。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以緩沖系統(tǒng)與阿達(dá)木單抗的摩爾比為5：1至約145：1包含緩沖系統(tǒng)(適當(dāng)?shù)貫闄幟仕猁}緩沖系統(tǒng))。在一個(gè)實(shí)施方式中，該緩沖系統(tǒng)以緩沖系統(tǒng)與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約14：1至約40：1而存在，最適當(dāng)?shù)貫榧s29：1。在一個(gè)實(shí)施方式中，緩沖系統(tǒng)以29:1的濃度存在。這包括其中“緩沖劑”(例如，檸檬酸鈉)通過(guò)在緩沖劑的共軛酸(例如檸檬酸)中加入強(qiáng)堿(例如氫氧化鈉)來(lái)形成。如在實(shí)施例部分所示，本發(fā)明的包括檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，特別是關(guān)系到片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)，這是穩(wěn)定性和藥物產(chǎn)品活力的重要指標(biāo)。此外，檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)維持穩(wěn)定的pH5.8的液體藥物組合物表現(xiàn)特別好。糖穩(wěn)定劑適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物包含穩(wěn)定劑，最適當(dāng)?shù)貫樘欠€(wěn)定劑。適當(dāng)?shù)?，該穩(wěn)定劑是指促進(jìn)維持生物藥品的結(jié)構(gòu)完整性的組分，特別是在冷凍和/或冷凍干燥和/或存儲(chǔ)時(shí)(尤其是當(dāng)暴露于應(yīng)力時(shí))。該液體藥物組合物可包含一種或多種糖穩(wěn)定劑，雖然在優(yōu)選實(shí)施方式中只有單一糖穩(wěn)定劑的存在。適當(dāng)?shù)?，所述糖穩(wěn)定劑是糖多元醇(sugarpolyol)(包括糖醇(sugaralcohols))和/或二糖。糖穩(wěn)定劑適當(dāng)?shù)剡x自海藻糖、甘露醇、蔗糖、山梨醇、麥芽糖、乳糖、木糖醇、阿拉伯糖醇、赤蘚糖醇、乳糖醇、麥芽糖醇和肌醇。在具體實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑選自海藻糖、甘露醇、蔗糖、麥芽糖、乳糖、木糖醇、阿拉伯糖醇、赤蘚糖醇、乳糖醇、麥芽糖醇和肌醇。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑是非還原性糖，任選本文任何地方列出的非還原性糖。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑選自海藻糖和甘露醇。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑是海藻糖。海藻糖是一種特別有益的糖穩(wěn)定劑，與液體阿達(dá)木單抗制劑中的檸檬酸鹽緩沖劑/緩沖系統(tǒng)一起使用。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物包含至多一種糖穩(wěn)定劑，適當(dāng)?shù)刂炼嘁环N糖多元醇和/或二糖。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物包含海藻糖作為唯一的糖穩(wěn)定劑。適當(dāng)?shù)?，用于形成液體藥物組合物的海藻糖是海藻糖二水合物，盡管適當(dāng)?shù)仃P(guān)于海藻糖的任何規(guī)定量(除非另有說(shuō)明-如實(shí)施例中所示)涉及純的無(wú)水海藻糖。這樣的量可以通過(guò)運(yùn)用適當(dāng)?shù)爻藬?shù)而轉(zhuǎn)化成海藻糖二水合物的量。此外，為了評(píng)估給定配方是否落在任何本文給出的海藻糖量的定義的范圍之內(nèi)，海藻糖二水合物的量可以容易地通過(guò)運(yùn)用該乘數(shù)反向轉(zhuǎn)換成純的無(wú)水海藻糖的相應(yīng)量(用等摩爾數(shù))。這個(gè)原則適用于任何糖穩(wěn)定劑組分。當(dāng)給定為摩爾濃度時(shí)，濃度當(dāng)然是相同的，無(wú)論糖穩(wěn)定劑的水合狀態(tài)。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以約50至約400mM的濃度包含糖穩(wěn)定劑(最適宜地為海藻糖)，更適當(dāng)?shù)貫榧s100至約300mM，更適當(dāng)?shù)貫榧s150至約250mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑以190-210mM的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s200mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，海藻糖以200mM的濃度存在。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以約15mg/mL至約140mg/mL的濃度包含糖穩(wěn)定劑(最適宜地為海藻糖)，更適當(dāng)?shù)貫榧s35mg/mL至約100mg/mL，更適當(dāng)?shù)貫榧s45mg/mL至約80mg/mL。在一個(gè)實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑以65mg/mL-72mg/mL的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s68mg/mL。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，海藻糖以約68mg/mL(相當(dāng)于約75.7mg/mL的海藻糖二水合物)的濃度存在。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以糖穩(wěn)定劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約145:1至約1150:1包含糖穩(wěn)定劑(最適宜地為海藻糖)，更適當(dāng)?shù)貫榧s290:1至約860:1，更適當(dāng)?shù)貫榧s430:1至約720:1。在一個(gè)實(shí)施方式中，糖穩(wěn)定劑以糖穩(wěn)定劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約550:1至約605:1存在，最適當(dāng)?shù)貫榧s576:1。在一個(gè)實(shí)施方式中，海藻糖以海藻糖與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約576:1存在。如在實(shí)施例部分所示，本發(fā)明的包括上述糖穩(wěn)定劑的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，特別是關(guān)系到片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)，這是穩(wěn)定性和藥物產(chǎn)品活力的重要指標(biāo)。此外，包括海藻糖作為糖穩(wěn)定劑的液體藥物組合物表現(xiàn)特別好。稀釋劑本發(fā)明的液體藥物組合物可以包含任何一種或多種藥學(xué)上可接受的稀釋劑或其混合物。然而，最適當(dāng)?shù)匾后w藥物組合物是水性藥物組合物。最適當(dāng)?shù)叵♂寗┦撬m當(dāng)?shù)貎H用水。水是適當(dāng)?shù)刈⑸溆盟?WFI)。適當(dāng)?shù)兀♂寗┛梢詷?gòu)成任何液體藥物組合物中成分的平衡，例如從而重量百分比總計(jì)為100％。適當(dāng)?shù)仃P(guān)于液體藥物組合物的任何組分的本文給定的任何濃度表示所述組分在(和適當(dāng)?shù)厝芙庥?稀釋劑中與任何其他組分混合的濃度。本發(fā)明的液體藥物組合物適當(dāng)?shù)厥侨芤海⑦m當(dāng)?shù)?基本或完全)不含微?；虺恋怼２缓虻退降慕M分低/無(wú)精氨酸適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物可以(基本或完全)不含精氨酸(適當(dāng)?shù)貫長(zhǎng)-精氨酸)或以至多0.1mM的濃度包括精氨酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?.01mM，最適當(dāng)?shù)刂炼?.001mM。適當(dāng)?shù)兀后w藥物組合物(基本或完全)不含精氨酸或以精氨酸與緩沖系統(tǒng)的摩爾比最多1:150(即對(duì)每150摩爾緩沖系統(tǒng)而言小于或等于1摩爾精氨酸)來(lái)含有精氨酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?：1500，最適當(dāng)?shù)刂炼?：15000。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含精氨酸或以精氨酸與阿達(dá)木單抗的摩爾比最多1:3000(即對(duì)每3000重量份的阿達(dá)木單抗而言小于或等于1重量份的精氨酸)來(lái)含有精氨酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?：30000，最適當(dāng)?shù)刂炼?：300000。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含精氨酸或以精氨酸與阿達(dá)木單抗的摩爾比最多1:3.75(即對(duì)每3.75摩爾的阿達(dá)木單抗而言小于或等于1摩爾的精氨酸)來(lái)含有精氨酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?:37.5，最適當(dāng)?shù)刂炼?:375。如本文所述，在其存在的環(huán)境中或存在于液體藥物組合物中的“精氨酸”的引用涉及相應(yīng)的游離氨基酸而不是作為較大化合物(例如肽或蛋白質(zhì))的部分而共價(jià)納入的氨基酸殘基。如實(shí)施例部分所示，本發(fā)明的(基本或完全)不含精氨酸的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，尤其是涉及聚集、片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)。低/無(wú)氨基酸適當(dāng)?shù)兀后w藥物組合物可以(基本或完全)不含氨基酸或以至多0.1mM的(總體)濃度包括一種或多種氨基酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?.01mM，最適當(dāng)?shù)刂炼?.001mM。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含氨基酸或以氨基酸與緩沖系統(tǒng)的(總體)摩爾比最多1:150(即對(duì)每150摩爾緩沖系統(tǒng)而言小于或等于1摩爾氨基酸)來(lái)含有一種或多種氨基酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?：1500，最適當(dāng)?shù)刂炼?：15000。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含氨基酸或以氨基酸與阿達(dá)木單抗的(總體)重量比最多1:3000(即對(duì)每3000重量份阿達(dá)木單抗而言小于或等于1重量份氨基酸)來(lái)含有一種或多種氨基酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?：30000，最適當(dāng)?shù)刂炼?:300000。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含氨基酸或以氨基酸與阿達(dá)木單抗的(總體)摩爾比最多1:3.75(即對(duì)每3.75摩爾阿達(dá)木單抗而言小于或等于1摩爾氨基酸)來(lái)含有一種或多種氨基酸，更適當(dāng)?shù)刂炼?:37.5，最適當(dāng)?shù)刂炼?:375。如本文所述，在其存在的環(huán)境中或存在于液體藥物組合物中的“氨基酸”的引用涉及相應(yīng)的游離氨基酸而不是作為較大化合物(例如肽或蛋白質(zhì))的部分而共價(jià)納入的氨基酸殘基。適當(dāng)?shù)兀竟?jié)提到的氨基酸(并認(rèn)為不含或以低量存在)可能是天然的和/或人造氨基酸，雖然他們優(yōu)選天然氨基酸。具體地，液體藥物組合物(基本或完全)不含選自下組的任何氨基酸：精氨酸、賴(lài)氨酸、天冬氨酸和組氨酸；或以前述有關(guān)“氨基酸”所述的量、濃度、摩爾比或重量包括一個(gè)或多個(gè)上述氨基酸。如實(shí)施例部分所示，本發(fā)明如上所述(基本或完全)不含氨基酸或某些氨基酸的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，尤其是涉及聚集、片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)。低/無(wú)表面活性劑適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含表面活性劑(無(wú)論是陽(yáng)離子、陰離子、兩性或非離子型)，但任選例外聚山梨酯80(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯)，或以(總體)濃度至多1mM包括一種或多種所述表面活性劑(任選不計(jì)算聚山梨酯80)，更適當(dāng)?shù)刂炼?.1mM，更適當(dāng)?shù)刂炼?.01mM，更適當(dāng)?shù)貫橹炼?.001mM，最適當(dāng)?shù)貫橹炼?.0001mM。在這種情況下，該液體藥物組合物可任選包含如本文定義的聚山梨酯80。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含表面活性劑(無(wú)論是陽(yáng)離子、陰離子、兩性或非離子型)，但任選例外聚山梨酯80(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯)，或以表面活性劑與緩沖系統(tǒng)的(總體)摩爾比至多1:10包括一種或多種所述表面活性劑(任選不計(jì)算聚山梨酯80)，更適當(dāng)?shù)刂炼?:100，更適當(dāng)?shù)刂炼?:1000，更適當(dāng)?shù)貫橹炼?:10000，最適當(dāng)?shù)貫橹炼?:100000。在這種情況下，該液體藥物組合物可任選包含如本文定義的聚山梨酯80。適當(dāng)?shù)兀后w藥物組合物(基本或完全)不含表面活性劑(無(wú)論是陽(yáng)離子、陰離子、兩性或非離子型)，但任選例外聚山梨酯80(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯)，或以表面活性劑與阿達(dá)木單抗的(總體)重量比至多1:50(即對(duì)每50重量份阿達(dá)木單抗而言小于或等于1重量份表面活性劑)包括一種或多種所述表面活性劑(任選不計(jì)算聚山梨酯80)，更適當(dāng)?shù)刂炼?:500，更適當(dāng)?shù)刂炼?:5000，更適當(dāng)?shù)貫橹炼?:50000，最適當(dāng)?shù)貫橹炼?:500000。在這種情況下，該液體藥物組合物可任選包含如本文定義的聚山梨酯80。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物可以(基本或完全)不含表面活性劑(無(wú)論是陽(yáng)離子、陰離子、兩性或非離子型)，但任選例外聚山梨酯80(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯)或以表面活性劑與阿達(dá)木單抗的(總體)摩爾比至多3:1包括一種或多種所述表面活性劑(任選不計(jì)算聚山梨酯80)，更適當(dāng)?shù)刂炼?.3:1，更適當(dāng)?shù)刂炼?.003:1，更適當(dāng)?shù)貫橹炼?.0003:1，最適當(dāng)?shù)貫橹炼?.00003:1。在這種情況下，該液體藥物組合物可任選包含如本文定義的聚山梨酯80。適當(dāng)?shù)?，本部分所述表面活性?并認(rèn)為不含或以低量存在)可以是陽(yáng)離子、陰離子、兩性或非離子表面活性劑。適當(dāng)?shù)?，本部分所述表面活性?并認(rèn)為不含或以低量存在)可以是陽(yáng)離子、陰離子和兩性表面活性劑，但可任選地排除非離子表面活性劑(如聚山梨酯或司盤(pán))，或至少可任選排除聚山梨酯80。因此，該液體藥物組合物(基本或完全)不含陽(yáng)離子、陰離子或兩性表面活性劑或以本小節(jié)前述段落所述的更一般的“表面活性劑”所規(guī)定的至多的量、濃度、摩爾比或重量比包括一種或多種所述表面活性劑。因此，該液體藥物組合物(基本或完全)不含非離子表面活性劑，但任選例外聚山梨酯80，或以本小節(jié)前述段落所述的更一般的“表面活性劑”所規(guī)定的至多的量、濃度、摩爾比或重量比包括一種或多種所述表面活性劑。因此，該液體藥物組合物(基本或完全)不含聚山梨酯表面活性劑，但任選例外聚山梨酯80，或以本小節(jié)前述段落所述的更一般的“表面活性劑”所規(guī)定的至多的量、濃度、摩爾比或重量比包括一種或多種所述表面活性劑。在這種情況下，該液體藥物組合物可任選包含如本文定義的聚山梨酯80。因此，該液體藥物組合物(基本或完全)不含聚山梨酯20(還稱(chēng)為吐溫20-聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單月桂酸酯)表面活性劑，或以本小節(jié)前述段落所述的更一般的“表面活性劑”所規(guī)定的至多的量、濃度、摩爾比或重量比包括一種或多種所述表面活性劑。該液體藥物組合物可適當(dāng)?shù)?基本或完全)不含聚山梨酯80表面活性劑，或以前述“表面活性劑”所述的量、濃度、摩爾比或重量比包括一種或多種所述表面活性劑。因此，該液體藥物組合物(基本或完全)不含聚山梨酯80表面活性劑，或以本小節(jié)前述段落所述的更一般的“表面活性劑”所規(guī)定的至多的量、濃度、摩爾比或重量比包括一種或多種所述表面活性劑。如實(shí)施例部分所示，本發(fā)明如上所述(基本或完全)不含表面活性劑或某些表面活性劑的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，尤其是涉及聚集、片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)。低/無(wú)磷酸鹽適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉)，或以至多0.1mM的濃度包含磷酸鹽緩沖系統(tǒng)，更適當(dāng)?shù)刂炼?.01mM，最適當(dāng)最多0.001mM。適當(dāng)?shù)?，液體藥物組合物(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉)或以磷酸鹽緩沖系統(tǒng)與任何非磷酸鹽緩沖系統(tǒng)的摩爾比最多1:150(即對(duì)每150摩爾非磷酸鹽緩沖系統(tǒng)而言小于或等于1摩爾磷酸鹽緩沖系統(tǒng))來(lái)含有磷酸鹽緩沖系統(tǒng)，更適當(dāng)?shù)刂炼?：1500，最適當(dāng)?shù)刂炼?：15000。適當(dāng)?shù)兀后w藥物組合物(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑或以磷酸鹽緩沖劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比最多1:3.75(即對(duì)每3.75摩爾的阿達(dá)木單抗而言小于或等于1摩爾的磷酸鹽緩沖劑)來(lái)含有磷酸鹽緩沖劑，更適當(dāng)?shù)刂炼?:37.5，最適當(dāng)?shù)刂炼?:375。如本文所述，在其存在的環(huán)境中或存在于液體藥物組合物中的“磷酸鹽緩沖劑”的引用涉及任何形式或質(zhì)子化狀態(tài)的任何磷酸鹽，包括磷酸鹽，一氫磷酸鹽和二氫磷酸鹽。然而，適當(dāng)?shù)嘏懦鳛檩^大化合物(如磷酸化的或糖基化的肽或蛋白質(zhì))的部分共價(jià)納入的任何任何磷酸鹽部分或殘基。如實(shí)施例部分所示，本發(fā)明的(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，尤其是涉及聚集、片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)。任選的其他組分等張劑本發(fā)明的液體藥物組合物適當(dāng)?shù)匕ā皬埩φ{(diào)節(jié)劑”(或“等張劑”)或一種或多種等張劑，適當(dāng)?shù)厝绫疚亩x。包含等張劑適當(dāng)?shù)赜兄?或增加)的組合物的總滲透壓和克分子滲透壓濃度。適當(dāng)?shù)兀葟垊┮宰阋允菇M合物(基本)與體液等滲的量或濃度在組合物中存在。適當(dāng)?shù)兀葟垊┮宰阋允菇M合物具有本文所述范圍內(nèi)的滲透壓和克分子滲透壓濃度的量或濃度在組合物中存在?？梢允褂萌我夂线m的等張劑。然而適當(dāng)?shù)兀葟垊┻x自：水溶性金屬鹽(例如氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣)、水溶性等張?zhí)?糖醇(例如葡萄糖、蔗糖、甘露醇)，和/或其它水溶性多元醇。適當(dāng)?shù)氐葟垊┦欠蔷彌_的(即，產(chǎn)生很少或沒(méi)有緩沖作用)。因此，任何金屬鹽等張劑適當(dāng)?shù)夭皇蔷彌_劑。該液體藥物組合物可包含一種或多種等張劑，盡管優(yōu)選僅存在單一“等張劑”(即使旨在行使本文所述另一功能的組分賦予所述組合物任何等張效果)。最優(yōu)選地，等張劑是或包括金屬鹽(優(yōu)選非緩沖水溶性金屬鹽)。適當(dāng)?shù)?，所述金屬鹽是或包括金屬鹵化物，適當(dāng)?shù)貫閴A或堿土金屬鹵化物，適當(dāng)?shù)貕A金屬氯化物。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，等張劑是或包括氯化鈉。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，等張劑是氯化鈉。氯化鈉是一種特別有益的穩(wěn)定劑，與液體阿達(dá)木單抗制劑中的檸檬酸鹽緩沖劑/緩沖系統(tǒng)一起使用。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以約10至約200mM的濃度包含等張劑(最適宜地為氯化鈉)，更適當(dāng)?shù)貫榧s20至約100mM，更適當(dāng)?shù)貫榧s25至約75mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，等張劑以40-60mM的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s50mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，氯化鈉以50mM的濃度存在。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以約0.5mg/mL至約12mg/mL的濃度包含等張劑(最適宜地為氯化鈉)，更適當(dāng)?shù)貫榧s1.2mg/mL至約5mg/mL，更適當(dāng)?shù)貫榧s1.5mg/mL至約4.4mg/mL。在一個(gè)實(shí)施方式中，等張劑以2.7mg/mL-3.1mg/mL的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s2.9mg/mL。在一個(gè)實(shí)施方式中，氯化鈉以約2.9mg/mL的濃度存在。適當(dāng)?shù)兀撘后w藥物組合物以等張劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約30:1至約580:1包含等張劑(最適宜地為氯化鈉)，更適當(dāng)?shù)貫榧s60:1至約290:1，更適當(dāng)?shù)貫榧s70:1至約220:1。在一個(gè)實(shí)施方式中，等張劑以等張劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約115：1至約175：1存在，最適當(dāng)?shù)貫榧s145：1。在一個(gè)實(shí)施方式中，氯化鈉以氯化鈉與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約145：1存在。如在實(shí)施例部分所示，本發(fā)明的包括上述等張劑的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，特別是關(guān)系到片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)，這是穩(wěn)定性和藥物產(chǎn)品活力的重要指標(biāo)。此外，含氯化鈉(尤其是以規(guī)定范圍的量)的液體藥物組合物表現(xiàn)特別好。表面活性劑本發(fā)明的液體藥物組合物可適當(dāng)?shù)匕砻婊钚詣┗蛞环N或多種表面活性劑，適當(dāng)?shù)厝绫疚亩x。表面活性劑的加入適當(dāng)?shù)赜兄诎⑦_(dá)木單抗蛋白的穩(wěn)定化?？梢允褂萌我夂线m的表面活性劑。然而適當(dāng)?shù)?，表面活性劑是非離子表面活性劑，最適當(dāng)?shù)厥蔷凵嚼骢?聚氧乙烯乙二醇脫水山梨醇烷基酯)或司盤(pán)(脫水山梨醇烷基酯)表面活性劑。雖然一種或多種表面活性劑可以包含在本發(fā)明的液體藥物組合物內(nèi)，最適當(dāng)?shù)刂淮嬖趩我槐砻婊钚詣?，最適當(dāng)?shù)厥菃我环请x子表面活性劑(適當(dāng)?shù)厝绫疚乃x)。表面活性劑適當(dāng)?shù)剡x自：聚山梨酯20(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單月桂酸酯)、聚山梨酯40(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單棕櫚酸酯)、聚山梨酯60(聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單硬脂酸酯)、聚山梨酯80(聚氧乙烯(20)山梨醇單油酸酯)、脫水山梨醇單月桂酸酯、脫水山梨醇單棕櫚酸酯、脫水山梨醇單硬脂酸酯、脫水山梨醇三硬脂酸酯、和/或脫水山梨醇單油酸酯。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，表面活性劑選自聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、和/或聚山梨酯80。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，液體藥物組合物包括選自聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60和聚山梨酯80的單一表面活性劑。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，表面活性劑是聚山梨酯80或聚山梨酯20。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，表面活性劑是聚山梨酯80。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以約0.0001至約5mM(即0.1μΜ-5mΜ)的濃度包含表面活性劑(最適宜地為聚山梨酯80)，更適當(dāng)?shù)貫榧s0.001至約2mM，更適當(dāng)?shù)貫榧s0.01至約1.0mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，表面活性劑以0.72-0.80mM的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s0.76mM。在一個(gè)實(shí)施方式中，聚山梨酯80以0.76mM的濃度存在。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以約0.001mg/mL至約5mg/mL的濃度包含表面活性劑(最適宜地為0.76)，更適當(dāng)?shù)貫榧s0.01mg/mL至約2mg/mL，更適當(dāng)?shù)貫榧s0.05mg/mL至約1.5mg/mL。在一個(gè)實(shí)施方式中，表面活性劑以0.9mg/mL-1.1mg/mL的濃度存在，最適當(dāng)?shù)丶s1.0mg/mL。在一個(gè)實(shí)施方式中，聚山梨酯80以約1.0mg/mL的濃度存在。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物以表面活性劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約1:3500至約15:1包含表面活性劑(最適宜地為聚山梨酯80)，更適當(dāng)?shù)貫榧s1:350至約6:1，更適當(dāng)?shù)貫榧s1:35至約3:1。在一個(gè)實(shí)施方式中，表面活性劑以表面活性劑與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約2.1：1至約2.3：1存在，最適當(dāng)?shù)貫榧s2.2：1。在一個(gè)實(shí)施方式中，聚山梨酯80以聚山梨酯80與阿達(dá)木單抗的摩爾比為約2.2：1存在。如在實(shí)施例部分所示，本發(fā)明的包括上述表面活性劑的液體藥物組合物在應(yīng)力測(cè)試中表現(xiàn)特別好，特別是關(guān)系到片段化和蛋白質(zhì)解折疊時(shí)，這是穩(wěn)定性和藥物產(chǎn)品活力的重要指標(biāo)。此外，含聚山梨酯(尤其是以規(guī)定范圍的量)的液體藥物組合物表現(xiàn)特別好。本發(fā)明相關(guān)其他參數(shù)滲透壓適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物的滲透壓為200-405mOsm/kg，更適當(dāng)?shù)?20-390mOsm/kg，更適當(dāng)?shù)?30-350mOsm/kg，更適當(dāng)?shù)?40-340mOsm/kg，更適當(dāng)?shù)?60-320mOsm/kg，最適當(dāng)?shù)?80-310mOsm/kg。適當(dāng)?shù)?，組合物的各種組分的相對(duì)量和濃度可經(jīng)謹(jǐn)慎調(diào)節(jié)以實(shí)現(xiàn)所需滲透壓，并且組分的特定新穎組合允許很大程度上實(shí)現(xiàn)而不破壞其它重要參數(shù)。然而適當(dāng)?shù)兀部梢赃x擇組合物的各種組分的相對(duì)量和濃度，以便優(yōu)化其他參數(shù)-本公開(kāi)內(nèi)容，包括其中提出的實(shí)施例和方案，使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)這一目的，并實(shí)現(xiàn)一些或所有的本發(fā)明的益處。蛋白質(zhì)解折疊溫度適當(dāng)?shù)厥?，本發(fā)明的液體藥物組合物中阿達(dá)木單抗的蛋白質(zhì)解折疊溫度(適當(dāng)?shù)赜杀疚乃鯠SF方案測(cè)定)大于或等于65℃，更適當(dāng)?shù)卮笥诨虻扔?0℃。本發(fā)明的組合物中存在的組分的新穎結(jié)合使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)高解折疊的溫度，從熱穩(wěn)定性的角度來(lái)看其被認(rèn)為是理想的。受到熱應(yīng)力時(shí)的參數(shù)適當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物處在40℃熱應(yīng)力(即該組合物保持在40℃的溫度下)持續(xù)28天時(shí)，液體藥物組合物內(nèi)存在的聚集體(適當(dāng)?shù)卦醋园⑦_(dá)木單抗，并適當(dāng)?shù)赜杀疚乃鯯E-HPLC方案確定)的量(或濃度)增加不超過(guò)因子4(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的4倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子3，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子2.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子2.2。適當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物處在40℃熱應(yīng)力(即該組合物保持在40℃的溫度下)持續(xù)28天時(shí)，液體藥物組合物內(nèi)存在的片段(適當(dāng)?shù)卦醋园⑦_(dá)木單抗，并適當(dāng)?shù)赜杀疚乃錾锓治龇桨笢y(cè)量)的量(或濃度)增加不超過(guò)因子4(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的4倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子3，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子2.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子2.2。適當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物處在40℃熱應(yīng)力(即該組合物保持在40℃的溫度下)持續(xù)28天時(shí)，液體藥物組合物的濁度(適當(dāng)?shù)馗鶕?jù)本文所述方案通過(guò)比濁法測(cè)量)增加不超過(guò)因子2(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的2倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.2，并且適當(dāng)?shù)貪岫炔辉黾印＿m當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物處在40℃熱應(yīng)力(即該組合物保持在40℃的溫度下)持續(xù)28天時(shí)，液體藥物組合物的pH變化(無(wú)論提高還是降低，雖然通常pH降低)不超過(guò)0.5pH單位，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)0.2pH單位，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)0.1pH單位，并且適當(dāng)?shù)豴H不增加(精確至小數(shù)點(diǎn)后第一位)。受到機(jī)械應(yīng)力時(shí)的參數(shù)適當(dāng)?shù)兀?dāng)組合物受機(jī)械應(yīng)力(即根據(jù)本文所述方案振蕩)持續(xù)48小時(shí)時(shí)，液體藥物組合物內(nèi)存在的聚集體(適當(dāng)?shù)卦醋园⑦_(dá)木單抗，并適當(dāng)?shù)赜杀疚乃鯯E-HPLC方案確定)的量(或濃度)增加不超過(guò)因子2(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的2倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.2，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.1。適當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物受機(jī)械應(yīng)力(即根據(jù)本文所述方案振蕩)持續(xù)48小時(shí)時(shí)，液體藥物組合物內(nèi)存在的片段(適當(dāng)?shù)卦醋园⑦_(dá)木單抗，并適當(dāng)?shù)赜杀疚乃錾锓治龇桨笢y(cè)量)的量(或濃度)增加不超過(guò)因子2(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的2倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.2，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.1。適當(dāng)?shù)兀?dāng)組合物受機(jī)械應(yīng)力(即根據(jù)本文所述方案振蕩)持續(xù)48小時(shí)時(shí)，液體藥物組合物的濁度(適當(dāng)?shù)馗鶕?jù)本文所述方案通過(guò)比濁法測(cè)量)增加不超過(guò)因子2(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的2倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.2，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.1，并且適當(dāng)?shù)貪岫炔辉黾印＿m當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物受機(jī)械應(yīng)力(即根據(jù)本文所述方案振蕩)持續(xù)48小時(shí)時(shí)，液體藥物組合物的pH變化(無(wú)論提高還是降低，雖然通常pH降低)不超過(guò)0.5pH單位，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)0.2pH單位，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)0.1pH單位，并且適當(dāng)?shù)豴H不增加(精確至小數(shù)點(diǎn)后第一位)。受到光應(yīng)力時(shí)的參數(shù)適當(dāng)?shù)兀?dāng)組合物受到光應(yīng)力時(shí)(即該組合物根據(jù)本文所述方案暴露在光下，即765W/m2下7小時(shí))，液體藥物組合物內(nèi)存在的聚集體(適當(dāng)?shù)卦醋园⑦_(dá)木單抗，并適當(dāng)?shù)赜杀疚乃鯯E-HPLC方案確定)的量(或濃度)增加不超過(guò)因子50(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的50倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子45，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子35，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子30。適當(dāng)?shù)兀?dāng)組合物受到光應(yīng)力時(shí)(即該組合物根據(jù)本文所述方案暴露在光下，即765W/m2下7小時(shí))，液體藥物組合物內(nèi)存在的片段(適當(dāng)?shù)卦醋园⑦_(dá)木單抗，并適當(dāng)?shù)赜杀疚乃錾锓治龇桨笢y(cè)量)的量(或濃度)增加不超過(guò)因子4(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的4倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子3，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子2.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子2。適當(dāng)?shù)?，?dāng)組合物受到光應(yīng)力時(shí)(即該組合物根據(jù)本文所述方案暴露在光下，即765W/m2下7小時(shí))，液體藥物組合物的濁度(適當(dāng)?shù)馗鶕?jù)本文所述方案通過(guò)比濁法測(cè)量)增加不超過(guò)因子2(即相對(duì)于任意的開(kāi)始時(shí)間的2倍量)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.5，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)因子1.2，并且適當(dāng)?shù)貪岫炔辉黾?。適當(dāng)?shù)兀?dāng)組合物受到光應(yīng)力時(shí)(即該組合物根據(jù)本文所述方案暴露在光下，即765W/m2下7小時(shí))，液體藥物組合物的pH變化(無(wú)論提高還是降低，雖然通常pH降低)不超過(guò)0.5pH單位，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)0.2pH單位，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)0.1pH單位，并且適當(dāng)?shù)豴H不增加(精確至小數(shù)點(diǎn)后第一位)。適當(dāng)?shù)兀?dāng)組合物受到光應(yīng)力時(shí)(即該組合物根據(jù)本文所述方案暴露在光下，即765W/m2下7小時(shí))，液體藥物組合物中阿達(dá)木單抗的異構(gòu)體譜，特別是“主峰”的積分面積(適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)等電聚焦，適當(dāng)?shù)豤IEF，適當(dāng)?shù)厥褂胕CE280，適當(dāng)采用所述方案來(lái)測(cè)量)是適當(dāng)穩(wěn)定的。適當(dāng)?shù)?，光?yīng)力是按照歐洲藥品管理局目前的ICHQ1B的指南(有關(guān)新活性物質(zhì)和醫(yī)藥產(chǎn)品耐光性測(cè)試)進(jìn)行，適當(dāng)?shù)赜晌募﨏PMP/ICH/279/95所示。適當(dāng)?shù)?，?dāng)受到光應(yīng)力時(shí)(適當(dāng)?shù)?65W/m2下7小時(shí)，適當(dāng)?shù)匕凑諝W洲藥品管理局的當(dāng)前ICHQ1B指南，適當(dāng)?shù)貫槲募﨏PMP/ICH/279/95)，組合物中的阿達(dá)木單抗的異構(gòu)體譜，如參照在等電聚焦(適當(dāng)?shù)厝绫疚乃龅拿?xì)管等電聚焦，或本領(lǐng)域公知的任選其他標(biāo)準(zhǔn)等電聚焦方案)產(chǎn)生的電泳圖譜中涉及阿達(dá)木單抗的“主峰”的積分面積測(cè)量，變化不超過(guò)20％。適當(dāng)?shù)兀?dāng)以此方案進(jìn)行光應(yīng)力時(shí)，組合物中的阿達(dá)木單抗的異構(gòu)體譜(適當(dāng)?shù)貐⒄丈婕鞍⑦_(dá)木單抗的“主峰”的積分面積測(cè)量)，變化不超過(guò)15％(不論是峰面積增加還是降低)，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)10％，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)5％，適當(dāng)?shù)夭怀^(guò)4％?，F(xiàn)有技術(shù)的阿達(dá)木單抗的組合物由于光氧化現(xiàn)象而表現(xiàn)出較差的異構(gòu)體譜穩(wěn)定性，這可通過(guò)使用本發(fā)明的特定液體藥物組合物內(nèi)的檸檬酸鹽緩沖液適當(dāng)?shù)氐玫揭种?。因此，本發(fā)明的阿達(dá)木單抗的液體藥物組合物表現(xiàn)出優(yōu)異的光穩(wěn)定性。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明的液體藥物組合物中的阿達(dá)木單抗具有比本文所述商業(yè)制劑更好的耐光性(適當(dāng)?shù)赜上鄬?duì)異構(gòu)體譜指示，特別是涉及阿達(dá)木單抗的主峰的異構(gòu)體譜)。應(yīng)理解，對(duì)應(yīng)于阿達(dá)木單抗的“主峰”是指從適當(dāng)?shù)厝绫疚闹兴鲞M(jìn)行的等電聚焦測(cè)量所得的電泳(即具有最高積分峰面積)的阿達(dá)木單抗的主峰。適當(dāng)?shù)?，電泳?80nm處獲得，適當(dāng)?shù)仡A(yù)聚焦和聚焦時(shí)間分別為1和6分鐘，適當(dāng)?shù)卦?500V(預(yù)聚焦)和3000V(聚焦)的電壓處。適當(dāng)?shù)兀鍨槲辗?，適當(dāng)?shù)卦?80nm處。各種同種型的分離適當(dāng)?shù)厥褂?00mM氫氧化鈉(0.1％甲基纖維素中)作為陰極溶液和適當(dāng)?shù)厥褂?0mMo-磷酸(0.1％甲基纖維素中)作為陽(yáng)極溶液來(lái)實(shí)現(xiàn)。適當(dāng)?shù)兀瑢?duì)于等電聚焦測(cè)量的樣品根據(jù)本文或本領(lǐng)域他處定義的方案制備，但特別地可以適當(dāng)?shù)厣婕跋率龅囊粋€(gè)或多個(gè)或所有：i)純化；ii)除去鹽(例如用離心，適當(dāng)?shù)赜?0kDa的截止值)；iii)預(yù)先稀釋得到約5.0mg/mL的蛋白質(zhì)含量，適當(dāng)?shù)丶s1.0mg/mL，其中稀釋劑可任選包括甲基纖維素、Pharmalyte5-8(GE健康公司(GEHealthcare))、Pharmalyte8-10.5(GE健康公司)、低pI標(biāo)記7.05(蛋白質(zhì)樣品公司(ProteinSimple))、高PI標(biāo)記9.50(蛋白質(zhì)樣品公司)和純化水；iv)一個(gè)或多個(gè)其他離心步驟(例如10000rpm下3分鐘，適當(dāng)?shù)仉S后7000rpm下2分鐘，適當(dāng)?shù)卦?50微升樣品上)。等電聚焦適當(dāng)?shù)厥敲?xì)管等電聚焦(cIEF)，并適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)蛋白樣品公司使用iCE280系統(tǒng)進(jìn)行。穩(wěn)定抗體的方法考慮本小節(jié)的上述各點(diǎn)，以及實(shí)施例中提供的數(shù)據(jù)，本發(fā)明還提供穩(wěn)定液體阿達(dá)木單抗組合物的方法(化學(xué)上和/或物理上，任選關(guān)聯(lián)上述參數(shù)/性質(zhì)中的任何一種或多種)，包括用形成如本文定義的液體藥物組合物所需要的任何相關(guān)的組分混合阿達(dá)木單抗。不同的實(shí)施方式將適當(dāng)?shù)匦枰牟煌M成的組分來(lái)進(jìn)行混合，可能以不同的量，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過(guò)參考該液體藥物組合物中的上述公開(kāi)容易地推斷出此類(lèi)組合和量。此類(lèi)不同組成的組分可以在不同的方面穩(wěn)定液體阿達(dá)木單抗的組合物。例如，用前述組分混合阿達(dá)木單抗形成如本文定義的液體藥物組合物可以通過(guò)下述方面穩(wěn)定阿達(dá)木單抗：i)提高阿達(dá)木單抗的蛋白質(zhì)解折疊溫度；ii)抑制聚集物的形成；iii)抑制片段的形成；iv)抑制亞可見(jiàn)顆粒的形成(≤25微米或≤10微米)；v)抑制濁化(turbidification)；vi)抑制pH值的變化；vii)抑制光氧化；和/或viii)減少在冷凍/解凍循環(huán)的不穩(wěn)定性。因此，本發(fā)明提供了實(shí)現(xiàn)一個(gè)、一些或所有以下優(yōu)勢(shì)的方法：i)提高阿達(dá)木單抗的蛋白質(zhì)解折疊溫度；ii)抑制聚集物的形成；iii)抑制片段的形成；iv)抑制亞可見(jiàn)顆粒的形成(≤25微米或≤10微米)；v)抑制濁化；vi)抑制pH值的變化；vii)抑制光氧化；viii)減少在冷凍/解凍循環(huán)的不穩(wěn)定性；和/或ix)使異構(gòu)體譜(尤其關(guān)于本文所述的“主峰”)穩(wěn)定；該方法包括制造本文所定義的阿達(dá)木單抗的液體藥物組合物。適當(dāng)?shù)?，本發(fā)明的液體藥物組合物具有至少6個(gè)月的保質(zhì)期，適當(dāng)?shù)刂辽?2個(gè)月，適當(dāng)?shù)刂辽?8個(gè)月，更適當(dāng)?shù)刂辽?4個(gè)月。適當(dāng)?shù)?，本發(fā)明的液體藥物組合物在2-8℃溫度下具有至少6個(gè)月的保質(zhì)期，適當(dāng)?shù)刂辽?2個(gè)月，適當(dāng)?shù)刂辽?8個(gè)月，更適當(dāng)?shù)刂辽?4個(gè)月。使技術(shù)人員優(yōu)化關(guān)鍵穩(wěn)定性性能公開(kāi)用于本發(fā)明的液體藥物組合物中的新穎結(jié)合使本領(lǐng)域技術(shù)人員能生產(chǎn)(和審慎調(diào)整)相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的組合物表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)幕蛟鰪?qiáng)的性能的組合物。具體地，本發(fā)明現(xiàn)在提供給本領(lǐng)域技術(shù)人員所有必要的工具來(lái)優(yōu)化制劑穩(wěn)定性，特別是優(yōu)化下述的一個(gè)或多個(gè)：抑制聚集、片段化、蛋白解折疊、沉淀、pH值滑移和氧化(特別是光氧化)。此外，給予本領(lǐng)域技術(shù)人員關(guān)于如何實(shí)現(xiàn)這樣的優(yōu)化(通過(guò)審慎地改變組合物)，以及在過(guò)程中如何盡量減少任何有害副作用的指導(dǎo)。本公開(kāi)內(nèi)容使得本領(lǐng)域技術(shù)人員在本發(fā)明的整個(gè)范圍工作，以生產(chǎn)出表現(xiàn)相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的組合物相當(dāng)?shù)幕蚋倪M(jìn)的性能的各種特定組合物，并且這可以用更少的組分來(lái)實(shí)現(xiàn)。具體實(shí)施方式在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-阿達(dá)木單抗；-檸檬酸鹽緩沖劑(例如檸檬酸鈉)(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；-糖穩(wěn)定劑(例如海藻糖)；和-表面活性劑(例如聚山梨酯80)。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-阿達(dá)木單抗；-檸檬酸鹽緩沖劑(例如檸檬酸鈉)(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；-糖穩(wěn)定劑(例如海藻糖)；-等張劑(例如氯化鈉)；和-任選的表面活性劑(例如聚山梨酯80)。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:288-865的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)和糖穩(wěn)定劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:288-865:28-576的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)、糖穩(wěn)定劑和等張劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:288-865:28-576:0.1-3.2的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)、糖穩(wěn)定劑、等張劑和表面活性劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:548-605的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)和糖穩(wěn)定劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:548-605:115-173的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)、糖穩(wěn)定劑和等張劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:548-605:115-173:2-2.4的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)、糖穩(wěn)定劑、等張劑和表面活性劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:5.7-145:288-865的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)和海藻糖。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:5.7-145:288-865:28-576的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)、海藻糖和氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:5.7-145:288-865:28-576:0.002-11的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)、海藻糖、氯化鈉和聚山梨酯80。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:548-605的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)和海藻糖。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:548-605:115-173的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)、海藻糖和氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:14-40:548-605:115-173:2-2.4的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)、海藻糖、氯化鈉和聚山梨酯80。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:28.8:576的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)和海藻糖。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:28.8:576:144的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)、海藻糖和氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別1:28.8:576:144:2.2的摩爾比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)、海藻糖、氯化鈉和聚山梨酯80。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別25-75:0.38-9.6:15-140的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)和海藻糖。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別25-75:0.38-9.6:15-140:0.5-12的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)、海藻糖和氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別25-75:0.38-9.6:15-140:0.5-12:0.01-2的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)、海藻糖、氯化鈉和聚山梨酯80。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別45-55:0.96-2.69:65-72的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)和海藻糖。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別45-55:0.96-2.69:65-72:2.7-3.1的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)、海藻糖和氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別45-55:0.96-2.69:65-72:2.7-3.1:0.9-1.1的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)、海藻糖、氯化鈉和聚山梨酯80。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別50:1.9:68的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)和海藻糖。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別50:1.9:68:2.9的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)、海藻糖和氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物以分別50:1.9:68:2.9:1的重量比包含阿達(dá)木單抗、檸檬酸鹽緩沖物質(zhì)、海藻糖、氯化鈉和聚山梨酯80。涉及各組分的摩爾和/或重量比的任何前述實(shí)施方式還可以通過(guò)參考下述內(nèi)容來(lái)定義：(基本或全部)不存在或以低水平存在的組分例如精氨酸、氨基酸、表面活性劑(任選例外聚山梨酯80)和/或磷酸鹽緩沖劑/系統(tǒng)，如本文任何地方所定義。應(yīng)理解，任何前述實(shí)施方式的所述緩沖劑(例如檸檬酸鈉)或緩沖系統(tǒng)(檸檬酸鹽/檸檬酸)可以直接納入到組合物中，或者可以在原位產(chǎn)生，例如，通過(guò)酸堿反應(yīng)，適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)緩沖劑的共軛酸(例如檸檬酸)與堿(如氫氧化鈉)反應(yīng)。無(wú)論用何種提供或產(chǎn)生緩沖劑或緩沖系統(tǒng)的方法，適當(dāng)?shù)厮媒M合物最終含有緩沖劑和任何酸/堿共軛物的適當(dāng)平衡以得到所需pH。本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠容易地計(jì)算或?qū)嶒?yàn)確定(無(wú)需過(guò)多的努力)緩沖劑和酸/堿共軛物的適當(dāng)平衡，和/或加入共軛酸以產(chǎn)生量適量緩沖劑并提供所需pH所需的堿的量。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-阿達(dá)木單抗；-檸檬酸鹽緩沖劑(例如檸檬酸鈉)(或檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng))；-糖穩(wěn)定劑(例如海藻糖)；和-等張劑(例如氯化鈉)；-任選的表面活性劑(例如聚山梨酯80)；和-水(用于注射的水)；-其中所述組合物：o(基本或完全)不含精氨酸；含有濃度至多0.1mM的精氨酸；o(基本或完全)不含氨基酸或含有(總體)濃度至多0.1mM的一種或多種氨基酸；o(基本或完全)不含任選除聚山梨酯80之外的表面活性劑，或含有(總體)濃度至多1mM的一種或多種表面活性劑(任選聚山梨酯80不計(jì)算在內(nèi))；和/或o(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉)或含有濃度至多0.1mM的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-阿達(dá)木單抗(適當(dāng)?shù)匾员疚乃鰸舛?；-5-14mM檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)(例如檸檬酸鈉/檸檬酸)；-100-約300mM的糖穩(wěn)定劑(例如海藻糖)；-10-約200mM等張劑(例如氯化鈉)；-(任選)0.05mg/mL-約1.5mg/mL表面活性劑(例如聚山梨酯80)；和-水(用于注射的水)；-其中所述組合物：opH為5.4-6.2(例如pH5.8)o(基本或完全)不含精氨酸；含有濃度至多0.1mM的精氨酸；o(基本或完全)不含氨基酸或含有(總體)濃度至多0.1mM的一種或多種氨基酸；o(基本或完全)不含任選除聚山梨酯80之外的表面活性劑，或含有(總體)濃度至多1mM的一種或多種表面活性劑(任選聚山梨酯80不計(jì)算在內(nèi))；和/或o(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉)或含有濃度至多0.1mM的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-25-約75mg/mL阿達(dá)木單抗；-2-約50mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)；-100-約300mM海藻糖；-10-約200mM氯化鈉；-可選的0.001mg/mL-約5mg/mL聚山梨酯80；和-水(用于注射的水)；-其中所述組合物：opH為約5.4-6.0；o(基本或完全)不含精氨酸或含有濃度至多0.1mM的精氨酸；o(基本或完全)不含氨基酸或含有(總體)濃度至多0.1mM的一種或多種氨基酸；o(基本或完全)不含除可選的聚山梨酯80之外的表面活性劑，或含有(總體)濃度至多1mM的一種或多種表面活性劑(可選的聚山梨酯80不計(jì)算在內(nèi))；和/或o(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉)或含有濃度至多0.1mM的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-45至約55mg/ml阿達(dá)木單抗；-5至14mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)；-190至210mM海藻糖；-40至60mM氯化鈉；-可選的0.9mg/mL至1.1mg/mL聚山梨酯80；和-水(用于注射的水)；-其中所述組合物：opH為5.7-5.9；o(基本或完全)不含精氨酸或含有濃度至多0.001mM的精氨酸；o(基本或完全)不含氨基酸或含有(總體)濃度至多0.001mM的一種或多種氨基酸；o(基本或完全)不含除可選的聚山梨酯80之外的表面活性劑，或含有(總體)濃度至多0.0001mM的一種或多種表面活性劑(可選的聚山梨酯80不計(jì)算在內(nèi))；和/或o(基本或完全)不含磷酸鹽緩沖劑(例如磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉)或含有濃度至多0.001mM的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，液體藥物組合物包含：-50mg/ml阿達(dá)木單抗；-10mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)；-200mM海藻糖；-50mM氯化鈉；-可選的1.0mg/mL聚山梨酯80；和-水(用于注射的水)；-其中所述組合物：opH為5.8；o不含精氨酸；o不含氨基酸；o不含除可選的聚山梨酯80之外的表面活性劑；和o不含磷酸緩沖系統(tǒng)。優(yōu)選地，液體藥物組合物基本由下述組成：-25-約75mg/mL阿達(dá)木單抗；-2-約50mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)；-100-約300mM海藻糖；-10-約200mM氯化鈉；-水(用于注射的水)；-其中所述組合物的pH為5.4-6.0。優(yōu)選地，液體藥物組合物基本由下述組成：-40-約60mg/mL阿達(dá)木單抗；-5-約15mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)；-175-約225mM海藻糖；-25-約75mM氯化鈉；-水(用于注射的水)；-其中所述組合物的pH為5.7-5.9。優(yōu)選地，液體藥物組合物基本由下述組成：-50mg/mL阿達(dá)木單抗；-10mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖系統(tǒng)；-200mM海藻糖；-50mM氯化鈉；-水(用于注射的水)；其中所述組合物的pH為5.8。適當(dāng)?shù)?，該液體藥物組合物可以如任一前述實(shí)施方式所示，不同之處在于不含或含低水平的組分例如精氨酸、氨基酸、表面活性劑(任選例外聚山梨酯80)，和磷酸鹽緩沖劑/系統(tǒng)，不是通過(guò)參考濃度(即摩爾濃度)來(lái)定義而是可以參考組分相對(duì)緩沖系統(tǒng)的相應(yīng)摩爾比；組分相對(duì)阿達(dá)木單抗的相應(yīng)重量比；或組分相對(duì)阿達(dá)木單抗的相應(yīng)摩爾比來(lái)定義。根據(jù)本文相關(guān)部分所述有關(guān)具體組分的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易推斷對(duì)每個(gè)組分而言，摩爾和重量比所對(duì)應(yīng)的濃度，因?yàn)楸疚南嚓P(guān)摩爾和重量比分別對(duì)應(yīng)給定的濃度。例如，在精氨酸的情況中，“至多為0.1mM，更適當(dāng)?shù)刂炼?.01mM，最適當(dāng)?shù)貫橹炼?.001mM”的任選濃度分別對(duì)應(yīng)精氨酸與緩沖系統(tǒng)的摩爾比“至多1:150...更適當(dāng)?shù)刂炼?:1500，最適當(dāng)?shù)刂炼?:15,000”；對(duì)應(yīng)于“精氨酸與阿達(dá)木單抗的重量比至多1：3000...更適當(dāng)?shù)刂炼?：30000，最適當(dāng)?shù)貫橹炼?300,000”；和對(duì)應(yīng)于精氨酸與阿達(dá)木單抗的摩爾比至多1:3.75...更適當(dāng)?shù)刂炼?：37.5，最適當(dāng)?shù)卦?：375”。相同的對(duì)應(yīng)用于氨基酸、表面活性劑和磷酸鹽緩沖劑/系統(tǒng)。制造液體藥物組合物的方法本發(fā)明提供適當(dāng)?shù)厝缟纤龅闹苽湟后w藥物組合物的方法。所述方法適當(dāng)?shù)匕ㄒ匀魏翁囟ǖ倪m當(dāng)順序?qū)⑿纬扇绫疚亩x的液體藥物組合物所需的任何相關(guān)的組分混合在一起。本領(lǐng)域技術(shù)人員可參照用于形成液體藥物組合物(尤其是用于通過(guò)注射器注射的那些)的本領(lǐng)域公知的實(shí)施例或技術(shù)。不同的實(shí)施方式將適當(dāng)?shù)匦枰牟煌M成的組分(可能以不同的量)來(lái)進(jìn)行混合。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過(guò)參考有關(guān)該液體藥物組合物的上述公開(kāi)內(nèi)容容易地推斷出這種組合和用量。適當(dāng)?shù)兀龇椒ㄉ婕皩⑾嚓P(guān)組分適當(dāng)?shù)鼗旌显谝黄?，在稀釋?例如水)中，適當(dāng)?shù)厥顾械慕M分(基本或完全)溶解在稀釋劑中。該方法可以涉及，首先制備不含阿達(dá)木單抗的一些或所有組分(任選用部分或全部的稀釋劑)的預(yù)混合物(或預(yù)溶液)，然后阿達(dá)木單抗可以本身(任選用稀釋劑或預(yù)先溶解在一些稀釋劑中)與預(yù)混合物(或預(yù)溶液)混合以得到液體藥物組合物，或者向得到的組合中加入最終組分以提供最終的液體藥物組合物。最適當(dāng)?shù)兀A(yù)混合物含有除了阿達(dá)木單抗以外的所有組分以及任選還含有一些稀釋劑(其可被用于預(yù)溶解阿達(dá)木單抗)，適當(dāng)?shù)貙⑦_(dá)木單抗添加至混合物以提供阿達(dá)木單抗的最佳穩(wěn)定性。適當(dāng)?shù)貙⑸鲜鲱A(yù)混合物制備為最終的液體藥物制劑所需的pH。適當(dāng)?shù)?，該方法涉及形成緩沖系統(tǒng)，適當(dāng)?shù)鼐彌_系統(tǒng)包括如本文定義的緩沖劑。緩沖系統(tǒng)被適當(dāng)?shù)卦诩尤氚⑦_(dá)木單抗之前在預(yù)混合物中形成，但緩沖系統(tǒng)可任選在阿達(dá)木單抗存在下形成。緩沖系統(tǒng)可通過(guò)簡(jiǎn)單地將緩沖劑(提供現(xiàn)成的)與它的酸/堿的共軛物混合來(lái)形成(適當(dāng)?shù)匾院线m的相對(duì)量，從而提供所需的pH-這可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)理論上或通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定)。在檸檬酸鹽緩沖系統(tǒng)的情況下，這意味著混合檸檬酸鈉與檸檬酸?；蛘?，緩沖系統(tǒng)可通過(guò)向緩沖劑(如檸檬酸鈉)中加入強(qiáng)酸(例如HCl)來(lái)形成，從而原位形成酸/堿共軛物(例如檸檬酸)(同樣適當(dāng)?shù)匾院线m的相對(duì)量，以提供所需的pH)。或者，緩沖系統(tǒng)可通過(guò)向酸/堿共軛物(如檸檬酸)中加入緩沖劑(例如檸檬酸鈉)的強(qiáng)堿(如氫氧化鈉)來(lái)形成，從而原位形成緩沖劑(同樣適當(dāng)?shù)匾院线m的相對(duì)量，以提供所需的pH)。最終液體藥物組合物的預(yù)混合物的pH可通過(guò)加入所需量的強(qiáng)堿或強(qiáng)酸(或甚至一定量的緩沖劑或酸/堿共軛物)來(lái)審慎調(diào)節(jié)。在某些實(shí)施方式中，所述緩沖劑和/或緩沖系統(tǒng)預(yù)形成為單獨(dú)的混合物，而緩沖系統(tǒng)通過(guò)緩沖液交換(例如，使用滲濾，直到達(dá)到相關(guān)濃度或滲透壓)而轉(zhuǎn)移至液體藥物組合物的前體(其包含除了該緩沖劑和/或緩沖系統(tǒng)之外的一些或所有組分，適當(dāng)?shù)匕⑦_(dá)木單抗，并可能只有阿達(dá)木單抗)。若需要，之后可加入其他賦形劑從而產(chǎn)生最終液體藥物組合物。所有組分都存在時(shí)或之后可以調(diào)節(jié)pH。任何、一些或所有的組分可以在與其它成分混合之前用稀釋劑預(yù)先溶解或預(yù)混合。最終的液體藥物組合物可經(jīng)過(guò)濾，適當(dāng)?shù)爻ノ⒘Ｎ镔|(zhì)。適當(dāng)?shù)?，過(guò)濾通過(guò)尺寸等于或低于1μm，適當(dāng)?shù)?.22μm的過(guò)濾器。適當(dāng)?shù)兀^(guò)濾通過(guò)PES濾器或PVDF濾器，適當(dāng)?shù)赜?.22μmPES濾器。本發(fā)明還提供可獲自、獲自或直接獲自本文所述制造方法的液體藥物組合物。藥物遞送裝置本發(fā)明提供了一種藥物輸送裝置，其包括如本文定義的液體藥物組合物。適當(dāng)?shù)?，該藥物輸送裝置包括在其內(nèi)駐留藥物組合物的腔室。適當(dāng)?shù)兀幬镞f送裝置是無(wú)菌的。藥物輸送裝置可為小瓶、安瓿、注射器、注射筆(例如實(shí)質(zhì)上涵蓋注射器)、或靜脈袋。最適當(dāng)?shù)?，藥物遞送裝置是注射器，適當(dāng)?shù)厥亲⑸涔P。適當(dāng)?shù)兀⑸淦魇遣Ａё⑸淦?。適當(dāng)?shù)兀撟⑸淦靼ㄡ橆^，適當(dāng)?shù)貫?9G1/2”針頭。本發(fā)明提供一種制造藥物遞送裝置的方法，適當(dāng)?shù)厝绫疚乃x，該方法包括將本文所述的液體藥物組合物納入藥物遞送裝置內(nèi)。這種制造通常包括將本文所述液體藥物組合物加入注射器，適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)固定在其上的針頭。然后可移除、替換或保留所述針頭。本發(fā)明第十一方面提供可獲自、獲自或直接獲自本文所述制造方法藥物遞送裝置。包裝本發(fā)明提供了一種包裝，其包括如本文定義的液體藥物組合物。適當(dāng)?shù)?，該包裝包括如本文所述的藥物遞送裝置，適當(dāng)?shù)匕鄠€(gè)藥物遞送裝置。所述包裝可以包括用于容納一個(gè)或多個(gè)藥物遞送裝置的任何適當(dāng)?shù)娜萜?。本發(fā)明提供一種制造包裝的方法，該方法包括將本文所述的液體藥物組合物納入包裝中。適當(dāng)?shù)?，這是通過(guò)在一種或多種藥物遞送裝置內(nèi)納入所述液體藥物組合物，然后將一個(gè)或多個(gè)預(yù)填充的藥物遞送裝置納入包裝內(nèi)的容器來(lái)實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明提供可獲自、獲自或直接獲自本文所述制造方法的包裝。多部分試劑盒本發(fā)明提供了多部分試劑盒，包括藥物遞送裝置(沒(méi)有納入其中的液體藥物組合物)，如本文所定義的液體藥物組合物(任選包含在單獨(dú)的包裝或容器中)，和任選的說(shuō)明組，其具有關(guān)于液體組合物給藥(例如皮下)的指導(dǎo)。然后，用戶(hù)可以在給藥之前用液體藥物組合物(其可在小瓶或安瓿等中提供)填充藥物遞送裝置。藥物液體組合物的使用和治療方法本發(fā)明第十二方面提供治療疾病或醫(yī)學(xué)紊亂的方法；用于治療的液體藥物組合物；液體藥物組合物在制造用于治療疾病或紊亂的藥物中的應(yīng)用；治療腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病的方法；用于治療腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病的液體藥物組合物；液體藥物組合物在制造用于治療腫瘤壞死因子α(TNF-α)相關(guān)自身免疫疾病的藥物中的應(yīng)用；治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和/或幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎的方法；用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和/或幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎的液體藥物組合物；液體藥物組合物在制造用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、中度至重度慢性銀屑病和/或幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用；如本文所述。本文定義的液體藥物組合物可用于治療上述疾病或醫(yī)學(xué)紊亂中的任何一種或多種。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，液體藥物組合物用于治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、克羅恩病和銀屑病。液體藥物組合物適當(dāng)?shù)亟?jīng)胃腸外給藥，適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)皮下注射。實(shí)施例材料和設(shè)備以下材料在下述實(shí)施例中所述的制劑制備中使用：成分阿達(dá)木單抗DS單鹽酸精氨酸天冬氨酸一水合檸檬酸二水合磷酸氫二鈉鹽酸賴(lài)氨酸甘露醇二水合磷酸二氫鈉泊洛沙姆188聚山梨酯80氯化鈉檸檬酸鈉氫氧化鈉溶液30％海藻糖二水合物WFI下述一次性設(shè)備和材料在下述實(shí)施例和篩選實(shí)驗(yàn)中使用。下述包裝在隨后的實(shí)施例和篩篩選實(shí)驗(yàn)中使用。下述設(shè)備在隨后的實(shí)施例和篩篩選實(shí)驗(yàn)中使用。分析技術(shù)和方案出于下表所述原因在后續(xù)實(shí)施例和篩選實(shí)驗(yàn)中使用方案的以下分析方法：方法編號(hào)分析方法測(cè)試范圍1生物分析儀純度2DSF解折疊溫度3iCE280異構(gòu)體譜4OD蛋白質(zhì)含量5SE-HPLC聚集體測(cè)定6比濁法濁度7滲透壓溶液滲透壓8pHpH測(cè)定9亞可見(jiàn)顆粒顆粒計(jì)數(shù)對(duì)于上述各分析方法的各個(gè)方案如下依次描述，而在實(shí)施例和篩選實(shí)驗(yàn)對(duì)任何分析方法的參考使用這些方案。1.純度-生物分析儀使用2100生物分析儀。方案可以在相關(guān)的說(shuō)明書(shū)中找到。然而，這些方案已被如下進(jìn)一步改進(jìn)。溶液：凝膠-染料混合物(染色溶液)：25μL的230plus染料濃縮物加入到蛋白質(zhì)230plus凝膠基質(zhì)管中。良好渦旋，然后管降速15秒。轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)濾器并2500rpm離心至少20分鐘。溶液可投入使用。溶液儲(chǔ)存在+5±3℃不超過(guò)4周。脫色液：吸取650μL凝膠基質(zhì)加入成旋轉(zhuǎn)濾器中。2500rpm離心至少25分鐘。溶液儲(chǔ)存在+5±3℃不超過(guò)4周。樣品緩沖液：建議將200μL樣品緩沖器分成25μL的等分試樣并解凍等分試樣用于各芯片。-20℃存儲(chǔ)樣品緩沖液儲(chǔ)液和等分試樣，不超過(guò)由供應(yīng)商提供的到期日期。馬來(lái)酰亞胺儲(chǔ)液：在1mLMilliQ水中溶解23.4毫克的馬來(lái)酰亞胺(0.24M)。良好渦旋溶液。接著用MilliQ水1：4稀釋該溶液。(例如50μL儲(chǔ)液+150μLMilliQ)。稀釋的馬來(lái)酰亞胺溶液的最終濃度為60mM。(由于該溶液的穩(wěn)定性沒(méi)有可用數(shù)據(jù)，必須在每個(gè)分析階段之前新鮮制備)。OTf-溶液:為了分析阿達(dá)木單抗樣品，必須用1MDTT制備還原溶液，因此在1mlMilliQ水中溶解154.0毫克DTT。非還原溶液：樣品緩沖等分試樣(25μL)中加入1μL的MilliQ水并渦旋5秒。制備當(dāng)天之內(nèi)的使用該非還原溶液。還原溶液：樣品緩沖等分試樣(25μL)中加入相應(yīng)DTf-溶液并渦旋5秒。制備當(dāng)天之內(nèi)的使用該還原溶液。樣品制備：·以2.4-3mg/ml的濃度分析樣品?！と绻斜匾捎肕illiQ水將樣品稀釋到目標(biāo)濃度。按試劑盒指南使用還原和非還原樣品緩沖液根據(jù)試劑盒指南中的說(shuō)明書(shū)和上述內(nèi)容制備樣品。強(qiáng)烈建議使用不同于指南的更大的體積以實(shí)現(xiàn)可重復(fù)的準(zhǔn)確結(jié)果。如下報(bào)道如何制備梯度和樣品的示例：樣品制備溶液還原和非還原條件注1：對(duì)于濃度為2.4mg/mL-3.0mg/mL的IPC，樣品制備如上表所示，但樣品加熱后加入的MilliQ水的體積經(jīng)計(jì)算以達(dá)到0.1mg/ml的最終蛋白質(zhì)濃度。2.4-3.0mg/mL的濃度樣品的樣品制備的示例如下所示：樣品制備溶液還原和非還原條件注2：所有的孔都經(jīng)加載。如果樣品數(shù)目小于可用孔，空孔可用于其他重復(fù)或空白樣品。制備系統(tǒng)和芯片：-為了在分析前后清理系統(tǒng)，用600llLMilliQ水填充“電極清洗器”，并將其放入Agilent2100生物分析儀，蓋上蓋子并讓系統(tǒng)停止。無(wú)需進(jìn)一步操作。-調(diào)節(jié)芯片初始位置的底板到位置“A”和注射器夾到其中間位置。制品芯片加載梯度和樣品：-將6μL每個(gè)樣品轉(zhuǎn)移到樣品孔中并將6μL梯度加入專(zhuān)用孔，其用梯度符號(hào)明確標(biāo)注。芯片放入Agilent2100生物分析儀，5分鐘內(nèi)開(kāi)始分析。樣品組示例孔樣品量μL1空白62空白63未知樣品1重復(fù)164未知樣品1重復(fù)265未知樣品2重復(fù)166未知樣品2重復(fù)267未知樣品3重復(fù)168未知樣品3重復(fù)269當(dāng)前參考材料重復(fù)1610當(dāng)前參考材料重復(fù)26梯度梯度6數(shù)據(jù)分析和結(jié)果評(píng)價(jià)：為了獲得結(jié)果，必須執(zhí)行以下最少操作·在特定的位置放置芯片，并蓋上蓋子。·在儀器菜單中選擇分析-電泳-蛋白-蛋白230Plus?！c(diǎn)擊START開(kāi)始分析，在30分鐘內(nèi)完成?！ねㄟ^(guò)點(diǎn)擊"數(shù)據(jù)分析"顯示原始數(shù)據(jù)，列出該天進(jìn)行的所有實(shí)驗(yàn)。點(diǎn)擊感興趣的實(shí)驗(yàn)并選擇?！乃x擇的實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的凝膠會(huì)被自動(dòng)打開(kāi)?！?shù)據(jù)可以顯示為一個(gè)電泳圖譜或凝膠狀圖像。關(guān)于在電泳圖譜(以獲得純度數(shù)據(jù))中峰的積分的詳細(xì)信息包括在軟件手冊(cè)中。樣品的純度由系統(tǒng)通過(guò)自動(dòng)積分而自動(dòng)給出，但如果需要，可以應(yīng)用手動(dòng)積分。結(jié)果：在非還原條件下，結(jié)果顯示為純度％和LMW％(單體前峰的總和)。在還原條件下，結(jié)果表示為純度％，作為重鏈和輕鏈的總和。指示分子量值列于下表：阿達(dá)木單抗的指示分子量2.解折疊溫度-DSFDSF(差示掃描熒光)如下進(jìn)行：2微升Sypro橙(橙色蛋白質(zhì)凝膠染色，編號(hào)S6650，生命科學(xué)公司)于注射用水中預(yù)先稀釋500倍，然后加入到20微升藥物產(chǎn)品溶液中。加入Sypro橙后，用DP溶液(一式三份制備)填充96孔板(MicroAmp快速96-W反應(yīng)板0.1mL,編號(hào)4346907)。然后將板用保護(hù)性透明蓋密封(MicroAmp光學(xué)粘附膜，編碼4311971)，然后進(jìn)行離心以除去氣泡。然后將板插入7500快速實(shí)時(shí)AB應(yīng)用生物系統(tǒng)并在從室溫到90-100℃的溫度掃描發(fā)射概況。熒光發(fā)射的強(qiáng)度對(duì)溫度的依賴(lài)性是通常在變性溫度處(用于比較不同組合物的參數(shù))顯示反轉(zhuǎn)點(diǎn)/不連續(xù)的曲線(xiàn)。3.異構(gòu)體譜-iCE280通過(guò)iCE280的cIEF(異構(gòu)體譜)：純化并在AmiconUltra-4離心設(shè)備中離心除去鹽后(截止值為10kDa)，用純化水將樣品預(yù)稀釋至5.0mg/mL的濃度。然后用包含下述的溶液進(jìn)行第二稀釋至1.0mg/ml：甲基纖維素，Pharmalyte5-8(GE健康公司)上、Pharmalyte8-10.5(GE健康公司)、低pI標(biāo)志物7.05(蛋白樣品公司)，高PI標(biāo)志物9.50(蛋白樣品公司)和純化水。稀釋后，將樣品以10000rpm離心3分鐘。然后在轉(zhuǎn)移至玻璃插件中的150微升各樣品上進(jìn)行另一離心步驟(以7000rpm2分鐘)。用蛋白樣品公司的iCE280系統(tǒng)進(jìn)行cIEF(毛細(xì)管等電聚焦)，使用有100微米ID涂層和總長(zhǎng)50nm的毛細(xì)管筒Fc(蛋白樣品公司，產(chǎn)品編號(hào)101700/101701)。各種同種型的分離使用100mM氫氧化鈉(0.1％甲基纖維素中)作為陰極溶液和使用80mM鄰-磷酸(0.1％甲基纖維素中)作為陽(yáng)極溶液來(lái)實(shí)現(xiàn)。以預(yù)聚焦和聚焦時(shí)間分別為1和6分鐘用1500V(預(yù)聚焦)和3000V(聚焦)的電壓在280nm處獲得電泳。4.蛋白質(zhì)含量-ODOD(蛋白質(zhì)含量)測(cè)量是在最初按比重(gravimetrically)稀釋的樣品上進(jìn)行(制備一式三份獨(dú)立的稀釋液)，相關(guān)的緩沖器或安慰劑從起始濃度至約10mg/mL。在0.1徑長(zhǎng)的石英比色皿中測(cè)試稀釋溶液在280和320nm的吸光度，室溫，用雙光束分光光度計(jì)(PerkinElmer公司的Lambda35)。值1.35用作阿達(dá)木單抗的摩爾消光系數(shù)。5.聚集體測(cè)定-SE-HPLC將樣品用DPBS1×稀釋到0.5mL的濃度并注入(20微升注射體積)Tosoh的柱TSK凝膠超級(jí)SW30004.6mmIDX30.0cm編號(hào)18675中維持等度條件(流動(dòng)相：50mM的磷酸鈉+0.4M高氯酸鈉，pH6.3±0.1)。UV檢測(cè)在214nm處以0.35mL的流速進(jìn)行。每個(gè)分析運(yùn)行時(shí)間為15分鐘。在分析之前在WatersAllianceHPLC系統(tǒng)的自動(dòng)進(jìn)樣器中將樣品保持在2-8℃用于本測(cè)試。6.濁度-比濁法在室溫下用Hach的2100ANIS濁度計(jì)通過(guò)比濁法(基于由尺寸典型地<1微米的顆粒引起的光擴(kuò)散效果)測(cè)量來(lái)評(píng)估濁度。最小量的3mL溶液置于減小體積的玻璃試管總并在用一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1-7500NTU)校準(zhǔn)儀器后測(cè)試擴(kuò)散效果。7.滲透壓測(cè)定-滲透壓滲透壓基于溶液的冰點(diǎn)降低特性進(jìn)行測(cè)量。該試驗(yàn)通過(guò)用Gonotech的Osmomat030-D使50微升樣品凍結(jié)來(lái)進(jìn)行。冷凍溫度取決于該溶液的滲透壓(即，取決于存在的溶解試劑，如鹽、糖、其它離子和非離子物質(zhì)等)。8.pH的測(cè)定-pH通過(guò)室溫下用MettlerToledoSevenMultipH計(jì)進(jìn)行的電勢(shì)測(cè)量來(lái)測(cè)定pH值。9.顆粒計(jì)數(shù)-亞可見(jiàn)顆粒用純水將樣品5倍稀釋至25mL的最終體積。顆粒數(shù)目通過(guò)Aminstruments的PAMASSVSS室溫下測(cè)定，收集四個(gè)獨(dú)立運(yùn)行并針對(duì)各感興趣的尺寸分?jǐn)?shù)對(duì)結(jié)果進(jìn)行平均。實(shí)施例1–用于第一制劑篩選的制劑下面的第一組制劑(在本文中經(jīng)常引用為DoE1制劑)示于下表1中。表1：用于后續(xù)篩選試驗(yàn)1的DoE1制劑列表表1的制劑的制備從預(yù)配制、不含表面活性劑的DS材料開(kāi)始。DS的等分試樣用pH5.2的10mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖液滲濾，直到實(shí)現(xiàn)與緩沖器的三倍體積交換。然后將所需的賦形劑添加到緩沖交換DS材料，并通過(guò)加入氫氧化鈉的稀溶液調(diào)節(jié)到目標(biāo)pH。各制劑通過(guò)0.22μmPES濾器過(guò)濾。在表2中，報(bào)道了三緩沖液交換DS材料在材料回收率和滲透壓方面的結(jié)果。表2：緩沖液交換后DS材料的回收率和滲透壓檸檬酸鈉緩沖液具有優(yōu)良的回收率(≤90％)。該滲透壓值表示緩沖交換達(dá)到滿(mǎn)意的程度，而來(lái)自原始DS的物質(zhì)殘留最少。實(shí)施例2–用于第二制劑篩選的制劑下面的第二組制劑(在本文中經(jīng)常引用為DoE2制劑)示于下表3中(源自下表4)。表3：用于后續(xù)篩選試驗(yàn)2的DoE2制劑列表(制劑源自表4中具有額外指示表面活性劑的那些)表4：源自從DoE1篩選的制劑原型DoE2制劑(表3)的制備從預(yù)配制、不含表面活性劑的DS材料開(kāi)始。DS的三個(gè)等分經(jīng)滲濾，直到實(shí)現(xiàn)三倍體積交換。然后將所需的賦形劑添加到緩沖交換DS材料，并通過(guò)加入氫氧化鈉的稀溶液調(diào)節(jié)到目標(biāo)pH。各制劑通過(guò)0.22μmPES濾器過(guò)濾。在表5中，報(bào)道了緩沖液交換DS材料在滲透壓和濁度方面的結(jié)果。該滲透壓值(≤40mOsm/kg)表示緩沖交換達(dá)到滿(mǎn)意的程度，而來(lái)自原始DS的物質(zhì)殘留最少。表5：緩沖液交換后DS材料的滲透壓和濁度實(shí)施例3–用于第一和第二篩選的比較制劑為了比較和對(duì)照目的，制備或獲得三種參考制劑，包括Ref-1(由申請(qǐng)人制造的組合物)；Ref-2(來(lái)自美國(guó)的RMPUS-商購(gòu)藥品)；以及Ref-3(來(lái)自EU的RMPEU-商購(gòu)藥品)。所有這些參考制劑的具有表6中所示的組合物。表6：HumiraDP的組成篩選第一制劑篩選(DoE1)實(shí)現(xiàn)對(duì)負(fù)責(zé)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性的各種因素(如pH、存在氯化鈉、賦形劑類(lèi)型)的鑒定，并最終實(shí)現(xiàn)對(duì)進(jìn)行第二篩選(DoE2)的制劑的選擇，試圖精細(xì)調(diào)節(jié)制劑并評(píng)估表面活性劑(如聚山梨酯80)如何影響蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。兩個(gè)篩選各涉及在暴露于長(zhǎng)時(shí)間(例如，1個(gè)月)的各種水平的熱、機(jī)械和光應(yīng)力的不同制劑范圍上進(jìn)行多種分析測(cè)試，如前所述并在后文參考。這些制劑篩選收集到大量數(shù)據(jù)，提供了令人驚訝的和有價(jià)值的內(nèi)容，允許開(kāi)發(fā)新的有利制劑。兩種制劑篩選的結(jié)果如下所述。篩選實(shí)驗(yàn)1-針對(duì)實(shí)施例3的比較制劑分析和篩選實(shí)施例1制劑初步DoE篩選(步驟1)評(píng)估離子強(qiáng)度(由氯化鈉提供)、pH值和不同的穩(wěn)定劑在短期穩(wěn)定性研究的過(guò)程中對(duì)蛋白質(zhì)的影響。已應(yīng)用響應(yīng)面D-最優(yōu)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)?？紤]三個(gè)參數(shù)：-離子強(qiáng)度(由氯化鈉濃度驅(qū)動(dòng)，其在25mM-100mM的范圍中變化并設(shè)定為數(shù)字因子)；-調(diào)查pH值(范圍5.4-6.4，由檸檬酸鹽緩沖)；-穩(wěn)定劑/賦形劑(包括下述數(shù)個(gè)水平的明確因素：鹽酸賴(lài)氨酸、精氨酸+天冬氨酸、甘露醇、海藻糖二水合物)。如實(shí)施例1中所述制造這些制劑，從DS開(kāi)始而沒(méi)有聚山梨酯80并因此無(wú)表面活性劑。下面表7概括本篩選中測(cè)試的制劑。除了提出的7種制劑之外，兩個(gè)對(duì)照也經(jīng)分析作為比較：·Humira的商購(gòu)藥物產(chǎn)品“DP”(按照上述實(shí)施例3配制)·MS藥物物質(zhì)“DS”配制成Humira的商購(gòu)DP(按照上述實(shí)施例3配制)表7：通過(guò)熱應(yīng)力條件(在40℃的穩(wěn)定性)和蛋白質(zhì)解折疊溫度(DSF)的高通量測(cè)定而篩選的DoE1制劑(步驟1)的列表。制劑按照表8所報(bào)告的方案進(jìn)行測(cè)試?？紤]40℃熱應(yīng)力高達(dá)1個(gè)月。在T0進(jìn)行用DSF技術(shù)(旨在依據(jù)蛋白質(zhì)解折疊溫度測(cè)定而快速篩選)的高通量評(píng)估。表8：對(duì)初步DoE制劑上進(jìn)行的分析試驗(yàn)組(步驟1)：1個(gè)月的40℃熱應(yīng)力條件。1.1滲透壓篩選從緩沖交換DS材料開(kāi)始(5.1.1部分)的復(fù)合DoE1制劑的滲透壓列于表9。發(fā)現(xiàn)多數(shù)制劑的滲透壓的范圍內(nèi)為250-400mOsm/kg，而在最高氯化鈉濃度中觀察到略高的值。表9：在時(shí)間0記錄的DoE1篩選制劑的滲透壓(毫滲量/KQ)1.2蛋白質(zhì)含量(OD)DoE1制劑的蛋白質(zhì)含量在40℃下于時(shí)間0和1個(gè)月后測(cè)定。圖1顯示DoE1制劑(實(shí)施例1)的蛋白質(zhì)含量(mg/mL)的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和4周后(紅色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。結(jié)果在圖1所示，表明隨時(shí)間無(wú)顯著變化。所有品系的濃度為目標(biāo)50mg/mL。1.3聚集性(SE-HPLC)圖2顯示SE-HPLC所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的聚集％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(綠色柱)和4周(橙色柱)后，制劑經(jīng)40℃加熱。40℃下隨著穩(wěn)定性通過(guò)SE-HPLC觀察到的總聚集體以圖形表示在圖2中。在所有的制劑中觀察到最小的聚集增加。然而，即使是1個(gè)月后，所有聚集水平低于1％。1.4片段化(生物分析儀)圖3顯示SE-HPLC所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的片段％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(深色柱，時(shí)間＝0)以及2周(粉色柱)和4周(淺綠柱)后，制劑經(jīng)40℃加熱。在圖3中，報(bào)道生物分析儀確定的隨時(shí)間的片段變化。在更酸性pH的制劑趨向于經(jīng)歷更快的片段化速率。此外，在該pH范圍內(nèi)氨基酸的存在可顯著惡化穩(wěn)定性概況。氨基酸物質(zhì)的不利影響也在pH5.4被證實(shí)(制劑12)。在pH>5.0和存在糖/多元醇時(shí)，所有的制劑(包括參考)均相當(dāng)(40℃1個(gè)月后碎片低于1％)。數(shù)據(jù)用ANOVA進(jìn)行分析，它證實(shí)了pH值因子的統(tǒng)計(jì)顯著性(p值<0.001)，也表明pH值>5.0應(yīng)針對(duì)性減少片段。未發(fā)現(xiàn)范圍25-100mM的氯化鈉是穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素。1.5pH篩選表10示出了DoE1制劑(實(shí)施例1)與參考標(biāo)準(zhǔn)(代表比較物制劑)在任意開(kāi)始點(diǎn)的pH(時(shí)間＝0)和制劑在40℃加熱2周與4周之后的pH。從表10可以看出，沒(méi)有觀察到從目標(biāo)pH的偏差。表10：40℃時(shí)隨著穩(wěn)定性測(cè)定的DoE1篩選制劑的pH1.6解折疊溫度(DSF)DSF是高通量方法，其通過(guò)隨著施加到樣品上的溫度梯度而增加與熒光探針的相互作用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)的解折疊溫度。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)開(kāi)始解折疊，它會(huì)逐步暴露的疏水點(diǎn)至溶劑中，吸引熒光探針，后者將從溶液中的游離狀態(tài)(非熒光)變?yōu)榕c蛋白質(zhì)的結(jié)合狀態(tài)(通過(guò)疏水相互作用)，因此增加熒光信號(hào)程度。從熒光信號(hào)的評(píng)價(jià)可能確定S形曲線(xiàn)的中點(diǎn)，它表示各制劑的轉(zhuǎn)變點(diǎn)。預(yù)計(jì)轉(zhuǎn)變點(diǎn)越高，制劑對(duì)熱應(yīng)力的抗性越高。在DoE1篩選制劑上進(jìn)行的評(píng)估的結(jié)果列于圖4。圖4顯示DSF所確定的DoE1制劑(實(shí)施例1)的解折疊溫度(℃)的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)。篩選實(shí)驗(yàn)1的結(jié)論從生物分析儀和DSF測(cè)試中得到的結(jié)果通過(guò)ANOVA模型就響應(yīng)面進(jìn)行組合評(píng)估，以確定可能保證最高熱穩(wěn)定性的蛋白質(zhì)的最佳組合物。推薦的組合物的列于表12，其還比較所得的原型制劑與HumiraRMP在40℃1個(gè)月以上的解折疊溫度和片段化改變方面的性能。制劑B是通過(guò)軟件外推的，因此表中包含的數(shù)值是理論性的。比較這些制劑和RMP可以得出結(jié)論，這些原型制劑響應(yīng)熱應(yīng)力的行為與RMP觀察的相當(dāng)。表12：DoE1實(shí)驗(yàn)的結(jié)果：用于二次篩選的推薦組合物多少有些出人意料的是，含有海藻糖二水合物作為唯一穩(wěn)定劑的制劑表現(xiàn)極為出色，尤其是在片段抑制、解折疊抑制和pH維持方面。這種基于海藻糖的制劑也表現(xiàn)出在聚集和沉淀方面良好的性能。海藻糖是穩(wěn)定劑的強(qiáng)有力的候選，特別其自身的抗氧化性能賦予阿達(dá)木單抗制劑進(jìn)一步長(zhǎng)期的化學(xué)穩(wěn)定性(特別對(duì)于氧化和/或光氧化)，將非常有前景。此外，海藻糖可以單獨(dú)使用，但仍然表現(xiàn)出優(yōu)異的性能，被認(rèn)為是特別令人鼓舞的，并且為使用更少的組分制備不太復(fù)雜的制劑鋪平了道路-這將繼而減少與生產(chǎn)相關(guān)的阿達(dá)木單抗藥物產(chǎn)品相關(guān)的加工和成本。因此，這些基于海藻糖的制劑用于第二輪篩選實(shí)驗(yàn)以精細(xì)調(diào)節(jié)制劑。篩選實(shí)驗(yàn)2-針對(duì)實(shí)施例3的比較制劑分析和篩選實(shí)施例2制劑上一篩選確定制劑原型(表12)。由于上一步驟中沒(méi)有加入表面活性劑，第二步驟目的是篩選一系列水平的混配聚山梨酯80表面活性劑(范圍：0–1mg/mL)，從而評(píng)估是否需要添加表面活性劑來(lái)有利于蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。表3(實(shí)施例2)概括了研究的第二個(gè)步驟的設(shè)計(jì)，并列出在第二次篩選運(yùn)行中測(cè)試的制劑(DoE2制劑)。典型地，已觀察到表面活性劑對(duì)比機(jī)械應(yīng)力引起的聚集，并且已經(jīng)因此執(zhí)行了振蕩應(yīng)力測(cè)試從而評(píng)估聚山梨酯80如何影響蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和響應(yīng)振蕩。作為第1步驟，還評(píng)估在實(shí)施例3中記載的參考組合物，從而提供新制劑的開(kāi)發(fā)基準(zhǔn)。在該區(qū)域制劑上進(jìn)行的分析的完整列表示于表13。在該第二篩選中，相應(yīng)制劑暴露于三種不同類(lèi)型的應(yīng)力、熱、機(jī)械和光。表13：分析測(cè)試組在DoE2制劑上進(jìn)行(步驟2)：1個(gè)月的40℃熱應(yīng)力條件(A)，200rpm振蕩應(yīng)力(B)和按照ICHQ1B的光暴露應(yīng)力(C)。A.40℃熱應(yīng)力B.振蕩應(yīng)力條件C.765W/m2光暴露7小時(shí)(ICHQ1B)。熱應(yīng)力測(cè)試通過(guò)簡(jiǎn)單地在規(guī)定的溫度下加熱相關(guān)制劑的樣品持續(xù)規(guī)定的時(shí)間(通常為2周或4周/1個(gè)月)來(lái)進(jìn)行。機(jī)械應(yīng)力試驗(yàn)通過(guò)簡(jiǎn)單地在室溫下機(jī)械地以200rpm振蕩相關(guān)制劑的樣品持續(xù)規(guī)定的期間(通常為24小時(shí)或48小時(shí))來(lái)進(jìn)行。光應(yīng)力試驗(yàn)通過(guò)簡(jiǎn)單地將相關(guān)制劑的樣品暴露于765W/m2光(按照目前歐洲藥品管理局有關(guān)新活性物質(zhì)和醫(yī)藥產(chǎn)品光穩(wěn)定性測(cè)試的ICHQ1B的指南)持續(xù)7小時(shí)來(lái)進(jìn)行。2.1滲透壓所述DoE2篩選制劑的滲透壓示于表14。包括在范圍378–401mOsm/kg內(nèi)的值可能高估，這是由于海藻糖二水合物的存在可導(dǎo)致粘度的一些增加，影響溶液的近冰點(diǎn)和滲透壓。這通過(guò)相對(duì)于其他測(cè)試制劑進(jìn)行測(cè)量來(lái)確認(rèn)，其在滲透壓測(cè)試之前用WFI3倍稀釋?zhuān)瑥亩档驼扯龋核羞@些試劑的實(shí)際滲透壓<350mOsm/kg。表14：DoE2篩選制劑的滲透壓(測(cè)試的未稀釋)2.2蛋白質(zhì)含量(OD)時(shí)間0處的所有DoE2制劑的蛋白含量與50mg/mL的蛋白質(zhì)濃度目標(biāo)一致(表15)。表15：DoE2篩選制劑的蛋白質(zhì)含量(OD)(測(cè)試的未稀釋)2.3熱應(yīng)力的聚集體(SE-HPLC)SE-HPLC所測(cè)的總聚集體變化示于圖5。圖5顯示SE-HPLC所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的聚集％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(紅色柱，時(shí)間＝0)以及2周(綠色柱)和4周后(紫色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。觀察到所有制劑發(fā)生最小的變化，40℃1個(gè)月后總聚集體低于1％。DoE2篩選制劑的性能與RMP材料的性能相當(dāng)。2.4熱應(yīng)力的片段化(生物分析儀)生物分析儀所測(cè)的片段的變化示于圖6。圖6顯示Bioanalyzer所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的片段％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。在檸檬酸鈉中觀察到的變化與RMP中所觀察到的相當(dāng)。三個(gè)制劑之間觀察到的差別可忽略不計(jì)。2.5熱應(yīng)力的異構(gòu)體譜(iCE280)三種試劑40℃持續(xù)1個(gè)月的主峰和酸性簇變化分別示于圖7和圖8。圖7顯示iCE280分析所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的主峰異構(gòu)體譜的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。圖8顯示iCE280分析所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的酸性簇異構(gòu)體譜的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。酸性簇方面的結(jié)果與針對(duì)主峰的觀察一致。2.6熱應(yīng)力的pH篩選制劑在40℃加熱一段期間的DoE2制劑(實(shí)施例2)的pH變化示于表16。如表6所示，在DoE2-5中觀察到了pH的降低。這可能是由于樣本中的污染/細(xì)菌增殖而造成的。表16：DoE2篩選：pH值(40℃熱應(yīng)力)2.7熱應(yīng)力的濁度(比濁法)圖9顯示比濁法所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的濁度的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及2周(紅色柱)和4周后(綠色柱)，制劑經(jīng)40℃加熱。時(shí)間0處三種制劑的濁在通常乳白色溶液的范圍(6-18NTU)。關(guān)于典型濁度19-52NTU的原始DS材料，無(wú)菌過(guò)濾后的DP溶液相當(dāng)澄清。2.8機(jī)械應(yīng)力的聚集體(SE-HPLC)圖10顯示SE-HPLC所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的聚集％的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及24小時(shí)(紅色柱)和48小時(shí)后(綠色柱)，制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)。SE-HPLC所測(cè)的總聚集體的變化示于圖10。檸檬酸鹽緩沖液中的所有制劑均觀察到最小的變化(+0.1％)。2.9機(jī)械應(yīng)力的片段化(生物分析儀)圖11顯示Bioanalyzer所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的片段化％的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及24小時(shí)(紅色柱)和48小時(shí)后(綠色柱)，制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)。生物分析儀所測(cè)的片段的變化示于圖11。觀察到最小的變化，所有記錄值等于或低于0.5％。室溫振蕩48小時(shí)后，所有樣品顯示出范圍0.2–0.4％的片段化。機(jī)械振蕩后沒(méi)有突出顯示趨向片段化的趨勢(shì)。2.10機(jī)械應(yīng)力的pH篩選制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)一段期間的DoE2制劑(實(shí)施例2)的pH變化示于表17。沒(méi)有觀察到變化。表17：DoE2篩選:pH(機(jī)械振蕩)2.11機(jī)械應(yīng)力的濁度(比濁法)圖12顯示比濁法所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的濁度的柱狀圖，在任意起始點(diǎn)(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)以及24小時(shí)(紅色柱)和48小時(shí)后(綠色柱)，制劑經(jīng)機(jī)械攪動(dòng)(振蕩)。沒(méi)有觀察到變化。2.12光應(yīng)力的聚集體(SE-HPLC)圖13顯示SE-HPLC所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的聚集％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。還用在相同的條件下處理的Humira樣品(來(lái)自US和EU)來(lái)進(jìn)行比較。在RMP中，光暴露后聚集增加多達(dá)9–15％(在時(shí)間0聚集體低于1％)。所有DoE2制劑表現(xiàn)出較低的或相當(dāng)?shù)脑黾?，從而更好?類(lèi)似地耐受熱應(yīng)力。更具體地：·檸檬酸鹽緩沖液中的制劑：4.2→6.1％光暴露后的總聚集2.13光應(yīng)力的片段化(生物分析儀)圖14顯示生物分析儀所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的片段化％的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。突出顯示了最小增加(暴露后最多+0.3％)。7小時(shí)暴露后所有片段量遠(yuǎn)低于1％(圖14)。2.14光應(yīng)力的異構(gòu)體譜(iCE280)圖15顯示iCE280分析儀所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的主峰異構(gòu)體譜的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。圖16顯示iCE280分析儀所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的酸性簇異構(gòu)體譜的柱狀圖，伴有參考標(biāo)記(代表比較物制劑)，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)。在HumiraRMP中，光暴露決定顯著的效果：最相關(guān)地，觀察到與光氧化現(xiàn)象相關(guān)的主峰豐度降低(約-9％)并且同時(shí)酸性簇出現(xiàn)增加(高達(dá)+15％)。檸檬酸鹽緩沖液中的制劑顯著提高蛋白質(zhì)的抗降解現(xiàn)象：主峰豐度減少大約-3.5％或更低，酸性簇得分增加最高+4％。2.15光應(yīng)力的濁度(比濁法)圖17顯示比濁法所確定的DoE2制劑(實(shí)施例2)的濁度的柱狀圖，在接觸光之前(藍(lán)色柱，時(shí)間＝0)和以765W/m2接觸光7小時(shí)之后(紅色柱)?；緵](méi)有觀察到變化。2.16光應(yīng)力的pH篩選制劑于765W/m2光暴露7小時(shí)的DoE2制劑(實(shí)施例2)的pH變化示于表18。沒(méi)有觀察到變化。表18：DoE2篩選:pH(光暴露)篩選實(shí)驗(yàn)2的結(jié)論基于關(guān)于熱、機(jī)械和光應(yīng)力所收集的數(shù)據(jù)可得到如下結(jié)論：pH5.8的10mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖液的制劑(DoE2–4,DoE2–5,DoE2–6)：-受熱應(yīng)力后，突出顯示與Humira的性能相當(dāng)。-機(jī)械振蕩后聚集有少量增加。-當(dāng)經(jīng)過(guò)連續(xù)(7小時(shí))照射時(shí)，相對(duì)Humira有更好的性能?；谠诰彌_劑/pH、穩(wěn)定劑、等張劑(氯化鈉)量和表面活性劑(聚山梨酯80)水平方面變化的不同制劑中的篩選工作，鑒定到的在不同應(yīng)力條件(熱、機(jī)械、光)時(shí)顯示與Humira有相當(dāng)或甚至改善的特性的最佳組合物為：*對(duì)應(yīng)于10mM檸檬酸鈉/檸檬酸緩沖液；**對(duì)應(yīng)于200mM；***對(duì)應(yīng)于50mM該制劑可容易地用29G1/2”針頭納入預(yù)填充玻璃注射器中?？s寫(xiě)DoE實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)DP藥品DS藥物DSF差示掃描熒光FT-IR傅里葉變換紅外光譜MS-A默克雪蘭諾-歐伯訥MS-V默克雪蘭諾-沃韋OD光密度PES聚醚砜rpm每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)RT室溫SE-HPLC尺寸排阻高效液相色譜法SMI概括制造說(shuō)明SOP標(biāo)準(zhǔn)操作程序WI工作說(shuō)明當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3