相關(guān)申請本申請要求于2014年6月13日提交的美國臨時申請序列號62/012,109和于2014年9月4日提交的美國臨時申請序列號62/045,808的優(yōu)先權(quán)權(quán)益。上述申請各自的公開內(nèi)容在此以其整體并入。發(fā)明背景成熟的紅血細(xì)胞或紅細(xì)胞負(fù)責(zé)在脊椎動物的循環(huán)系統(tǒng)中的氧運輸。紅血細(xì)胞含有高濃度的血紅蛋白，此類蛋白質(zhì)在相對高的氧分壓（po2）下結(jié)合肺中的氧，并且以相對低的po2將氧輸送到身體區(qū)域。成熟紅血細(xì)胞在稱為紅細(xì)胞生成的過程中由多能造血干細(xì)胞產(chǎn)生。出生后紅細(xì)胞生成主要在骨髓和脾的紅髓中發(fā)生。不同信號途徑的協(xié)同作用控制細(xì)胞增殖、分化、存活和死亡的平衡。在正常條件下，紅血細(xì)胞以在體內(nèi)維持恒定紅細(xì)胞質(zhì)量的速率產(chǎn)生，并且產(chǎn)生可響應(yīng)不同刺激（包括增加或減少的氧張力或組織需求）而增加或減少。紅細(xì)胞生成的過程開始于譜系定向前體細(xì)胞的形成，并且通過一系列不同的前體細(xì)胞類型進(jìn)行。隨著網(wǎng)織紅細(xì)胞釋放到血流中并失去其線粒體和核糖體，同時采取成熟紅血細(xì)胞的形態(tài)，發(fā)生紅細(xì)胞生成的最后階段。血液中升高水平的網(wǎng)織紅細(xì)胞或升高的網(wǎng)織紅細(xì)胞:紅細(xì)胞比率指示紅血細(xì)胞生產(chǎn)率增加。一般而言，貧血是當(dāng)受試者的血液缺乏足夠的健康紅血細(xì)胞或小于正常數(shù)量的血紅蛋白時發(fā)展的狀況。當(dāng)可能起因于一個或多個血紅蛋白亞基中的畸形的紅血細(xì)胞的氧結(jié)合能力減少時，也可以診斷貧血。由于人類細(xì)胞依靠氧氣來存活，貧血可以導(dǎo)致廣泛范圍的臨床并發(fā)癥，包括例如組織損傷。例如，據(jù)報道潰瘍是慢性貧血病癥，特別是在溶血性貧血例如鐮狀細(xì)胞病和地中海貧血中的最常見的皮膚表現(xiàn)之一。參見例如keast等人（2004）ostomywoundmanage.，50（10）：64-70；trent等人（2004）advskinwoundcare，17（8）：410-416；j.r.eckman（1996）hematoloncolclinnortham.，10（6）：1333-1344；和rassi等人（2008）pediatricannals37（5）：322-328。關(guān)于貧血患者中的潰瘍形成的根本機(jī)制尚未完全定義。然而，認(rèn)為多重貧血并發(fā)癥促進(jìn)潰瘍發(fā)展，包括例如缺血、一氧化氮生物利用度減少、血管阻塞、血栓形成和缺氧。同上。在貧血患者中的潰瘍愈合通常是緩慢的過程，并且此類患者也處于復(fù)發(fā)性潰瘍的高風(fēng)險。參見例如keast等人（2004）ostomywoundmanage.，50（10）：64-70；trent等人（2004）advskinwoundcare，17（8）：410-416；j.r.eckman（1996）hematoloncolclinnortham.，10（6）：1333-1344；和rassi等人（2008）pediatricannals37（5）：322-328。此外，大多數(shù)療法在治療貧血患者中發(fā)生的潰瘍方面具有有限的成功。因此，本發(fā)明的目的是提供用于治療或預(yù)防與貧血相關(guān)的潰瘍的替代方法。發(fā)明概述部分地，本發(fā)明證明actrii拮抗劑可以用于改變患有貧血的患者中的不同血液參數(shù)（例如紅血細(xì)胞水平、血紅蛋白水平、鐵水平、膽紅素水平、氮水平等），以及治療與貧血相關(guān)的并發(fā)癥，包括例如潰瘍。特別地，本發(fā)明證明施用gdf捕獲（gdftrap）多肽，其為就本seqidno:1而言在位置79處具有酸性氨基酸的actriib多肽的可溶形式，增加在患有不同類型的溶血性貧血，特別是血紅蛋白病性貧血、地中海貧血和鐮狀細(xì)胞病的患者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平。令人驚訝的是，除直接影響不同紅血細(xì)胞參數(shù)之外，公開的actrii拮抗劑改善了與貧血相關(guān)的其他并發(fā)癥。例如，在患有地中海貧血的人類患者中，使用gdf捕獲蛋白的治療顯示增加血紅蛋白水平并促進(jìn)皮膚（皮膚的）潰瘍的傷口愈合。在一些情況下，這些相關(guān)并發(fā)癥的改善對于患者健康和生活質(zhì)量具有與根本性貧血的治療相同或更大的重要性。因此，在某些實施方案中，本發(fā)明提供了使用一種或多種actrii拮抗劑來增加有此需要的患者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平，并且治療或預(yù)防與這些患者中的低紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平相關(guān)的一種或多種并發(fā)癥的方法。特別地，本發(fā)明提供了通過施用一種或多種actrii拮抗劑，用于治療或預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥（hereditarystomacytosis）、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了通過施用一種或多種actrii拮抗劑，用于治療有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了通過施用一種或多種actrii拮抗劑，用于預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療或預(yù)防患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來預(yù)防患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。特別地，本發(fā)明的方法部分涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療或預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。例如，本發(fā)明部分涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療或預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施例中，本發(fā)明涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療或預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來治療患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及通過施用一種或多種actrii拮抗劑來預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在某些方面，一種或多種actrii拮抗劑可以與一種或多種現(xiàn)有的支持療法組合用于治療或預(yù)防潰瘍和/或治療貧血（例如用于治療鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血等的支持療法）。此類支持療法的例子是本領(lǐng)域眾所周知的并且也在本文中描述。在一些實施方案中，受試者是具有貧血的輸血依賴性受試者。在一些實施方案中，受試者是患有貧血的非輸血依賴性受試者。部分地，本發(fā)明提供了用一種或多種actrii拮抗劑來治療與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是治療或預(yù)防皮膚（皮膚的）潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了用一種或多種actrii拮抗劑來治療與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是治療皮膚（皮膚的）潰瘍的方法。部分地，本發(fā)明提供了用一種或多種actrii拮抗劑來預(yù)防與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是預(yù)防皮膚（皮膚的）潰瘍的方法。本發(fā)明的actrii拮抗劑包括例如可以抑制actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活（例如經(jīng)由細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)例如smad1、2、3、5和/或8的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活）的藥物；可以抑制一種或多種actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、bmp6、bmp7、nodal等）例如結(jié)合和/或激活actrii受體的藥物；抑制actrii配體和/或actrii受體的表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞分泌或其組合）的藥物；以及可以抑制actrii信號傳導(dǎo)途徑的一種或多種細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)（例如smad1、2、3、5和/或8）的藥物。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及用于在有此需要的患者中增加紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平，并且治療或預(yù)防與這些患者中的低紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平相關(guān)的一種或多種并發(fā)癥的方法中使用的一種或多種actrii拮抗劑。特別地，本發(fā)明提供了用于在治療或預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的actrii拮抗劑，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了用于在治療有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的actrii拮抗劑，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了用于在預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的actrii拮抗劑，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑用于在治療或預(yù)防患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑用于在治療患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑用于在預(yù)防患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用。特別地，本發(fā)明的actrii拮抗劑部分用于在治療或預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑用于在治療患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑用于在預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用。例如，本發(fā)明部分涉及用于在治療或預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及用于在治療患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在一些實施例中，本發(fā)明涉及用于在預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及用于在治療或預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及用于在治療患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在一些實施方案中，本發(fā)明涉及用于在預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在某些方面，一種或多種actrii拮抗劑可以與一種或多種現(xiàn)有的支持療法組合用于治療或預(yù)防潰瘍和/或治療貧血（例如用于治療鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血等的支持療法）。此類支持療法的例子是本領(lǐng)域眾所周知的并且也在本文中描述。部分地，本發(fā)明提供了用于在治療與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是治療或預(yù)防皮膚（皮膚的）潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了用于在用一種或多種actrii拮抗劑治療與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是治療皮膚（皮膚的）潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。部分地，本發(fā)明提供了用于在預(yù)防與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是預(yù)防皮膚（皮膚的）潰瘍中使用的一種或多種actrii拮抗劑。本發(fā)明的actrii拮抗劑包括例如可以抑制actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活（例如經(jīng)由細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)例如smad1、2、3、5和/或8的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活）的藥物；可以抑制一種或多種actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、bmp6、bmp7、nodal等）例如結(jié)合和/或激活actrii受體的藥物；抑制actrii配體和/或actrii受體的表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞分泌或其組合）的藥物；以及可以抑制actrii信號傳導(dǎo)途徑的一種或多種細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)（例如smad1、2、3、5和/或8）的藥物。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于增加有此需要的患者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平，并且用于治療或預(yù)防與這些患者中的低紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平相關(guān)的一種或多種并發(fā)癥。特別地，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療或預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍，所述受試者具有低水平的紅血細(xì)胞和/或血紅蛋白，或者在其他方面被分類為患有貧血的受試者[例如，遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）和陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥]。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療或預(yù)防患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于預(yù)防患有溶血性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。特別地，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑部分用于治療或預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。例如，本發(fā)明部分涉及一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療或預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑通過施用一種或多種actrii拮抗劑用于治療患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施例中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療或預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在某些方面，一種或多種actrii拮抗劑可以與一種或多種現(xiàn)有的支持療法組合用于治療或預(yù)防潰瘍和/或治療貧血（例如用于治療鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血等的支持療法）。此類支持療法的例子是本領(lǐng)域眾所周知的并且也在本文中描述。部分地，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于治療與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是治療或預(yù)防皮膚（皮膚的）潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于與一種或多種actrii拮抗劑治療與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是治療皮膚（皮膚的）潰瘍。部分地，本發(fā)明提供了一種或多種actrii拮抗劑在制備藥物中的用途，所述藥劑用于預(yù)防與貧血相關(guān)的潰瘍，特別是預(yù)防皮膚（皮膚的）潰瘍。本發(fā)明的actrii拮抗劑包括例如可以抑制actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活（例如經(jīng)由細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)例如smad1、2、3、5和/或8的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活）的藥物；可以抑制一種或多種actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、bmp6、bmp7、nodal等）例如結(jié)合和/或激活actrii受體的藥物；抑制actrii配體和/或actrii受體的表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞分泌或其組合）的藥物；以及可以抑制actrii信號傳導(dǎo)途徑的一種或多種細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)（例如smad1、2、3、5和/或8）的藥物。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑是結(jié)合和/或抑制gdf11和/或gdf8的藥物（例如抑制gdf11和/或gdf8介導(dǎo)的actriia激活和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的藥物）。此類藥物統(tǒng)稱為gdf-actrii拮抗劑。任選地，此類gdf-actrii拮抗劑可以進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種。因此，在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用一種或多種actrii拮抗劑（包括例如可溶性actriia多肽、可溶性actriib多肽、gdf捕獲多肽、抗actriia抗體、抗actriib抗體、抗actrii配體抗體（例如抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗激活素a抗體、抗激活素b抗體、抗激活素ab抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體和抗nodal抗體）、actriia的小分子抑制劑、actriib的小分子抑制劑、一種或多種actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、bmp6、bmp7、nodal等）的小分子抑制劑、actriia的抑制劑核苷酸、actriib的抑制劑核苷酸、一種或多種actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、bmp6、bmp7、nodal等）的抑制劑核苷酸或其組合的方法，以增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防患有貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑結(jié)合激活素a或激活素b。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑結(jié)合激活素a。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑結(jié)合激活素b。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a（例如激活素a介導(dǎo)的actriia的激活和/或actriib信號傳導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)）。部分地，本發(fā)明證明包含結(jié)合并抑制gdf11活性（例如gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)）的變體/細(xì)胞外（可溶性）actriib結(jié)構(gòu)域的actrii拮抗劑，可以用于增加體內(nèi)的紅血細(xì)胞水平，治療起因于不同狀況/病癥的貧血，以及治療患有貧血的患者中的皮膚潰瘍。因此，在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑[例如，增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平的方法，治療有此需要的受試者的貧血的方法，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥（特別是潰瘍）的方法等]是結(jié)合和/或抑制gdf11（例如gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）的可溶性actrii多肽（例如可溶性actriia或actriib多肽）。盡管可溶性actriia和可溶性actriibactrii拮抗劑可以通過gdf11拮抗作用以外的機(jī)制影響紅血細(xì)胞形成和潰瘍，但是本發(fā)明仍然證明就本文公開的方法而言，可以基于gdf11拮抗作用或actrii拮抗作用或兩者選擇期望的治療劑。任選地，此類可溶性actrii多肽拮抗劑可以進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制gdf8（例如抑制gdf8介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。在一些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf11和/或gdf8的本發(fā)明的可溶性actriia和actriib多肽可以進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制選自下述的一種或多種另外的actrii配體：激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal。在某些方面，本發(fā)明提供了其為變體actrii多肽（例如actriia和actriib多肽）的gdf捕獲物，包括具有氨基和羧基末端截短和/或其他序列改變（一個或多個氨基酸取代、添加、缺失或其組合）的actrii多肽。任選地，本發(fā)明的gdf捕獲物可以被設(shè)計為優(yōu)先拮抗actrii受體的一種或多種配體，例如gdf8（也稱為肌肉生長抑制素）、gdf11、nodal、bmp6和bmp7（也稱為op-1）。如本文所公開的，gdf捕獲物的例子包括衍生自actriib的一組變體，其具有對激活素特別是激活素a極大縮小的親和力。這些變體顯示出紅血細(xì)胞的期望作用，同時對其他組織的降低作用。此類變體的例子包括在對應(yīng)于seqidno:1的位置79的位置處具有酸性氨基酸[例如天冬氨酸（d）或谷氨酸（e）]的那些。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法[例如，增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平的方法，治療有此需要的受試者中的貧血的方法，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥（特別是潰瘍）的方法]使用的gdf捕獲物結(jié)合和/或抑制gdf11。任選地，此類gdf捕獲物可以進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制gdf8。在一些實施方案中，結(jié)合和/或和/或抑制gdf11和/或gdf8的gdf捕獲物可以進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制一種或多種另外的actrii配體（例如激活素b、激活素e、bmp6、bmp7和nodal）。在一些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的gdf捕獲物基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a（例如激活素a介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。在某些實施方案中，gdf捕獲物多肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含下述、由下述組成或基本上由下述組成：seqidno:36、37、41、44、45、50或51的氨基酸序列，以及與前述中的任何至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%等同的多肽。在其他實施方案中，gdf捕獲物多肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含下述、由下述組成或基本上由下述組成：seqidno:2、3、4、5、6、10、11、22、26、28、29、31或49的氨基酸序列，以及與前述中的任何至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%等同的多肽。在另外其他實施方案中，gdf捕獲物多肽包含氨基酸序列，其包含seqidno:2、3、4、5、6、29、31或49的氨基酸序列，以及與前述中的任何至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%等同的多肽，其中對應(yīng)于seqidno:1、4或50中的79的位置是酸性氨基酸。gdf捕獲物可以包括天然actrii多肽的功能片段，例如包含選自seqidno:1、2、3、4、5、6、9、10、11或49的序列的至少10、20或30個氨基酸的多肽，或缺乏c末端1、2、3、4、5或10至15個氨基酸且缺乏在n末端處的1、2、3、4或5個氨基酸的seqidno:2、5、10、11或49的序列。在一些實施方案中，多肽包含相對于seqidno:2或5在n末端處2至5個氨基酸以及在c末端處不超過3個氨基酸的截短。在一些實施方案中，用于根據(jù)本文公開的方法使用的gdf捕獲物由seqidno:36的氨基酸序列組成或基本上由seqidno:36的氨基酸序列組成。任選地，包含改變的actrii配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物具有關(guān)于激活素a結(jié)合的kd與關(guān)于gdf11和/或gdf8結(jié)合的kd的比率，其相對于關(guān)于野生型配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的比率大至少2-、5-、10-、20、50-、100-或甚至1000倍。任選地，包含改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物具有關(guān)于抑制激活素a的ic50與關(guān)于抑制gdf11和/或gdf8的ic50的比率，其相對于野生型actrii配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域大至少2-、5-、10-、20、25-、50-、100-或甚至1000倍。任選地，包含改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物以比關(guān)于抑制激活素a的ic50小至少2、5、10、20、50或甚至100倍的ic50抑制gdf11和/或gdf8。這些gdf捕獲物可以是包括免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域（野生型或突變型）的融合蛋白。在某些情況下，主題可溶性gdf捕獲物是gdf8和/或gdf11的拮抗劑（抑制劑）。在某些方面，本發(fā)明提供了gdf捕獲物，其是包含改變的配體結(jié)合（例如gdf11結(jié)合）結(jié)構(gòu)域的可溶性actriib多肽。具有改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物可以包含例如在人actriib的氨基酸殘基例如e37、e39、r40、k55、r56、y60、a64、k74、w78、l79、d80、f82和f101（編號相對于seqidno:1）處的一個或多個突變。任選地，相對于actriib受體的野生型配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域，改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以具有對于配體例如gdf8/gdf11增加的選擇性。為了舉例說明，在本文中證明這些突變增加改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域?qū)τ趃df11（并且因此，推測gdf8）超過激活素的選擇性：k74y、k74f、k74i、l79d、l79e和d80i。下述突變具有逆轉(zhuǎn)效應(yīng)，增加激活素結(jié)合超過gdf11的比率：d54a、k55a、l79a和f82a?？赏ㄟ^包含“尾部”區(qū)或推測為非結(jié)構(gòu)化接頭區(qū)，并且還通過使用k74a突變，來增加總體（gdf11和激活素）結(jié)合活性。引起配體結(jié)合親和力整體減少的其他突變包括：r40a、e37a、r56a、w78a、d80k、d80r、d80a、d80g、d80f、d80m和d80n。突變可以組合以實現(xiàn)所需效應(yīng)。例如，影響gdf11:激活素結(jié)合比率的許多突變對配體結(jié)合具有總體負(fù)面作用，并且因此，這些突變可以與一般增加配體結(jié)合以產(chǎn)生具有配體選擇性的改善結(jié)合蛋白的突變組合。在一個示例性實施方案中，gdf捕獲物是包含l79d或l79e突變的actriib多肽，任選與另外的氨基酸取代、添加或缺失組合。在某些實施方案中，根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑是actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽。一般而言，此類actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物多肽是可溶性多肽，其包含衍生自seqidno:1、4或49的actriib序列的部分/結(jié)構(gòu)域，特別是衍生自seqidno:1、4或49的actriib序列的細(xì)胞外、配體結(jié)合部分/結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸21-29中的任何一個（例如21、22、23、24、25、26、27、28或29）處開始[任選地在seqidno:1或4的22-25（例如22、23、24或25）處開始]，并且在seqidno:1或4的氨基酸109-134中的任何一個（例如109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸20-29中的任何一個（例如20、21、22、23、24、25、26、27、28或29）處開始[任選地在seqidno:1或4的22-25（例如22、23、24或25）處開始]，并且在seqidno:1或4的氨基酸109-133中的任何一個（例如109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸20-24中的任何一個（例如20、21、22、23或24）處開始[任選地在seqidno:1或4的22-25（例如22、23、24或25）處開始]，并且在seqidno:1或4的氨基酸109-133中的任何一個（例如109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸21-24中的任何一個（例如21、22、23或24）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸109-134中的任何一個（例如109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸20-24中的任何一個（例如20、21、22、23或24）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸118-133中的任何一個（例如118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸21-24中的任何一個（例如21、22、23或24）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸118-134中的任何一個（例如118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸20-24中的任何一個（例如20、21、22、23或24）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸128-133中的任何一個（例如128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或39的氨基酸20-24中的任一個（例如20、21、22、23或24）處開始，并且在seqidno:1或39的氨基酸128-133中的任一個（例如128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸21-29中的任何一個（例如21、22、23、24、25、26、27、28或29）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸118-134中的任何一個（例如118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸20-29中的任何一個（例如20、21、22、23、24、25、26、27、28或29）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸118-133中的任何一個（例如118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸21-29中的任何一個（例如21、22、23、24、25、26、27、28或29）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸128-134中的任何一個（例如128、129、130、131、132、133或134）處結(jié)束的序列。在一些實施方案中，衍生自actriib的部分對應(yīng)于在seqidno:1或4的氨基酸20-29中的任何一個（例如20、21、22、23、24、25、26、27、28或29）處開始，并且在seqidno:1或4的氨基酸128-133中的任何一個（例如128、129、130、131、132或133）處結(jié)束的序列。令人驚訝的是，在seqidno:1或4的22-25（例如22、23、24或25）處開始的actriib和基于actriib的gdf捕獲物構(gòu)建體具有比具有人actriib的完全細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更高的活性水平。在一些實施方案中，actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物多肽包含下述、基本上由下述組成、或由下述組成：在seqidno:1或4的氨基酸位置25處開始并且在seqidno:1或4的氨基酸位置131處結(jié)束的氨基酸序列。前述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何均可作為同二聚體產(chǎn)生。前述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何可以進(jìn)一步包含異源部分，其包含來自igg重鏈的恒定區(qū)，例如fc結(jié)構(gòu)域。上述基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何均可包含在對應(yīng)于seqidno:1的位置79的位置處的酸性氨基酸，任選與相對于seqidno:1的一個或多個另外的氨基酸取代、缺失或插入組合。上述actriib多肽、基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何，包括其同二聚體和/或其融合蛋白，可以在基于細(xì)胞的測定中結(jié)合和/或抑制通過激活素（例如激活素a、激活素b、激活素c或激活素ab）的信號傳導(dǎo)。上述actriib多肽、基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何，包括其同二聚體和/或其融合蛋白，可以在基于細(xì)胞的測定中結(jié)合和/或抑制通過gdf11和/或gdf8的信號傳導(dǎo)。任選地，上述actriib多肽、基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何，包括其同二聚體和/或其融合蛋白，可以在基于細(xì)胞的測定中結(jié)合和/或抑制激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種的信號傳導(dǎo)?？紤]了其他actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物多肽，例如下述。包含與seqidno:1或4的氨基酸29-109的序列至少80%（例如85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%）等同的氨基酸序列的actriib多肽或gdf捕獲物多肽，其中對應(yīng)于seqidno:1的64的位置是r或k，并且其中actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽在基于細(xì)胞的測定中抑制通過激活素、gdf8和/或gdf11的信號傳導(dǎo)。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中就seqidno:1或4的序列而言的至少一個改變位于配體結(jié)合口袋外部。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中就seqidno:1或4的序列而言的至少一個改變是位于配體結(jié)合口袋內(nèi)的保守改變。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中就seqidno:1或4的序列而言的至少一個改變是在選自k74、r40、q53、k55、f82和l79的一個或多個位置處的改變?？紤]了其他actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物多肽，例如下述。包含與seqidno:1或4的氨基酸29-109的序列至少80%（例如85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%）等同的氨基酸序列的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，并且其中該蛋白質(zhì)包含在除actriib的內(nèi)源性n-x-s/t序列外的位置處，以及在配體結(jié)合口袋外部的位置處的至少一個n-x-s/t序列。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中所述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽包含在對應(yīng)于seqidno:1或4的位置24的位置處的n，以及在對應(yīng)于seqidno:1或4的位置26的位置處的s或t，并且其中所述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽在基于細(xì)胞的測定中抑制通過激活素、gdf8和/或gdf11的信號傳導(dǎo)。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中所述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽包含在對應(yīng)于seqidno:1或4的位置64的位置處的r或k。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中所述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽包含在對應(yīng)于seqidno:1或4的位置79的位置處的d或e，并且其中所述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽在基于細(xì)胞的測定中抑制通過激活素、gdf8和/或gdf11的信號傳導(dǎo)。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中就seqidno:1或4的序列而言的至少一個改變是位于配體結(jié)合口袋內(nèi)的保守改變。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中就seqidno:1或4的序列而言的至少一個改變是在選自k74、r40、q53、k55、f82和l79的一個或多個位置處的改變。如上文的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽，其中所述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽是進(jìn)一步包含一個或多個異源部分的融合蛋白。上述actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽中的任何，或其融合蛋白可以作為同二聚體產(chǎn)生。上述actriib融合蛋白或基于actriib的gdf捕獲物融合蛋白中的任何均可具有異源部分，其包含來自igg重鏈的恒定區(qū)，例如fc結(jié)構(gòu)域。在某些實施方案中，用于根據(jù)本文公開的方法使用的actriib多肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含下述、由下述組成或基本上由下述組成：seqidno:2、3、5、6、29、31或49的氨基酸序列，以及與前述中的任何至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%等同的多肽。actriib多肽可以包括天然actriib多肽的功能片段，例如包含選自seqidno:2、3、5、6、29、31或49的序列的至少10、20或30個氨基酸的多肽，或缺乏c末端1、2、3、4、5或10至15個氨基酸且缺乏在n末端處的1、2、3、4或5個氨基酸的seqidno:2或5的序列。在一些實施方案中，多肽包含相對于seqidno:2或5在n末端處2至5個氨基酸以及在c末端處不超過3個氨基酸的截短。在一些實施方案中，用于根據(jù)本文描述的方法使用的gdf捕獲物由seqidno:29的氨基酸序列組成或基本上由seqidno:29的氨基酸序列組成。關(guān)于活性（例如配體結(jié)合）actriia多肽的通式是包含在seqidno:9的氨基酸30處開始并在氨基酸110處結(jié)束的多肽的那種。相應(yīng)地，本發(fā)明的actriia多肽和基于actriia的gdf捕獲物可以包含多肽、由多肽組成或基本上由多肽組成，所述多肽與seqidno:9的氨基酸30-110至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。任選地，本發(fā)明的actriia多肽和基于actriia的gdf捕獲物可以包含多肽、由多肽組成或基本上由多肽組成，所述多肽與seqidno:9的氨基酸12-82至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同，任選分別在范圍為seqidno:9的1-5（例如1、2、3、4或5）或3-5（例如3、4或5）的位置處開始，并且在范圍為seqidno:9的110-116（例如110、111、112、113、114、115或116）或110-115（例如110、111、112、113、114或115）的位置處結(jié)束，并且包含在配體結(jié)合口袋中的不超過1、2、5、10或15個保守氨基酸改變，以及在就seqidno:9而言的配體結(jié)合口袋中的位置40、53、55、74、79和/或82處的零個、一個或多個非保守改變。前述actriia多肽或基于actriia的gdf捕獲物多肽中的任何均可作為同二聚體產(chǎn)生。前述actriia多肽或基于actriia的gdf捕獲物多肽中的任何可以進(jìn)一步包含異源部分，其包含來自igg重鏈的恒定區(qū)，例如fc結(jié)構(gòu)域。上述actriia多肽、基于actriia的gdf捕獲物多肽中的任何，包括其同二聚體和/或其融合蛋白，可以在基于細(xì)胞的測定中結(jié)合和/或抑制通過激活素（例如激活素a、激活素b、激活素c或激活素ab）的信號傳導(dǎo)。上述actriia多肽、基于actriia的gdf捕獲物多肽中的任何，包括其同二聚體和/或其融合蛋白，可以在基于細(xì)胞的測定中結(jié)合和/或抑制通過gdf11和/或gdf8的信號傳導(dǎo)。任選地，上述actriia多肽、基于actriia的gdf捕獲物多肽中的任何，包括其同二聚體和/或其融合蛋白，可以在基于細(xì)胞的測定中結(jié)合和/或抑制激活素b、激活素c、激活素e、gdf7和nodal中的一種或多種的信號傳導(dǎo)。在某些實施方案中，用于根據(jù)本文公開的方法使用的actriia多肽和基于actriia的gdf捕獲物多肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含下述、由下述組成或基本上由下述組成：seqidno:9、10、22、26或28的氨基酸序列，以及與前述中的任何至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%等同的多肽。actriia多肽和基于actriia的gdf捕獲物多肽可以包括天然actriia多肽的功能片段，例如包含選自seqidno:9、10、22、26或28的序列的至少10、20或30個氨基酸的多肽，或缺乏c末端1、2、3、4、5或10至15個氨基酸且缺乏在n末端處的1、2、3、4或5個氨基酸的seqidno:10的序列。在一些實施方案中，多肽將包含相對于seqidno:10在n末端處2至5個氨基酸以及在c末端處不超過3個氨基酸的截短。在一些實施方案中，用于在本文描述的方法中使用的actriia多肽由seqidno:26或28的氨基酸序列組成或基本上由seqidno:26或28的氨基酸序列組成。本發(fā)明的actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）或gdf捕獲物多肽可以包括相對于天然存在的actrii多肽，在actrii多肽（例如在配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域中）的氨基酸序列中的一個或多個改變（例如氨基酸添加、缺失、取代或其組合）。當(dāng)在哺乳動物、昆蟲或其他真核細(xì)胞中產(chǎn)生時，氨基酸序列中的改變可以例如改變多肽的糖基化，或改變多肽相對于天然存在的actrii多肽的蛋白酶解切割。任選地，本發(fā)明的actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）和gdf捕獲物多肽包含選自下述的一個或多個經(jīng)修飾的氨基酸殘基：糖基化氨基酸、聚乙二醇化氨基酸、法尼基化氨基酸、乙?；被?、生物素化的氨基酸、與脂質(zhì)部分綴合的氨基酸和與有機(jī)衍生劑綴合的氨基酸。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）或gdf捕獲物多肽可以是融合蛋白，其具有actrii多肽或gdf捕獲物多肽作為一個結(jié)構(gòu)域（例如任選地具有一個或多個序列變異的actrii受體的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域）以及一個或多個另外的異源結(jié)構(gòu)域，所述另外的異源結(jié)構(gòu)域提供所需的性質(zhì)，例如改善的藥物代謝動力學(xué)、更容易的純化、對特定組織的靶向等。例如，融合蛋白的結(jié)構(gòu)域可以增強(qiáng)體內(nèi)穩(wěn)定性、體內(nèi)半衰期、攝取/施用、組織定位或分布、蛋白質(zhì)復(fù)合物的形成、融合蛋白的多聚化和/或純化中的一種或多種。actrii多肽和gdf捕獲物融合蛋白可以包括異源多肽結(jié)構(gòu)域，例如但不限于免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域（野生型或突變體）或血清白蛋白。在一些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是igg1fc結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，igg1fc結(jié)構(gòu)域是人igg1fc結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，igg1fc結(jié)構(gòu)域是小鼠igg1fc結(jié)構(gòu)域。在某些實施方案中，actrii多肽和gdf捕獲物多肽融合蛋白包含位于actrii或gdf捕獲物多肽結(jié)構(gòu)域和異源結(jié)構(gòu)域之間的相對非結(jié)構(gòu)化接頭。在某些實施方案中，actrii多肽和gdf捕獲物融合蛋白包含位于fc結(jié)構(gòu)域和actrii或gdf捕獲物結(jié)構(gòu)域之間的相對非結(jié)構(gòu)化接頭。此類非結(jié)構(gòu)化接頭可以對應(yīng)于在actrii或gdf捕獲物的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的c末端（“尾部”）處的大致15個氨基酸的非結(jié)構(gòu)化區(qū)域，或者它可以是相對不含二級結(jié)構(gòu)的3至5、15、20、30、50或更多個氨基酸的人工序列。接頭可以富含甘氨酸和脯氨酸殘基，并且可以例如含有蘇氨酸/絲氨酸和甘氨酸的重復(fù)序列[例如，tg4（seqidno:52）、sg4（seqidno:54）或tg3（seqidno:53）單峰（singlet）或重復(fù)]或一系列三個甘氨酸。融合蛋白可以包括純化子序列，例如表位標(biāo)簽、flag標(biāo)簽、多組氨酸序列和gst融合物。在某些實施方案中，actrii融合蛋白或gdf捕獲物融合物包含前導(dǎo)序列。前導(dǎo)序列可以是天然actrii前導(dǎo)序列（例如天然actriia或actriib前導(dǎo)序列）或異源前導(dǎo)序列。在某些實施方案中，前導(dǎo)序列是組織型纖溶酶原激活物（tpa）前導(dǎo)序列。在一些實施方案中，actrii融合蛋白或gdf捕獲物融合蛋白包含如式a-b-c中所示的氨基酸序列。b部分是如本文所述的n末端和c末端截短的actrii或gdf捕獲物多肽。a和c部分可以獨立地是零個、一個或超過一個氨基酸，并且a和c部分兩者均與b異源。a和/或c部分可以經(jīng)由接頭序列附著至b部分。任選地，待根據(jù)本文公開的方法使用的actrii多肽（例如actriia和actriib多肽）、gdf捕獲物多肽，包括其變體和融合蛋白，結(jié)合一種或多種actriib配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、bmp6、bmp7和/或nodal），其kd小于10微摩爾、小于1微摩爾、小于100納摩爾、小于10納摩爾或小于1納摩爾。任選地，此類actrii多肽gdf捕獲物多肽抑制actrii信號傳導(dǎo)，例如通過actrii配體（例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)）觸發(fā)的actriia和/或actriib細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)事件。在某些方面，本發(fā)明提供了包含本發(fā)明的actrii拮抗劑（例如actriia多肽和actriib多肽、gdf捕獲物多肽）和藥學(xué)可接受的載體的藥物制劑或組合物。藥物制劑或組合物還可以包括一種或多種另外的化合物，例如用于治療本文所述的病癥或狀況的化合物（例如增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的潰瘍特別是皮膚潰瘍的另外化合物）。優(yōu)選地，本發(fā)明的藥物制劑或組合物基本上不含熱原。一般而言，優(yōu)選在哺乳動物細(xì)胞系中表達(dá)actriia多肽和actriib多肽或gdf捕獲物多肽，所述哺乳動物細(xì)胞系適當(dāng)?shù)亟閷?dǎo)多肽的天然糖基化，以便減小患者中的不利免疫應(yīng)答的可能性。人和cho細(xì)胞系已成功使用，并且預(yù)期其他常見的哺乳動物表達(dá)載體將是有用的。在一些實施方案中，優(yōu)選的actriia多肽、actriib多肽和gdf捕獲物多肽是糖基化的，并且具有可從哺乳動物細(xì)胞優(yōu)選cho細(xì)胞獲得的糖基化模式。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了包含本文所述的藥物制劑或組合物并且標(biāo)記用于下述中的一種或多種的包裝藥物：增加哺乳動物（優(yōu)選人）中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白，??治療或預(yù)防哺乳動物（優(yōu)選人）中的貧血，治療或預(yù)防哺乳動物（優(yōu)選人）中的鐮狀細(xì)胞病，和/或治療或預(yù)防哺乳動物（優(yōu)選人）中的一種或多種鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥（例如貧血、血管阻塞危象、潰瘍（例如皮膚潰瘍）等）。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了包含本文所述的藥物制劑或組合物并且標(biāo)記用于下述中的包裝藥物：??治療哺乳動物（優(yōu)選人）中的貧血，治療哺乳動物（優(yōu)選人）中的鐮狀細(xì)胞病，和/或治療哺乳動物（優(yōu)選人）中的一種或多種鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥（例如貧血、血管阻塞危象、潰瘍（例如皮膚潰瘍）等）。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了包含本文所述的藥物制劑或組合物并且標(biāo)記用于下述中的包裝藥物：??預(yù)防哺乳動物（優(yōu)選人）中的貧血，預(yù)防哺乳動物（優(yōu)選人）中的鐮狀細(xì)胞病，和/或預(yù)防哺乳動物（優(yōu)選人）中的一種或多種鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥（例如貧血、血管阻塞危象、潰瘍（例如皮膚潰瘍）等）。在某些方面，本發(fā)明提供了編碼actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）或gdf捕獲物多肽的核酸。分離的多核苷酸可以包含關(guān)于可溶性actrii多肽或gdf捕獲物多肽的編碼序列，例如如本文所述的。例如，分離的核酸可以包括編碼包含具有一個或多個序列變異的actrii多肽的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（例如配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域）的actrii多肽或gdf捕獲物的序列，以及編碼actrii多肽的跨膜結(jié)構(gòu)域和/或細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的部分或所有的序列，但結(jié)束密碼子位于跨膜結(jié)構(gòu)域或細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域內(nèi)，或位于細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域和跨膜結(jié)構(gòu)域或細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域之間。例如，編碼gdf捕獲物的分離的多核苷酸可以包含全長actrii多核苷酸序列例如seqidno:1、4或9，或者具有一個或多個變體或部分截短形式，所述分離的多核苷酸進(jìn)一步包含在3'末端之前至少六百個核苷酸的轉(zhuǎn)錄結(jié)束密碼子或以其他方式放置，使得多核苷酸的翻譯產(chǎn)生任選與全長actrii的截短部分融合的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域。本文公開的核酸可以可操作地連接至啟動子用于表達(dá)，并且本發(fā)明提供了用此類重組多核苷酸轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。優(yōu)選地，細(xì)胞是哺乳動物細(xì)胞，例如cho細(xì)胞。在某些方面，本發(fā)明提供了用于制備actrii多肽或gdf捕獲物的方法。此類方法可以包括在合適的細(xì)胞，例如中國倉鼠卵巢（cho）細(xì)胞中表達(dá)本文公開的核酸中的任何（例如seqidno:8、13、27、32、39、42、46或48）。此類方法可以包括：a）在適合于表達(dá)gdf捕獲物多肽的條件下培養(yǎng)細(xì)胞，其中所述細(xì)胞用gdf捕獲物表達(dá)構(gòu)建體轉(zhuǎn)化；和b）回收如此表達(dá)的gdf捕獲物多肽。gdf捕獲物多肽可以使用用于從細(xì)胞培養(yǎng)物獲得蛋白質(zhì)的眾所周知技術(shù)中的任何作為粗制、部分純化或高度純化的級分回收。在某些方面，本發(fā)明涉及拮抗actrii活性（例如抑制actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)）的抗體或抗體組合。特別地，本發(fā)明提供了使用抗體actrii拮抗劑或抗體actrii拮抗劑組合來例如增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防患有貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗體actrii拮抗劑或抗體actrii拮抗劑組合來治療患有貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗體actrii拮抗劑或抗體actrii拮抗劑組合來預(yù)防患有貧血的受試者中的潰瘍，特別是皮膚潰瘍的方法。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗體actrii拮抗劑是結(jié)合和/或抑制至少gdf11的活性（例如gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）的抗體或抗體組合。任選地，抗體或抗體組合進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制gdf8的活性（例如gdf8介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活），特別是在對于gdf11和gdf8兩者具有結(jié)合親和力的多特異性抗體的情況下，或者在一種或多種抗gdf11抗體和一種或多種抗gdf8抗體的組合的上下文中。任選地，本發(fā)明的抗體或抗體組合基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a的活性（例如激活素a介導(dǎo)的actriia或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。在一些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf11和/或gdf8活性的本發(fā)明的抗體或抗體組合進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種的活性（例如actriia或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)的激活），特別是在對于多重actrii配體具有結(jié)合親和力的多特異性抗體的情況下，或在各自具有對于不同actrii配體的結(jié)合親和力的組合多重抗體的上下文中。部分地，本發(fā)明證明actrii拮抗劑可以與epo受體激活劑組合使用（例如在相同時間或不同時間施用，但一般以實現(xiàn)重疊藥理效應(yīng)的方式），以增加紅血細(xì)胞水平（紅細(xì)胞生成）或治療有此需要的患者中的貧血。部分地，本發(fā)明證明gdf捕獲物可以與epo受體激活劑組合施用，以協(xié)同增加患者特別是鐮狀細(xì)胞患者中的紅血細(xì)胞形成。因此，當(dāng)以其各自的劑量分別施用時，該組合治療的效應(yīng)可以顯著大于actrii拮抗劑和epo受體激活劑的效應(yīng)總和。在某些實施方案中，此類協(xié)同作用可能是有利的，因為它使得能夠用更低劑量的epo受體激活劑獲靶水平的紅血細(xì)胞，從而避免潛在的不良反應(yīng)或與更高水平的epo受體激活相關(guān)的其他問題。相應(yīng)地，在某些實施方案中，本發(fā)明的方法（例如增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防患有貧血的受試者中的潰瘍的方法）包括給有此需要的患者施用與一種或多種epo受體激活劑組合的一種或多種actrii拮抗劑（例如actriia多肽，actriib多肽和/或gdf捕獲物多肽）。epo受體激活劑可以通過直接接觸且激活epo受體來刺激紅細(xì)胞生成。在某些實施方案中，epo受體激活劑是基于天然epo的165氨基酸序列并且一般稱為促紅細(xì)胞生成刺激劑（esa）的一類化合物之一，其例子是依泊汀α（epoetinalfa）、依泊汀β（neorecormon?）、依泊汀δ（dynepo?）和依泊汀ω。在其他實施方案中，esa包括具有賦予期望的藥物代謝動力學(xué)性質(zhì)（延長的循環(huán)半衰期）的非肽修飾的合成epo蛋白質(zhì)（sep）和epo衍生物，其例子是達(dá)貝泊汀α（darbepoetinalfa）（aranesp?）和甲氧基-聚乙二醇依泊汀β（mircera?）。在某些實施方案中，epo受體激活劑可以是不摻入epo多肽主鏈或一般不分類為esa的epo受體激動劑。此類epo受體激動劑可以包括但不限于epo的肽和非肽模擬物、靶向epo受體的激動性抗體、包含epo模擬結(jié)構(gòu)域的融合蛋白、以及促紅細(xì)胞生成素受體延長持續(xù)時間受限激動劑（eredla）。在某些實施方案中，epo受體激活劑可以通過增強(qiáng)內(nèi)源性epo的產(chǎn)生而間接刺激紅細(xì)胞生成，而不接觸epo受體本身。例如，缺氧誘導(dǎo)型轉(zhuǎn)錄因子（hif）是epo基因表達(dá)的內(nèi)源性刺激物，其在含氧量正常條件下通過細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)制被壓制（去穩(wěn)定化）。部分地，本發(fā)明通過用gdf捕獲物和具有hif穩(wěn)定性質(zhì)的間接epo受體激活劑（例如脯氨酰羥化酶抑制劑）的組合治療，在患者中提供增加的紅細(xì)胞生成。actrii拮抗劑，特別是actrii多肽和gdf捕獲物多肽，也可以用于治療或預(yù)防其他病癥和狀況，例如促進(jìn)肌肉生長和/或治療或預(yù)防肌肉相關(guān)病癥，促進(jìn)骨生長和/或治療或預(yù)防骨相關(guān)病癥，治療或預(yù)防癌癥（特別是多發(fā)性骨髓瘤和/或乳腺癌）。參見例如美國專利號：7,612,041；8,173,601；7,842,663以及美國專利申請公開號u.s.2009/0074768。在某些情況下，當(dāng)施用用于這些其他治療適應(yīng)癥的gdf捕獲物多肽時，可能期望在施用actrii拮抗劑期間監(jiān)測對紅血細(xì)胞的作用，或者測定或調(diào)節(jié)actrii拮抗劑的給藥，以便減少對紅血細(xì)胞的不期望的效應(yīng)。例如，紅血細(xì)胞水平、血紅蛋白水平或血細(xì)胞比容水平的增加可以導(dǎo)致血壓的升高。附圖簡述該專利或?qū)＠暾埼募兄辽僖粋€彩色圖。具有彩色附圖的該專利或?qū)＠暾埞_的副本將由專利局根據(jù)請求并支付必要的費用而提供。圖1顯示了基于多個actriib和actriia晶體結(jié)構(gòu)的復(fù)合分析，具有本文推導(dǎo)殘基的人actriia（seqidno:56）和人actriib的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的比對，以直接接觸用框指示的配體（seqidno:57-64）。圖2顯示了不同脊椎動物actriib蛋白和人actriia的多重序列比對。圖3a和3b顯示了在cho細(xì)胞中表達(dá)的actriia-hfc的純化。如通過篩分柱（上圖）和考馬斯染色的sds-page（下圖）（左泳道：分子量標(biāo)準(zhǔn)品；右泳道：actriia-hfc）顯現(xiàn)的，蛋白質(zhì)純化為單個明確限定的峰。圖4a和4b顯示了通過biacoretm測定測量的actriia-hfc與激活素和gdf-11的結(jié)合。圖5a和5b顯示了actriia-hfc對雌性非人靈長類動物（nhp）中的紅血細(xì)胞計數(shù)的作用。在第0天、第7天、第14天和第21天時，用安慰劑或1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的actriia-hfc處理雌性食蟹猴（各五只猴的四組）。圖5a顯示了紅血細(xì)胞（rbc）計數(shù)。圖5b顯示了血紅蛋白水平。統(tǒng)計學(xué)顯著性相對于每個治療組的基線。在第57天時，在每組中保留兩只猴。圖6a和6b顯示了actriia-hfc對雄性非人靈長類動物中的紅血細(xì)胞計數(shù)的作用。在第0天、第7天、第14天和第21天時，用安慰劑或1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的actriia-hfc處理雄性食蟹猴（各五只猴的四組）。圖6a顯示了紅血細(xì)胞（rbc）計數(shù)。圖6b顯示了血紅蛋白水平。統(tǒng)計學(xué)顯著性相對于每個治療組的基線。在第57天時，在每組中保留兩只猴。圖7a和7b顯示了actriia-hfc對雌性非人靈長類動物中的網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的作用。在第0天、第7天、第14天和第21天時，用安慰劑或1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的actriia-hfc處理食蟹猴（各五只猴的四組）。圖7a顯示了絕對網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)。圖7b顯示了相對于rbc的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比。統(tǒng)計學(xué)顯著性相對于每組的基線。在第57天時，在每組中保留兩只猴。圖8a和8b顯示了actriia-hfc對雄性非人靈長類動物中的網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的作用。在第0天、第7天、第14天和第21天時，用安慰劑或1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的actriia-hfc處理食蟹猴（各五只猴的四組）。圖8a顯示了絕對網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)。圖8b顯示了相對于rbc的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比。統(tǒng)計學(xué)顯著性相對于每組的基線。在第57天時，在每組中保留兩只猴。圖9顯示了來自實施例5中描述的人臨床試驗的結(jié)果，其中actriia-hfc的曲線下面積（auc）和施用劑量具有線性相關(guān)性，與actriia-hfc是靜脈內(nèi)（iv）施用還是皮下施用（sc）無關(guān)。圖10顯示了iv或sc施用的患者中的actriia-hfc血清水平的比較。圖11顯示了響應(yīng)不同劑量水平的actriia-hfc的骨堿性磷酸酶（bap）水平。bap是合成代謝骨生長的標(biāo)記物。圖12描繪了來自實施例5中描述的人臨床試驗的血細(xì)胞比容水平相對于基線的中值變化。actriia-hfc在指示劑量下進(jìn)行靜脈內(nèi)（iv）施用。圖13描繪了來自實施例5中描述的人臨床試驗的血紅蛋白水平相對于基線的中值變化。actriia-hfc在指示劑量下進(jìn)行靜脈內(nèi)（iv）施用。圖14描繪了來自實施例5中描述的人臨床試驗的rbc（紅血細(xì)胞）計數(shù)相對于基線的中值變化。actriia-hfc在指示劑量下進(jìn)行靜脈內(nèi)（iv）施用。圖15描繪了來自實施例5中描述的人臨床試驗的網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)相對于基線的中值變化。actriia-hfc在指示劑量下進(jìn)行靜脈內(nèi)（iv）施用。圖16顯示了關(guān)于gdf捕獲物actriib（l79d20-134）-hfc的完全氨基酸序列（seqidno:38），包括tpa前導(dǎo)序列（加雙下劃線的）、actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（seqidno:1中的殘基20-134；加下劃線的）和hfc結(jié)構(gòu)域。在天然序列中的位置79處取代的天冬氨酸是加雙下劃線并突出顯示的，如通過測序揭示的甘氨酸是成熟融合蛋白中的n末端殘基。圖17a和17b顯示了編碼actriib（l79d20-134）-hfc的核苷酸序列。seqidno:39對應(yīng)于有義鏈，并且seqidno:40對應(yīng)于反義鏈。tpa前導(dǎo)區(qū)（核苷酸1-66）是加雙下劃線的，并且actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（核苷酸76-420）是加下劃線的。圖18顯示了關(guān)于截短的gdf捕獲物actriib（l79d25-131）-hfc的完全氨基酸序列（seqidno:41），包括tpa前導(dǎo)區(qū)（加雙下劃線的）、截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（seqidno:1中的殘基25-131；加下劃線的）和hfc結(jié)構(gòu)域。在天然序列中的位置79處取代的天冬氨酸是加雙下劃線并突出顯示的，如通過測序揭示的谷氨酸鹽是成熟融合蛋白中的n末端殘基。圖19a和19b顯示了編碼actriib（l79d25-131）-hfc的核苷酸序列。seqidno:42對應(yīng)于有義鏈，并且seqidno:43對應(yīng)于反義鏈。tpa前導(dǎo)區(qū)（核苷酸1-66）是加雙下劃線的，并且截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（核苷酸76-396）是加下劃線的。還顯示了關(guān)于actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列（seqidno:1中的殘基25-131）。圖20顯示了關(guān)于不含前導(dǎo)區(qū)的截短的gdf捕獲物actriib（l79d25-131）-hfc的氨基酸序列（seqidno:44）。截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（seqidno:1中的殘基25-131）是加下劃線的。在天然序列中的位置79處取代的天冬氨酸是加雙下劃線并突出顯示的，如通過測序揭示的谷氨酸是成熟融合蛋白中的n末端殘基。圖21顯示了關(guān)于不含前導(dǎo)區(qū)、hfc結(jié)構(gòu)域和接頭的截短的gdf捕獲物actriib（l79d25-131）-hfc的氨基酸序列（seqidno:45）。在天然序列中的位置79處取代的天冬氨酸是加下劃線并突出顯示的，如通過測序揭示的谷氨酸是成熟融合蛋白中的n末端殘基。圖22a和22b顯示了編碼actriib（l79d25-131）-hfc的替代核苷酸序列。seqidno:46對應(yīng)于有義鏈，并且seqidno:47對應(yīng)于反義鏈。tpa前導(dǎo)區(qū)（核苷酸1-66）是加雙下劃線的，截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（核苷酸76-396）是加下劃線的，并且細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的野生型核苷酸序列中的取代是加雙下劃線和突出顯示的（與seqidno:42相比較，圖19）。還顯示了關(guān)于actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列（seqidno:1中的殘基25-131）。圖23顯示了圖22中所示的替代核苷酸序列（seqidno:46）的核苷酸76-396（seqidno:48）。圖22中指示的相同核苷酸取代也是加下劃線并突出顯示的。seqidno:48僅編碼具有l(wèi)79d取代的截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（對應(yīng)于seqidno:1中的殘基25-131），例如actriib（l79d25-131）。圖24顯示了用actriib（l79d20-134）-hfc（灰色）或actriib（l79d25-131）-hfc（黑色）處理對食蟹猴相對于基線的紅血細(xì)胞濃度中的絕對變化的作用。veh=媒介物。數(shù)據(jù)為平均值±sem。n=4-8只/組。圖25顯示了用actriib（l79d20-134）-hfc（灰色）或actriib（l79d25-131）-hfc（黑色）處理對食蟹猴相對于基線的血細(xì)胞比容中的絕對變化的作用。veh=媒介物。數(shù)據(jù)為平均值±sem。n=4-8只/組。圖26顯示了用actriib（l79d20-134）-hfc（灰色）或actriib（l79d25-131）-hfc（黑色）處理對食蟹猴相對于基線的血紅蛋白濃度中的絕對變化的作用。veh=媒介物。數(shù)據(jù)為平均值±sem。n=4-8只/組。圖27顯示了用actriib（l79d20-134）-hfc（灰色）或actriib（l79d25-131）-hfc（黑色）處理對食蟹猴相對于基線的循環(huán)網(wǎng)織紅細(xì)胞濃度中的絕對變化的作用。veh=媒介物。數(shù)據(jù)為平均值±sem。n=4-8只/組。圖28顯示了用促紅細(xì)胞生成素（epo）和actriib（l79d25-131）-hfc組合處理72小時對小鼠中的血細(xì)胞比容的作用。數(shù)據(jù)為平均值±sem（n=4只/組），并且彼此顯著不同的平均值（p<0.05，未配對t檢驗）由不同字母指定。組合處理與媒介物相比較使血細(xì)胞比容增加23%，大于epo和actriib（l79d25-131）-hfc的分別效應(yīng)總和的協(xié)同增加。圖29顯示了用epo和actriib（l79d25-131）-hfc組合處理72小時對小鼠中的血紅蛋白濃度的作用。數(shù)據(jù)為平均值±sem（n=4只/組），并且彼此顯著不同的平均值（p<0.05）由不同字母指定。組合處理與媒介物相比較使血紅蛋白濃度增加23%，這也是協(xié)同效應(yīng)。圖30顯示了用epo和actriib（l79d25-131）-hfc組合處理72小時對小鼠中的紅血細(xì)胞濃度的作用。數(shù)據(jù)為平均值±sem（n=4只/組），并且彼此顯著不同的平均值（p<0.05）由不同字母指定。組合處理與媒介物相比較使紅血細(xì)胞濃度增加20%，這也是協(xié)同效應(yīng)。圖31顯示了用epo和actriib（l79d25-131）-hfc組合處理72小時對小鼠脾中的紅細(xì)胞生成前體細(xì)胞數(shù)目的作用。數(shù)據(jù)為平均值±sem（n=4只/組），并且彼此顯著不同的平均值（p<0.01）由不同的字母指定。雖然epo單獨以晚期前體成熟為代價使嗜堿性成紅細(xì)胞（basoe）的數(shù)目急劇增加，組合處理使basoe數(shù)目增加至較小但仍然顯著的程度，同時支持未減少的晚期前體成熟。圖32a-c比較了β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的rbc參數(shù)與野生型（wt）小鼠中的rbc參數(shù)。分析來自未經(jīng)處理的2-6月齡小鼠的血樣以測定紅血細(xì)胞數(shù)目（rbc；a）、血細(xì)胞比容（hct；b）和血紅蛋白濃度（hgb；c）。數(shù)據(jù)為平均值±sem（n=4只/組），***，p<0.001。hbb-/-小鼠被證實嚴(yán)重貧血。圖33顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中rbc數(shù)目的作用。在治療4周后收集血樣。數(shù)據(jù)是2只/組的平均值，其中條指示范圍。用actriib（l79d25-131）-mfc處理使hbb-/-小鼠中存在的rbc缺陷降低一半。圖34顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的rbc形態(tài)的作用。在100x放大率下獲得來自處理4周的小鼠的吉姆薩染色的血涂片的圖像。注意來自媒介物處理的hbb-/-小鼠的血液中的溶血、細(xì)胞碎片和許多小的或不規(guī)則形狀的rbc。相比之下，actriib（l79d25-131）-mfc治療極大降低了溶血、碎片和不規(guī)則形狀的rbc的發(fā)生，同時增加了正常形狀的rbc的數(shù)目。圖35顯示了actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的rbc數(shù)目的作用，其中包括來自媒介物給藥的野生型小鼠的數(shù)據(jù)用于比較。數(shù)據(jù)為平均值±sem；n=7只/組。**，p<0.01相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理使hbb-/-小鼠中的平均rbc缺陷降低超過50%。圖36顯示了actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的血清膽紅素水平的作用，其中包括來自媒介物給藥的野生型小鼠的數(shù)據(jù)用于比較。數(shù)據(jù)為平均值±sem；n=7只/組。###，p<0.001相對于媒介物處理的野生型小鼠；*，p<0.05相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理顯著降低hbb-/-小鼠中的總膽紅素水平。圖37顯示了actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的血清epo水平的作用，其中包括來自媒介物給藥的野生型小鼠的數(shù)據(jù)用于比較。數(shù)據(jù)為平均值±sem；n=7只/組。###，p<0.001相對于媒介物處理的野生型小鼠；*，p<0.05相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理使hbb-/-小鼠中的平均循環(huán)epo水平降低超過60%。圖38a和38b顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的脾腫大的作用，其中包括來自媒介物給藥的野生型小鼠的數(shù)據(jù)用于比較。a.用1mg/kg每周兩次處理2個月后，來自在3月齡時開始的小鼠的平均值±sem。＃＃＃，p<0.001，相對于媒介物處理的野生型小鼠；*，p<0.05相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。b.代表性脾大小，如在用1mg/kg每周兩次處理3個月后在6-8月齡時開始的小鼠中的分別研究中觀察到的。用actriib（l79d25-131）-mfc處理顯著降低hbb-/-小鼠中的脾重量。圖39顯示了actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的骨礦物質(zhì)密度的作用，其中包括來自媒介物給藥的野生型小鼠的數(shù)據(jù)用于比較。平均值±sem基于股骨分析。＃，p<0.05相對于媒介物處理的野生型小鼠；*，p<0.05相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理使hbb-/-小鼠中的骨礦物質(zhì)密度標(biāo)準(zhǔn)化。圖40a-c顯示了actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的鐵穩(wěn)態(tài)參數(shù)的作用。關(guān)于血清鐵（a）、血清鐵蛋白（b）和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和（c）的平均值±sem。*，p<0.05；**，p<0.01相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理顯著降低hbb-/-小鼠中的鐵過載的每個量度。圖41顯示了actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的組織鐵過載的作用。通過用perl的普魯士藍(lán)染色測定來自脾（a-c）、肝（d-f）和腎（g-i）的組織切片（200μm）中的鐵水平。野生型脾（a）中的鐵染色在紅髓（箭頭）中豐富，但在白髓（*）中不存在。hbb-/-小鼠脾中增加的鐵染色（b）反映了由于髓外紅細(xì)胞生成的紅髓區(qū)的擴(kuò)張。hbb-/-小鼠中的actriib（l79d25-131）-mfc減少脾紅細(xì)胞生成并恢復(fù)脾鐵染色的野生型模式（c）。另外，hbb-/-小鼠的肝枯否細(xì)胞（h，箭頭）和腎皮質(zhì)（e，箭頭）中的異常鐵染色通過actriib（l79d25-131）-mfc（f和i）標(biāo)準(zhǔn)化。放大率，200x。圖42顯示actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的鐵調(diào)素mrna肝臟水平的作用。平均值±sem；*，p<0.05相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理顯著增加hbb-/-小鼠中的鐵調(diào)素mrna的表達(dá)。圖43顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對β地中海貧血的hbb-/-小鼠模型中的活性氧（ros）的循環(huán)水平的作用，其中包括來自媒介物給藥的野生型小鼠的數(shù)據(jù)用于比較。數(shù)據(jù)為幾何平均值±sem；n=7只/組。###，p<0.001相對于媒介物處理的野生型小鼠；***，p<0.001相對于媒介物處理的hbb-/-小鼠。用actriib（l79d25-131）-mfc處理顯著降低hbb-/-小鼠中的ros。圖44顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對鐮狀細(xì)胞?。╯cd）小鼠中的紅血細(xì)胞濃度的絕對變化的作用。數(shù)據(jù)為平均值±sem（n=5只/組）。wt=野生型小鼠，其為無癥狀復(fù)合雜合子（β/βs）小鼠。actriib（l79d25-131）-mfc處理導(dǎo)致與對照小鼠（僅施用媒介物的鐮狀細(xì)胞小鼠）相比較，鐮狀細(xì)胞小鼠中的紅血細(xì)胞水平的顯著增加（p≤0.001）。圖45顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對鐮狀細(xì)胞小鼠中的紅血細(xì)胞水平、血細(xì)胞比容水平和血紅蛋白水平的作用。數(shù)據(jù)是相對于鐮狀細(xì)胞對照小鼠經(jīng)過4周相對于基線的平均變化（±sem）。actriib（l79d25-131）-mfc處理導(dǎo)致與對照小鼠相比較，鐮狀細(xì)胞小鼠中的紅血細(xì)胞水平、血細(xì)胞比容水平和血紅蛋白水平的顯著增加。圖46顯示了actriib（l79d25-131）-mfc對不同血液參數(shù)（即鐮狀細(xì)胞小鼠中的平均細(xì)胞容積、紅血細(xì)胞（rdc）分布寬度、網(wǎng)織紅細(xì)胞和活性氧）的作用。數(shù)據(jù)是相對于鐮狀細(xì)胞對照小鼠經(jīng)過4周相對于基線的平均變化（±sem）。actriib（l79d25-131）-mfc處理導(dǎo)致與對照小鼠相比較，鐮狀細(xì)胞小鼠中的平均細(xì)胞容積、紅血細(xì)胞（rdc）分布寬度、網(wǎng)織紅細(xì)胞和活性氧的顯著增加。發(fā)明詳述1.概述轉(zhuǎn)化生長因子-β（tgf-β）超家族含有共享共同序列元件和結(jié)構(gòu)基序的各種生長因子。已知這些蛋白質(zhì)對脊椎動物和無脊椎動物兩者中的多種細(xì)胞類型施加生物效應(yīng)。超家族的成員在模式形成和組織特化中在胚胎發(fā)育期間執(zhí)行重要功能，并且可以影響各種分化過程，包括脂肪生成、肌生成、軟骨形成、心臟發(fā)生、造血、神經(jīng)發(fā)生和上皮細(xì)胞分化。通過操縱tgf-β家族成員的活性，通?？赡茉谏镏幸痫@著的生理變化。例如，皮埃蒙特牛和比利時藍(lán)牛品種攜帶在gdf8（也稱為肌肉生長抑制素）基因中的功能缺失突變，其導(dǎo)致肌肉質(zhì)量中的顯著增加。參見例如grobet等人（1997）natgenet.17（1）:71-4。此外，在人中，gdf8的無活性等位基因與增加的肌肉質(zhì)量相關(guān)，并且據(jù)報道，具有異常的強(qiáng)度。參見例如schuelke等人（2004）nengljmed，350:2682-8。tgf-β信號由i型和ii型絲氨酸/蘇氨酸激酶受體的異聚復(fù)合物介導(dǎo)，其在配體刺激后磷酸化并激活下游smad蛋白（例如smad蛋白1、2、3、5和8）。參見例如massagué（2000）nat.rev.mol.cellbiol.1:169-178。這些i型和ii型受體是跨膜蛋白，由具有富含半胱氨酸區(qū)域的配體結(jié)合細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和具有預(yù)測的絲氨酸/蘇氨酸特異性的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域組成。i型受體是信號傳導(dǎo)所必需的。ii型受體是結(jié)合配體和i型受體表達(dá)所需的。i型和ii型激活素受體在配體結(jié)合后形成穩(wěn)定的復(fù)合物，導(dǎo)致i型受體被ii型受體磷酸化。兩種相關(guān)的ii型受體（actrii），actriia和actriib已被鑒定為關(guān)于激活素的ii型受體。參見例如mathews和vale（1991）cell65:973-982；和attisano等人（1992）cell68：97-108。除激活素之外，actriia和actriib可以與幾種其他tgf-β家族蛋白質(zhì)包括例如bmp6、bmp7、nodal、gdf8和gdf11生物化學(xué)相互作用。參見例如yamashita等人（1995）j.cellbiol.130:217-226；lee和mcpherron（2001）proc.natl.acad.sci.98:9306-9311；yeo和whitman（2001）mol.cell7：949-957；和oh等人（2002）genesdev.16:2749-54。alk4是關(guān)于激活素，特別是激活素a的主要i型受體，并且alk-7也可以充當(dāng)關(guān)于其他激活素，特別是激活素b的受體。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及用本文公開的一種或多種抑制劑藥物，特別是可以拮抗gdf11和/或gdf8的抑制劑藥物來拮抗actrii受體的配體（也稱為actrii配體）。激活素是屬于tgf-β超家族的二聚多肽生長因子。存在三個主要激活素形式（a、b和ab），其是兩個緊密相關(guān)的β亞基的同二聚體/異二聚體（分別為βaβa、βbβb和βaβb）。人類基因組還編碼激活素c和激活素e，其主要在肝中表達(dá)，并且含有βc或βe的異二聚體形式也是已知的。在tgf-β超家族中，激活素是獨特的多功能因子，其可以刺激卵巢和胎盤細(xì)胞中的激素產(chǎn)生，支持神經(jīng)元細(xì)胞存活，取決于細(xì)胞類型正面或負(fù)面影響細(xì)胞周期進(jìn)展，并且至少在兩棲動物胚胎中誘導(dǎo)中胚層分化。depaolo等人（1991）procsocepbiolmed.198:500-512；dyson等人（1997）currbiol.7:81-84；和woodruff（1998）biochempharmacol.55:953-963。此外，從刺激的人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞分離的紅細(xì)胞樣分化因子（edf）被發(fā)現(xiàn)與激活素a等同。murata等人（1988）pnas，85：2434。已提出激活素a促進(jìn)骨髓中的紅細(xì)胞生成。在幾種組織中，激活素信號傳導(dǎo)被其相關(guān)的異二聚體抑制素拮抗。例如，在從垂體釋放卵泡刺激激素（fsh）期間，激活素促進(jìn)fsh分泌和合成，而抑制素阻止fsh分泌和合成。可以調(diào)節(jié)激活素生物活性和/或結(jié)合激活素的其他蛋白質(zhì)包括卵泡抑素（fs）、卵泡抑素相關(guān)蛋白（fsrp，也稱為flrg或fsrl3）和α2-巨球蛋白。如本文描述的，結(jié)合“激活素a”的藥物是無論是在分離的βa亞基的背景下還是作為二聚體復(fù)合物（例如βaβa同二聚體或βaβb異二聚體）均特異性結(jié)合βa亞基的藥物。在異二聚體復(fù)合物（例如βaβb異二聚體）的情況下，結(jié)合“激活素a”的藥物對存在于βa亞基內(nèi)的表位是特異性的，但不結(jié)合存在于復(fù)合物的非βa亞基中的表位（例如復(fù)合物的βb亞基）。類似地，本文公開的拮抗（抑制）“激活素a”的藥物是抑制由βa亞基介導(dǎo)的一種或多種活性的藥物，無論是在分離的βa亞基的背景下還是作為二聚體復(fù)合物（例如βaβa同二聚體或βaβb異二聚體）。在βaβb異二聚體的情況下，抑制“激活素a”的藥物是特異性抑制βa亞基的一種或多種活性但不抑制復(fù)合物的非βa亞基的活性的藥物（例如復(fù)合物的βb亞基）。該原理也適用于結(jié)合和/或抑制“激活素b”、“激活素c”和“激活素e”的藥物。本文公開的拮抗“激活素ab”的藥物是抑制如由βa亞基介導(dǎo)的一種或多種活性和由βb亞基介導(dǎo)的一種或多種活性的藥物。nodal蛋白在中胚層和內(nèi)胚層誘導(dǎo)和形成中以及在早期胚胎發(fā)生中的軸向結(jié)構(gòu)例如心臟和胃組織的后續(xù)組構(gòu)具有功能。已證明發(fā)育中的脊椎動物胚胎中的背部組織占優(yōu)勢地促成脊索和脊索前板的軸向結(jié)構(gòu)，同時它募集周圍細(xì)胞以形成非軸向胚胎結(jié)構(gòu)。nodal看起來通過i型和ii型受體兩者以及稱為smad蛋白的細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)物發(fā)信號。研究支持actriia和actriib充當(dāng)nodal的ii型受體的觀點。參見例如sakuma等人（2002）genescells.2002，7:401-12。提出nodal配體與其輔因子（例如cripto）相互作用，以激活磷酸化smad2的激活素i型和ii型受體。nodal蛋白質(zhì)牽涉對早期脊椎動物胚胎關(guān)鍵的許多事件，包括中胚層形成、前模式形成和左右軸特化。實驗證據(jù)已證明nodal信號傳導(dǎo)激活par3-lux，先前顯示對激活素和tgf-β特異性應(yīng)答的熒光素酶報道分子。然而，nodal不能誘導(dǎo)ptlx2-lux，對骨形態(tài)發(fā)生蛋白特異性響應(yīng)的報告分子。近期結(jié)果提供了直接的生化證據(jù)：nodal信號傳導(dǎo)由激活素-tgf-β途徑smad、smad2和smad3介導(dǎo)。進(jìn)一步的證據(jù)已顯示細(xì)胞外cripto蛋白是nodal信號傳導(dǎo)所需的，使其不同于激活素或tgf-β信號傳導(dǎo)。生長和分化因子-8（gdf8）也稱為肌肉生長抑制素。gdf8是骨骼肌質(zhì)量的負(fù)調(diào)節(jié)劑。gdf8在發(fā)育中的骨骼肌和成人骨骼肌中高度表達(dá)。轉(zhuǎn)基因小鼠中的gdf8無效突變的特征在于骨骼肌的明顯肥大和增生。mcpherron等人，nature（1997）387：83-90。骨骼肌質(zhì)量的類似增加在牛中[參見例如ashmore等人（1974）growth，38:501-507；swatland和kieffer（1994）j.anim.sci.38:752-757；mcpherron和lee（1997）proc.natl.acad.sci.usa94:12457-12461；和kambadur等人（1997）genomeres.7:910-915]，并且顯著地，在人類中[參見例如schuelke等人（2004）nengljmed350:2682-8]的gdf8的天然存在的突變中是明顯的。研究還顯示與人中的hiv感染相關(guān)的肌肉萎縮伴隨著gdf8蛋白質(zhì)表達(dá)的增加。參見例如gonzalez-cadavid等人（1998）pnas95：14938-43。另外，gdf8可以調(diào)節(jié)肌肉特異性酶（例如肌酸激酶）的產(chǎn)生且調(diào)節(jié)成肌細(xì)胞增殖。參見例如國際專利申請公開號wo00/43781。gdf8前肽可以非共價地結(jié)合成熟的gdf8結(jié)構(gòu)域二聚體，使其生物活性失活。參見例如miyazono等人（1988）j.biol.chem。，263：6407-6415；miyazono等人（1988）j.biol.chem.，263：6407-6415；wakefield等人（1988）j.biol.chem.，263：7646-7654；和brown等人（1990）growthfactors，3：35-43]。結(jié)合gdf8或結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白并抑制其生物活性的其他蛋白質(zhì)包括卵泡抑素、以及潛在的卵泡抑素相關(guān)蛋白。參見例如gamer等人（1999）dev.biol.，208：222-232。生長和分化因子-11（gdf11），也稱為bmp11，是分泌蛋白。mcpherron等人（1999）nat.genet.22：260-264。gdf11在小鼠發(fā)育期間在尾芽、肢芽、上頜和下頜弓以及背根神經(jīng)節(jié)中表達(dá)。參見例如nakashima等人（1999）mech.dev.80：185-189。gdf11在中胚層和神經(jīng)組織兩者的模式形成中起獨特作用。參見例如gamer等人（1999）devbiol.，208:222-32。gdf11顯示為發(fā)育中的雞肢體中的軟骨形成和肌生成的負(fù)調(diào)節(jié)劑。參見例如gamer等人（2001）devbiol.229:407-20。gdf11在肌肉中的表達(dá)還提示其以類似于gdf8的方式調(diào)節(jié)肌肉生長的作用。另外，gdf11在腦中的表達(dá)提示gdf11也可以具有與神經(jīng)系統(tǒng)的功能相關(guān)的活性。有趣的是，發(fā)現(xiàn)gdf11抑制嗅上皮中的神經(jīng)發(fā)生。參見例如wu等人（2003）neuron.37:197-207。骨形態(tài)發(fā)生蛋白（bmp7），也稱為成骨蛋白-1（op-1），眾所周知誘導(dǎo)軟骨和骨形成。另外，bmp7調(diào)節(jié)廣泛的生理過程。例如，bmp7可以是負(fù)責(zé)上皮骨生成的骨誘導(dǎo)因子。還發(fā)現(xiàn)bmp7在鈣調(diào)節(jié)和骨穩(wěn)態(tài)中起作用。如同激活素，bmp7結(jié)合ii型受體，actriia和actriib。然而，bmp7和激活素將不同的i型受體募集成異聚受體復(fù)合物。觀察到的主要bmp7i型受體是alk2，而激活素專一地結(jié)合alk4（actriib）。bmp7和激活素引起不同的生物應(yīng)答且激活不同的smad途徑。參見例如macias-silva等人（1998）jbiolchem.273:25628-36。如本文所證明的，actrii多肽（例如actriia和actriib多肽）可以用于增加體內(nèi)紅血細(xì)胞水平。在某些例子中，顯示與野生型（未經(jīng)修飾的）actrii多肽的相應(yīng)樣品相比較，gdf捕獲物多肽（特別是變體actriib多肽）的特征在于獨特的生物學(xué)性質(zhì)。此類gdf捕獲物的特征部分在于對于激活素a的結(jié)合親和力的基本喪失，并且因此顯著縮小拮抗激活素a活性的能力，但保留接近野生型水平的gdf11的結(jié)合和抑制。在體內(nèi)，與野生型actrii多肽相比較，gdf捕獲物在增加紅血細(xì)胞水平方面更有效，并且在患有貧血的患者包括例如患有鐮狀細(xì)胞病的患者和患有地中海貧血的患者中具有有益效應(yīng)。例如，本文顯示gdf捕獲物療法導(dǎo)致患有地中海貧血的人類患者中的血紅蛋白水平增加。除改善紅血細(xì)胞參數(shù)之外，還觀察到某些地中海貧血患者在gdf捕獲物療法過程期間具有腿部潰瘍（這是貧血特別是溶血性貧血如地中海貧血和鐮狀細(xì)胞病中的常見皮膚并發(fā)癥）的基本消解。這些數(shù)據(jù)指示除了對紅血細(xì)胞參數(shù)的正面作用之外，actrii拮抗劑在治療貧血病癥的不同并發(fā)癥中的更廣泛用途。相應(yīng)地，一般而言，本發(fā)明的方法涉及本文所述的一種或多種actrii拮抗劑藥物（任選與一種或多種支持療法組合）增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平，治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥，包括例如潰瘍，特別是皮膚潰瘍的用途。此外，本發(fā)明的數(shù)據(jù)指示觀察到的就紅血細(xì)胞參數(shù)和潰瘍而言的actrii多肽的生物活性不依賴于激活素a抑制。然而，應(yīng)當(dāng)注意保留激活素a結(jié)合的未經(jīng)修飾的actriib多肽仍證明在體內(nèi)增加紅血細(xì)胞的能力。此外，與具有縮小的對于激活素a的結(jié)合親和力的gdf捕獲物相比較，保留激活素a抑制的actriib或actriia多肽可以更好地適合于一些應(yīng)用，其中紅血細(xì)胞水平中更適度的增加是期望的，和/或其中一定水平的脫靶活性是可接受的（或甚至是期望的）。應(yīng)當(dāng)注意，造血是復(fù)雜的過程，由各種因子包括促紅細(xì)胞生成素、g-csf和鐵穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)。術(shù)語“增加的紅血細(xì)胞水平”和“促進(jìn)紅血細(xì)胞形成”指臨床上可觀察的量度，例如血細(xì)胞比容、紅血細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白測量，并且預(yù)期對于此類變化通過其發(fā)生的機(jī)制是中性的。epo是涉及紅系祖細(xì)胞生長和成熟為紅細(xì)胞的糖蛋白激素。epo通過在胎兒壽命期間的肝和通過成人中的腎產(chǎn)生。通常在成年人中由于腎衰竭而發(fā)生的epo的產(chǎn)生減少導(dǎo)致貧血。epo已通過基于來自用epo基因轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)的表達(dá)和分泌的遺傳工程技術(shù)產(chǎn)生。此類重組epo的施用已在治療貧血中有效。例如，eschbach等人（1987，nengljmed316:73）描述了epo校正由慢性腎衰竭引起的貧血的用途。epo的效應(yīng)通過其結(jié)合和激活屬于細(xì)胞因子受體超家族并稱為epo受體的細(xì)胞表面受體來介導(dǎo)。人和鼠epo受體已得到克隆和表達(dá)。參見例如d’andrea等人（1989）cell57:277；jones等人（1990）blood76:31；winkelman等人（1990）blood76:24；以及美國專利號5,278,065。人epo受體基因編碼483氨基酸跨膜蛋白，其包含約224個氨基酸的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域，并且顯示出與鼠epo受體大約82%的氨基酸序列同一性。參見例如美國專利號6,319,499。在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)的克隆的全長epo受體（66-72kda）以類似于紅系祖細(xì)胞上的天然受體的那種的親和力（kd=100-300nm）結(jié)合epo。因此，此類形式被認(rèn)為含有主要的epo結(jié)合決定簇，并被稱為epo受體。通過與其他密切相關(guān)的細(xì)胞因子受體類比，epo受體被認(rèn)為在激動劑結(jié)合時二聚化。然而，可以是多聚體復(fù)合物的epo受體的詳細(xì)結(jié)構(gòu)及其具體的激活機(jī)制尚未完全理解。參見例如美國專利號6,319,499。epo受體的激活導(dǎo)致幾種生物效應(yīng)。這些包括增加未成熟紅細(xì)胞的增殖，增加未成熟成紅細(xì)胞的分化，并且減少紅系祖細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡。參見例如liboi等人（1993）procnatlacadsciusa90:11351-11355；koury等人（1990）science248:378-381。介導(dǎo)增殖和分化的epo受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑看起來是不同的。參見例如noguchi等人（1988）molcellbiol8:2604；patel等人（1992）jbiolchem，267:21300；和liboi等人（1993）procnatlacadsciusa90:11351-11355）。一些結(jié)果提示可能需要輔助蛋白用于介導(dǎo)分化信號。參見例如chiba等人（1993）nature362:646；和chiba等人（1993）procnatlacadsciusa90:11593。然而，關(guān)于輔助蛋白在分化中的作用存在爭議，因為受體的組成型激活形式可以刺激增殖和分化兩者。參見例如pharr等人（1993）procnatlacadsciusa90:938。epo受體激活劑包括小分子紅細(xì)胞生成刺激劑（esa）以及基于epo的化合物。前者的一個例子是與聚乙二醇（專有名稱hematide?和omontys?）共價連接的基于二聚肽的激動劑，其在健康志愿者和具有慢性腎疾病和內(nèi)源性抗epo抗體兩者的患者中顯示紅細(xì)胞生成刺激性質(zhì)。參見例如stead等人（2006）blood108:1830-1834；和macdougall等人（2009）nengljmed361:1848-1855。其他例子包括基于非肽的esas。參見例如qureshi等人（1999）procnatlacadsciusa96:12156-12161。epo受體激活劑還包括通過增強(qiáng)內(nèi)源性epo的產(chǎn)生間接刺激紅細(xì)胞生成而不接觸epo受體本身的化合物。例如，缺氧誘導(dǎo)型轉(zhuǎn)錄因子（hif）是epo基因表達(dá)的內(nèi)源性刺激物，其在含氧量正常條件下通過細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)制被壓制（去穩(wěn)定化）。因此，正研究hif脯氨酰羥化酶的抑制劑在體內(nèi)的epo誘導(dǎo)活性。epo受體的其他間接激活劑包括增強(qiáng)抑制epo基因表達(dá)的gata-2轉(zhuǎn)錄因子的抑制劑[參見例如nakano等人（2004）blood104:4300-4307]，以及充當(dāng)epo受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)調(diào)節(jié)劑的造血細(xì)胞磷酸酶（hcp或shp-1）抑制劑[參見例如klingmuller等人（1995）cell80:729-738。在本發(fā)明的上下文中以及在使用每個術(shù)語的特定上下文中，在本說明書中使用的術(shù)語一般具有其在本領(lǐng)域中的普通含義。某些術(shù)語在下文或說明書中的其他地方討論，以對實踐者提供對描述本發(fā)明的組合物和方法以及如何制備和使用它們的另外指導(dǎo)。術(shù)語的任何使用的范圍或含義由使用它們的具體上下文中顯而易見?！巴吹摹?，在其所有的語法形式和拼寫變化中，指具有“共同進(jìn)化起源”的兩種蛋白質(zhì)之間的關(guān)系，包括來自相同生物物種中的超家族的蛋白質(zhì)，以及來自不同生物物種的同源蛋白質(zhì)。此類蛋白質(zhì)（及其編碼核酸）具有序列同源性，如通過它們的序列相似性所反映的，無論是根據(jù)百分比同一性還是通過特定殘基或基序和保守位置的存在。術(shù)語“序列相似性”以其所有語法形式指可以共享或不共享共同進(jìn)化起源的核酸或氨基酸序列之間的同一性或?qū)?yīng)性程度。然而，在通常使用和本申請中，當(dāng)用副詞如“高度”修飾時，術(shù)語“同源的”可以指序列相似性，并且可以涉及或不涉及共同的進(jìn)化起源。就參考多肽（或核苷酸）序列而言的“序列同一性百分比（%）”定義為在比對序列和必要時引入缺口以實現(xiàn)最大序列同一性百分比后，并且不考慮任何保守取代作為序列同一性的部分，候選序列中與參考多肽（核苷酸）序列中的氨基酸殘基（或核酸）相同的氨基酸殘基（或核酸）的百分比。用于測定氨基酸序列同一性百分比目的的比對可以以本領(lǐng)域技術(shù)內(nèi)的不同方式實現(xiàn)，例如使用公眾可獲得的計算機(jī)軟件如blast、blast-2、align或megalign（dnastar）軟件。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定用于比對序列的適當(dāng)參數(shù)，包括在待比較序列的全長上實現(xiàn)最大比對所需的任何算法。然而，為了本文的目的，使用序列比較計算機(jī)程序align-2生成%氨基酸（核酸）序列同一性值。align-2序列比較計算機(jī)程序由genentech，inc.撰寫，并且源代碼已在美國版權(quán)局，washingtond.c.，20559中提交用戶文檔，其中它在美國版權(quán)注冊號txu510087下注冊。align-2程序可從genentech，inc.，southsanfrancisco，calif.公開獲得，或可以從源代碼編譯。align-2程序應(yīng)當(dāng)編譯用于在unix操作系統(tǒng)上使用，包括數(shù)位unixv4.0d。所有序列比較參數(shù)均由align-2程序設(shè)置并且不變。如本文所使用的，“基本上不與x結(jié)合”意指藥物具有對于“x”大于約10-7、10-6、10-5、10-4或更大的kd（例如通過用于測定kd的測定無法檢測的結(jié)合）。2.actrii拮抗劑本文呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)證明actrii的拮抗劑（抑制劑）（例如actriia和/或actriibsmad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)的拮抗劑）可以用于增加體內(nèi)紅血細(xì)胞水平。特別地，此類actrii拮抗劑在本文中顯示有效治療不同貧血以及不同的貧血并發(fā)癥（例如病癥/狀況），包括例如皮膚潰瘍。相應(yīng)地，本發(fā)明部分提供了不同的actrii拮抗劑藥物，其可以單獨或與一種或多種紅細(xì)胞生成刺激劑（例如epo）或其他支持療法[例如用羥基脲治療、輸血、鐵螯合療法和/或疼痛管理（例如用一種或多種阿片類鎮(zhèn)痛劑、非甾體抗炎藥和/或皮質(zhì)類固醇治療）組合使用，以治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或治療或預(yù)防患有貧血的患者中的皮膚潰瘍。在某些實施方案中，待根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑是gdf-actrii拮抗劑（例如gdf介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的拮抗劑），特別是gdf11-和/或gdf8介導(dǎo)的actrii信號傳導(dǎo)。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑是可溶性actrii多肽（例如可溶性actriia和actriib多肽）和gdf捕獲物多肽，例如actriia-fc融合蛋白、actriib-fc融合蛋白和gdf捕獲物-fc融合蛋白。雖然本發(fā)明的可溶性actrii多肽和gdf捕獲物多肽可以通過除gdf（例如gdf11和/或gdf8）拮抗作用外的機(jī)制影響紅血細(xì)胞水平和/或皮膚潰瘍[例如，gdf11和/或gdf8抑制可以是藥物抑制一系列另外藥物包括可能的tgf-β超家族的其他成員（例如激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal）活性的傾向的指示劑，并且此類集中抑制可以導(dǎo)致對例如造血的所需效應(yīng)]，預(yù)期其他類型的gdf-actrii拮抗劑是有用的，包括例如抗gdf11抗體；抗gdf8抗體；抗actriia抗體；抗actriib抗體；反義、rnai或核酶核酸，其抑制gdf11、gdf8、actriia和/或actriib中的一種或多種的產(chǎn)生；gdf8、actriia和/或actriib中的一種或多種的其他抑制劑（例如小分子抑制劑），特別是破壞gdf11和/或gdf8-actriia結(jié)合和/或gdf11和/或gdf8-actriib結(jié)合的藥物，以及抑制gdf11、gdf8、actriia和/或actriib中的一種或多種的表達(dá)的藥物。任選地，本發(fā)明的gdf-actrii拮抗劑可以結(jié)合和/或抑制其他actrii配體的活性（或表達(dá)），包括例如激活素a、激活素ab、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal。任選地，本發(fā)明的gdf-actrii拮抗劑可以與結(jié)合和/或抑制一種或多種另外的actrii配體的活性（或表達(dá)）的至少一種另外的actrii拮抗劑藥物組合使用，所述另外的actrii配體包括例如激活素a、激活素ab、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal。在一些實施方案中，待根據(jù)本文公開的方法使用的actrii拮抗劑基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a（例如激活素a介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號傳導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。a.actrii多肽和gdf捕獲物在某些方面，本發(fā)明涉及actrii多肽。特別地，本發(fā)明提供了使用actrii多肽以例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。如本文使用的，術(shù)語“actrii”指ii型激活素受體家族。該家族包括激活素受體iia型和激活素受體iib型兩者。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用actrii多肽以治療有此需要的受試者中的貧血和/或治療患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用actrii多肽以預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或預(yù)防患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，actrii多肽是actriia多肽。在一些實施方案中，actrii多肽是actriib多肽。如本文使用的，術(shù)語“actriib”指來自任何物種的激活素受體iib型（actriib）蛋白家族和通過誘變或其他修飾衍生自此類actriib蛋白的變體。本文中對actriib的提及應(yīng)理解為對目前鑒定的形式中的任一種的提及。actriib家族的成員一般是跨膜蛋白，由包含富含半胱氨酸的區(qū)域的配體結(jié)合細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和具有預(yù)測的絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域組成。術(shù)語“actriib多肽”包括包含actriib家族成員的任何天然存在的多肽以及其保留有用活性的任何變體（包括突變體、片段、融合物和擬肽形式）的多肽。此類變體actriia多肽的例子在本發(fā)明中以及國際專利申請公開號wo2006/012627中提供，所述參考文獻(xiàn)以引用的方式整體并入本文。任選地，本發(fā)明的actriib多肽可以用于增加受試者中的紅血細(xì)胞水平。除非另有具體說明，否則本文所述的所有actriib相關(guān)多肽的氨基酸編號均基于下文提供的人actriib前體蛋白序列（seqidno:1）的編號。人actriib前體蛋白序列如下：信號肽用單下劃線指示；細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域以粗體字體指示；并且潛在的內(nèi)源n聯(lián)糖基化位點用雙下劃線指示。經(jīng)加工的可溶性（細(xì)胞外）人actriib多肽序列如下：。在一些實施方案中，可以產(chǎn)生在n末端處具有“sgr...”序列的蛋白質(zhì)。細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的c末端“尾部”由單下劃線指示。缺失“尾部”的序列（δ15序列）如下：。在文獻(xiàn)中還報道了在seqidno:1的位置64處具有丙氨酸（a64）的actriib形式。參見例如hilden等人（1994）blood，83（8）：2163-2170。申請人已確定包含具有a64取代的actriib的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的actriib-fc融合蛋白對于激活素和gdf11具有相對低的親和力。相比之下，在位置64處具有精氨酸（r64）的相同actriib-fc融合蛋白對于激活素和gdf11具有在低納摩爾至高皮摩爾范圍內(nèi)的親和力。因此，在本發(fā)明中，具有r64的序列用作人類actriib的“野生型”參考序列。在位置64處具有丙氨酸的actriib的形式如下：。信號肽由單下劃線指示，并且細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域由粗體字體指示。替代a64形式的經(jīng)加工的可溶性（細(xì)胞外）actriib多肽序列如下：。在一些實施方案中，可以產(chǎn)生在n末端處具有“sgr...”序列的蛋白質(zhì)。細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的c末端“尾部”由單下劃線指示。缺失“尾部”的序列（δ15序列）如下：。編碼人actriib前體蛋白的核酸序列如下所示（seqidno:7），其由genbank參考序列nm_001106.3的核苷酸25-1560組成，其編碼actriib前體的氨基酸1-513。如所示的序列在位置64處提供精氨酸，并且可以被修飾以提供丙氨酸代替。信號序列是加下劃線的。編碼經(jīng)加工的可溶性（細(xì)胞外）人actriib多肽的核酸序列如下（seqidno:8）。如所示的序列在位置64處提供精氨酸，并且可以被修飾以提供丙氨酸代替。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及actriia多肽。如本文使用的，術(shù)語“actriia”指來自任何物種的激活素受體iib型（actriia）蛋白家族和通過誘變或其他修飾衍生自此類actriia蛋白的變體。本文中對actriia的提及應(yīng)理解為對目前鑒定的形式中的任一種的提及。actriia家族的成員一般是跨膜蛋白，由包含富含半胱氨酸的區(qū)域的配體結(jié)合細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和具有預(yù)測的絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域組成。術(shù)語“actriia多肽”包括包含actriia家族成員的任何天然存在的多肽以及其保留有用活性的任何變體（包括突變體、片段、融合物和擬肽形式）的多肽。此類變體actriia多肽的例子在本發(fā)明中以及國際專利申請公開號wo2006/012627中提供，所述參考文獻(xiàn)以引用的方式整體并入本文。任選地，本發(fā)明的actriia多肽可以用于增加受試者中的紅血細(xì)胞水平。除非另有具體說明，否則本文所述的所有actriia相關(guān)多肽的氨基酸編號均基于下文提供的人actriia前體蛋白序列（seqidno:9）的編號。人actriia前體蛋白序列如下：信號肽由單下劃線指示；細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域以粗體字體指示；并且潛在的內(nèi)源n聯(lián)糖基化位點由雙下劃線指示。經(jīng)加工的可溶性（細(xì)胞外）人actriia多肽序列如下：。細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的c末端“尾部”由單下劃線指示。缺失“尾部”的序列（δ15序列）如下：。編碼人actriia前體蛋白的核酸序列如下所示（seqidno:12），如genbank參考nm_001616.4的下述核苷酸159-1700。信號序列是加下劃線的。編碼經(jīng)加工的可溶性（細(xì)胞外人actriia多肽的核酸序列如下：。人actriib可溶性細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域和人actriia可溶性細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列的比對在圖1中示出。該比對指示被認(rèn)為直接接觸actrii配體的兩種受體內(nèi)的氨基酸殘基。圖2描述了不同脊椎動物actriib蛋白和人actriia的多重序列比對。從這些比對中可以預(yù)測配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域內(nèi)對于正常actrii-配體結(jié)合活性重要的關(guān)鍵氨基酸位置，以及預(yù)測可能耐受取代而不顯著改變正常的actrii-配體結(jié)合活性的氨基酸位置。在其他方面，本發(fā)明涉及gdf捕獲物多肽（也稱為“gdf捕獲物”）。特別地，本發(fā)明提供了使用gdf捕獲物多肽以例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，治療有此需要的受試者中的鐮狀細(xì)胞病和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用gdf捕獲物多肽以治療有此需要的受試者中的貧血和/或治療患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用gdf捕獲物多肽以預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或預(yù)防患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物是可溶性變體actrii多肽（例如actriia和actriib多肽），其包含在actrii多肽（例如“野生型”actrii多肽）的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（也稱為配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域）中的一個或多個突變（例如氨基酸添加、缺失、取代及其組合），使得變體actrii多肽具有與相應(yīng)的野生型actrii多肽相比較的一種或多種改變的配體結(jié)合活性。在一些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽保留與相應(yīng)的野生型actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）的至少一種相似活性。例如，gdf捕獲物可以結(jié)合和/或抑制（例如拮抗）一種或多種actrii配體的功能（例如抑制actrii配體介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)途徑的激活）。在一些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物結(jié)合和/或抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、nodal、gdf8、gdf11、bmp6和/或bmp7）中的一種或多種。在某些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽對于一種或多種特異性actrii配體（例如gdf8、gdf11、bmp6、nodal和/或bmp7）具有提高的結(jié)合親和力。在其他實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽對于一種或多種特異性actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c和/或激活素e）具有減少的結(jié)合親和力。在另外其他實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽對于一種或多種特異性actrii配體具有提高的結(jié)合親和力，并且對于一種或多種不同/其他actrii配體具有減少的結(jié)合親和力。因此，本發(fā)明提供了對于一種或多種actrii配體具有改變的結(jié)合特異性的gdf捕獲物多肽。在某些實施方案中，例如，與野生型actrii多肽相比較，本發(fā)明的gdf捕獲物被設(shè)計為優(yōu)先結(jié)合并拮抗gdf11和/或gdf8（也稱為肌肉生長抑制素）。任選地，此類gdf11和/或gdf8結(jié)合捕獲物可以進(jìn)一步結(jié)合和/或拮抗nodal、gdf8、gdf11、bmp6和/或bmp7中的一種或多種。任選地，此類gdf11和/或gdf8結(jié)合捕獲物可以進(jìn)一步結(jié)合和/或拮抗激活素b、激活素c、激活素e、nodal、gdf8、gdf11、bmp6和/或bmp7中的一種或多種。任選地，此類gdf11和/或gdf8結(jié)合捕獲物可以進(jìn)一步結(jié)合和/或拮抗激活素a、激活素a/b、激活素b、激活素c、激活素e、nodal、gdf8、gdf11、bmp6和/或bmp7中的一種或多種。在某些實施方案中，例如與野生型actrii多肽相比較，本發(fā)明的gdf捕獲物對于激活素（例如激活素a、激活素a/b、激活素b、激活素c、激活素e）具有縮小的結(jié)合親和力。在某些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽減對于激活素a具有縮小的結(jié)合親和力。例如，本發(fā)明提供了相對于激活素a優(yōu)先結(jié)合和/或拮抗gdf8/gdf11的gdf捕獲物多肽。如本發(fā)明的實施例所證明的，與保留對于激活素a的高結(jié)合親和力的actrii多肽相比較，此類gdf捕獲物多肽是體內(nèi)紅細(xì)胞生成的更有力激活劑。此外，這些非激活素a結(jié)合gdf捕獲物多肽證明對其他組織的作用減少。因此，此類gdf捕獲物可以用于增加受試者中的紅血細(xì)胞水平，同時降低與結(jié)合/拮抗激活素a相關(guān)的潛在脫靶效應(yīng)。然而，此類選擇性gdf捕獲物多肽在一些應(yīng)用中可能較不期望，其中可能需要紅血細(xì)胞水平中的更適度的增益用于療效，并且其中一定水平的脫靶效應(yīng)是可接受的（或甚至是期望的）。actriib蛋白的氨基酸殘基（例如e39、k55、y60、k74、w78、l79、d80和f101）在actriib配體結(jié)合口袋中，并幫助介導(dǎo)與其配體包括例如激活素a、gdf11和gdf8的結(jié)合。因此，本發(fā)明提供了包含actriib受體的改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域（例如gdf8/gdf11結(jié)合結(jié)構(gòu)域）的gdf捕獲物多肽，其包含在那些氨基酸殘基處的一個或多個突變。任選地，相對于actriib受體的野生型配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域，改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以對于配體例如gdf11和/或gdf8具有增加的選擇性。為了舉例說明，可以選擇增加改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域?qū)τ趃df11和/或gdf8的選擇性超過一種或多種激活素（激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c和/或激活素a），特別是激活素a的一個或多個突變。任選地，改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域具有關(guān)于激活素結(jié)合的kd與關(guān)于gdf11和/或gdf8結(jié)合的kd的比率，其相對于關(guān)于野生型配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的比率大至少2-、5-、10-、20、50-、100-或甚至1000倍。任選地，改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域具有關(guān)于抑制激活素的ic50與關(guān)于抑制gdf11和/或gdf8的ic50的比率，其相對于野生型配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域大至少2-、5-、10-、20、50-、100-或甚至1000倍。任選地，改變的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域以比關(guān)于抑制激活素的ic50小至少2、5、10、20、50、100或甚至1000倍的ic50抑制gdf11和/或gdf8。作為具體例子，actriib的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的帶正電荷的氨基酸殘基asp（d80）可以突變?yōu)椴煌陌被釟埢?，以產(chǎn)生優(yōu)先結(jié)合gdf8而不是結(jié)合激活素的gdf捕獲物多肽。優(yōu)選地，就seqidno:1而言的d80殘基改變?yōu)檫x自下述的氨基酸殘基：不荷電氨基酸殘基、負(fù)性氨基酸殘基和疏水性氨基酸殘基。作為進(jìn)一步的具體例子，seqidno:1的疏水性殘基l79可以改變，以賦予改變的激活素-gdf11/gdf8結(jié)合性質(zhì)。例如，l79p取代比激活素結(jié)合更大程度地降低gdf11結(jié)合。相比之下，用酸性氨基酸取代l79[天冬氨酸或谷氨酸；l79d或l79e取代]極大降低激活素a結(jié)合親和力，同時保留gdf11結(jié)合親和力。在示例性實施方案中，本文所述的方法利用gdf捕獲物多肽，其為在對應(yīng)于seqidno:1的位置79的位置處包含酸性氨基酸（例如d或e）的變體actriib多肽，任選與一個或多個另外的氨基酸取代、添加或缺失組合。如本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到的，本文描述的所述突變、變體或修飾中的大多數(shù)可以在核酸水平上，或在一些情況下通過翻譯后修飾或化學(xué)合成進(jìn)行制備。此類技術(shù)是本領(lǐng)域眾所周知的，其中一些在本文中描述。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及其為可溶性actrii多肽的actrii多肽（actriia和actriib多肽）。如本文所述的，術(shù)語“可溶性actrii多肽”一般指包含actrii蛋白的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的多肽。如本文使用的，術(shù)語“可溶性actrii多肽”包括actrii蛋白的任何天然存在的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域以及其保留有用活性的任何變體（包括突變體，片段和擬肽形式）（例如如本文所述的gdf捕獲物多肽）?？扇苄詀ctrii多肽的其他例子還包含除actrii或gdf捕獲蛋白的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域之外的信號序列。例如，信號序列可以是actriia或actriib蛋白的天然信號序列，或來自另一種蛋白質(zhì)的信號序列，包括例如組織型纖溶酶原激活物（tpa）信號序列或蜜蜂蜂毒素（hbm）信號序列。部分地，本發(fā)明鑒定了actrii多肽的功能活性部分和變體，其可以用作在本文所述方法的范圍內(nèi)生成且使用actriia多肽、actriib多肽和gdf捕獲物多肽的指導(dǎo)。actrii蛋白已在本領(lǐng)域中根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能特征，特別是就配體結(jié)合而言進(jìn)行表征。參見例如attisano等人（1992）cell68（1）:97-108；greenwald等人（1999）naturestructuralbiology6（1）：18-22；allendorph等人（2006）pnas103（20：7643-7648；thompson等人（2003）theembojournal22（7）：1555-1566；以及美國專利號7,709,605、7,612,041和7,842,663。例如，attisano等人顯示在actriib的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的c末端處的脯氨酸結(jié)缺失降低受體對于激活素的親和力。包含本文seqidno:1的氨基酸20-119的actriib-fc融合蛋白，“actriib（20-119）-fc”，相對于包括脯氨酸結(jié)區(qū)和完整的近膜結(jié)構(gòu)域的actriib（20-134）-fc，具有降低的與gdf-11和激活素的結(jié)合。參見例如美國專利號7,842,663。然而，即使脯氨酸結(jié)區(qū)被破壞，actriib（20-129）-fc蛋白仍保留相對于野生型相似但稍微降低的活性。因此，在氨基酸134、133、132、131、130和129（就本文的seqidno:1而言）處結(jié)束的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域都預(yù)期是有活性的，但在134或133處結(jié)束的構(gòu)建體可能是最活躍的。類似地，在殘基129-134（就seqidno:1而言）中的任一個處的突變預(yù)期不通過大邊緣改變配體結(jié)合親和力。為了支持這一點，p129和p130（就seqidno:1而言）的突變基本上不減少配體結(jié)合。因此，本發(fā)明的actriib多肽或基于actriib的gdf捕獲物多肽可以早在氨基酸109（最終的半胱氨酸）結(jié)束，然而，在109和119處或在109和119之間結(jié)束的形式（例如109、110、111、112、113、114、115、116、117、118或119）預(yù)期具有降低的配體結(jié)合。氨基酸119（就本文的seqidno:1而言）是較差保守的，并且因此容易被改變或截短。在128（就本文的seqidno:1而言）或以后處結(jié)束的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物應(yīng)當(dāng)保留配體結(jié)合活性。就seqidno:1而言，在119和127處或在119和127處之間（例如119、120、121、122、123、124、125、126或127）結(jié)束的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物將具有中間結(jié)合能力。取決于臨床或?qū)嶒炘O(shè)置，這些形式中的任何均可能是期望使用的。在actriib的n末端處，預(yù)期在氨基酸29（就本文的seqidno:1而言）處或之前開始的蛋白質(zhì)將保留配體結(jié)合活性。氨基酸29表示起始半胱氨酸。在位置24（就本文的seqidno:1而言）處的丙氨酸至天冬酰胺突變引入n聯(lián)糖基化序列，而基本上不影響配體結(jié)合。參見例如美國專利號7,842,663。這證實了對應(yīng)于氨基酸20-29的信號切割肽和半胱氨酸交聯(lián)區(qū)之間的區(qū)域中的突變是良好耐受的。特別地，在位置20、21、22、23和24（就本文的seqidno:1而言）處開始的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物應(yīng)當(dāng)保留一般的配體結(jié)合活性，并且在位置25、26、27、28和29（就本文的seqidno:1而言）處開始的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物也預(yù)期保留配體結(jié)合活性。本文以及例如美國專利號7,842,663中顯示的數(shù)據(jù)證明，令人驚訝地，在22、23、24或25處開始的actriib構(gòu)建體將具有最大的活性。總之，actriib的活性部分（例如配體結(jié)合活性）包含seqidno:1的氨基酸29-109。因此，本發(fā)明的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物可以例如包含氨基酸序列，其與在對應(yīng)于seqidno:1的氨基酸20-29的殘基處開始（例如在氨基酸20、21、22、23、24、25、26、27、28或29處開始），并且在對應(yīng)于seqidno:1的氨基酸109-134的位置處結(jié)束（例如在氨基酸109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134處結(jié)束）的actriib部分至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在一些實施方案中，本發(fā)明的基于actriib的gdf捕獲物多肽不包含seqidno:1的氨基酸29-109或由seqidno:1的氨基酸29-109組成。其他例子包括在來自seqidno:1的20-29（例如位置20、21、22、23、24、25、26、27、28或29）或21-29（例如位置21、22、23、24、25、26、27、28或29）的位置處開始，并且在來自119-134（例如（例如119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）、119-133（例如119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132或133）、129-134（例如129、130、131、132、133或134）、或129-133（例如129、130、131、132或133）處結(jié)束的多肽。其他例子包括在來自seqidno:1的20-24（例如20、21、22、23或24）、21-24（例如21、22、23或24）、或22-25（例如22、22、23或25）的位置處開始，并且在來自109-134（例如109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）、119-134（例如119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134）或129-134（例如129、130、131、132、133或134）的位置處結(jié)束的構(gòu)建體。還考慮了在這些范圍內(nèi)的變體，特別是與seqidno:1的相應(yīng)部分具有至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的變體。在一些實施方案中，actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物包含具有氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列與seqidno:1的氨基酸殘基25-131至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在某些實施方案中，基于actriib的gdf捕獲物多肽不包含seqidno:1的氨基酸25-131或由seqidno:1的氨基酸25-131組成。本發(fā)明包括圖1中所示的復(fù)合actriib結(jié)構(gòu)的分析結(jié)果，證明配體結(jié)合口袋部分地由殘基y31、n33、n35、l38直到t41，e47、e50、q53直到k55，l57、h58、y60、s62、k74、w78直到n83，y85、r87、a92和e94直到f101限定。在這些位置處，預(yù)期保守突變將被耐受，盡管k74a突變是良好耐受的，如r40a，k55a，f82a和在位置l79處的突變。r40是非洲爪蟾中的k，指示在該位置處的堿性氨基酸將被耐受。q53在牛actriib中為r，并且在非洲爪蟾actriib中為k，并且因此包括r、k、q、n和h的氨基酸在該位置處將被耐受。因此，關(guān)于本發(fā)明的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物多肽的通式是包含氨基酸序列的那種，所述氨基酸序列與seqidno:1的氨基酸29-109至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同，任選在范圍為20-24（例如20、21、22、23或24）或22-25（例如22、23、24或25）的位置處開始，并且在范圍為129-134（例如129、130、131、132、133或134）的位置處結(jié)束，并且包含在配體結(jié)合口袋中的不超過1、2、5、10或15個保守氨基酸變化，以及在配體結(jié)合口袋中的位置40、53、55、74、79和/或82處的零個、一個或多個非保守改變。在其處變應(yīng)性可以特別良好地耐受的在結(jié)合口袋外部的位點包括細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的氨基末端和羧基末端（如上所述），以及位置42-46和65-73（就seqidno:1而言）。在位置65處的天冬酰胺至丙氨酸改變（n65a）實際上改善了在a64背景下的配體結(jié)合，并且因此預(yù)期在r64背景下對配體結(jié)合沒有有害影響。參見例如美國專利號7,842,663。此類變化很可能消除了在a64背景下的n65糖基化，因此證明該區(qū)域中的顯著變化可能是可耐受的。盡管r64a變化耐受不良，但r64k耐受良好，因此另一種堿性殘基例如h在位置64處可以耐受。參見例如美國專利號7,842,663。actriib在幾乎所有脊椎動物中均良好保守，其中細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的大片段完全保守。結(jié)合actriib的配體中的許多也是高度保守的。相應(yīng)地，來自不同脊椎動物生物的actriib序列的比較提供了可被改變的殘基的見識。因此，根據(jù)目前公開的方法有用的活性人類actriib變體多肽和基于actriib的gdf捕獲物可以包括在來自另一種脊椎動物actriib的序列的相應(yīng)位置處的一個或多個氨基酸，或者可以包括類似于在人或其他脊椎動物序列中的那種的殘基。下述例子舉例說明了限定活性actriib變體的此類方法。l46在非洲爪蟾actriib中是纈氨酸，因此該位置可以被改變，并且任選地可以改變?yōu)榱硪环N疏水性殘基例如v、i或f，或者非極性殘基例如a。e52在非洲爪蟾中是k，指示該位點可以耐受廣泛多樣的變化，包括極性殘基例如e、d、k、r、h、s、t、p、g、y和可能的a。t93在非洲爪蟾中是k，指示廣泛的結(jié)構(gòu)變化在這個位置處是被耐受的，其中極性殘基是有利的，例如s、k、r、e、d、h、g、p、g和y。f108在非洲爪蟾中是y，并且因此y或其他疏水基團(tuán)，例如i、v或l應(yīng)當(dāng)是耐受的。e111在非洲爪蟾中是k，指示荷電殘基在該位置處將是耐受的，包括d、r、k和h以及q和n。r112在非洲爪蟾中是k，指示堿性殘基在該位置處是耐受的，包括r和h。在位置119處的a是相對弱保守的，并且在嚙齒動物中表現(xiàn)為p，并且在非洲爪蟾中表現(xiàn)為v，因此基本上任何氨基酸在該位置都應(yīng)當(dāng)是耐受的。先前已證明相對于actriib（r64）-fc形式，進(jìn)一步的n聯(lián)糖基化位點（n-x-s/t）的添加是良好耐受的。參見例如美國專利號7,842,663。因此，n-x-s/t序列一般可以在本發(fā)明的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物中的在圖1中定義的配體結(jié)合口袋外部的位置處引入。用于引入非內(nèi)源性n-x-s/t序列的特別合適的位點包括氨基酸20-29、20-24、22-25、109-134、120-134或129-134（就seqidno:1而言）。也可以將n-x-s/t序列引入actriib序列和fc結(jié)構(gòu)域或其他融合組分之間的接頭內(nèi)?？梢酝ㄟ^在就預(yù)先存在的s或t而言的正確位置中引入n，或通過在對應(yīng)于預(yù)先存在的n的位置處引入s或t，以最低限度的努力引入此類位點。因此，將產(chǎn)生n聯(lián)糖基化位點的期望改變?yōu)椋篴24n、r64n、s67n（可能與n65a改變組合），e105n、r112n、g120n、e123n、p129n、a132n、r112s和r112t（就seqidno:1而言）。預(yù)測為糖基化的任何s均可改變?yōu)閠而不產(chǎn)生免疫原性位點，因為通過糖基化提供的保護(hù)。同樣地，預(yù)測為糖基化的任何t均可改變?yōu)閟。因此，考慮了改變s67t和s44t（就seqidno:1而言）。同樣地，在a24n變體中，可以使用s26t改變。因此，本發(fā)明的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物多肽可以是具有如上所述的一個或多個另外的非內(nèi)源性n聯(lián)糖基化共有序列的變體。本文描述的變型可以以不同方式組合。另外，本文所述的誘變程序的結(jié)果指示在actriib中存在通常有利于保守的氨基酸位置。就seqidno:1而言，這些包括位置64（堿性氨基酸）、位置80（酸性或疏水性氨基酸）、位置78（疏水性且特別是色氨酸）、位置37（酸性且特別是天冬氨酸或谷氨酸）、位置56（堿性氨基酸）、位置60（疏水性氨基酸，特別是苯丙氨酸或酪氨酸）。因此，在本文公開的actriib多肽和基于actriib的gdf捕獲物中，本發(fā)明提供了可以是保守的氨基酸構(gòu)架?？赡芷谕Ｊ氐钠渌恢萌缦拢何恢?2（酸性氨基酸）、位置55（堿性氨基酸）、位置81（酸性）、98（極性或荷電的，特別是e、d、r或k），所有均就seqidno:1而言。關(guān)于活性（例如配體結(jié)合）actriia多肽的通式是包含在seqidno:9的氨基酸30處開始并在氨基酸110處結(jié)束的多肽的通式。因此，本發(fā)明的actriia多肽和基于actriia的gdf捕獲物可以包含與seqidno:9的氨基酸30-110至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的多肽。在一些實施方案中，本發(fā)明的基于actriia的gdf捕獲物不包含seqidno:9的氨基酸30-110或不由seqidno:9的氨基酸30-110組成。任選地，本發(fā)明的actriia多肽和基于actriia的gdf捕獲物多肽包含此類多肽，其與seqidno:9的氨基酸12-82至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同，任選地分別在范圍為1-5（例如1、2、3、4或5）或3-5（例如3、4或5）的位置處開始，并且在范圍為110-116（例如110、111、112、113、114、115或116）或110-115（例如110、111、112、113、114或115）的位置處結(jié)束，并且包含在配體結(jié)合口袋中的不超過1、2、5、10或15個保守氨基酸變化，以及就seqidno:9而言在配體結(jié)合口袋中的位置40、53、55、74、79和/或82的零個、一個或多個非保守改變。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii多肽（例如actriia和actriib多肽）和gdf捕獲物多肽的功能活性片段可以通過篩選由編碼actrii多肽或gdf捕獲物多肽的核酸的相應(yīng)片段重組產(chǎn)生的多肽（例如seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、46和48）而獲得。另外，可以使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)，例如常規(guī)的merrifield固相f-moc或t-boc化學(xué)，來化學(xué)合成片段。片段可以（重組或通過化學(xué)合成）被產(chǎn)生并測試，以鑒定可以充當(dāng)actrii受體和/或一種或多種actrii配體（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal）的拮抗劑（抑制劑）的那些肽基片段。在一些實施方案中，本發(fā)明的actriia多肽是包含與選自seqidno:9、10、11、22、26和28的氨基酸序列至少75%等同的氨基酸序列的多肽。在某些實施方案中，actriia多肽包含與選自seqidno:9、10、11、22、26和28的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的氨基酸序列。在某些實施方案中，actriia多肽基本上由氨基酸序列組成或由氨基酸序列組成，所述氨基酸序列與選自seqidno:9、10、11、22、26和28的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在一些實施方案中，本發(fā)明的actriib多肽是包含與選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29、31和49的氨基酸序列至少75%等同的氨基酸序列的多肽。在某些實施方案中，actriib多肽包含與選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29、31和49的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的氨基酸序列。在某些實施方案中，actriib多肽基本上由氨基酸序列組成或由氨基酸序列組成，所述氨基酸序列與選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29、31和49的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在一些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽是變體actriib多肽，其包含與選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29、30、31、36、37、38、41、44、45、49、50和51的氨基酸序列至少75%等同的氨基酸序列。在某些實施方案中，gdf捕獲物多肽包含與選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29、30、31、36、37、38、41、44、45、49、50和51的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的氨基酸序列。在某些實施方案中，gdf捕獲物包含與選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29、30、31、36、37、38、41、44、45、49、50和51的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的氨基酸序列，其中對應(yīng)于seqidno:1、4或49的l79的位置是酸性氨基酸（d或e氨基酸殘基）。在某些實施方案中，gdf捕獲物基本上由氨基酸序列或由氨基酸序列組成，所述氨基酸序列與選自seqidno:36、37、38、41、44、45、50和51的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在某些實施方案中，gdf捕獲物不包含選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29和31的氨基酸序列，或由選自seqidno:1、2、3、4、5、6、29和31的氨基酸序列組成。在一些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物多肽是變體actriia多肽，其包含與選自seqidno:9、10、11、22、26、28、29和31的氨基酸序列至少75%等同的氨基酸序列。在某些實施方案中，gdf捕獲物多肽包含與選自seqidno:9、10、11、22、26、28、29和31的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的氨基酸序列。在某些實施方案中，gdf捕獲物基本上由氨基酸序列或由氨基酸序列組成，所述氨基酸序列與選自seqidno:9、10、11、22、26、28、29和31的氨基酸序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在某些實施方案中，gdf捕獲物不包含選自seqidno:9、10、11、22、26、28、29和31的氨基酸序列，或不由選自seqidno:9、10、11、22、26、28、29和31的氨基酸序列組成。在一些實施方案中，本發(fā)明考慮通過修飾actrii多肽（例如和actriia或actriib多肽）或gdf捕獲物的結(jié)構(gòu)來制備功能變體，用于此類目的如增強(qiáng)治療功效或穩(wěn)定性（例如保存期限和對蛋白酶解降解的抗性）。變體可以通過氨基酸取代、缺失、添加或其組合產(chǎn)生。例如，可以合理地預(yù)期分別用異亮氨酸或纈氨酸取代亮氨酸、用谷氨酸鹽取代天冬氨酸鹽、用絲氨酸取代蘇氨酸、或用結(jié)構(gòu)相關(guān)的氨基酸類似地取代氨基酸（例如保守突變）不會對所得到的分子的生物活性具有主要作用。保守取代是在其側(cè)鏈中相關(guān)的氨基酸家族內(nèi)發(fā)生的那些。本發(fā)明的多肽的氨基酸序列的變化是否導(dǎo)致功能同源物可以通過評價變體多肽以類似于野生型多肽的方式在細(xì)胞中產(chǎn)生應(yīng)答的能力來容易地測定，或者與未經(jīng)修飾的或野生型多肽相比較，結(jié)合一種或多種配體，例如gdf11、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf8、bmp6和bmp7。在某些實施方案中，本發(fā)明考慮本發(fā)明的actrii多肽和gdf捕獲物多肽的特異性突變，以便改變多肽的糖基化?？梢赃x擇此類突變以便引入或消除一個或多個糖基化位點，例如o聯(lián)或n聯(lián)糖基化位點。天冬酰胺連接的糖基化識別位點一般包含被適當(dāng)?shù)募?xì)胞糖基化酶特異性識別的三肽序列，天冬酰胺-x-蘇氨酸或天冬酰胺-x-絲氨酸（其中“x”是任何氨基酸）。該改變也可以通過給多肽序列添加或取代一個或多個絲氨酸或蘇氨酸殘基（對于o聯(lián)糖基化位點）來進(jìn)行。在糖基化識別位點的第一個或第三個氨基酸位置中的一個或兩個處的各種氨基酸取代或缺失（和/或在第二個位置處的氨基酸缺失）導(dǎo)致在經(jīng)修飾的三肽序列上的非糖基化。增加多肽上的碳水化合物部分?jǐn)?shù)目的另一種方法是通過糖苷與多肽的化學(xué)或酶偶聯(lián)。取決于所使用的偶聯(lián)模式，糖可以附著至（a）精氨酸和組氨酸；（b）游離羧基；（c）游離巰基，例如半胱氨酸的游離巰基；（d）游離羥基，例如絲氨酸、蘇氨酸或羥脯氨酸的游離羥基；（e）芳族殘基，例如苯丙氨酸、酪氨酸或色氨酸的芳族殘基；或（f）谷氨酰胺的酰胺基。存在于多肽上的一個或多個碳水化合物部分的去除可以化學(xué)和/或酶促實現(xiàn)?；瘜W(xué)去糖基化可以涉及例如使多肽暴露于化合物三氟甲磺酸或等價化合物。此類處理導(dǎo)致除了連接糖（n-乙酰葡萄糖胺或n-乙酰半乳糖胺）之外的大多數(shù)或所有糖的切割，同時保留氨基酸序列完整。多肽上的碳水化合物部分的酶促切割可以通過使用各種內(nèi)切和外切糖苷酶來實現(xiàn)，如thotakura等人[meth.enzymol.（1987）138:350]所述。多肽的序列可以取決于所使用的表達(dá)系統(tǒng)的類型適當(dāng)?shù)卣{(diào)整，因為哺乳動物、酵母、昆蟲和植物細(xì)胞都可以引入可以受肽的氨基酸序列影響的不同糖基化模式。一般而言，用于在人中使用的本發(fā)明的actrii多肽和gdf捕獲物多肽可以在提供適當(dāng)糖基化的哺乳動物細(xì)胞系例如hek293或cho細(xì)胞系中表達(dá)，盡管其他哺乳動物表達(dá)細(xì)胞系預(yù)期也是有用的。本發(fā)明進(jìn)一步考慮生成突變體，特別是本發(fā)明的actrii多肽和gdf捕獲物多肽的組合突變體組以及截短突變體的方法。組合突變體的庫對于鑒定actrii和gdf捕獲物序列尤其有用。篩選此類組合文庫的目的可以是生成例如具有改變的性質(zhì)的多肽變體，所述改變的性質(zhì)例如改變的藥物代謝動力學(xué)或改變的配體結(jié)合。下文提供了各種篩選測定，并且此類測定可以用于評估變體。例如，可以就下述能力篩選actrii多肽和gdf捕獲物多肽：結(jié)合actrii受體，阻止actrii配體（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp7、bmp6和/或nodal）與actrii多肽的結(jié)合，或干擾由actrii配體引起的信號傳導(dǎo)。還可以在基于細(xì)胞或體內(nèi)測定中測試actrii多肽或gdf捕獲物多肽的活性。例如，可以評價actrii多肽或gdf捕獲物多肽對涉及造血的基因的表達(dá)的作用。這可以根據(jù)需要在一種或多種重組actrii配體蛋白（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp7、bmp6和/或nodal）的存在下進(jìn)行，并且可以轉(zhuǎn)染細(xì)胞以便產(chǎn)生actrii多肽或gdf捕獲物多肽，以及任選的actrii配體。同樣地，可以給小鼠或其他動物施用actrii多肽或gdf捕獲物多肽，并且可以使用領(lǐng)域公認(rèn)的方法來評價一種或多種血細(xì)胞計數(shù)測量（例如rbc計數(shù)、血紅蛋白或網(wǎng)織紅細(xì)胞）或皮膚潰瘍參數(shù)。可以生成組合衍生的變體，其相對于參考actrii多肽或gdf捕獲物多肽具有選擇性或一般增加的效力。當(dāng)從重組dna構(gòu)建體表達(dá)時，此類變體可以用于基因治療方案中。同樣地，誘變可以產(chǎn)生具有與相應(yīng)的未經(jīng)修飾的actrii多肽或gdf捕獲物多肽顯著不同的細(xì)胞內(nèi)半衰期的變體。例如，改變的蛋白質(zhì)可以致使對蛋白酶解降解或其他細(xì)胞過程更穩(wěn)定或更不穩(wěn)定，其導(dǎo)致未經(jīng)修飾的多肽的破壞或以其他方式失活。此類變體和編碼其的基因可以通過調(diào)節(jié)多肽的半衰期用于改變actrii多肽或gdftrap多肽水平。例如，短半衰期可以產(chǎn)生更瞬時的生物效應(yīng)，并且當(dāng)是可誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的一部分時，可以允許更嚴(yán)格地控??制細(xì)胞內(nèi)的重組actrii多肽或gdf捕獲物多肽水平。在fc融合蛋白中，可以在接頭（如果有的話）和/或fc部分中進(jìn)行突變以改變蛋白的半衰期?？梢酝ㄟ^編碼多肽文庫的基因的簡并文庫產(chǎn)生組合文庫，所述多肽各自包括潛在的actrii或gdf捕獲物序列的至少一部分。例如，合成寡核苷酸的混合物可以酶促連接到基因序列中，使得潛在的actrii或gdf捕獲物多肽編碼核苷酸序列的簡并集合可作為單個多肽表達(dá)，或者作為一組較大的融合蛋白（例如對于噬菌體展示）表達(dá)。存在通過其由簡并寡核苷酸序列生成潛在同源物文庫的許多方法。簡并基因序列的化學(xué)合成可以在自動dna合成儀中進(jìn)行，并且隨后將合成基因連接到適當(dāng)?shù)妮d體內(nèi)用于表達(dá)。簡并寡核苷酸的合成是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如narang，sa（1983）tetrahedron39:3；itakura等人（1981）recombinantdna，proc.3rdclevelandsympos.macromolecules，編輯agwalton，amsterdam：elsevier第273-289頁；itakura等人（1984）annu.rev.biochem.53:323；itakura等人（1984）science198:1056；ike等人（1983）nucleicacidres.11:477。此類技術(shù)已用于其他蛋白質(zhì)的定向進(jìn)化中。參見例如scott等人，（1990）science249:386-390；roberts等人（1992）pnasusa89:2429-2433；devlin等人（1990）science249：404-406；cwirla等人，（1990）pnasusa87：6378-6382；以及美國專利號5,223,409、5,198,346和5,096,815）?？商娲?，可以利用其他形式的誘變來生成組合文庫。例如，可以通過使用例如丙氨酸掃描誘變[參見例如ruf等人（1994）biochemistry33:1565-1572；wang等人（1994）j.biol.chem.269:3095-3099；balint等人（1993）gene137:109-118；grodberg等人（1993）eur.j.biochem.218:597-601；nagashima等人（1993）j.biol.chem.268:2888-2892；lowman等人（1991）biochemistry30:10832-10838；和cunningham等人（1989）science244:1081-1085]，通過接頭掃描誘變（參見例如gustin等人（1993）virology193:653-660；和brown等人（1992）mol.cellbiol.12:2644-2652；mcknight等人（1982）science232:316），通過飽和誘變[參見例如meyers等人，（1986）science232:613]；通過pcr誘變[參見例如leung等人（1989）methodcellmolbiol1:11-19]；或通過隨機(jī)誘變，包括化學(xué)誘變[參見例如miller等人（1992）ashortcourseinbacterialgenetics，cshlpress，coldspringharbor，ny；和greener等人（1994）strategiesinmolbiol7:32-34]，來生成且分離本發(fā)明的actrii多肽或gdf捕獲物多肽。接頭掃描誘變特別是在組合設(shè)置中是用于鑒定actrii多肽的截短（生物活性）形式的有吸引力的方法。廣泛技術(shù)是本領(lǐng)域已知的，用于篩選通過點突變和截短制備的組合文庫的基因產(chǎn)物，并且就此而言，用于篩選具有某種性質(zhì)的基因產(chǎn)物的cdna文庫。此類技術(shù)一般適用于快速篩選通過本發(fā)明的actrii多肽或gdf捕獲物多肽的組合誘變生成的基因文庫。用于篩選大型基因文庫的最廣泛使用的技術(shù)通常包括將基因文庫克隆到可復(fù)制的表達(dá)載體中，用所得到的的載體文庫轉(zhuǎn)化適當(dāng)細(xì)胞，并在其中所需活性的檢測促進(jìn)編碼檢測其產(chǎn)物的基因的載體的相對容易分離的條件下表達(dá)組合基因。在一些實施方案中，測定包括actrii配體（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp7、bmp6和/或nodal）結(jié)合測定和/或actrii配體介導(dǎo)的細(xì)胞信號傳導(dǎo)測定。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii多肽或gdf捕獲物多肽還可以包含除天然存在于actrii（例如actriia或actriib多肽）或gdf捕獲物多肽中的任何之外的翻譯后修飾。此類修飾包括但不限于乙?；Ⅳ然?、糖基化、磷酸化、脂化和酰化。因此，actrii多肽或gdf捕獲物多肽可以含有非氨基酸要素，例如聚乙二醇、脂質(zhì)、多糖或單糖和磷酸鹽。此類非氨基酸要素對配體捕獲物多肽的功能性的作用可以如本文對于其他actrii或gdftrap變體所述的進(jìn)行測試。當(dāng)通過切割多肽的新生形式在細(xì)胞中產(chǎn)生本發(fā)明的多肽時，翻譯后加工對于蛋白質(zhì)的正確折疊和/或功能也可能是重要的。不同的細(xì)胞（例如cho、hela、mdck、293、wi38、nih-3t3或hek293）具有用于此類翻譯后活性的特異性細(xì)胞機(jī)制和特征性機(jī)制，并且可以選擇以確保actrii多肽或gdf捕獲物多肽的正確修飾和加工。在某些方面，本發(fā)明的actrii多肽或gdf捕獲物多肽包括融合蛋白，其具有actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）或gdf捕獲物多肽的至少一部分（結(jié)構(gòu)域）和一個或多個異源部分（結(jié)構(gòu)域）。此類融合結(jié)構(gòu)域的眾所周知例子包括但不限于多組氨酸、glu-glu、谷胱甘肽s轉(zhuǎn)移酶（gst）、硫氧還蛋白、蛋白a、蛋白g、免疫球蛋白重鏈fc區(qū)、麥芽糖結(jié)合蛋白（mbp）或人血清白蛋白?？梢赃x擇融合結(jié)構(gòu)域以便賦予所需性質(zhì)。例如，一些融合結(jié)構(gòu)域?qū)τ谕ㄟ^親和層析分離融合蛋白特別有用。為了親和純化的目的，使用用于親和層析的相關(guān)基質(zhì)，例如谷胱甘肽、淀粉酶和鎳或鈷綴合的樹脂。許多此類基質(zhì)以“藥物盒”形式可獲得，例如與（his6）融合配偶體可一起使用的pharmaciagst純化系統(tǒng)和qiaexpresstm系統(tǒng)（qiagen）。作為另一個例子，可以選擇融合結(jié)構(gòu)域以便促進(jìn)配體捕獲物多肽的檢測。此類檢測結(jié)構(gòu)域的例子包括不同的熒光蛋白（例如gfp）以及“表位標(biāo)簽”，其通常是對于其可獲得特異性抗體的短肽序列。對于其可容易獲得特異性單克隆抗體的眾所周知的表位標(biāo)簽包括flag、流感病毒血凝素（ha）和c-myc標(biāo)簽。在一些情況下，融合結(jié)構(gòu)域具有例如關(guān)于因子xa或凝血酶的蛋白酶切割位點，其允許相關(guān)蛋白酶部分消化融合蛋白，從而從其中釋放重組組合物。隨后可以通過后續(xù)層析分離從融合結(jié)構(gòu)域中分離釋放的蛋白質(zhì)。在某些實施方案中，actrii多肽或gdf捕獲物多肽與在體內(nèi)穩(wěn)定多肽的結(jié)構(gòu)域（“穩(wěn)定劑”結(jié)構(gòu)域）融合?！胺€(wěn)定”意指增加血清半衰期的任何物質(zhì)，不管這是否是由于減少的破壞，減少的通過腎的清除或其他藥物代謝動力學(xué)效應(yīng)。已知具有免疫球蛋白的fc部分的融合物對廣泛范圍的蛋白質(zhì)賦予期望的藥物代謝動力學(xué)性質(zhì)。同樣地，與人血清白蛋白的融合可以賦予期望性質(zhì)?？梢赃x擇的其他類型的融合結(jié)構(gòu)域包括多聚化（例如二聚化、四聚化）結(jié)構(gòu)域和功能結(jié)構(gòu)域（其賦予另外的生物學(xué)功能，例如進(jìn)一步刺激肌肉生長）。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了包含免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域的actrii或gdf捕獲物融合蛋白。在一些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是哺乳動物免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是人免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是小鼠免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。在某些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是iga、igd、ige、igg或igmfc結(jié)構(gòu)域。在某些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是igg1、igg2、igg3、igg4、iga1或iga2fc結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域是人igg1fc結(jié)構(gòu)域或人igg2fc結(jié)構(gòu)域。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了包含下述igg1fc結(jié)構(gòu)域序列的actrii或gdftrap融合蛋白：。在其他實施方案中，本發(fā)明提供了包含igg1fc結(jié)構(gòu)域的下述變體的actrii或gdf捕獲物融合蛋白：。任選地，igg1fc結(jié)構(gòu)域具有在諸如asp-265、賴氨酸322和asn-434的殘基處的一個或多個突變。在某些情況下，具有這些突變（例如asp-265突變）中的一個或多個的突變型igg1fc結(jié)構(gòu)域相對于野生型fc結(jié)構(gòu)域具有降低的與fcγ受體結(jié)合的能力。在其他情況下，具有這些突變（例如asn-434突變）中的一個或多個的突變型fc結(jié)構(gòu)域具有相對于野生型igg1fc結(jié)構(gòu)域增加的結(jié)合mhci類相關(guān)fc受體（fcrn）的能力。在某些其他實施方案中，本發(fā)明提供了包含igg2fc結(jié)構(gòu)域的變體的actrii或gdf捕獲物融合蛋白，包括下述：。應(yīng)理解融合蛋白的不同要素可以以與所需功能性一致的任何方式排列。例如，actrii多肽結(jié)構(gòu)域或gdf捕獲物多肽結(jié)構(gòu)域可以位于異源結(jié)構(gòu)域的c末端，或可替代地，異源結(jié)構(gòu)域可以位于actrii多肽結(jié)構(gòu)域或gdf捕獲物多肽結(jié)構(gòu)域的c末端。actrii多肽結(jié)構(gòu)域或gdf捕獲物多肽結(jié)構(gòu)域和異源結(jié)構(gòu)域無需在融合蛋白中相鄰，并且另外的結(jié)構(gòu)域或氨基酸序列可以包括在任一結(jié)構(gòu)域的c或n末端或結(jié)構(gòu)域之間。例如，actrii或gdf捕獲物融合蛋白可以包含如式a-b-c中所示的氨基酸序列。b部分對應(yīng)于actrii多肽結(jié)構(gòu)域或gdf捕獲物多肽結(jié)構(gòu)域。a和c部分可以獨立地為零個、一個或超過一個氨基酸，并且a和c部分兩者當(dāng)存在時對于b是異源的。a和/或c部分可以經(jīng)由接頭序列附著至b部分。示例性接頭包括短的多肽接頭，例如2-10、2-5、2-4、2-3個甘氨酸殘基，例如gly-gly-gly接頭。其他合適的接頭在上文描述[例如，tggg接頭（seqidno:53）]。在某些實施方案中，actrii或gdf捕獲物融合蛋白包含如式a-b-c中所示的氨基酸序列，其中a是前導(dǎo)（信號）序列，b由actrii或gdf多肽結(jié)構(gòu)域組成，并且c是增強(qiáng)體內(nèi)穩(wěn)定性、體內(nèi)半衰期、攝取/施用、組織定位或分布、蛋白質(zhì)復(fù)合物的形成和/或純化中的一種或多種的多肽部分。在某些實施方案中，actrii或gdf捕獲物融合蛋白包含如式a-b-c中所示的氨基酸序列，其中a是tpa前導(dǎo)序列，b由actrii或gdf多肽結(jié)構(gòu)域組成，并且c是免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域。在一些實施方案中，融合蛋白包含seqidno:22、26、29、31、36、38、41、44和51中的任何一個中所示的氨基酸序列。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii多肽或gdf捕獲物多肽含有能夠穩(wěn)定多肽的一種或多種修飾。例如，此類修飾增強(qiáng)多肽的體外半衰期，增強(qiáng)多肽的循環(huán)半衰期和/或減降低多肽的蛋白酶解降解。此類穩(wěn)定修飾包括但不限于融合蛋白（包括例如包含actrii多肽結(jié)構(gòu)域或gdf捕獲物多肽結(jié)構(gòu)域和穩(wěn)定結(jié)構(gòu)域的融合蛋白）、糖基化位點的修飾（包括例如糖基化位點對本發(fā)明的多肽的添加）、以及碳水化合物部分的修飾（包括例如從本發(fā)明的多肽中去除碳水化合物部分）。如本文使用的，術(shù)語“穩(wěn)定劑結(jié)構(gòu)域”不僅指如在融合蛋白的情況下的融合結(jié)構(gòu)域（例如免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域），還包括非蛋白質(zhì)修飾例如碳水化合物部分或非蛋白質(zhì)部分例如聚乙二醇。在一些實施方案中，待根據(jù)本文所述的方法使用的actrii多肽和gdf捕獲物是分離的多肽。如本文所用，分離的蛋白質(zhì)或多肽是與其天然環(huán)境的組分分開的蛋白質(zhì)或多肽。在一些實施方案中，本發(fā)明的多肽純化至大于95%、96%、97%、98%或99%的純度，如通過例如電泳（例如sds-page、等電聚焦（ief）、毛細(xì)管電泳）或?qū)游觯ɡ珉x子交換或反相hplc）測定的。用于評價抗體純度的方法是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如flatman等人，（2007）j.chromatogr.b848:79-87。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii多肽和gdf捕獲物可以通過各種本領(lǐng)域已知的技術(shù)產(chǎn)生。例如，本發(fā)明的多肽可以使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)化學(xué)技術(shù)合成，例如在bodansky，m.principlesofpeptidesynthesis，springerverlag，berlin（1993）和grantg.a.（編輯），syntheticpeptides：auser'sguide，w.h.freemanandcompany，newyork（1992）中所述的技術(shù)。另外，自動化肽合成儀是商購可得的（參見例如advancedchemtechmodel396；milligen/biosearch9600）?？商娲?，本發(fā)明的多肽，包括其片段或變體，可以使用如本領(lǐng)域眾所周知的各種表達(dá)系統(tǒng)重組產(chǎn)生（例如大腸桿菌（e.coli）、中國倉鼠卵巢（cho）細(xì)胞、cos細(xì)胞、桿狀病毒）。在一個進(jìn)一步的實施方案中，本發(fā)明的經(jīng)修飾的或未經(jīng)修飾的多肽可以通過使用例如蛋白酶（例如胰蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶或配對的堿性氨基酸轉(zhuǎn)化酶（pace）），通過消化重組產(chǎn)生的全長actrii或gdf捕獲物多肽來產(chǎn)生。計算機(jī)分析（使用商購可得的軟件，例如macvector，omega，pcgene，molecularsimulation，inc.）可以用于鑒定蛋白酶解切割位點?？商娲兀梢允褂没瘜W(xué)切割（例如溴化氰、羥胺等）由重組產(chǎn)生的全長actrii或gdf捕獲物多肽產(chǎn)生此類多肽。本文公開的actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）中的任何均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如治療或預(yù)防貧血，治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍等）。在一些實施方案中，所需效應(yīng)是治療一種或多種貧血并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍。在一些實施方案中，所需效應(yīng)是預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍。例如，本文公開的actrii多肽可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的actrii多肽，ii）本文公開的一種或多種gdf捕獲物；iii）本文公開的一種或多種actrii拮抗劑抗體（例如抗激活素a抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體和/或抗actriib抗體）；iv）本文公開的一種或多種小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）；v）本文公開的多核苷酸actrii拮抗劑中的一種或多種（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種卵泡抑素多肽；和/或vii）本文公開的一種或多種flrg多肽。類似地，本文公開的gdf捕獲物中的任何均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如治療或預(yù)防貧血，治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍等）。在一些實施方案中，所需效應(yīng)是治療一種或多種貧血并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍。在一些實施方案中，所需效應(yīng)是預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍。例如，本文公開的gdf捕獲物可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的gdf捕獲物，ii）本文公開的一種或多種actrii多肽（例如actriia或actriib多肽）；iii）本文公開的一種或多種actrii拮抗劑抗體（例如抗激活素a抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體和/或抗actriib抗體）；iv）本文公開的一種或多種小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）；v）本文公開的多核苷酸actrii拮抗劑中的一種或多種（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種卵泡抑素多肽；和/或vii）本文公開的一種或多種flrg多肽。b.編碼actrii多肽和gdf捕獲物的核酸在某些實施方案中，本發(fā)明提供了編碼本文公開的actrii多肽和gdf捕獲物多肽（包括其片段、功能變體和融合蛋白）的分離的和/或重組的核酸。例如，seqidno:12編碼天然存在的人actriia前體多肽，而seqidno:13編碼actriia的經(jīng)加工的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域。另外，seqidno:7編碼天然存在的人actriib前體多肽（上述r64變體），而seqidno:8編碼actriib的經(jīng)加工的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（上述r64變體）。主題核酸可以是單鏈或雙鏈的。此類核酸可以是dna或rna分子。這些核酸可以用于例如制備本發(fā)明的基于actrii的配體捕獲物多肽的方法中。如本文使用的，分離的核酸指已與其天然環(huán)境的組分分離的核酸分子。分離的核酸包括包含在通常含有核酸分子的細(xì)胞中的核酸分子，但是該核酸分子存在于染色體外或存在于與其天然染色體位置不同的染色體位置處。在某些實施方案中，編碼本發(fā)明的actrii多肽和gdf捕獲物的核酸應(yīng)理解為包括其為seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、43、46、47和48中的任何一個的變體的核酸。變體核苷酸序列包括通過一個或多個核苷酸取代、添加或缺失（包括等位基因變體）而不同的序列，并且因此將包括與seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、43、46、47和48中的任何一個中指定的核苷酸序列不同的編碼序列。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii多肽和gdf捕獲物由分離的或重組的核酸序列編碼，所述分離的或重組的核酸序列與seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、43、46、47和48至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同。在一些實施方案中，本發(fā)明的gdf捕獲物不由核酸序列編碼，所述核酸序列包含對應(yīng)于seqidno:7、8、12、13、27和32中的任何一個的核苷酸序列中的任何一個，或由對應(yīng)于seqidno:7、8、12、13、27和32中的任何一個的核苷酸序列中的任何一個組成。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將了解與seqidno:7、8、12、13、27、32、39、42、47和48互補(bǔ)的序列至少80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%等同的核酸序列或其變體也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在進(jìn)一步的實施方案中，本發(fā)明的核酸序列可以與異源核苷酸序列或在dna文庫中分離、重組和/或融合。在其他實施方案中，本發(fā)明的核酸還包括在高度嚴(yán)格條件下與seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、43、46、47和48中指定的核苷酸序列雜交的核苷酸序列，seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、43、46、47和48的互補(bǔ)序列或其片段。如上文討論的，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地理解，可以改變促進(jìn)dna雜交的合適的嚴(yán)格條件。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地理解，可以改變促進(jìn)dna雜交的合適的嚴(yán)格條件。例如，可以在約45℃下在6.0x氯化鈉/檸檬酸鈉（ssc）下執(zhí)行雜交，隨后為在50℃下2.0xssc的洗滌。例如，洗滌步驟中的鹽濃度可以選自在50℃下約2.0xssc的低嚴(yán)格性至在50℃下約0.2xssc的高嚴(yán)格性。另外，洗滌步驟中的溫度可以從在室溫、約22℃下的低嚴(yán)格條件增加到在約65℃下的高嚴(yán)格條件。溫度和鹽兩者均可改變，或者溫度或鹽濃度可以保持恒定，而另一個變量改變。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了在室溫下在6xssc的低嚴(yán)格條件下雜交，隨后在室溫下在2xssc下洗滌的核酸。由于遺傳密碼中的簡并性而與seqidno:7、8、12、13、27、32、39、40、42、43、46、47和48中所示的核酸不同的分離的核酸也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，許多氨基酸由超過一個三聯(lián)體指定。指定相同氨基酸或同義詞（例如cau和cac是組氨酸的同義詞）的密碼子可以導(dǎo)致不影響蛋白質(zhì)的氨基酸序列的“沉默”突變。然而，預(yù)期導(dǎo)致主題蛋白質(zhì)的氨基酸序列中的變化的dna序列多態(tài)性將存在于哺乳動物細(xì)胞中。本領(lǐng)域技術(shù)人員將了解由于天然等位基因變異，編碼特定蛋白質(zhì)的核酸的一個或多個核苷酸（高達(dá)約3-5%的核苷酸）中的這些變化可存在于給定物種的個體中。任何和所有此類核苷酸變化和所得到的氨基酸多態(tài)性在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在某些實施方案中，本發(fā)明的重組核酸可以可操作地連接到表達(dá)構(gòu)建體中的一種或多種調(diào)節(jié)核苷酸序列。調(diào)節(jié)核苷酸序列一般適合于用于表達(dá)的宿主細(xì)胞。眾多類型的合適的表達(dá)載體和合適的調(diào)節(jié)序列在本領(lǐng)域中對于各種宿主細(xì)胞是已知的。通常，所述一種或多種調(diào)節(jié)核苷酸序列可以包括但不限于啟動子序列、前導(dǎo)序列或信號序列、核糖體結(jié)合位點、轉(zhuǎn)錄起始和終止序列、翻譯起始和終止序列、以及增強(qiáng)子或激活子序列。本發(fā)明考慮了如本領(lǐng)域已知的組成型或誘導(dǎo)型啟動子。啟動子可以是天然存在的啟動子，或組合超過一個啟動子元件的雜合啟動子。表達(dá)構(gòu)建體可以存在于細(xì)胞中的附加體（例如質(zhì)粒）上，或表達(dá)構(gòu)建體可以插入染色體中。在一些實施方案中，表達(dá)載體含有可選擇標(biāo)記物基因以允許選擇轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞?？蛇x擇標(biāo)記物基因是本領(lǐng)域眾所周知的，并且將隨所使用的宿主細(xì)胞而變。在本發(fā)明的某些方面，主題核酸在包含編碼actrii多肽或gdf捕獲物的核苷酸序列的表達(dá)載體中提供，并可操作地連接于至少一種調(diào)節(jié)序列。調(diào)節(jié)序列是本領(lǐng)域公認(rèn)的，并被選擇以指導(dǎo)actrii或gdf捕獲物多肽的表達(dá)。因此，術(shù)語調(diào)節(jié)序列包括啟動子、增強(qiáng)子和其他表達(dá)控制元件。示例性調(diào)節(jié)序列在goeddel；geneexpressiontechnology：methodsinenzymology，academicpress，sandiego，ca（1990）中描述。例如，當(dāng)可操作地連接到dna序列時，控制dna序列表達(dá)的廣泛多樣的表達(dá)控制序列中的任何均可用于這些載體中，以表達(dá)編碼actrii或gdf捕獲物多肽的dna序列。此類有用的表達(dá)控制序列包括例如sv40的早期和晚期啟動子、tet啟動子、腺病毒或巨細(xì)胞病毒立即早期啟動子、rsv啟動子、lac系統(tǒng)、trp系統(tǒng)、tac或trc系統(tǒng)、其表達(dá)由t7rna聚合酶指導(dǎo)的t7啟動子、噬菌體λ的主要操縱子和啟動子區(qū)、關(guān)于fd外殼蛋白的控制區(qū)、關(guān)于3-磷酸甘油酸激酶或其他糖酵解酶的啟動子、酸性磷酸酶的啟動子例如pho5、酵母α-交配因子的啟動子、桿狀病毒系統(tǒng)的多角體啟動子以及已知控制原核或真核細(xì)胞或其病毒的基因表達(dá)的其他序列、及其各種組合。應(yīng)當(dāng)理解表達(dá)載體的設(shè)計可以取決于此類因素如待轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞的選擇和/或期望表達(dá)的蛋白質(zhì)的類型等。此外，還應(yīng)考慮載體的拷貝數(shù)、控制該拷貝數(shù)的能力和由載體編碼的任何其他蛋白質(zhì)例如抗生素標(biāo)記物的表達(dá)。本發(fā)明的重組核酸可以通過將克隆的基因或其部分連接到適合于在原核細(xì)胞、真核細(xì)胞（酵母、鳥類、昆蟲或哺乳動物）或兩者中表達(dá)的載體內(nèi)來產(chǎn)生。用于產(chǎn)生重組actrii或gdf捕獲物多肽的表達(dá)載體包括質(zhì)粒和其他載體。例如，合適的載體包括下述類型的質(zhì)粒：pbr322衍生的質(zhì)粒、pembl衍生的質(zhì)粒、pex衍生的質(zhì)粒、pbtac衍生的質(zhì)粒和puc衍生的質(zhì)粒，用于在原核細(xì)胞例如大腸桿菌中表達(dá)。一些哺乳動物表達(dá)載體含有促進(jìn)載體在細(xì)菌中增殖的原核序列，以及在真核細(xì)胞中表達(dá)的一個或多個真核轉(zhuǎn)錄單位兩者。pcdnai/amp、pcdnai/neo、prc/cmv、psv2gpt、psv2neo、psv2-dhfr、ptk2、prsvneo、pmsg、psvt7、pko-neo和phyg衍生載體是適合于轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞的哺乳動物表達(dá)載體的例子。這些載體中的一些用來自細(xì)菌質(zhì)粒（例如pbr322）的序列進(jìn)行修飾，以促進(jìn)在原核和真核細(xì)胞兩者中的復(fù)制和藥物抗性選擇。可替代地，病毒例如牛乳頭瘤病毒（bpv-1）或eb病毒（phebo、prep衍生的和p205）的衍生物可以用于在真核細(xì)胞中瞬時表達(dá)蛋白質(zhì)。其他病毒（包括逆轉(zhuǎn)錄病毒）表達(dá)系統(tǒng)的例子可以在下文的基因治療遞送系統(tǒng)的描述中找到。在質(zhì)粒的制備和宿主生物體的轉(zhuǎn)化中采用的各種方法是本領(lǐng)域眾所周知的。對于用于原核和真核細(xì)胞兩者的其他合適的表達(dá)系統(tǒng)，以及一般重組程序。參見例如molecularcloningalaboratorymanual，第3版，由sambrook、fritsch和maniatis編輯（coldspringharborlaboratorypress，2001）。在一些情況下，可能期望通過使用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)來表達(dá)重組多肽。此類桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的例子包括pvl衍生的載體（例如pvl1392、pvl1393和pvl941）、pacuw衍生的載體（例如pacuw1）和pbluebac衍生的載體（例如含有βgal的pbluebaciii）。在一些實施方案中，載體將設(shè)計用于在cho細(xì)胞中生產(chǎn)主題actrii或gdftrap多肽，例如pcmv-script載體（stratagene，lajolla，calif.）、pcdna4載體（invitrogen，carlsbad，calif.）、和pci-neo載體（promega，madison，wisc.）。顯而易見的是，主題基因構(gòu)建體可以用于引起主題actrii多肽在培養(yǎng)中繁殖的細(xì)胞中的表達(dá)，例如以產(chǎn)生用于純化的蛋白質(zhì)，包括融合蛋白或變體蛋白質(zhì)。本發(fā)明還涉及用包括一種或多種主題actrii或gdf捕獲物多肽的編碼序列的重組基因轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞。宿主細(xì)胞可以是任何原核或真核細(xì)胞。例如，本發(fā)明的actrii或gdf捕獲物多肽可以在細(xì)菌細(xì)胞例如大腸桿菌、昆蟲細(xì)胞（例如使用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)）、酵母或哺乳動物細(xì)胞[例如，中國倉鼠卵巢（cho）細(xì)胞系]中表達(dá)。其他合適的宿主細(xì)胞是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。相應(yīng)地，本發(fā)明進(jìn)一步涉及產(chǎn)生主題actrii和gdf捕獲物多肽的方法。例如，用編碼actrii或gdf捕獲物多肽的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞可以在適當(dāng)?shù)臈l件下培養(yǎng)，以允許actrii或gdf捕獲物多肽的表達(dá)發(fā)生。多肽可以從含有多肽的細(xì)胞和培養(yǎng)基的混合物中分泌且分離?？商娲兀琣ctrii或gdf捕獲物多肽可以保留在細(xì)胞質(zhì)中或膜部分中，并且將細(xì)胞收獲、裂解并分離蛋白質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)物包括宿主細(xì)胞、培養(yǎng)基和其他副產(chǎn)物。用于細(xì)胞培養(yǎng)的合適培養(yǎng)基是本領(lǐng)域眾所周知的。使用本領(lǐng)域已知的用于純化蛋白質(zhì)的技術(shù)，包括離子交換層析、凝膠過濾層析、超濾、電泳、使用對于actrii或gdf捕獲物多肽的特定表位的特異性抗體的免疫親和純化、以及用結(jié)合融合至actrii或gdf捕獲物多肽的結(jié)構(gòu)域的藥物的親和純化（例如蛋白a柱可以用于純化actrii-fc或gdf捕獲物-fc融合蛋白），可以從細(xì)胞培養(yǎng)基，宿主細(xì)胞或兩者中分離主題多肽。在一些實施方案中，actrii或gdf捕獲物多肽是含有促進(jìn)其純化的結(jié)構(gòu)域的融合蛋白。在一些實施方案中，純化通過一系列柱層析步驟實現(xiàn)，包括例如以任何次序的下述中的三種或更多種：蛋白a層析、q瓊脂糖層析、苯基瓊脂糖層析、尺寸排阻層析和陽離子交換層析。純化可以用病毒過濾和緩沖液交換完成。actrii-fc或gdf捕獲物-fc蛋白可以純化至如通過尺寸排阻層析測定的>90%、>95%、>96%、>98%或>99%的純度，或者如通過sdspage測定的>90%、>95%、>96%、>98%或>99%的純度。純度的靶水平應(yīng)當(dāng)是足以在哺乳動物系統(tǒng)，特別是非人靈長類動物、嚙齒動物（小鼠）和人中實現(xiàn)期望結(jié)果的水平。在另一個實施方案中，編碼純化前導(dǎo)序列的融合基因，例如在重組actrii或gdf捕獲物多肽的所需部分的n末端處的聚（his）/腸激酶裂解位點序列，可允許通過使用ni2+金屬樹脂的親和層析來純化表達(dá)的融合蛋白。隨后可以通過用腸激酶處理后續(xù)去除純化前導(dǎo)序列，以提供純化的actrii或gdf捕獲物多肽。參見例如hochuli等人（1987）j.chromatography411:177；和janknecht等人（1991）pnasusa88:8972。用于制備融合基因的技術(shù)是眾所周知的。基本上，編碼不同多肽序列的不同dna片段的連接根據(jù)常規(guī)技術(shù)執(zhí)行，采用用于連接的平端或交錯末端，限制酶消化以提供合適的末端，適當(dāng)?shù)靥畛湔承阅┒耍瑝A性磷酸酶處理以避免不期望的連接，以及酶連接。在另一個實施方案中，融合基因可以通過常規(guī)技術(shù)包括自動化dna合成儀合成?？商娲兀梢允褂缅^定引物進(jìn)行基因片段的pcr擴(kuò)增，所述錨定引物在兩個連續(xù)的基因片段之間產(chǎn)生互補(bǔ)突出端，隨后可以使所述互補(bǔ)突出端退火以生成嵌合基因序列。參見例如currentprotocolsinmolecularbiology，編輯ausubel等人，johnwiley&sons：1992。c.抗體拮抗劑在某些方面，本發(fā)明涉及拮抗actrii活性（例如抑制actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)）的抗體或抗體組合。特別地，本發(fā)明提供了使用抗體actrii拮抗劑或抗體actrii拮抗劑組合來例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗體actrii拮抗劑或抗體actrii拮抗劑組合來治療有此需要的受試者中的貧血，和/或治療患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用抗體actrii拮抗劑或抗體actrii拮抗劑組合來預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或預(yù)防患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗體actrii拮抗劑是結(jié)合和/或抑制至少gdf11的活性（例如gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）的抗體或抗體組合。任選地，抗體或抗體組合進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制gdf8的活性（例如gdf8介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活），特別是在對于gdf11和gdf8兩者具有結(jié)合親和力的多特異性抗體的情況下，或者在一種或多種抗gdf11抗體和一種或多種抗gdf8抗體的組合的上下文中。任選地，本發(fā)明的抗體或抗體組合基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a的活性（例如激活素a介導(dǎo)的actriia或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。在一些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf11和/或gdf8活性的本發(fā)明的抗體或抗體組合進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種（例如actriia或actriib、smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)的激活），特別是在對于多重actrii配體具有結(jié)合親和力的多特異性抗體的情況下，或在各自具有對于不同actrii配體的結(jié)合親和力的多重抗體組合的上下文中。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑是結(jié)合和/或抑制至少gdf8的活性（例如gdf8介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）的抗體或抗體組合。任選地，抗體或抗體組合進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制gdf11的活性（例如gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活），特別是在對于gdf8和gdf11兩者具有結(jié)合親和力的多特異性抗體的情況下，或者在一種或多種抗gdf8抗體和一種或多種抗gdf11抗體的組合的上下文中。任選地，本發(fā)明的抗體或抗體組合基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a的活性（例如激活素a介導(dǎo)的actriia或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。在一些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf8和/或gdf11活性的本發(fā)明的抗體或抗體組合進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種（例如actriia或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)的激活），特別是在對于多重actrii配體具有結(jié)合親和力的多特異性抗體的情況下，或在各自具有對于不同actrii配體的結(jié)合親和力的組合多重抗體的上下文中。在另一個方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑是結(jié)合和/或抑制actrii受體（例如actriia或actriib受體）活性的抗體或抗體組合。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗actrii受體抗體（例如抗actriia或抗actriib受體抗體）或抗體組合結(jié)合actrii受體并阻止通過至少gdf11的actrii受體的結(jié)合和/或激活（例如gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。任選地，本發(fā)明的抗actrii受體抗體或抗體組合進(jìn)一步阻止通過gdf8的actrii受體結(jié)合和/或激活。任選地，本發(fā)明的抗actrii受體抗體或抗體組合基本上不抑制激活素a結(jié)合和/或激活actrii受體。在一些實施方案中，結(jié)合actrii受體并阻止通過gdf11和/或gdf8的actrii受體結(jié)合和/或激活的本發(fā)明的抗actrii受體抗體或抗體組合進(jìn)一步阻止通過激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種的actrii受體結(jié)合和/或激活。術(shù)語抗體在本文中以最廣泛的含義使用，并且涵蓋不同抗體結(jié)構(gòu)，包括但不限于單克隆抗體、多克隆抗體、多特異性抗體（例如雙特異性抗體）和抗體片段，只要它們顯示出所需的抗原結(jié)合活性?？贵w片段指除完整抗體外的分子，其包含結(jié)合完整抗體與之結(jié)合的抗原的完整抗體的一部分?？贵w片段的例子包括但不限于fv、fab、fab'、fab'-sh、f（ab'）2；雙抗體；線性抗體；單鏈抗體分子（例如scfv）；和由抗體片段形成的多特異性抗體。參見例如hudson等人（2003）nat.med.9:129-134；plückthun，thepharmacologyofmonoclonalantibodies，第113卷，rosenburg和moore編輯（springer-verlag，newyork），第269-315頁（1994）；wo93/16185；以及美國專利號5,571,894、5,587,458和5,869,046。本文公開的抗體可以是多克隆抗體或單克隆抗體。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗體包含附著于其并能夠被檢測的標(biāo)記（例如標(biāo)記可以是放射性同位素、熒光化合物、酶或酶輔因子）。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體是分離的抗體。雙抗體是具有可以是二價或雙特異性的兩個抗原結(jié)合位點的抗體片段。參見例如ep404,097；wo1993/01161；hudson等人（2003）nat.med.9:129-134（2003）；和hollinger等人（1993）proc.natl.acad.sci.usa90：6444-6448。三抗體和四抗體也在hudson等人（2003）nat.med.9:129-134中描述。單結(jié)構(gòu)域抗體是包含抗體的重鏈可變結(jié)構(gòu)域的全部或部分或者輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的全部或部分的抗體片段。在某些實施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體是人單結(jié)構(gòu)域抗體。參見例如美國專利號6,248,516?？贵w片段可以通過不同技術(shù)進(jìn)行制備，所述技術(shù)包括但不限于完整抗體的蛋白酶解消化以及通過重組宿主細(xì)胞（例如大腸桿菌或噬菌體）的產(chǎn)生，如本文描述的。本文的抗體可以是任何類別?？贵w的類別指由其重鏈具有的恒定結(jié)構(gòu)域或恒定區(qū)的類型。存在五個主要類別的抗體：iga、igd、ige、igg和igm，并且這些中的幾個可以進(jìn)一步分為亞類（同種型），例如igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2。對應(yīng)于不同類別的免疫球蛋白的重鏈恒定結(jié)構(gòu)域稱為α，δ，ε，γ和μ。一般而言，用于本文公開的方法中的抗體特異性結(jié)合其靶抗原，優(yōu)選具有高結(jié)合親和力。親和力可以表示為kd值并反映固有的結(jié)合親和力（例如具有最低限度的親合力效應(yīng)）。通常，在體外測量結(jié)合親和力，無論是在無細(xì)胞還是細(xì)胞相關(guān)設(shè)置中。本領(lǐng)域已知的多種測定法中的任何，包括本文公開的那些，可以用于獲得結(jié)合親和力測量，包括例如表面等離子體共振（biacore?測定）、放射性標(biāo)記的抗原結(jié)合測定（ria）和elisa。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體結(jié)合其靶抗原（例如gdf11、gdf8、actriia、actriib等），其具有至少1x10-7或更強(qiáng)、1x10-8或更強(qiáng)、1x10-9或更強(qiáng)、1x10-10或更強(qiáng)、1x10-11或更強(qiáng)、1x10-12或更強(qiáng)、1x10-13或更強(qiáng)、或者1x10-14或更強(qiáng)的kd。在某些實施方案中，通過用fab形式的目的抗體及其靶抗原執(zhí)行的ria測量kd，如通過下述測定所述。通過在滴定系列的未標(biāo)記抗原的存在下用最低限度濃度的放射性標(biāo)記的抗原（例如125i標(biāo)記的）平衡fab，隨后用抗fab抗體包被的板捕獲結(jié)合的抗原，來測量fab對于抗原的溶液結(jié)合親和力。參見例如chen等人（1999）j.mol.biol.293:865-881。為了建立用于測定的條件，用捕獲抗fab抗體（例如來自cappellabs）包被（例如過夜）多孔板（例如來自thermoscientific的microtiter?），并且隨后用牛血清白蛋白封閉，優(yōu)選在室溫（大約23℃）下。在非吸附板中，將放射性標(biāo)記的抗原與目的fab的系列稀釋物混合（例如與presta等人，（1997）cancerres.57:4593-4599中的抗vegf抗體，fab-12的評價一致]。隨后溫育目的fab，優(yōu)選過夜，但溫育可以持續(xù)更長的時期（例如約65小時），以確保達(dá)到平衡。其后，將混合物轉(zhuǎn)移至捕獲板用于溫育，優(yōu)選在室溫下約一小時。隨后去除溶液，將板洗滌幾次，優(yōu)選用聚山梨醇酯20和pbs混合物。當(dāng)板已干燥時，加入閃爍劑（例如來自packard的microscint?），并在γ計數(shù)器（例如來自packard的topcount?）上計數(shù)板。根據(jù)另一個實施方案，使用例如具有以約10個響應(yīng)單位（ru）的固定化抗原cm5芯片的biacore?2000或biacore?3000（biacore，inc.，piscataway，n.j.），使用表面等離子體共振測定測量kd。簡言之，根據(jù)供應(yīng)商的說明書，用n-乙基-n'-（3-二甲基氨基丙基）-碳二亞胺鹽酸鹽（edc）和n-羥基琥珀酰亞胺（nhs）激活羧甲基化右旋糖酐生物傳感器芯片（cm5，biacoreinc.）。例如，可以在以5μl/分鐘的流速注射以實現(xiàn)大約10個響應(yīng)單位（ru）的偶聯(lián)蛋白前，用10mm乙酸鈉，ph4.8將抗原稀釋至5μg/ml（約0.2μm）。在注射抗原后，注射1m乙醇胺以封閉未反應(yīng)的基團(tuán)。對于動力學(xué)測量，將fab（0.78nm至500nm）的兩倍系列稀釋物以大約25μl/分鐘的流速注射到具有0.05%聚山梨醇酯20（tween-20?）表面活性劑的pbs（pbst）中。使用例如簡單的一對一蘭米爾結(jié)合模型（biacore?evaluationsoftware版本3.2），通過同時擬合結(jié)合和解離傳感圖，來計算結(jié)合速率（kon）和解離速率（kon）。平衡解離常數(shù)（kd）計算為比率koff/kon。參見例如chen等人，（1999）j.mol.biol.293:865-881。如果結(jié)合速率通過上述表面等離子體共振測定超過例如106m-1s-1，則結(jié)合速率可以通過使用熒光淬滅技術(shù)進(jìn)行測定，所述熒光淬滅技術(shù)測量在增加濃度的抗原的存在下在pbs中的20nm抗抗原抗體（fab形式）的熒光發(fā)射強(qiáng)度（例如激發(fā)=295nm；發(fā)射=340nm，16nm帶通）中的增加或降低，如在光譜儀中測量的，所述光譜儀例如裝備有截止流量的分光光度計（avivinstruments）或具有攪拌比色杯的8000系列slm-aminco分光光度計?（thermospectronic）。如本文使用的，抗gdf11抗體一般指能夠以足夠的親和力結(jié)合gdf11的抗體，使得抗體可用作靶向gdf11的診斷劑和/或治療劑。在某些實施方案中，抗gdf11抗體與不相關(guān)的非gdf11蛋白的結(jié)合程度小于約10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小于1%的抗體與gdf11的結(jié)合，如例如通過放射性免疫測定（ria）測量。在某些實施方案中，抗gdf11抗體結(jié)合來自不同物種的在gdf11中保守的gdf11表位。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗gdf11抗體是可以抑制gdf11活性的拮抗劑抗體。例如，本發(fā)明的抗gdf11抗體可以抑制gdf11與同源受體（例如actriia或actriib受體）的結(jié)合，和/或抑制gdf11介導(dǎo)的同源受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)（激活）例如通過actriia和/或actriib受體的smad2/3信號傳導(dǎo)。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗gdf11抗體基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a的活性。應(yīng)當(dāng)注意gdf11與gdf8具有高序列同源性，并且因此結(jié)合和/或結(jié)合gdf11的抗體在一些情況下還可以結(jié)合和/或抑制gdf8?？筭df8抗體指能夠以足夠的親和力結(jié)合gdf8的抗體，使得抗體可用作靶向gdf8的診斷劑和/或治療劑。在某些實施方案中，抗gdf8抗體與不相關(guān)的非gdf8蛋白的結(jié)合程度小于約10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小于1%的抗體與gdf8的結(jié)合，如例如通過放射性免疫測定（ria）測量。在某些實施方案中，抗gdf8抗體結(jié)合來自不同物種的在gdf8中保守的gdf8表位。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗gdf8抗體是可以抑制gdf8活性的拮抗劑抗體。例如，本發(fā)明的抗gdf8抗體可以抑制gdf8與同源受體（例如actriia或actriib受體）的結(jié)合，和/或抑制gdf8介導(dǎo)的同源受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)（激活）例如通過actriia和/或actriib受體的smad2/3信號傳導(dǎo)。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗gdf8抗體基本上不結(jié)合和/或抑制激活素a的活性。應(yīng)當(dāng)注意gdf8與gdf11具有高序列同源性，并且因此結(jié)合和/或結(jié)合gdf8的抗體在許多情況下還可以結(jié)合和/或抑制gdf11?？筧ctriia抗體指能夠以足夠的親和力結(jié)合actriia的抗體，使得抗體可用作靶向actriia的診斷劑和/或治療劑。在某些實施方案中，抗actriia抗體與不相關(guān)的非actriia蛋白的結(jié)合程度小于約10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小于1%的抗體與actriia的結(jié)合，如例如通過放射性免疫測定（ria）測量。在某些實施方案中，抗actriia抗體結(jié)合來自不同物種的在actriia中保守的actriia表位。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗actriia抗體是可以抑制actriia活性的拮抗劑抗體。例如，本發(fā)明的抗actriia抗體可以抑制選自激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、激活素a、bmp6和bmp7中的一種或多種actriia配體結(jié)合actriia受體，和/或抑制這些配體之一激活actriia信號傳導(dǎo)（例如smad2/3和/或smad1/5/8actriia信號傳導(dǎo)）。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗actriia抗體抑制gdf11結(jié)合actriia受體和/或抑制gdf11激活actriia信號傳導(dǎo)。任選地，本發(fā)明的抗actriia抗體進(jìn)一步抑制gdf8結(jié)合actriia受體和/或抑制gdf8激活actriia信號傳導(dǎo)。任選地，本發(fā)明的抗actriia抗體基本上不抑制激活素a與actriia受體的結(jié)合和/或基本上不抑制激活素a介導(dǎo)的actriia信號傳導(dǎo)的激活。在一些實施方案中，抑制gdf11和/或gdf8結(jié)合和/或激活actriia受體的本發(fā)明的抗actriia抗體進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、激活素a、gdf8、bmp6和bmp7中的一種或多種結(jié)合和/或激活actriia受體?？筧ctriib抗體指能夠以足夠的親和力結(jié)合actriib的抗體，使得抗體可用作靶向actriib的診斷劑和/或治療劑。在某些實施方案中，抗actriib抗體與不相關(guān)的非actriib蛋白的結(jié)合程度小于約10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%或小于1%的抗體與actriib的結(jié)合，如例如通過放射性免疫測定（ria）測量。在某些實施方案中，抗actriib抗體結(jié)合來自不同物種的在actriib中保守的actriib表位。在某些實施方案中，本發(fā)明的抗actriib抗體是可以抑制actriib活性的拮抗劑抗體。例如，本發(fā)明的抗actriib抗體可以抑制選自激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf11、gdf8、激活素a、bmp6和bmp7中的一種或多種actriib配體結(jié)合actriib受體，和/或抑制這些配體之一激活actriib信號傳導(dǎo)（例如smad2/3和/或smad1/5/8actriib信號傳導(dǎo)）。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗actriib抗體抑制gdf11結(jié)合actriib受體和/或抑制gdf11激活actriib信號傳導(dǎo)。任選地，本發(fā)明的抗actriib抗體進(jìn)一步抑制gdf8結(jié)合actriib受體和/或抑制gdf8激活actriib信號傳導(dǎo)。任選地，本發(fā)明的抗actriib抗體基本上不抑制激活素a與actriib受體的結(jié)合和/或基本上不抑制激活素a介導(dǎo)的actriib信號傳導(dǎo)的激活。在一些實施方案中，抑制gdf11和/或gdf8結(jié)合和/或激活actriib受體的本發(fā)明的抗actriib抗體進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、激活素a、gdf8、bmp6和bmp7中的一種或多種結(jié)合和/或激活actriib受體。人gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、gdf8、bmp6、bmp7、actriib和actriia的核酸和氨基酸序列是本領(lǐng)域眾所周知的，并且因此用于根據(jù)本發(fā)明使用的抗體拮抗劑可以通過技術(shù)人員基于本領(lǐng)域的知識和本文提供的教導(dǎo)照常規(guī)進(jìn)行制備。在某些實施方案中，本文提供的抗體（例如抗gdf11抗體，抗gdf8抗體，抗actriia抗體或抗actriib抗體）是嵌合抗體。嵌合抗體指其中重鏈和/或輕鏈的一部分衍生自特定來源或物種，而重鏈和/或輕鏈的其余部分衍生自不同來源或物種的抗體。某些嵌合抗體例如在美國專利4,816,567；和morrison等人，（1984）proc.natl.acad.sci.usa，81:6851-6855中描述。在一些實施方案中，嵌合抗體包含非人可變區(qū)（例如衍生自小鼠、大鼠、倉鼠、兔或非人靈長類動物例如猴的可變區(qū)）和人恒定區(qū)。在一些實施方案中，嵌合抗體是其中類別或亞類已從親本抗體的類別或亞類改變的“類別轉(zhuǎn)換”抗體。一般而言，嵌合抗體包括其抗原結(jié)合片段。在某些實施方案中，本文提供的嵌合抗體（例如抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）是人源化抗體。人源化抗體指包含來自非人高變區(qū)（hvr）的氨基酸殘基和來自人構(gòu)架區(qū)（fr）的氨基酸殘基的嵌合抗體。在某些實施方案中，人源化抗體將包含至少一個且通常為兩個可變結(jié)構(gòu)域的基本上全部，其中hvr（例如cdr）的全部或基本上全部對應(yīng)于非人抗體的那些，并且fr的全部或基本上全部對應(yīng)于人抗體的fr。人源化抗體任選可以包含衍生自人抗體的抗體恒定區(qū)的至少一部分?？贵w例如非人抗體的“人源化形式”指已經(jīng)歷人源化的抗體。人源化抗體及其制備方法例如在almagro和fransson（2008）front.biosci.13:1619-1633中綜述，并且例如在riechmann等人，（1988）nature332:323-329；queen等人（1989）proc.nat'lacad.sci.usa86:10029-10033；美國專利號5,821,337、7,527,791、6,982,321和7,087,409；kashmiri等人，（2005）methods36:25-34[描述sdr（a-cdr）移植]；padlan，mol.immunol.（1991）28:489-498（描述“表面重建”）；dall'acqua等人（2005）methods36:43-60（描述“fr改組”）；osbourn等人（2005）methods36：61-68；和klimka等人br.j.cancer（2000）83:252-260（描述fr改組的“引導(dǎo)選擇”方法）中進(jìn)一步描述?？梢杂糜谌嗽椿娜藰?gòu)架區(qū)包括但不限于：使用“最佳擬合”方法選擇的構(gòu)架區(qū)[參見例如sims等人（1993）j.immunol.151:2296]；衍生自輕鏈或重鏈可變區(qū)的特定亞組的人抗體的共有序列的構(gòu)架區(qū)[參見例如carter等人（1992）proc.natl.acad.sci.usa，89:4285；和presta等人（1993）j.immunol.，151:2623]；人成熟（體細(xì)胞突變）構(gòu)架區(qū)或人種系構(gòu)架區(qū)[參見例如almagro和fransson（2008）front.biosci.13:1619-1633]；以及衍生自篩選fr文庫的構(gòu)架區(qū)（參見例如baca等人，（1997）j.biol.chem.272:10678-10684；和rosok等人，（1996）j.biol.chem.271:22611-22618）。在某些實施方案中，本文提供的抗體（例如抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）是人抗體。人抗體可以使用本領(lǐng)域已知的不同技術(shù)產(chǎn)生。人抗體一般在vandijk和vandewinkel（2001）curr.opin.pharmacol.5：368-74和lonberg（2008），curr.opin.immunol.20:450-459中描述。人抗體可以通過將免疫原（例如gdf11多肽、gdf8多肽、actriia多肽或actriib多肽）施用于轉(zhuǎn)基因動物進(jìn)行制備，所述轉(zhuǎn)基因動物已進(jìn)行修飾以響應(yīng)抗原攻擊產(chǎn)生完整的人抗體或具有人可變區(qū)的完整抗體。此類動物通常含有人免疫球蛋白基因座的全部或一部分，其替換內(nèi)源性免疫球蛋白基因座，或者存在于染色體外或隨機(jī)整合到動物的染色體內(nèi)。在此類轉(zhuǎn)基因動物中，內(nèi)源性免疫球蛋白基因座一般已失活。關(guān)于從轉(zhuǎn)基因動物獲得人抗體的方法的綜述，參見例如lonberg（2005）nat.biotechnol.23:1117-1125；美國專利號6,075,181和6,150,584（描述xenomouse?技術(shù)）；美國專利號5,770,429（描述humab?技術(shù)）；美國專利號7,041,870（描述k-mmouse?技術(shù)）；和美國專利申請公開號2007/0061900（描述velocimouse?技術(shù)）。來自由此類動物生成的完整抗體的人可變區(qū)可以例如通過與不同的人恒定區(qū)組合進(jìn)一步進(jìn)行修飾。本文提供的人抗體也可以通過基于雜交瘤的方法進(jìn)行制備。已描述了用于產(chǎn)生人單克隆抗體的人骨髓瘤和小鼠-人異源骨髓瘤細(xì)胞系。參見例如kozborj.immunol.,（1984）133：3001；brodeur等人（1987）monoclonalantibodyproductiontechniquesandapplications，第51-63頁，marceldekker，inc.，newyork；和boerner等人（1991）j.immunol.，147：86；經(jīng)由人b細(xì)胞雜交瘤技術(shù)生成的人抗體也在li等人，（2006）proc.natl.acad.sci.usa，103:3557-3562中描述。另外的方法包括例如在美國專利號7,189,826（描述了從雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生單克隆人igm抗體）和ni，xiandaimianyixue（2006）26（4）:265-268（2006）（描述人-人雜交瘤）中描述的那些。人雜交瘤技術(shù)（三源雜交瘤技術(shù)）也在vollmers和brandlein（2005）histol.histopathol.，20（3）:927-937（2005）以及vollmers和brandlein（2005）methodsfindexp.clin.pharmacol.，27（3）:185-91中描述。本文提供的人抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）也可以通過分離選自人衍生的噬菌體顯示文庫的fv克隆可變結(jié)構(gòu)域序列來生成。隨后可以將此類可變結(jié)構(gòu)域序列與所需的人恒定結(jié)構(gòu)域組合。本文描述了用于從抗體文庫中選擇人抗體的技術(shù)。例如，本發(fā)明的抗體可以通過在組合文庫中篩選具有所需活性的抗體進(jìn)行分離。本領(lǐng)域已知用于生成噬菌體展示文庫并在此類文庫中篩選具有所需結(jié)合特征的抗體的各種方法。此類方法例如在hoogenboom等人（2001）methodsinmolecularbiology178:1-37，o'brien等人，編輯，humanpress，totowa，n.j.中綜述，并且進(jìn)一步例如在下述中描述：mccafferty等人（1991）nature348:552-554；clackson等人，（1991）nature352：624-628；marks等人（1992）j.mol.biol.222:581-597；marks和bradbury（2003）inmethodsinmolecularbiology248:161-175，lo，編輯，humanpress，totowa，n.j.；sidhu等人（2004）j.mol.biol.338（2）:299-310；lee等人（2004）j.mol.biol.340（5）:1073-1093；fellouse（2004）proc.natl.acad.sci.usa101（34）:12467-12472；和lee等人（2004）j.immunol.methods284（1-2）：119-132。在某些噬菌體展示方法中，通過聚合酶鏈反應(yīng)（pcr）分開克隆vh和vl基因的儲庫，并在噬菌體文庫中隨機(jī)重組，隨后可以在所述噬菌體文庫中篩選抗原結(jié)合噬菌體，如winter等人（1994）ann.rev.immunol.，12：433-455中所述。噬菌體通常展示作為單鏈fv（scfv）片段或fab片段的抗體片段。來自免疫來源的文庫提供了針對免疫原（例如gdf11、激活素b、actriia或actriib）的高親和力抗體，而無需構(gòu)建雜交瘤?？商娲兀梢钥寺。ɡ鐏碜匀耍┨烊粌?，以提供針對廣泛范圍的非自身抗體以及自身抗原的單一抗體來源，而無需任何免疫接種，如通過griffiths等人（1993）emboj，12：725-734描述的。最后，也可以通過克隆來自干細(xì)胞的未重排的v基因區(qū)段并使用含有隨機(jī)序列的pcr引物來合成制備天然文庫，以編碼高度可變的cdr3區(qū)并在體外完成重排，如通過hoogenboom和winter（1992）j.mol.biol.，227：381-388描述的。描述人抗體噬菌體文庫的專利出版物包括例如：美國專利號5,750,373和美國專利公開號2005/0079574、2005/0119455、2005/0266000、2007/0117126、2007/0160598、2007/0237764、2007/0292936和2009/0002360。在某些實施方案中，本文提供的抗體是多特異性抗體，例如雙特異性抗體。多特異性抗體（通常為單克隆抗體）對于在一種或多種（例如兩種、三種、四種、五種、六種或更多種）抗原上的至少兩個不同表位（例如兩個、三個、四個、五個、或者六個或更多個）具有結(jié)合特異性。在某些實施方案中，本發(fā)明的多特異性抗體包含兩種或更多種結(jié)合特異性，其中所述結(jié)合特異性中的至少一種針對gdf11表位，并且任選地一種或多種另外的結(jié)合特異性針對不同actrii配體（例如gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6bmp7和/或nodal）和/或actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）上的表位。在某些實施方案中，多特異性抗體可以結(jié)合gdf11的兩個或更多個不同表位。優(yōu)選地，本發(fā)明的多特異性抗體（其部分地對于gdf11表位具有結(jié)合親和力）可以用于抑制gdf11活性（例如結(jié)合和/或激活actriia和/或actriib受體的能力），并且任選地抑制一種或多種不同的actrii配體（例如gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal）和/或actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）的活性。在某些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf11的本發(fā)明的多特異性抗體進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制至少gdf8。任選地，結(jié)合和/或抑制gdf11的本發(fā)明的多特異性抗體基本上不結(jié)合和/或基本上不抑制激活素a。在一些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf11和gdd8的本發(fā)明的多特異性抗體進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal中的一種或多種。在某些實施方案中，本發(fā)明的多特異性抗體包含兩種或更多種結(jié)合特異性，其中所述結(jié)合特異性中的至少一種針對gdf8表位，并且任選地一種或多種另外的結(jié)合特異性針對不同actrii配體（例如gdf11、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6bmp7和/或nodal）和/或actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）上的表位。在某些實施方案中，多特異性抗體可以結(jié)合gdf8的兩個或更多個不同表位。優(yōu)選地，本發(fā)明的多特異性抗體（其部分地對于gdf8表位具有結(jié)合親和力）可以用于抑制gdf8活性（例如結(jié)合和/或激活actriia和/或actriib受體的能力），并且任選地抑制一種或多種不同的actrii配體（例如gdf11、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal）和/或actrii受體（例如actriia和/或actriib受體）的活性。在某些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf8的本發(fā)明的多特異性抗體進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制至少gdf11。任選地，結(jié)合和/或抑制gdf8的本發(fā)明的多特異性抗體基本上不結(jié)合和/或基本上不抑制激活素a。在一些實施方案中，結(jié)合和/或抑制gdf8和gdd11的本發(fā)明的多特異性抗體進(jìn)一步結(jié)合和/或抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和/或nodal中的一種或多種。本文還包括具有三個或更多個功能抗原結(jié)合位點的經(jīng)工程改造的抗體，包括“章魚抗體（octopusantibodies）”。參見例如us2006/0025576a1。在某些實施方案中，本文公開的抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）是單克隆抗體。單克隆抗體指從基本上同質(zhì)的抗體群體獲得的抗體，即群體包含的單個抗體是等同的和/或結(jié)合相同的表位，除了例如含有天然存在或在單克隆抗體制劑生產(chǎn)期間出現(xiàn)的突變的可能變體抗體之外，此類變體一般以少量存在。與通常包括針對不同表位的不同抗體的多克隆抗體制劑形成對比，單克隆抗體制劑的每種單克隆抗體針對抗原上的單個表位。因此，修飾語“單克隆”指示如從基本上同質(zhì)的抗體群體中獲得的抗體特征，并且不應(yīng)解釋為需要通過任何特定方法產(chǎn)生抗體。例如，待根據(jù)本文方法使用的單克隆抗體可以通過各種技術(shù)進(jìn)行制備，所述技術(shù)包括但不限于雜交瘤方法、重組dna方法、噬菌體展示方法和利用含有人免疫球蛋白基因座的全部或部分的轉(zhuǎn)基因動物的方法，此類方法和用于制備單克隆抗體的其他示例性方法在本文中描述。例如，通過使用衍生自gdf11或gdf8的免疫原，可以通過標(biāo)準(zhǔn)方案制備抗蛋白/抗肽抗血清或單克隆抗體。參見例如antibodies：alaboratorymanual（1988）由harlow和lane編輯，coldspringharborpress：1988?？梢杂妹庖咴孕问降膅df11或gdf8多肽、能夠引發(fā)抗體應(yīng)答的抗原性段或融合蛋白來免疫哺乳動物，例如小鼠、倉鼠或兔。用于對蛋白質(zhì)或肽賦予免疫原性的技術(shù)包括與載體綴合或本領(lǐng)域眾所周知的其他技術(shù)。gdf11或gdf8多肽的免疫原性部分可以在佐劑的存在下進(jìn)行施用。可以通過檢測血漿或血清中的抗體滴度來監(jiān)測免疫接種的進(jìn)展。標(biāo)準(zhǔn)elisa或其他免疫測定可以與作為抗原的免疫原一起使用，以評價抗體產(chǎn)生的水平和/或結(jié)合親和力的水平。在用gdf11或gdf8的抗原制劑給動物免疫接種后，可以獲得抗血清，并且如果需要，則可以從血清中分離多克隆抗體。為了產(chǎn)生單克隆抗體，可以從免疫動物中收獲抗體產(chǎn)生細(xì)胞（淋巴細(xì)胞），并通過標(biāo)準(zhǔn)體細(xì)胞融合程序與永生化細(xì)胞（例如骨髓瘤細(xì)胞）融合以產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞。此類技術(shù)是本領(lǐng)域眾所周知的，并且包括例如雜交瘤技術(shù)[參見例如kohler和milstein（1975）nature，256：495-497]、人b細(xì)胞雜交瘤技術(shù)[參見例如kozbar等人（1983）immunologytoday，4:72]和ebv雜交瘤技術(shù)來產(chǎn)生人單克隆抗體[cole等人（1985）monoclonalantibodiesandcancertherapy，alanr.liss，inc.第77-96頁]?？梢悦庖呋瘜W(xué)篩選雜交瘤細(xì)胞用于產(chǎn)生與gdf11或gdf8多肽特異性反應(yīng)的抗體，和從包含此類雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)物中分離的單克隆抗體。在某些實施方案中，可以將一種或多種氨基酸修飾引入本文提供的抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）的fc區(qū)內(nèi)，從而生成fc區(qū)變體。fc區(qū)變體可以包含在一個或多個氨基酸位置處包含氨基酸修飾（例如取代，、缺失和/或添加）的人fc區(qū)序列（例如人igg1、igg2、igg3或igg4fc區(qū)）。例如，本發(fā)明考慮了具有一些但不是全部效應(yīng)子功能的抗體變體，這使其成為應(yīng)用的期望候選物，在所述應(yīng)用中抗體的體內(nèi)半衰期是重要的，但對于其某些效應(yīng)子功能[例如補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性（cdc）和抗體依賴性細(xì)胞毒性（adcc）]是不必要的或有害的。可以進(jìn)行體外和/或體內(nèi)細(xì)胞毒性測定，以證實cdc和/或adcc活性的降低/耗盡。例如，可以進(jìn)行fc受體（fcr）結(jié)合測定，以確?？贵w缺乏fcγr結(jié)合（因此可能缺乏adcc活性），但保留fcrn結(jié)合能力。用于介導(dǎo)adcc的原代細(xì)胞nk細(xì)胞僅表達(dá)fcγriii，而單核細(xì)胞表達(dá)fcγri、fcγrii和fcγriii。造血細(xì)胞上的fcr表達(dá)在例如ravetch和kinet（1991）annu.rev.immunol.9:457-492中概括。評價目的分子的adcc活性的體外測定的非限制性例子在美國專利號5,500,362；hellstrom，i.等人（1986）proc.nat'lacad.sci.usa83:7059-7063]；hellstrom，i等人（1985）proc.nat'lacad.sci.usa82:1499-1502；美國專利號5,821,337；和bruggemann，m.等人（1987）j.exp.med.166:1351-1361中描述?？商娲?，可以采用非放射性測定方法（例如acti?，用于流式細(xì)胞術(shù)的非放射性細(xì)胞毒性測定；celltechnology，inc.mountainview，calif.；和cytotox96?非放射性細(xì)胞毒性測定，promega，madison，wis.）。用于此類測定的有用的效應(yīng)細(xì)胞包括外周血單核細(xì)胞（pbmc）和自然殺傷（nk）細(xì)胞?？商娲鼗蛄硗猓梢岳缭趧游锬Ｐ椭?，例如在clynes等人（1998）proc.nat'lacad.sci.usa95:652-656中公開的動物模型中，在體內(nèi)評價目的分子的adcc活性。還可以進(jìn)行c1q結(jié)合測定，以證實抗體不能結(jié)合c1q并因此缺乏cdc活性。參見例如wo2006/029879和wo2005/100402中的c1q和c3c結(jié)合elisa。為了評價補(bǔ)體激活，可以執(zhí)行cdc測定。參見例如gazzano-santoro等人（1996）j.immunol.methods202:163；cragg，m.s.等人（2003）blood101:1045-1052；和cragg，m.s,和m.j.glennie（2004）blood103:2738-2743。fcrn結(jié)合和體內(nèi)清除/半衰期測定也可以使用本領(lǐng)域已知的方法執(zhí)行。參見例如petkova，s.b.等人（2006）int'l.immunol.18（12）:1759-1769。具有降低的效應(yīng)子功能的本發(fā)明的抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）包括具有fc區(qū)殘基238、265、269、270、297、327和329中的一個或多個的取代的那些（美國專利號6,737,056）。此類fc突變體包括在氨基酸位置265、269、270、297和327中的兩個或更多個位置處具有取代的fc突變體，包括殘基265和297取代為丙氨酸的所謂“dana”fc突變體（美國專利號7,332,581）。在某些實施方案中，可能期望產(chǎn)生半胱氨酸經(jīng)工程改造的抗體，例如“thiomab”，其中抗體的一個或多個殘基被半胱氨酸殘基取代。在特定實施方案中，取代的殘基在抗體的可接近位點處出現(xiàn)。通過用半胱氨酸取代那些殘基，反應(yīng)性硫醇基團(tuán)因此位于抗體的可接近位點處，并且可以用于將抗體與其他部分（例如藥物部分或接頭-藥物部分）綴合以產(chǎn)生免疫綴合物，如本文進(jìn)一步描述的。在某些實施方案中，下述殘基中的任何一個或多個可以被半胱氨酸取代：輕鏈的v205（kabat編號）；重鏈的a118（eu編號）；和重鏈fc區(qū)的s400（eu編號）。半胱氨酸改造的抗體可以如例如在美國專利號7,521,541中所述生成。另外，用于篩選抗體以便鑒定所需抗體的技術(shù)可以影響所獲得的抗體的性質(zhì)。例如，如果抗體用于結(jié)合溶液中的抗原，則可能期望測試溶液結(jié)合。各種不同的技術(shù)可用于測試抗體和抗原之間的相互作用以鑒定特別期望的抗體。此類技術(shù)包括elisa、表面等離子體共振結(jié)合測定（例如biacore?結(jié)合測定，bia-coreab，uppsala，瑞典）、夾心測定（例如igeninternational，inc.，gaithersburg，maryland的順磁性珠系統(tǒng)）、蛋白質(zhì)印跡，免疫沉淀測定和免疫組織化學(xué)。在某些實施方案中，考慮了本文提供的抗體和/或結(jié)合多肽的氨基酸序列變體。例如，可能期望改善抗體和/或結(jié)合多肽的結(jié)合親和力和/或其他生物性質(zhì)。抗體和/或結(jié)合多肽的氨基酸序列變體可以通過將適當(dāng)?shù)男揎椧刖幋a抗體和/或結(jié)合多肽的核苷酸序列，或通過肽合成來制備。此類修飾包括例如在抗體和/或結(jié)合多肽的氨基酸序列內(nèi)的殘基的缺失和/或插入和/或取代?？梢灾苽淙笔А⒉迦牒腿〈娜魏谓M合以得到最終構(gòu)建體，條件是最終構(gòu)建體具有所需特征，例如靶結(jié)合（gdf11、gdf8、actriia和/或actriib結(jié)合）。可以在hvr中制備改變（例如取代），例如，以改善抗體親和力。此類改變可以在hvr“熱點”中進(jìn)行，所述熱點即由在體細(xì)胞成熟過程期間以高頻率經(jīng)歷突變的密碼子編碼的殘基（參見例如chowdhury（2008）methodsmol.biol.207:179-196（2008））和/或sdr（a-cdr），其中所得到的變體vh或vl就結(jié)合親和力進(jìn)行測試。通過構(gòu)建二級文庫且從二級文庫中重新選擇的親和力成熟已在本領(lǐng)域中得到描述。參見例如hoogenboom等人，methodsinmolecularbiology178:1-37，o'brien等人，編輯，humanpress，totowa，n.j.,（2001）。在親和力成熟的一些實施方案中，將多樣性引入通過各種方法（例如易錯pcr、鏈改組或寡核苷酸定向誘變）中的任何選擇用于成熟的可變基因內(nèi)。隨后創(chuàng)建二級文庫。隨后篩選文庫以鑒定具有所需親和力的任何抗體變體。引入多樣性的另一種方法涉及hvr指導(dǎo)的方法，其中幾個hvr殘基（例如一次4-6個殘基）被隨機(jī)化。例如使用丙氨酸掃描誘變或建模，可以特異性鑒定涉及抗原結(jié)合的hvr殘基。cdr-h3和cdr-l3特別是通常靶向的。在某些實施方案中，取代、插入或缺失可以在一個或多個hvr內(nèi)出現(xiàn)，只要此類改變基本上不降低抗體結(jié)合抗原的能力。例如，可以在hvr中進(jìn)行基本上不降低結(jié)合親和力的保守改變（例如本文提供的保守取代）。此類改變可以在hvr“熱點”或sdr外部。在上文提供的變體vh和vl序列的某些實施方案中，每個hvr是未改變的，或含有不超過一個、兩個或三個氨基酸取代。用于鑒定可以被靶向用于誘變的抗體和/或結(jié)合多肽的殘基或區(qū)域的有用方法稱為“丙氨酸掃描誘變”，如通過cunningham和wells（1989）science，244:1081-1085描述的。在該方法中，殘基或靶殘基組（例如荷電殘基例如arg、asp、his、lys和glu）被鑒定并且取代為中性或帶負(fù)電的氨基酸（例如丙氨酸或聚丙氨酸），以測定是否影響相互作用?？梢栽谧C明對初始取代的功能敏感性的氨基酸位置處引入進(jìn)一步的取代?？商娲鼗蛄硗?，抗原-抗體復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)可以用于鑒定抗體和抗原之間的接觸點。此類接觸殘基和鄰近殘基可以作為替代的候選物被靶向或消除?？梢院Y選變體以測定它們是否含有所需性質(zhì)。氨基酸序列插入包括長度范圍為一個殘基到含有一百個或更多個殘基的多肽的氨基末端和/或羧基末端融合物，以及單個或多個氨基酸殘基的序列內(nèi)插入。末端插入的例子包括具有n末端甲硫氨?；鶜埢目贵w?？贵w分子的其他插入變體包括抗體的n-或c末端與酶（例如用于adept）或增加抗體的血清半衰期的多肽的融合。在某些實施方案中，本文提供的抗體和/或結(jié)合多肽可以進(jìn)一步進(jìn)行修飾，以含有本領(lǐng)域已知的且容易獲得的另外的非蛋白質(zhì)部分。適合于抗體和/或結(jié)合多肽衍生化的部分包括但不限于水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性例子包括但不限于聚乙二醇（peg）、乙二醇/丙二醇的共聚物、羧甲基纖維素、右旋糖酐、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧戊環(huán)、聚-1,3,6-三噁烷、乙烯/馬來酸酐共聚物、聚氨基酸（均聚物或無規(guī)共聚物）和右旋糖酐或聚（n-乙烯吡咯烷酮）聚乙二醇、丙二醇均聚物、聚環(huán)氧丙烷/環(huán)氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇（例如甘油）、聚乙烯醇及其混合物。聚乙二醇丙醛由于其在水中的穩(wěn)定性可以在制造中具有優(yōu)勢。聚合物可以是任何分子量，并且可以是支化或非支化的。附著至抗體和/或結(jié)合多肽的聚合物數(shù)目可以變化，并且如果附著超過一個聚合物，則它們可以是相同或不同的分子。一般而言，用于衍生化的聚合物的數(shù)目和/或類型可以基于考慮進(jìn)行測定，所述考慮包括但不限于待改善的抗體和/或結(jié)合多肽的特定性質(zhì)或功能，抗體衍生物和/或結(jié)合多肽衍生物是否用于在限定條件下的療法。本文公開的actrii拮抗劑抗體中的任何（例如抗激活素a抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體和/或抗actriib抗體）均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥，包括例如皮膚潰瘍）。例如，本文公開的actrii拮抗劑抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的actrii拮抗劑抗體，ii）本文公開的一種或多種actrii多肽（例如actriia和/或actriib多肽），iii）本文公開的一種或多種gdf捕獲物；iv）本文公開的一種或多種小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）；v）本文公開的一種或多種多核苷酸actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種卵泡抑素多肽；和/或vii）本文公開的一種或多種flrg多肽。d.小分子拮抗劑在另一個方面，本發(fā)明涉及拮抗actrii活性（例如抑制actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)）的小分子或小分子組合。特別地，本發(fā)明提供了使用actrii的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合，以例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用actrii的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合，以治療有此需要的受試者中的貧血和/或治療患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用actrii的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合，以預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或預(yù)防患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑是直接或間接抑制至少gdf11活性的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合。任選地，此類小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步直接或間接抑制gdf8。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合基本上不抑制激活素a活性。在一些實施方案中，直接或間接抑制gdf11和/或gdf8活性的本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合進(jìn)一步直接或間接抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib中的一種或多種的活性。在某些實施方案中，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合是gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、nodal、actriia和actriib中的一種或多種的間接抑制劑。例如，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以抑制至少gdf11的表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞分泌或其組合）。任選地，此類小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制gdf8的表達(dá)。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合基本上不抑制激活素a的表達(dá)。在一些實施方案中，抑制gdf11和/或gdf8表達(dá)的本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib中的一種或多種的表達(dá)。在其他實施方案中，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合是gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib中的一種或多種的直接抑制劑。例如，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合直接結(jié)合并抑制至少gdf11活性（例如抑制gdf11結(jié)合actriia和/或actriib受體的能力；抑制gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步結(jié)合并抑制gdf8活性（例如抑制gdf8結(jié)合actriia和/或actriib受體的能力；抑制gdf8介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合基本上不結(jié)合或抑制激活素a活性（例如激活素a結(jié)合actriia和/或actriib受體的能力；激活素a介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)途徑的激活）。在一些實施方案中，結(jié)合并抑制gdf11和/或gdf8活性的本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合進(jìn)一步結(jié)合并抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib中的一種或多種活性。在一些實施方案中，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合直接結(jié)合并抑制至少gdf8活性（例如抑制gdf8結(jié)合actriia和/或actriib受體的能力；抑制gdf8介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。任選地本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步結(jié)合并抑制gdf11活性（例如抑制gdf11結(jié)合actriia和/或actriib受體的能力；抑制gdf11介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合基本上不結(jié)合或抑制激活素a活性（例如激活素a結(jié)合actriia和/或actriib受體的能力；激活素a介導(dǎo)的actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，smad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。在一些實施方案中，結(jié)合并抑制gdf8和/或gdf11的本發(fā)明小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合進(jìn)一步結(jié)合并抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib中的一種或多種的活性。在一些實施方案中，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合直接結(jié)合并抑制至少actriia活性（例如actrii配體介導(dǎo)的actriia信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)激活）。例如，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合結(jié)合actriia受體并且抑制至少gdf11結(jié)合和/或激活actriia受體。任選地，此類小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制gdf8結(jié)合和/或激活actriia受體。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合基本上不抑制激活素a結(jié)合和/或激活actriia受體。在一些實施方案中，抑制gdf11和/或gdf8結(jié)合和/或激活actriia受體的本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種結(jié)合/激活actriia受體。在一些實施方案中，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合直接結(jié)合并抑制至少actriib活性（例如actrii配體介導(dǎo)的actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3信號傳導(dǎo)激活）。例如，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合結(jié)合actriib受體并且抑制至少gdf11結(jié)合和/或激活actriib受體。任選地，此類小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制gdf8結(jié)合和/或激活actriib受體。任選地，本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合基本上不抑制激活素a結(jié)合和/或激活actriib受體。在一些實施方案中，抑制gdf11和/或gdf8結(jié)合和/或激活actriib受體的本發(fā)明的小分子拮抗劑或小分子拮抗劑組合進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7和nodal中的一種或多種結(jié)合/激活actriib受體?？梢允褂靡阎姆椒ㄨb定且化學(xué)合成本發(fā)明的結(jié)合有機(jī)小分子拮抗劑（參見例如pct公開號wo00/00823和wo00/39585）。一般而言，本發(fā)明的小分子拮抗劑通常大小小于約2000道爾頓，可替代地大小小于約1500、750、500、250或200道爾頓，其中此類有機(jī)小分子能夠結(jié)合優(yōu)選特異性結(jié)合如本文所述的多肽（例如gdf11、gdf8、actriia和actriib）。此類小分子拮抗劑可以使用眾所周知的技術(shù)而無需過度實驗進(jìn)行鑒定。在這方面，注意到用于在有機(jī)小分子文庫中篩選能夠結(jié)合多肽靶的分子的技術(shù)是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如國際專利公開號wo00/00823和wo00/39585。本發(fā)明的結(jié)合有機(jī)小分子可以是例如醛、酮、肟、腙、縮氨基脲、卡巴肼、伯胺、仲胺、叔胺、n-取代的肼、酰肼、醇、醚、硫醇、硫醚、二硫化物、羧酸、酯、酰胺、脲、氨基甲酸酯、碳酸酯、縮酮、硫縮酮、縮醛、硫縮醛、芳基鹵、芳基磺酸酯、烷基鹵、烷基磺酸酯、芳族化合物、雜環(huán)化合物、苯胺、烯烴、炔、二醇、氨基醇、噁唑烷、噁唑啉、噻唑烷、噻唑啉、烯胺、磺酰胺、環(huán)氧化物、氮丙啶、異氰酸酯、磺酰氯、重氮化合物和酰基氯。本文公開的小分子actrii拮抗劑中的任何（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如增加有此需要的受試者中的紅血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白，治療或預(yù)防貧血，治療鐮狀細(xì)胞病，治療或預(yù)防一種或多種鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥）。例如，本文公開的小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的小分子actrii拮抗劑，ii）本文公開的一種或多種actrii多肽（例如actriia和/或actriib多肽），iii）本文公開的一種或多種gdf捕獲物；iv）本文公開的一種或多種actrii拮抗劑抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）；v）本文公開的一種或多種多核苷酸actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種卵泡抑素多肽；和/或vii）本文公開的一種或多種flrg多肽。e.拮抗劑多核苷酸在另一個方面，本發(fā)明涉及拮抗actrii活性（例如抑制actriia和/或actriib信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如smad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)）的多核苷酸或多核苷酸組合。特別地，本發(fā)明提供了使用多核苷酸actrii拮抗劑或多核苷酸actrii拮抗劑組合，以例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用多核苷酸actrii拮抗劑或多核苷酸actrii拮抗劑組合，以治療有此需要的受試者中的貧血和/或治療患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用多核苷酸actrii拮抗劑或多核苷酸actrii拮抗劑組合，以預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或預(yù)防患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸actrii拮抗劑或多核苷酸actrii拮抗劑組合可以用于抑制gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib的一種或多種的活性和/或表達(dá)。在某些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸actrii拮抗劑或多核苷酸actrii拮抗劑組合是gdf-actrii拮抗劑。在一些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合抑制至少gdf11的活性和/或表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、分泌或其組合）。任選地，此類多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制gdf8的活性和/或表達(dá)。任選地，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合基本上不抑制激活素a的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，抑制gdf11和/或gdf8的活性和/或表達(dá)的本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合抑制至少gdf8的活性和/或表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、分泌或其組合）。任選地，此類多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制gdf11的活性和/或表達(dá)。任選地，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合基本上不抑制激活素a的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，抑制gdf8和/或gdf11的活性和/或表達(dá)的本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合抑制至少actriia的活性和/或表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、分泌或其組合）。任選地，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合基本上不抑制激活素a的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，抑制actriia的活性和/或表達(dá)的本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal和/或actriib中的一種或多種的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合抑制至少actriib的活性和/或表達(dá)（例如轉(zhuǎn)錄、翻譯、分泌或其組合）。任選地，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合基本上不抑制激活素a的活性和/或表達(dá)。在一些實施方案中，抑制actriib的活性和/或表達(dá)的本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑或多核苷酸拮抗劑組合可以進(jìn)一步抑制激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal和/或actriia中的一種或多種的活性和/或表達(dá)。本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑可以是反義核酸、rnai分子（例如小干擾rna（sirna）、小發(fā)夾rna（shrna）、微小rna（mirna））、適體和/或核酶。人gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib的核酸和氨基酸序列是本領(lǐng)域已知的，并且因此用于根據(jù)本發(fā)明的方法使用的多核苷酸拮抗劑可以通過技術(shù)人員基于本領(lǐng)域的知識和本文提供的教導(dǎo)照常規(guī)進(jìn)行制備。例如，反義技術(shù)可以用于通過反義dna或rna或者通過三螺旋形成來控制基因表達(dá)。反義技術(shù)例如在okano（1991）j.neurochem.56:560；oligodeoxynucleotidesasantisenseinhibitorsofgeneexpression，crcpress，bocaraton，fla.（1988）中討論。三螺旋形成在例如cooney等人（1988）science241:456；和dervan等人，（1991）science251:1300中討論。該方法基于多核苷酸與互補(bǔ)dna或rna的結(jié)合。在一些實施方案中，反義核酸包含與本文公開的基因（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib）的rna轉(zhuǎn)錄物的至少一部分互補(bǔ)的單鏈rna或dna序列。然而，不需要絕對互補(bǔ)性。本文提及的“與rna的至少一部分互補(bǔ)的”序列意指具有足夠的互補(bǔ)性以能夠與rna雜交，形成穩(wěn)定雙鏈體的序列；在本文公開的基因（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib）的雙鏈反義核酸的情況下，因此可以測試雙鏈dna的單鏈，或可以測定三鏈體形成。雜交的能力將取決于互補(bǔ)性程度和反義核酸的長度。一般地，雜交核酸越大，與其可以含有并且仍形成穩(wěn)定雙鏈體（或三鏈體，視情況而定）的rna的堿基錯配越多。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過使用標(biāo)準(zhǔn)程序來確定可容許的錯配程度，以測定雜交復(fù)合物的熔點。與信使的5'端互補(bǔ)的多核苷酸，例如，直至并包括aug起始密碼子的5'非翻譯序列，應(yīng)當(dāng)在抑制翻譯方面最有效地起作用。然而，與mrna的3'非翻譯序列互補(bǔ)的序列已顯示同樣有效抑制mrna的翻譯。參見例如wagner，r.,（1994）nature372:333-335。因此，與本發(fā)明的基因（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib）的5'-或3'-非翻譯非編碼區(qū)互補(bǔ)的寡核苷酸可以用于反義方法中，以抑制內(nèi)源mrna的翻譯。與mrna的5'非翻譯區(qū)互補(bǔ)的多核苷酸應(yīng)當(dāng)包括aug起始密碼子的互補(bǔ)體。與mrna編碼區(qū)互補(bǔ)的反義多核苷酸是較不有效的翻譯抑制劑，但可以根據(jù)本發(fā)明的方法使用。無論是設(shè)計為與本發(fā)明的mrna（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriibmrna）的5'-非翻譯區(qū)、3'非翻譯區(qū)還是編碼區(qū)雜交，反義核酸應(yīng)當(dāng)為長度至少6個核苷酸，并且優(yōu)選為長度6至約50個核苷酸的寡核苷酸。在具體方面，寡核苷酸為至少10個核苷酸、至少17個核苷酸、至少25個核苷酸或至少50個核苷酸。在一個實施方案中，本發(fā)明的反義核酸（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia或actriib反義核酸）通過從外源序列轉(zhuǎn)錄細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生。例如，轉(zhuǎn)錄載體或其一部分，產(chǎn)生本發(fā)明的基因的反義核酸（rna）。此類載體將含有編碼所需反義核酸的序列。此類載體可以保持游離或變得染色體整合，只要它可以轉(zhuǎn)錄以產(chǎn)生所需的反義rna。此類載體可以通過本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)的重組dna技術(shù)方法進(jìn)行構(gòu)建。載體可以是用于在脊椎動物細(xì)胞中復(fù)制和表達(dá)的質(zhì)粒、病毒或本領(lǐng)域已知的其他。編碼本發(fā)明的所需基因的序列或其片段的表達(dá)可以通過本領(lǐng)域已知的在脊椎動物，優(yōu)選人細(xì)胞中起作用的任何啟動子。此類啟動子可以是誘導(dǎo)型或組成型的。此類啟動子包括但不限于sv40早期啟動子區(qū)[參見例如benoist和chambon（1981）nature29:304-310]、包含在勞斯肉瘤病毒的3'長末端重復(fù)中的啟動子（參見例如yamamoto等人（1980）cell22:787-797、皰疹胸苷啟動子[參見例如wagner等人（1981）proc.natl.acad.sci.u.s.a.78:1441-1445]、以及金屬硫蛋白基因的調(diào)節(jié)序列（參見例如brinster等人（1982）nature296:39-42。在一些實施方案中，多核苷酸拮抗劑是靶向下述中的一種或多種的表達(dá)的干擾rna或rnai分子：gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib。rnai指干擾靶mrna的表達(dá)的rna的表達(dá)。具體地，rnai通過sirna（小干擾rna）經(jīng)由與特異性mrna相互作用使靶基因沉默。dsrna復(fù)合物隨后被靶向用于通過細(xì)胞降解。sirna分子是長度10至50個核苷酸的雙鏈rna雙鏈體，其干擾足夠互補(bǔ)的靶基因的表達(dá)（例如與基因的至少80%同一性）。在一些實施方案中，sirna分子包含與靶基因的核苷酸序列至少85、90、95、96、97、98、99或100%等同的核苷酸序列。另外的rnai分子包括短發(fā)夾rna（shrna）；以及短干擾發(fā)夾和微小rna（mirna）。shrna分子含有通過環(huán)連接的來自靶基因的有義和反義序列。shrna從核轉(zhuǎn)運到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，并且它連同mrna一起降解。poliii或u6啟動子可以用于表達(dá)關(guān)于rnai的rna。paddison等人[genes&dev.（2002）16:948-958，2002]已使用折疊成發(fā)夾的小rna分子作為實現(xiàn)rnai的手段。相應(yīng)地，此類短發(fā)夾rna（shrna）分子也有利地用于本文所述的方法中。功能shrna的莖和環(huán)的長度不同；莖長度的范圍可為約25至約30nt的任何地方，并且環(huán)大小的范圍可為4至約25nt，而不影響沉默活性。盡管不希望受任何特定理論的束縛，但認(rèn)為這些shrna類似dicerrna酶的雙鏈rna（dsrna）產(chǎn)物，并且在任何情況下，具有用于抑制特定基因表達(dá)的相同能力。shrna可以由慢病毒載體表達(dá)。mirna是長度約10至70個核苷酸的單鏈rna，其最初轉(zhuǎn)錄為特征在于“莖-環(huán)”結(jié)構(gòu)的前體mirna，并且在通過risc進(jìn)一步加工后后續(xù)加工為成熟mirna。介導(dǎo)rnai的分子，包括但不限于sirna，可以通過下述在體外產(chǎn)生：化學(xué)合成（hohjoh，febslett521:195-199，2002）、dsrna水解（yang等人，procnatlacadsciusa99:9942-9947，2002）、用t7rna聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄（donzeet等人，nucleicacidsres30:e46，2002；yu等人，procnatlacadsciusa99:6047-6052，2002）、以及使用核酸酶例如大腸桿菌rna酶iii的雙鏈rna水解（yang等人，procnatlacadsciusa99:9942-9947，2002）。根據(jù)另一個方面，本發(fā)明提供了多核苷酸拮抗劑，包括但不限于誘餌dna、雙鏈dna、單鏈dna、復(fù)合dna、封裝dna、病毒dna、質(zhì)粒dna、裸露rna、封裝rna、病毒rna、雙鏈rna、能夠生成rna干擾的分子或其組合。在一些實施方案中，本發(fā)明的多核苷酸拮抗劑是適體。適體是核酸分子，包括雙鏈dna和單鏈rna分子，其結(jié)合并形成特異性結(jié)合靶分子的三級結(jié)構(gòu)，所述靶分子例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和actriib多肽。適體的生成和治療用途在本領(lǐng)域中是充分確定的。參見例如美國專利號5,475,096。關(guān)于適體的另外的信息可以在美國專利申請公開號20060148748中找到。使用本領(lǐng)域已知的方法，例如指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化（systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment）（selex）過程來選擇核酸適體。selex是用于與靶分子具有高度特異性結(jié)合的核酸分子的體外進(jìn)化的方法，如例如美國專利號5,475,096、5,580,737、5,567,588、5,707,796、5,763,177、6,011,577和6,699,843中所述。美國專利號5,270,163中描述了鑒定適體的另一種篩選方法。selex過程基于核酸形成各種二維和三維結(jié)構(gòu)的能力，以及核苷酸單體內(nèi)可用的化學(xué)多功能性，以充當(dāng)無論是單體還是聚合的幾乎任何化學(xué)化合物包括其他核酸分子和多肽的配體（形成特異性結(jié)合對）。任何大小或組成的分子均可用作靶。selex方法涉及從候選寡核苷酸的混合物中選擇，并使用相同的一般選擇方案逐步重復(fù)結(jié)合、分隔和擴(kuò)增，以實現(xiàn)所需的結(jié)合親和力和選擇性。從可以包含隨機(jī)化序列區(qū)段的核酸混合物開始，selex方法包括下述步驟：在有利于結(jié)合的條件下使混合物與靶接觸；使未結(jié)合的核酸與已特異性結(jié)合靶分子的那些核酸分隔；使核酸-靶復(fù)合物解離；擴(kuò)增與核酸-靶復(fù)合物解離的核酸，以獲得富含配體的核酸混合物。結(jié)合、分隔、解離和擴(kuò)增的步驟通過所需的多個循環(huán)重復(fù)，以獲得針對靶分子的高度特異性的高親和力核酸配體。通常，將此類結(jié)合分子分開施用于動物[參見例如o'connor（1991）j.neurochem.56:560]，但此類結(jié)合分子也可以在體內(nèi)由多核苷酸表達(dá)，所述多核苷酸由宿主細(xì)胞攝取并在體內(nèi)表達(dá)。參見例如oligodeoxynucleotidesasantisenseinhibitorsofgeneexpression，crcpress，bocaraton，fla.（1988）。本文公開的多核苷酸actrii拮抗劑中的任何（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍）。例如，本文公開的多核苷酸actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的多核苷酸actrii拮抗劑，ii）本文公開的一種或多種actrii多肽（例如actriia和/或actriib多肽），iii）本文公開的一種或多種gdf捕獲物；iv）本文公開的一種或多種actrii拮抗劑抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）；v）本文公開的一種或多種小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種卵泡抑素多肽；和/或vii）本文公開的一種或多種flrg多肽。f.其他拮抗劑在其他方面，用于根據(jù)本文公開的方法（例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血的方法，和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法）使用的藥物是卵泡抑素多肽。術(shù)語“卵泡抑素多肽”包括包含任何天然存在的卵泡抑素多肽及其保留有用活性的任何變體（包括突變體、片段、融合物和擬肽形式）的多肽，并且進(jìn)一步包括卵泡抑素的任何功能單體或多聚體。在某些實施方案中，本發(fā)明的卵泡抑素多肽結(jié)合和/或抑制激活素活性，特別是激活素a（例如激活素介導(dǎo)的actriia和/或actriibsmad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。保留激活素結(jié)合性質(zhì)的卵泡抑素多肽的變體可以基于涉及卵泡抑素和激活素相互作用的先前研究來鑒定。例如，wo2008/030367公開了顯示對于激活素結(jié)合重要的特異性卵泡抑素結(jié)構(gòu)域（“fsd”）。如下文seqidno:18-20中所示，卵泡抑素n末端結(jié)構(gòu)域（“fsnd”seqidno:18）、fsd2（seqidno:20）和較小程度的fsd1（seqidno:19）代表卵泡抑素內(nèi)對于激活素結(jié)合重要的示例性結(jié)構(gòu)域。另外，用于制備和測試多肽文庫的方法在上文actrii多肽的上下文中描述，并且此類方法也涉及制備和測試卵泡抑素的變體。卵泡抑素多肽包括衍生自任何已知卵泡抑素的序列的多肽，所述任何已知卵泡抑素具有的序列與卵泡抑素多肽的序列至少約80%等同，以及任選至少85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更大的同一性。卵泡抑素多肽的例子包括成熟卵泡抑素多肽或者人卵泡抑素前體多肽（seqidno:16）的更短同種型或的其他變體，如例如wo2005/025601中所述。人卵泡抑素前體多肽同種型fst344如下：（seqidno:16；ncbi參考號np_037541.1卵泡抑素同種型fst344）信號肽是加下劃線的；還在上文加下劃線的是最后27個殘基，其中代表使該卵泡抑素同種型區(qū)別于如下所示的較短的卵泡抑素同種型fst317的c端延伸。人卵泡抑素前體多肽同種型fst317如下：（seqidno:17；ncbi參考號np_006341.1）信號肽是加下劃線的。卵泡抑素n末端結(jié)構(gòu)域（fsnd）序列如下：。fsd1和fsd2序列如下：。在其他方面，用于根據(jù)本文公開的方法（例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血的方法和/或治療或預(yù)防貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法）使用的藥物是卵泡抑素樣相關(guān)基因（flrg），也稱為卵泡抑素相關(guān)蛋白3（fstl3）。在一些實施方案中，該藥物用于治療貧血并發(fā)癥，包括例如皮膚潰瘍。在一些實施方案中，該藥物用于預(yù)防貧血并發(fā)癥，包括例如皮膚潰瘍。術(shù)語“flrg多肽”包括包含flrg的任何天然存在的多肽以及其保留有用活性的任何變體（包括突變體、片段、融合物和擬肽形式）的多肽。在某些實施方案中，本發(fā)明的flrg多肽結(jié)合和/或抑制激活素活性，特別是激活素a（例如激活素介導(dǎo)的actriia和/或actriibsmad2/3信號傳導(dǎo)的激活）。保留激活素結(jié)合性質(zhì)的flrg多肽的變體可以使用測定flrg和激活素相互作用的常規(guī)方法來鑒定。參見例如us6,537,966。另外，用于制備和測試多肽文庫的方法在上文actrii多肽的上下文中描述，并且此類方法也涉及制備和測試flrg的變體。flrg多肽包括衍生自任何已知flrg的序列的多肽，所述任何已知flrg具有的序列與flrg多肽的序列至少約80%相同，以及任選至少85%、90%、95%、97%、99%或更大的同一性。人flrg（卵泡抑素相關(guān)蛋白3前體）多肽如下：（seqidno:21；ncbi參考號np_005851.1）信號肽是加下劃線的。在某些實施方案中，卵泡抑素多肽和flrg多肽的功能變體或修飾形式包括具有卵泡抑素多肽或flrg多肽的至少一部分和一個或多個融合結(jié)構(gòu)域的融合蛋白，所述一個或多個融合結(jié)構(gòu)域例如促進(jìn)多肽的分離、檢測、穩(wěn)定化或多聚化的結(jié)構(gòu)域。合適的融合結(jié)構(gòu)域在上文中就actrii多肽而言詳細(xì)討論。在一些實施方案中，本發(fā)明的拮抗劑藥物是融合蛋白，其包含與fc結(jié)構(gòu)域融合的卵泡抑素多肽的激活素結(jié)合部分。在另一個實施方案中，本發(fā)明的拮抗劑藥物是融合蛋白，其包含與fc結(jié)構(gòu)域融合的flrg多肽的激活素結(jié)合部分。本文公開的卵泡抑素多肽中的任何均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍）。例如，本文公開的卵泡抑素多肽可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的卵泡抑素多肽，ii）本文公開的一種或多種actrii多肽（例如actriia和/或actriib多肽），iii）本文公開的一種或多種gdf捕獲物；iv）本文公開的一種或多種actrii拮抗劑抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）；v）本文公開的一種或多種小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種多核苷酸actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）；和/或本文公開的一種或多種flrg多肽。類似地，本文公開的flrg多肽中的任何均可與本發(fā)明的一種或多種另外的actrii拮抗劑藥物組合，以實現(xiàn)所需效應(yīng)（例如治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血，和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍）。例如，本文公開的flrg多肽可以與下述組合使用：i）本文公開的一種或多種另外的flrg多肽，ii）本文公開的一種或多種actrii多肽（例如actriia和/或actriib多肽），iii）本文公開的一種或多種gdf捕獲物；iv）本文公開的一種或多種actrii拮抗劑抗體（例如抗gdf11抗體、抗激活素b抗體、抗激活素c抗體、抗激活素e抗體、抗gdf11抗體、抗gdf8抗體、抗bmp6抗體、抗bmp7抗體、抗actriia抗體或抗actriib抗體）；v）本文公開的一種或多種小分子actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的小分子拮抗劑）；vi）本文公開的一種或多種多核苷酸actrii拮抗劑（例如gdf11、gdf8、激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、激活素e、bmp6、bmp7、nodal、actriia和/或actriib中的一種或多種的多核苷酸拮抗劑）；和/或本文公開的一種或多種卵泡抑素多肽。4.篩選測定在某些方面，本發(fā)明涉及主題actrii多肽（例如actriia和actriib多肽）和gdf捕獲物多肽鑒定其為actriib多肽的激動劑或拮抗劑的化合物（藥物）的用途。通過該篩選鑒定的化合物可以進(jìn)行測試，以評價其調(diào)節(jié)紅血細(xì)胞、血紅蛋白和/或網(wǎng)織紅細(xì)胞水平以及影響皮膚潰瘍的能力。這些化合物可以例如在動物模型中進(jìn)行測試。存在篩選治療劑的許多方法，所述治療劑通過靶向actrii信號傳導(dǎo)（例如actriia和/或actriibsmad2/3和/或smad1/5/8信號傳導(dǎo)）用于增加紅血細(xì)胞或血紅蛋白水平。在某些實施方案中，可以進(jìn)行化合物的高通量篩選，以鑒定干擾actrii介導(dǎo)的對所選細(xì)胞系的作用的藥物。在某些實施方案中，進(jìn)行測定以篩選且鑒定特異性抑制或降低actrii多肽或gdf捕獲物多肽與其結(jié)合配偶體結(jié)合的化合物，所述結(jié)合配偶體例如actrii配體（例如激活素a、激活素b、激活素ab、激活素c、nodal、gdf8、gdf11或bmp7）?？商娲兀摐y定可以用于鑒定增強(qiáng)actrii多肽或gdf捕獲物多肽與其結(jié)合配偶體（例如actrii配體）的結(jié)合的化合物。在進(jìn)一步的實施方案中，化合物可以通過其與actrii多肽或gdf捕獲物多肽相互作用的能力來鑒定。各種測定形式將是足夠的，并且根據(jù)本發(fā)明，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解本文中未明確描述的那些。如本文描述的，本發(fā)明的測試化合物（藥物）可以通過任何組合化學(xué)方法產(chǎn)生。可替代地，主題化合物可以是在體內(nèi)或體外合成的天然存在的生物分子。待測試其充當(dāng)組織生長調(diào)節(jié)劑的能力的化合物（藥物）可以例如通過細(xì)菌、酵母、植物或其他生物產(chǎn)生（例如天然產(chǎn)物），化學(xué)產(chǎn)生（例如小分子，包括擬肽），或重組產(chǎn)生。由本發(fā)明考慮的測試化合物包括非肽基有機(jī)分子、肽、多肽、擬肽、糖、激素和核酸分子。在某些實施方案中，測藥物是具有小于約2,000道爾頓的分子量的小有機(jī)分子。本發(fā)明的測試化合物可以作為單個離散的實體提供，或者在例如通過組合化學(xué)制備的具有更大復(fù)雜性的文庫中提供。這些文庫可以包含例如醇、烷基鹵、胺、酰胺、酯、醛、醚和其他類別的有機(jī)化合物。測試化合物對測試系統(tǒng)的呈遞可以是分離形式或作為化合物的混合物，尤其是在初始篩選步驟中。任選地，化合物可以任選用其他化合物衍生化，并具有促進(jìn)化合物分離的衍生基團(tuán)。衍生基團(tuán)的非限制性例子包括生物素、熒光素、地高辛、綠色熒光蛋白、同位素、多組氨酸、磁珠、谷胱甘肽s轉(zhuǎn)移酶（gst）、可光激活的交聯(lián)劑或其任何組合。在測試化合物和天然提取物的文庫的許多藥物篩選程序中，期望高通量測定以使在給定時間段內(nèi)調(diào)查的化合物數(shù)目達(dá)到最大。在無細(xì)胞系統(tǒng)（例如可以用純化或半純化的蛋白質(zhì)衍生的）中執(zhí)行的測定通常優(yōu)選作為“初級”篩選，因為它們可以生成以允許分子靶中的改變的快速發(fā)展和相對容易檢測，所述分子靶中的改變由測試化合物介導(dǎo)。此外，在體外系統(tǒng)中一般可以忽略測試化合物的細(xì)胞毒性或生物利用度的效應(yīng)，相反該測定主要集中于藥物對分子靶的作用，如可以在actrii多肽或gdf捕獲物多肽及其結(jié)合配偶體（例如actrii配體）之間的結(jié)合親和力中的改變方面體現(xiàn)的。僅舉例說明，在本發(fā)明的示例性篩選測定中，使目的化合物與分離和純化的actriib多肽接觸，所述actriib多肽通常能夠結(jié)合actriib配體，如對于測定目的適當(dāng)?shù)摹ｋS后將化合物和actriib多肽的混合物加入含有actriib配體（例如gdf11）的組合物中。actriib/actriib配體復(fù)合物的檢測和定量提供了用于測定化合物在抑制（或增強(qiáng)）actriib多肽及其結(jié)合蛋白之間的復(fù)合物形成方面的功效的手段?？梢酝ㄟ^從使用不同濃度的測試化合物獲得的數(shù)據(jù)生成劑量反應(yīng)曲線來評估化合物的功效。此外，還可以執(zhí)行對照測定以提供用于比較的基線。例如，在對照測定中，將分離和純化的actriib配體加入含有actriib多肽的組合物中，并且在不存在測試化合物的情況下，定量actriib/actriib配體復(fù)合物的形成。應(yīng)理解，一般而言，在其中反應(yīng)物可以混合的次序可以改變，并且可以同時混合。此外，代替純化的蛋白質(zhì)，細(xì)胞提取物和裂解產(chǎn)物可以用于形成合適的無細(xì)胞測定系統(tǒng)?？梢酝ㄟ^各種技術(shù)檢測actrii多肽或gdf捕獲物多肽與其結(jié)合蛋白之間的復(fù)合物形成。例如，可以通過免疫測定或通過層析檢測，使用可檢測標(biāo)記的蛋白質(zhì)例如放射性標(biāo)記的（例如32p、35s、14c或3h）、熒光標(biāo)記的（例如fitc）或酶促標(biāo)記的actrii多肽或gdf和/或其結(jié)合蛋白，來定量復(fù)合物形成的調(diào)節(jié)。在某些實施方案中，本發(fā)明考慮了測定在直接或間接測量gdf捕獲物多肽的actrii多肽及其結(jié)合蛋白之間的相互作用程度中使用熒光偏振測定和熒光共振能量轉(zhuǎn)移（fret）。進(jìn)一步地，其他檢測模式，例如基于光波導(dǎo)（參見例如pct公開wo96/26432和美國專利號5,677,196）、表面等離子體共振（spr）、表面電荷傳感器和表面力傳感器的那些與本發(fā)明的許多實施方案兼容。此外，本發(fā)明考慮了使用相互作用捕獲測定（也稱為“雙雜交測定”），用于鑒定破壞或加強(qiáng)actrii多肽或gdf捕獲物多肽與其結(jié)合配偶體之間的相互作用的藥物。參見例如美國專利號5,283,317；zervos等人（1993）cell72:223-232；madura等人（1993）jbiolchem268:12046-12054；bartel等人（1993）biotechniques14:920-924；和iwabuchi等人（1993）oncogene8:1693-1696）。在具體實施方案中，本發(fā)明考慮了使用反向雙雜交系統(tǒng)來鑒定化合物（例如小分子或肽），所述化合物解離actrii多肽或gdf捕獲物及其結(jié)合蛋白之間的相互作用。參見例如vidal和legrain,（1999）nucleicacidsres27:919-29；vidal和legrain,（1999）trendsbiotechnol17:374-81；以及美國專利號5,525,490；5,955,280；和5,965,368。在某些實施方案中，主題化合物通過其與actrii多肽或gdf捕獲物多肽相互作用的能力來鑒定。化合物和actrii多肽或gdf捕獲物多肽之間的相互作用可以是共價或非共價的。例如，可以使用體外生物化學(xué)方法，包括光交聯(lián)、放射性標(biāo)記的配體結(jié)合和親和層析，在蛋白質(zhì)水平上鑒定此類相互作用。參見例如jakobywb等人（1974）methodsinenzymology46:1。在某些情況下，可以在基于機(jī)制的測定中篩選化合物，例如檢測結(jié)合gdf捕獲物多肽的actrii多肽的化合物的測定。這可以包括固相或流體相結(jié)合事件?？商娲?，編碼actrii多肽或gdf捕獲物多肽的基因可以用報道系統(tǒng)（例如β半乳糖苷酶、熒光素酶或綠色熒光蛋白）轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)，并優(yōu)選通過高通量篩選或用文庫的個別成員針對文庫進(jìn)行篩選?？梢允褂闷渌跈C(jī)制的結(jié)合測定，例如，檢測自由能中的變化的結(jié)合測定。結(jié)合測定可以用固定至孔、珠或芯片的靶執(zhí)行，或通過固定的抗體捕獲或通過毛細(xì)管電泳分辨。結(jié)合的化合物通常可以使用比色終點或熒光或表面等離子體共振來檢測。5.示例性治療用途在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于增加有此需要的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的紅血細(xì)胞水平。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防有此需要的受試者（例如患者）中的貧血和/或一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療有此需要的受試者（例如患者）中的貧血和/或一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于預(yù)防有此需要的受試者（患者）中的貧血和/或一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如潰瘍，特別是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有貧血的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防有此需要的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中與貧血相關(guān)的潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有貧血的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的皮膚（例如皮膚的）潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防有此需要的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中與貧血相關(guān)的皮膚潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有溶血性貧血的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者（例如患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）的受試者（患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的受試者（患者），特別是哺乳動物例如嚙齒類動物、靈長類動物和人中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在前述實施方案的一些中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合用于治療患有貧血（例如溶血性貧血、血紅蛋白病性貧血、地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）、鐮狀細(xì)胞病等）的受試者（例如患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在前述實施方案的一些中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合用于預(yù)防患有貧血（例如溶血性貧血、血紅蛋白病性貧血、地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）、鐮狀細(xì)胞病等）的受試者（例如患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，患有貧血的受試者患有鐮狀細(xì)胞病。在一些實施方案中，患有貧血的受試者患有地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）。在一些實施方案中，患有貧血的受試者具有皮膚潰瘍。在一些實施方案中，皮膚潰瘍是皮膚潰瘍。在一些實施方案中，潰瘍出現(xiàn)在腿或肛門上。如本文使用的，“預(yù)防”病癥或狀況的治療劑指這樣的化合物，其在統(tǒng)計樣品中相對于未經(jīng)處理的對照樣品降低經(jīng)處理的樣品中病癥或病癥的出現(xiàn)，或者相對于未經(jīng)處理的對照樣品延遲病癥或狀況的一種或多種癥狀的發(fā)作或降低病癥或狀況的一種或多種癥狀的嚴(yán)重性。例如，使用本發(fā)明的actrii拮抗劑來預(yù)防患有貧血的受試者中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）指相對于未接受actrii拮抗劑的患有貧血的受試者，降低受試者中潰瘍的出現(xiàn)或延遲受試者中潰瘍的發(fā)作或降低受試者中潰瘍的嚴(yán)重性。如本文使用的，術(shù)語“治療”包括狀況在確定后的改善或消除。在任一情況下，可以在由醫(yī)生或其他保健提供者提供的診斷和治療劑的預(yù)期施用結(jié)果中區(qū)分預(yù)防或治療。在一些實施方案中，治療潰瘍指促進(jìn)潰瘍組織的傷口愈合。一般而言，通過以有效量施用本發(fā)明的actrii拮抗劑（例如actriia和/或actriib拮抗劑）中的一種或多種，來實現(xiàn)本發(fā)明中所述的疾病或狀況的治療或預(yù)防。藥物的有效量指在必需的劑量和時間段內(nèi)有效實現(xiàn)所需治療或預(yù)防結(jié)果的量。本發(fā)明的藥物的“治療有效量”可以根據(jù)諸如個體的疾病狀態(tài)、年齡、性別和體重，以及藥物在個體中引發(fā)所需應(yīng)答的能力等因素而變化。“預(yù)防有效量”指在必需的劑量和時間段內(nèi)有效達(dá)到所需預(yù)防結(jié)果的量。潰瘍和貧血潰瘍是皮膚或粘膜上的瘡，其伴隨著組織的分解。皮膚（皮膚的）潰瘍可導(dǎo)致表皮以及通常真皮甚至皮下脂肪的一部分的完全喪失。皮膚潰瘍在下肢皮膚上最常見，但確實出現(xiàn)在身體的其他部位上。通常，潰瘍表現(xiàn)為開放的坑，通常是圓形的，具有已被侵蝕的皮膚層，并且此類損害對于感染高度敏感。潰瘍周圍的皮膚可能是紅色、腫脹和/或柔嫩的。一般而言，潰瘍傾向于比其他類型的皮膚損傷更緩慢愈合，并且對治療有抗性。潰瘍分階段發(fā)展。在階段1中，皮膚是紅色的，具有柔軟的下層組織。在第二階段，皮膚的發(fā)紅變得更顯著，出現(xiàn)腫脹，并且可能存在一些水泡和外皮層的喪失。在下一階段期間，皮膚可能向下穿過皮膚的深層壞死，并且下面的脂肪可能變得暴露。在最后兩個階段，瘡可能促使脂肪的更深喪失和肌肉的壞死-在嚴(yán)重的情況下，它可以延伸至骨的破壞并引起膿毒病。鑒于潰瘍病理的分期進(jìn)展，醫(yī)生已采用分級系統(tǒng)來分類潰瘍。wagner分級系統(tǒng)將潰瘍分成5類：i）淺表潰瘍指定為1級；ii）更深入皮下組織暴露軟組織的（但沒有膿腫或骨髓炎）的潰瘍指定為2級；iii）具有膿腫形成和/或骨髓炎的潰瘍指定為3級；iv）在組織或肢體的部分上具有相關(guān)壞疽的潰瘍指定為4級；和v）在大面積或整個肢體具有廣泛性壞疽的潰瘍指定為5級。潰瘍，特別是皮膚潰瘍，作為許多貧血的并發(fā)癥出現(xiàn)。在大多數(shù)患者中，這些潰瘍出現(xiàn)在腿或腳踝中，但可能出現(xiàn)在身體的其他部分上。貧血和潰瘍形成之間的關(guān)系是多因素的，但一般預(yù)期升高的溶血、氧化性應(yīng)激、弱組織氧合作用和血管充血可能全部促成潰瘍的形成。升高的溶血引起游離血紅蛋白釋放到血清內(nèi)，這促使氧化性損傷并消耗維持適當(dāng)血管緊張度所需的一氧化氮。潰瘍與許多遺傳性和獲得性貧血相關(guān)，包括遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥。鐮狀細(xì)胞病和地中海貧血特別因引起潰瘍而著名，這可能是因為所有的危險因素均存在于這些疾病中。潰瘍與許多溶血性貧血有關(guān)，所述溶血性貧血描述由紅血細(xì)胞過度破壞引起的貧血狀況。溶血性貧血可起因于感染，例如肝炎、巨細(xì)胞病毒（cmv）、eb病毒（ebv）、傷寒、大腸桿菌（大腸埃希桿菌）、支原體肺炎或鏈球菌，藥劑例如青霉素、抗瘧藥劑、磺胺藥劑或?qū)σ阴０被?，癌癥例如白血病或淋巴瘤和不同類型的實體瘤、自身免疫病癥例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（sle或狼瘡）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、維奧二氏綜合征或潰瘍性結(jié)腸炎、脾功能亢進(jìn)和自身免疫溶血性貧血，其中身體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對其自身血細(xì)胞的抗體。微血管病性溶血性貧血和血栓性血小板減少性紫癜也與貧血和潰瘍形成有關(guān)。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有選自下述的貧血的受試者（患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）：包括遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥、遺傳性口形細(xì)胞增多癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥、溶血性貧血、血紅蛋白病性貧血、鐮狀細(xì)胞病、地中海貧血（α和β兩者）、β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、微血管病性溶血性貧血、血栓性血小板減少性紫癜，與感染（例如肝炎、巨細(xì)胞病毒（cmv）、eb病毒（ebv）、傷寒、大腸桿菌（大腸埃希桿菌）、支原體肺炎或鏈球菌）相關(guān)的貧血、與藥劑施用（例如青霉素、抗瘧藥劑、磺胺藥劑或?qū)σ阴０被樱┫嚓P(guān)的貧血、與癌癥（例如白血病或淋巴瘤和不同類型的實體瘤）相關(guān)的貧血、以及與自身免疫病癥（例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（sle或狼瘡）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、維奧二氏綜合征或潰瘍性結(jié)腸炎、脾功能亢進(jìn)和自身免疫溶血性貧血，其中身體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對其自身血細(xì)胞的抗體）相關(guān)的貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有溶血性貧血的受試者（患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有血紅蛋白病性貧血的受試者（患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有地中海貧血綜合征的受試者（患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有β地中海貧血綜合征的受試者（患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于治療或預(yù)防患有β中間型地中海貧血的受試者（患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或actrii拮抗劑藥物組合可以用于使?jié)儯ɡ缙つw潰瘍）的級別分類（例如wager分級系統(tǒng)）改善至少一個等級（例如至少一個、兩個、三個、四個或五個等級）。在某些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以與用于潰瘍的支持療法組合使用。皮膚潰瘍的常規(guī)護(hù)理涉及傷口的清創(chuàng)和清潔，隨后為封閉敷料的施用。參見例如marti-carvajal等人（2012）thecochranecollaboration，由wiley＆sons，ltd出版。另外的干預(yù)一般可以分為兩個主要治療組：藥物干預(yù)（全身和局部藥物）和非藥物干預(yù)。系統(tǒng)性藥物干預(yù)包括例如血管藥物（例如己酮可可堿、鹽酸異舒普林和煙酸占替諾）、抗氧化劑（例如l-肉毒堿）、epo和epo刺激劑、生長因子（例如波生坦）、礦物質(zhì)（例如硫酸鋅）、hbf合成的激動劑（例如丁酸精氨酸）和抗生素。局部藥物干預(yù)包括例如抗生素、抗菌藥、生長因子（例如gm-csf、rgd肽基質(zhì)、solcoseryl?）、類固醇（例如可的松）和疼痛緩解劑（例如阿片類物質(zhì)）。非藥物干預(yù)包括例如重建手術(shù)、細(xì)胞療法、激光療法和高壓氧。潰瘍和鐮狀細(xì)胞病眾多基因促成經(jīng)典鐮狀細(xì)胞?。╯cd；鐮狀細(xì)胞?。╠repanocytosis）；鐮狀細(xì)胞性貧血）。主要地，scd是由β珠蛋白基因中的突變（在密碼子6處的谷氨酸鹽突變?yōu)槔i氨酸）引起的遺傳性病癥。參見例如kassim等人（2013）annurevmed，64：451-466。鐮狀細(xì)胞性貧血是scd的最常見形式，具有在βs等位基因（hbss）中的純合突變，影響60%至70%的scd患者。由于β珠蛋白基因中的突變，產(chǎn)生具有疏水基序的異常血紅蛋白分子，當(dāng)其處于脫氧狀態(tài)時，所述疏水基序暴露。參見例如eaton等人（1990）advproteinchem，40：63-279；steinberg，mh（1999）nengljmed340（13）：1021-1030；和ballas等人（1992）blood，79（8）2154-63。一旦暴露，分離的血紅蛋白分子的鏈就聚合，這導(dǎo)致對紅血細(xì)胞膜的損害和細(xì)胞脫水。膜損害部分地通過膜脂質(zhì)的再分布體現(xiàn)，導(dǎo)致在紅細(xì)胞膜的外小葉上的磷脂酰絲氨酸表達(dá)。參見例如（2002）blood99（5）：1564-1571。外化的磷脂酰絲氨酸促進(jìn)對巨噬細(xì)胞和激活的內(nèi)皮細(xì)胞兩者的粘附，其促進(jìn)血管（血管的）閉塞。因此，在低氧狀態(tài)下，紅血細(xì)胞的血紅蛋白沉淀成長晶體，使其延長，從形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)椤扮牋睢奔t血細(xì)胞。基因型以及脫氧范圍和程度兩者均促成血紅蛋白聚合的嚴(yán)重性。已證明胎兒血紅蛋白的存在成比例地降低病理性血紅蛋白聚合物的量，并且使免于血管閉塞性危象。大多數(shù)鐮狀細(xì)胞病患者經(jīng)歷稱為疼痛危象的疼痛發(fā)作。鐮狀細(xì)胞疼痛危象指持續(xù)至少1小時（例如至少1、2、3、4、5、6或10小時）的急性鐮狀細(xì)胞形成相關(guān)疼痛，并且任選地需要疼痛管理治療，例如施用一種或多種麻醉劑和/或非甾體抗炎劑。疼痛危象通常導(dǎo)致患者進(jìn)入用于疼痛管理治療的醫(yī)療機(jī)構(gòu)?；加衧cd的患者中的急性疼痛在性質(zhì)上一般是缺血性的，并且可以起因于微血管床的閉塞。臨床數(shù)據(jù)至少患有scd的一些患者每年有三至十次疼痛危象。在許多患者中，疼痛危象發(fā)作通常在約一周內(nèi)消退。在一些情況下，嚴(yán)重發(fā)作可以持續(xù)數(shù)周或甚至數(shù)月。scd疼痛管理通常需要施用一種或多種阿片類鎮(zhèn)痛藥（例如氫嗎啡酮、哌替啶等）、非甾體抗炎藥（例如酮咯酸氨丁三醇）和皮質(zhì)類固醇。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防患有scd的患者中的疼痛危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于降低scd患者中的疼痛管理的頻率（例如用一種或多種麻醉劑、非甾體抗炎藥和/或皮質(zhì)類固醇治療）。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于降低scd患者中的一種或多種疼痛管理藥物（例如麻醉劑、非類固醇抗炎藥和/或皮質(zhì)類固醇）的劑量。血管閉塞性危象是scd的臨床標(biāo)志之一。參見例如rees等人（2010）lancet，376：2018-2031。缺氧、酸中毒、炎癥應(yīng)激和內(nèi)皮細(xì)胞激活促進(jìn)剛性、聚合的鐮狀紅細(xì)胞和白細(xì)胞在小血管內(nèi)的截留。鐮狀紅血細(xì)胞阻塞毛細(xì)血管并限制血液流向器官，導(dǎo)致缺血、疼痛、組織壞死和對各種器官的損害。這可以引起血管阻塞，導(dǎo)致組織缺血。雖然聚合和早期膜損害最初是可逆的，但重復(fù)的鐮狀細(xì)胞形成發(fā)作導(dǎo)致不可逆鐮狀紅血細(xì)胞，其可以影響各種器官系統(tǒng)并導(dǎo)致死亡。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的血管閉塞性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的血管閉塞。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的血管閉塞的并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的血管閉塞性疼痛。如同血管閉塞性并發(fā)癥，溶血性貧血導(dǎo)致scd患者的顯著發(fā)病率。參見例如pakbaz等人（2014）hematoloncolclinnam28：355-374；kassim等人（2013）annurevmed64：451-466。多重因素促成scd中的慢性貧血。隨著紅細(xì)胞變得變形，產(chǎn)生針對暴露抗原的抗體，這導(dǎo)致紅細(xì)胞的破壞增加，平均壽命為17天而不是110至120天。在溶血期間的血紅蛋白釋放抑制一氧化氮信號傳導(dǎo)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙并促成高凝狀態(tài)。慢性溶血促成貧血連同由激素和維生素缺乏引起的受損的紅細(xì)胞代償機(jī)制。進(jìn)行性腎疾病在scd中是常見的，導(dǎo)致促紅細(xì)胞生成素減少，從而導(dǎo)致受損的刺激紅細(xì)胞生成。葉酸和鐵缺乏是常見的，因為來自紅細(xì)胞生產(chǎn)的更高需求和尿鐵損失增加。所有這些因素均促成scd患者中的慢性貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療鐮狀細(xì)胞病的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的貧血并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者的貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者的貧血并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的貧血并發(fā)癥。急性貧血可以是嚴(yán)重和潛在致命的，與scd患者中的10%至15%的死亡率相關(guān)。一般而言，嚴(yán)重發(fā)作由三個主要原因引起：脾隔離危象、再生障礙性危象或高溶血性危象。參見例如ballas等人（2010）amjhematol，85：6-13。脾隔離危象由于脾內(nèi)的紅細(xì)胞血管閉塞而出現(xiàn)，其中紅細(xì)胞的匯集促使其快速擴(kuò)大。像這樣，存在循環(huán)血紅蛋白（例如減少2g/dl）和有效循環(huán)體積的減少，這可能導(dǎo)致低血容量性休克。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的脾隔離危機(jī)。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中紅血細(xì)胞的脾隔離。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的脾腫大。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者中的脾腫大。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的脾腫大。再生障礙性危象當(dāng)紅細(xì)胞生成受損時出現(xiàn)。由于紅細(xì)胞的不斷過量產(chǎn)生，再生障礙性危象可以迅速導(dǎo)致嚴(yán)重的貧血。感染，例如細(xì)小病毒b19、鏈球菌、沙門氏菌和eb病毒，是紅細(xì)胞生成的瞬時停滯的常見原因。循環(huán)紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞兩者在再生障礙性危象期間均減少。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的再生障礙性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的再生障礙性貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者中的再生障礙性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的再生障礙性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者的再生障礙性貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的再生障礙性貧血。高度溶血當(dāng)存在伴隨網(wǎng)織紅細(xì)胞增多癥的貧血的突然惡化時出現(xiàn)，而無脾隔離的證據(jù)。高溶血性危象已在具有多次輸血的患者或接受靜脈內(nèi)免疫球蛋白治療的患者中得到記錄。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的高溶血性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd患者中的高溶血性貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者中的高溶血性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的高溶血性危象。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd患者中的高溶血性貧血。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd患者中的高溶血性貧血。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的心臟并發(fā)癥。通常，scd中的慢性貧血引起代償性心輸出量增加。這依次又導(dǎo)致心臟肥大和左心室肥大伴左心室功能障礙。參見例如adebayo等人（2002）nigerjmed，11：145-152；sachdev等人（2007）jamcollcardiol，49：472-279；和zilberman等人（2007）amjhematol82：433-438。急性心肌梗塞可能出現(xiàn)，甚至無需冠狀動脈疾病，并且因此在scd中診斷不足。參見例如pannu等人（2008）critpathwcardio，7：133-138。心律失常和充血性心力衰竭也與scd患者中的早死聯(lián)系。參見例如fitzhugh等人（2010）amjhematol85：36-40。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種心臟并發(fā)癥，包括例如心輸出量增加、心臟肥大、心肌病、左心室肥大、急性心肌梗塞、心律失常和充血性心力衰竭。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種心臟并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種心臟并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的肺部并發(fā)癥。scd頻繁導(dǎo)致急性和慢性肺部并發(fā)癥兩者。參見例如rucknagel，dl（2001）pediatrpatholmolmed，20：137-154；haynes等人（1986）amjmed80：833-840。急性并發(fā)癥可以包括感染、來自血栓的肺栓塞、骨髓梗塞和脂肪栓塞。肺功能障礙可能由于來自肋骨的局部疼痛和胸骨梗塞而發(fā)生，導(dǎo)致肺換氣不足和伴有低氧血癥的肺不張。慢性并發(fā)癥包括鐮狀細(xì)胞慢性肺病和肺動脈高壓。急性胸部綜合征（acs）是患有鐮狀病的人所特有的，并且被定義為涉及至少1個完整的肺段、胸痛和高于38.5℃的溫度的新的肺浸潤，連同呼吸急促、喘息或咳嗽。參見例如vichinsky等人（2000）nengljmed，342：1855-1865。肺梗塞、脂肪栓塞和感染的發(fā)展可能都促成acs。感染是acs患者中的發(fā)病率和死亡率的主要原因。肺動脈高壓是目前scd中的發(fā)病率和死亡率的主要原因。參見例如decastro等人（2008）amjhematol，83：19-25；gladwin等人（2004）nengljmed350：886-895。肺動脈高壓已在32%的患有scd的成人中得到記錄，并且與血管閉塞性危象和溶血有關(guān)。參見例如machado等人（2010）chest，137（6supple）：30s-38s。來自溶血的無細(xì)胞血紅蛋白被認(rèn)為減少一氧化氮，促成血管閉塞的肺血管擴(kuò)張劑。參見例如wood等人（2008）freeradicbiolmed44：1506-1528。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種肺部并發(fā)癥，包括例如脂肪或骨髓栓塞、肺水腫、鐮狀細(xì)胞肺病、肺動脈高壓、血栓栓塞和急性胸部綜合征。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種肺部并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種肺部并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的肝并發(fā)癥。肝病理狀況在scd中是常見的，在~90%的尸檢病例中觀察到肝腫大。參見例如bauer等人（1980）amjmed69：833-837；mills等人（1988）archpathollabmed112：290-294。鐮狀細(xì)胞性貧血對肝的作用包括具有近端竇狀擴(kuò)張的竇內(nèi)鐮狀細(xì)胞形成，伴有紅細(xì)胞增多癥的枯否細(xì)胞增生和含鐵血黃素沉著癥。局灶性壞死、再生性結(jié)節(jié)和肝硬化也已在驗尸檢查中得到描述。血管閉塞可以導(dǎo)致竇性閉塞和缺血，導(dǎo)致急性鐮狀肝肝象。與脾隔離相似，紅細(xì)胞可以在肝內(nèi)被隔離，導(dǎo)致急性貧血。參見例如lee等人（1996）postgradmedj72：487-488。肝隔離也可以導(dǎo)致肝內(nèi)膽汁淤積。參見例如shao等人（1995）amjgastroenterol90：2045-2050。來自鐮狀細(xì)胞形成發(fā)作的肝細(xì)胞內(nèi)的缺血還導(dǎo)致紅細(xì)胞的氣脹和小管內(nèi)膽汁淤積。用于治療scd的一些療法也促成肝病理狀況。例如，頻繁輸血導(dǎo)致枯否細(xì)胞內(nèi)的鐵沉積增加（這可能導(dǎo)致鐵過載），并增加感染血源性疾病如病毒性肝炎的風(fēng)險。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種肝并發(fā)癥，包括例如肝衰竭、肝腫大、肝隔離、肝內(nèi)膽汁淤積、膽石病和鐵過載。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的脾并發(fā)癥。如前文討論的，脾隔離由于脾內(nèi)的紅細(xì)胞血管閉塞而出現(xiàn)。急性加重導(dǎo)致脾腫大以及偶爾的脾梗塞。更常見的是，亞臨床脾隔離可以導(dǎo)致脾功能的逐漸喪失，導(dǎo)致功能性脾功能減退和無脾。這依次又可以導(dǎo)致由于封裝的細(xì)菌對膿毒病的易感性增加。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種脾并發(fā)癥，包括例如急性或慢性脾隔離、脾腫大、脾功能減退、無脾和脾梗塞。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種脾并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種脾并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的腎并發(fā)癥。大約十二百分比的患有scd的患者發(fā)展腎衰竭。參見例如powars等人（2205）medicine84：363-376；scheinman，ji（2009）natclinpractnephrol5：78-88。直腸血管毛細(xì)血管內(nèi)的血管閉塞導(dǎo)致微血栓性梗塞和紅細(xì)胞外滲到腎髓質(zhì)內(nèi)。由于低氧張力、低ph和高滲透壓，血液在腎髓質(zhì)中變得更粘稠，并且如果嚴(yán)重的話，則可以促成缺血、梗塞和乳頭壞死。反復(fù)性腎小球缺血導(dǎo)致腎小球硬化。缺血性損害的臨床后果包括血尿、蛋白尿、濃縮能力下降、腎小管性酸中毒、近端腎小管功能異常、急性和慢性腎衰竭和泌尿道感染。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種腎并發(fā)癥，包括例如急性和/或慢性腎衰竭、腎盂腎炎和腎髓質(zhì)癌。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種腎并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種腎并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的骨和/或關(guān)節(jié)并發(fā)癥。骨和關(guān)節(jié)并發(fā)癥是scd患者中的常見并發(fā)癥。參見例如hernigou等人（1991）jbonejoinsurgam，73：81-92。來自手和腳中的小骨的疼痛，指（趾）炎，在患有scd的嬰兒中頻繁出現(xiàn)。在骨髓中的血管閉塞的長期后果包括梗死、壞死和最終的退行性變化。由于脾功能減退，細(xì)菌感染在scd中更常見。梗塞的骨和骨髓是常見的感染部位，導(dǎo)致骨髓炎和膿毒性關(guān)節(jié)炎。骨壞死或無血管壞死在伴隨骨髓和骨髓的梗塞后出現(xiàn)。梗塞在長骨例如肱骨、脛骨和股骨內(nèi)最常見。長期負(fù)重會對異常股骨頭造成壓力，并導(dǎo)致進(jìn)行性關(guān)節(jié)破壞和關(guān)節(jié)炎。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種骨和/或關(guān)節(jié)并發(fā)癥，包括梗塞、壞死、骨髓炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、骨壞死和骨質(zhì)減少。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種骨和/或關(guān)節(jié)并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種骨和/或關(guān)節(jié)并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的神經(jīng)性并發(fā)癥。大約25百分比的患有scd的個體受神經(jīng)損傷的影響。參見例如ohene-frempong等人（1998）blood，91：288-294；verduzco等人（2009）blood114：5117-5125。損傷可以是急性或慢性的。腦血管意外在成人中最常見，但依賴基因型?；加衕bss的人具有最高的腦血管風(fēng)險，具有在45歲之前患有臨床中風(fēng)的24百分比可能性。缺血性中風(fēng)在9歲下述的兒童中更常見，而出血性中風(fēng)在成年人中更常見。缺血性中風(fēng)由于大顱內(nèi)動脈的閉塞而出現(xiàn)，導(dǎo)致缺血。缺血繼發(fā)于通過剛性紅細(xì)胞的較小血管閉塞，由于慢性貧血、高凝狀態(tài)和對動脈內(nèi)皮的流動相關(guān)血液動力學(xué)損傷而加劇，進(jìn)一步增加紅細(xì)胞粘附的可能性。相比之下，出血性中風(fēng)可以在腦室內(nèi)、實質(zhì)內(nèi)和蛛網(wǎng)膜下腔中出現(xiàn)。參見例如anson等人（1991）jneurosurg，75：552-558。腦室內(nèi)出血可能與大腦前動脈動脈瘤的破裂或?qū)嵸|(zhì)內(nèi)出血直接蔓延到外側(cè)或第三腦室內(nèi)有關(guān)。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種神經(jīng)性并發(fā)癥，例如動脈瘤、缺血性中風(fēng)、實質(zhì)內(nèi)出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血和腦室內(nèi)出血。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種神經(jīng)性并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種神經(jīng)性并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的眼部并發(fā)癥。scd的眼并發(fā)癥主要影響視網(wǎng)膜。參見例如downes等人（2005）opthalmology，112：1869-1875；fadugbagbe等人（2010）anntroppaediatr30：19-26。由于血管閉塞性危象，出現(xiàn)周圍性視網(wǎng)膜缺血。新血管（海扇形成）主要接近動靜脈交叉點形成，并且被稱為增殖性鐮狀視網(wǎng)膜病變。這些新血管可以容易地出血，引起牽拉性視網(wǎng)膜脫離和最終失明。非增殖性視網(wǎng)膜變化在scd中也更常見。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種眼部并發(fā)癥，包括例如外周視網(wǎng)膜缺血、增殖性鐮狀視網(wǎng)膜病變、玻璃體出血、視網(wǎng)膜脫離和非增殖性視網(wǎng)膜變化。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種眼部并發(fā)癥。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種眼部并發(fā)癥。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的皮膚（皮膚的）并發(fā)癥。scd的常見皮膚并發(fā)癥之一是潰瘍的表現(xiàn)。參見例如keast等人（2004）ostomywoundmanage.，50（10）：64-70；trent等人（2004）advskinwoundcare，17（8）：410-416；j.r.eckman（1996）hematoloncolclinnortham.，10（6）：1333-1344；和chung等人（1996）advancesinwoundcare，9（5）：46-50。盡管scd患者中的潰瘍發(fā)展機(jī)制尚未完全闡明，但認(rèn)為它是受scd的各個方面影響的多因素過程，包括例如血管閉塞，增加的靜脈和毛細(xì)血管壓，異常血液流變學(xué)，組織缺氧，以及通過靜脈停滯、靜脈壓升高或兩者引起的細(xì)菌侵入的易感性增加。已發(fā)現(xiàn)潰瘍愈合的速率比患有scd的患者中的速率慢三至16倍。潰瘍可以持續(xù)數(shù)月至數(shù)年，并且scd患者中存在復(fù)發(fā)的高發(fā)生率。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防scd的一種或多種皮膚并發(fā)癥，包括例如潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療scd的一種或多種皮膚并發(fā)癥，例如潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療scd的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防scd的一種或多種皮膚并發(fā)癥，例如潰瘍。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑可以與一種或多種另外的藥物（例如羥基脲、epo拮抗劑、epo、阿片類鎮(zhèn)痛藥、非甾體抗炎藥、皮質(zhì)類固醇、鐵螯合劑）或支持療法（例如紅血細(xì)胞輸血）組合施用于有此需要的受試者，用于治療鐮狀細(xì)胞病或鐮狀細(xì)胞病的一種或多種并發(fā)癥（例如皮膚并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍）。大多數(shù)scd患者的主要治療是支持性的。對于患有鐮狀細(xì)胞病的患者的目前治療選項包括抗生素、疼痛管理、靜脈注射液、輸血、手術(shù)和化合物例如羥基脲。羥基脲（例如droxia?）是用于治療鐮狀細(xì)胞病的批準(zhǔn)藥物。羥基脲是s期細(xì)胞毒性藥物，并且用于長期治療。它被認(rèn)為增加血紅蛋白f的水平，所述血紅蛋白f防止s-聚合物的形成和紅血細(xì)胞鐮形化形成。它還被認(rèn)為增加no產(chǎn)生。羥基脲在患有鐮狀細(xì)胞病的成人中的多中心試驗顯示羥基脲使疼痛發(fā)作的發(fā)生率降低近一半。然而，目前羥基脲僅用于患有scd的嚴(yán)重并發(fā)癥并且能夠遵循每日劑量方案的患者。一般認(rèn)為羥基脲療法僅在具有高依從性潛力的結(jié)構(gòu)化環(huán)境中給予時才是有效的。不幸的是，許多scd患者對羥基脲抗拒。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用本發(fā)明的actrii拮抗劑和羥基脲的組合，來治療有此需要的受試者中的鐮狀細(xì)胞病。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用本發(fā)明的actrii拮抗劑和羥基脲的組合，來治療或預(yù)防有此需要的受試者中的一種或多種鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥（例如皮膚并發(fā)癥，例如皮膚潰瘍）。定期紅血細(xì)胞輸血也是scd患者的常見療法。然而，幾個問題使得其不適合于長期使用。雖然定期輸血已顯示預(yù)防中風(fēng)、acs和血管閉塞性疼痛危象，但它們不能阻止無癥狀性梗死的發(fā)展或煙霧病的發(fā)展，所述煙霧病是其中某些動脈收縮并且代償性側(cè)支血管易于出血的腦循環(huán)病癥。參見例如bishop等人（2011）bloodcells，molecules&disease，47：125-128；debaun等人（2012）blood，119：4787-4596。此外，scd患者可能由于紅血細(xì)胞輸血而發(fā)展鐵過載，所述鐵過載與其自身的發(fā)病率相關(guān)。定期紅血細(xì)胞輸血需要暴露于各種供體單位的血液，并且因此具有更高的同種異體免疫的風(fēng)險。血管通路的困難、鐵螯合的可用性和順應(yīng)性以及高成本是為何定期輸血并非普遍療法的最佳選擇的一些原因。wayne等人（2000）blood，96：2369-2372。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用本發(fā)明的actrii拮抗劑和一種或多種血細(xì)胞輸注的組合，來治療有此需要的受試者中的鐮狀細(xì)胞病。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法涉及通過施用本發(fā)明的actrii拮抗劑和一種或多種紅血細(xì)胞輸注的組合，來治療或預(yù)防有此需要的受試者中的一種或多種鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥。在一些實施方案中，用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑的治療有效減少scd患者中的輸血需求，例如降低有效治療scd或一種或多種scd并發(fā)癥所需的輸血頻率和/或輸血量。在某些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以與用于scd的支持療法組合使用。此類療法包括用紅血細(xì)胞或全血輸血以治療貧血。在scd患者中，關(guān)于鐵穩(wěn)態(tài)的正常機(jī)制被反復(fù)輸血壓制，最終導(dǎo)致在活組織例如心臟、肝和內(nèi)分泌腺中的毒性和潛在致命的鐵積累。因此，用于scd患者的支持療法還包括用一種或多種鐵螯合分子的治療，以促進(jìn)尿和/或糞便中的鐵排泄，并且從而預(yù)防或逆轉(zhuǎn)組織鐵過載。有效的鐵螯合劑應(yīng)當(dāng)能夠選擇性結(jié)合且中和三價鐵，氧化形式的非轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合鐵，其通過羥基自由基和氧化產(chǎn)物的催化生產(chǎn)可能負(fù)責(zé)大多數(shù)鐵毒性。參見例如esposito等人（2003）blood102:2670-2677。這些藥物在結(jié)構(gòu)上是多樣的，但是都具有能夠與以1:1（六齒藥物）、2:1（三齒）或3:1（雙齒）的化學(xué)計量學(xué)的各個鐵原子形成中和八面體配位絡(luò)合物的氧或氮供體原子。kalinowski等人（2005）pharmacolrev57:547-583。一般而言，有效的鐵螯合劑也具有相對低的分子量（例如小于700道爾頓），其中在水和脂質(zhì)兩者中的溶解性能夠接近受累組織。鐵螯合分子的具體例子包括去鐵胺（也稱為去鐵敏b、去鐵胺b、dfo-b、dfoa、dfb或desferal?），需要每日腸胃外施用的細(xì)菌來源的六齒藥物，以及經(jīng)口活性的合成藥物去鐵酮（也稱為ferriprox?）（雙齒）和地拉羅司（也稱為雙-羥基苯基-三唑、icl670或exjade?）（三齒）。由同一天施用兩種鐵螯合劑組成的組合療法在對螯合單一療法無應(yīng)答的患者中顯示出前景，并且還克服了患者對單獨的去鐵胺（dereroxamine）的弱順應(yīng)性的問題。cao等人（2011）pediatrrep3（2）:e17；和galanello等人（2010）annnyacadsci1202:79-86。無效紅細(xì)胞生成和潰瘍在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防有此需要的受試者中的無效紅細(xì)胞生成。最初基于鐵動力學(xué)研究（ricketts等人，1978，clinnuclmed3：159-164）區(qū)別于再生障礙性貧血、出血或外周溶血，無效紅細(xì)胞生成描述了不同組的貧血，其中成熟rbc的產(chǎn)生少于骨髓中存在的紅系前體（成紅細(xì)胞）的數(shù)目（tanno等人，2010，advhematol2010：358283）。在此類貧血中，盡管由于成熟rbc的無效生產(chǎn)導(dǎo)致促紅細(xì)胞生成素水平升高，組織缺氧仍然存在。最終發(fā)展為惡性循環(huán)，其中升高的促紅細(xì)胞生成素水平驅(qū)動成紅細(xì)胞的大量擴(kuò)增，潛在導(dǎo)致由于髓外紅細(xì)胞生成的脾腫大（脾擴(kuò)大）（aizawa等人，2003，amjhematol74：68-72）、成紅細(xì)胞誘導(dǎo)的骨病理狀態(tài)（dimatteo等人，2008，jbiolregulhomeostagents22：211-216）和組織鐵過載，即使在不存在治療性rbc輸血的情況下（pippard等人，1979，lancet2：819-821）。因此，通過提高紅細(xì)胞生成效力，本發(fā)明的actrii拮抗劑可以打破上述循環(huán)，并且不僅可以緩解潛在的貧血，還可以緩解促紅細(xì)胞生成素水平升高、脾腫大、骨病理狀態(tài)和組織鐵過載的相關(guān)并發(fā)癥。actrii拮抗劑可以治療無效紅細(xì)胞生成，包括貧血和epo水平升高，以及并發(fā)癥例如脾腫大、成紅細(xì)胞誘導(dǎo)的骨病理狀態(tài)和鐵過載、皮膚潰瘍及其伴隨的病理狀態(tài)。對于脾腫大，這種病理狀態(tài)包括胸部或腹部疼痛和網(wǎng)狀內(nèi)皮增生。髓外造血不僅可以在脾中出現(xiàn)，還潛在地可以在其他組織中以髓外造血假瘤的形式出現(xiàn)（musallam等人，2012，coldspringharbperspectmed2:a013482）。對于成紅細(xì)胞誘導(dǎo)的骨病理狀態(tài)，伴隨的病理狀態(tài)包括低骨礦物質(zhì)密度、骨質(zhì)疏松和骨痛（haidari.，2011，bone48:425-432）。對于鐵過載，伴隨的病理狀態(tài)包括鐵調(diào)素壓制和膳食鐵的過度吸收（musallam等人，2012，bloodrev26（suppl1）:s16-s19）、多發(fā)性內(nèi)分泌病和肝纖維化/肝硬化（galanello等人，2010，orphanetjraredis5:11）和鐵過載心肌?。╨ekawanvijit等人，2009，canjcardiol25:213-218）。無效紅細(xì)胞生成的最常見原因是地中海貧血綜合征，遺傳性血紅蛋白病，其中完整的α-和β血紅蛋白鏈的產(chǎn)生中的不平衡導(dǎo)致在成紅細(xì)胞成熟期間的細(xì)胞凋亡增加（schrier，2002，curropinhematol9:123-126）。地中海貧血是共同的全世界最頻繁的遺傳病癥，其中不斷變化的流行病學(xué)模式預(yù)測會促成美國和全球日益嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題（vichinsky，2005，annnyacadsci1054:18-24）。地中海貧血綜合征根據(jù)其嚴(yán)重性來命名。因此，α地中海貧血包括α-輕型地中海貧血（也稱為α地中海貧血性狀；兩種受影響的α珠蛋白基因）、血紅蛋白h疾?。ㄈN受影響的α珠蛋白基因）和α-重型地中海貧血（也稱為胎兒水腫；四種受影響的α珠蛋白基因）。β地中海貧血包括β輕型地中海貧血（也稱為β地中海貧血性狀；一種影響β珠蛋白基因）、β中間型地中海貧血（兩種受影響的β珠蛋白基因）、血紅蛋白e地中海貧血（兩種受影響的β珠蛋白基因）和β重型地中海貧血（也稱為庫利氏貧血；兩種受影響的β珠蛋白基因，導(dǎo)致β珠蛋白蛋白質(zhì)的完全不存在）。β地中海貧血影響多重器官，與相當(dāng)大的發(fā)病率和死亡率相關(guān)，并且目前需要終身護(hù)理。雖然患有β地中海貧血的患者中的預(yù)期壽命近年來由于使用與鐵螯合組合的定期輸血而增加，但起因于輸血和鐵的過量胃腸吸收兩者而導(dǎo)致的鐵過載可以引起嚴(yán)重的并發(fā)癥，例如心臟病、血栓形成、性腺機(jī)能減退、甲狀腺功能減退、糖尿病、骨質(zhì)疏松和骨質(zhì)減少（rund等人，2005，nengljmed353:1135-1146）。如本文用β地中海貧血的小鼠模型證明的，任選與epo受體激活劑組合的actriia拮抗劑可以用于治療地中海貧血綜合征。此外，本文公開的數(shù)據(jù)證明gdf捕獲物多肽可以用于促進(jìn)對人類地中海貧血患者中的紅血細(xì)胞參數(shù)（例如血清血紅蛋白水平升高）的正面作用以及治療地中海貧血的并發(fā)癥（例如皮膚潰瘍）。在某些方面，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療無效紅細(xì)胞生成病癥（例如地中海貧血綜合征）的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防無效紅細(xì)胞生成的皮膚（皮膚的）并發(fā)癥。無效紅細(xì)胞生成特別是地中海貧血的常見皮膚并發(fā)癥是潰瘍的表現(xiàn)。雖然關(guān)于地中海貧血患者中的潰瘍發(fā)展的機(jī)制尚未完全闡明，但認(rèn)為它是受地中海貧血的各個方面影響的多因素過程，包括例如和組織缺氧。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療無效紅細(xì)胞生成（例如地中海貧血）的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療或預(yù)防無效紅細(xì)胞生成（例如地中海貧血）的一種或多種皮膚并發(fā)癥，包括例如潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑，任選與一種或多種用于治療無效紅細(xì)胞生成（例如地中海貧血）的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療無效紅細(xì)胞生成（例如地中海貧血）的一種或多種皮膚并發(fā)癥，包括例如潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療無效紅細(xì)胞生成（例如地中海貧血）的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防無效紅細(xì)胞生成（例如地中海貧血）的一種或多種皮膚并發(fā)癥，包括例如潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療β地中海貧血（例如β中間型地中海貧血）的藥物和/或支持療法組合，可以用于治療β地中海貧血（例如β中間型地中海貧血）的一種或多種皮膚并發(fā)癥，包括例如潰瘍。在一些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物，任選與一種或多種用于治療β地中海貧血（例如β中間型地中海貧血）的藥物和/或支持療法組合，可以用于預(yù)防β地中海貧血（例如β中間型地中海貧血）的一種或多種皮膚并發(fā)癥，包括例如潰瘍。其他貧血適應(yīng)癥本發(fā)明的actrii拮抗劑，任選與一種或多種支持療法組合，可以用于治療除地中海貧血綜合征之外的無效紅細(xì)胞生成的病癥。此類病癥包括鐵粒幼紅細(xì)胞貧血（遺傳性或獲得性）；紅細(xì)胞生成異常性貧血（i型和ii型）；鐮狀細(xì)胞性貧血；遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥；丙酮酸激酶缺乏癥；可能由諸如葉酸缺乏癥（由于先天性疾病、攝入減少或需求增加）、鈷胺素缺乏癥（由于先天性疾病、惡性貧血、吸收受損、胰腺功能不全或攝入減少）的狀況、某些藥物或不明原因（先天性紅細(xì)胞生成異常性水腫、難治性巨幼紅細(xì)胞性貧血或紅白血?。┒鸬木抻准t細(xì)胞性貧血；骨髓性貧血，包括骨髓纖維化（髓樣化生）和骨髓癆；先天性紅細(xì)胞生成性卟啉癥；和鉛中毒。如本文所示，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），任選與epo受體激活劑和一種或多種另外的支持療法組合，可以用于增加健康個體和所選擇的患者群體中的紅血細(xì)胞、血紅蛋白或網(wǎng)織紅細(xì)胞水平。適當(dāng)?shù)幕颊呷后w的例子包括具有不期望的低紅血細(xì)胞或血紅蛋白水平的那些，例如患有貧血的患者、鐮狀細(xì)胞患者、以及處于發(fā)展不期望的低紅血細(xì)胞或血紅蛋白水平的風(fēng)險中的那些，例如即將經(jīng)歷可能導(dǎo)致大量失血的大手術(shù)或其他手術(shù)的那些患者。在一些實施方案中，具有足夠紅血細(xì)胞水平的患者用一種或多種actrii拮抗劑藥物進(jìn)行治療以增加紅血細(xì)胞水平，并且隨后抽取血液并儲存用于以后在輸血中使用。本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），任選與epo受體激活劑和/或其他一種或多種另外的支持療法組合，可以用于增加患有貧血的患者（例如鐮狀細(xì)胞患者、地中海貧血患者等）中的紅血細(xì)胞水平、血紅蛋白水平和/或血細(xì)胞比容水平。當(dāng)觀察人中的血紅蛋白和/或血細(xì)胞比容水平時，小于對于適當(dāng)年齡和性別類別正常水平的水平可以指示貧血，盡管考慮了個體差異。例如，10-12.5g/dl且通常為約11.0g/dl的血紅蛋白水平視為在健康成人中的正常范圍內(nèi)，盡管就治療而言，較低的靶水平可能引起較少的心血管副作用。參見例如jacobs等人（2000）nephroldialtransplant15，15-19?？商娲?，血細(xì)胞比容水平（由細(xì)胞占據(jù)的血樣體積的百分比）可以用作貧血的量度。健康個體的血細(xì)胞比容水平對于成年男性范圍為約41-51%，并且對于成年女性范圍為35-45%。在某些實施方案中，可以用預(yù)期使患者恢復(fù)至紅血細(xì)胞、血紅蛋白和/或血細(xì)胞比容的靶水平的給藥方案治療患者。由于血紅蛋白和血細(xì)胞比容水平因人而異，最佳地，靶血紅蛋白和/或血細(xì)胞比容水平可以針對每個患者進(jìn)行個體化。在具有組織損傷、感染和/或慢性疾病特別是癌癥的患者中頻繁觀察到貧血。在一些受試者中，貧血通過低促紅細(xì)胞生成素水平和/或?qū)撬柚写偌t細(xì)胞生成素的不充分應(yīng)答加以區(qū)別。參見例如adamson，2008，harrison’sprinciplesofinternalmedicine，第17版；mcgrawhill，newyork，第628-634頁。貧血的潛在原因包括例如失血、營養(yǎng)缺乏（例如蛋白質(zhì)的飲食攝入降低）、藥物反應(yīng)、與骨髓有關(guān)的不同問題和許多疾病。更特別地，貧血與各種病癥和狀況相關(guān)，所述病癥和狀況包括例如骨髓移植；實體瘤（例如乳腺癌、肺癌和結(jié)腸癌）；淋巴系統(tǒng)腫瘤（例如慢性淋巴細(xì)胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤）；造血系統(tǒng)腫瘤（例如白血病、骨髓增生異常綜合征和多發(fā)性骨髓瘤）；放射療法；化學(xué)療法（例如含鉑方案）；炎性和自身免疫性疾病，包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、其他炎性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（sle）、急性或慢性皮膚病（例如牛皮癬）、炎性腸?。ɡ缈肆_恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎）；急性或慢性腎疾病或衰竭，包括特發(fā)性或先天性狀況；急性或慢性肝??；急性或慢性出血；由于患者同種異體或自身抗體和/或宗教原因（例如一些耶和華見證人（jehovah'switnesses）），其中紅血細(xì)胞不能輸血的情況；感染（例如瘧疾和骨髓炎）；血紅蛋白病，包括例如鐮狀細(xì)胞病（貧血）、地中海貧血；藥物使用或濫用（例如酒精濫用）；出于避免輸血的任何原因的具有貧血的兒科患者；以及老年患者或具有潛在的伴有貧血的心肺疾病的患者，其由于擔(dān)心循環(huán)過載而不能接受輸血。參見例如adamson（2008）harrison’sprinciplesofinternalmedicine，第17版；mcgrawhill，newyork，第628-634頁。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療或預(yù)防與一種或多種本文公開的病癥或狀況相關(guān)的貧血。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療與一種或多種本文公開的病癥或狀況相關(guān)的貧血。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于預(yù)防與一種或多種本文公開的病癥或狀況相關(guān)的貧血。許多因素可以促成癌癥相關(guān)性貧血。一些與疾病過程本身和炎癥細(xì)胞因子例如白細(xì)胞介素-1、干擾素-γ和腫瘤壞死因子的生成相關(guān)。bron等人（2001）seminoncol28（suppl8）:1-6。在其效應(yīng)中，炎癥誘導(dǎo)關(guān)鍵的鐵調(diào)節(jié)肽鐵調(diào)素，從而抑制來自巨噬細(xì)胞的鐵輸出，并且一般限制用于紅細(xì)胞生成的鐵利用度。參見例如ganz（2007）jamsocnephrol18:394-400。通過各種途徑的失血也可以促成癌癥相關(guān)性貧血。由于癌癥進(jìn)展的貧血患病率隨著癌癥類型而變，范圍從前列腺癌中的5%直到多發(fā)性骨髓瘤中的90%。癌癥相關(guān)性貧血對患者具有深刻后果，包括疲勞和生活質(zhì)量降低、治療功效降低和死亡率增加。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療或預(yù)防癌癥相關(guān)性貧血。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療癌癥相關(guān)性貧血。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于預(yù)防癌癥相關(guān)性貧血。低增殖性貧血可起因于原發(fā)性功能障礙或骨髓的衰竭。低增殖性貧血包括：慢性疾病貧血、腎疾病貧血、與代謝減退狀態(tài)相關(guān)的貧血和與癌癥相關(guān)的貧血。在這些類型的每一種中，內(nèi)源性促紅細(xì)胞生成素水平對于觀察到的貧血程度不適當(dāng)?shù)氐汀Ｆ渌驮鲋承载氀ǎ涸缙阼F缺乏性貧血和由骨髓損傷引起的貧血。在這些類型中，內(nèi)源性促紅細(xì)胞生成素水平對于觀察到的貧血程度適當(dāng)升高。突出的例子是由癌癥和/或化學(xué)治療藥物或癌癥放射療法引起的骨髓抑制。臨床試驗的廣泛綜述發(fā)現(xiàn)輕度貧血可以在化學(xué)治療后的100%患者中出現(xiàn)，而更嚴(yán)重的貧血可以在高達(dá)80%的此類患者中出現(xiàn)。參見例如groopman等人（1999）jnatlcancerinst91:1616-1634。骨髓抑制藥包括例如：1）烷化劑，例如氮芥（例如美法侖）和亞硝基脲（例如鏈佐星）；2）抗代謝藥例如葉酸拮抗劑（例如氨甲蝶呤）、嘌呤類似物（例如硫鳥嘌呤）和嘧啶類似物（例如吉西他濱）；3）細(xì)胞毒性抗生素，例如蒽環(huán)類（例如多柔比星）；4）激酶抑制劑（例如吉非替尼）；5）有絲分裂抑制劑，例如紫杉烷（例如紫杉醇）和長春花生物堿（例如長春瑞濱）；6）單克隆抗體（例如利妥昔單抗）；和7）拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑（例如拓?fù)涮婵岛鸵劳胁窜眨?。另外，?dǎo)致代謝減退速率的狀況可以產(chǎn)生輕度至中度的低增殖性貧血。在這些狀況中有內(nèi)分泌缺乏狀態(tài)。例如，貧血可在阿狄森氏病、甲狀腺功能減退、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、或者閹割或用雌激素治療的男性中出現(xiàn)。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療或預(yù)防過度增殖性貧血。慢性腎疾病有時與低增殖性貧血有關(guān)，貧血的程度隨著腎受損的水平在嚴(yán)重性中不同。此類貧血主要是由于促紅細(xì)胞生成素的生產(chǎn)不足和紅血細(xì)胞的存活降低。慢性腎疾病通常經(jīng)過數(shù)年或數(shù)十年的時期逐漸進(jìn)展到終末期（5期）疾病，在該時間點需要透析或腎移植用于患者存活。貧血通常在該過程早期發(fā)展，并且隨著疾病進(jìn)展而惡化。腎疾病的貧血的臨床后果得到充分記錄，并且包括左心室肥大、認(rèn)知功能受損、生活質(zhì)量降低和免疫功能改變。參見例如levin等人（1999）amjkidneydis27:347-354；nissenson（1992）amjkidneydis20（suppl1）:21-24；revicki等人（1995）amjkidneydis25:548-554；gafter等人，（1994）kidneyint45:224-231。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療或預(yù)防與急性或慢性腎疾病或衰竭相關(guān)的貧血。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療與急性或慢性腎疾病或衰竭相關(guān)的貧血。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于預(yù)防與急性或慢性腎疾病或衰竭相關(guān)的貧血。起因于足夠體積的急性失血的貧血，例如來自創(chuàng)傷或產(chǎn)后出血的貧血，被稱為急性出血后貧血。急性失血最初引起無貧血的血容量減少，因為rbc連同其他血液組成成分一起按比例耗盡。然而，血容量減少將迅速觸發(fā)將流體從血管外轉(zhuǎn)移到血管腔隙的生理機(jī)制，這導(dǎo)致血液稀釋和貧血。如果慢性，則失血逐漸耗盡身體鐵儲存，并且最終導(dǎo)致鐵缺乏。在一些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以用于治療起因于急性失血的貧血。缺鐵性貧血是增加鐵缺乏癥的分級進(jìn)展的最后階段，所述鐵缺乏癥包括作為中間階段的負(fù)鐵平衡和鐵缺乏紅細(xì)胞生成。鐵缺乏癥可以起因于鐵需求增加、鐵攝入減少或鐵損失增加，如在諸如懷孕、飲食不足、腸道吸收不良、急性或慢性炎癥和急性或慢性失血的狀況中例證。對于這種類型的輕度至中度貧血，骨髓保持低增殖，且rbc形態(tài)大部分正常；然而，即使輕度貧血也以可導(dǎo)致一些小紅細(xì)胞低色素性rbc，并且向嚴(yán)重鐵缺乏性貧血的過渡伴隨著骨髓的過度增殖和越來越普遍的小紅細(xì)胞和低色素性rbc。參見例如adamson（2008）harrison’sprinciplesofinternalmedicine，第ed版；mcgrawhill，newyork，第628-634頁。缺鐵性貧血的適當(dāng)治療取決于其原因和嚴(yán)重性，其中經(jīng)口鐵制劑、腸胃外鐵制劑和rbc輸血作為主要常規(guī)選項。在一些實施方案中，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療慢性鐵缺乏。骨髓增生異常綜合征（mds）是血液學(xué)狀況的多樣化集合，所述血液學(xué)狀況的特征在于髓樣血細(xì)胞的無效產(chǎn)生和轉(zhuǎn)化為急性髓性白血病的風(fēng)險。在mds患者中，血液干細(xì)胞不成熟為健康的紅血細(xì)胞、白血細(xì)胞或血小板。mds病癥包括例如難治性貧血、難治性貧血伴環(huán)狀鐵粒幼紅細(xì)胞、難治性貧血伴原始細(xì)胞過多、難治性貧血伴轉(zhuǎn)化中原始細(xì)胞過多、難治性血細(xì)胞減少伴多系發(fā)育不良、以及與孤立的5q染色體異常相關(guān)的骨髓增生異常綜合征。由于這些病癥在造血細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量兩者中表現(xiàn)為不可逆的缺陷，大多數(shù)mds患者患有慢性貧血。因此，mds患者最終需要輸血和/或用生長因子（例如促紅細(xì)胞生成素或g-csf）治療以增加紅血細(xì)胞水平。然而，由于此類療法的頻率，許多mds患者產(chǎn)生副作用。例如，接受頻繁紅血細(xì)胞輸血的患者可能由于額外鐵的積聚而具有組織和器官損傷。相應(yīng)地，任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等），可以用于治療患有mds的患者。在某些實施方案中，可以使用任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療患有mds的患者。在其他實施方案中，可以使用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）和一種或更多用于治療mds的另外治療劑（包括例如沙利度胺、來那度胺、阿扎胞苷、地西他濱、促紅細(xì)胞生成素、去鐵胺、抗胸腺細(xì)胞球蛋白和非格司亭（g-csf））治療患有mds的患者。如本文使用的，“與...組合”或“組合施用”指任何形式的施用，使得第二療法在體內(nèi)仍有效（例如兩種藥物或化合物在患者中同時有效，其可以包括兩種藥物或化合物的協(xié)同作用）。有效性可能與血液、血清或血漿中藥物的可測量濃度不關(guān)聯(lián)。例如，不同的治療劑或化合物可以在相同制劑或分開制劑中，同時或序貫地，且在不同的時間表上施用。因此，接受此類治療的個體可以受益于不同療法的組合效應(yīng)。本發(fā)明的一種或多種gdf11和/或激活素b拮抗劑藥物（任選地，gdf8、激活素a、激活素c、激活素e和bmp6中的一種或多種的進(jìn)一步拮抗劑）可以與一種或多種其他的另外藥物或支持療法同時、之前或之后施用。一般而言，每種治療劑以對于該特定藥物確定的劑量和/或時間表施用。在方案中采用的特定組合將考慮到本發(fā)明的拮抗劑與療法和/或待實現(xiàn)的所需療效的相容性。在某些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以與鐵調(diào)素或鐵調(diào)素激動劑組合用于治療鐮狀細(xì)胞病，特別是與鐵過載相關(guān)的鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥。主要在肝中產(chǎn)生的循環(huán)多肽，鐵調(diào)素視為鐵代謝的主要調(diào)節(jié)劑，由于其誘導(dǎo)鐵轉(zhuǎn)運蛋白的降解的能力，所述鐵轉(zhuǎn)運蛋白是局限于吸收性腸細(xì)胞、肝細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上的鐵輸出蛋白。廣泛地說，鐵調(diào)素降低細(xì)胞外鐵的可用性，因此鐵調(diào)素激動劑可能有益于治療鐮狀細(xì)胞病，特別是與鐵過載相關(guān)的鐮狀細(xì)胞病并發(fā)癥。任選與epo受體激活劑組合的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）也適用于治療紊亂rbc成熟的貧血，其特征部分在于由小尺寸（小紅細(xì)胞）、超尺寸（大紅細(xì)胞）、畸形或異常著色（低色素性）rbc。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了通過給個體施用治療有效量的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑，actriia多肽，actriib多肽，gdf捕獲物等）和epo受體激活劑，來治療或預(yù)防有此需要的個體中的貧血的方法。在某些實施方案中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以與epo受體激活劑組合使用，以降低這些激活劑在易受epo的不良反應(yīng)的患者中的劑量。這些方法可以用于患者的治療性和預(yù)防性處理。本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以與epo受體激活劑組合使用，以實現(xiàn)紅血細(xì)胞的增加，特別是在較低劑量范圍。這可能有益于降低已知的脫靶效應(yīng)和與高劑量的epo受體激活劑相關(guān)的風(fēng)險。epo的主要不良反應(yīng)包括例如血細(xì)胞比容或血紅蛋白水平中的過度增加和紅細(xì)胞增多癥。升高的血細(xì)胞比容水平可以導(dǎo)致高血壓（更特別地，高血壓的惡化）和血管血栓形成。已報道的epo的其他不良反應(yīng)（其中一些涉及高血壓）是頭痛、流感樣綜合征、分流閉塞、心肌梗塞以及由于血栓形成、高血壓性腦病和紅血細(xì)胞血液細(xì)胞發(fā)育不全的腦痙攣。參見例如singibarti（1994）j.clininvestig72（suppl6），s36-s43；horl等人（2000）nephroldialtransplant15（suppl4），51-56；delanty等人（1997）neurology49，686-689；和bunn（2002）nengljmed346（7），522-523）。如果本發(fā)明的拮抗劑通過與epo不同的機(jī)制起作用，則這些拮抗劑可以用于增加對epo并未良好應(yīng)答的患者中的紅血細(xì)胞和血紅蛋白水平。例如，本發(fā)明的actrii拮抗劑可以有益于其中施用正常至增加（>300iu/kg/周）劑量的epo不導(dǎo)致血紅蛋白水平增加至靶水平的患者。對于所有類型的貧血發(fā)現(xiàn)具有不足夠的epo應(yīng)答的患者，但在患有癌癥的患者和患有終末期腎疾病的患者中特別頻繁地觀察到更高數(shù)目的無應(yīng)答者。對epo的不足夠應(yīng)答可以是組成性（用epo首次治療后觀察到的）或獲得性的（用epo反復(fù)治療后觀察到的）。在某些實施方案中，本發(fā)明提供了通過測量患者中的一種或多種血液學(xué)參數(shù)用于管理的方法，所述患者已用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療，或是用其治療的候選者。血液學(xué)參數(shù)可以用于評估用于患者的適當(dāng)劑量，所述患者是待用本發(fā)明的拮抗劑治療的候選者，以監(jiān)測在治療期間的血液學(xué)參數(shù)，評估在用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑治療期間是否調(diào)整劑量，和/或評估本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的適當(dāng)維持劑量。如果一種或多種血液學(xué)參數(shù)在正常水平之外，則可以降低、延遲或終止用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）的給藥。使用領(lǐng)域公認(rèn)的方法，可以根據(jù)本文提供的方法測量的血液學(xué)參數(shù)包括例如紅血細(xì)胞水平、血壓、鐵儲存和在體液中發(fā)現(xiàn)的與增加的紅血細(xì)胞水平關(guān)聯(lián)的其他藥物。此類參數(shù)可以使用來自患者的血樣進(jìn)行測定。紅血細(xì)胞水平、血紅蛋白水平和/或血細(xì)胞比容水平中的增加可以引起血壓升高。在一個實施方案中，如果一種或多種血液學(xué)參數(shù)在患者的正常范圍之外或正常的高側(cè)上，所述患者是待用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療的候選者，則可以延遲本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的施用開始，直到血液學(xué)參數(shù)自然地或經(jīng)由治療干預(yù)恢復(fù)到正?；蚩山邮艿乃?。例如，如果候選患者是高血壓或高血壓前期，則可以用降血壓劑治療患者以降低患者的血壓?？梢允褂眠m合于個體患者狀況的任何降血壓劑，包括例如利尿劑、腎上腺素能抑制劑（包括α阻斷劑和β阻斷劑）、血管擴(kuò)張劑、鈣通道阻斷劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ace）抑制劑或血管緊張素ii受體阻斷劑。可以可替代地使用飲食和運動方案來治療血壓。類似地，如果候選患者具有低于正?；蛟谡５牡蛡?cè)上的鐵儲存，則可以用適當(dāng)?shù)娘嬍撤桨负?或鐵補(bǔ)充劑治療患者，直到患者的鐵儲存已恢復(fù)到正?；蚩山邮艿乃健τ诰哂懈哂谡＜t血細(xì)胞水平和/或血紅蛋白水平的患者，則可以延遲本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的施用，直到水平已恢復(fù)到正?；蚩山邮艿乃?。在某些實施方案中，如果一種或多種血液學(xué)參數(shù)在患者的正常范圍之外或正常的高側(cè)上，所述患者是待用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療的候選者，則施用的開始可以不被延遲。然而，本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的給藥劑量或頻率可以設(shè)定為降低施用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑后出現(xiàn)的血液學(xué)參數(shù)中不可接受的增加的風(fēng)險的量?？商娲?，可以開發(fā)用于患者的治療方案，所述治療方案將本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）與解決血液學(xué)參數(shù)的不期望水平的治療劑組合。例如，如果患者具有升高的血壓，則可以設(shè)計涉及本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）和血壓降低劑的施用的治療方案。對于具有低于所需鐵儲存的患者，可以開發(fā)涉及本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）和鐵補(bǔ)充的施用的治療方案。在一個實施方案中，可以對于患者建立關(guān)于一種或多種血液學(xué)參數(shù)的基線參數(shù)，所述患者是待用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療的候選者，并且基于基線值對于該患者建立合適的給藥方案。可替代地，基于患者病史建立的基線參數(shù)可以用于告知用于患者的適當(dāng)拮抗劑給藥方案。例如，如果健康患者具有高于限定的正常范圍的確定的基線血壓讀數(shù)，則在用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑治療之前，可能不需要使患者的血壓達(dá)到對于一般群體視為正常的范圍內(nèi)。在用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療之前，關(guān)于一種或多種血液學(xué)參數(shù)的患者基線值也可以用作用于在用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑治療期間監(jiān)測血液學(xué)參數(shù)的任何變化的相關(guān)比較值。在某些實施方案中，在用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療的患者中測量一種或多種血液學(xué)參數(shù)。血液學(xué)參數(shù)可以用于在治療期間監(jiān)測患者，并允許調(diào)整或終止用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的給藥或用另一種治療劑的另外給藥。例如，如果本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）的施用導(dǎo)致血壓、紅血細(xì)胞水平或血紅蛋白水平中的增加或鐵儲存中的減少，則本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的劑量可以在量或頻率中降低，以便減少本發(fā)明的一種或多種拮抗劑對一種或多種血液學(xué)參數(shù)的作用。如果本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）的施用導(dǎo)致對患者不利的一種或多種血液學(xué)參數(shù)變化，則可以暫時終止本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的給藥，直到血液參數(shù)恢復(fù)到可接受的水平，或永久終止。類似地，如果在降低本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的施用劑量或頻率后，一種或多種血液學(xué)參數(shù)未達(dá)到可接受的范圍內(nèi)，則可以終止給藥。作為降低或終止用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑給藥的替代或補(bǔ)充，患者可以用解決了血液學(xué)參數(shù)中的不期望水平的另外治療劑給藥，所述另外治療劑例如降血壓劑或鐵補(bǔ)充劑。例如，如果待用本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）治療的患者具有升高的血壓，則用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的給藥可以以相同的水平繼續(xù)，并且將降血壓劑加入治療方案中，用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的給藥可以降低（例如在量和/或頻率方面），并且將降血壓劑加入治療方案中，或者可以終止用本發(fā)明的一種或多種拮抗劑的給藥，并且可以用降血壓劑治療患者。6.藥物組合物在某些方面，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）可以單獨或作為藥物制劑（也稱為治療組合物或藥物組合物）的組分施用。藥物形成是指以這樣的形式的制劑，使得允許在其中包含的活性成分（例如本發(fā)明的藥物）的生物活性是有效的，并且不含有對制劑將施用于其的受試者不可接受的毒性的另外組分。主題actrii拮抗劑藥物可以配制用于以任何方便的方式施用用于在人或獸醫(yī)學(xué)中使用。例如，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物可以與藥學(xué)可接受的載體一起配制。藥學(xué)可接受的載體指藥物制劑中除活性成分外的成分，其一般對受試者無毒。藥學(xué)可接受的載體包括但不限于緩沖液、賦形??劑、穩(wěn)定劑和/或防腐劑。一般而言，當(dāng)施用于受試者時，用于在本發(fā)明中使用的藥物制劑是無熱原、生理學(xué)可接受的形式?？梢匀芜x包括在如上所述的制劑中的除本文所述那些外的治療有用藥物可以與本發(fā)明的方法中的主題actrii拮抗劑藥物組合施用。在某些方面，本發(fā)明提供了使用包含actrii拮抗劑和藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物，來治療或預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或治療或預(yù)防一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用包含actrii拮抗劑或actrii拮抗劑組合和藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物，來治療有此需要的受試者中的貧血和/或治療患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了使用包含actrii拮抗劑或actrii拮抗劑組合和藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物，來預(yù)防有此需要的受試者中的貧血和/或預(yù)防患有貧血的受試者中的一種或多種貧血并發(fā)癥包括例如皮膚潰瘍的方法。在前述實施方案的一些中，包含本發(fā)明的actrii拮抗劑或actrii拮抗劑組合和藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物用于治療患有貧血（例如溶血性貧血、血紅蛋白病性貧血、地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）、鐮狀細(xì)胞病等）的受試者（例如患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在前述實施方案的一些中，包含本發(fā)明的actrii拮抗劑或actrii拮抗劑組合和藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物用于預(yù)防患有貧血（例如溶血性貧血、血紅蛋白病性貧血、地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）、鐮狀細(xì)胞病等）的受試者（例如患者）中的潰瘍（例如皮膚潰瘍）。在一些實施方案中，患有貧血的受試者患有鐮狀細(xì)胞病。在一些實施方案中，患有貧血的受試者患有地中海貧血綜合征（例如β地中海貧血綜合征、β中間型地中海貧血等）。在一些實施方案中，患有貧血的受試者患有皮膚潰瘍。在一些實施方案中，皮膚潰瘍是皮膚的潰瘍。在一些實施方案中，潰瘍出現(xiàn)在腿或踝（anke）上。在某些實施方案中，腸胃外施用[例如通過靜脈內(nèi)（i.v.）注射、動脈內(nèi)注射、骨內(nèi)注射、肌內(nèi)注射、鞘內(nèi)注射、皮下注射或皮內(nèi)注射]本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或藥物組合物。適合于腸胃外施用的藥物組合物可以包含本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物，與一種或多種藥學(xué)可接受的無菌等滲水性或非水性溶液、分散體、懸浮液或乳劑或無菌粉末組合，所述無菌粉末可以緊在使用前重構(gòu)成無菌可注射溶液或分散體?？勺⑸淙芤夯蚍稚Ⅲw可以含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、懸浮劑、增稠劑或使制劑與預(yù)期接受者的血液等滲的溶質(zhì)?？梢杂糜诒景l(fā)明的藥物制劑中的合適的水性和非水性載體的例子包括水、乙醇、多元醇（例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等）、植物油（例如橄欖油）、可注射有機(jī)酯（例如油酸乙酯）及其合適的混合物?？梢岳缤ㄟ^使用包衣材料（例如卵磷脂），在分散體的情況下通過維持所需粒度以及通過使用表面活性劑來維持適當(dāng)?shù)牧鲃有?。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或藥物組合物將皮下（例如皮下注射）施用。在某些實施方案中，本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物或藥物組合物將局部施用。在一些實施方案中，本發(fā)明的治療方法包括從植入物或裝置全身或局部地施用本發(fā)明的藥物組合物。進(jìn)一步地，本發(fā)明的藥物組合物可以以用于遞送至靶組織部位（例如骨髓或肌肉）的形式封裝或注射。在某些實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物可以包括能夠?qū)⒈景l(fā)明的藥物中的一種或多種遞送至靶組織部位（例如骨髓或肌肉）的基質(zhì)，提供用于發(fā)育中組織的結(jié)構(gòu)且最佳地能夠被再吸收到身體內(nèi)。例如，基質(zhì)可以提供本發(fā)明的一種或多種藥物的緩釋。此類基質(zhì)可以由目前用于其他植入醫(yī)療應(yīng)用中的材料形成?；|(zhì)材料的選擇可以基于下述中的一種或多種：生物相容性、生物可降解性、機(jī)械性質(zhì)、美容外觀和界面性質(zhì)。主題組合物的特定應(yīng)用將限定適當(dāng)制劑。用于組合物的潛在基質(zhì)可以是生物可降解和化學(xué)成分確定的硫酸鈣、磷酸三鈣、羥磷灰石、聚乳酸和聚酐。其他潛在材料是生物可降解和生物學(xué)定義明確的，包括例如骨或真皮膠原。進(jìn)一步的基質(zhì)由純蛋白或細(xì)胞外基質(zhì)組分組成。其他潛在的基質(zhì)是生物不可降解和化學(xué)成分確定的，包括例如燒結(jié)羥磷灰石、生物玻璃、鋁酸鹽或其他陶瓷。基質(zhì)可以由上述材料類型中的任何的組合組成，包括例如聚乳酸和羥磷灰石或膠原和磷酸三鈣。生物陶瓷可以在組成（例如磷酸鋁酸鈣）和加工中改變，以改變孔徑、粒度、顆粒形狀和生物可降解性中的一種或多種。在某些實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物可以局部施用?！熬植繎?yīng)用”或“局部地”意指藥物組合物與體表包括例如皮膚、傷口部位、潰瘍部位和粘膜的接觸。局部藥物組合物可以具有不同的應(yīng)用形式，并且通常包含含藥物層，其適于在局部施用組合物后置于組織附近或與組織直接接觸。適合于局部施用的藥物組合物可以包含配制為液體、凝膠、乳膏、洗劑、軟膏、泡沫、糊劑、膩子、半固體或固體的本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物（例如gdf-actrii拮抗劑、actriia多肽、actriib多肽、gdf捕獲物等）。以液體、凝膠、乳膏、洗劑、軟膏、泡沫、糊劑或膩子形式的藥物組合物可以通過在靶組織上鋪展、噴霧、涂抹、擦拭或滾動組合物來應(yīng)用。藥物組合物還可以被浸漬到無菌敷料、透皮貼劑、膏藥和繃帶內(nèi)。膩子、半固體或固體形式的藥物組合物可以是可變形的。它們可以是彈性或非彈性的（例如柔性或剛性的）。在某些方面，藥物組合物形成復(fù)合材料的部分，并且可包括具有相同或不同組成的纖維、微?；蚨鄬?。以液體形式的局部組合物可以包括藥學(xué)可接受的溶液、乳劑、微乳劑和懸浮液。除活性成分之外，液體劑型可以含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，包括例如水或其他溶劑、增溶劑和/或乳化劑[例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇或1,3-丁二醇、油（例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油）、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇、脫水山梨糖醇的脂肪酸酯及其混合物]。局部凝膠、乳膏、洗劑、軟膏、半固體或固體組合物可以包括一種或多種增稠劑，例如多糖、合成聚合物或基于蛋白質(zhì)的聚合物。在本發(fā)明的一個實施方案中，本文的膠凝劑是適當(dāng)無毒的并且產(chǎn)生所需粘度的膠凝劑。增稠劑可以包括下述的聚合物、共聚物和單體：乙烯基吡咯烷酮、甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺n-乙烯基咪唑、羧基乙烯基、乙烯酯、乙烯醚、聚硅氧烷、聚環(huán)氧乙烷、聚乙二醇、乙烯醇、丙烯酸鈉、丙烯酸酯、馬來酸、nn-二甲基丙烯酰胺、雙丙酮丙烯酰胺、丙烯酰胺、丙烯酰嗎啉、普朗尼克、膠原、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯、聚乙烯醇、聚亞乙烯基、聚乙烯硅酸鹽、用糖（例如蔗糖、葡萄糖、葡萄糖胺、半乳糖、海藻糖、甘露糖或乳糖）取代的丙烯酸酯、酰基酰胺基丙烷磺酸、四甲氧基正硅酸鹽、甲基三甲氧基正硅酸鹽、四烷氧基正硅酸鹽、三烷氧基正硅酸鹽、二醇、丙二醇、丙三醇、多糖、海藻酸鹽、右旋糖酐、環(huán)糊精、纖維素、改性纖維素、氧化纖維素、殼聚糖、殼多糖、瓜爾膠、角叉菜膠、透明質(zhì)酸、菊粉、淀粉、改性淀粉、瓊脂糖、甲基纖維素、植物樹膠、透明質(zhì)烷（hylaronan）、水凝膠、明膠、糖胺聚糖、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、果膠、低甲氧基果膠、交聯(lián)右旋糖酐、淀粉-丙烯腈接枝共聚物、聚丙烯酸淀粉鈉、甲基丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥乙酯、聚亞乙烯基、聚乙基乙烯基醚、聚甲基丙烯酸甲酯、聚苯乙烯、聚氨基甲酸酯、聚烷酸酯、聚乳酸、聚乳酸酯、聚（3-羥基丁酸酯）、磺化水凝膠、amps（2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙磺酸）、sem（甲基丙烯酸磺基乙酯）、spm（甲基丙烯酸磺丙酯）、spa（丙烯酸磺丙酯）、n,n-二甲基-n-甲基丙烯酰氧基乙基-n-（3-磺丙基）銨甜菜堿、甲基丙烯酰胺基丙基-二甲基銨磺基甜菜堿、spi（衣康酸雙（1-丙基磺酸（sulfonizacid）-3）酯二鉀鹽）、衣康酸、ambc（3-丙烯酰胺基-3-甲基丁酸）、丙烯酸β羧乙酯（丙烯酸二聚體）和馬來酸酐-甲基乙烯醚聚合物、其衍生物、其鹽、其酸及其組合。在某些實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物可以經(jīng)口施用，例如以膠囊、扁囊劑、丸劑、片劑、錠劑（使用調(diào)味基質(zhì)，例如蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠）、粉末、顆粒劑、在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液、水包油或油包水液體乳劑、或酏劑或糖漿、或軟錠劑（使用惰性基質(zhì)，例如明膠和丙三醇、或蔗糖和阿拉伯膠）和/或漱口劑的形式，各自含有預(yù)定量的本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物和任選的一種或多種其他活性成分。本發(fā)明的actrii拮抗劑藥物和任選的一種或多種其他活性成分也可以作為大丸劑、藥糖劑或糊劑施用。在用于經(jīng)口施用的固體劑型（例如膠囊、片劑、丸劑、糖衣丸、粉劑和顆粒劑）中，本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物可以與一種或多種藥學(xué)可接受的載體混合，所述藥學(xué)可接受的載體包括例如檸檬酸鈉、磷酸二鈣、填充劑或膨脹劑（例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸）、粘合劑（例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠）、保濕劑（例如甘油）、崩解劑（例如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、硅酸鹽和碳酸鈉）、溶液阻滯劑（例如石蠟）、吸收促進(jìn)劑（例如季銨化合物）、濕潤劑（例如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯）、吸收劑（例如高嶺土和膨潤土）、潤滑劑（例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉）、著色劑及其混合物。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，藥物制劑（組合物）還可以包含緩沖藥物。相似類型的固體組合物也可以用作使用一種或多種賦形劑（包括例如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇）的軟和硬填充的明膠膠囊中的填充劑。用于本發(fā)明的藥物組合物的經(jīng)口施用的液體劑型可以包括藥學(xué)可接受的乳劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除活性成分之外，液體劑型可以含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，包括例如水或其他溶劑、增溶劑和/或乳化劑[例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇或1,3-丁二醇、油（例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油）、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇、脫水山梨糖醇的脂肪酸酯及其混合物]。除惰性稀釋劑之外，經(jīng)口制劑還可以包括佐劑，包括例如濕潤劑、乳化和懸浮劑、甜味劑、調(diào)味劑、著色劑、芳香劑、防腐劑及其組合。除活性actrii拮抗劑藥物之外，懸浮液還可以含有懸浮劑，包括例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇、脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂-瓊脂、黃蓍膠及其組合?？梢酝ㄟ^包括不同抗細(xì)菌劑和抗真菌劑（包括例如對羥基苯甲酸酯、三氯叔丁醇和苯酚山梨酸）來確保微生物的作用和/或生長的預(yù)防。在某些實施方案中，可能期望在藥物組合物內(nèi)包括等滲劑，包括例如糖或氯化鈉。另外，可注射藥物形式的延長吸收可以通過包括延遲吸收的藥物（包括例如單硬脂酸鋁和明膠）來實現(xiàn)。應(yīng)理解劑量方案將由主治醫(yī)師考慮修飾本發(fā)明的藥物中的一種或多種的作用的不同因素來確定。不同因素包括但不限于患者的紅血細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白水平、所需靶紅血細(xì)胞計數(shù)、患者的年齡、患者的性別、患者的飲食、可能促成抑制的紅血細(xì)胞水平的任何疾病的嚴(yán)重性、施用時間和其他臨床因素。向最終組合物中加入其他已知的活性劑也可以影響劑量。可以通過定期評估紅血細(xì)胞水平、血紅蛋白水平、網(wǎng)織紅細(xì)胞水平和造血過程的其他指示劑中的一種或多種來監(jiān)測進(jìn)展。在某些實施方案中，本發(fā)明還提供了用于體內(nèi)產(chǎn)生本發(fā)明的一種或多種actrii拮抗劑藥物的基因療法。此類療法將通過將藥物序列引入細(xì)胞或組織內(nèi)來實現(xiàn)其療效，所述細(xì)胞或組織具有如上文列出的病癥中的一種或多種?？梢岳缤ㄟ^使用重組表達(dá)載體例如嵌合病毒或膠體分散系統(tǒng)來實現(xiàn)藥物序列的遞送。在一些實施方案中，本發(fā)明的藥物序列中的一種或多種的治療遞送是使用靶向脂質(zhì)體?？梢杂糜谌绫疚慕虒?dǎo)的基因療法的不同病毒載體包括腺病毒、皰疹病毒、牛痘病毒或rna病毒（例如逆轉(zhuǎn)錄病毒）。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以是鼠或禽逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生物。單個外源基因可以插入其中的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的例子包括但不限于：莫洛尼鼠白血病病毒（momulv）、哈維鼠肉瘤病毒（hamusv）、鼠乳腺腫瘤病毒（mumtv）和勞斯肉瘤病毒（rsv）。許多另外的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以摻入多重基因。所有這些載體均可轉(zhuǎn)移或摻入關(guān)于可選擇標(biāo)記物的基因，使得可以鑒定且生成轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞。通過附著例如糖、糖脂或蛋白質(zhì)，可以使逆轉(zhuǎn)錄病毒載體成為靶特異性的。在一些實施方案中，靶向通過使用抗體來實現(xiàn)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，特異性多核苷酸序列可以插入逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組內(nèi)或附著至病毒包膜，以允許靶向特異性遞送含有本發(fā)明的藥物中的一種或多種的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。可替代地，可以通過常規(guī)的磷酸鈣轉(zhuǎn)染，用編碼逆轉(zhuǎn)錄病毒結(jié)構(gòu)基因（gag、pol和env）的質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)染組織培養(yǎng)細(xì)胞。隨后用含有目的基因的載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染這些細(xì)胞。所得到的細(xì)胞將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體釋放到培養(yǎng)基內(nèi)。用于本發(fā)明的藥物中的一種或多種的另一種靶向遞送系統(tǒng)是膠體分散系統(tǒng)。膠體分散系統(tǒng)包括例如大分子復(fù)合物、納米膠囊、微球體、珠和基于脂質(zhì)的系統(tǒng)，包括水包油乳劑、膠束、混合膠束和脂質(zhì)體。在某些實施方案中，本發(fā)明的膠體系統(tǒng)是脂質(zhì)體。脂質(zhì)體是可用作體外和體內(nèi)遞送媒介物的人工膜囊泡。rna、dna和完整病毒例子可以封裝在水性內(nèi)部中，并以生物活性形式遞送至細(xì)胞。參見例如fraley等人（1981）trendsbiochem.sci.，6:77。關(guān)于使用脂質(zhì)體媒介物的有效基因轉(zhuǎn)移的方法是本領(lǐng)域已知的。參見例如mannino等人（1988）biotechniques，6:682，1988。脂質(zhì)體的組成通常是磷脂的組合，其可以包括類固醇（例如膽固醇）。脂質(zhì)體的物理特征取決于ph、離子強(qiáng)度和二價陽離子的存在。也可以使用其他磷脂或其他脂質(zhì)，包括例如磷脂?；衔铮ɡ缌字８视?、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰乙醇胺、鞘脂、腦苷脂和神經(jīng)節(jié)苷脂）、卵磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿和二硬脂酰磷脂酰膽堿?；诶缙鞴偬禺愋浴⒓?xì)胞特異性和細(xì)胞器特異性，脂質(zhì)體的靶向也是可能的，并且是本領(lǐng)域已知的。范例現(xiàn)在對本發(fā)明進(jìn)行一般性描述，通過參考下述實施例它將更易于理解，所述實施例僅為了舉例說明本發(fā)明的某些實施方案和實施方案的目的而包括的，而不意圖限制本發(fā)明。實施例1：actriia-fc融合蛋白申請人構(gòu)建了可溶性actriia融合蛋白，其具有與人或小鼠fc結(jié)構(gòu)域融合的人actriia的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域，其間具有最低限度接頭。構(gòu)建體分別被稱為actriia-hfc和actriia-mfc。actriia-hfc在下文顯示為由cho細(xì)胞系純化（加下劃線的fc部分）（seqidno:22）：actriia-hfc和actriia-mfc蛋白在cho細(xì)胞系中表達(dá)?？紤]了三種不同的前導(dǎo)序列：（i）蜜蜂蜂毒素（hbml）：mkflvnvalvfmvvyisyiya（seqidno:23）（ii）組織纖溶酶原激活劑（tpa）：mdamkrglccvlllcgavfvsp（seqidno:24）（iii）天然的：mgaaaklafavfliscssga（seqidno:25）。所選形式采用tpa前導(dǎo)區(qū)并具有下述未經(jīng)加工的氨基酸序列：。該多肽由下述核酸序列編碼：。actriia-hfc和actriia-mfc兩者均顯著順應(yīng)重組表達(dá)。如圖3a和3b中所示，將蛋白質(zhì)純化為單一的明確限定的蛋白質(zhì)峰。n末端測序揭示ilgrsetqe（seqidno:34）的單一序列。純化可以通過一系列柱層析步驟來實現(xiàn)，包括例如以任何次序的下述中的三種或更多種：蛋白a層析、q瓊脂糖層析、苯基瓊脂糖層析、尺寸排阻層析和陽離子交換層析。純化可以用病毒過濾和緩沖液交換來完成。將actriia-hfc蛋白純化至如通過尺寸排阻層析測定的>98%的純度，以及如通過sdspage測定的>95%的純度。actriia-hfc和actriia-mfc顯示對于配體特別是激活素a的高親和力。使用標(biāo)準(zhǔn)胺偶聯(lián)程序，將gdf-11或激活素a固定在biacore?cm5芯片上。將actriia-hfc和actriia-mfc蛋白裝載到系統(tǒng)上，并測量結(jié)合。actriia-hfc以5x10-12的解離常數(shù)（kd）結(jié)合激活素，并以9.96x10-9的kd結(jié)合gdf11。參見圖4a和4b。actriia-mfc表現(xiàn)類似。actriia-hfc在藥物代謝動力學(xué)研究中非常穩(wěn)定。大鼠用1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg的actriia-hfc蛋白給藥，并在24，48，72，144和168小時測量蛋白質(zhì)的血漿水平。在分開的研究中，大鼠以1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg給藥。在大鼠中，actriia-hfc具有11-14天的血清半衰期，并且藥物的循環(huán)水平在兩周后相當(dāng)高（對于1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的初始施用，分別為11μg/ml、110μg/ml或304μg/ml）。在食蟹猴中，血漿半衰期基本上大于14天，并且藥物的循環(huán)水平對于1mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的初始施用，分別為25μg/ml、304μg/ml或1440μg/ml。實施例2：actriia-hfc蛋白的表征使用seqidno:24的組織纖溶酶原前導(dǎo)序列，在由paid4載體（sv40ori/增強(qiáng)子、cmv啟動子）穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的cho-dukxb11細(xì)胞中表達(dá)actriia-hfc融合蛋白。如上文實施例1中所述純化的蛋白質(zhì)具有seqidno:22的序列。fc部分是人igg1fc序列，如seqidno:22中所示。蛋白質(zhì)分析揭示actriia-hfc融合蛋白形成為具有二硫鍵合的同二聚體。實施例3.actriia-hfc增加非人靈長類動物中的紅血細(xì)胞水平研究采用各5只雄性和5只雌性食蟹猴的四組，其中每組每性別三只預(yù)定在第29天時終止，并且每組每性別兩只預(yù)定在第57天時終止。經(jīng)由在第1、8、15和22天時的靜脈內(nèi)（iv）注射，每只動物施用媒介物（組i）或以1、10或30mg/kg劑量（分別為組2、3和4）的actriia-fc。劑量體積維持在3ml/kg。在第一次施用前兩天以及在第一次施用后第15、29和57天（對于剩余的兩只動物），評價紅血細(xì)胞水平的不同測量。在研究自始至終的所有劑量水平和時間點，actriia-hfc引起關(guān)于雄性和雌性的平均紅血細(xì)胞參數(shù)[紅血細(xì)胞計數(shù)（rbc、血紅蛋白（hgb）和血細(xì)胞比容（hct）]中的統(tǒng)計學(xué)顯著的增加，伴隨絕對和相對網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)（artc；rtc）中的升高。參見圖5-8。相對于在基線時關(guān)于處理組的平均值，對于每個處理組計算統(tǒng)計顯著性。值得注意的是，紅血細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白水平的增加在量級中與由促紅細(xì)胞生成素報道的效應(yīng)大致相等。這些效應(yīng)的發(fā)作對于actriia-fc比促紅細(xì)胞生成素更快。用大鼠和小鼠觀察到類似的結(jié)果。實施例4：actriia-hfc增加人患者中的紅血細(xì)胞水平和骨形成的標(biāo)記物實施例1中所述的actriia-hfc融合蛋白在隨機(jī)化、雙盲、安慰劑對照研究中施用于人患者，進(jìn)行該研究主要用于評估該蛋白質(zhì)在健康的絕經(jīng)后婦女中的安全性。四十八名受試者以6個隊列隨機(jī)化，以接受單一劑量的actriia-hfc或安慰劑（5個活性：1個安慰劑）。劑量水平范圍為靜脈內(nèi)（iv）0.01至3.0mg/kg，以及皮下（sc）0.03至0.1mg/kg。所有受試者隨訪120天。除藥物代謝動力學(xué)（pk）分析之外，還通過測量骨形成和再吸收的生化標(biāo)記物以及fsh水平來評價actriia-hfc的生物活性。為了尋找潛在的變化，在研究過程中對于所有受試者詳細(xì)檢查血紅蛋白和rbc數(shù)目，并與基線水平進(jìn)行比較。血小板計數(shù)經(jīng)過與對照相同的時間進(jìn)行比較。對于血小板計數(shù)，隨著時間過去不存在與基線值的臨床顯著變化。actriia-hfc的pk分析揭示隨著劑量的線性概況，以及大約25-32天的平均半衰期。關(guān)于actriia-hfc的曲線下面積（auc）與劑量線性相關(guān)，并且在sc給藥后的吸收基本上完全。參見圖9和10。這些數(shù)據(jù)指示sc是期望的給藥方法，因為它提供了關(guān)于藥物的等效生物利用度和血清半衰期，同時避免了與iv給藥的最初幾天相關(guān)的藥物的血清濃度中的尖峰。參見圖10。actriia-hfc引起骨特異性堿性磷酸酶（bap）（其是合成代謝性骨生長的標(biāo)記物）的血清水平中的快速、持續(xù)的劑量依賴性增加，以及c末端1型膠原端肽和酒石酸鹽抗性酸性磷酸酶5b水平（其是骨吸收的標(biāo)記物）中的劑量依賴性減少。其他標(biāo)記物例如p1np顯示不確定的結(jié)果。bap水平在藥物的最高劑量下顯示接近飽和的效應(yīng)，指示在0.3mg/kg的劑量下可以達(dá)到對這種合成代謝性骨生物標(biāo)記物的半最大效應(yīng)，其中增加范圍高達(dá)3mg/kg。計算為關(guān)于藥物的藥效學(xué)效應(yīng)與auc的關(guān)系，ec50為51,465（天*ng/ml）。參見圖11。這些骨生物標(biāo)記物變化在所測試的最高劑量水平下持續(xù)大約120天。還存在與激活素的抑制一致的血清fsh水平中的劑量依賴性減少。總之，經(jīng)過研究的第一周，血紅蛋白中的極小的非藥物相關(guān)的降低很可能與0.01和0.03mg/kg組中的研究靜脈切開術(shù)有關(guān)，無論是iv還是sc給予。0.1mg/kgsc和iv血紅蛋白結(jié)果到第8-15天時是穩(wěn)定的或顯示適度的增加。在0.3mg/kgiv劑量水平下，早在第2天時可見hgb水平中的明確增加，并且經(jīng)常在第15-29天時達(dá)到峰值，這在安慰劑治療的受試者中沒有看到。在1.0mg/kgiv劑量和3.0mg/kgiv劑量下，響應(yīng)單一劑量觀察到大于1g/dl的血紅蛋白中的平均增加，伴隨rbc計數(shù)和血細(xì)胞比容中的相應(yīng)增加。這些血液學(xué)參數(shù)在劑量后約60天時達(dá)到峰值，并到第120天時基本上減少。這指示如果以小于120天的間隔完成（即在恢復(fù)到基線之前），則用于增加紅血細(xì)胞水平目的的給藥可能更有效，其中90天或更短或60天或更短的給藥間隔可能是期望的。對于血液學(xué)變化的概括，參見圖12-15。總之，actriia-hfc顯示對紅血細(xì)胞計數(shù)和網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的劑量依賴性作用。實施例5：用actriia-hfc治療貧血患者設(shè)計了臨床研究，以0.1mg/kg、0.3mg/kg和1.0mg/kg的30個劑量水平，用actriia-hfc的多重劑量治療患者，其中給藥每三十天發(fā)生。試驗中的正常健康患者顯示出血紅蛋白和血細(xì)胞比容中的增加，這與實施例4中報道的i期臨床試驗中可見的增加一致，除了在一些情況下之外，血紅蛋白（hg）和血細(xì)胞比容（hct）升高超出正常范圍。具有大約7.5g/dl血紅蛋白水平的貧血患者也接受以1mg/kg水平的兩個劑量，導(dǎo)致在兩個月后大約10.5g/dl的血紅蛋白水平?；颊叩呢氀切〖t細(xì)胞性貧血，被認(rèn)為由慢性鐵缺乏癥引起。已進(jìn)一步證明actriia-fc融合蛋白在增加不同貧血模型中的紅血細(xì)胞水平中是有效的，包括例如化學(xué)療法誘導(dǎo)的貧血和與慢性腎疾病相關(guān)的貧血。參見例如美國專利申請公開號2010/0028331。實施例6：可替代的actriia-fc蛋白可以根據(jù)本文所述的方法使用的各種actriia變體在作為wo2006/012627（參見例如第59-60頁）公開的國際專利申請中描述，所述專利通過引用整體并入本文?？商娲鷺?gòu)建體可以具有c末端尾部（actriia的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的最后15個氨基酸）的缺失。關(guān)于此類構(gòu)建體的序列在下文呈現(xiàn)（fc部分加下劃線）（seqidno:28）：實施例7：actriib-fc融合蛋白的生成申請人構(gòu)建了可溶性actriib融合蛋白，其具有與人或小鼠fc結(jié)構(gòu)域融合的人actriib的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域，其間具有最低限度接頭（三個甘氨酸氨基酸）。構(gòu)建體分別被稱為actriib-hfc和actriib-mfc。actriib-hfc在下文顯示為由cho細(xì)胞系純化（seqidno:29）actriib-hfc和actriib-mfc蛋白在cho細(xì)胞系中表達(dá)?？紤]了三種不同的前導(dǎo)序列：（i）蜜蜂蜂毒素（hbml）：mkflvnvalvfmvvyisyiya（seqidno:23）（ii）組織纖溶酶原激活劑（tpa）：mdamkrglccvlllcgavfvsp（seqidno:24）（iii）天然的：mgaaaklafavfliscssga（seqidno:30）。所選形式采用tpa前導(dǎo)區(qū)并具有下述未經(jīng)加工的氨基酸序列（seqidno:31）：該多肽由下述核酸序列（seqidno:32）編碼：cho細(xì)胞產(chǎn)生的材料的n末端測序揭示-grgeae（seqidno:33）的主要多肽序列。值得注意的是，文獻(xiàn)中報道的其他構(gòu)建體以-sgr...序列開始。純化可以通過一系列柱層析步驟來實現(xiàn)，包括例如以任何次序的下述中的三種或更多種：蛋白a層析、q瓊脂糖層析、苯基瓊脂糖層析、尺寸排阻層析和陽離子交換層析。純化可以用病毒過濾和緩沖液交換來完成。actriib-fc融合蛋白也在hek293細(xì)胞和cos細(xì)胞中表達(dá)。盡管來自所有細(xì)胞系和合理的培養(yǎng)條件的材料在體內(nèi)提供具有肌肉構(gòu)建活性的蛋白質(zhì)，但觀察到效力的可變性，可能與細(xì)胞系選擇和/或培養(yǎng)條件有關(guān)。申請人在actriib的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域中生成一系列突變，并產(chǎn)生這些突變蛋白作為細(xì)胞外actriib和fc結(jié)構(gòu)域之間的可溶性融合蛋白。本底actriib-fc融合物具有seqidno:29的序列。將不同突變（包括n端和c端截短）引入本底actriib-fc蛋白內(nèi)。基于實施例1中呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)，預(yù)期這些構(gòu)建體如果用tpa前導(dǎo)區(qū)表達(dá)，則缺乏n末端絲氨酸。通過pcr誘變在actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域中生成突變。在pcr后，片段通過qiagen柱純化，用sfoi和agei消化并凝膠純化。將這些片段連接到表達(dá)載體paid4（參見wo2006/012627）內(nèi)，使得在連接后，它產(chǎn)生具有人igg1的融合嵌合體。在轉(zhuǎn)化到大腸桿菌dh5α內(nèi)之后，挑取菌落并分離dna。對于鼠構(gòu)建體（mfc），用鼠igg2a取代人igg1。驗證所有突變體的序列。所有突變體通過瞬時轉(zhuǎn)染在hek293t細(xì)胞中產(chǎn)生。總的來說，在500ml旋轉(zhuǎn)器中，將hek293t細(xì)胞以6x105細(xì)胞/ml設(shè)置在250ml體積的freestyle（invitrogen）培養(yǎng)基中，并生長過夜。第二天，這些細(xì)胞用以0.5ug/ml最終dna濃度的dna:pei（1:1）復(fù)合物進(jìn)行處理。在4小時后，加入250ml培養(yǎng)基，并且使細(xì)胞生長7天。通過將細(xì)胞向下旋轉(zhuǎn)來收獲并濃縮條件培養(yǎng)基。突變體使用各種技術(shù)包括例如蛋白a柱進(jìn)行純化，并用低ph（3.0）甘氨酸緩沖液進(jìn)行洗脫。在中和后，這些針對pbs進(jìn)行透析。還通過類似的方法在cho細(xì)胞中產(chǎn)生突變體。在通過引用并入本文的wo2008/097541和wo2006/012627中描述的結(jié)合測定和/或生物測定中測試突變體。在一些情況下，用條件培養(yǎng)基而不是純化的蛋白質(zhì)執(zhí)行測定。actriib的另外變異在美國專利號7,842,663中描述。實施例8：actriib-fc刺激非人靈長類動物中的紅細(xì)胞生成將食蟹猴分成七組（6只/性別/組），并且經(jīng)過9周時期，每2周或每4周以0.6、3或15mg/kg的劑量作為皮下注射施用actriib（20-134）-hfc。對照組（6只/性別/組）接受以與actriib（20-134）-hfc處理的動物相同劑量體積（0.5ml/kg/劑量）的媒介物。監(jiān)測動物的一般臨床病理學(xué)參數(shù)（例如血液學(xué)、臨床化學(xué)、凝血和尿分析）的變化。在給藥起始前以及在第59、143、199、227天和在第267天（對于每4周給藥的組）或第281天（對于每2周給藥的組）時評估血液學(xué)、凝血和臨床化學(xué)參數(shù)（包括鐵參數(shù)、脂肪酶和淀粉酶）兩次。在第267/281天時的評估在施用最終劑量后2周發(fā)生。actriib（20-134）-hfc的施用導(dǎo)致雄性和雌性猴中的血液學(xué)參數(shù)的非不利的劑量相關(guān)變化。這些變化包括增加的紅血細(xì)胞計數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)和紅血細(xì)胞分布寬度，以及減少的平均紅細(xì)胞容積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白和血小板計數(shù)。在雄性中，rbc計數(shù)在所有劑量水平下均增加，并且增加的量級一般是可比較的，無論actriib（20-134）-hfc是每2周還是每4周施用。在第59天和第267/281天之間的所有時間點，平均rbc計數(shù)增加（除了在第281天時組2雄性[每2周0.6mg/kg]中的rbc計數(shù)未增加之外）。在雌性中，rbc計數(shù)每2周在≥3mg/kg時增加，并且在第143天和第281天之間出現(xiàn)變化；每4周在15mg/kg時，在第59天和第267天之間平均rbc計數(shù)增加。這些效應(yīng)與actriib（20-134）-hfc對刺激紅細(xì)胞生成的正面作用一致。實施例9：gdf捕獲物的生成申請人構(gòu)建了如下的gdf捕獲物。相對于gdf11和/或肌肉生長抑制素具有極大降低的激活素a結(jié)合（由于在seqidno:1中的位置79處的亮氨酸至天冬氨酸鹽取代）的actriib的經(jīng)修飾的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（seqidno:1的氨基酸20-134，具有l(wèi)79d置換）的多肽與人或小鼠fc結(jié)構(gòu)域融合，其間具有最低限度接頭（三個甘氨酸氨基酸）。構(gòu)建體分別被稱為actriib（l79d20-134）-hfc和actriib（l79d20-134）-mfc。類似地執(zhí)行在位置79處具有谷氨酸鹽而不是天冬氨酸鹽的替代形式（l79e）。還生成了就seqidno:36而言在位置226處具有丙氨酸而不是纈氨酸的替代形式，并且在所有測試方面等價地執(zhí)行。在位置79（相對于seqidno:1，或相對于seqidno:36的位置60）處的天冬氨酸鹽用下文的加雙下劃線指示。在相對于seqidno:36的位置226處的纈氨酸也用下文的加雙下劃線指示。gdf捕獲物actriib（l79d20-134）-hfc在下文顯示為由cho細(xì)胞系純化（seqidno:36）。gdf捕獲物的actriib衍生部分具有下文所示的氨基酸序列（seqidno:37），并且該部分可以用作單體或非fc融合蛋白作為單體、二聚體或更高級復(fù)合物。gdf捕獲物蛋白在cho細(xì)胞系中表達(dá)。考慮了三種不同的前導(dǎo)序列：（i）蜜蜂蜂毒素（hbml）：mkflvnvalvfmvvyisyiya（seqidno:23）（ii）組織纖溶酶原激活劑（tpa）：mdamkrglccvlllcgavfvsp（seqidno:24）（iii）天然的：mtapwvalallwgslcags（seqidno:30）。所選形式采用tpa前導(dǎo)區(qū)并具有下述未經(jīng)加工的氨基酸序列：該多肽由下述核酸序列（seqidno:39）編碼：純化可以通過一系列柱層析步驟來實現(xiàn)，包括例如以任何次序的下述中的三種或更多種：蛋白a層析、q瓊脂糖層析、苯基瓊脂糖層析、尺寸排阻層析和陽離子交換層析。純化可以用病毒過濾和緩沖液交換來完成。在純化方案的例子中，使細(xì)胞培養(yǎng)基通過蛋白a柱，在150mmtris/nacl（ph8.0）中洗滌，隨后在50mmtris/nacl（ph8.0）中洗滌，并用0.1m甘氨酸，ph3.0洗脫。將低ph洗脫液在室溫下保持30分鐘作為病毒清除步驟。隨后將洗脫液中和并通過q瓊脂糖離子交換柱，并且在50mmtrisph8.0，50mmnacl中洗滌，并在50mmtrisph8.0中洗脫，其中nacl濃度在150mm和300mm之間。隨后將洗脫液變成50mmtrisph8.0，1.1m硫酸銨，并通過苯基瓊脂糖柱，洗滌，并在具有150至300mm的硫酸銨的50mmtrisph8.0中洗脫。將洗脫液透析并過濾用于使用。在通過引用并入本文的wo2008/097541和wo2006/012627中描述了另外的gdf捕獲物（actriib-fc融合蛋白，其被這樣修飾以便降低激活素a結(jié)合相對于肌肉生長抑制素或gdf11結(jié)合的比率）。實施例10：用于gdf-11和激活素介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)的生物測定a-204報道基因測定用于評估actriib-fc蛋白和gdf捕獲物對通過gdf-11和激活素a的信號傳導(dǎo)的作用。細(xì)胞系：人橫紋肌肉瘤（衍生自肌肉）。報道載體：pgl3（caga）12（在dennler等人，1998，embo17：3091-3100中描述）。caga12基序存在于tgf-β響應(yīng)基因（例如pai-1基因）中，因此該載體一般用于通過smad2和3的信號傳導(dǎo)因子。第1天：將a-204細(xì)胞拆分到48孔板內(nèi)。第2天：用10ugpgl3（caga）12或pgl3（caga）12（10ug）+prlcmv（1μg）和fugene轉(zhuǎn)染a-204細(xì)胞。第3天：加入因子（稀釋到培養(yǎng)基+0.1%bsa內(nèi)）。在加入細(xì)胞之前，抑制劑需要與因子預(yù)溫育1小時。六小時后，細(xì)胞用pbs漂洗并裂解。這隨后為螢光素酶測定。在不存在任何抑制劑的情況下，激活素a顯示報道基因表達(dá)的10倍刺激和ed50~2ng/ml。gdf-11：16倍刺激，ed50：~1.5ng/ml。在該測定中，actriib（20-134）是激活素a、gdf-8和gdf-11活性的有力抑制劑。如下文描述的，在該測定中還測試了actriib變體。實施例11：actriib-fc變體，基于細(xì)胞的活性如上文描述的，在基于細(xì)胞的測定中測試actriib-fc蛋白和gdf捕獲物的活性。結(jié)果在下表中概括。在不同的c末端截短構(gòu)建體中測試了一些變體。如上文討論的，五個或十五個氨基酸的截短引起活性降低。gdf捕獲物（l79d和l79e變體）顯示激活素a抑制的大量損失，同時保留gdf-11的幾乎野生型抑制?？扇苄詀ctriib-fc與gdf11和激活素a的結(jié)合：+弱活性（大致1x10-6ki）++中等活性（大致1x10-7ki）+++良好（野生型）活性（大致1x10-8ki）++++大于野生型活性。已評估了幾種變體在大鼠中的血清半衰期。actriib（20-134）-fc具有大約70小時的血清半衰期。actriib（a24n20-134）-fc具有大約100-150小時的血清半衰期。a24n變體在基于細(xì)胞的測定（上文）和體內(nèi)測定（下文）中具有等價于野生型分子的活性。與更長的半衰期偶聯(lián)，這意味著隨著時間過去，a24n變體將給予比野生型分子更大的效應(yīng)/單位蛋白質(zhì)。a24n變體和上文測試的其他變體中的任何可以與gdf捕獲物分子例如l79d或l79e變體組合。實施例12：gdf-11和激活素a結(jié)合在biacoretm測定中測試某些actriib-fc蛋白和gdf捕獲物與配體的結(jié)合。使用抗hfc抗體將actriib-fc變體或野生型蛋白捕獲到系統(tǒng)上。配體被注射并流經(jīng)捕獲的受體蛋白。結(jié)果在下表中概括。配體結(jié)合特異性iib變體。從無細(xì)胞測定獲得的這些數(shù)據(jù)證實基于細(xì)胞的測定數(shù)據(jù)，證明a24n變體保留與actriib（20-134）-hfc分子的那種類似的配體結(jié)合活性，并且l79d或l79e分子保留肌肉生長抑制素和gdf11結(jié)合，但顯示顯著減少的（不可定量的）與激活素a的結(jié)合。已生成并測試了其他變體，如wo2006/012627（通過引用整體并入本文）中報道的。參見例如第59-60頁，使用與裝置偶聯(lián)的配體和使受體流動經(jīng)過偶聯(lián)的配體。值得注意的是，相對于野生型k74分子，k74y、k74f、k74i（以及在k74處的可能的其他疏水取代，例如k74l）和d80i引起激活素a（acta）與gdf11結(jié)合的比率中的減少。就這些變體而言的數(shù)據(jù)表在下文再現(xiàn)：與gdf11和激活素a結(jié)合的可溶性actriib-fc變體（biacore測定）*未觀察到結(jié)合--<1/5wt結(jié)合-~1/2wt結(jié)合+wt++<2x增加的結(jié)合+++~5x增加的結(jié)合++++~10x增加的結(jié)合+++++~40x增加的結(jié)合。實施例13：gdf捕獲物在體內(nèi)增加紅血細(xì)胞水平將十二周齡的雄性c57bl/6ntac小鼠分配到兩個治療組之一（n=10）。通過以10mg/kg每周兩次的皮下注射（sc），用媒介物或變體actriib多肽（“gdf捕獲物”）[actriib（l79d20-134）-hfc]向小鼠給藥4周。在研究終止時，通過心臟穿刺將全血收集到含有edta的試管中，并使用hm2血液分析儀（abaxis，inc）分析細(xì)胞分布。組指定組n小鼠注射劑量（mg/kg）途徑頻率110c57bl/6pbs0sc兩次/周210c57bl/6gdf捕獲物[actriib（l79d20-134）-hfc]10sc兩次/周與媒介物對照相比較，使用gdf捕獲物的處理對白血細(xì)胞（wbc）的數(shù)目沒有統(tǒng)計學(xué)顯著的作用。相對于對照，紅血細(xì)胞（rbc）數(shù)目在處理組中增加（參見下表）。由于另外的紅血細(xì)胞，血紅蛋白含量（hgb）和血細(xì)胞比容（hct）兩者也增加。紅血細(xì)胞的平均寬度（rdwc）在處理的動物中較高，指示未成熟紅血細(xì)胞庫中的增加。因此，用gdf捕獲物的處理導(dǎo)致紅血細(xì)胞增加，對白血細(xì)胞群體沒有可區(qū)別的作用。血液學(xué)結(jié)果*=p<0.05，**=p<0.01。實施例14：對于增加體內(nèi)的紅血細(xì)胞水平gdf捕獲物優(yōu)于actriib-fc。將十九周齡的雄性c57bl/6ntac小鼠隨機(jī)分配到三個組之一。通過每周兩次共三周的皮下注射，用媒介物（10mmtris緩沖鹽水，tbs）、野生型actriib（20-134）-mfc或gdf捕獲物actriib（l79d20-134）-hfc向小鼠給藥。在基線和給藥三周后收集面頰出血，并使用血液分析儀（hm2，abaxis，inc.）分析細(xì)胞分布。與載體對照相比較，用actriib-fc或gdf捕獲物的處理對白血細(xì)胞（wbc）數(shù)目沒有顯著作用。與對照或野生型構(gòu)建體相比較，紅血細(xì)胞計數(shù)（rbc）、血細(xì)胞比容（hct）和血紅蛋白水平在用gdf捕獲物處理的小鼠中都升高（參見下表）。因此，在直接比較中，gdf捕獲物促進(jìn)紅血細(xì)胞增加至明顯大于野生型actriib-fc蛋白的程度。事實上，在該實驗中，野生型actriib-fc蛋白質(zhì)不引起紅血細(xì)胞中的統(tǒng)計學(xué)顯著的增加，提示需要更長或更高的劑量來揭示這種效應(yīng)。給藥三周后的血液學(xué)結(jié)果**=p<0.01。實施例15：具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物的生成如實施例9中所述，通過tpa前導(dǎo)區(qū)與含有亮氨酸至天冬氨酸鹽取代（seqidno:1中的殘基79處）的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（seqidno:1中的殘基20-134）的n末端融合，以及具有最低限度接頭（三個甘氨酸殘基）的人fc結(jié)構(gòu)域的c端融合，來生成稱為actriib（l79d20-134）-hfc的gdf捕獲物（圖16）。對應(yīng)于該融合蛋白的核苷酸序列顯示于圖17a和17b中。通過tpa前導(dǎo)區(qū)與含有亮氨酸至天冬氨酸鹽取代（seqidno:1中的殘基79處）的截短的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（seqidno:1中的殘基25-131）的n末端融合，以及具有最低限度接頭（三個甘氨酸殘基）的人fc結(jié)構(gòu)域的c端融合，來生成稱為actriib（l79d25-131）-hfc的具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物（圖18）。對應(yīng)于該融合蛋白的核苷酸序列顯示于圖19a和19b中。實施例16：通過具有雙重截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物的選擇性配體結(jié)合用biacore?儀器在體外評估gdf捕獲物和其他actriib-hfc蛋白對于幾種配體的親和力。結(jié)果在下表中概括。由于復(fù)合物的非?？焖俚慕Y(jié)合和解離，通過穩(wěn)態(tài)親和力擬合獲得kd值，這阻止了kon和koff的準(zhǔn)確測定。actriib-hfc變體的配體選擇性：融合構(gòu)建體激活素a（kde-11）激活素b（kde-11）gdf11（kde-11）actriib（l7920-134）-hfc1.61.23.6actriib（l79d20-134）-hfc1350.078.812.3actriib（l7925-131）-hfc1.81.23.1actriib（l79d25-131）-hfc2290.062.17.4具有截短的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物，actriib（l79d25-131）-hfc，等于或超過由較長變體actriib（l79d20-134）-hfc展示的配體選擇性，與缺乏l79d替代的actriib-hfc配對物相比較，具有激活素a結(jié)合的顯著喪失、激活素b結(jié)合的部分喪失以及gdf11結(jié)合的幾乎完全保留。注意到單獨的截短（不含l79d取代）不改變此處展示的配體中的選擇性[比較actriib（l7925-131）-hfc與actriib（l7920-134）-hfc]。實施例17：用可替代核苷酸序列生成actriib（l79d25-131）-hfc為了生成actriib（l79d25-131）-hfc，在天然位置79（seqidno:1）處具有天冬氨酸鹽取代以及具有n末端和c末端截短（seqidno:1中的殘基25-131）的人actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域與tpa前導(dǎo)序列而不是天然actriib前導(dǎo)區(qū)n末端融合，并經(jīng)由最低限度接頭（三個甘氨酸殘基）與人fc結(jié)構(gòu)域c末端融合（圖18）。編碼該融合蛋白的一個核苷酸序列顯示于圖19（seqidno:42）中，并且編碼完全相同的融合蛋白的可替代核苷酸序列顯示于圖22a和22b（seqidno:46）中。使用實施例9中所述的方法表達(dá)且純化該蛋白質(zhì)。實施例18：具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物增加小鼠中的紅系祖細(xì)胞的增殖評估actriib（l79d25-131）-hfc以測定其對紅系祖細(xì)胞增殖的作用。在第1天和第4天時，用actriib（l79d25-131）-hfc（10mg/kg，sc；n=6）或媒介物（tbs；n=6）處理雄性c57bl/6小鼠，并且隨后在第8天時實施安樂死，用于收集脾、脛骨、股骨和血液。分離脾和骨髓的細(xì)胞，在含有5%胎牛血清的iscove改良的達(dá)爾貝科培養(yǎng)基中稀釋，懸浮于專門的基于甲基纖維素的培養(yǎng)基中，并且培養(yǎng)2或12天，以評價在集落形成單位紅細(xì)胞（cfu-e）和爆發(fā)形成單位紅細(xì)胞（bfu-e）階段時的克隆形成祖細(xì)胞水平。用于bfu-e測定的基于甲基纖維素的培養(yǎng)基（methocultm3434，stemcelltechnologies）包括重組鼠干細(xì)胞因子、白細(xì)胞介素-3和白細(xì)胞介素-6，其不存在于用于cfu-e測定的甲基纖維素培養(yǎng)基（methocultm3334，celltechnologies）中，而在其他組成成分中，這兩種培養(yǎng)基均含有促紅細(xì)胞生成素。對于bfu-e和cfu-e，在衍生自每個組織樣品的一式兩份的培養(yǎng)板中測定集落數(shù)目，并且結(jié)果的統(tǒng)計分析基于每個處理組的小鼠數(shù)目。來自用actriib（l79d25-131）-hfc處理的小鼠的脾衍生培養(yǎng)物具有來自對照小鼠的相應(yīng)培養(yǎng)物的cfu-e集落數(shù)目的兩倍（p<0.05），而bfu-e集落數(shù)目對于體內(nèi)處理并無顯著不同。來自骨髓培養(yǎng)物的cfu-e或bfu-e集落數(shù)目與治療也沒有顯著不同。如預(yù)期的，與對照相比較，在用actriib（l79d25-131）-hfc處理的小鼠中在安樂死時，脾衍生的培養(yǎng)物中的cfu-e集落數(shù)目的增加伴隨紅血細(xì)胞水平（11.6%增加）、血紅蛋白濃度（12%增加）和血細(xì)胞比容水平（11.6%增加）中高度顯著的變化（p<0.001）。這些結(jié)果指示具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物的體內(nèi)施用可以刺激紅系祖細(xì)胞的增殖，作為其增加紅血細(xì)胞水平的總體效應(yīng)的部分。已進(jìn)一步證明gdf捕獲物融合蛋白在增加不同貧血模型中的紅血細(xì)胞水平中是有效的，包括例如化學(xué)療法誘導(dǎo)的貧血、腎切除術(shù)誘導(dǎo)的貧血和失血性貧血。參見例如國際專利申請公開號wo2010/019261。實施例19：具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物增加非人靈長類動物中的紅血細(xì)胞水平就其刺激食蟹猴中的紅血細(xì)胞產(chǎn)生的能力評估兩種gdf捕獲物，actriib（l79d20-134）-hfc和actriib（l79d25-131）-hfc。在第1天和第8天時，用gdf捕獲物（10mg/kg；n=4只雄性/4只雌性）或媒介物（n=2只雄性/2只雌性）皮下處理猴。在第1（處理前基線）、3、8、15、29和44天時收集血樣，并分析紅血細(xì)胞水平（圖24）、血細(xì)胞比容（圖25）、血紅蛋白水平（圖26）和網(wǎng)織紅細(xì)胞水平（圖27）。媒介物處理的猴在所有后處理時間點顯示出紅血細(xì)胞、血細(xì)胞比容和血紅蛋白的水平減少，這是反復(fù)血液取樣的預(yù)期效應(yīng)。相比之下，用actriib（l79d20-134）-hfc或actriib（l79d25-131）-hfc的處理到第一后處理時間點（第3天）時增加這些參數(shù)，并且對于研究的持續(xù)時間將其維持在基本上升高的水平（圖24-26）。重要的是，與媒介物相比較，用actriib（l79d20-134）-hfc或actriib（l79d25-131）-hfc處理的猴中的網(wǎng)織紅細(xì)胞水平在第8、15和29天時基本上增加（圖27）。該結(jié)果證明gdf捕獲物處理增加紅系前體的產(chǎn)生，導(dǎo)致紅血細(xì)胞水平升高。總之，這些數(shù)據(jù)證明截短的gdf捕獲物以及全長變體可以用作gdf11和潛在相關(guān)配體的選擇性拮抗劑，以增加體內(nèi)紅血細(xì)胞形成。實施例20：衍生自actriib5的gdf捕獲物其他人已報道了可替代的可溶形式的actriib（命名為actriib5），其中外顯子4包括actriib跨膜結(jié)構(gòu)域已替換為不同的c末端序列。參見例如wo2007/053775。不含其前導(dǎo)區(qū)的天然人actriib5的序列如下：可以如所述的在天然位置79（加下劃線）處執(zhí)行亮氨酸至天冬氨酸鹽取代或其他酸性取代，以構(gòu)建具有下述序列的變體actriib5（l79d）：該變體可以用tggg接頭（加單下劃線的）連接至人fc（加雙下劃線的），以生成具有下述序列的人actriib5（l79d）-hfc融合蛋白：。該構(gòu)建體可以在cho細(xì)胞中表達(dá)。實施例21：用epo和具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物的組合處理在小鼠中的效應(yīng)epo通過增加紅系前體的增殖誘導(dǎo)紅血細(xì)胞的形成，而gdf捕獲物可能以補(bǔ)充或增強(qiáng)epo的效應(yīng)的方式影響紅血細(xì)胞的形成。因此，申請人調(diào)查了用epo和actriib（l79d25-131）-hfc的組合處理對紅細(xì)胞生成參數(shù)的作用。雄性c57bl/6小鼠（9周齡）給予單獨的重組人epo（依伯汀α，1800單位/kg）、單獨的actriib（l79d25-131）-hfc（10mg/kg）、epo和actriib（l79d25-131）-hfc兩者或媒介物（tris緩沖鹽水）的單次i.p.注射。小鼠在給藥后72小時實施安樂死，用于收集血液、脾和股骨。加工脾和股骨以獲得用于流式細(xì)胞術(shù)分析的紅系前體細(xì)胞。在取出后，將脾在含有5%胎牛血清的iscove改良的達(dá)爾貝科培養(yǎng)基中切碎，并通過用來自無菌1-ml注射器的柱塞推動通過70-μm細(xì)胞濾器進(jìn)行機(jī)械解離。將股骨清除任何殘余肌肉或結(jié)締組織，并修剪末端以允許通過與3-ml注射器連接的21號針頭，用含有5%胎牛血清的iscove改良的達(dá)爾貝科培養(yǎng)基沖洗剩余的軸來收集骨髓。將細(xì)胞懸浮液離心（2000rpm共10分鐘），并且將細(xì)胞團(tuán)塊重懸浮于含有5%胎牛血清的pbs中。將來自每種組織的細(xì)胞（106）與抗小鼠igg一起溫育以阻斷非特異性結(jié)合，隨后與針對小鼠細(xì)胞表面標(biāo)記物cd71（轉(zhuǎn)鐵蛋白受體）和ter119（與細(xì)胞表面血型糖蛋白a相關(guān)的抗原）的熒光標(biāo)記的抗體一起溫育，洗滌，并通過流式細(xì)胞術(shù)分析。通過用碘化丙啶復(fù)染從分析中排除樣品中的死細(xì)胞。通過在分化過程中減少的cd71標(biāo)記的程度，以及在從原紅血細(xì)胞階段開始的末期紅細(xì)胞分化期間增加的ter119標(biāo)記，來評估脾或骨髓中的紅細(xì)胞分化（socolovsky等人，2001，blood98:3261-3273；ying等人，2006，blood108:123-133）。因此，如所述的，流式細(xì)胞術(shù)用于測定原紅血細(xì)胞（cd71高ter119低）、嗜堿性成紅細(xì)胞（cd71高ter119高）、多色性+正色性成紅細(xì)胞（cd71中ter119高）和晚期正色性成紅細(xì)胞+網(wǎng)織紅細(xì)胞（cd71低ter119高）。用epo和actriib（l79d25-131）-hfc的組合處理導(dǎo)致紅血細(xì)胞中令人驚訝的劇烈增加。在該實驗的72小時時間范圍，與媒介物相比較，epo和actriib（l79d25-131）-hfc單獨均未顯著增加血細(xì)胞比容，而用兩種藥物的組合處理導(dǎo)致血細(xì)胞比容中接近25%的增加，這是出乎意料的協(xié)同作用，即大于其單獨效應(yīng)的總和（圖28）。這種類型的協(xié)同作用一般視為個別藥物通過不同的細(xì)胞機(jī)制起作用的證據(jù)。對于血紅蛋白濃度（圖29）和紅血細(xì)胞濃度（圖30）也觀察到類似的結(jié)果，其中各自也通過組合處理協(xié)同增加。紅系前體水平的分析揭示更復(fù)雜的模式。在小鼠中，脾視為負(fù)責(zé)誘導(dǎo)（“應(yīng)激”）紅細(xì)胞生成的主要器官。與媒介物相比較，在72小時的脾組織的流式細(xì)胞術(shù)分析揭示epo顯著改變紅系前體概況，以減少超過三分之一的晚期前體（晚期正色性成紅細(xì)胞+網(wǎng)織紅細(xì)胞）為代價，使嗜堿性成紅細(xì)胞的數(shù)目增加超過170%（圖31）。重要的是，與媒介物相比較，組合處理顯著增加嗜堿性成紅細(xì)胞，但至比單獨的epo更小的程度，同時支持晚期前體的未縮小的成熟（圖31）。因此，用epo和actriib（l79d25-131）-hfc的組合處理通過前體增殖和成熟的平衡增強(qiáng)來增加紅細(xì)胞生成。與脾形成對比，組合處理后骨髓中的前體細(xì)胞概況與單獨的epo后的那種并無明顯不同。申請人由脾前體概況預(yù)測，如果實驗延長超過72小時，則組合處理將導(dǎo)致增加的網(wǎng)織紅細(xì)胞水平，并且伴隨成熟紅血細(xì)胞水平的持續(xù)升高。總之，這些發(fā)現(xiàn)證明具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物可以與epo組合施用，以在體內(nèi)協(xié)同增加紅血細(xì)胞形成。通過互補(bǔ)但未明確的機(jī)制起作用，gdf捕獲物可以緩和單獨的epo受體激活劑的強(qiáng)增殖效應(yīng)，并且仍允許用較低劑量的epo受體激活劑獲得靶水平的紅血細(xì)胞，從而避免潛在的不良反應(yīng)或與更高水平的epo受體激活相關(guān)的其他問題。實施例22：具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物對β地中海貧血的小鼠模型中的rbc水平和形態(tài)的作用在代表無效紅細(xì)胞生成的最常見原因的地中海貧血綜合征中，α-和β珠蛋白鏈表達(dá)中的不平衡導(dǎo)致由于成紅細(xì)胞成熟期間細(xì)胞凋亡的增加的貧血。rbc輸血目前是地中海貧血中的關(guān)鍵維持療法，但隨著時間過去在某些組織中引起潛在的致死性鐵積累（tanno等人，2010，advhematol2010:358283）。例如，與鐵過載相關(guān)的心臟病在患有重型地中海貧血的患者中可以占50%的死亡率（borgna-pignatti等人，2005，annnyacadsci1054:40-47）。重要的是，內(nèi)源性epo水平通常升高，并且促成地中海貧血綜合征以及無效紅細(xì)胞生成的其他病癥中的疾病病因；因此，重組epo的治療用途可能是不適當(dāng)?shù)?。因此，需要用于地中海貧血和無效紅細(xì)胞生成的其他病癥的可替代療法，其將增加rbc水平而無伴隨伴隨長期輸血的鐵過載。申請人調(diào)查了在β地中海貧血的小鼠模型中actriib（l79d25-131）-mfc對rbc形成的作用，在所述小鼠模型中β主要珠蛋白編碼基因的整個編碼區(qū)已缺失。對于該hbbth-1等位基因純合的小鼠顯示出在高比例的循環(huán)rbc中具有包涵體的低色素性、小紅細(xì)胞性貧血（skow等人，1983，cell1043:1043-1052）。在初步實驗中，2-5月齡的hbb-/-β地中海貧血小鼠（c57bl/6j-hbbd3th/j）被隨機(jī)分配為接受通過每周兩次的皮下注射的actriib（l79d25-131）-mfc（10mg/kg）或媒介物（tris緩沖鹽水）。用媒介物給藥的野生型同窩幼仔充當(dāng)另外的對照。在給藥開始之前以及其后以定期間隔通過頰部出血收集血樣（100μl），用于cbc分析。在基線時血液學(xué)參數(shù)的表征證實hbb-/-β地中海貧血小鼠嚴(yán)重貧血（圖32a-c），并且與媒介物處理的hbb-/-小鼠相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理hbb-/-小鼠4周顯著增加rbc數(shù)目，從而使在該模型中觀察到的貧血降低一半（圖33）。還可見處理相關(guān)的血細(xì)胞比容和血紅蛋白濃度中的增加。重要的是，與媒介物處理的hbb-/-小鼠相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理hbb-/-小鼠也導(dǎo)致改善的rbc形態(tài)和降低的溶血和紅血細(xì)胞碎片，從而指示紅細(xì)胞生成中的基本改善。因此，具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物多肽可以通過增加rbc數(shù)目和形態(tài)兩者，提供用于β地中海貧血的鼠模型中的貧血的治療益處。通過促進(jìn)成紅細(xì)胞成熟同時降低貧血，gdf捕獲物多肽可以治療無效紅細(xì)胞生成。與固有的外源性鐵來源的輸血不同，gdf捕獲物多肽可以通過促進(jìn)經(jīng)由紅細(xì)胞生成的內(nèi)源性鐵儲存的使用來提高rbc水平，從而避免鐵過載及其負(fù)面后果。實施例23：具有截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物對β地中海貧血的小鼠模型中epo水平、脾腫大、骨密度和鐵過載的作用與無效紅細(xì)胞生成相關(guān)的缺氧促使升高的epo水平，其可以驅(qū)動骨髓內(nèi)和骨髓外兩者的成紅細(xì)胞的大量擴(kuò)增，導(dǎo)致脾腫大（脾擴(kuò)大）、成紅細(xì)胞誘導(dǎo)的骨病理狀態(tài)和組織鐵過載，即使在不存在治療性rbc輸血的情況下。未治療的鐵過載導(dǎo)致組織鐵沉積、多器官功能障礙和過早死亡（borgna-pignatti等人，2005，annnyacadsci1054:40-47；borgna-pignatti等人，2011，expertrevhematol4:353-366），最通常是由于嚴(yán)重形式的地中海貧血中的心肌?。╨ekawanvijit等人，2009，canjcardiol25:213-218）。通過增加紅細(xì)胞生成效率，gdf捕獲物多肽不僅可以減輕潛在的貧血和升高的epo水平，還可以減輕脾腫大、骨病理狀態(tài)和鐵過載的相關(guān)并發(fā)癥。申請人研究了實施例21中研究的β中間型地中海貧血的相同小鼠模型中g(shù)df捕獲物多肽對這些參數(shù)的作用。將3月齡的hbb-/-β地中海貧血小鼠（c57bl/6j-hbbd3th/j）隨機(jī)分配，以接受通過每周兩次皮下注射共2個月的actriib（l79d25-131）-mfc（1mg/kg，n=7）或媒介物（tris緩沖鹽水，n=7）。用媒介物給藥的野生型同窩幼仔（n=13）充當(dāng)另外的對照。在研究終止時收集血樣（100μl）用于cbc分析。在研究終止時，通過雙能量x射線吸收測定法（dexa）測定骨礦物質(zhì)密度，通過elisa測定血清epo水平，用2',7'-二氯二氫熒光素二乙酸酯和流式細(xì)胞術(shù)定量活性氧（ros）（suragani等人，2012，blood119:5276-5284），并通過定量聚合酶鏈反應(yīng)測定鐵調(diào)素mrna水平。這種gdf捕獲物多肽發(fā)揮與減少無效紅細(xì)胞生成一致的多重血液學(xué)效應(yīng)。與媒介物給藥的hbb-/-小鼠相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理hbb-/-小鼠2個月使rbc計數(shù)增加25%（圖35）。在hbb-/-小鼠中，與媒介物對照相比較，actriib（l79d25-131）-mfc處理在2個月時也顯著增加血紅蛋白濃度和血細(xì)胞比容。這些變化伴隨循環(huán)網(wǎng)織紅細(xì)胞水平的降低（對于用actriib（l79d25-131）-mfc或媒介物處理的hbb-/-小鼠，分別為31.3±2.3%相對于44.8±5.0%），這與貧血的減輕一致。如在實施例21中，與媒介物給藥的hbb-/-小鼠相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理hbb-/-小鼠導(dǎo)致改善的rbc形態(tài)和降低的紅血細(xì)胞碎片。與健康個體相比較，患有地中海貧血的患者顯示出rbc破壞的速率增加和膽紅素的血清水平升高，所述膽紅素是血紅素分解代謝的產(chǎn)物和溶血的標(biāo)記物（orten，1971，annclinlabsci1:113-124）。在hbb-/-小鼠中，與媒介物相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理使在2個月時的血清膽紅素水平降低近一半（圖36），從而提供actriib（l79d25-131）-mfc可以出乎意料地改善成熟rbc的結(jié)構(gòu)/功能完整性的證據(jù)，因為其促進(jìn)rbc形成。重要的是，與相同模型中的媒介物相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理hbb-/-小鼠使在2個月時的血清epo水平降低超過60%（圖37）。由于升高的epo水平是β地中海貧血中的無效紅細(xì)胞生成的標(biāo)志，此類水平的降低在此處是下述的強(qiáng)有力證據(jù)：actriib（l79d25-131）-mfc在地中海貧血的這種鼠模型中減輕無效紅細(xì)胞生成本身，而不僅是其引起的貧血。該gdf捕獲物多肽還在代表無效紅細(xì)胞生成的主要并發(fā)癥的終點中產(chǎn)生有益的變化。在地中海貧血患者中，脾腫大和骨退化兩者均由epo刺激的紅血細(xì)胞增生和髓外紅細(xì)胞生成引起。在hbb-/-小鼠中，與媒介物相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月顯著降低脾重量（圖38a和38b），并且使骨礦物質(zhì)密度完全恢復(fù)至野生型值（圖39）。通過用該gdf捕獲物多肽處理，鐵穩(wěn)態(tài)也顯著改善。血清鐵由未結(jié)合的（游離的）鐵和結(jié)合原轉(zhuǎn)鐵蛋白的鐵（形成轉(zhuǎn)鐵蛋白）組成，所述原轉(zhuǎn)鐵蛋白是用于在循環(huán)中轉(zhuǎn)運元素鐵的專門蛋白質(zhì)。血清鐵構(gòu)成全身鐵的相對小且不穩(wěn)定的組分，而鐵蛋白（主要在細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的另一種鐵儲存形式）的血清水平代表較大和較不穩(wěn)定的組分。鐵負(fù)荷的第三個量度是轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度，轉(zhuǎn)鐵蛋白的鐵結(jié)合能力被占據(jù)的程度。在hbb-/-小鼠中，與媒介物相比較，actriib（l79d25-131）-mfc處理2個月顯著降低鐵過載的這些指示劑中的每一種（圖40a-c）。除其對鐵穩(wěn)態(tài)的這些不同參數(shù)的作用之外，如通過脾、肝和腎中的組織化學(xué)分析測定的，actriib（l79d25-131）-mfc使hbb-/-小鼠中的組織鐵過載歸一化（圖41）。此外，該gdf捕獲物多肽對鐵調(diào)素（視為鐵穩(wěn)態(tài)的主調(diào)節(jié)物的肝臟蛋白質(zhì)（gantz，2011，blood117:4425-4433））的表達(dá)發(fā)揮有益的作用，所述鐵調(diào)素的水平與膳食鐵攝入相反變化。用actriib（l79d25-131）-mfc處理逆轉(zhuǎn)了hbb-/-小鼠的肝中的鐵調(diào)素的異常低表達(dá)（圖42）。最后，執(zhí)行具有相似設(shè)計的另一項研究，以測定該gdf捕獲物對活性氧（ros）的作用，所述活性氧被認(rèn)為介導(dǎo)鐵超載的毒性效應(yīng)中的許多（rund等人，2005，nengljmed353:1135-1146）。在3月齡hbb-/-小鼠中，用actriib（l79d25-131）-mfc以1mg/kg每周兩次處理2個月幾乎標(biāo)準(zhǔn)化ros水平（圖43），并且因此預(yù)測將極大降低地中海貧血和特征在于無效紅細(xì)胞生成的其他疾病中由ros介導(dǎo)的組織損害。總之，上文發(fā)現(xiàn)證明gdf捕獲物多肽可以治療無效紅細(xì)胞生成，包括貧血和epo水平升高，以及并發(fā)癥例如脾腫大、成紅細(xì)胞誘導(dǎo)的骨病理狀態(tài)和鐵過載及其伴隨的病理狀態(tài)。對于脾腫大，這種病理狀態(tài)包括胸部或腹部疼痛和網(wǎng)狀內(nèi)皮增生。髓外造血不僅可以在脾中出現(xiàn)，還潛在地可以在其他組織中以髓外造血假瘤的形式出現(xiàn)（musallam等人，2012，coldspringharbperspectmed2:a013482）。對于成紅細(xì)胞誘導(dǎo)的骨病理狀態(tài)，伴隨的病理狀態(tài)包括低骨礦物質(zhì)密度、骨質(zhì)疏松和骨痛（haidar等人，2011，bone48:425-432）。對于鐵過載，伴隨的病理狀態(tài)包括鐵調(diào)素壓制和膳食鐵的過度吸收（musallam等人，2012，bloodrev26（suppl1）:s16-s19）、多發(fā)性內(nèi)分泌病和肝纖維化/肝硬化（galanello等人，2010，orphanetjraredis5:11）和鐵過載心肌?。╨ekawanvijit等人，2009，canjcardiol25:213-218）。與用于無效紅細(xì)胞生成的現(xiàn)有療法形成對比，gdf捕獲物多肽例如actriib（l79d25-131）-mfc能夠降低鼠模型中的鐵過載，同時增加rbc水平。這種新型能力區(qū)別gdf捕獲物多肽與輸血，所述輸血在治療貧血的過程中固有地用外源性鐵負(fù)載身體，并且實現(xiàn)這點而不減輕無效紅細(xì)胞生成的根本條件。實施例24：gdf捕獲物增加血紅蛋白水平，并且使地中海貧血患者中的皮膚潰瘍基本上消退。設(shè)計臨床研究，以用actriib（l79d25-131）-hfc的多重劑量治療地中海貧血患者（β中間型和重型地中海貧血患者）。該研究包括非輸血依賴性患者（<4單位/8周，血紅蛋白<10g/dl）和輸血（血液）依賴性患者（≥4單位/8周，經(jīng)過6個月證實）。將患者分到四個治療組之一內(nèi)：i）通過每三周的皮下注射施用0.2mg/kgactriib（l79d25-131）-hfc；ii）通過每三周的皮下注射施用0.4mg/kgactriib（l79d25-131）-hfc；iii）通過每三周的皮下注射施用0.6mg/kgactriib（l79d25-131）-hfc；和iv）通過每三周的皮下注射施用0.8mg/kgactriib（l79d25-131）-hfc。經(jīng)過三個月的治療過程，觀察到患者具有血紅蛋白水平中的顯著的劑量依賴性增加。此外，actriib（l79d25-131）-hfc治療在減少輸血依賴性方面是有效的，即所有輸血依賴性患者在研究過程中均經(jīng)歷輸血負(fù)荷>50%的降低。具有大約9.2g/dl的基線血紅蛋白水平的一個患者接受以0.4mg/kg水平的actriib（l79d25-131）-hfc的4個劑量，導(dǎo)致在三個月的治療后大約10.6g/dl的血紅蛋白水平?；颊叩牡刂泻Ｘ氀铅轮虚g型地中海貧血，并且患者是非輸血依賴性的。在本研究前大約三年，該患者已患有下肢中的復(fù)發(fā)性皮膚潰瘍。此類潰瘍是地中海貧血的常見皮膚并發(fā)癥。參見例如rassi等人（2008）pediatricannals37（5）：322-328。在actriib（l79d25-131）-hfc治療之前，該患者被診斷患有腿部潰瘍。在施用第一個actriib（l79d25-131）-hfc劑量后兩周觀察到潰瘍愈合。在actriib（l79d25-131）-hfc處理6周后，腿部潰瘍測定為基本上消退。第二個非輸血依賴患者開始關(guān)于腿部潰瘍的研究。在用以1.25mg/kg的幾個劑量的actriib（l79d25-131）-hfc處理后，腿部潰瘍基本上消退。另外，輸血依賴性患者開始關(guān)于在左踝上的潰瘍的研究。在以1.0mg/kg的五個劑量的actriib（l79d25-131）-hfc后，潰瘍基本上消退，并且對于研究的持續(xù)時間保持如此。因此，actriib（l79d25-131）-hfc可以用于有效治療在非輸血和輸血依賴性地中海貧血患者中表現(xiàn)的潰瘍。相應(yīng)地，這些數(shù)據(jù)證明actriib（l79d25-131）-hfc治療有效增加血紅蛋白水平，并且可以用于降低人地中海貧血患者中的輸血依賴性。除對疾病的貧血的正面作用之外，腿部潰瘍愈合中的顯著改善指示actriib（l79d25-131）-hfc可以用于有效治療地中海貧血的其他非貧血并發(fā)癥，這與來自上述β地中海貧血的小鼠模型的數(shù)據(jù)一致。實施例25：gdf捕獲物增加鐮狀細(xì)胞病模型中的紅血細(xì)胞水平且改善紅血細(xì)胞形態(tài)申請人調(diào)查了在鐮狀細(xì)胞病（scd）的小鼠模型中actriib（l79d25-131）-mfc對紅血細(xì)胞（rbc）形成的作用，其中小鼠血紅蛋白基因（α/α和β/β）已替換為人鐮狀血紅蛋白基因（α/α、γ/γ和βs/βs）。對于人βs等位基因純合的小鼠顯示出在患有scd的人中發(fā)現(xiàn)的主要特點（例如，嚴(yán)重溶血性貧血、不可逆鐮狀紅細(xì)胞、血管（血管的）閉塞和多器官病理狀態(tài)）。參見例如wu等人，（2006）blood，108（4）：1183-1188；ryan等人（1997）science278：873-876。通過每周兩次的皮下注射，scd小鼠（βs/βs）在3月齡時被隨機(jī)分配，以接受actriib（l79d25-131）-mfc（1mg/kg）或媒介物[tris緩沖鹽水（tbs）]。用媒介物給藥的無癥狀復(fù)合雜合子（βs/βs）同窩幼仔充當(dāng)另外的對照（wt動物）。在基線時，與復(fù)合雜合子小鼠相比較，scd小鼠具有降低的rbc水平（-28%，p<0.01）和血紅蛋白水平（-14.5%，p<0.05）以及增加的網(wǎng)織紅細(xì)胞水平，證明scd小鼠嚴(yán)重貧血。在一個月的處理后，就不同紅血細(xì)胞參數(shù)中的變化評估受試者。與媒介物處理的scd小鼠相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理scd小鼠4周顯著增加rbc水平（+15.2%，p<0.01），從而降低在該模型中觀察到的貧血（圖44和45）。還觀察到actriib（l79d25-131）-mfc處理相關(guān)的血細(xì)胞比容和血紅蛋白濃度中的增加（圖45），以及平均細(xì)胞容積、rdc分布寬度、網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)目和活性氧中的顯著減少（圖46），這都與改善的紅血細(xì)胞半衰期一致。令人驚訝的是，用actriib（l79d25-131）-mfc處理scd小鼠6周導(dǎo)致外周血細(xì)胞中的磷脂酰絲氨酸（ps）暴露的基本減少（-14%，p=0.08），如通過爬行酶（scramblase）測定和膜聯(lián)蛋白-v測定所測定的，指示與媒介物治療的受試者相比較朝向改善的膜磷脂不對稱的趨勢。在三個月的處理后，觀察到受試者具有另外的血液化學(xué)參數(shù)中的改善。特別地，與媒介物處理的scd小鼠相比較，用actriib（l79d25-131）-mfc處理scd小鼠12周顯著降低膽紅素（總）水平（-17.0%，p<0.05）、血尿素氮水平（-19.2%，p<0.05）以及細(xì)胞游離血紅蛋白（-30.7%，p=0.06）。這些數(shù)據(jù)指示與媒介物處理的受試者相比較，gdf捕獲物處理的受試者具有紅血細(xì)胞溶血水平的減少，這與早在actriib（l79d25-131）-mfc療法開始后一個月觀察到的紅血細(xì)胞水平的增加一致。與媒介物處理的受試者相比較，膜聯(lián)蛋白-v測定證明在三個月的治療后外周血細(xì)胞中的磷脂酰絲氨酸（ps）暴露中的顯著減少（-13.4%，p=0.06）。此外，與用媒介物單獨處理的小鼠相比較，在處理三個月后執(zhí)行的血涂片顯示在actriib（l79d25-131）-mfc處理的小鼠中較少的不可逆鐮狀形成的紅血細(xì)胞（-66.5%，p<0.0001；由每組大約2000個細(xì)胞計數(shù)）。這些數(shù)據(jù)指示在actriib（l79d25-131）-mfc處理后的紅血細(xì)胞形態(tài)中的定性改善，這與在一個月和三個月的actriib（l79d25-131）-mfc處理后獲得的爬行酶測定和膜聯(lián)蛋白-v測定數(shù)據(jù)一致。此外，與媒介物處理的scd小鼠相比較，用gdf捕獲物處理scd小鼠三個月也導(dǎo)致脾重量中的顯著減少（-20.5%，p<0.05）。這些數(shù)據(jù)指示actriib（l79d25-131）-mfc可以用于治療與scd相關(guān)的其他并發(fā)癥，包括例如紅血細(xì)胞的脾隔離，其可導(dǎo)致脾隔離危象和/或脾腫大?？傊?，這些數(shù)據(jù)指示包含截短的actriib細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的gdf捕獲物可以在scd的鼠模型中提供不同的治療益處。除增加rbc水平和改善不同的血液參數(shù)之外，數(shù)據(jù)證明rbc形態(tài)中的改善。這種觀察到的rbc形態(tài)中的改善指示除貧血之外，gdf捕獲物治療可以用于治療或預(yù)防scd的不同的其他并發(fā)癥（例如起于血管閉塞的并發(fā)癥）。這通過actriib（l79d25-131）-mfc處理的受試者中觀察到的脾大小減少得到進(jìn)一步支持。相應(yīng)地，本文呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)提示gdf捕獲物多肽可以用于治療鐮狀細(xì)胞病的各種并發(fā)癥。與固有的外源性鐵來源的紅血細(xì)胞輸注不同，gdf捕獲物多肽可以通過促進(jìn)經(jīng)由紅細(xì)胞生成的內(nèi)源性鐵儲存的使用來提高rbc水平，并因此避免鐵過載及其負(fù)面后果。如在地中海貧血患者中觀察到的，皮膚潰瘍是鐮狀細(xì)胞病的最常見的皮膚并發(fā)癥之一。參見例如keast等人（2004）ostomywoundmanage.，50（10）：64-70；trent等人（2004）advskinwoundcare，17（8）：410-416；和j.r.eckman（1996）hematoloncolclinnortham.，10（6）：1333-1344。關(guān)于貧血患者中的潰瘍形成的根本機(jī)制尚未完全確定。然而，認(rèn)為貧血的多重并發(fā)癥促成潰瘍發(fā)展，包括例如缺血、一氧化氮生物利用度減少、血管閉塞（特別是在鐮狀細(xì)胞貧血和地中海貧血的情況下）、血栓形成、高水平的循環(huán)網(wǎng)織紅細(xì)胞和缺氧。同上。如上文討論的，本發(fā)明證明actriib（l79d25-131）-fc處理減輕了這些鐮狀細(xì)胞病相關(guān)狀況中的許多。相應(yīng)地，本文公開的數(shù)據(jù)提示如在上述地中海貧血患者中觀察到的，actrii拮抗劑可以用于治療和預(yù)防患有鐮狀細(xì)胞病的患者中的潰瘍。通過引用并入本文提及的所有出版物和專利均通過引用整體并入本文，如同每個個別出版物或?qū)＠唧w且個別地指示通過引用并入。雖然已討論了主題的具體實施例，但上文說明書是舉例說明性的而不是限制性的。在審閱本說明書和下文權(quán)利要求后，許多變化對于本領(lǐng)域技術(shù)人員將變得顯而易見。本發(fā)明的完全范圍應(yīng)當(dāng)通過參考權(quán)利要求連同其等同物的完全范圍，以及說明書連同這些變化來確定。當(dāng)前第1頁12