本發(fā)明是在美國政府支持下完成，即美國衛(wèi)生和人類服務(wù)部公共衛(wèi)生的防范與突發(fā)事件應(yīng)對(duì)中心(The United States Of America Department Of Health And Human Services Assistant Secretary For Preparedness And Response)、美國衛(wèi)生和人類服務(wù)部公共衛(wèi)生的防范與突發(fā)事件應(yīng)對(duì)中心內(nèi)的生物醫(yī)學(xué)高級(jí)研究與發(fā)展局(Biomedical Advanced Research and Development Authority，BARDA)的支持下完成的，資助合同號(hào)：HHSO100201300011C。美國政府對(duì)本發(fā)明有一定的權(quán)利。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥本文所述的新的三環(huán)含氮化合物及相應(yīng)的藥物組合物。

背景技術(shù)：

淋病是全球第二大最常見的細(xì)菌性性傳播感染，并且仍然是全世界的重要臨床和公共衛(wèi)生問題。性傳播和圍產(chǎn)期傳播后的淋球菌感染是全世界發(fā)病率的主要原因[Barry,2009]。感染可以涉及宮頸炎、直腸炎、尿道炎、盆腔炎性疾病、附睪炎、睪丸炎、前列腺炎、結(jié)膜炎、咽炎和其他播散性淋球菌性疾病。

淋病奈瑟球菌也被稱為淋球菌(復(fù)數(shù)形式：gonococci，單數(shù)形式：gonococcus)或GC(縮寫)，是引起性傳播感染淋病的革蘭氏陰性咖啡豆形雙球菌的一種。^[1]

并發(fā)癥包括不育、異位妊娠、慢性盆腔疼痛、不良妊娠結(jié)局，以及人類免疫缺陷病毒的易感性和傳播性增加[Workowski,2008；Barry,2009]。

由沙眼衣原體和淋病奈瑟球菌引起的感染可導(dǎo)致宮頸炎、尿道炎、直腸炎和盆腔炎性疾病(PID)，并且它們的并發(fā)癥可顯著損害婦女的生殖功能。這些感染是非自愿不孕和異位妊娠的主要可預(yù)防的原因，并且可以影響包括低出生體重、早產(chǎn)、胎兒死亡和先天性感染在內(nèi)的妊娠結(jié)局。衣原體和淋球菌感染也可以增加對(duì)HIV的易感性和促進(jìn)HIV的傳播。Kimberly Workowski.2013American College of Physicians,Annals of Internal Medicine,In the Clinic。

多年來已經(jīng)使用多種抗微生物劑來治療淋??；然而，淋病的有效治療選擇已經(jīng)迅速減少，這是因?yàn)閷?duì)先前使用或考慮的第一線的許多藥物(即青霉素、窄譜頭孢菌素、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類和氟喹諾酮類)的抗微生物劑耐藥性的出現(xiàn)和全世界擴(kuò)散[Workowski,2008；Barry,2009]。

目前疾病控制和預(yù)防中心(CDC)推薦的單純性淋病治療方案是使用單一肌內(nèi)劑量的頭孢曲松加單一劑量的阿奇霉素或7天多西環(huán)素方案的組合治療[CDC,2012]。雖然CDC指南可能有助于延遲頭孢菌素耐藥性淋病的出現(xiàn)，但它們不能消除這種即將來臨的威脅。

因此，CDC敦促科學(xué)家和私營部門藥物開發(fā)商優(yōu)先鑒定和研究新的、有效的淋病的抗生素治療選擇[CDC,2013]。

WO02/08224、WO02/50061、WO02/56882、WO02/96907、WO2003087098、WO2003010138、WO2003064421、WO2003064431、WO2004002992、WO2004002490、WO2004014361、WO2004041210、WO2004096982、WO2002050036、WO2004058144、WO2004087145、WO2006002047、WO2006014580、WO2006010040、WO2006017326、WO2006012396、WO2006017468、WO2006020561、WO2006081179、WO2006081264、WO2006081289、WO2006081178、WO2006081182、WO01/25227、WO02/40474、WO02/07572、WO2004024712、WO2004024713、WO2004035569、WO2004087647、WO2004089947、WO2005016916、WO2005097781、WO2006010831、WO2006021448、WO2006032466、WO2006038172、WO2006046552、WO06099884、WO06126171、WO06137485、WO06105289、WO06125974、WO06134378、WO07016610、WO07081597、WO07071936、WO07115947、WO07118130、WO07122258、WO08006648、WO08003690和WO08009700公開了具有抗菌劑活性的喹啉、二氮雜萘、嗎啉、環(huán)己烷、哌啶和哌嗪衍生物。WO2004104000公開了能夠選擇性作用于大麻素受體的三環(huán)稠環(huán)化合物。WO2003048081、WO2003048158和US2003232804公開了甘氨酰胺作為Xa因子抑制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

總體上，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥如本文所述的新的三環(huán)含氮化合物及其相應(yīng)的藥物組合物。

發(fā)明詳述

化合物

總體上，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥如本文所述的新的三環(huán)含氮化合物及其相應(yīng)的藥物組合物。

具體地，本發(fā)明提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物的用途：

其中：

Z¹和Z²獨(dú)立地選自CH和N；

R^1a和R^1b獨(dú)立地選自氫；鹵素；氰基；(C_1-6)烷基；(C_1-6)烷基硫基；三氟甲基；三氟甲氧基；羧基；其任選被(C_1-6)烷基或(C_1-6)烷氧基-取代的(C_1-6)烷基取代的羥基；(C_1-6)烷氧基-取代的(C_1-6)烷基；羥基(C_1-6)烷基；氨基，其任選在N上被一個(gè)或兩個(gè)(C_1-6)烷基、甲酰基、(C_1-6)烷基羰基或(C_1-6)烷基磺酰基取代；和氨基羰基，其中所述氨基任選被(C_1-4)烷基取代；

條件是當(dāng)Z²或Z¹分別為N時(shí)，R^1a和R^1b為H；

R²為氫或(C_1-4)烷基，或與R⁶一起形成如下定義的Y；

A為基團(tuán)(i)：

其中：R³如針對(duì)R^1a和R^1b所定義，或R³為氧代且n為1或2：

或A為基團(tuán)(ii)

W¹、W²和W³為CR⁴R⁸；

或W²和W³為CR⁴R⁸且W1代表W³和N之間的鍵；

X為O、CR⁴R⁸或NR⁶；

一個(gè)R⁴如針對(duì)R^1a和R^1b所定義且剩余的R⁴和R⁸為氫，或一個(gè)R⁴和R⁸一起為氧代且剩余的R⁴和R⁸為氫；

R⁶為氫或(C_1-6)烷基；或與R²一起形成Y；

R⁷為氫；鹵素；任選被(C_1-6)烷基取代的羥基；或(C_1-6)烷基；

Y為CR⁴R⁸CH₂；CH₂CR⁴R⁸；(C＝O)；CR⁴R⁸；CR⁴R⁸(C＝O)；或(C＝O)CR⁴R⁸；

或當(dāng)X為CR⁴R⁸時(shí)，R⁸和R⁷一起代表鍵；

U選自CO和CH₂，且

R⁵為任選取代的雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)系統(tǒng)(B)：

各環(huán)中含有至多四個(gè)雜原子，其中

(a)和(b)環(huán)的至少一個(gè)環(huán)為芳香環(huán)；

當(dāng)X¹為芳香環(huán)的一部分時(shí)，X¹為C或N，或當(dāng)X¹為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，X¹為CR¹⁴；

當(dāng)X²為芳香環(huán)或非芳香環(huán)的一部分時(shí)，X²為N、NR¹³、O、S(O)_x、CO或CR¹⁴，或當(dāng)X²為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，X²還可為CR¹⁴R¹⁵；

X³和X⁵獨(dú)立地為N或C；

Y¹為0至4個(gè)原子的連接基，其中當(dāng)各原子為芳香環(huán)或非芳香環(huán)的一部分時(shí)，各原子獨(dú)立地選自N、NR¹³、O、S(O)_x、CO和CR¹⁴，或當(dāng)各原子為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，各原子還可為CR¹⁴R¹⁵；

Y²為2至6個(gè)原子的連接基，其中當(dāng)Y²的各原子為芳香環(huán)或非芳香環(huán)的一部分時(shí)，Y²的各原子獨(dú)立地選自N、NR¹³、O、S(O)_x、CO和CR¹⁴，或當(dāng)Y²的各原子為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，Y²的各原子還可以為CR¹⁴R¹⁵；

各個(gè)R¹⁴和R¹⁵獨(dú)立地選自：H；(C_1-4)烷基硫基；鹵素；羧基(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷氧基羰基；(C_1-4)烷基羰基；(C_1-4)烷氧基(C_1-4)烷基；羥基；羥基(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷氧基；硝基；氰基；羧基；氨基或氨基羰基，其任選被(C_1-4)烷基單-或二-取代；或

R¹⁴和R¹⁵可一起表示氧代；

各個(gè)R¹³獨(dú)立地為H；三氟甲基；任選被羥基、(C_1-6)烷氧基、(C_1-6)烷基硫基、鹵素或三氟甲基取代的(C_1-4)烷基；(C_2-4)烯基；(C_1-4)烷氧基羰基；(C_1-4)烷基羰基；(C_1-6)烷基磺?；话被驶?，其中所述氨基任選被(C_1-4)烷基單或二取代；且

各個(gè)X獨(dú)立地為0、1或2。

本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物，和藥學(xué)上可接受的載體。

一方面，Z¹和Z²之一為CH或N且另一個(gè)為CH。

在具體的方面中：

(i)Z¹和Z²均為CH；

(ii)Z¹為N和Z²為CH；或

(iii)Z¹為CH和Z²為N。

在具體的方面中，R^1a和R^1b獨(dú)立地為氫、(C_1-4)烷氧基、(C_1-4)烷基硫基、(C_1-4)烷基、氰基、羧基、羥基甲基或鹵素；更具體地，為氫、甲氧基、甲基、氰基或鹵素。

在具體實(shí)施方案中，R^1a和R^1b為氫。

在具體的方面中，R²為氫。

R³的具體實(shí)例包括氫；任選取代的羥基；任選取代的氨基；鹵素；(C_1-4)烷基；1-羥基-(C_1-4)烷基；任選取代的氨基羰基。更具體地，R³為氫；CONH₂；1-羥基烷基，例如CH₂OH；任選取代的羥基，例如甲氧基；任選取代的氨基；和鹵素，具體為氟。最具體地，R³為氫、羥基或氟。

在具體的方面中，當(dāng)A為(ia)時(shí)，n為1。在其他方面中，R³在3-或4-位。在更具體的方面中，A為(ia)、n為1且R³在3-位，更具體地，R³與NR²基團(tuán)成順式。在具體實(shí)施方案中，A為基團(tuán)(ia)，其中n為1且R³為氫或羥基。更具體地，其中A為3-羥基-哌啶-4-基，其構(gòu)型為(3R,4S)或(3S,4R)?；蛘咔腋唧w地，其中A為哌啶-4-基，其構(gòu)型為(3R,4S)。

在可選的更具體的方面中，當(dāng)A為(ia)時(shí)，n為1、R³在4-位且為甲基。

在具體的方面中，當(dāng)A為(ii)時(shí)，X為CR⁴R⁸，其中R⁸為H且R⁴為H或OH，更具體地，與R7成反式的OH。在其他方面中，W¹為鍵。在另一方面中，R⁷為H。在其他方面中，W¹為鍵，W²和W³均為CH₂且R⁷為H。在具體的方面中，當(dāng)A為4-羥基吡咯烷-3-基甲基時(shí)，其構(gòu)型為(3S,4S)。在具體的方面中，當(dāng)A為吡咯烷-3-基甲基時(shí)，其構(gòu)型為3S。

在具體的方面中，當(dāng)A為(ii)時(shí)，X為O、R⁷為H且W¹、W²和W³各為CH₂。

在具體實(shí)施方案中，U為CH₂。

在具體實(shí)施方案中，R⁵為具有8-11個(gè)環(huán)原子且包括2-4個(gè)雜原子的芳香雜環(huán)(B)，其中至少一個(gè)雜原子為N或NR¹³，其中，在具體實(shí)施方案中，Y²包括2-3個(gè)雜原子，其中一個(gè)為S且1-2個(gè)為N，且其中一個(gè)N連接至X³。

在可選實(shí)施方案中，所述雜環(huán)(B)具有環(huán)(a)芳香環(huán)，其選自任選取代的苯并、吡啶并、噠嗪并和嘧啶并，和環(huán)(b)非芳香環(huán)，且Y²具有3-5個(gè)原子，更具體地，4個(gè)原子，其中包括至少一個(gè)雜原子，且O、S、CH₂或NR¹³連接至X⁵，其中R¹³不是氫，或者NHCO經(jīng)N連接至X³，或O、S、CH₂或NH連接至X³。在具體的方面中，所述環(huán)(a)含有芳香氮，和更具體地，環(huán)(a)為吡啶或吡嗪。環(huán)(B)的實(shí)例包括任選取代的以下基團(tuán)：

(a)和(b)均為芳香環(huán)

1H-吡咯并[2,3-b]-吡啶-2-基、1H-吡咯并[3,2-b]-吡啶-2-基、3H-咪唑并[4,5-b]-吡啶-2-基、3H-喹唑啉-4-酮-2-基、苯并咪唑-2-基、苯并[1,2,3]-噻二唑-5-基、苯并[1,2,5]-噁二唑-5-基、苯并呋喃-2-基、苯并噻唑-2-基、苯并[b]噻吩-2-基、苯并噁唑-2-基、色烯-4-酮-3-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基、咪唑并-[1,2-a]-嘧啶-2-基、吲哚-2-基、吲哚-6-基、異喹啉-3-基、[1,8]-二氮雜萘-3-基、噁唑并[4,5-b]-吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、喹喔啉-2-基、萘-2-基、1,3-二氧代-異吲哚-2-基、1H-苯并三唑-5-基、1H-吲哚-5-基、3H-苯并噁唑-2-酮-6-基、3H-苯并噁唑-2-硫酮-6-基、3H-苯并噻唑-2-酮-5-基、3H-喹唑啉-4-酮-6-基、吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮-3-基(4-氧代-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-3-基)、苯并[1,2,3]噻二唑-6-基、苯并[1,2,5]噻二唑-5-基、苯并[1,4]噁嗪-2-酮-3-基、苯并噻唑-5-基、苯并噻唑-6-基、噌啉-3-基、咪唑并[1,2-b]噠嗪-2-基、吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基、吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基、吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基、吡唑并[5,1-c][1,2,4]三嗪-3-基、吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮-2-基(4-氧代-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-2-基)、喹唑啉-2-基、喹喔啉-6-基、噻唑并[3,2-a]嘧啶-5-酮-7-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基、噻吩并[3,2-b]吡啶-6-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基、噻唑并[4,5-b]吡啶-5-基、[1,2,3]噻二唑并[5,4-b]吡啶-6-基、2H-異喹啉-1-酮-3-基(1-氧代-1,2-二氫-異喹啉-3-基)、[1,2,3]噻二唑并[5,4-b]吡啶-6-基，

→為連接點(diǎn)

(a)為非芳香環(huán)

(2S)-2,3-二氫-1H-吲哚-2-基、(2S)-2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環(huán)己二烯-2-基、3-(R,S)-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噻嗪-3-基、3-(R)-2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-b]吡啶-3-基、3-(S)-2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-b]吡啶-3-基、2,3-二氫-苯并[1,4]二噁烷-2-基、3-取代的-3H-喹唑啉-4-酮-2-基，

→為連接點(diǎn)

(b)為非芳香環(huán)

1,1,3-三氧代-1,2,3,4-四氫l⁶-苯并[1,4]噻嗪-6-基、苯并[1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基、2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環(huán)己二烯-6-基、3-取代的-3H-苯并噁唑-2-酮-6-基、3-取代的-3H-苯并噁唑-2-硫酮-6-基、3-取代的-3H-苯并噻唑-2-酮-6-基、4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮-6-基(3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基)、4H-苯并[1,4]噻嗪-3-酮-6-基(3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噻嗪-6-基)、4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮-7-基、4-氧代-2,3,4,5-四氫-苯并[b][1,4]硫氮雜-7-基、5-氧代-2,3-二氫-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-6-基、1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噻嗪-2-酮-7-基(2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b]噻嗪-7-基)、2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噻嗪-7-基、2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b]噻嗪-7-基、2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-b]吡啶-6-基、2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基、2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-b]吡啶-7-基、3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基、3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噻嗪-6-基、3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基、3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基、3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基、3,4-二氫-1H-喹啉-2-酮-7-基、3,4-二氫-1H-喹喔啉-2-酮-7-基、6,7-二氫-4H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-酮-2-基、5,6,7,8-四氫-[1,8]二氮雜萘-2-基(1,2,3,4-四氫-[1,8]二氮雜萘-7-基)、2-氧代-3,4-二氫-1H-[1,8]二氮雜萘-6-基、6-氧代-6,7-二氫-5H-噠嗪并[3,4-b][1,4]噻嗪-3-基(6-氧代-6,7-二氫-5H-8-硫雜-1,2,5-三氮雜-萘-3-基)、2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]噁嗪-7-基、2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基、6,7-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-d]嘧啶-2-基、[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基、3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基、2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基、6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪-3-基、5,6,7,8-四氫異喹啉-3-基、6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-基、1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-基、3,4-二氫-2H-[1,4]氧硫雜環(huán)庚二烯并[2,3-c]吡啶-8-基、[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-基、6,7-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪-3-基、6,7-二氫-5H-吡喃并[2,3-c]噠嗪-3-基、5,6-二氫呋喃并[2,3-c]噠嗪-3-基、2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-基、2-取代的1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-7(6H)-酮、2-取代的5,6-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(1H)-酮、7-取代的2H-色烯-2-酮、7-取代的2H-吡喃并[2,3-b]吡啶-2-酮、2-取代的6,7-二氫-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶、8-取代的2H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-2-酮、2,3-二氫-1-苯并呋喃-5-基、1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-7(6H)-酮-2-基、3,4-二氫-2H-色烯-7-基、2,3-二氫-1-苯并呋喃-6-基、3,4-二氫-2H-色烯-6-基、3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基、3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基、6,7-二氫-5H-噻吩并[3,2-b]吡喃-2-基、2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜-7-基，

其中R為任選取代基

→為連接點(diǎn)

在一些實(shí)施方案中，當(dāng)R¹³在環(huán)(a)中時(shí)，R¹³為H，或當(dāng)R¹³在環(huán)(b)中時(shí)，R¹³還可為(C_1-4)烷基，例如甲基或異丙基。更具體地，在環(huán)(b)中，當(dāng)NR¹³連接至X³時(shí)，R¹³為H，和當(dāng)NR¹³連接至X⁵時(shí)，R¹³為(C_1-4)烷基。

在其他實(shí)施方案中，R¹⁴和R¹⁵獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、(C_1-4)烷基、(C_1-4)烷氧基、硝基和氰基。更具體地，R¹⁵為氫。

更具體地，各個(gè)R¹⁴選自氫、氯、氟、羥基、甲基、甲氧基、硝基和氰基。更具體地，R¹⁴選自氫、氟或硝基。

最具體地，R¹⁴和R¹⁵均為H。

具體基團(tuán)R⁵包括：

[1,2,3]噻二唑并[5,4-b]吡啶-6-基

1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-基

2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-b]吡啶-6-基

2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-b]吡啶-7-基

2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基

2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環(huán)己二烯-6-基

2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-7-基

2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噻嗪-7-基

3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基

3-甲基-2-氧代-2,3-二氫-苯并噁唑-6-基

3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基

3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基

3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噻嗪-6-基(4H-苯并[1,4]噻嗪-3-酮-6-基)

4-氧代-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-2-基

6-硝基-苯并[1,3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基

7-氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基

8-羥基-1-氧代-1,2-二氫-異喹啉-3-基

8-羥基喹啉-2-基

苯并[1,2,3]噻二唑-5-基

苯并[1,2,5]噻二唑-5-基

苯并噻唑-5-基

噻唑并-[5,4-b]吡啶-6-基

3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基

7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基

7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基

7-氟-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基

2-氧代-2,3-二氫-1H-吡啶并[3,4-b][1,4]噻嗪-7-基

[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基

3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基

5-氰基-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基

6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪-3-基

5,6,7,8-四氫異喹啉-3-基

6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-基

1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-基

6-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

3,4-二氫-2H-[1,4]氧硫雜環(huán)庚二烯并[2,3-c]吡啶-8-基

[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-基

2,3-二氫-1-苯并呋喃-5-基

6,7-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪-3-基

6,7-二氫-5H-吡喃并[2,3-c]噠嗪-3-基

5,6-二氫呋喃并[2,3-c]噠嗪-3-基

2-取代的1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-7(6H)-酮

2-取代的4-氯-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-7(6H)-酮

2-取代的5,6-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(1H)-酮

2-取代的4-氯-5,6-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(1H)-酮

2-取代的4-甲基-5,6-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(1H)-酮

2-取代的4-甲基氧基-5,6-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(1H)-酮

7-取代的2H-色烯-2-酮

7-取代的2H-吡喃并[2,3-b]吡啶-2-酮

4-氯-6,7-二氫-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-2-基

8-取代的2H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-2-酮

6,7-二氫-5H-吡喃并[2,3-d]嘧啶-2-基

5-氯-1-苯并噻吩-2-基

6-氯-1-苯并噻吩-2-基

1-苯并噻吩-5-基

1-甲基-1H-1,2,3-苯并三唑-6-基

咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-6-基

4-甲基-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基

1-甲基-1H-吲哚-2-基

1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-7(6H)-酮-2-基

[1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-基

4-氟-1H-苯并咪唑-2-基

3,4-二氫-2H-色烯-7-基

2,3-二氫-1-苯并呋喃-6-基

3,4-二氫-2H-色烯-6-基

6-氯-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

7-氯-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基

7-氯-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基

3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基

5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基

8-氟-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮-6-基

8-氟-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基

7,8-二氟-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基

6,7-二氫-5H-噻吩并[3,2-b]吡喃-2-基

5-甲基-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

4-氧代-2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜-7-基

3,4-二氫-2H-1,4-苯并噻嗪-6-基

2,3,4,5-四氫-1,5-苯并硫氮雜-7-基

7-氟-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基

→為連接點(diǎn)

尤其為

3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基

3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基

2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基

[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基

6-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基

3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基

5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

5-氰基-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基

2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環(huán)己二烯-6-基

→為連接點(diǎn)

定義

當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"烷基"包括直鏈和支鏈的基團(tuán)，例如，當(dāng)合適時(shí)，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。術(shù)語'烯基'也相應(yīng)地解釋。

鹵或鹵素包括氟、氯、溴和碘。

鹵素烷基基團(tuán)包括1-3個(gè)鹵素原子。

本發(fā)明中的化合物含有雜環(huán)基，且可能以兩種或更多種互變異構(gòu)形式存在，取決于所述雜環(huán)基的性質(zhì)；所有這些互變異構(gòu)形式均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

本發(fā)明的一些化合物可以從溶劑(例如水性溶劑和有機(jī)溶劑)中結(jié)晶或重結(jié)晶。在該情況下，可以形成溶劑合物。本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括化學(xué)計(jì)量的溶劑合物(包括水合物)以及含有可變量水的化合物，其通過例如冷凍干燥的方法制備。

另外，將理解，短語例如"式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或N-氧化物"旨在包括式(I)化合物、式(I)化合物的N-氧化物、式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、式(I)化合物的溶劑合物，或上述的任意藥學(xué)上可接受的組合。因此，通過用于例示目的的非限制性實(shí)例，"式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽"可以包括式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，其進(jìn)一步存在為溶劑合物。

由于式(I)化合物旨在用于藥物組合物，因此容易理解，在具體實(shí)施方案中，它們以基本上純的形式提供，例如至少60％純，更合適地，至少75％純，具體地，至少85％，尤其至少98％純(％為重量比)。所述化合物的不純制品可以用于制備用于藥物組合物的更純形式；化合物的這些較不純的制品應(yīng)當(dāng)含有至少1％，更合適地，至少5％，更具體地，至少10％的式(I)化合物或藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物。

本發(fā)明的具體化合物包括實(shí)施例中提及的那些化合物及其藥學(xué)上可接受的N-氧化物、鹽和溶劑合物。

所述式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括酸加成鹽或季銨鹽，例如與以下無機(jī)酸形成的鹽：例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸或磷酸，或與以下有機(jī)酸形成的鹽：例如乙酸、富馬酸、琥珀酸、馬來酸、檸檬酸、苯甲酸、對(duì)甲苯磺酸、甲烷磺酸、萘磺酸或酒石酸。式(I)化合物還可以制備為N-氧化物。本發(fā)明的范圍包括所有這些衍生物。

一些式(I)化合物可以存在為光學(xué)異構(gòu)體的形式，例如非對(duì)映異構(gòu)體和所有比例的異構(gòu)體的混合物，例如外消旋混合物。本發(fā)明包括所有這些形式，尤其純的異構(gòu)體形式。例如，本發(fā)明包括在NR2和R3的連接點(diǎn)處的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。所述不同的異構(gòu)體形式可以通過常規(guī)方法彼此分離或拆分，或任何給定的異構(gòu)體可以通過常規(guī)的合成方法獲得或通過立體特異性或不對(duì)稱合成獲得。一些式(I)化合物還可以存在為多晶型物形式，且本發(fā)明包括這些多晶型物形式。

制備用于本發(fā)明的化合物的方法

使用常規(guī)有機(jī)合成制備本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。

合適的合成路線描述在以下通用反應(yīng)方案中。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，如果本文所述的取代基與本文所用合成方法不相容，則可以用對(duì)該反應(yīng)條件穩(wěn)定的合適保護(hù)基保護(hù)該取代基。可以在反應(yīng)順序中的必要或合適處除去該保護(hù)基以提供所需中間體或目標(biāo)化合物。

合適的保護(hù)基以及使用該合適的保護(hù)基保護(hù)和脫保護(hù)不同的取代基的方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的；其實(shí)例可以在T.Greene and P.Wuts,Protecting Groups in Chemical Synthesis(3rd ed.),John Wiley&Sons,NY(1999)中找到。在一些情況下，可以具體選擇取代基以在所使用的反應(yīng)條件下具有反應(yīng)性。在這些情況下，反應(yīng)條件將所選擇的取代基轉(zhuǎn)化為另一種取代基，其可用作中間體化合物或是目標(biāo)化合物中的所需取代基。

在本發(fā)明的其他方面中，提供了制備式(I)化合物(其中Z²為氮)和其藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物的方法，該方法包括將式(IIA)化合物與(i)溴乙酸乙酯反應(yīng)，然后環(huán)化和氧化，或與(ii)氧代乙酸乙酯反應(yīng)，然后環(huán)化，以得到式(IIIA)化合物：

在式(IIA)化合物中L為離去基團(tuán)或-A(Q¹)(Q²)，其中Q¹和Q²均連接至A上的相同碳原子，Q¹為H且Q²為N(R²⁰)R^2’，或Q¹和Q²一起形成乙二氧基或氧代，R²⁰為UR⁵或可以轉(zhuǎn)化為UR⁵的基團(tuán)，且R^2’為R²或可以轉(zhuǎn)化為R²的基團(tuán)，A、R^1b、R²、U和R⁵如式(I)中所定義，

之后任選或根據(jù)需要將L轉(zhuǎn)化為-A-NR²-UR⁵，互相轉(zhuǎn)化任何可變基團(tuán)，和/或形成其藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物。

反應(yīng)變化(i)為在堿性條件(例如碳酸鉀)下用溴乙酸乙酯的選擇性烷基化(在烷基化2,3-二氨基吡啶中的選擇性的實(shí)例請(qǐng)參見Yoshizawa,H.等人，Heterocycles(2004),63(8),1757-1763)、在強(qiáng)堿性條件(例如叔丁醇鉀)下加熱環(huán)化，然后在常規(guī)條件下用二氧化錳氧化(參見例如Smith,M.B.；March,J.M.Advanced Organic Chemistry,Wiley-Interscience 2001)。

反應(yīng)變化(ii)可以在甲苯中進(jìn)行，并且環(huán)化在強(qiáng)堿性條件(例如叔丁醇鉀)下實(shí)現(xiàn)。

L可為羥基，其可以通過常規(guī)方法(例如1,1,1-三-(乙?；趸?-1,1-二氫-1,2-苯碘酰-3-(1H)-酮)氧化為醛，用于在常規(guī)條件下用HA-N(R²⁰)R^2’還原烷基化(參見例如Smith,M.B.；March,J.M.Advanced Organic Chemistry,Wiley-Interscience 2001)。

或者，L可以為溴，其可以在常規(guī)條件下用HA-N(R²⁰)R^2’烷基化。

當(dāng)Q1和Q2一起形成乙二氧基時(shí)，該縮酮可以通過用例如HCl水溶液或三氟乙酸的常規(guī)酸水解處理轉(zhuǎn)化為酮(Q¹和Q²一起形成氧代)，并且通過常規(guī)還原烷基化用胺NHR^2’R²⁰轉(zhuǎn)化為NR²UR⁵(參見例如Nudelman,A.,et al,Tetrahedron 60(2004)1731-1748)，隨后轉(zhuǎn)化為所需取代的胺，或例如用三乙酰氧基硼氫化鈉在二氯甲烷/甲醇中直接用NHR²UR⁵轉(zhuǎn)化為NR²UR⁵。

方便地，R²⁰和R^2’之一為N保護(hù)基，例如叔丁氧基羰基、芐基氧基羰基或9-芴基甲基氧基羰基?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的多種方法(例如參見“Protective Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene and P.G.M.Wuts,Wiley-Interscience,1999)脫保護(hù)該取代基，例如用例如三氟乙酸或鹽酸的常規(guī)酸水解。本發(fā)明還提供了式(IIIA)化合物，其中L為-A-N(R²⁰)R^2’且R²⁰為氫。

其中R²⁰為氫的式(IIIA)的游離胺可以通過以下常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為NR²UR⁵：例如對(duì)于其中U為CO的化合物，用?；苌颮5COW的酰胺形成，或其中U為CH₂時(shí)，通過在堿的存在下用烷基鹵化物R⁵CH₂-鹵化物烷基化、用?；苌颮⁵COW?；?還原，或在常規(guī)條件下用醛R⁵CHO還原烷基化(參見例如Smith,M.B.；March,J.M.Advanced Organic Chemistry,Wiley-Interscience 2001)。含有所需R⁵基團(tuán)的合適試劑是已知化合物，或可以類似于已知化合物制備，參見例如WO02/08224、WO02/50061、WO02/56882、WO02/96907、WO2003087098、WO2003010138、WO2003064421、WO2003064431、WO2004002992、WO2004002490、WO2004014361、WO2004041210、WO2004096982、WO2002050036、WO2004058144、WO2004087145、WO06002047、WO06014580、WO06010040、WO06017326、WO06012396、WO06017468、WO06020561、WO2004/035569、WO2004/089947、WO2003082835、WO06002047、WO06014580、WO06010040、WO06017326、WO06012396、WO06017468、WO06020561、WO06132739、WO06134378、WO06137485、WO06081179、WO06081264、WO06081289、WO06081178、WO06081182、WO07016610、WO07081597、WO07071936、WO07115947、WO07118130、WO07122258、WO08006648、WO08003690、WO08009700、WO2007067511和EP0559285。

當(dāng)R⁵含有NH基團(tuán)時(shí)，可以在R⁵衍生物與式(IIB)的游離胺偶聯(lián)時(shí)，用合適的N保護(hù)基(例如叔丁氧基羰基、芐基氧基羰基或9-芴基甲基氧基羰基)對(duì)其進(jìn)行保護(hù)?？梢酝ㄟ^常規(guī)方法(例如通過三氟乙酸處理)脫除該保護(hù)基。

在本發(fā)明的其他方面中，提供了制備式(I)化合物(其中Z¹為氮)和其藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物的方法，該方法包括將式(IIB)化合物與(i)溴乙酸乙酯反應(yīng)，然后環(huán)化和氧化，或與(ii)氧代乙酸乙酯反應(yīng)，然后環(huán)化，以得到式(IIIB)化合物：

在式(IIB)化合物中L為離去基團(tuán)或-A(Q¹)(Q²)，其中Q¹和Q²均連接至A上的相同碳原子上，Q¹為H且Q²為N(R²⁰)R^2’，或Q¹和Q²一起形成乙二氧基或氧代，R²⁰為UR⁵或可以轉(zhuǎn)化為UR⁵的基團(tuán)，且R^2’為R²或可以轉(zhuǎn)化為R²的基團(tuán)，A、R^1a、R²、U和R⁵如式(I)中所定義，

之后任選或根據(jù)需要將L轉(zhuǎn)化為-A-NR²-UR⁵，互相轉(zhuǎn)化任何可變基團(tuán)，和/或形成其藥學(xué)上可接受的鹽和/或N-氧化物。

反應(yīng)和隨后轉(zhuǎn)換如制備式(IIIA)化合物那樣進(jìn)行。

本發(fā)明還提供了式(IIIB)化合物，其中L為-A-N(R²⁰)R^2’且R²⁰為氫。

式(IIB)化合物(L＝-A(Q¹)(Q²))可以通過方案1制備：

方案1

可以將氯吡啶(2)與烯丙基胺反應(yīng)，得到(3)，然后將其用溴環(huán)化，在水解后處理后生成吡啶酮(4)(參見Schmid,S et al,Synthesis,2005(18),3107。用H-A(Q¹)(Q²)置換得到(5)，并且在Pd/C上氫化(5)得到胺(6)。

式(IIIA)化合物可以通過方案2，使用式(IVA)化合物制備：

起始原料可以通過用甲醇鈉還原來自方案1的化合物(3)，然后用氯化錫(II)或連二亞硫酸鈉還原而制備。用丙炔酸酯對(duì)(IVA)進(jìn)行環(huán)化得到(19)(方案2)(參見Kalyanam,N.et al,Indian Journal of Chemistry,Section B:Organic Chemistry Including Medicinal Chemistry(1992),31B(7),415-420)。標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)得到(20)，然后用溴環(huán)化(參見Schmid,S et al,Synthesis,2005(18),3107)，可以得到溴甲基類似物(21)，可以將其用TFA脫保護(hù)得到(22)，并且用過氧化氫或氧化錳(II)氧化，得到(23)(參見Sakata,G.,Heterocycles(1985),23(1),143-51)。

方案2

式(I)化合物(其中Z¹和Z²均為CH)可以通過方案3制備：

方案3

L為-A(Q¹)(Q²)

(a)正丁基鋰，二溴乙烷(b)三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)，N,N-二環(huán)己基甲胺，雙(三叔丁基膦)鈀(0)，丙炔酸丁酯(c)氫，鈀/碳，然后酸處理(HCl)(d)參見下文(e)胺H-A(Q¹)(Q²)，加熱(f)甲烷磺酸酐，三乙胺，然后KI(g)2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(h)i)DMF，加熱，ii)甲烷磺酰氯，三乙胺，iii)胺H-A(Q¹)(Q²)，加熱。

用正丁基鋰金屬化(1)(市售可得)，然后用二溴乙烷溴化，得到溴吡啶衍生物(2)(該類型的金屬化化學(xué)的實(shí)例請(qǐng)參見Zhichkin，P.et al，Synlett(2006)，(3)，379-382)。使用鈀催化對(duì)(2)進(jìn)行Heck反應(yīng)(該類型的Heck反應(yīng)中的催化的實(shí)例請(qǐng)參見Sydorenko,N,et al,Organic&Biomolecular Chemistry(2005),3(11),2140-2144)，得到丙烯酸酯(3)。氫化(3)的雙鍵，然后酸處理除去新戊酸酯殘基并實(shí)現(xiàn)內(nèi)酰胺化，得到雙環(huán)內(nèi)酰胺(4)?？梢砸栽S多方法實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為環(huán)氧化物(5)：在堿性條件下與表氯環(huán)氧丙烷反應(yīng)得到外消旋環(huán)氧化物。與市售可得的R或S-間硝基苯磺酸縮水甘油酯((2R)-或(2S)-3-硝基苯磺酸2-環(huán)氧乙烷基甲基酯)或(2R)-或(2S)-4-甲基苯磺酸2-環(huán)氧乙烷基甲基酯反應(yīng)(用堿例如氫化鈉或叔丁醇鉀)，得到相應(yīng)的手性環(huán)氧化物。或者，在堿性條件下用烯丙基溴烯丙基化，得到相應(yīng)的N-烯丙基材料，其可以在標(biāo)準(zhǔn)非手性或手性條件下氧化，得到相應(yīng)的非手性或手性環(huán)氧化物。可以用胺H-A(Q¹)(Q²)(例如4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯)通過加熱在DMF中開環(huán)環(huán)氧化物(5)，得到(6)，然后用甲烷磺酸酐將其環(huán)化，得到(7)?；蛘撸h(huán)氧化物(5)可以通過加熱直接開環(huán)和環(huán)化，得到(7)(L＝OH)?？梢酝ㄟ^用2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)氧化為(8)。隨后可以如本文一般所述進(jìn)行轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。具體地，將L轉(zhuǎn)化為A(Q¹)(Q²)可以在(7)或(8)上進(jìn)行。作為方案3的其他變化，環(huán)氧化物(5)可以由(2)制備：首先通過引入合適的環(huán)氧化物前體基團(tuán)(-CH₂-CHOH-CH₂OH，作為環(huán)化酯保護(hù))，然后進(jìn)行步驟(b)和(c)。

本發(fā)明還提供了來自方案3的式(8)化合物，其中L為-A-N(R²⁰)R^2’且R²⁰為氫。

式(I)化合物(其中Z²為N)可以備選地通過方案4制備：

方案4

(a)2-氨基-1,3-丙二醇(b)二甲氧基丙烷，對(duì)甲苯磺酸(c)氫，鈀/碳(d)溴乙酸乙酯，碳酸鉀(e)氫化鈉(f)氯甲酸芐基酯(g)酸水溶液(h)甲烷磺酸酐(i)氫，鈀/碳(j)MnO₂

硝基吡啶(1)與2-氨基-1,3-丙二醇反應(yīng)，得到二醇(2)，其保護(hù)為縮醛(3)。還原硝基得到胺(4)，將其烷基化，得到酯(5)?？梢杂脷浠c實(shí)現(xiàn)環(huán)化，得到(6)。將其用芐氧羰基(CBz)基團(tuán)保護(hù)，得到(7)，然后斷裂得到二醇(8)。用甲烷磺酸酐環(huán)化，得到甲磺酸酯(9)，然后氫解CBz基團(tuán)，得到(10)，隨后用氧化錳(II)氧化，得到重要的二酮中間體甲磺酸酯(11)?？梢愿淖儾襟E順序以經(jīng)過(7a)。甲磺酸酯(11)可以如本文一般所述轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。

手性式(I)化合物(其中Z²為N)可以備選地通過方案4a制備：

方案4a

Bn＝芐基

(a)EtOH，回流，(b)TBS-Cl，(c)鋅，乙酸，(d)溴乙酸乙酯，碳酸鉀(e)NaH，(f)氫，鈀/碳(g)MnO₂，(h)甲烷磺酸酐(i)TFA，(j)甲烷磺酸酐

硝基吡啶(1)與手性胺(2)反應(yīng)，得到中間體(3)。用叔丁基-二甲基氯硅烷保護(hù)(3)，得到(4)。還原硝基得到胺(5)，將其烷基化，得到酯(6)。(6)的環(huán)化可以用氫化鈉然后用氫氣在鈀/碳催化劑上處理實(shí)現(xiàn)，得到中間體(7)。用氧化錳(II)氧化并用甲烷磺酸酐處理，得到(8)。該中間體可以用TFA脫保護(hù)，得到(9)，并且與甲烷磺酸酐反應(yīng)，得到(10)。然后可以如本文一般所述將形成的甲磺酸酯(10)轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。

式(I)化合物(其中Z¹為N)可以備選地通過方案5制備：

方案5

L為-A(Q¹)(Q²)

(a)NH₃/MeOH(b)氫，鈀/碳(c)溴乙酸乙酯，碳酸鉀(d)叔丁醇鉀(e)CBzCl(f)NaH，(S)-間硝基苯磺酸縮水甘油酯(g)DMF，加熱(h)甲烷磺酰氯(i)胺H-A(Q¹)(Q²)，加熱(j)氫，鈀/碳，然后MnO₂

硝基吡啶(1)與氨水反應(yīng)，得到硝基-吡啶(2)，其還原為雙-苯胺(3)。用溴乙酸乙酯烷基化，然后用叔丁醇鉀環(huán)化，得到(5)。將其用羧基芐基保護(hù)，得到(6)，然后將其與市售可得的S-間硝基苯磺酸縮水甘油酯((2S)-3-硝基苯磺酸2-環(huán)氧乙烷基甲基酯)反應(yīng)，得到(7)。在熱條件下環(huán)化得到(8)。甲磺?；⒂煤线m的胺置換、氫解(10)中的CBz基團(tuán)，隨后用氧化錳(II)氧化，得到(13)?；蛘撸瑲浣釩Bz基團(tuán)，得到(10)，隨后用氧化錳(II)氧化，然后甲磺?；陀煤线m的胺置換，也得到(13)。將其如本文一般所述轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。

式(I)化合物(其中Z¹和Z²均為N)可以通過方案6制備：

方案6

(a)氯乙酰氯(b)氨水(c)Boc-甘氨酸(d)HCl

通過用氯乙酰氯?；瘜⒒衔?1)(Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters(2005),15(24),5446-5449)轉(zhuǎn)化為(2)，然后用氨水處理，得到(4)。或者，(1)可以通過與Boc-甘氨酸偶聯(lián)轉(zhuǎn)化為(3)，然后通過酸性脫保護(hù)，得到(4)。然后，化合物(4)可以通過參照方案5中轉(zhuǎn)化化合物(5)的方法轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。

R^1a、R^1b、R²、A和R⁵的相互轉(zhuǎn)化是常規(guī)的。在含有任選保護(hù)的羥基的化合物中，合適的常規(guī)羥基保護(hù)基(其可以在不干擾分子其余部分的情況下脫除)包括?；屯榛杌?。通過常規(guī)方法脫除N-保護(hù)基。

R^1a和R^1b基團(tuán)的相互轉(zhuǎn)化可以常規(guī)地在式(I)化合物上進(jìn)行。例如，通過用鋰和二苯基膦(一般方法描述在Ireland et al,J.Amer.Chem.Soc.,1973,7829中)或HBr處理，R^1a或R^1b甲氧基可以轉(zhuǎn)化為R^1a或R^1b羥基。用帶有離去基團(tuán)(例如鹵素)的合適的烷基衍生物烷基化羥基，得到R^1a或R^1b取代的烷氧基。R^1a或R^1b鹵素(例如溴)可以通過用氰化亞銅(I)在N,N-二甲基甲酰胺中處理轉(zhuǎn)化為氰基。R^1a或R^1b羧基可以通過常規(guī)水解R^1a或R^1b氰基獲得，并且通過常規(guī)的還原將羧基轉(zhuǎn)化為羥基甲基。

式HA-N(R²⁰)R^2’化合物是已知化合物，或可以類似于已知化合物進(jìn)行制備，參見，例如WO2004/035569、WO2004/089947、WO02/08224、WO02/50061、WO02/56882、WO02/96907、WO2003087098、WO2003010138、WO2003064421、WO2003064431、WO2004002992、WO2004002490、WO2004014361、WO2004041210、WO2004096982、WO2002050036、WO2004058144、WO2004087145、WO2003082835、WO2002026723、WO06002047和WO06014580、WO06134378、WO06137485、WO07016610、WO07081597、WO07071936、WO07115947、WO07118130、WO07122258、WO08006648、WO08003690和WO08009700。

制備式(I)化合物的其他細(xì)節(jié)詳見實(shí)施例。

藥物組合物和制劑

根據(jù)本發(fā)明的抗菌劑化合物可以通過與其它抗菌劑/抗結(jié)核化合物類似的方式配制用于以任何方便的方式給藥用于人或獸醫(yī)學(xué)。

本發(fā)明的藥物組合物可以配制用于通過任何途徑給藥，并且包括適于口服、局部或腸胃外使用的形式的那些，并且可以用于治療細(xì)菌感染，包括哺乳動(dòng)物(包括人)的結(jié)核病。

組合物可以是片劑、膠囊、粉劑、顆粒劑、錠劑、栓劑、乳膏或液體制劑的形式，例如口服或無菌腸胃外溶液或懸浮液。

本發(fā)明的局部制劑可以作為例如軟膏劑、乳膏或洗劑、眼用軟膏和滴眼劑或滴耳劑、浸漬敷料和氣霧劑，并且可以含有合適的常規(guī)添加劑，例如防腐劑，幫助藥物滲透的溶劑，在軟膏和乳膏中的軟化劑。

制劑還可以含有相容的常規(guī)載體，例如乳膏或軟膏劑基質(zhì)和用于洗劑的乙醇或油醇。此類載體可以以制劑的約1％至最多約98％存在。更通常地，它們將構(gòu)成高達(dá)約80％的制劑。

用于口服給藥的片劑和膠囊可以是單位劑量呈現(xiàn)形式，并且可以含有常規(guī)賦形劑，例如粘合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；壓片潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，例如馬鈴薯淀粉；或可接受的潤濕劑如十二烷基硫酸鈉。片劑可以根據(jù)通常藥物實(shí)踐中熟知的方法包衣?？诜后w制劑可以是例如水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿或酏劑的形式，或者可以作為用于在使用前用水或其它合適的載體重構(gòu)的干燥產(chǎn)品。這樣的液體制劑可以含有常規(guī)的添加劑，例如懸浮劑，例如山梨糖醇、甲基纖維素、葡萄糖糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇單油酸酯、阿拉伯膠；非水性載體(其可包括食用油)，例如杏仁油，油性酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，以及如果需要，常規(guī)調(diào)味劑或著色劑。

栓劑將含有常規(guī)的栓劑基質(zhì)，例如可可脂或其它甘油酯。

對(duì)于腸胃外給藥，使用化合物和無菌載體(優(yōu)選水)制備流體單位劑型。取決于所使用的載體和濃度，化合物可以懸浮或溶解在載體中。在制備溶液時(shí)，化合物可以溶解在注射用水中并過濾滅菌，然后填充到合適的小瓶或安瓿中并密封。

有利地，試劑例如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑可以溶解在載體中。為了提高穩(wěn)定性，可以在填充到小瓶中之后將組合物冷凍，并在真空下除去水。然后將干燥的凍干粉末密封在小瓶中，并且可以提供相伴小瓶的注射用水，以在使用前重構(gòu)液體。以基本上相同的方式制備胃腸外懸浮液，不同的是將化合物懸浮在載體中而不是溶解，并且不能通過過濾進(jìn)行滅菌?；衔锟梢栽趹腋∮跓o菌載體中之前通過暴露于環(huán)氧乙烷來滅菌。有利地，組合物中包括表面活性劑或潤濕劑以促進(jìn)化合物的均勻分布。

此外，所給藥的本發(fā)明的化合物或組合物的量將根據(jù)患者和給藥方式而變化，并且可以是任何有效量。

給藥本發(fā)明的化合物和/或組合物的治療方案也可由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地確定。所給藥的本發(fā)明的化合物和/或組合物的量可以在寬范圍內(nèi)變化，以在單位劑量中提供基于患者體重的每天有效量以實(shí)現(xiàn)期望的效果。

根據(jù)給藥方法，組合物可以含有0.1重量％，優(yōu)選10-60重量％的活性物質(zhì)。當(dāng)組合物包含劑量單位時(shí)，每個(gè)單位優(yōu)選含有50-1000mg的活性成分。

用于成人治療的劑量優(yōu)選為100-3000mg/天，例如1500mg/天，取決于給藥的途徑和頻率。這樣的劑量對(duì)應(yīng)于每天約1.5至約50mg/kg。合適地，劑量為每天5-30mg/kg。

具體地，本發(fā)明組合物作為單位劑量呈現(xiàn)，優(yōu)選每日服用1至5次，最優(yōu)選每日一次，以實(shí)現(xiàn)期望的效果。

常規(guī)的給藥方法可以適用于本發(fā)明。

取決于所進(jìn)行的治療，本發(fā)明的化合物和/或組合物可以口服、血管內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、肌內(nèi)或局部給藥。優(yōu)選地，所述組合物適合于口服給藥。

根據(jù)本發(fā)明制備的化合物和/或組合物可用于治療溫血?jiǎng)游?，例如包括人的哺乳?dòng)物。

式(I)化合物可以是本發(fā)明組合物中的唯一治療劑或與包括抗結(jié)核化合物的其它抗菌劑組合。如果其它抗菌劑是β-內(nèi)酰胺，則也可以使用β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。

式(I)化合物可用于治療由廣泛范圍的生物體引起的細(xì)菌感染，包括革蘭氏陰性和革蘭氏陽性生物體，例如上呼吸道和/或下呼吸道感染、皮膚和軟組織感染，和/或尿道感染。式(I)化合物還可以用于治療由結(jié)核分枝桿菌引起的肺結(jié)核。一些式(I)化合物可以對(duì)多于一種生物體具有活性。這可以通過本文所述的方法確定。

治療方法

本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥如本文所述的新的三環(huán)含氮化合物和相應(yīng)的藥物組合物。

一方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥有效量的式(I)化合物：

其中：

Z¹和Z²獨(dú)立地選自CH和N；

R^1a和R^1b獨(dú)立地選自氫；鹵素；氰基；(C_1-6)烷基；(C_1-6)烷基硫基；三氟甲基；三氟甲氧基；羧基；任選被(C_1-6)烷基或(C_1-6)烷氧基-取代的(C_1-6)烷基取代的羥基；(C_1-6)烷氧基-取代的(C_1-6)烷基；羥基(C_1-6)烷基；氨基，其任選在N上被一個(gè)或兩個(gè)(C_1-6)烷基、甲?；?、(C_1-6)烷基羰基或(C_1-6)烷基磺?；〈?；和氨基羰基，其中所述氨基任選被(C_1-4)烷基取代；

條件是當(dāng)Z²或Z¹分別為N時(shí)，R^1a和R^1b為H；

R²為氫或(C_1-4)烷基，或與R⁶一起形成如下定義的Y；

A為基團(tuán)(i)：

其中：R³如R^1a和R^1b所定義，或?yàn)檠醮襫為1或2：

或A為基團(tuán)(ii)

W¹、W²和W³為CR⁴R⁸；

或W²和W³為CR⁴R⁸且W¹表示W(wǎng)³和N之間的鍵；

X為O、CR⁴R⁸或NR⁶；

一個(gè)R⁴如R^1a和R^1b所定義，且剩余的R⁴和R⁸為氫，或一個(gè)R⁴和R⁸一起為氧代，且剩余的R⁴和R⁸為氫；

R⁶為氫或(C_1-6)烷基；或與R²一起形成Y；

R⁷為氫；鹵素；任選被(C_1-6)烷基取代的羥基；或(C_1-6)烷基；

Y為CR⁴R⁸CH₂；CH₂CR⁴R⁸；(C＝O)；CR⁴R⁸；CR⁴R⁸(C＝O)；或(C＝O)CR⁴R⁸；

或當(dāng)X為CR⁴R⁸時(shí)，R⁸和R⁷一起代表鍵；

U選自CO和CH₂，且

R⁵為任選取代的雙環(huán)碳環(huán)或雜環(huán)系統(tǒng)(B)：

各環(huán)中含有至多四個(gè)雜原子，其中

(a)和(b)環(huán)的至少一個(gè)環(huán)為芳香環(huán)；

當(dāng)X¹為芳香環(huán)的一部分時(shí)，X¹為C或N，或當(dāng)X¹為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，X¹為CR¹⁴；

當(dāng)X²為芳香環(huán)或非芳香環(huán)的一部分時(shí)，X²為N、NR¹³、O、S(O)_x、CO或CR¹⁴，或當(dāng)X²為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，X²還可為CR¹⁴R¹⁵；

X³和X⁵獨(dú)立地為N或C；

Y¹為0至4個(gè)原子的連接基，其中當(dāng)各原子為芳香環(huán)或非芳香環(huán)的一部分時(shí)，各原子獨(dú)立地選自N、NR¹³、O、S(O)_x、CO和CR¹⁴，或當(dāng)各原子為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，各原子還可為CR¹⁴R¹⁵；

Y²為2至6個(gè)原子的連接基，其中當(dāng)Y²的各原子為芳香環(huán)或非芳香環(huán)的一部分時(shí)，Y²的各原子獨(dú)立地選自N、NR¹³、O、S(O)_x、CO和CR¹⁴，或當(dāng)Y²的各原子為非芳香環(huán)的一部分時(shí)，Y²的各原子還可以為CR¹⁴R¹⁵；

各個(gè)R¹⁴和R¹⁵獨(dú)立地選自：H；(C_1-4)烷基硫基；鹵素；羧基(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷氧基羰基；(C_1-4)烷基羰基；(C_1-4)烷氧基(C_1-4)烷基；羥基；羥基(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷氧基；硝基；氰基；羧基；氨基或氨基羰基，其任選被(C_1-4)烷基單-或二-取代；或

R¹⁴和R¹⁵可一起表示氧代；

各個(gè)R¹³獨(dú)立地為H；三氟甲基；任選被羥基、(C_1-6)烷氧基、(C_1-6)烷基硫基、鹵素或三氟甲基取代的(C_1-4)烷基；(C_2-4)烯基；(C_1-4)烷氧基羰基；(C_1-4)烷基羰基；(C_1-6)烷基磺?；话被驶?，其中所述氨基任選被(C_1-4)烷基單或二取代；且

各個(gè)X獨(dú)立地為0、1或2；或

或其藥學(xué)上可接受的鹽。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中在式I化合物中：

(i)Z¹和Z²均為CH；

(ii)Z¹為N和Z²為CH；或

(iii)Z¹為CH和Z²為N。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中R^1a為氫且R^1b為氫，如式I化合物中所定義。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中在式I化合物中：

A為(ia)、n為1且R³為3-位的H或羥基；

A為(ii)、X為CR⁴R⁸、R⁸為H且R⁴為H或OH；或

A為(ii)、X為O、R⁷為H且W¹、W²和W³各為CH₂。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中A為哌啶-4-基或吡咯烷-4-基甲基，如式I化合物中所定義。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中U為CH₂，如式I化合物中所定義。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中在式I化合物中：

R⁵為具有8-11個(gè)環(huán)原子且其中包括2-4個(gè)雜原子的芳香雜環(huán)(B)，其中至少一個(gè)雜原子為N或NR¹³，其中Y²包含2-3個(gè)雜原子，其中一個(gè)為S且1-2個(gè)為N，并且一個(gè)N連接至X³，或

所述雜環(huán)(B)具有環(huán)(a)芳香環(huán)，選自任選取代的苯并、吡啶并、噠嗪并和嘧啶并，和環(huán)(b)非芳香環(huán)，且Y²具有3-5個(gè)原子且其中包括至少一個(gè)雜原子，并且O、S、CH₂或NR¹³連接至X⁵，其中R¹³不是氫，或者NHCO經(jīng)N連接至X³，或O、S、CH₂或NH連接至X³。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中在式I化合物中：

R⁵選自：

3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基；

3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基；

2,3-二氫-[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基；

[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基；

6-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基；

2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基；

3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基；

5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基；

5-氰基-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-7-基；或

2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環(huán)己二烯-6-基。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及所述方法，其中在式I化合物中：A選自：

1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(5,6,7,8-四氫-3-異喹啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

7-[({1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基)甲基]-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈；

1-[(4-{[(3-氧代-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2S)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2S)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

2-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-4-甲基-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-甲基-4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(2R)-2-({4-[(2,1,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-[(4-{[(7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-[1,4]氧硫雜環(huán)庚二烯并[2,3-c]吡啶-8-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-[(4-{[(3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(4-氯-7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(1,2,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1-苯并呋喃-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-({4-[(2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(2R)-2-[(4-{[(8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

7-{[(1-{[(2R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基]甲基}-4-哌啶基)氨基]甲基}-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈；

(2R)-2-({4-[(2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[([1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[((2S)-2-{[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]甲基}-4-嗎啉基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-{[(2S)-2-({[(7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(2R)-2-({4-[([1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-色烯-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1-苯并呋喃-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-色烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(2R)-2-[(4-{[(5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-{[(2S)-2-({[(7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[((3S)-3-{[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]甲基}-1-吡咯烷基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

7-{[(1-{[(1R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基]甲基}-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈；

(1R)-1-[(4-{[(7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(2-氧代-2H-色烯-7-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(2-氧代-2H-色烯-7-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-[(4-{[(2-氧代-2H-色烯-7-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；或

1-[(4-{[(3-氧代-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮；

或表1化合物的游離堿；

或其藥學(xué)上可接受的鹽。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥藥物組合物，其包含有效量的式(I)化合物：

其中：

取代基A、R1a、R1b、R2、R5、Z1和Z2如權(quán)利要求1所定義；

和藥學(xué)上可接受的賦形劑。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥有效量的以下化合物

式(IIIA)：

式(IIIB)：

式(8)：

其中：

L為-A-N(R²⁰)R^2’，其中R²⁰為氫、R^2’為R²或可以轉(zhuǎn)化為R²的基團(tuán)，且A、R²、R^1a和R^1b如權(quán)利要求1所定義。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥藥物組合物，其包含有效量的以下化合物：

式(IIIA)：

式(IIIB)：

式(8)：

其中：

L為-A-N(R²⁰)R^2’，其中R²⁰為氫、R^2’為R²或可以轉(zhuǎn)化為R²的基團(tuán)，且A、R²、R^1a和R^1b如權(quán)利要求1所定義；

和藥學(xué)上可接受的賦形劑。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥有效量的如下所示的化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥有效量的如下所示的化合物：

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥藥物組合物，其包含：

化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽；

和藥學(xué)上可接受的賦形劑。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥有效量的化合物(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮：

其藥學(xué)上可接受的鹽。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥有效量的化合物(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮：

在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種治療淋病奈瑟球菌感染的方法，其包括向需要的受試者給藥藥物組合物，其包含：

化合物(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮：

其藥學(xué)上可接受的鹽；

和藥學(xué)上可接受的賦形劑。

闡述以下實(shí)施例用于闡明本發(fā)明，但是并不旨在以任何方式限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例

以下實(shí)施例闡明了本發(fā)明。這些實(shí)施例并不旨在限定本發(fā)明的范圍，而是為本領(lǐng)域技術(shù)人員提供制備和使用本發(fā)明的化合物、組合物和方法的指導(dǎo)。雖然具體公開了本發(fā)明的實(shí)施方案，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以對(duì)其進(jìn)行各種修改和改進(jìn)。

以下實(shí)施例闡明了具體式(I)化合物的制備和具體式(I)化合物針對(duì)多種細(xì)菌生物體(包括淋病奈瑟球菌)的活性。

實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)

通用部分

實(shí)施例中的縮寫：

MS＝質(zhì)譜

ES＝電噴霧質(zhì)譜

LCMS/LC-MS＝液相色譜質(zhì)譜

HPLC＝高效液相色譜

rt＝室溫

Rf＝保留因子

也在此提供了具體試劑的縮寫。TFA是指三氟乙酸，THF是指四氫呋喃，Pd/C是指鈀/碳催化劑，DCM是指二氯甲烷，MeOH是指甲醇，DMF是指二甲基甲酰胺，EtOAc是指乙酸乙酯，DDQ是指2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌，NaBH(OAc)₃是指三乙酰氧基硼氫化鈉，Pd₂(dba)₃是指三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)。

質(zhì)子核磁共振(¹H NMR)波譜在400或250MHz記錄，化學(xué)位移報(bào)道為內(nèi)標(biāo)四甲基硅烷(TMS)低場方向的百萬分率(ppm)。NMR數(shù)據(jù)的縮寫如下：s＝單峰，d＝雙重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，dd＝兩組雙重峰，dt＝兩組三重峰，td＝三組雙重峰，app＝表觀的，br＝寬峰。J表示NMR偶合常數(shù)，測(cè)得為赫茲。CDCl₃為氘代氯仿且CD₃OD為四氘代甲醇。使用電噴霧(ES)離子化技術(shù)獲得質(zhì)譜。所有溫度均以攝氏度報(bào)道。

MP-碳酸鹽是指大孔的碳酸甲基聚苯乙烯三乙基銨(triethylammonium methylpolystyrene carbonate)(Argonaut Technologies)。A21是弱堿性、具有烷基胺官能團(tuán)的大網(wǎng)絡(luò)樹脂，表示Rohm&Haas Co的注冊(cè)商標(biāo)。

AD mixα通過混合鋨酸鉀(K₂OsO₄.2H₂O)(0.52g)、(3a,9R,3”'a,4”'b,9”'R)-9,9'-[1,4-酞嗪二基雙(氧基)]雙[6'-(甲基氧基)-10,11-二氫脫氧辛可寧][(DHQ)₂PHAL](5.52g)，然后加入鐵氰化鉀[K₃Fe(CN)₆](700g)和碳酸鉀粉末(294g)制備。將該混合物在混合器中攪拌30分鐘。如此提供大約1kg的AD mixα，其可從Aldrich市售獲得。參見K.Barry Sharpless et al,J.Org.Chem.,1992,57(10),2771。AD mixβ是用(9S,9”'S)-9,9'-[1,4-酞嗪二基雙(氧基)]雙[6'-(甲基氧基)-10,11-二氫脫氧辛可寧][(DHQD)₂PHAL]制備的相應(yīng)混合物。當(dāng)提及AD mixα/β時(shí)，指的是α和β的1:1混合物。

是由酸-洗滌的硅藻土組成的過濾助劑，是Manville Corp.，Denver，Colorado的商標(biāo)。

SCX柱是含有強(qiáng)陽離子交換樹脂(苯磺酸)的離子交換柱，由Varian，USA供應(yīng)。

Chiralpak IA和Chiralpak AS-H是基于多糖的手性HPLC柱(Chiral Technologies Inc.)。Chiralpak AS-H柱包括直鏈淀粉三[(S)-α-甲基芐基氨基甲酸酯]，其涂覆在5μm硅膠上。Chiralpak IA柱包括硅膠制備柱(5μm粒度，21mm ID x 250mm L)，其固定有直鏈淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)。Chiralpak AD和AD-H柱包括硅膠制備柱(5μm粒度AD-H和10μm粒度AD，21mm ID x 250mm L；20μM粒度AD，101mm ID x 250mm L)，其涂覆有直鏈淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiral Technologies USA)。測(cè)量的保留時(shí)間取決于色譜操作的精確條件。當(dāng)在下面的實(shí)施例中引用時(shí)，它們指示洗脫順序。Kromasil 5微米C-18柱(21mm x 250mm)包括化學(xué)連接至5微米多孔硅膠的十八基硅烷。

本領(lǐng)域化學(xué)人員將理解，提及的以與其他制備相似的方式或通過其他制備的通用方法進(jìn)行的制備，可以包括常規(guī)參數(shù)的變化，例如時(shí)間、溫度、后處理?xiàng)l件、試劑量的少量變化等。

涉及金屬氫化物(包括氫化鋰、氫化鋁鋰、二異丁基氫化鋁、氫化鈉、硼氫化鈉和三乙酰氧基硼氫化鈉)的反應(yīng)在氬氣或其他惰性氣體中進(jìn)行。

實(shí)施例1 1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽

(a)6-氯-3-硝基-N-2-丙烯-1-基-2-吡啶胺

通過改進(jìn)Schmid,S.,et al,Synthesis(2005),(18),3107-3118的方法進(jìn)行制備。在氬氣中，將2,6-二氯-3-硝基吡啶(8.0g，41.45mmol)在無水二氯甲烷(180ml)中的溶液冷卻至-15℃。加入三乙胺(6.0ml，43mmol)，然后分小批經(jīng)3小時(shí)加入烯丙基胺(3.23ml，43mmol)，保持溫度為-15℃。將反應(yīng)混合物攪拌過夜，期間溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)混合物用0.2M檸檬酸水溶液(100ml)、飽和NaHCO₃水溶液(100ml)洗滌，通過疏水砂芯漏斗，蒸發(fā)得到黃色油狀物，將其通過硅膠色譜純化，用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到黃色固體(7.49g，85％)。

C₈H₈ClN₃O₂計(jì)算值213，MS(ES+)m/z 214，216(MH⁺)。

(b)3-(溴甲基)-8-硝基-2,3-二氫咪唑并[1,2-a]吡啶-5(1H)-酮

通過改進(jìn)Schmid,S.,et al,Synthesis(2005),(18),3107-3118的方法進(jìn)行制備。將6-氯-3-硝基-N-2-丙烯-1-基-2-吡啶胺(20g，93.6mmol)在氯苯(500ml)中的溶液用溴(4.75ml，92.7mmol)在氯苯(100ml)中的溶液滴加處理，經(jīng)4.5小時(shí)，保持T<26℃，需要時(shí)冷卻。將粘稠懸浮液在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，并用己烷(200ml)稀釋，然后將反應(yīng)混合物倒入己烷(1000ml)中。15分鐘后，將橙色沉淀通過過濾收集，并用己烷(250ml)洗滌，得到26.6g橙色固體(3-(溴甲基)-5-氯-8-硝基-2,3-二氫咪唑并[1,2-a]吡啶-1-鎓溴化物)。將該中間體經(jīng)45分鐘加入至快速攪拌的飽和NaHCO₃水溶液(1000ml)和乙酸乙酯(500ml)的混合物中。將該鮮紅色混合物攪拌1小時(shí)，用乙酸乙酯(200ml)稀釋，并分離各層。將水層用乙酸乙酯(200ml)洗滌，并將有機(jī)萃取物合并、干燥(無水硫酸鈉)、過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為棕色固體(18.3g，含40％6-溴-3-(溴甲基)-8-硝基-2,3-二氫咪唑并[1,2-a]吡啶-5(1H)-酮)。

C₈H₈BrN₃O₃計(jì)算值273，MS(ES+)m/z 274，276(MH⁺)。

(c){1-[(8-硝基-5-氧代-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將3-(溴甲基)-8-硝基-2,3-二氫咪唑并[1,2-a]吡啶-5(1H)-酮和6-溴-3-(溴甲基)-8-硝基-2,3-二氫咪唑并[1,2-a]吡啶-5(1H)-酮(18.2g)的3:2混合物在乙腈(900ml)中的懸浮液用4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(26.6g，132.8mmole)，然后用吡啶(10.7ml，132mmol)處理。將混合物在60℃在氬氣中加熱17小時(shí)，然后在70℃加熱2小時(shí)，冷卻和蒸發(fā)至大約一半體積。將該粘稠的黃色沉淀通過過濾除去，并用乙醚充分洗滌。將濾液蒸發(fā)至干，并將殘余物在氯仿(500ml)和水(200ml)之間分配。將未溶解的物質(zhì)通過過濾除去，并用氯仿(100ml)洗滌。分離濾液中的各層，并將水層用氯仿(200ml)洗滌。將合并的有機(jī)萃取液通過疏水砂芯漏斗，并蒸發(fā)得到深黃色膠狀物，將其色譜純化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液，然后用0-30％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脫，得到黃色固體(10.98g)。

C₁₈H₂₇N₅O₅計(jì)算值393，MS(ES+)m/z 394(MH⁺)。

(d){1-[(3,8-二氧代-1,2,5a,8b-四氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基)甲基]-4-哌啶基}碳酸1,1-二甲基乙基酯

將{1-[(8-硝基-5-氧代-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(2.0g，5.08mmol)和無水碳酸鉀(700mg，5.06mmol)在無水乙醇(150ml)中的懸浮液在常壓在10％Pd/C(1g)的存在下氫化4小時(shí)。將反應(yīng)經(jīng)Keiselguhr過濾，經(jīng)乙醇(100ml)洗滌，并將深紫色混合物通過用無水碳酸鉀(1.4g，10mmol)和溴乙酸乙酯(550ul，4.95mmol)處理而立即反應(yīng)，并在室溫?cái)嚢?0小時(shí)，然后在60℃加熱30分鐘。45分鐘后，加入另外0.25ml溴乙酸乙酯，并在60℃加熱1.5小時(shí)。加入0.25ml溴乙酸乙酯，并將反應(yīng)再次在60℃加熱1小時(shí)。將反應(yīng)經(jīng)Keiselguhr過濾和蒸發(fā)至干。將混合物與氯仿共沸，然后色譜純化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液，然后用0-20％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脫。用0-50％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脫二次純化，得到深色膠狀物(37mg，1.6％)。

C₂₀H₂₇N₅O₂計(jì)算值401，MS(ES+)m/z 402(MH⁺)。

(e)1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5a,8b-四氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮

將{1-[(3,8-二氧代-1,2,5a,8b-四氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(37mg，0.092mmol)在無水二氯甲烷(2ml)中的溶液用TFA(1ml)處理，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)，蒸發(fā)至干，與無水二氯甲烷混合，并蒸發(fā)得到深色膠狀物。將該膠狀物溶于1:1二氯甲烷:甲醇(10ml)中，并用MP-碳酸鹽樹脂(600mg)處理，并攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)過濾，并將樹脂用1:1二氯甲烷:甲醇(30ml)洗滌，并將濾液蒸發(fā)至干。在5gSCX柱上純化，用甲醇至2N氨的甲醇溶液梯度純化，得到產(chǎn)物，其為膠狀物。進(jìn)一步從乙醚蒸發(fā)得到產(chǎn)物，其為棕色固體(22.8mg，82％)。

C₁₅H₁₉N₅O₂計(jì)算值301，MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

(f)標(biāo)題化合物

將1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5a,8b-四氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(22.8mg，0.0757mmol)在無水二氯甲烷(3ml)和無水甲醇(0.6ml)中的溶液用2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(12.5mg，0.076mmol)(其合成請(qǐng)參見WO2004058144實(shí)施例2(c)或WO03/087098實(shí)施例19(d))處理，并在氬氣中攪拌15分鐘，然后用三乙酰氧基硼氫化鈉(48mg，0.226mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?7小時(shí)。然后將反應(yīng)用另一部分2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(2mg)和三乙酰氧基硼氫化鈉(10mg)處理，并將混合物攪拌4小時(shí)，用飽和NaHCO₃水溶液(1ml)處理，并攪拌10分鐘。分離各層，并將水層用9:1二氯甲烷:甲醇(2x10ml)洗滌。將合并的有機(jī)萃取液通過疏水砂芯漏斗，并蒸發(fā)得到棕色膠狀物，將其色譜純化，用0-30％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色膠狀物(20.6mg，60％)。

C₂₃H₂₆N₆O₄計(jì)算值450，MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

¹H NMR(250MHz)δ(CDCl₃)1.38-1.54(2H，m)，1.83-1.93(2H，m)，2.19-2.36(2H，m)，2.54-2.73(3H，m)，2.93-2.98(1H，m)，3.09-3.15(1H，m)，3.85(2H，s)，4.26-4.61(6H，m)，4.96-5.05(1H，m)，6.33(1H，d)，6.82(1H，s)，7.76(1H，d)，7.87(1H，s)和8.10(1H，s)

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于無水二氯甲烷(2ml)和無水甲醇(0.5ml)中，并用1M HCl的乙醚溶液(0.5ml)處理。加入乙醚(5ml)，并冷卻懸浮液。離心后，除去溶劑，并將固體干燥，得到標(biāo)題化合物，其為棕色固體(23.5mg)。

C₂₃H₂₆N₆O₄計(jì)算值450，MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

實(shí)施例2 1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)N-(6-氯-2-吡啶基)-2,2-二甲基丙酰胺

在50℃，在氬氣中，將6-氯-2-吡啶胺(13.776g，107mmol)在甲苯(100ml)和三乙胺(16.28ml，118mmol)中的溶液用2,2-二甲基丙酰氯(13.81ml，112mmol)處理。然后將反應(yīng)在50℃攪拌4h，然后在室溫?cái)嚢?8h。然后加入2M HCl(200ml)，并將混合物用乙醚(3x 500ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為棕色固體(21.005g，92％)。

MS(ES+)m/z 213/215(MH⁺)。

(b)N-(3-溴-6-氯-2-吡啶基)-2,2-二甲基丙酰胺

在-78℃，在氬氣中，經(jīng)10min，將N-(6-氯-2-吡啶基)-2,2-二甲基丙酰胺(4.83g，22.7mmol)在THF(40ml)中的溶液用正丁基鋰(20ml，2.5M的己烷溶液，50mmol)處理，然后溫?zé)嶂?℃，在0℃攪拌3h，然后冷卻至-78℃。然后將反應(yīng)用二溴乙烷(2.057ml，23.9mmol)滴加處理，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用水(5ml)處理，在室溫?cái)嚢?min，用更多水(500ml)處理，并用乙醚(3x 500ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、過濾、蒸發(fā)并將殘余物色譜純化(0-25％乙酸乙酯:己烷)，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(3.489g，53％)。

MS(ES+)m/z 291/293/295(MH⁺)。

(c)N-(3-溴-6-氯-2-吡啶基)-2,2-二甲基-N-2-丙烯-1-基丙酰胺

在0℃，在氬氣中，將N-(3-溴-6-氯-2-吡啶基)-2,2-二甲基丙酰胺(2.305g，7.907mmol)在DMF(40ml)中的溶液用氫化鈉(0.696g，17.395mmol)處理，然后經(jīng)0.25h溫?zé)嶂潦覝?，在室溫?cái)嚢?.25h，然后用烯丙基碘(1.61ml，17.395mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?h。然后將反應(yīng)用水(10ml)處理，濃縮至大約5ml，用更多水(200ml)處理，并用DCM(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、過濾、蒸發(fā)并將殘余物色譜純化(0-20％乙酸乙酯:己烷)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物，其固化為米白色固體(5.324g，67％)。

MS(ES+)m/z 331/333/335(MH⁺)。

(d)N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-2,2-二甲基-N-2-丙烯-1-基丙酰胺

在室溫，在氬氣中，將N-(3-溴-6-氯-2-吡啶基)-2,2-二甲基-N-2-丙烯-1-基丙酰胺(12.388g，37.370mmol)在甲醇(100ml)中的溶液用甲醇鈉溶液(25％w/v的甲醇溶液，17.76g，82.212mmol)處理，然后加熱回流42h。然后將反應(yīng)冷卻，用水(500ml)處理，并用乙醚(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(10.918g，89％)。

MS(ES+)m/z 327/329(MH⁺)。

(e)N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-N-(2,3-二羥基丙基)-2,2-二甲基丙酰胺

在室溫，在氬氣中，將N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-2,2-二甲基-N-2-丙烯-1-基丙酰胺(1.246g，3.81mmol)在叔丁醇(40ml)中的溶液用水(40ml)處理，然后用AD-mixα(2.86g)和AD-mixβ(2.86g)處理，并在室溫?cái)嚢?8h。然后將反應(yīng)用飽和亞硫酸鈉水溶液(40ml)處理，攪拌10min，用20％甲醇/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物(1.728g，126％)，含有殘留叔丁醇。

MS(ES+)m/z 361/363(MH⁺)。

(f)N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-2,2-二甲基-N-[(2-氧代-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]丙酰胺

在-78℃，在氬氣中，經(jīng)5min將N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-N-(2,3-二羥基丙基)-2,2-二甲基丙酰胺(7.628g，21.130mmol)在DCM(100ml)和吡啶(3.407ml，42.26mmol)中的溶液用三光氣(6.27g，21.130mmol)在DCM(20ml)中的溶液處理，然后將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?0min。然后將反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(200ml)小心處理，用DCM(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-50％乙酸乙酯:己烷)，得到產(chǎn)物，其為白色固體(5.722g，70％)。

MS(ES+)m/z 387/389(MH⁺)。

(g)(2E)-3-[2-{(2,2-二甲基丙?；?[(2-氧代-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]氨基}-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]-2-丙烯酸丁基酯

將N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-2,2-二甲基-N-[(2-氧代-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]丙酰胺(5.722g，14.722mmol)、Pd(PtBu₃)₂(151mg，0.296mmol)、Pd₂(dba)₃(135mg，0.149mmol)在1,4-二噁烷(40ml)中的混合物用N,N’-二環(huán)己基甲胺(3.48ml，16.265mmol)和丙烯酸正丁酯(2.54ml，17.743mmol)處理，然后將混合物在80℃加熱1h。然后將反應(yīng)冷卻，用水(200ml)處理，用DCM(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-50％乙酸乙酯:己烷)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(6.156g，96％)。

MS(ES+)m/z 435(MH⁺)。

(h)3-[2-{(2,2-二甲基丙酰基)[(2-氧代-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]氨基}-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]丙酸丁基酯

將(2E)-3-[2-{(2,2-二甲基丙?；?[(2-氧代-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]氨基}-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]-2-丙烯酸丁基酯(6.156g，14.184mmol)在乙醇(200ml)中的溶液用鈀/碳(10％糊狀物，1.23g)處理，然后將混合物在室溫在1個(gè)大氣壓氫化18h。然后將反應(yīng)混合物經(jīng)薄Celite墊過濾，用更多乙醇(200ml)洗滌。然后將有機(jī)濾液液蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(6.065g，98％)。

MS(ES+)m/z 437(MH⁺)。

(i)1-(2,3-二羥基丙基)-7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮

將3-[2-{(2,2-二甲基丙?；?[(2-氧代-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]氨基}-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]丙酸丁基酯(6.065g，13.911mmol)在甲醇(100ml)中的溶液用濃HCl水溶液(12M，50ml)處理，然后加熱回流48h。然后將反應(yīng)混合物濃縮至大約50ml，用碳酸鉀中和，并用20％甲醇/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為黃色油狀物(2.325g，66％)。

MS(ES+)m/z 279(MH⁺)。

(j)7-(甲基氧基)-1-(2-環(huán)氧乙烷基甲基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮

在0℃，在氬氣中，將1-(2,3-二羥基丙基)-7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(2.325g，9.226mmol)在DCM(40ml)和三乙胺(1.915ml，13.839mmol)中的溶液用甲烷磺酰氯(0.714ml，9.226mmol)處理，并在0℃攪拌0.5h。然后將反應(yīng)混合物用水(100ml)處理，用DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)和蒸發(fā)。然后將殘余物溶于甲醇(50ml)，用碳酸鉀(6.366g，46.130mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5min。然后將反應(yīng)混合物用水(100ml)處理，用DCM(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-100％乙酸乙酯:己烷)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(428mg，20％)。

MS(ES+)m/z 235(MH⁺)。

(k)(1-{2-羥基-3-[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]丙基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在氬氣中，將7-(甲基氧基)-1-(2-環(huán)氧乙烷基甲基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(428mg，1.829mmol)和4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(366mg，1.829mmol)在DMF(2ml)中的溶液在120℃加熱1h。然后將混合物蒸發(fā)和色譜純化(0-10％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(301mg，38％)。

MS(ES+)m/z 435(MH⁺)。

(l){1-[(4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在室溫，在氬氣中，將(1-{2-羥基-3-[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]丙基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(301mg，0.694mmol)在氯仿(10ml)和三乙胺(0.24ml，1.735mmol)中的溶液用甲烷磺酸酐(242mg，1.388mmol)處理，并加熱回流2h。然后將反應(yīng)混合物蒸發(fā)和溶于乙腈(10ml)，用碘化鈉(520mg，3.47mmol)處理，并在80℃加熱0.25h。然后將混合物冷卻，蒸發(fā)，然后用水(200ml)處理，用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-10％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為橙色油狀物(194mg，70％)。

MS(ES+)m/z 403(MH⁺)。

(m){1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將{1-[(4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(194mg，0.0.483mmol)(301mg，0.694mmol)在1,4-二噁烷(5ml)中的溶液用DDQ(164mg，0.724mmol)處理，并在60℃攪拌24h。加入另外的DDQ(164mg，0.724mmol)，并將反應(yīng)攪拌另外2h。然后將反應(yīng)用5％碳酸鉀水溶液(100ml)處理，用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為橙色油狀物(159mg，82％)。

MS(ES+)m/z 401(MH⁺)。

(n)1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

在氬氣中，在室溫，將{1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(159mg，0.398mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(2ml)中的溶液用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2ml)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)干燥和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(138mg，93％)。

MS(ES+)m/z 301(MH⁺)。

(o)標(biāo)題化合物

在氬氣中，在室溫，將1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(49mg，0.131mmol)在DCM(2ml)和甲醇(0.1ml)中的混合物用三乙胺(58μl，0.419mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h，然后加入[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)(22mg，0.131mmol)。然后將混合物在室溫?cái)嚢?h，然后加入NaBH(OAc)₃(56mg，0.262mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢枇硗?.5h，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)。將混合物用20％甲醇/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為透明油狀物(28mg，47％)。

MS(ES+)m/z 452(MH⁺)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.38-1.48(2H，m)，1.78-1.95(2H，m)，2.15-2.37(2H，m)2.45-2.60(1H，m)，2.61-2.72(2H，m)，2.92-3.02(1H，m)，3.05-3.12(1H，m)，3.83(2H，s)，4.32-4.42(1H，m)，4.52-4.61(1H，m)，4.96-5.05(1H，m)，5.74(2H，s)，6.22-6.32(2H，m)，7.20(1H，s)，7.45-7.52(2H，m)，7.99(1H，s)。

通過加入等當(dāng)量的4M氯化氫的1,4-二噁烷溶液，然后蒸發(fā)至干，將標(biāo)題化合物的游離堿在甲醇和氯仿中轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。

實(shí)施例3 1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

方法A

在氬氣中，在室溫，將1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(36mg，0.0965mmol)(其制備參見實(shí)施例2(n))在DCM(2ml)和甲醇(0.1ml)中的混合物用三乙胺(43μl，0.309mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h，然后加入2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例2(c)或WO03/087098實(shí)施例19(d)))(16mg，0.0965mmol)。然后將混合物在室溫?cái)嚢?h，然后加入NaBH(OAc)₃(41mg，0.193mmol)。然后將反應(yīng)在室溫?cái)嚢枇硗?.5h，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)。將混合物用20％甲醇/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為透明油狀物(24mg，55％)。

MS(ES+)m/z 450(MH⁺)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.30-1.50(2H，m)，1.80-1.92(2H，m)，2.19-2.35(2H，m)2.49-2.72(3H，m)，2.92-3.02(1H，m)，3.07-3.13(1H，m)，3.81(2H，s)，4.22-4.51(5H，m)4.52-4.60(1H，m)，4.96-5.04(1H，m)，6.22-6.32(2H，m)，6.81(1H，s)，7.45-7.53(2H，m)，8.04(1H，s)。

通過加入等當(dāng)量的4M氯化氫的1,4-二噁烷溶液，然后蒸發(fā)至干，將標(biāo)題化合物的游離堿在甲醇和氯仿中轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。

方法B

(a)2-溴-3-[(苯基甲基)氧基]丙酸

將外消旋O-(苯基甲基)絲氨酸(5g，25.6mmol)和溴化鉀(10.7g，89.6mmol)溶于冰冷卻的H₂SO₄(2.5N)中，并經(jīng)50分鐘(保持反應(yīng)溫度<4℃)用亞硝酸鈉(2.65g)在水(30ml)中的溶液處理。然后將反應(yīng)在0℃攪拌45分鐘，然后在室溫?cái)嚢?h，用乙酸乙酯(3x 100ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用水、飽和食鹽水洗滌，干燥(MgSO₄)、過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(6g，90％)。

MS(ES+)m/z 259/261(MH⁺)。

(b)2-溴-3-[(苯基甲基)氧基]丙酸甲基酯

在室溫，在氬氣中，將2-溴-3-[(苯基甲基)氧基]丙酸(6g，23.2mmol)在甲醇(40ml)中的溶液用亞硫酰氯(1.7ml，23.2mmol)處理，然后將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?h，然后蒸發(fā)得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(6.3g，99％)。

MS(ES+)m/z 273/275(MH⁺)。

(c)2-[4-((2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基){[(1,1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-1-哌啶基]-3-[(苯基甲基)氧基]丙酸甲基酯

將(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(1.087g，3.11mmol)(其合成參見WO2004/058144實(shí)施例99(h))、2-溴-3-[(苯基甲基)氧基]丙酸甲基酯(1.0g，3.66mmol)和碳酸鉀(0.860g，6.22mmol)在DMF(50ml)中的混合物加熱至80℃，并在氬氣中攪拌2.5h。將溶劑在減壓下除去，并將殘余物用飽和碳酸氫鈉水溶液處理。將水相用DCM(5x 100ml)萃取，經(jīng)MgSO₄干燥，過濾和在減壓下濃縮。將粗產(chǎn)物色譜純化，用0-100％EtOAc/40-60石油醚洗脫。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除。然后將殘余物溶于DCM(50ml)并用水(20ml)洗滌。分離有機(jī)層，經(jīng)MgSO₄干燥和在減壓下蒸除，得到產(chǎn)物(618mg，35％產(chǎn)率)。

MS(ES+)m/z 542(MH⁺)。

(d)(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)[1-(2-羥基-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在-78℃，在氬氣中，向2-[4-((2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基){[(1,1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-1-哌啶基]-3-[(苯基甲基)氧基]丙酸甲基酯(618mg，1.141mmol)在無水THF(8ml)中的溶液中滴加LiAlH₄(1.312ml，1.312mmol)。經(jīng)2h將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂良s-10℃。然后將混合物在0℃攪拌2h，然后加入水(0.1ml)、氫氧化鈉(0.18ml，0.360mmol)和水(0.2ml)。然后將混合物在室溫?cái)嚢枇硗?h。將所得混合物過濾和用THF(100ml)洗滌。將合并的濾液和清洗液在減壓下蒸除，得到產(chǎn)物(0.519g，89％產(chǎn)率)。

MS(ES+)m/z 514(MH⁺)。

(e)[1-(2-氯-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基](2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在0℃，將(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)[1-(2-羥基-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(150mg，0.292mmol)和三乙胺(0.049ml，0.350mmol)在DCM(5ml)中的溶液用甲烷磺酰氯(0.025ml，0.321mmol)處理。將溶液溫?zé)嶂潦覝?，并在此溫度攪?h。加入另外0.2當(dāng)量三乙胺和0.4當(dāng)量甲烷磺酰氯，并將反應(yīng)攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物用DCM(20ml)稀釋，并用水(2ml)處理。將水層再次用DCM(50ml)萃取。將有機(jī)層合并并經(jīng)MgSO₄干燥，過濾和在減壓下蒸除，得到粗產(chǎn)物(101mg，65％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。

MS(ES+)m/z 532/534(MH⁺)。

(f)(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)[1-(2-[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

方法1：將[1-(2-氯-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基](2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(101mg，0.190mmol)在DMF(10ml)中的溶液滴加至7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮的鈉鹽(33.8mg，0.190mmol)在DMF(10ml)中的溶液(通過加入氫化鈉(9.11mg，0.228mmol)至7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(33.8mg，0.190mmol)(其制備參見實(shí)施例5(e))在DMF(10ml)中的溶液中制備)中。將溶液在室溫在氬氣中攪拌過夜。然后將反應(yīng)加熱至60℃，并在該溫度在氬氣中攪拌1h。將反應(yīng)冷卻至室溫，并加入另外一當(dāng)量氫化鈉(9.11mg，0.228mmol)，并在在氬氣中攪拌。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?2h。

方法：將[1-(2-氯-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基](2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(343mg，0.645mmol)在DMF(10ml)中的溶液滴加至7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮的鈉鹽(138mg，0.774mmol)(通過加入氫化鈉(60％，38.7mg，0.967mmol)至7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(138mg，0.774mmol)(其制備參見實(shí)施例5(e))在DMF(10ml)中的溶液中制備)的溶液中。將溶液在室溫在氬氣中攪拌過夜。

將來自方法1和方法2的反應(yīng)混合物合并，并將DMF在減壓下除去。將殘余物用飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)和水(20ml)處理，并用DCM(3x100ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(MgSO₄)，過濾和在減壓下除去。將粗產(chǎn)物色譜純化，用0-100％EtOAc/己烷洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到兩批產(chǎn)物(批次1：167mg，38％)和(批次2：較低純度，78mg，18％)。

MS(ES+)m/z 674(MH⁺)。

(g)(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)[1-(2-羥基-1-{[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]甲基}乙基)-4-哌啶基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)[1-(2-[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]-1-{[(苯基甲基)氧基]甲基}乙基)-4-哌啶基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(167mg，0.248mmol)在乙醇(20ml)中的溶液在一個(gè)大氣壓氫氣壓力下氫化大約9天。將反應(yīng)經(jīng)Celite過濾，并用乙醇洗滌。將合并的濾液和清洗液在減壓下蒸除，得到產(chǎn)物(162mg，91％)。

MS(ES+)m/z 584(MH⁺)。

(h)(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基){1-[(4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)[1-(2-羥基-1-{[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]甲基}乙基)-4-哌啶基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(162mg，0.278mmol)在DCM(10ml)中的溶液在氬氣中冷卻至0℃，并用三乙胺(0.046ml，0.333mmol)和甲烷磺酰氯(0.026ml，0.333mmol)處理。將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并在該溫度攪?h。加入另外1.2當(dāng)量三乙胺(0.046ml，0.333mmol)和甲烷磺酰氯(0.026ml，0.333mmol)，并將溶液在室溫?cái)嚢柽^夜。加入另外1.2當(dāng)量三乙胺(0.046ml，0.333mmol)和甲烷磺酰氯(0.026ml，0.333mmol)，并將溶液加熱至50℃保持6h。將溶液冷卻至室溫，加入飽和NaHCO₃水溶液(10ml)，并將水溶液用20％MeOH/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)相合并，經(jīng)MgSO₄干燥，過濾和濃縮。然后將粗產(chǎn)物色譜純化，用0-15％MeOH/DCM洗脫。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到產(chǎn)物(80mg，48％)。

MS(ES+)m/z 552(MH⁺)。

(i)(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基){1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基){1-[(4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(80mg，0.145mmol)和DDQ(49.4mg，0.218mmol)在1,4-二噁烷(5ml)中的溶液在120℃攪拌2h。加入另外0.5當(dāng)量的DDQ(17mg)，并將溶液攪拌另外2h。將混合物冷卻至室溫，并用NaHCO₃飽和水溶液(10ml)處理。將水層用20％MeOH/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)層合并，經(jīng)MgSO₄干燥，過濾和濃縮，得到粗產(chǎn)物(64mg，83％)。

MS(ES+)m/z 550(MH⁺)。

(j)標(biāo)題化合物

將(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基){1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(64mg，0.116mmol)在DCM(2ml)和HCl的1,4-二噁烷溶液(0.291ml，1.164mmol)中的溶液在室溫?cái)嚢?h。將溶劑在減壓下除去。將粗產(chǎn)物加載至離子交換柱，并用MeOH(20ml)然后用2M NH₃的MeOH溶液(15ml)洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿(34mg，65％)。

¹H NMR和LC-MS與實(shí)施例3A的產(chǎn)物相同。

然后通過溶解于DCM(2ml)并用1當(dāng)量的1M HCl的乙醚溶液處理，將標(biāo)題產(chǎn)物的游離堿轉(zhuǎn)化為HCl鹽。將溶劑在減壓下除去，得到標(biāo)題鹽酸鹽。

實(shí)施例4 1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽1

在氬氣中，在室溫，將1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(51mg，0.136mmol)(其制備參見實(shí)施例2(n))在DCM(2ml)和甲醇(0.1ml)中的混合物用三乙胺(60μl，0.438mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h，然后加入7-溴-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-甲醛(其合成參見WO 2002056882實(shí)施例33(e))(37mg，0.136mmol)。然后將混合物在室溫?cái)嚢?h，然后加入NaBH(OAc)₃(86mg，0.408mmol)。然后將反應(yīng)在室溫?cái)嚢枇硗?.5h，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)。將混合物用20％甲醇/DCM(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)、蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為透明油狀物(36mg，48％)。

MS(ES+)m/z 558(MH⁺)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.32-1.51(2H，m)，1.81-2.00(2H，m)，2.20-2.41(2H，m)2.50-2.75(3H，m)，2.93-3.03(1H，m)，3.04-3.15(1H，m)，3.46(2H，s)，3.98(2H，s)，4.32-4.41(1H，m)4.52-4.61(1H，m)，4.98-5.04(1H，m)，6.22-6.32(2H，m)，7.48-7.51(2H，m)，7.75(1H，s)。

通過加入等當(dāng)量的4M氯化氫的1,4-二噁烷溶液，然后蒸發(fā)至干，將游離堿在甲醇和氯仿中轉(zhuǎn)化為標(biāo)題鹽酸鹽。

實(shí)施例5A(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)2,2-二甲基-N-[6-(甲基氧基)-2-吡啶基]丙酰胺

將三甲基乙酰胺(18.08g，178.744mmol)、Cs₂CO₃(68.823g，211.242mmol)、Pd₂(dba)₃(1.488g，1.625mmol)和Xantphos(4,5-雙-(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧雜蒽)(1.880g，3.249mmol)在無水、脫氣的1,4-二噁烷(800ml)中的懸浮液在氬氣中超聲0.25h，然后用2-氯-6-(甲基氧基)吡啶(19.32ml，162.494mmol)處理。然后將混合物加熱回流24h。將混合物蒸發(fā)，用水(1L)處理，并用DCM(1L然后2x 500ml)萃取3x。將有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)，蒸發(fā)和色譜純化(50-100％DCM/40-60石油醚，然后0-5％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體(25.191g，121.111mmol，75％)。將不純級(jí)分再次色譜純化(如上洗脫)，得到更多產(chǎn)物(4.990g，23.990mmol，15％)。總產(chǎn)率為90％。

MS(ES+)m/z 209(MH⁺，100％)。

(b)N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-2,2-二甲基丙酰胺

在具有內(nèi)部溫度計(jì)的三頸1L燒瓶中，將2,2-二甲基-N-[6-(甲基氧基)-2-吡啶基]丙酰胺(55.011g，264.467mmol)在THF(450ml)中的溶液在氬氣中冷卻至-78℃，并用正丁基鋰(232ml，581.847mmol)處理15分鐘，然后溫?zé)嶂?℃，并在0℃攪拌7h。然后將混合物再次冷卻至-78℃，并用1,2-二溴乙烷(27.3ml，317mmol)處理10分鐘，然后將溶液溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?0分鐘，期間所有形成的固體再次溶解。在此階段冒出氣泡，因此安裝鼓泡器在燒瓶的一個(gè)頸上。然后經(jīng)10分鐘小心加入水(100ml)。然后加入更多水(500ml)，并將混合物用乙醚(3x 500ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。然后將其溶于溫?zé)岬囊宜嵋阴?100ml)，并在冰箱中靜置過夜。將所得的析晶固體濾出，用冰冷卻的乙醚(20ml)洗滌，并在真空中干燥，得到產(chǎn)物，其為白色固體(45.660g，159.011mmol，60％產(chǎn)率)。將濾液蒸發(fā)，并將殘余物色譜純化(0-25％乙酸乙酯/40-60石油醚)，得到回收的起始原料(7.264g，34.9mmol)和產(chǎn)物，其為白色固體(8.038g，27.992mmol，10％產(chǎn)率)。來自重結(jié)晶和硅膠色譜純化的產(chǎn)物經(jīng)NMR和LC-MS鑒定相同，因此將其合并。

MS(ES+)m/z 287/289(MH⁺，100％)。

(c)(2E)-3-[2-[(2,2-二甲基丙酰基)氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]-2-丙烯酸丁基酯

將N-[3-溴-6-(甲基氧基)-2-吡啶基]-2,2-二甲基丙酰胺(78.783g，274mmol)、雙(三叔丁基膦)鈀(0)(1g，1.957mmol)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(0.892g，0.974mmol)在無水、脫氣的1,4-二噁烷(600ml)中的混合物用丙烯酸正丁酯(47.1ml，329mmol)和二環(huán)己基甲胺(64.5ml，302mmol)處理。然后將反應(yīng)混合物在80℃加熱4h，然后在120℃加熱3h。然后將反應(yīng)蒸發(fā)，并加入水(1000ml)，并將混合物用乙醚(3x 500ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。然后將其溶于DCM(300ml)、色譜純化(10-30％乙酸乙酯:40-60石油醚)，然后在真空中干燥，得到產(chǎn)物，其為白色固體(87.412g，95％)。

MS(ES+)m/z 335(MH⁺，100％)。

(d)3-[2-[(2,2-二甲基丙?；?氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]丙酸丁基酯

在氬氣中，在室溫，將(2E)-3-[2-[(2,2-二甲基丙?；?氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]-2-丙烯酸丁基酯(43.706g，131mmol)在乙醇(450ml)中的溶液用鈀/碳(5.0g，47.0mmol)處理，并在室溫在一個(gè)大氣壓氫氣下攪拌90h。然后將反應(yīng)混合物經(jīng)薄Kieselguhr墊過濾，將產(chǎn)物經(jīng)另外乙醇(200ml)清洗。然后將溶劑蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(43.549，99％)。

MS(ES+)m/z 337(MH⁺，100％)。

(e)7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮

將3-[2-[(2,2-二甲基丙酰基)氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]丙酸丁基酯(86.01g，256mmol)在鹽酸(500ml，3000mmol)(6M水溶液)中的混合物在80℃加熱6h。將反應(yīng)冷卻，用水(500ml)處理，轉(zhuǎn)移至5L錐形瓶，并用固體碳酸鉀(需要大約250g)小心地中和(觀察到明顯的泡騰現(xiàn)象)。然后將混合物用20％MeOH/DCM(3x 500ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為黃色固體(35.84g，79％)。

MS(ES+)m/z 179(MH⁺，100％)。

(f)7-(甲基氧基)-1-[(2R)-2-環(huán)氧乙烷基甲基]-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮

在0℃，在氬氣中，將7-(甲基氧基)-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(4.974g，27.9mmol)在DMF(100ml)中的溶液用氫化鈉(60％，1.340g，33.5mmol)處理，并在0℃攪拌20min。然后將反應(yīng)混合物用(2S)-2-3-硝基苯磺酸環(huán)氧乙烷基甲基酯(7.60g，29.3mmol)處理，在0℃攪拌，然后溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?h。然后加入水(5ml)。將反應(yīng)蒸發(fā)，然后加入飽和碳酸氫鹽水溶液(500ml)，并將混合物用DCM(3x 500ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。

MS(ES+)m/z 235(MH⁺，100％)。

(g)(1S)-1-(羥基甲基)-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

將7-(甲基氧基)-1-[(2R)-2-環(huán)氧乙烷基甲基]-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(1.167g，4.98mmol)在DMF(20ml)中的溶液在氬氣中加熱至120℃保持6h。然后將反應(yīng)蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為橙色固體(339mg，31％)。

MS(ES+)m/z 221(MH⁺，100％)。

或者，反應(yīng)可以用微波在160℃加熱40分鐘。

(h)(1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在0℃，在氬氣中，將(1S)-1-(羥基甲基)-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(1.909g，8.67mmol)在DCM(100ml)中的溶液用三乙胺(1.450ml，10.40mmol)處理，然后加入甲烷磺酰氯(0.743ml，9.54mmol)，然后溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?h。然后將反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鹽水溶液(100ml)處理，并將混合物用DCM(2x 100ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗品中間體[甲磺酸(2S)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基酯。將其溶于無水乙腈(100ml)，然后用吡啶(1.402ml，17.34mmol)和4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(3.47g，17.34mmol)處理，并在70℃加熱20h。20h后，加入更多4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(3.47g，17.34mmol)和吡啶(1.402ml，17.34mmol)，并將溫度升高至回流(加熱塊95℃)，并將反應(yīng)在該溫度攪拌另外4h。然后將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，然后加入飽和NaHCO₃水溶液(200ml)，并將混合物用DCM(3x 200ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為棕色固體。

MS(ES+)m/z 403(MH⁺，100％)。

(i)(1-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將(1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(5.710g，14.19mmol)在1,4-二噁烷(50ml)中的溶液在室溫用DDQ(4.83g，21.28mmol)處理，然后在120℃加熱1h。然后將反應(yīng)冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物用飽和K₂CO₃水溶液(5％，1000ml)處理，并用DCM(3x 500ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為棕色固體。使用另一份氨基甲酸酯(2.889g，7.18mmol)在1,4-二噁烷(50ml)中用DDQ(2.444g，10.77mmol)重復(fù)反應(yīng)。如上進(jìn)行反應(yīng)和后處理，并將合并的殘余物色譜純化(0-100％乙酸乙酯:40-60石油醚，然后0-20％甲醇:乙酸乙酯)，得到產(chǎn)物，其為棕色固體(1.532g)。

MS(ES+)m/z 401(MH⁺，100％)。

(j)(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

在氬氣中，在室溫，將(1-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(1.532g，3.83mmol)在氯仿(20ml)中的溶液用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(10ml，40.0mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后加入甲醇(20ml)，并將反應(yīng)攪拌另外0.25h。然后將反應(yīng)蒸發(fā)和用乙醚(20ml)研磨。然后將固體在真空中干燥，得到不純產(chǎn)物，其為棕色固體(1.443g，101％)。

MS(ES+)m/z 301(MH⁺，100％)

通過通用方法(實(shí)施例5(a)-(j))制備1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽，經(jīng)手性HPLC(Chiralpak AS-H(5微米)分析，發(fā)現(xiàn)為單一對(duì)映異構(gòu)體，假定為R。

(k)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(不純產(chǎn)物)(575mg，1.540mmol)在氯仿(20ml)和甲醇(1ml)中的懸浮液用三乙胺(0.644ml，4.62mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后將溶液用[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)(258mg，1.540mmol)處理，并攪拌另外0.5h。然后將溶液用NaBH(OAc)₃(979mg，4.62mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(100ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(574mg，1.273mmol，83％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.25-1.45(2H，m)，1.75-1.95(2H，m)，2.20-2.45(2H，m)，2.45-2.55(1H，m)，2.60-2.75(2H，m)，2.90-3.00(1H，m)，3.05-3.15(1H，dd)，3.85(2H，s)，4.30-4.40(1H，m)，4.55-4.65(1H，m)，4.95-5.05(1H，m)，5.75(2H，s)，6.25(1H，m)，6.30(1H，m)，7.20(1H，s)，7.45-7.52(2H，m)，8.00(1H，s)

MS(ES+)m/z 452(MH⁺)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(15ml)中用1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單鹽酸鹽。

實(shí)施例5B(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮苯甲酸鹽

將(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮溶于甲醇，并用苯甲酸(1當(dāng)量)處理。濃縮，用乙醚處理，并在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物，其為苯甲酸鹽。

實(shí)施例5C(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二-三氟乙酸鹽

將(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽在洗脫劑[10％MeCN的水溶液(含有0.1％TFA)]中加載于制備型反相HPLC柱。將含有產(chǎn)物的級(jí)分合并，濃縮和凍干。產(chǎn)物分離為粘性白色泡沫，在P₂O₅上干燥(過周末)。

實(shí)施例6A(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(511mg，1.369mmol)(其制備參見實(shí)施例5(j))在氯仿(20ml)和甲醇(1ml)中的懸浮液用三乙胺(0.572ml，4.11mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后將溶液用2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)(248mg，1.369mmol)處理，并攪拌另外0.5h。然后將溶液用NaBH(OAc)₃(870mg，4.11mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(100ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(499mg，78％)。

MS(ES+)m/z 466(MH⁺)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.21-1.48(2H，m)，1.72-1.92(2H，m)，2.12-2.39(2H，m)2.41-2.78(3H，m)，2.89-3.22(4H，m)，3.78(2H，s)，4.28-4.48(3H，m)4.50-4.61(1H，m)，4.96-5.04(1H，m)，6.19-6.32(2H，m)，7.01(1H，s)，7.42-7.53(2H，m)，8.00(1H，s)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(15ml)中用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單鹽酸鹽。

實(shí)施例6B(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

將(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮溶于甲醇，并用苯甲酸(1當(dāng)量)處理。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物，其為苯甲酸鹽。

實(shí)施例6C(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二三氟乙酸鹽

將(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽加載至制備型反相HPLC柱，用含有0.1％TFA的10％MeCN的水溶液洗脫混合物。將含有產(chǎn)物的級(jí)分合并，濃縮和凍干。產(chǎn)物(雙-TFA鹽)分離為白色固體，在P₂O₅上干燥。

實(shí)施例7(1R)-1-({4-[(5,6,7,8-四氫-3-異喹啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)5,6,7,8-四氫-3-異喹啉甲酸乙基酯

在氬氣中，在室溫，將1,7-辛二炔(4.00ml，30.1mmol)和氰基甲酸乙基酯(2.95ml，30.1mmol)在無水脫氣的1,4-二噁烷(500ml)中的溶液用環(huán)戊二烯基-鈷(I)-二羰基(0.814g，4.52mmol)處理，然后加熱回流18h。然后將反應(yīng)蒸發(fā)，用甲苯(100ml)處理，再次蒸發(fā)，溶于DCM(100ml)，經(jīng)短Kieselguhr墊過濾，用DCM洗脫，將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，色譜純化(0-100％DCM:40-60石油醚，然后0-10％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為不純棕色油狀物(1.27g，21％)。

MS(ES+)m/z 206(MH⁺)。

(b)5,6,7,8-四氫-3-異喹啉基甲醇

在-78℃，在氬氣中，將5,6,7,8-四氫-3-異喹啉甲酸乙基酯(1.27g，6.19mmol)在THF(50ml)中的溶液用LiAlH₄(1M的THF溶液，6.19ml，6.19mmol)處理，并溫?zé)嶂潦覝亍Ｔ谑覝?0min后，依次加入水(1ml)、2M NaOH水溶液(1ml)和水(1ml)，并將混合物在室溫?cái)嚢?.5h。然后將混合物經(jīng)短Kieselguhr墊過濾，用THF(50ml)洗脫，然后將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為橙色油狀物(0.572g，57％)。

MS(ES+)m/z 164(MH⁺)。

(c)5,6,7,8-四氫-3-異喹啉甲醛

在室溫，在氬氣中，將5,6,7,8-四氫-3-異喹啉基甲醇(572mg，3.50mmol)在DCM(10ml)中的溶液用二氧化錳(3.047g，35.0mmol)處理，然后在室溫?cái)嚢?h。然后將反應(yīng)混合物經(jīng)薄Kieselguhr墊過濾，用DCM(50ml)洗脫，將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為棕色油狀物(435mg，77％)。

MS(ES+)m/z 162(MH⁺)。

(d)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(87mg，0.233mmol)(其制備參見實(shí)施例5(j))在氯仿(5ml)和甲醇(0.2ml)中的懸浮液用三乙胺(97μl，0.699mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后將溶液用5,6,7,8-四氫-3-異喹啉甲醛(37.6mg，0.233mmol)處理，并攪拌另外0.5h。然后將溶液用NaBH(OAc)₃(148mg，0.699mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(100ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(66mg，64％)。

MS(ES+)m/z 446(MH⁺)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.22-1.51(2H，m)，1.71-1.99(7H，m)，2.15-2.38(2H，m)2.45-2.82(4H，m)，2.61-3.22(4H，m)，3.85(2H，s)，4.29-4.42(1H，m)4.50-4.61(1H，m)，4.96-5.04(1H，m)，6.18-6.32(2H，m)，7.00(1H，s)，7.47-7.59(2H，m)，8.21(1H，s)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(15ml)中用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單鹽酸鹽。

實(shí)施例8(1R)-1-({4-[(6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-甲酸乙基酯

在氬氣中，在室溫，將1,6-庚二炔(1.242ml，10.85mmol)和氰基甲酸乙基酯(1.063ml，10.85mmol)在無水脫氣的1,4-二噁烷(100ml)中的溶液用環(huán)戊二烯基-鈷(I)-二羰基(0.293g，1.628mmol)處理，然后加熱回流18h。然后將反應(yīng)蒸發(fā)，用甲苯(100ml)處理，再次蒸發(fā)，溶于DCM(100ml)，經(jīng)短Kieselguhr墊過濾，用DCM洗脫，將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，色譜純化(0-100％DCM:40-60石油醚，然后0-10％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為不純的棕色油狀物(427mg，21％)。

MS(ES+)m/z 192(MH⁺)。

(b)6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-基甲醇

在-78℃，在氬氣中，將6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-甲酸乙基酯(427mg，2.233mmol)在THF(20ml)中的溶液用LiAlH₄(1M的THF溶液)(2.233ml，2.233mmol)處理，并溫?zé)嶂潦覝?。在室?0min后，依次加入水(1ml)、2M NaOH水溶液(1ml)和水(1ml)，并將混合物在室溫?cái)嚢?.5h。然后將混合物經(jīng)短Kieselguhr墊過濾，用THF(50ml)洗脫，然后將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為橙色油狀物(189mg，57％)。

MS(ES+)m/z 150(MH⁺)。

(c)6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-甲醛

在室溫，在氬氣中，將6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-基甲醇(189mg，1.267mmol)在DCM(10ml)中的溶液用二氧化錳(1.101g，12.67mmol)處理，然后在室溫?cái)嚢?h，經(jīng)薄Kieselguhr墊過濾，用DCM(40ml)洗脫，將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為棕色油狀物(110mg，59％)。

MS(ES+)m/z 148(MH⁺)。

(d)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(82mg，0.220mmol)(其制備參見實(shí)施例5(j))在氯仿(5ml)和甲醇(0.2ml)中的懸浮液用三乙胺(92μl，0.659mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后將溶液用6,7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[c]吡啶-3-甲醛(32.3mg，0.220mmol)處理，并攪拌另外0.5h。然后將溶液用NaBH(OAc)₃(140mg，0.659mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(100ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(39mg，41％)。

MS(ES+)m/z 432(MH⁺)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.32-1.59(2H，m)，1.82-2.40(6H，m)2.51-2.72(3H，m)，2.82-3.18(6H，m)，3.95(2H，s)，4.31-4.42(1H，m)，4.50-4.61(1H，m)，4.92-5.08(1H，m)，6.19-6.32(2H，m)，7.23(1H，s)，7.42-7.53(2H，m)，8.38(1H，s)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(15ml)中用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單鹽酸鹽。

實(shí)施例9(1R)-1-({4-[(1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-甲酸乙基酯

在氬氣中，在室溫，將二-2-丙炔-1-基乙醚(5.01g，53.2mmol)和氰基甲酸乙基酯(5.21ml，53.2mmol)在無水脫氣的1,4-二噁烷(500ml)中的溶液用環(huán)戊二烯基-鈷(I)-二羰基(1.437g，7.98mmol)處理，然后加熱回流(加熱塊溫度120℃)18h。將反應(yīng)蒸發(fā)，用甲苯(100ml)處理，再次蒸發(fā)，溶于DCM(100ml)，經(jīng)短Kieselguhr墊過濾，用DCM洗脫，將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，色譜純化(0-100％DCM:40-60石油醚，然后0-10％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為不純的棕色固體(0.871g)和不純的產(chǎn)物，其為黑色油狀物(2.684g)，將其再次色譜純化(0-10-10％甲醇/DCM)，得到更多物質(zhì)，其為棕色固體(1.261g)。獲得的產(chǎn)物總計(jì)(2.132g，21％)。

MS(ES+)m/z 194(MH⁺)。

(b)1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-基甲醇

在-78℃，在氬氣中，將1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-甲酸乙基酯(0.871g，4.51mmol)在THF(20ml)中的溶液用LiAlH₄(1M的THF溶液)(4.51ml，4.51mmol)處理，并溫?zé)嶂潦覝?。在室?0min后，依次加入水(1ml)、2M NaOH水溶液(1ml)和水(1ml)，并將混合物在室溫?cái)嚢?.5h。然后將混合物經(jīng)短Kieselguhr墊過濾，用THF(50ml)洗脫，然后將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到產(chǎn)物，其為橙色油狀物(66mg，10％)。

MS(ES+)m/z 152(MH⁺)。

(c)1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-甲醛

在室溫，在氬氣中，將1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-基甲醇(66mg，0.437mmol)在DCM(5ml)中的溶液用二氧化錳(380mg，4.37mmol)處理，然后在室溫?cái)嚢?h，經(jīng)薄Kieselguhr墊過濾，用DCM(40ml)和甲醇(10ml)洗脫，將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為棕色油狀物(65mg，100％)。

MS(ES+)m/z 150(MH⁺)。

(d)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(121mg，0.324mmol)(其制備參見實(shí)施例5(j))在氯仿(5ml)和甲醇(0.2ml)中的懸浮液用三乙胺(0.136ml，0.972mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后將溶液用1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-甲醛(48.3mg，0.324mmol)處理，并攪拌另外0.5h。然后將溶液用NaBH(OAc)₃(206mg，0.972mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(100ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(37mg，26％)

MS(ES+)m/z 434(MH⁺)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.21-1.52(2H，m)，1.78-2.00(2H，m)，2.15-2.40(2H，m)2.49-3.15(5H，m)，3.95(2H，s)，4.31-4.48(1H，m)4.50-4.62(1H，m)，4.92-5.19(5H，m)，6.19-6.32(2H，m)，7.27(1H，s)，7.41-7.54(2H，m)，8.45(1H，s)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(15ml)中用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單鹽。

實(shí)施例10(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5(j))(51mg，0.14mmol)在氯仿:甲醇(9:1，3ml)中的懸浮液用三乙胺(0.06ml)處理，并在室溫?cái)嚢?0min。然后將溶液用1,3-二氫呋喃并[3,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例126(e))(21mg，0.133mmol)處理，并攪拌另外2h。然后將溶液用NaBH(OAc)₃(87mg)處理，并在室溫?cái)嚢?h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 50ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(20mg，32％)

MS(ES+)m/z 448(MH⁺)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.15-1.49(2H，m)，1.61-1.95(2H，m)，1.99-2.09(2H，m)2.20-2.38(1H，m)，2.45-2.85(6H，m)，2.92-3.02(1H，m)，3.05-3.15(1H，m)，3.78(2H，s)，4.20(2H，t)，4.30-4.42(1H，m)，4.52-4.61(1H，m)，4.95-5.05(1H，m)，6.23-6.32(2H，m)，7.00(1H，s)，7.47-7.50(2H，m)，8.07(1H，s)。

將游離堿在DCM中用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單鹽酸鹽。

實(shí)施例11 7-[({1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基)甲基]-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈鹽酸鹽(R:S的2:1混合物)

(a)(1-{(2R)-2-羥基-3-[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]丙基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將7-(甲基氧基)-1-[(2S)-2-環(huán)氧乙烷基甲基]-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(根據(jù)實(shí)施例5(f)的通用方法但使用(2R)-3-硝基苯磺酸2-環(huán)氧乙烷基甲基酯制備)(3.1g，13.3mmol)和4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(2.7g，13.3mmol)在DMF(3ml)中的混合物在110℃加熱1h。然后將DMF蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化，使用0-10％甲醇/二氯甲烷梯度，得到所需化合物，其為淡黃色固體，假定為R對(duì)映異構(gòu)體(3.9g；89％；90％純度)。

MS(ES+)m/z 435(MH⁺)。

(b){1-[(4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(R:S的2:1混合物)

在室溫，在氬氣中，將(1-{(2R)-2-羥基-3-[7-(甲基氧基)-2-氧代-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-1(2H)-基]丙基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(3.9g，8.97mmol)在氯仿(150ml)和三乙胺(3.1ml)中的溶液用甲烷磺酸酐(3.1g，17.94mmol)處理，然后加熱回流2.5h。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物溶于乙腈(150ml)，并用碘化鈉(6.7g，44.85mmol)處理，并在80℃加熱。45分鐘后，將乙腈蒸發(fā)，并將殘余物在水(250ml)和20％甲醇/二氯甲烷(250ml)之間分配；分離各層，并將水層用20％甲醇/二氯甲烷(4x250ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)。將粗品通過硅膠色譜純化，使用0-10％甲醇/二氯甲烷梯度，得到所需化合物，其為亮橙色泡沫(1.83g；57％，不純，含有三乙胺)。將水層蒸發(fā)，然后用氯仿處理；將固體濾除，并將氯仿蒸發(fā)，得到2.77g黃色固體。將固體溶于甲醇，并加載至SCX柱，將其用甲醇預(yù)先潤濕。將柱用甲醇(50ml)洗滌，然后用2M氨的甲醇溶液(50ml)洗滌。將2M氨的甲醇溶液蒸發(fā)，得到純的產(chǎn)物，其為白色固體(220mg)，假定為R:S的2:1混合物)。

MS(ES+)m/z 403(MH⁺)。

(c){1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(R:S的2:1混合物)

將{1-[(4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(R:S的2:1混合物)(1.83g，4.55mmol)和DDQ(1.6g，6.83mmol)在1,4-二噁烷(100ml)中的混合物在60℃在氬氣中攪拌過夜。加入更多DDQ(1.6g，6.83mmol)，并將反應(yīng)在60℃攪拌另外1h。將反應(yīng)冷卻至室溫，用5％碳酸鉀水溶液(600ml)處理，并用20％甲醇/二氯甲烷(3x500ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液通過硫酸鎂干燥，過濾和蒸發(fā)，得到粗品，其為棕色油狀物。LCMS顯示仍有約8％的起始原料殘留，因此將油狀物與回收自之前步驟的水相中的更多起始原料(220mg)混合，并溶于1,4-二噁烷(100ml)，用1當(dāng)量的DDQ處理，并在60℃加熱1h。LCMS顯示反應(yīng)未完成，因此加入0.5g的DDQ，并將反應(yīng)在60℃攪拌0.5h。少量后處理顯示反應(yīng)完成，因此將反應(yīng)用5％碳酸鉀水溶液(500ml)處理，并用20％甲醇/二氯甲烷(2x500ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液通過硫酸鎂干燥，過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為淡棕色泡沫(1g，50％)。

MS(ES+)m/z 401(MH⁺)。

(d)1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(R:S的2:1混合物)

在室溫，將{1-[(4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(R:S的2:1混合物)(1g，2.5mmol)溶于氯仿(10ml)，并用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(10ml)處理。固體沉淀，因此加入一些甲醇將其溶解。1h后，LCMS顯示反應(yīng)完成，因此加入更多甲醇溶解所有固體，然后加入甲苯(約50ml)。將所有溶劑在減壓下蒸除，得到黃色固體。將固體溶于100ml甲醇，并與Amberlyst A21樹脂一起攪拌1h。然后將樹脂濾除，并除去甲醇，得到0.7g棕色膠狀物。將膠狀物溶于甲醇，并加載至SCX柱，其用甲醇預(yù)先潤濕。將柱用甲醇然后用2M氨的甲醇溶液洗滌。將2M氨的甲醇溶液蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為淡棕色膠狀物(0.6g，80％)。

MS(ES+)m/z 301(MH⁺)。

將通過該通用方法得到的產(chǎn)物經(jīng)手性HPLC(Chiralpak AS-H(5微米)，90:10:0.1乙腈:甲醇:異丙基胺作為流動(dòng)相)分析。異構(gòu)體(假定為R:S)的比例為大約2:1。

(e)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(R:S的2:1混合物)(60mg，0.2mmol)和7-甲?；?2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈(其合成參見WO06014580制備13或WO2007122258實(shí)施例31(d))(37.8mg，0.2mmol)溶于二氯甲烷/甲醇(2/0.1ml)，并在室溫?cái)嚢?h。然后將其用NaBH(OAc)₃(85mg，0.4mmol)處理，并攪拌1小時(shí)。然后加入碳酸氫鈉飽和溶液(15ml)，并將水溶液用20％甲醇/二氯甲烷(3x35ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)。將粗品通過硅膠色譜純化，使用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色膠狀物(26mg，27％)。

δH CDCl₃，(250MHz)1.15-1.45(m，2H)，1.53(bs，1H),1.70-1.90(m，2H)，2.15-2.35(m，1H)，2.35-2.55(m，1H)，2.55-2.75(m，2H)，2.85-3.00(m，2H)，3.00-3.15(m，1H)，3.68(s,2H)，4.25-4.45(m，5H)，4.50-4.65(m，1H)，4.90-5.10(m，1H)，6.20-6.35(m，2H)，7.00-7.10(m，2H)，7.40-7.55(m，2H)。

MS(ES+)m/z 474(MH⁺)。

通過將游離堿溶于DCM并用1當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理制備標(biāo)題化合物。然后將其蒸發(fā)至干，并在真空干燥器中在P₂O₅的存在下干燥。

實(shí)施例12 1-[(4-{[(3-氧代-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽(R:S的2:1混合物)

在室溫，在氬氣中，將1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(R:S的2:1混合物，其制備參見實(shí)施例11(d))(60mg，0.2mmol)和3-氧代-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噻嗪-6-甲醛(其合成參見WO2002056882，實(shí)施例6(c)(38.6mg，0.2mmol)溶于二氯甲烷/甲醇(2/0.1ml)，并在室溫?cái)嚢?h。然后將其用NaBH(OAc)₃(85mg，0.4mmol)處理，攪拌1小時(shí)。然后加入碳酸氫鈉飽和溶液(20ml)，并將水溶液用20％甲醇/二氯甲烷(3x35ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化，使用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(37mg，39％)。

δH CDCl₃，(250MHz)1.20-1.45(m，2H),1.70-2.15(m，4H)，2.15-2.40(m，2H)，2.40-2.75(m，3H)，2.95(d，1H)，3.05-3.15(m，1H)，3.40(s，2H)，3.76(s，2H)，4.30-4.45(m，1H)，4.50-4.65(m，1H)，4.90-5.10(m，1H)，6.20-6.35(m，2H)，6.85-7.00(m，2H)，7.25(d，1H)，7.40-7.60(m，2H)，8.53(bs，1H)。

MS(ES+)m/z 478(MH⁺)。

通過將游離堿溶于DCM/MeOH并用1當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理制備標(biāo)題化合物。然后將其蒸發(fā)至干，并在真空干燥器中在P₂O₅的存在下干燥4天。

實(shí)施例13A(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

(a)6-(甲基氧基)-3-硝基-2-吡啶胺

將2-氯-6-(甲基氧基)-3-硝基吡啶(65.7g，348mmol)在2M氨的甲醇溶液(500ml，1000mmol)和氨水溶液(500ml，348mmol)中的溶液/懸浮液在65℃攪拌18h。將反應(yīng)冷卻，并將固體濾除，并用水(2x100ml)洗滌。將固體在真空烘箱在40℃干燥過夜，得到產(chǎn)物，其為亮黃色固體(52.14g，84％純度(NMR)，74％)。

MS(ES+)m/z 170(MH⁺)。

(b)6-(甲基氧基)-2,3-吡啶二胺

在室溫，在氬氣中，將6-(甲基氧基)-3-硝基-2-吡啶胺(26g，129mmol)懸浮于乙醇(500ml)，然后用鈀/碳(15g，14.10mmol)(10％糊狀物)處理。將反應(yīng)在1atm的氫氣下攪拌過夜。將反應(yīng)經(jīng)Celite墊過濾，并將墊用乙醇(500ml)洗滌。將乙醇蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為紫色油狀物(20.68g，稍微不純)。

MS(ES+)m/z 140(MH⁺)。

(c)N-[2-氨基-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]甘氨酸乙基酯

在室溫，在氬氣中，將6-(甲基氧基)-2,3-吡啶二胺(21.7g，估計(jì)87％純度，136mmol)溶于乙腈(500ml)，然后用碳酸鉀(24.38g，176mmol)和溴乙酸乙酯(18.13ml，163mmol)處理。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。然后將乙腈在真空中除去。使用更多6-(甲基氧基)-2,3-吡啶二胺(20.68g，87％純度，129mmol)在乙腈(500ml)中，碳酸鉀(23.23g)和溴乙酸乙酯(17.27g)重復(fù)反應(yīng)，并將反應(yīng)再次在室溫?cái)嚢柽^夜，然后將乙腈在真空中除去。將殘余物在水(1L)和乙酸乙酯(1L)之間分配，分離各層。將水層用乙酸乙酯(1L)再萃取一次，并將合并的有機(jī)萃取液在MgSO₄上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到紫色油狀物(64g)。將油狀物用DCM(300ml)處理，并將不溶雜質(zhì)濾除。將DCM溶液加載于800g硅膠柱上，并用0-2％MeOH/DCM洗脫，得到40.6g所需產(chǎn)物，其為棕色固體(LCMS和NMR與以下一致：75％所需產(chǎn)物和15％環(huán)化產(chǎn)物6-(甲基氧基)-1,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(2H)-酮和6.4g環(huán)化產(chǎn)物6-(甲基氧基)-1,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(2H)-酮，其為紫色固體。

MS(ES+)m/z 226(MH⁺)。

(d)6-(甲基氧基)-1,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(2H)-酮

在室溫，在氬氣中，將N-[2-氨基-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]甘氨酸乙基酯(40.6g，135mmol)溶于四氫呋喃(THF)(1L)，并用叔丁醇鉀(15.17g，135mmol)處理。在室溫2h后，加入NH₄Cl(500ml)，并將THF蒸發(fā)。加入水(500ml)，然后加入20％MeOH/DCM(1L)；將不溶物質(zhì)濾除，用乙醚洗滌，并在真空烘箱中在40℃干燥過夜，得到所需產(chǎn)物，其為黃色固體(15.3g)：LCMS和NMR與產(chǎn)物一致(存在9％氧化物質(zhì)(NMR))。

將兩相轉(zhuǎn)移至分液漏斗并分離。將水層用20％MeOH/DCM(2x500ml)再萃取兩次，并將合并的有機(jī)萃取液在MgSO₄上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到棕色固體，將其用足量乙醚洗滌，得到更多所需產(chǎn)物，其為淡綠色固體(7.7g)：LCMS和NMR與產(chǎn)物一致(存在20％氧化物質(zhì)(NMR))。

MS(ES+)m/z 180(MH⁺)。

備選操作：

在氬氣中，將N-[2-氨基-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]甘氨酸乙基酯(16.2g，72mmol)溶于四氫呋喃(500ml)，并冷卻至0℃(冰浴冷卻)。然后將其用叔丁醇鉀(1M的THF溶液，80ml，80mmol)處理。1.5h后，將反應(yīng)用乙酸(80mmol)處理，并蒸發(fā)得到深色固體。將其用水(200ml)研磨，過濾和在真空中干燥(約13g，定量)，其可以在沒有進(jìn)一步純化的情況下直接使用。

(e)6-(甲基氧基)-3-氧代-3,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-1(2H)-甲酸苯基甲基酯

在室溫，向劇烈攪拌的6-(甲基氧基)-1,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(2H)-酮(6.35g，35.4mmol)在乙酸乙酯(600ml)/碳酸氫鈉(飽和溶液)(200ml)中的溶液中加入氯甲酸芐基酯(5.31ml，37.2mmol)。45分鐘后，反應(yīng)完成。分離各層，并將有機(jī)層在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到所需產(chǎn)物，其為米色固體(11g，99％)。

MS(ES+)m/z 314(MH⁺)。

(f)6-(甲基氧基)-4-[(2R)-2-環(huán)氧乙烷基甲基]-3-氧代-3,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-1(2H)-甲酸苯基甲基酯

在室溫，在氬氣中，將6-(甲基氧基)-3-氧代-3,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-1(2H)-甲酸苯基甲基酯(11g，35.1mmol)溶于DMF(300ml)，得到黃色溶液。然后將溶液用冰浴冷卻，并用氫化鈉(1.685g，42.1mmol)處理。將溶液溫?zé)嶂潦覝亍?0分鐘后，加入(2S)-3-硝基苯磺酸2-環(huán)氧乙烷基甲基酯(9.56g，36.9mmol)。1h后，所有起始原料消耗，因此將反應(yīng)用碳酸氫鈉飽和溶液(350ml)處理，并將水層用DCM(3x400ml)萃取。將合并的有機(jī)層在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到淡棕色油狀物(16.93g)。將產(chǎn)物以粗品在下一步中使用。

MS(ES+)m/z 370(MH⁺)。

(g)(1S)-1-(羥基甲基)-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯

在室溫，將6-(甲基氧基)-4-[(2R)-2-環(huán)氧乙烷基甲基]-3-氧代-3,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-1(2H)-甲酸苯基甲基酯(粗品，15.93g，估計(jì)32.8mmol)溶于DMF(250ml)，并在130℃加熱兩晚，并在120℃加熱一晚。反應(yīng)完成，因此將DMF蒸發(fā)，并將殘余物用水/飽和食鹽水(350/50ml)和DCM(500ml)處理。分離各層，并將水層用DCM(500ml)再萃取一次。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到棕色油狀物，將其在高真空干燥過周末。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化，使用0-10％甲醇/二氯甲烷梯度，得到所需產(chǎn)物，其為金色泡沫(3.6g，30.9％)。

MS(ES+)m/z 356(MH⁺)。

(h)(1S)-1-(羥基甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮

在室溫，將(1S)-1-(羥基甲基)-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯(1.6g，4.50mmol)溶于乙醇(100ml)，然后用鈀/碳(10％糊狀物)(1g，0.940mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫1atm氫氣下攪拌3小時(shí)。然后將反應(yīng)經(jīng)Celite墊過濾，并將雜質(zhì)用更多乙醇洗滌。然后將產(chǎn)物用DMF(400ml)洗脫，并將DMF蒸發(fā)，得到棕色固體(780mg)。然后將固體懸浮于30％MeOH/DCM(150ml)，并與二氧化錳(1.174g，13.51mmol)在室溫?cái)嚢?h，然后經(jīng)Celite墊過濾，將其用20％甲醇/二氯甲烷(100ml)洗滌。將溶劑蒸發(fā)，得到所需化合物，其為棕色固體(750mg，76％)。

MS(ES+)m/z 220(MH⁺)。

(i)甲磺酸[(1S)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基酯

在室溫，在氬氣中，將(1S)-1-(羥基甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(750mg，3.42mmol)懸浮于無水DCM(100ml)，然后用三乙胺(0.572ml，4.11mmol)處理。然后將混合物使用冰水浴冷卻。然后加入甲烷磺酰氯(0.293ml，3.76mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝亍?0分鐘后，無起始原料剩余，因此將混合物用飽和NaHCO₃(100ml)洗滌。將水層用20％MeOH/DCM(2x100ml)萃??；將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)得到產(chǎn)物，其為棕色泡沫(1.05g，90％純度(LCMS0)。

MS(ES+)m/z 297.9(MH⁺)。

(j)(1-{[(1R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

室溫，在氬氣中，將甲磺酸[(1S)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基酯(1.05g，3.53mmol)在無水乙腈(50ml)中的溶液用吡啶(0.343ml，4.24mmol)，然后用4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(0.884g，4.24mmol)處理。將混合物在70℃加熱1.5h，然后在90℃加熱3h。LCMS顯示約25％產(chǎn)物。因此，加入0.5當(dāng)量吡啶和0.5當(dāng)量4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯，并將反應(yīng)在90℃加熱過夜，然后在室溫?cái)嚢?天。反應(yīng)完成。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物在NaHCO₃和20％甲醇/二氯甲烷(100ml/100ml)之間分配。分離各層，并將水層用20％甲醇/二氯甲烷(2x100ml)再次萃取。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到1.7g粗品，將其通過硅膠色譜純化，使用0-5％甲醇/二氯甲烷梯度，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(0.57g，40.2％)。

MS(ES+)m/z 402(MH⁺)。

(k)(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽

在室溫，將(1-{[(1R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(0.57g，1.420mmol)在氯仿(7ml)中的溶液用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(7ml)處理。固體沉淀，并將混合物在室溫?cái)嚢琛?.5h后，加入一些甲醇溶解大多數(shù)固體，然后加入甲苯并除去所有溶劑，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(0.53g，100％)。

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

(l)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(165mg，0.441mmol)在氯仿(10ml)和甲醇(0.4ml)中的懸浮液用三乙胺(0.184ml，1.323mmol)處理，并攪拌0.25h(懸浮液轉(zhuǎn)變?yōu)槿芤?。然后加入[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)(73.7mg，0.441mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(280mg，1.323mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?.5h后，LCMS顯示仍有一些亞胺存在于混合物中，因此，加入1當(dāng)量三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入飽和NaHCO₃(50ml)，然后加入20％甲醇/二氯甲烷(80ml)，并將水層萃取，然后與有機(jī)層分離。將水層用20％甲醇/二氯甲烷(2x80ml)再次萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鎂上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到215mg粗產(chǎn)物，將其通過硅膠色譜純化，使用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(185mg，93％)。

δH CDCl₃，(250MHz)1.20-1.45(m，2H),1.75-2.75(m，8H)，2.94(d，1H)，3.00-3.15(m，1H)，3.81(s，2H)，4.30-4.45(m，1H)，4.50-4.65(m，1H)，4.90-5.10(m，1H)，5.74(s，2H)，6.34(d，1H)，7.19(s，1H)，7.77(d，1H)，7.87(s，1H)，7.99(s，1H)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

通過將游離堿溶于甲醇/二氯甲烷，并用1當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液制備標(biāo)題化合物。然后將其蒸發(fā)至干，并在真空干燥器中在P₂O₅的存在下干燥。

實(shí)施例13B(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮苯甲酸鹽

將(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽(45mg，0.092mmol)通過使用AD-H柱和CH₃CN:CH₃OH:.1％異丙基胺純化。收集主峰產(chǎn)物，并將溶劑除去。通過將化合物溶于MeOH并加入一當(dāng)量苯甲酸制備苯甲酸鹽。將溶液攪拌1小時(shí)，并將溶劑除去，得到產(chǎn)物。

實(shí)施例13C(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮富馬酸鹽

將(1R)-1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽(49mg，0.100mmol)溶于MeOH 10mL，并加載至SCX柱2g(用甲醇預(yù)先潤濕)。將粗品吸附在柱上，然后將柱用甲醇(15mL)洗滌。將產(chǎn)物使用2M NH₃的甲醇溶液(15mL)洗脫；將含有產(chǎn)物的級(jí)分蒸發(fā)，得到游離胺產(chǎn)物(41.5mg，92％收率)。LCMS和NMR與產(chǎn)物一致。將游離胺溶于少量DCM/MeOH，用1當(dāng)量富馬酸(10.6mg)處理，并攪拌10分鐘。將溶劑除去，并將固體在干燥器(P₂O₅)中干燥過夜，得到產(chǎn)物，其為白色固體(51mg，LCMS和NMR與產(chǎn)物一致)。

實(shí)施例14(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在氬氣中，在室溫，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(160mg，0.428mmol)(其制備參見實(shí)施例13(k)或15(d))在氯仿(10ml)和甲醇(0.400ml)中的懸浮液用三乙胺(0.179ml，1.283mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h(形成溶液)。然后加入2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)(77mg，0.428mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(272mg，1.283mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?.5h后，仍有一些亞胺存在(LCMS)，因此，加入1當(dāng)量三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入飽和NaHCO₃(50ml)，然后加入20％甲醇/二氯甲烷(80ml)，并將水溶液萃取，然后與有機(jī)層分離。將水層用20％甲醇/二氯甲烷(2x80ml)再次萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液在MgSO₄上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到215mg粗產(chǎn)物，將其通過硅膠色譜純化，使用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色泡沫(179mg，90％)。

δH CDCl₃，(250MHz)1.20-1.50(m，2H)，1.85(t，2H)，1.95-2.40(m，3H)，2.45-2.75(m，3H)，2.94(d，1H)，3.05-3.20(m，3H)，3.69(s，2H)，4.30-4.50(m，3H)，4.50-4.65(m，1H)，4.90-5.10(m，1H)，6.33，(d，1H)，6.99(s，1H)，7.67(d，1H)，7.86(s，1H)，8.01(s，1H)。

MS(ES+)m/z 467(MH⁺)。

通過將游離堿溶于DCM/MeOH并用1當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理制備標(biāo)題化合物。然后將其蒸發(fā)至干，并在真空干燥器中在P₂O₅的存在下干燥。

實(shí)施例15(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽

(a)(1S)-1-{[(甲基磺?；?氧基]甲基}-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯

在室溫，在氬氣中，將(1S)-1-(羥基甲基)-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯(242mg，0.681mmol)(其制備參見實(shí)施例13(g))溶于DCM(10ml)，然后用三乙胺(0.114ml，0.817mmol)處理。然后將混合物使用冰水浴冷卻。然后加入甲烷磺酰氯(0.058ml，0.749mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝亍?h后，將混合物用飽和NaHCO₃(10ml)洗滌。將水層用DCM(2x50ml)萃取，并將合并的有機(jī)萃取液在MgSO₄上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色泡沫(232mg，95％純度(LCMS)，74.7％)。

MS(ES+)m/z 434(MH⁺)。

(b)(1R)-1-{[4-({[(1,1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-1-哌啶基]甲基}-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯

在室溫，在氬氣中，將(1S)-1-{[(甲基磺?；?氧基]甲基}-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯(232mg，0.508mmol)溶于無水乙腈(10ml)，并用吡啶(0.049ml，0.610mmol)處理。然后加入4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(127mg，0.610mmol)，并將反應(yīng)在70℃加熱過夜。然后加入0.049ml吡啶和127mg 4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯至反應(yīng)中，并將溫度升高至80℃保持8h，然后將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物在飽和NaHCO₃和DCM(50/50ml)之間分配。分離各層，并將水層用DCM(2x50ml)再次萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到280mg粗產(chǎn)物，將其通過硅膠色譜純化，使用0-5％甲醇/二氯甲烷梯度，得到產(chǎn)物，其為黃色膠狀物(130mg，47.6％)。

MS(ES+)m/z 538(MH⁺)。

(c)(1-{[(1R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在室溫，將(1R)-1-{[4-({[(1,1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-1-哌啶基]甲基}-3,8-二氧代-1,2,3,4-四氫-5H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-5-甲酸苯基甲基酯(130mg，0.242mmol)溶于乙醇(10ml)，然后用鈀/碳(10％糊狀物)(100mg，0.094mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫在1atm氫氣中攪拌3小時(shí)。然后將反應(yīng)經(jīng)Celite墊過濾，并用更多乙醇(50ml)洗滌。將乙醇蒸發(fā)，得到黃色膠狀物(79mg)，將其溶于DCM(約10ml)，并與二氧化錳(63.1mg，0.725mmol)在室溫?cái)嚢柽^夜。然后再加入1.5當(dāng)量的更多二氧化錳(32mg)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?h。仍有起始原料存在(LCMS)，因此，加入2當(dāng)量二氧化錳。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?h，然后經(jīng)Celite墊過濾。將Celite墊用DCM洗滌，并將溶劑蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為棕色固體(76mg，78％)。

MS(ES+)m/z 402(MH⁺)。

(d)(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽

在室溫，將(1-{[(1R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(76mg，0.189mmol)在氯仿(2ml)中的溶液用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2ml)處理。固體沉淀，并將混合物在室溫?cái)嚢琛?.5h后，反應(yīng)完成，因此，加入一些甲醇溶解大多數(shù)固體，然后加入甲苯，并將所有溶劑除去，得到產(chǎn)物，其為深黃色固體(70.9mg，99％)。

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

(e)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(70mg，0.187mmol)在氯仿(5ml)和甲醇(0.2ml)中的懸浮液用三乙胺(0.078ml，0.561mmol)處理，并攪拌0.25h。形成溶液；然后加入2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例2(c)或WO03/087098實(shí)施例19(d)))(30.9mg，0.187mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(119mg，0.561mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?.5h后，加入1當(dāng)量更多三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入飽和NaHCO₃(50ml)，然后加入20％MeOH/DCM(50ml)，并將水層萃取，然后與有機(jī)層分離。將水層用20％MeOH/DCM(2x50ml)再次萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液在MgSO₄上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到90mg粗產(chǎn)物，將其通過硅膠色譜純化，使用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色膠狀物(60mg，71％)。

δH CDCl₃，(250MHz)1.25-1.50(m，2H)，1.86(t，2H)，2.10-2.75(m，6H)，2.93(d，1H)，3.00-3.15(m，1H)，3.79(s，2H)，4.20-4.45(m，5H)，4.50-4.65(m，1H)，4.90-5.10(m，1H)，6.33(d，1H)，6.82(s，1H)，7.76(d，1H)，7.86(s，1H)，8.11(s，1H)。

MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

通過將游離堿溶于DCM/MeOH，并用2當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理制備標(biāo)題化合物。然后將其蒸發(fā)至干，并在真空干燥器中在P₂O₅的存在下干燥。

實(shí)施例16A(2R)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

(a)2-{[6-(甲基氧基)-3-硝基-2-吡啶基]氨基}-1,3-丙二醇

在回流下，在氬氣中，將6-甲氧基-2-氯-3-硝基吡啶(36.94g，195.9mmol)和2-氨基丙烷-1.3-二醇(35.65g，391.3mmol，2當(dāng)量)在乙醇(500ml)中攪拌3小時(shí)。將混合物冷卻至室溫并放置過夜。將溶劑在減壓下部分除去(至約150ml)，并將所得亮黃色漿液倒入冰-水(1.5L)中，伴隨劇烈攪拌。將混合物攪拌1小時(shí)，然后趁冷抽吸過濾。將固體用冰冷的水(200ml)洗滌，并空氣干燥，得到標(biāo)題化合物，其為亮黃色固體(45.03g，94％)。LCMS顯示所需產(chǎn)物(93％)和7％起始原料。產(chǎn)物不僅進(jìn)一步純化直接使用。

MS(ES+)m/z 244(MH⁺)

(b)N-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)-3-硝基-2-吡啶胺

在氬氣中，將2-{[6-(甲基氧基)-3-硝基-2-吡啶基]氨基}-1,3-丙二醇(53.93g，228.7mmol)在2,2-二甲氧基丙烷(900ml)中攪拌，并加入對(duì)甲苯磺酸單水合物(1.00g)。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將其用二氯甲烷(1L)稀釋，并將所得溶液用飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)和固體碳酸氫鈉(20g)處理，伴隨劇烈攪拌(泡騰)。將混合物劇烈攪拌20分鐘，然后將剩余的水通過加入無水硫酸鈉吸附。將混合物抽吸過濾，并將固體用DCM(500ml)洗滌。將合并的濾液和清洗液在減壓下蒸除，得到黃色固體，將其與石油醚(40-60°)攪拌過周末。將固體通過抽吸過濾分離，用石油醚(40-60°)洗滌，并空氣干燥，得到標(biāo)題化合物，其為亮黃色固體(57.83g，92％)。

MS(ES+)m/z 284(MH⁺)。

(c)N²-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)-2,3-吡啶二胺

將N-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)-3-硝基-2-吡啶胺(35.00g，123.6mmol)分為兩等分，各溶于1,4-二噁烷(500ml)中，并在室溫，在10％Pd/碳(糊狀物，含1:1w:w水，4.00g)上在1atm氫氣壓力下氫化過夜。將混合物經(jīng)Celite抽吸過濾，使用氬氣氛圍并小心操作以最小化產(chǎn)物接觸空氣。將溶液在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物，其為深紫色油狀物。將其直接用于下一步。

MS(ES+)m/z 254(MH⁺)。

(d)N-[2-[(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]甘氨酸乙基酯

在氬氣中，將在實(shí)施例16A(c)中制備的粗品N²-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)-2,3-吡啶二胺(假定123.6mmol)溶于無水DMF(500ml)，并加入無水碳酸鉀(37.56g，2.2當(dāng)量)，然后加入溴乙酸乙酯(12.31ml，0.9當(dāng)量)。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將溶劑在減壓下除去，并將所得紅棕色漿液在DCM(1.2L)和水(300ml)之間分配。分離有機(jī)相，并用水(300ml)洗滌，硫酸鈉干燥，過濾和在減壓下蒸除，得到深紅色油狀物，將其溶于最少量DCM，并通過硅膠柱色譜純化(用5％-60％乙酸乙酯的石油醚(40-60°)溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物，其為深橙色油狀物(35.42g，84％)。

MS(ES+)m/z 340(MH⁺)

(e)4-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)-1,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(2H)-酮

將N-[2-[(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)氨基]-6-(甲基氧基)-3-吡啶基]甘氨酸乙基酯(35.42g，104.4mmol)溶于無水THF(500ml)，并在氬氣中將該溶液經(jīng)2小時(shí)滴加至冷卻的(0℃)氫化鈉(4.173g，60％w:w油中分散液，1.00當(dāng)量)在無水THF(500ml)中的懸浮液中。加入期間，懸浮液的顏色由橙色變?yōu)榫G色。將混合物在0℃攪拌另外15分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，并伴隨劇烈攪拌小心加入飽和氯化銨(15ml)(觀察到泡騰現(xiàn)象)。泡騰停止后，將混合物溫?zé)嶂潦覝兀嚢?小時(shí)，然后用乙酸乙酯(500ml)稀釋，并抽吸過濾。將固體用乙酸乙酯(300ml)洗滌，并將合并的濾液和清洗液在減壓下蒸除，得到深棕色固體。將其與石油醚(40-60°)(500ml)和乙酸乙酯(20ml)攪拌2h，并抽吸過濾，得到淺棕色固體，將其與石油醚(40-60°)(100ml)洗滌，并空氣干燥，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃褐色固體(25.37g，82.8％)。

MS(ES+)m/z 316(MNa⁺)。

(f)4-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(4H)-酮

在室溫，將4-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)-1,4-二氫吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(2H)-酮(25.37g)和活化的二氧化錳(120g，約15當(dāng)量)在DCM(500ml)中攪拌2小時(shí)，然后攪拌過夜。將混合物抽吸過濾，并將固體用DCM(2x100ml)洗滌。將合并的濾液和清洗液在減壓下蒸除，得到棕色泡沫；將其通過硅膠柱色譜純化(用0％-100％乙酸乙酯的石油醚(40-60°)溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物，其為淡黃褐色固體(17.40g，69％)。

MS(ES+)m/z 314(MNa⁺)。

(g)4-[2-羥基-1-(羥基甲基)乙基]-6-(甲基氧基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(4H)-酮

將4-(2,2-二甲基-1,3-二噁烷-5-基)-6-(甲基氧基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(4H)-酮(17.40g，59.7mmol)溶于四氫呋喃(THF)(220ml)，得到深黃色溶液。加入1M HCl水溶液(200ml)(在溶液中出現(xiàn)暫時(shí)的藍(lán)色和綠色)，并將現(xiàn)在的淡黃色溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，使用冷水浴，將混合物濃縮至大約300ml(一些固體在該過程中沉淀)，然后伴隨劇烈攪拌分批加入固體碳酸氫鈉(小心：泡騰)，直至混合物大約為pH 8。將所得黃色固體通過抽吸過濾收集，用水(2x20ml)洗滌，并空氣干燥，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃色固體(13.805g，91％)。

MS(ES+)m/z 252(MH⁺)。

(h)甲磺酸(3,8-二氧代-1,2,5a,8b-四氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基)甲基酯

在1L圓底燒瓶中放入4-[2-羥基-1-(羥基甲基)乙基]-6-(甲基氧基)吡啶并[2,3-b]吡嗪-3(4H)-酮(11.330g，45.1mmol)。加入無水氯仿(280ml)，然后加入三乙胺(31.4ml，225mmol)和甲烷磺酸酐(31.4g，180mmol)，得到深黃色-棕色溶液。加入甲烷磺酸酐期間，發(fā)生放熱，其足以導(dǎo)致溶劑沸騰。將混合物在氬氣中，在回流下劇烈攪拌4.5小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，用DCM稀釋至大約600ml，并用水(200ml)洗滌。分離有機(jī)相，并將水相用DCM(2x200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾和在減壓下蒸除，得到粗品甲磺酸酯，其為深棕色油狀物。將其在40-60°石油醚(200ml)和DCM(50ml)中放置過夜。將所得固體通過抽吸過濾分離，用4:1石油醚:DCM(2x50ml)洗滌和空氣干燥，得到標(biāo)題化合物，其為棕色無定形固體(6.950g，52％)。

MS(ES+)m/z 332(MNa⁺)，298(MH⁺)。

(i){1-[(3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

將粗品甲磺酸(3,8-二氧代-1,2,5a,8b-四氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基)甲基酯(6.950g，23.38mmol)溶于無水乙腈(200ml)中，并將混合物用吡啶(7.55ml，94.0mmol)、然后用4-哌啶基氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(10.30g，51.4mmol)處理。將混合物在氬氣中在回流下攪拌3h，然后在50℃攪拌過周末。然后將混合物在90℃攪拌2小時(shí)，然后將揮發(fā)物在減壓下除去，并將殘余物在DCM(600ml)和水(100ml)之間分配。分離有機(jī)相，并將水相用DCM(2x200ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用水(2x100ml)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾和在減壓下蒸除，得到深黃褐色固體；將其溶于最少量5％MeOH的DCM溶液，并用硅膠色譜純化，用0-10％MeOH的DCM溶液洗脫。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物，其為無定形淡黃褐色固體(5.444g，56.8％)。

MS(ES+)m/z 424(MNa⁺)，402(MH⁺)。

(j)2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(外消旋體和對(duì)映異構(gòu)體1和2的合成)

方法A(外消旋體的合成)：

將{1-[(3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(1.630g，4.06mmol)懸浮于DCM(30ml)，并加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(15ml)，得到亮黃色懸浮液(冒出氣泡)。將亮黃色混合物在室溫靜置1小時(shí)。LCMS顯示無起始原料剩余。將溶劑在減壓下除去，并將殘余物在減壓下干燥過夜，得到標(biāo)題化合物的二鹽酸鹽，其為無定形黃褐色固體(1.760g(>二鹽酸鹽的理論產(chǎn)率，因?yàn)榇嬖跉埩羧軇?。

將一部分粗品二鹽酸鹽(0.513g)溶于甲醇(4ml)和水(1ml)，并加載于SCX柱(10g)(用2柱體積的甲醇預(yù)先調(diào)節(jié))。然后將柱在重力下使用(i)甲醇(2x50ml)，(ii)0.5M氨的甲醇溶液(3x50ml級(jí)分)洗脫。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到粗品標(biāo)題化合物，其為黃褐色無定形固體(410mg)，其含有甲醇不溶的且LCMS不顯示的雜質(zhì)(可能是氯化銨)。將產(chǎn)物溶于甲醇(30ml)，并將懸浮液過濾。將固體用甲醇(20ml)洗滌，并將合并的濾液和清洗液在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物(360mg，87％)。

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

方法B

將{1-[(3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(9.735g，24.25mmol)懸浮于DCM(90ml)，并加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(45ml)，得到亮黃色懸浮液(并且冒出氣泡)。將亮黃色混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將溶劑在減壓下除去，得到粗品二鹽酸鹽，其為亮黃色無定形固體(10.420g，含有殘留溶劑)。

分三批，將外消旋的二鹽酸鹽(10.4g)通過手性HPLC使用Chiralpak AD(20微米)制備柱(用50:50:0.1乙腈:甲醇:異丙基胺作為流動(dòng)相)拆分為兩種對(duì)映異構(gòu)體。α值為3.1，且三次運(yùn)行均觀察到基線分離度。沒有重疊級(jí)分，并且兩種對(duì)映異構(gòu)體(作為游離堿)各以>99.8ee分離。

(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(洗脫的第一組分)：(3.30g，淺褐色固體，手性HPLC：100％ee)。

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

旋光度：αD＝-120°(C＝1.00，甲醇，21.8℃)。

(2S)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(洗脫的第二組分)：(3.30g，淺褐色固體，手性HPLC：99.8％ee)。

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

旋光度：αD＝+122°(C＝1.00，甲醇，21.8℃)。

(k)標(biāo)題化合物

在室溫，將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(100mg，0.332mmol)與[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)(45mg，0.811當(dāng)量)在氯仿:甲醇(9:1，v:v，5ml)中攪拌2小時(shí)；然后在室溫，伴隨劇烈攪拌，將混合物用三乙酰氧基硼氫化鈉(211mg，3.0當(dāng)量)處理30分鐘。將混合物通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液(1ml)淬滅。加入DCM(10ml)，并繼續(xù)劇烈攪拌10分鐘，然后分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除和在真空管線下干燥過周末，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色泡沫(70mg，44.3％)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃)8.00(1H，s)；7.82(1H，s)；7.77(1H，d，J＝9.7Hz)；7.18(1H，s)；6.39(1H，d，J＝9.7Hz)；5.73(2H，s)；5.03(1H，m)；4.55(1H，dd，J＝12.5Hz，4.6Hz)；4.38(1H，dd，J＝12.5Hz，9.2Hz)；3.80(2H，s)；3.13(1H，dd，J＝12.9Hz，3.5Hz)；2.93(1H，m)；2.70(1H，dd，J＝12.9Hz，9.0Hz)；2.67(1H，m)；2.50(1H，m)；2.33(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；2.25(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；1.85(3H，m)；1.36(2H，m)。

用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理上述游離堿(70mg)在DCM(1ml)中的溶液，在減壓下除去溶劑后，得到標(biāo)題化合物，其為淡黃褐色無定形固體(75mg)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

實(shí)施例17A(2S)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，將(2S)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j)(100mg，0.332mmol)與[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)(45mg，0.811當(dāng)量)在氯仿:甲醇(9:1，v:v，5ml)中攪拌2小時(shí)；然后伴隨劇烈攪拌，在室溫，將混合物用三乙酰氧基硼氫化鈉(211mg，3.0當(dāng)量)處理30分鐘。將混合物通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液(1ml)淬滅。加入DCM(10ml)，并繼續(xù)劇烈攪拌10分鐘，然后分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除和在真空管線下干燥過周末，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色泡沫(91mg，61％)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃)(等同于(2R)對(duì)映異構(gòu)體，實(shí)施例16A)8.00(1H，s)；7.82(1H，s)；7.77(1H，d，J＝9.7Hz)；7.18(1H，s)；6.39(1H，d，J＝9.7Hz)；5.73(2H，s)；5.03(1H，m)；4.55(1H，dd，J＝12.5Hz，4.6Hz)；4.38(1H，dd，J＝12.5Hz，9.2Hz)；3.80(2H，s)；3.13(1H，dd，J＝12.9Hz，3.5Hz)；2.93(1H，m)；2.70(1H，dd，J＝12.9Hz，9.0Hz)；2.67(1H，m)；2.50(1H，m)；2.33(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；2.25(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；1.85(3H，m)；1.36(2H，m)。

用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理上述游離堿在DCM(1ml)中的溶液，在減壓下除去溶劑后，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃色固體(95mg)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

實(shí)施例18 2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，將外消旋2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(400mg，1.327mmol)與[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)(200mg，0.9當(dāng)量)在氯仿:甲醇(9:1，v:v，15ml)中攪拌30分鐘；然后伴隨劇烈攪拌，在室溫，將混合物用三乙酰氧基硼氫化鈉(844mg，3.0當(dāng)量)處理30分鐘。將反應(yīng)通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液(5ml)淬滅，并將混合物在室溫?cái)嚢?分鐘。分離有機(jī)相，經(jīng)無水Na₂SO₄干燥，并在減壓下蒸除。將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M氨的甲醇溶液)的DCM溶液洗脫，將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到(外消旋)標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色泡沫(290mg，46.8％)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃)(與純手性樣品(實(shí)施例16A和17A)相同，除了NH的位置)8.00(1H，s)；7.82(1H，s)；7.77(1H，d，J＝9.7Hz)；7.18(1H，s)；6.39(1H，d，J＝9.7Hz)；5.73(2H，s)；5.03(1H，m)；4.55(1H，dd，J＝12.5Hz，4.6Hz)；4.38(1H，dd，J＝12.5Hz，9.2Hz)；3.80(2H，s)；3.13(1H，dd，J＝12.9Hz，3.5Hz)；2.93(1H，m)；2.70(1H，dd，J＝12.9Hz，9.0Hz)；2.67(1H，m)；2.50(1H，m)；2.33(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；2.25(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；1.85(2H，m)；(NH在1.70的HOD峰下)；1.36(2H，m)。

將游離堿(290mg)溶于DCM(5ml)，并用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題化合物，其為淡黃色無定形固體(281mg)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)

實(shí)施例16B(2R)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮苯甲酸鹽，和

實(shí)施例17B(2S)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮苯甲酸鹽

通過制備型手性HPLC(使用21x 250mm Chiralpak IA，(5微米)制備柱)，使用1:1乙腈(含有0.1％異丙基胺)和乙腈(含有0.1％TFA)作為流動(dòng)相，將外消旋2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽(200mg)拆分為兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體。

(2R)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(洗脫的第一組分)：(81mg)

旋光度：在23.9℃的{α}D＝-85.58°(C＝.798，在MeOH中)

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

將游離堿溶于甲醇，并用苯甲酸(1當(dāng)量)處理。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物(實(shí)施例16B)，其為苯甲酸鹽。

(2S)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(洗脫的第二組分)：(76mg)

旋光度：在23.9℃的{α}D＝+84.9°(C＝.798，在MeOH中)

MS(ES+)m/z 302(MH⁺)。

將游離堿溶于甲醇，并用苯甲酸(1當(dāng)量)處理。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物(實(shí)施例17B)，其為苯甲酸鹽。

實(shí)施例19A(2R)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(600mg,1.991mmol)、2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)(325mg，0.900當(dāng)量)和20μL乙酸在氯仿:甲醇(9:1，v:v，30ml)中攪拌2小時(shí)；然后伴隨劇烈攪拌，在室溫，將混合物用三乙酰氧基硼氫化鈉(1.266g，3.0當(dāng)量)處理30分鐘。將混合物通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液(6ml)淬滅。加入DCM(60ml)，并繼續(xù)劇烈攪拌10分鐘，然后分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。

將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除和在真空干燥過夜，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色無定形固體(658mg)。

MS(ES+)m/z 467(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)1.25-1.40(2H，m)，1.80-1.90(2H，m)，2.20-2.30(1H，m),2.30-2.40(1H，m)，2.45-2.55(1H，m)，2.65-2.75(2H，m)，2.90-2.95(1H，m)，3.10-3.20(3H，m)，3.75(2H，s)，4.35-4.45(3H，m)，4.50-4.60(1H，dd)，5.00-5.10(1H，m)，6.40(1H，d)，7.00(1H，s)，7.75(1H，d)，7.85(1H，s)，8.05(1H，s)。

將游離堿(650mg，1.393mmol)懸浮于無水DCM(10ml)，加入1M氯化氫的乙醚溶液(1393μL，1.000當(dāng)量)。將體系保持密封、振搖1分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，并將殘余物在真空干燥，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃色固體(682mg)。

實(shí)施例20 2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

實(shí)施例19B(2R)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮三氟乙酸鹽，和

實(shí)施例21(2S)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1，2-二氫-3H，8H-2a，5，8a-三氮雜苊烯-3，8-二酮

在室溫，將外消旋2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(360mg，1.195mmol)與2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)(195mg，0.9當(dāng)量)在氯仿:甲醇(9:1，v:v，15ml)中攪拌30分鐘；然后伴隨劇烈攪拌，在室溫，將混合物用三乙酰氧基硼氫化鈉(760mg，3.0當(dāng)量)處理30分鐘。將反應(yīng)通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液(5ml)淬滅，并將混合物在室溫?cái)嚢?分鐘。分離有機(jī)相，經(jīng)無水Na₂SO₄干燥，并在減壓下蒸除。將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M氨的甲醇溶液)的DCM溶液洗脫，將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色泡沫(235mg，42％)。

NMR和LC-MS與實(shí)施例19A的產(chǎn)物相同。

將游離堿(225mg)溶于DCM(5ml)，并用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例20)，其為淡黃色無定形固體(224mg)。

MS(ES+)m/z 467(MH⁺)。

通過制備型手性HPLC(使用21x 250mm Chiralpak IA，(5微米)制備柱)，使用2:2:1甲醇:乙腈:叔丁醇(含有0.1％異丙基胺)作為流動(dòng)相，將標(biāo)題外消旋鹽酸鹽(實(shí)施例20，80mg)拆分為兩種對(duì)映異構(gòu)體。

(2R)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(洗脫的第一組分)：(31mg)MS(ES+)m/z 467(MH⁺)。

2R原料具有98.7％純度；通過反相HPLC(Kromasil 5微米，C-18柱(21mm x 250mm)，用9:1水(+0.1％TFA)和乙腈(+0.1％TFA)洗脫(3次))進(jìn)一步純化，得到二-三氟乙酸鹽(實(shí)施例19B)。

(2S)-2-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(洗脫的第二組分)：(32mg)(實(shí)施例21)。該化合物的立體化學(xué)通過小分子x-射線晶體學(xué)確定。MS(ES+)m/z 467(MH⁺)。

實(shí)施例22 2-({4-[(2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，將外消旋2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(50mg，0.166mmol)在9:1v:v氯仿:甲醇(2ml)中與2,3-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144實(shí)施例2(c)或WO03/087098實(shí)施例19(d))(28mg，1.0當(dāng)量)攪拌30分鐘，然后將混合物用三乙酰氧基硼氫化鈉(105mg，3.0當(dāng)量)處理，伴隨劇烈攪拌。攪拌另外25分鐘后，將反應(yīng)通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液(2ml)淬滅，用二氯甲烷稀釋，并在室溫劇烈攪拌20分鐘。分離有機(jī)相(疏水砂芯漏斗)和在減壓下蒸除，得到橙色膠狀物；將其通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為乳狀無定形固體(30mg，40％)。

MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

¹H NMR(CD₃OD)δ7.98(1H，s)；7.88(1H，d，J＝9.7Hz)；7.77(1H，s)；6.94(1H，s)；6.37(1H，d，J＝9.7Hz)；5.12(1H，m)；4.43(2H，m)；4.35(2H，m)；4.29(2H，m)；3.73(2H，s)；3.07(1H，m)；3.03(1H，m)；2.83(1H，dd，J＝13.2Hz，8.3Hz)；2.70(1H，m)；2.44(1H，m)；2.26(1H，dt，J＝11.6Hz，2.4Hz)；2.18(1H，dt，J＝11.6Hz，2.4Hz)；1.85(2H，m)；1.33(2H，m)。

將游離堿溶于DCM(1ml)，并用1M氯化氫的乙醚溶液(67μL，1.0當(dāng)量)處理；將容器密封并在室溫保持5分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，得到標(biāo)題化合物(20mg；由于蒸發(fā)溶劑時(shí)飛濺，損失了一些產(chǎn)物)。

MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

實(shí)施例23(1R)-1-({4-[(2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-4-甲基-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)4-甲基-4-({[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)-1-哌啶甲酸1,1-二甲基乙基酯

將1-{[(1,1-二甲基乙基)氧基]羰基}-4-甲基-4-哌啶甲酸(12.092g，49.7mmol)在甲苯(300ml)中的溶液用三乙胺(13.85ml，99mmol)處理，然后用疊氮磷酸二苯酯(21.42ml，99mmol)處理，加熱至90℃保持2h(觀察到冒泡)，然后用芐醇(10.34ml，99mmol)處理。然后將反應(yīng)在90℃加熱另外18h，然后冷卻，用飽和碳酸氫鈉水溶液(500ml)處理，將有機(jī)萃取物分離，并將水相用乙醚(200ml)萃取，將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，色譜純化(0-50％乙酸乙酯:40-60石油醚，Rf＝0.4，在4:1乙酸乙酯:40-60石油醚中)，得到產(chǎn)物，其為透明油狀物(15.473g，89％)。

(b)(4-甲基-4-哌啶基)氨基甲酸苯基甲基酯

在氬氣中，在室溫，將4-甲基-4-({[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)-1-哌啶甲酸1,1-二甲基乙基酯(15.473g，44.4mmol)在DCM(50ml)中的溶液用三氟乙酸(50ml，649mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，溶于水(200ml)，用乙醚(3x 200ml)洗滌。然后將水相用固體碳酸鉀堿化，用20％甲醇/DCM(3x 200ml)萃取，然后將這些有機(jī)萃取物干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色油狀物(6.327g，57％)。

MS(ES+)m/z 249(MH⁺)。

(c)(1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-4-甲基-4-哌啶基)氨基甲酸苯基甲基酯

在0℃，在氬氣中，將(1S)-1-(羥基甲基)-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5A(g))(1.494g，6.78mmol)在DCM(50ml)中的溶液用三乙胺(1.7ml，12.20mmol)處理，然后用甲烷磺酰氯(0.800ml，10.27mmol)處理，然后溫?zé)嶂潦覝兀⒃谑覝財(cái)嚢?h。然后將反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鹽水溶液(200ml)處理，并將混合物用DCM(3x 200ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，得到粗品甲磺酸酯(2.082g，6.987mmol，103％粗產(chǎn)率)。將甲磺酸酯溶于無水乙腈(30ml)，然后用吡啶(1.097ml，13.57mmol)處理，并將(4-甲基-4-哌啶基)氨基甲酸苯基甲基酯(3.164g，12.74mmol)在無水乙腈(20ml)中的溶液加熱回流(加熱塊95℃)6h。然后將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，用飽和NaHCO₃水溶液(200ml)處理，并將混合物用DCM(3x 200ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為橙色固體，然后將其色譜純化(0-10％甲醇/DCM，Rf＝0.5，在10％甲醇/DCM中)，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(1.848g，61％)。

MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

(d)(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

在室溫，在氬氣中，將(1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-4-甲基-4-哌啶基)氨基甲酸苯基甲基酯(1.848g，4.10mmol)在乙醇中的溶液用鈀/碳(10％糊狀物)(0.462g，4.34mmol)(20％w/w)處理，并在1個(gè)大氣壓氫氣下攪拌2h，將反應(yīng)混合物經(jīng)薄Kielselguhr墊過濾，用乙醇(100ml)洗脫。將濾液用鈀/碳(10％糊狀物)(0.462g，4.34mmol)處理，并在1atm氫氣下攪拌18h。將反應(yīng)混合物經(jīng)薄Kielselguhr墊過濾，用乙醇(500ml)洗脫，然后將濾液蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(1.294g，100％)。

MS(ES+)m/z 317(MH⁺)。

(e)(1R)-1-[(4-異氰酸酯基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

在氬氣中，在室溫，將(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(1.294g，4.09mmol)在DCM(30ml)中的溶液用三乙胺(0.684ml，4.91mmol)處理，然后用碳酸二叔丁酯(1.045ml，4.50mmol)處理，最后用4-二甲基氨基吡啶(0.050g，0.409mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?h。將反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉水溶液(100ml)處理，并用DCM(3x 200ml)萃取。將合并的有機(jī)級(jí)分干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為黃色固體，然后將其色譜純化(0-10％甲醇/DCM，Rf＝0.5，在10％甲醇/DCM中)，得到產(chǎn)物，其為白色固體(561mg，40％)。

MS(ES+)m/z 343(MH⁺)。

(f)(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

在室溫，將(1R)-1-[(4-異氰酸酯基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(561mg，1.638mmol)在THF(10ml)和水(10.00ml)中的溶液用氫氧化鈉(5ml，10.00mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?h。然后將反應(yīng)用濃HCl(5ml，12M)處理，并在室溫?cái)嚢?8h，然后蒸發(fā)。將所得的固體用甲醇(20ml)處理，然后將溶劑從固體中傾倒，蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為不純的綠色固體(687mg，108％)。

MS(ES+)m/z 317(MH⁺)。

(g)N-(1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-4-甲基-4-哌啶基)-2,2,2-三氟乙酰胺

在0℃，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(687mg，1.765mmol)在DCM(20ml)和三乙胺(1.476ml，10.59mmol)中的溶液用三氟乙酸酐(0.299ml，2.118mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?h。將反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(50ml)處理，并用DCM(3x 100ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為橙色固體，然后將其色譜純化(0-10％甲醇/DCM，Rf＝0.4，在10％甲醇/DCM中)，得到產(chǎn)物，其為不純的黃色固體(375mg，52％)。

MS(ES+)m/z 413(MH⁺)。

(h)N-(1-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-4-甲基-4-哌啶基)-2,2,2-三氟乙酰胺

在室溫，將N-(1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-4-甲基-4-哌啶基)-2,2,2-三氟乙酰胺(375mg，0.909mmol)在1,4-二噁烷(20ml)中的溶液用DDQ(248mg，1.091mmol)處理，然后在80℃加熱1h。然后將反應(yīng)冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物用飽和K₂CO₃水溶液(5％，100ml)處理，然后用DCM(100ml)處理，并將混合物經(jīng)Kieselguhr過濾。將有機(jī)級(jí)分分離，并將水層用DCM(2x 100ml)萃取。然后將合并的有機(jī)溶劑干燥(MgSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其為黃色油狀物。硅膠色譜純化(0-10％甲醇:DCM，Rf＝0.4，在10％MeOH/DCM中)得到產(chǎn)物，其為透明油狀物(171mg，46％)。

MS(ES+)m/z 411(MH⁺)。

(i)(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

將N-(1-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-4-甲基-4-哌啶基)-2,2,2-三氟乙酰胺(171mg，0.417mmol)用7％碳酸鉀溶液(450mg在2ml水/5ml甲醇中)處理，并在室溫?cái)嚢?h，然后在70℃攪拌18h，然后蒸發(fā)和溶于5％MeOH/DCM(100ml)，過濾和通過SCX純化(5g，用MeOH，然后用0.5M NH₃/MeOH，然后用2M NH₃/MeOH洗脫)。然后將含有產(chǎn)物的級(jí)分蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為粉色固體(60mg，46％)。

MS(ES+)m/z 315(MH⁺)。

(j)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(34mg，0.108mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.1ml)中的懸浮液用2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(19.60mg，0.108mmol)(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)處理，并攪拌2h。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(68.8mg，0.324mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(20ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 100ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM，Rf＝0.4，在15％甲醇/DCM中)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體(32mg，0.067mmol，62％)。

MS(ES+)m/z 517(MH⁺)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.14(3H，s)，1.42-1.70(4H，m)，2.30-2.45(1H，m)，

2.50-2.82(4H，m)，3.05-3.22(3H，m)，3.68(2H，s)，4.28-4.48(3H，m)4.51-4.63(1H，m)，4.96-5.11(1H，m)，6.20-6.35(2H，m)，7.04(1H，s)，7.46-7.51(2H，m)，8.00(1H，s)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(10ml)中用1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單-鹽酸鹽，其為白色固體(34mg)。

實(shí)施例24(1R)-1-({4-甲基-4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-4-甲基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(26mg，0.083mmol)(其制備參見實(shí)施例23(i))在氯仿(2ml)和甲醇(0.1ml)中的懸浮液用[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(13.83mg，0.083mmol)(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)處理，并在室溫?cái)嚢?h。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(52.6mg，0.248mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.5h。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 50ml)萃取。將合并的有機(jī)級(jí)分干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM，Rf＝0.3，在15％甲醇/DCM中)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(29mg，75％,)。

MS(ES+)m/z 466(MH⁺)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.14(3H，s)，1.40-1.71(4H，m)，2.30-2.46(1H，m)，2.51-2.82(4H，m)，3.08-3.22(1H，m)，3.73(2H，s)，4.28-4.42(1H，m)4.51-4.65(1H，m)，4.92-5.09(1H，m)，5.72(2H，s)，6.20-6.34(2H，m)，7.25(1H，s)，7.50-7.51(2H，m)，7.98(1H，s)。

將游離堿在DCM/MeOH 2:1(5ml)中用1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題單-鹽酸鹽。

實(shí)施例25(2R)-2-({4-[(2,1,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(50mg，0.166mmol)(其制備參見實(shí)施例16(j))和2,1,3-苯并噻二唑-5-甲醛(25mg，0.918當(dāng)量)在9:1v:v氯仿:甲醇(1ml)中攪拌2.5小時(shí)。然后一次性加入三乙酰氧基硼氫化鈉(105mg，3.000當(dāng)量)，并將混合物在室溫劇烈攪拌30min。然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(0.5ml)，和二氯甲烷(10ml)，并將混合物在室溫劇烈攪拌10min，分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(41mg)。

MS(ES+)m/z 450(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ7.95(1H，d，J＝9.0Hz)；7.90(1H，s)；7.83(1H，s)；7.77(1H，d，J＝9.7Hz)；7.61(1H，dd，J＝9.2Hz，1.8Hz)；6.39(1H，d，J＝9.7Hz)；5.03(1H，m)；4.56(1H，dd，J＝12.5Hz，4.6Hz)；4.39(1H，dd，J＝12.5Hz，9.2Hz)；3.98(2H，s)；3.14(1H，dd，J＝13.2Hz，3.5Hz)；2.94(1H，broad m)；2.69(2H，m)；2.56(1H，m)；2.34(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；2.25(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；1.89(2H，m)；(NH在1.48的HOD峰下)；1.37(2H，m)。

將游離堿(35mg，0.078mmol)溶于DCM(1ml)，并加入1.0M氯化氫的乙醚溶液(78μL，1.0當(dāng)量)。將體系密封，并在室溫振搖1分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體(38mg)。

MS(ES+)m/z 450(MH⁺)。

實(shí)施例26(2R)-2-[(4-{[(7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(50mg，0.166mmol)(其制備參見實(shí)施例16(j))和7-氟-2,3-二氫-苯并[1,4]二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(28mg，0.926當(dāng)量)(其合成參見WO2002056882，實(shí)施例23(a))在9:1v:v氯仿:甲醇(1ml)中攪拌2.5小時(shí)。然后一次性加入三乙酰氧基硼氫化鈉(105mg，3.000當(dāng)量)，并將混合物在室溫劇烈攪拌30min。然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(0.5ml)，和二氯甲烷(10ml)，并將混合物在室溫劇烈攪拌10min，并分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為白色固體(48mg)。

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ7.82(1H，s)；7.76(1H，d，J＝9.7Hz)；6.79(1H，d，J＝7.2Hz)；6.57(1H，d，J＝10.5Hz)；6.38(1H，d，J＝9.7Hz)；5.03(1H，m)；4.54(1H，dd，J＝12.5Hz，4.4Hz)；4.38(1H，dd，J＝12.5Hz，9.4Hz)；4.23(4H，m)；3.71(2H，s)；3.12(1H，dd，J＝12.9Hz，3.3Hz)；2.92(1H，m)；2.68(2H，m)；2.68(2H，m)；2.47(1H，m)；2.33(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；2.24(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；1.83(2H，m)；(NH在1.50的HOD峰下)；1.33(2H，m)。

將游離堿(48mg，0.103mmol)溶于DCM(1ml)，并加入1.0M氯化氫的乙醚溶液(103μL，1.0當(dāng)量)。將體系密封，并在室溫振搖1分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體(55mg)。

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

實(shí)施例27(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-[1,4]氧硫雜環(huán)庚二烯并[2,3-c]吡啶-8-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(50mg，0.166mmol)(其制備參見實(shí)施例16(j))和3,4-二氫-2H-[1,4]氧硫雜環(huán)庚二烯并[2,3-c]吡啶-8-甲醛(29mg，0.895當(dāng)量)(可以類似于合成2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(WO2004058144，實(shí)施例60)但替換二溴乙烷為二溴丙烷來制備)在9:1v:v氯仿:甲醇(1ml)中攪拌2.5小時(shí)。然后一次性加入三乙酰氧基硼氫化鈉(105mg，3.000當(dāng)量)，并將混合物在室溫劇烈攪拌30分鐘。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(0.5ml)，和二氯甲烷(10ml)，并將混合物在室溫劇烈攪拌10min，分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色固體(65mg)。

MS(ES+)m/z 481(MH⁺)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ8.12(1H，s)；7.82(1H，s)；7.76(1H，d，J＝9.7Hz)；7.17(1H，s)；6.38(1H，d，J＝9.7Hz)；5.03(1H，m)；4.55(1H，dd，J＝12.5Hz，4.5Hz)；4.37(3H，m)；3.79(2H，s)；3.13(3H，m)；2.94(1H，m)；2.69(2H，m)；2.52(1H，m)；2.30(4H，m)；1.86(3H，m)；1.37(2H，m)。

將游離堿(60mg，0.125mmol)懸浮于無水DCM(1ml)，并加入1M氯化氫的乙醚溶液(125μL，1.000當(dāng)量)。將體系保持密封并振搖1分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，并將殘余物在真空管線上干燥，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃色固體(64mg)。

MS(ES+)m/z 481(MH⁺)。

實(shí)施例28(2R)-2-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

(a)[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-甲醛

標(biāo)題化合物如下制備：(i)用三苯基磷，偶氮二甲酸二異丙基酯和芐醇處理[5-({[4-(甲基氧基)苯基]甲基}氧基)-4-氧代-1,4-二氫-2-吡啶基]甲酸乙酯(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60(c))，得到乙酸{5-({[4-(甲基氧基)苯基]甲基}氧基)-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯；(ii)用三氟乙酸和三乙基硅烷處理乙酸{5-({[4-(甲基氧基)苯基]甲基}氧基)-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯，得到乙酸{5-羥基-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯三氟乙酸鹽；(iii)用1,1,1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺?；鵠甲烷磺酰胺和三乙胺處理乙酸{5-羥基-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯三氟乙酸鹽，得到乙酸(4-[(苯基甲基)氧基]-5-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-2-吡啶基)甲基酯；(iv)用(R)-(+)-2,2雙(二苯基膦基)-1,1-聯(lián)萘、乙酸鈀和2-甲基-2-丙烷硫醇鈉處理乙酸(4-[(苯基甲基)氧基]-5-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-2-吡啶基)甲基酯，得到乙酸{5-[(1,1-二甲基乙基)硫基]-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯；(v)用鈀/碳在1個(gè)大氣壓氫氣下處理乙酸{5-[(1,1-二甲基乙基)硫基]-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯，得到乙酸{5-[(1,1-二甲基乙基)硫基]-4-氧代-1,4-二氫-2-吡啶基}甲基酯；(vi)用濃鹽酸處理乙酸{5-[(1,1-二甲基乙基)硫基]-4-氧代-1,4-二氫-2-吡啶基}甲基酯，得到2-(羥基甲基)-5-巰基-4(1H)-吡啶酮；(vii)用碳酸鉀和二溴甲烷處理2-(羥基甲基)-5-巰基-4(1H)-吡啶，得到[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-基甲醇，和(viii)用二氧化錳處理[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-基甲醇，得到標(biāo)題化合物。

(b)標(biāo)題化合物

將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(50mg，0.166mmol)(其制備參見實(shí)施例16(j))和[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[4,5-c]吡啶-6-甲醛(25mg，0.901當(dāng)量)在9:1v:v氯仿:甲醇(1ml)中攪拌2.5小時(shí)。然后一次性加入三乙酰氧基硼氫化鈉(105mg，3.000當(dāng)量)，并將混合物在室溫劇烈攪拌30min。然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(0.5ML)，和二氯甲烷(10ml)，并將混合物在室溫劇烈攪拌10min，分離各相(疏水砂芯漏斗)。將有機(jī)相在減壓下蒸除，并將粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，并在減壓下蒸除，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色無定形固體(48mg)。

¹H NMR(CDCl₃)δ8.22(1H，s)；7.82(1H，s)；7.76(1H，d，J＝9.7Hz)；6.80(1H，s)；6.38(1H，d，J＝9.7Hz)；5.77(2H，s)；5.03(1H，m)；4.55(1H，dd，J＝12.5Hz，4.6Hz)；4.38(1H，dd，J＝12.5Hz，9.4Hz)；3.81(2H，s)；3.13(1H，dd，J＝13.0Hz，3.5Hz)；2.93(1H，m)；2.68(2H，m)；2.49(1H，m)；2.33(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；2.24(1H，dt，J＝11.4Hz，2.6Hz)；1.84(3H，m)；(NH在1.66的HOD峰下)；1.34(2H，m)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿(48mg，0.106mmol)懸浮于無水DCM(1ml)，并加入1M氯化氫的乙醚溶液(106μL，1.000當(dāng)量)。將體系保持密封并振搖1分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，并將殘余物在真空管線上干燥，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃色固體(48mg)。

MS(ES+)m/z 453(MH⁺)。

實(shí)施例29(2R)-2-[(4-{[(3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(50mg，0.166mmol)(其制備參見實(shí)施例16(j))和3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-甲醛(29mg，0.90當(dāng)量)(其合成參見WO2003087098，實(shí)施例301(d))在9:1氯仿:甲醇(1ml)中攪拌3小時(shí)，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(105mg，3.00當(dāng)量)。將混合物在室溫?cái)嚢枇硗?0分鐘，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液(0.5ml)，并將有機(jī)相用DCM(10ml)稀釋。將混合物劇烈攪拌10分鐘，然后將有機(jī)相分離(疏水砂芯漏斗)和在減壓下蒸除。將殘余物溶于DCM(約3ml)+1滴MeOH，并通過硅膠柱色譜純化(用0-12％(2M NH₃的MeOH溶液)的DCM溶液洗脫)。將合適的級(jí)分合并，和蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色無定形固體。

¹H NMR(CDCl₃)δ8.58(1H，寬單峰)；7.83(1H，s)；7.77(1H，d，J＝9.7Hz)；7.57(1H，d，J＝7.8Hz)；6.97(1H，d，J＝7.8Hz)；6.38(1H，d，J＝9.7Hz)；5.04(1H，m)；4.55(1H，dd，J＝12.5Hz，4.5Hz)；4.38(1H，dd，J＝12.5Hz，9.3Hz)；3.82(2H，s)；3.47(2H，s)：3.14(1H，dd，J＝13.0Hz，3.5Hz)；2.94(1H，m)；2.69(2H，m)；2.51(1H，m)；2.33(1H，dt，J＝11.4Hz，2.4Hz)；2.25(1H，dt，J＝11.4Hz，2.4Hz)；(NH在2.06的HOD峰下)；1.85(2H，m)；1.37(2H，m)。

MS(ES+)m/z 480(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿(43mg，0.090mmol)溶于DCM(2ml)，并加入1M氯化氫的乙醚溶液。將體系保持密封并振搖1分鐘，然后將溶劑在減壓下除去，并將殘余物在真空管線上干燥，得到標(biāo)題化合物，其為無定形黃色固體(38mg)。

MS(ES+)m/z 480(MH⁺)。

將溶劑除去，并將固體在干燥器(P₂O₅)中干燥過夜，得到產(chǎn)物，其為白色固體(51mg，LCMS和NMR與產(chǎn)物一致)。

實(shí)施例30(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(60mg，0.161mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液用三乙胺(0.067ml，0.482mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5h。然后將溶液用2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(市售可得)(23.75mg，0.145mmol)處理，并攪拌另外30min。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?0min，30min后，LC-MS顯示一些起始原料存在，加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(19mg)，將反應(yīng)攪拌15min。然后將其用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物，其為游離堿(48mg，67％)，其為黃色膠狀物。

¹H NMRδH CDCl₃，(250MHz)1.28-1.51(m，2H)，1.75-1.99(m，2H)，2.13-2.38(m，2H)，2.41-2.80(m，3H)，2.90-3.15(m，2H)，3.75(s，2H)，4.22(s，4H)，4.31-4.42(m，1H)，4.51-4.62(m，1H)，4.90-5.08(m，1H)，6.20-6.32(m，2H)，6.81(m，2H)，6.84(m，1H)，7.42-7.53(m，2H)。

MS(ES+)m/z 449(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(44mg，53％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例31(1R)-1-[(4-{[(8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-({4-[(1,2,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(50mg，0.134mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液用三乙胺(0.056ml，0.402mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5min。然后將溶液用8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(其合成參見WO2007122258，實(shí)施例8(b))(21.96mg，0.121mmol)處理，并攪拌另外30min。將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(85mg，0.402mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?0min，30min后，LCMS顯示仍有起始原料和產(chǎn)物的亞胺。因此加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(40mg)，將反應(yīng)攪拌另外30min。此后，LCMS顯示反應(yīng)完成。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)級(jí)分干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿(6mg，9.6％)，其為淡黃色固體，一些粗產(chǎn)物(15mg，24％)，其為不純的淡黃色固體，將其使用SCX柱純化，得到更多相同的標(biāo)題化合物的游離堿。

¹H NMRδH CDCl₃，(250MHz)1.15-1.50(m，2H),1.70-2.10(m，2H)，2.15-2.39(m，2H)，2.41-2.58(m，1H)，2.60-2.74(2H，m)，2.85-3.11(m，1H)，3.11-3.15(m，1H)，3.69(s，2H)，4.22-4.45(m，5H)，4.50-4.62(m，1H)，4.90-5.09(m，1H)，

6.20-6.35(m，2H)，6.60-6.72(m，2H)，7.41-7.52(m，2H)。

MS(ES+)m/z 467(MH⁺)。

然后將標(biāo)題化合物的游離堿用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，得到標(biāo)題化合物，其為單鹽酸鹽(16.7mg，27.5％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例32(1R)-1-[(4-{[(7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

在10mL圓底燒瓶中，混合(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5A(j)(80mg，0.266mmol)、7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-甲醛(其合成參見WO2003064421，實(shí)施例15(c))(62.3mg，0.293mmol)和碳酸氫鈉(100mg，1.190mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1ml)中，得到棕色溶液。加入硫酸鈉(200mg，1.408mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。15h后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(113mg，0.533mmol)，并將反應(yīng)在25℃在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物吸附在硅膠上，并使用0-10％MeOH/DCM(1％NH₄OH)純化。產(chǎn)物的LCMS和1H NMR與標(biāo)題化合物一致，其為游離堿。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)1.24-1.45(m，2H),1.79-1.96(m，2H)，2.22-2.31(m，2H)，2.46-2.53(m，1H)，2.59-2.68(m,1H)，2.87-3.09(m，4H)，3.89(s，2H)，4.42-4.51(m，2H)，4.69(s，2H)，5.07-5.15(m，1H)，6.26-6.35(m，2H)，7.39(s，1H)，7.75-7.81(m，2H),MS(ES+)m/z 497/499(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于10％MeOH/DCM，并用1N HCl處理，形成標(biāo)題化合物，其為二HCl鹽(55mg，36.2％)。

實(shí)施例33(1R)-1-[(4-{[(4-氯-7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

在10mL圓底燒瓶中，混合(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5A(j))(60mg，0.178mmol)、4-氯-7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-2-甲醛(其合成參見WO2008009700，實(shí)施例124(g))(38mg，0.178mmol)和碳酸氫鈉(150mg，1.78mmol)于DCM(5ml)和甲醇(1ml)中，得到棕色溶液。加入硫酸鈉(200mg，1.408mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。15h后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(113mg，0.533mmol)，并將反應(yīng)在25℃在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物吸附在硅膠上，并使用0-20％MeOH/DCM(1％NH₄OH)純化，得到標(biāo)題化合物(4mg橙色固體，4.51％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(250MHz)1.28-1.51(m，2H),1.75-1.99(m，2H)，2.13-2.38(m，2H)，2.41-2.80(m，3H)，2.90-3.15(m，2H)，3.75(s，2H)，4.31-4.42(m，1H)，4.51-4.62(m，1H)，4.8(s，2H)，4.90-5.08(m，1H)，6.25-6.32(m，2H)，7.51-7.53(m，2H),MS(ES+)m/z 498/500(MH⁺)。

實(shí)施例34(1R)-1-[(4-{[(7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

(a)[(2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫-5-嘧啶基)硫基]乙酸乙基酯

將5-溴-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮(15g，79mmol)和巰基乙酸乙基酯(8.58ml，79mmol)在DMF(200mL)中的溶液用四丁基硫酸氫銨(6.67g，19.64mmol)和碳酸鉀(23.88g，173mmol)處理，并在室溫?cái)嚢柽^夜。將溶液過濾和在減壓下濃縮，得到標(biāo)題化合物，其為黃色油狀物，其在減壓下形成泡沫。

MS(ES+)m/z 231.1(MH⁺)。

(b)[(2,4-二氯-5-嘧啶基)硫基]乙酸乙基酯

將[(2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫-5-嘧啶基)硫基]乙酸乙基酯(粗品)(18.19g，79mmol)在三氯氧磷(100ml，1073mmol)中的懸浮液用二甲基苯胺(2.500ml，19.72mmol)處理，并將反應(yīng)加熱至回流，并攪拌2小時(shí)。將溶液冷卻至室溫，并緩慢倒在冰上以淬滅過量的三氯氧磷。一旦淬滅，將水層用CH₂Cl₂萃取(3X)。將有機(jī)層合并，在Na₂SO₄上干燥，過濾和在減壓下濃縮。將粗品色譜純化，使用0-50％EtOAc/己烷梯度。產(chǎn)物分離為深黃色油狀物。

1H NMR(400MHz，氯仿-d)ppm 1.22(t，J＝7.07Hz，3H)3.71(s，2H)4.15(d，J＝7.33Hz，1H)8.53(s，1H)。

(c)[(4-氨基-2-氯-5-嘧啶基)硫基]乙酸乙基酯

在壓力管中，將[(2,4-二氯-5-嘧啶基)硫基]乙酸乙基酯(2.0g，7.49mmol)在DMF(75ml)中的溶液用氨的異丙醇溶液(7.49ml，14.97mmol)處理。將管蓋上蓋，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?。一旦完成，將溶液在減壓下濃縮，用泵抽吸，以除去殘留的DMF。將粗品色譜純化，使用0-10％丙酮/氯仿梯度。產(chǎn)物含有少量環(huán)化物質(zhì)(其為下一步的產(chǎn)物)。產(chǎn)物分離為淡黃色固體。

MS(ES+)m/z 248.0(MH⁺)。

(d)2-氯-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-7(6H)-酮

將[(4-氨基-2-氯-5-嘧啶基)硫基]乙酸乙基酯(0.786g，3.17mmol)在乙醇(50ml)中的懸浮液加熱至70℃。加入碳酸銫(1.034g，3.17mmol)，并將溶液加熱另外5分鐘。白色固體幾乎立即從溶液中沉淀。將溶液在減壓下濃縮。將殘余物溶于水，并用1N HCl調(diào)節(jié)至pH＝5。將水層用CH₂Cl₂萃取(2X)。將有機(jī)層合并，在Na₂SO₄上干燥，過濾和在減壓下濃縮，得到淡黃色固體。

MS(ES+)m/z 202.0(MH⁺)。

(e)2-乙烯基-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-7(6H)-酮

在微波瓶中，將2-氯-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-7(6H)-酮(0.639g，3.17mmol)用三丁基乙烯基錫(1.388ml，4.76mmol)和四(三苯基膦)鈀(0)(0.293g，0.254mmol)在1,4-二噁烷(4ml)和甲苯(4mL)中處理。將反應(yīng)在微波中在140℃加熱20分鐘。將溶液用EtOAc稀釋，并用飽和NaHCO₃溶液洗滌。將水層用EtOAc萃取(2X)。將有機(jī)溶液合并，在Na₂SO₄上干燥，過濾和在減壓下濃縮。將粗品色譜純化，使用0-60％CH₂Cl₂/(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH)(90:10:1)梯度。產(chǎn)物分離為所需產(chǎn)物和三苯基膦的混合物。通過研磨和用乙醚洗滌獲得純的物質(zhì)。產(chǎn)物分離為橙色固體。

MS(ES+)m/z 194.0(MH⁺)。

(f)7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-2-甲醛

將2-乙烯基-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-7(6H)-酮(0.262g，1.356mmol)在甲醇/DCM中的溶液冷卻至-78℃，并用臭氧處理，直至溶液變?yōu)樗{(lán)色。將在-78℃攪拌另外5分鐘。加入二甲硫(5.0ml，67.6mmol)，并將溶液溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過夜。將溶液濃縮在硅膠上，并將粗品色譜純化，使用0-100％CH₂Cl₂/(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH)(90:10:1)梯度。產(chǎn)物分離為淡黃色固體。

MS(ES+)m/z 195.9(MH⁺)。

(g)標(biāo)題化合物

將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5A(j))(0.060g，0.179mmol)在1:1CH₂Cl₂/MeOH(10mL)中的懸浮液用7-氧代-6,7-二氫-1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噻嗪-2-甲醛(0.035g，0.179mmol)和碳酸氫鈉(0.151g，1.793mmol)處理。加入過量的Na₂SO₄，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(0.114g，0.538mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將溶液濃縮在硅膠上，并將粗品色譜純化，使用0-100％CH₂Cl₂/(CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH)(90:10:1)梯度。標(biāo)題化合物的游離堿分離為黃色固體(0.027g)。

MS(ES+)m/z 480.1(MH⁺)。

1H NMR(400MHz，氯仿-d)ppm 1.62(d，J＝2.53Hz，1H)1.61(br.s.，1H)1.90-2.09(m，3H)2.20-2.42(m，2H)2.59-2.78(m，2H)3.14(dd，J＝12.88，3.03Hz，2H)3.53(s，2H)4.05-4.14(m，2H)4.41(dd，J＝12.38，9.35Hz，1H)4.57(dd，J＝12.63，4.04Hz，1H)5.04(dd，J＝7.96，4.42Hz，1H)5.32(s，1H)6.28(dd，J＝16.29，9.22Hz，2H)7.49(d，J＝3.28Hz，1H)7.50-7.57(m，1H)。

通過將游離堿溶于CH₂Cl₂并加入0.113mL 1N HCl/乙醚，形成標(biāo)題二-HCl鹽。

實(shí)施例35(1R)-1-({4-[(1,2,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-({4-[(1,2,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(60mg，0.161mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液用三乙胺(0.067ml，0.482mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5h。然后將溶液用1,2,3-苯并噻二唑-5-甲醛(其合成參見WO0208224實(shí)施例20(a))(23.75mg，0.145mmol)處理，并攪拌另外30min。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5min，45min后，LC-MS顯示反應(yīng)完成。然后將其用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-5％甲醇/DCM 5％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿(26mg，36％)，其為淡黃色固體。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.30-1.49(m，2H),1.80-1.98(m，2H)，2.21-2.39(m，2H)，2.51-2.61(m，1H)，2.61-2.75(m，2H)，2.90-3.02(m，1H)，3.05-3.19(m，1H)，4.04(s，2H)，4.31-4.42(m，1H)，4.51-4.61(m，1H)，4.92-5.05(m，1H)，6.20-6.31(m，2H)，7.45-7.53(2H，m)，7.71(d，1H)。8.11(d，1H)，8.56(s，1H)

MS(ES+)m/z 449(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(16.2mg，20.8％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例36(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1-苯并呋喃-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-({4-[(1,2,3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(60mg，0.161mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液用三乙胺(0.067ml，0.482mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5min。然后將溶液用2,3-二氫-1-苯并呋喃-5-甲醛(市售可得)(0.020ml，0.161mmol)處理，并攪拌另外30min。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?5min。然后將其用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)級(jí)分干燥(NaSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(5-25％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿(24mg，34.5％)，其為白色固體。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.22-1.49(m，2H),1.79-2.10(m，2H)，2.21-2.40(m，2H)，2.45-2.58(m，1H)，2.61-2.72(m，2H)，2.90-3.01(m，1H)，3.05-3.15(m，1H)，3.21(t，2H)，3.72(s，2H)，4.32-4.42(m，1H)，4.51-4.62(m，3H)，4.95-5.05(m，1H)，6.22-6.33(m，2H)，6.72(d，1H)，7.14(d，1H)，7.19(s，1H)，7.45-7.52(2H，m)，MS(ES+)m/z 433(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(22.7mg，28.6％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例37(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例13(k)或15(d))(50mg，0.100mmol)在氯仿(4ml)和甲醇(0.200ml)中的懸浮液用三乙胺(0.042ml，0.301mmol)處理，并攪拌0.25h(懸浮液變?yōu)槿芤?。然后加入3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例126(e))(16.35mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，仍有一些起始原料，因此加入30mg三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)，然后加入20％甲醇/DCM(25mL)，并將水層萃取，然后與有機(jī)層分離。將水層用20％甲醇/DCM(2x25mL)再萃取兩次。將合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到60mg粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化(0-20％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(39mg，87％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.25-1.45(m，2H)，1.78-2.08(m，4H)，2.22-2.38(m，2H)，2.45-2.60(m，1H)，2.62(d，1H)，2.67-2.80(m，3H)，2.93(d，1H)，3.05-3.14(m，1H)，3.78(s，2H)，4.15-4.25(m，2H)，4.30-4.45(m，1H)，4.50-4.60(m，1H)，4.95-5.05(m，1H)，6.33(d，1H)，6.96(s，1H)，7.75(s，1H)，7.87(s，1H)，8.07(s，1H)。

MS(ES+)m/z 449(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量甲醇/DCM，并用1當(dāng)量的1M氯化氫的乙醚溶液處理。除去溶劑，并將固體在干燥器(在P₂O₅的存在下)中干燥過周末，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽，其為黃色固體(40.6mg，79％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例38(1R)-1-({4-[(2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀拢瑢?1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例13(k)或15(d))(50mg，0.100mmol)在氯仿(20ml)和甲醇(0.800ml)中的懸浮液用三乙胺(0.042ml，0.301mmol)處理，并攪拌0.25h(懸浮液變?yōu)槿芤?。然后加入2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-甲醛(其合成參見WO2007122258，實(shí)施例43(f)(14.94mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，仍有一些起始原料，因此加入30mg三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)，然后加入20％甲醇/DCM(25mL)，并將水層萃取，然后與有機(jī)層分離。將水層用20％甲醇/DCM(2x25mL)再萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鈉上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到50mg粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(31mg，71.2％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(250MHz)1.25-1.43(m，2H)，1.81-2.00(m，2H)，2.22-2.35(m，2H)，2.49-2.54(m，1H)，2.66(d，1H)，2.71-2.74(m，1H)，2.92(d，1H)，3.07-3.12(m，1H)，3.19-3.24(m，2H)，3.82(s，2H)，4.37-4.42(m，1H)，4.56-4.62(m，3H)，4.96-5.06(m，1H)，6.33(d，1H)，7.18(s，1H)，7.76(d，1H)，7.86(s，1H)，8.06(s，1H)。

MS(ES+)m/z 435(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量甲醇/DCM，并用1當(dāng)量的1M氯化氫的乙醚溶液處理。將溶劑除去，并將固體在干燥器中(在P₂O₅的存在下)干燥過周末，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽，其為橙色固體(33.5mg，67.4％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例39(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀拢瑢?2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(60mg，0.199mmol)和3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例126(e))(29.2mg，0.179mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.061ml)中的懸浮液用三乙酰氧基硼氫化鈉(127mg，0.597mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?0min。然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 20ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和使用硅膠色譜純化(0-20％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡棕色固體。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.28-1.40(m，2H)，1.78-1.86(m，2H)，1.96-2.01(m，2H)，2.14-2.34(m，2H)，2.45-2.52(m，1H)，2.62-2.74(m，4H)，2.91(m，1H)，3.07-3.11(m，1H)，3.74(s，2H)，4.16-4.18(m，2H)，4.32-4.37(m，1H)，4.48-4.52(m，1H)，4.97-5.03(m，1H)，6.34(d，1H)，6.93(s，1H)，7.72(d，1H)，7.77(s，1H)，8.03(s，1H)，MS(ES+)m/z 449(MH⁺)。

將溶于少量DCM的標(biāo)題化合物的游離堿用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液(0.17ml)處理，蒸發(fā)和在干燥器中干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(57.3mg，56.4％產(chǎn)率)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例40(2R)-2-({4-[(2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(60mg，0.199mmol)和2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(市售可得)(29.4mg，0.179mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液用三乙酰氧基硼氫化鈉(127mg，0.597mmol)處理，并攪拌90min，90min后，LC-MS顯示反應(yīng)完成。將其用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿(46.8mg，58.4％)，其為黃色膠狀物。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.20-1.41(m，2H),1.73-1.91(m，2H)，2.09-2.38(m，2H)，2.42-2.55(m，1H)，2.61-2.72(m，2H)，2.85-2.95(m，1H)，3.05-3.15(m，1H)，3.68(s，2H)，4.32(m，4H)。4.32-4.42(m，1H)，4.49-4.59(m，1H)，4.95-5.06(m，1H)，6.39(d，1H)，6.71-6.85(m，3H)，7.75(d，1H)，7.81s，1H)。

MS(ES+)m/z 450(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(43.8mg，53.4％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例41(2R)-2-[(4-{[(8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(58.5mg，0.194mmol)和8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(其合成參見WO2007122258，實(shí)施例8(b))(31.8mg，0.175mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液攪拌0.5h。然后將其用三乙酰氧基硼氫化鈉(123mg，0.582mmol)處理，并攪拌90min。然后將其用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(NaSO₄)，過濾，蒸發(fā)和使用硅膠色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色膠狀物(44.9mg，49.5％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.24-1.55(m，2H)，1.78-1.85(m，2H)，2.21-2.36(m，2H)，2.44-2.51(m，1H)，2.64-2.73(m，2H)，2.92(d，1H)，3.10-3.14(m，1H)，3.65(s，2H)，4.26-4.30(m，4H)，4.35-4.40(m，1H)，4.52-4.56(m，1H)，4.99-5.05(m，1H)，6.38(d，1H)，6.62-6.67(m，2H)，7.76(d，1H)，7.81(s，1H)，

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)和在干燥器中干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(30.1mg，29.2％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例42 7-{[(1-{[(2R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-2-基]甲基}-4-哌啶基)氨基]甲基}-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(60mg，0.199mmol)和7-甲酰基-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈(其合成參見WO06014580制備13或WO2007122258，實(shí)施例31(d))(37.7mg，0.199mmol)在氯仿(2ml)和甲醇(0.100ml)中的懸浮液用三乙酰氧基硼氫化鈉(127mg，0.597mmol)處理，并攪拌90min。然后將其用飽和NaHCO₃水溶液(10ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 25ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(NaSO₄)，過濾，蒸發(fā)和使用硅膠色譜純化(0-20％甲醇/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色膠狀物(40mg，42.3％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.24-156(m，2H)，1.79-1.86(m，2H)，2.21-2.36(m，2H)，2.43-2.50(m，1H)，2.65-2.72(m，2H)，2.93(d，1H)，3.12-3.16(m，1H)，3.68(s，2H)，4.29-4.41(m，5H)，4.53-4.57(m，1H)，5.00-5.06(m，1H)，6.39(d，1H)，7.06-7.09(m，2H)，7.77(d，1H)，7.83(s，1H),

MS(ES+)m/z 475(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，蒸發(fā)和在干燥器中干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(45mg，42％)，其為淡黃色固體。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例43(2R)-2-({4-[(2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀拢瑢?2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮(其制備參見實(shí)施例16A(j))(70mg，0.232mmol)和2,3-二氫呋喃并[2,3-c]吡啶-5-甲醛(其合成參見WO2007122258，實(shí)施例43(f)(34.6mg，0.232mmol)在氯仿(5ml)和甲醇(0.250ml)中的懸浮液攪拌0.5h(懸浮液變?yōu)槿芤?。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(155mg，0.697mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，無起始原料剩余，因此加入飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)，然后加入20％甲醇/DCM(25mL)，并將水層萃取，然后與有機(jī)層分離。將水層用20％甲醇/DCM(2x25mL)再萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液在硫酸鈉上干燥，過濾和蒸發(fā)，得到90mg粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化(0-20％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色固體(77mg，76％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.28-1.48(m，2H)，1.81-1.89(m，2H)，2.21-2.36(m，2H)，2.43-2.55(m，1H)，2.64-2.72(m，2H)，2.93(d，1H)，3.10-3.14(m，1H)，3.19-3.23(m，2H)，3.81(s，2H)，4.34-4.40(m，1H)，4.52-4.61(m，3H)，4.95-5.08(m，1H)，6.37(d，1H)，7.17(s，1H)，7.76(d，1H)，7.81(s，1H)，8.06(s，1H)。

MS(ES+)m/z 435(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量甲醇/DCM，并用1當(dāng)量的1M氯化氫的乙醚溶液處理。將溶劑除去，并將固體在干燥器中(在P₂O₅的存在下)干燥過周末，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽，其為米色固體(78.9mg，68.5％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例44(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例13(k)或15(d))(50mg，0.100mmol)在氯仿(4ml)和甲醇(0.200ml)中的懸浮液用三乙胺(0.042ml，0.301mmol)處理，并攪拌0.25h(懸浮液變?yōu)槿芤?。然后加入2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(市售可得)(16.45mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，加入40mg更多三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入30mg更多三乙酰氧基硼氫化鈉。1h后，加入飽和NaHCO₃(25mL)，然后加入20％MeOH/DCM(25mL)，并將水層與有機(jī)層分離。將水層用20％MeOH/DCM(2x25mL)再萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液用NaSO₄干燥，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化(0-20％MeOH/DCM)，得到27mg標(biāo)題化合物的游離堿(59.9％總產(chǎn)率)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.21-1.42(m，2H)，1.70-1.92(m，2H)，2.21-2.36(m，2H)，2.41-2.55(m，1H)，2.58-2.78(m，2H)，2.88-2.98(m，1H)，3.05-3.14(m，1H)，3.68(s，2H)，4.25(s，4H)，4.43-4.52(m，1H)，4.51-4.62(m，1H)，4.98-5.06(m，1H)，6.34(d，1H)，6.75-6.84(m，3H)，7.76(d，1H)，7.87(s，1H)。

MS(ES+)m/z 450(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量MeOH/DCM，并用1當(dāng)量的1M HCl的Et₂O溶液處理。

將溶劑合并，并將固體在干燥器(P₂O₅)中干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(26mg，0.051mmol，50.7％產(chǎn)率)，其為黃色固體。

實(shí)施例45(1R)-1-({4-[([1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

向(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j)(60mg，0.161mmol)中加入氯仿(3ml)、甲醇(0.3ml)和三乙胺(0.067ml，0.482mmol)。將反應(yīng)在氮?dú)鈿夥障聰嚢?0分鐘，然后加入[1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-甲醛(其制備參見實(shí)施例49(b))(25.2mg，0.153mmol)。將反應(yīng)攪拌另外2小時(shí)，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)，并繼續(xù)攪拌16小時(shí)。加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)，并攪拌30分鐘。加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)，并繼續(xù)攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)在飽和NaHCO₃和20％MeOH的DCM溶液之間分配。將水溶液用20％MeOH的DCM溶液再次萃取，并將合并的有機(jī)萃取液通過疏水砂芯漏斗并過濾，得到紅棕色固體(約65mg)。將其通過硅膠色譜純化，用0-20％MeOH的DCM溶液洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃褐色膠狀物(18mg)。

¹H NMRδH CD₃OD 400MHz 1.30(m，1H)，1.42(m，1H)，1.88(br d，1H)，1.98(br d，1H)，2.28(q，2H)，2.63(m，2H)，2.89(dd，1H)，3.01(dd，1H)，3.06(br d，1H)，4.08(s，2H)，4.45(m，2H)，5.10(m，1H)，6.28(dd，2H)，7.76(d，2H)，8.41(br d，1H)，9.08(br d，1H)

MS(ES+)m/z 450(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于2:1DCM:MeOH(1ml)，并加入HCl(1M的乙醚溶液)(0.040ml，0.04mmol)。將溶劑蒸發(fā)，得到淡棕色固體(22mg，28％)。

實(shí)施例46(1R)-1-[(4-{[(4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5A(j))(80mg，0.238mmol)、4-氟-1H-苯并咪唑-2-甲醛(其合成參見WO2003087098，實(shí)施例320)(42.9mg，0.261mmol)和碳酸氫鈉(100mg，1.190mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到棕色懸浮液。加入硫酸鈉(200mg，1.408mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。15h后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(101mg，0.475mmol)，并將反應(yīng)在25℃氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物吸附在硅膠上，并和使用0-10％MeOH/DCM(1％NH₄OH)純化，得到標(biāo)題化合物的游離堿。LCMS和1H NMR與所需產(chǎn)物一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)1.35-1.55(m，2H),1.90-1.96(m，2H)，2.30-2.41(m，2H)，2.71-2.81(m，2H)，2.91-2.99(m,1H)，3.05-3.15(m，2H)，4.20(s，2H)，4.41-4.50(m，2H)，4.69(s，2H)，5.10-5.20(m，1H)，6.25-6.36(m，2H)，6.91-7.05(m，1H)，7.16-7.25(m，1H)，7.31-7.39(m，1H)，7.75-7.81(m，2H),

MS(ES+)m/z 449(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于10％MeOH/DCM，并用1N HCl處理，形成標(biāo)題化合物，其為二HCl鹽(17mg，0.033mmol，13.73％產(chǎn)率)。

實(shí)施例47(1R)-1-[((2S)-2-{[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]甲基}-4-嗎啉基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

(a)[((2S)-4-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-2-嗎啉基)甲基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在0℃，在100mL圓底燒瓶中加入(1S)-1-(羥基甲基)-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(其制備參見實(shí)施例5A(g))(450mg，2.043mmol)和三乙胺(0.342ml，2.452mmol)于DCM(20ml)中的溶液，得到橙色溶液。加入甲烷磺酰氯(0.174ml，2.248mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并攪?h。LCMS指示已經(jīng)形成甲磺酸酯。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋，并用2X 25mL飽和NaHCO₃水溶液洗滌。分離有機(jī)相并在Na₂SO₄上干燥。將溶液在真空下濃縮，并溶于乙腈(20.00ml)。加入吡啶(0.500ml)，然后加入[(2R)-2-嗎啉基甲基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(其合成參見WO2008009700實(shí)施例89(e))(884mg，4.09mmol)，并將反應(yīng)加熱至75℃。將反應(yīng)攪拌5h，之后，LCMS指示反應(yīng)完成。將反應(yīng)冷卻至室溫，并在真空濃縮。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋，并用25mL飽和NaHCO₃水溶液洗滌。分離有機(jī)相，并在Na₂SO₄上干燥。將所得殘余物在硅膠上純化，使用0-10％MeOH/DCM，得到標(biāo)題化合物(805mg，1.539mmol，75％產(chǎn)率)，分離為紅色油狀物。

MS(ES+)m/z 419(MH⁺)。

(b)[((2S)-4-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-2-嗎啉基)甲基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯

在室溫，在氮?dú)庀?，?0mL圓底燒瓶中加入[((2S)-4-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-2-嗎啉基)甲基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(805mg，1.924mmol)于1,4-二噁烷(10ml)中的溶液，得到橙色溶液。加入DDQ(655mg，2.89mmol)，并且反應(yīng)變?yōu)榉浅：?。將反?yīng)油浴上加熱至90℃，并攪拌30min。將反應(yīng)冷卻至室溫，加入200mL5％K₂CO₃水溶液，并將反應(yīng)用DCM(3X200mL)萃取。將合并的有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌；將有機(jī)層分離，并在Na₂SO₄上干燥，并濃縮，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物加至硅膠柱，并用0-20％MeOH/CHCl₃洗脫，得到標(biāo)題化合物(830mg，1.794mmol，93％產(chǎn)率)，其為紅色油狀物。

MS(ES+)m/z 417(MH⁺)。

(c)(1R)-1-{[(2S)-2-(氨基甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(HCl)

向50mL圓底燒瓶中加入[((2S)-4-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-2-嗎啉基)甲基]氨基甲酸1,1-二甲基乙基酯(830mg，1.993mmol)于DCM(10ml)中的溶液，得到棕色溶液。加入4N HCl的二噁烷溶液(2.491ml，9.96mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢琛?0min后，溶液變渾濁，因此加入2mL甲醇，并將反應(yīng)攪拌另外30min。將反應(yīng)在真空下濃縮，得到所需產(chǎn)物，其為HCl鹽(520mg，1.474mmol，74.0％產(chǎn)率)，其為棕色固體，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。

(d)標(biāo)題化合物：

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-{[(2S)-2-(氨基甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(HCl)(85mg，0.241mmol)、[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(40.3mg，0.241mmol)(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)和NaHCO₃(60.7mg，0.723mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到黃色懸浮液。將反應(yīng)攪拌過夜，并加入三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)。將應(yīng)攪拌4h，然后經(jīng)Celite墊過濾，并將墊用10％MeOH/DCM洗滌。硅膠色譜純化，用0-10％MeOH/CHCl₃(1％NH₄OH)洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其中LCMS、¹HNMR一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)2.02-2.13(m，1H)，2.34-2.49(m，2H)，2.60-2.78(m，2H)，2.85-3.08(m，2H)，3.40-3.68(m，2H)，3.72-3.89(m，1H)，4.40-4.51(m，2H)，4.89(s，2H)，5.10-5.20(m，1H)，5.80-5.89(m，2H)，6.23-6.38(m，2H)，7.72-7.82(m，2H)，7.90-7.96(m，2H),

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于10％MeOH/DCM，并用500uL 1N HCl的乙醚溶液處理。將溶液在真空下濃縮，得到標(biāo)題化合物，其為二HCl鹽(49mg，0.091mmol，37.6％產(chǎn)率)，其為褐色固體。

實(shí)施例48(1R)-1-{[(2S)-2-({[(7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-{[(2S)-2-(氨基甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(HCl)(其制備參見實(shí)施例47(c))(85mg，0.241mmol)、7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲醛(51.0mg，0.241mmol)(其合成參見WO2003064421，實(shí)施例15(c))和NaHCO₃(60.7mg，0.723mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到黃色懸浮液。加入Na₂SO₄(171mg，1.205mmol)，將反應(yīng)攪拌過夜，并加入三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)。將反應(yīng)攪拌4h，經(jīng)Celite墊過濾，并將墊用10％MeOH/DCM洗滌。硅膠色譜純化，用0-10％MeOH/CHCl₃(1％NH₄OH)洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其中LCMS、1H NMR與所需產(chǎn)物一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)2.05-2.13(m，1H)，2.32-2.49(m，2H)，2.59-2.80(m，2H)，2.88-3.07(m，3H)，3.42(s，2H)，3.40-3.49(m，1H)，3.58-3.67(m，1H)，3.72-3.96(m，3H)，4.42-4.51(m，2H)，4.68(s，2H)，5.10-5.18(m，1H)，6.22-6.35(m，2H)，7.39(s，1H)7.72-7.80(m，2H)。

MS(ES+)m/z 513/515(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于10％MeOH/DCM，并用500uL 1N HCl的乙醚溶液處理。將溶液在真空下濃縮，得到標(biāo)題化合物，其為二HCl鹽(61mg，0.104mmol，43.2％產(chǎn)率)，其為淡黃色固體。

實(shí)施例49(2R)-2-({4-[([1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮

(a)6-[(E)-2-苯基乙烯基][1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶

向6-溴[1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶(其制備參見Indian Journal of Chemistry,Section B:Organic Chemistry Including Medicinal Chemistry(1979),17B(1),13-16)(1.9g，8.79mmol)、[(E)-2-苯基乙烯基]硼酸(1.561g，10.55mmol)和四三苯基磷鈀(0)(0.508g，0.440mmol)中加入在水(19ml)中的1,4-二噁烷(38ml)和碳酸鉀(1.276g，9.23mmol)。然后將反應(yīng)在回流下攪拌1.5小時(shí)。將冷卻的反應(yīng)在氯仿和水之間分配。用疏水砂芯漏斗分離各相，并將有機(jī)萃取物濃縮，得到黑色固體/膠狀物(～2.4g)。將該粗品通過硅膠色譜純化，用20-50％EtOAc的環(huán)己烷溶液洗脫，得到產(chǎn)物，其為黃色/棕色固體(0.88g)。

¹H NMRδH D6-DMSO 400MHz 7.36(t，1H)，7.45(t，2H)，7.55(d，1H)，7.70(d，2H)，7.78(d，1H)，8.3(s，1H)，9.51(s，1H)

MS(ES+)m/z 240(MH⁺)。

(b)[1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-甲醛

向6-[(E)-2-苯基乙烯基][1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶(0.88g，3.68mmol)中加入丙酮(30ml)、50wt.％N-甲基-嗎啉-N-氧化物的水溶液(1.525ml，7.35mmol)和四氧化鋨的水溶液(0.225ml，0.037mmol)。然后將反應(yīng)攪拌20小時(shí)。向淡棕色溶液中加入高碘酸鈉(3.15g，14.71mmol)，并繼續(xù)攪拌45分鐘。將溶劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減少，并將剩余物在氯仿和水之間分配。將水相用氯仿再次萃取，并將合并的有機(jī)萃取液通過疏水砂芯漏斗并濃縮，得到棕色/黑色固體(0.6g)。將部分該物質(zhì)(0.575g)通過硅膠色譜純化，用20％EtOAc的環(huán)己烷溶液洗脫，得到淡黃色固體(160mg)。

¹H NMRδH D6-DMSO 400MHz 9.18(s，1H)，9.49(s，1H)，10.30(s，1H)

(c)標(biāo)題化合物

向(2R)-2-[(4-氨基環(huán)己基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例16A(j))(100mg，0.333mmol)中加入氯仿(3ml)、甲醇(0.300ml)和三乙胺(0.139ml，0.999mmol)。將混合物攪拌20分鐘，然后加入[1,2,5]噻二唑并[3,4-b]吡啶-6-甲醛(52.2mg，0.316mmol)。將反應(yīng)攪拌過夜，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，0.999mmol)，并繼續(xù)攪拌1小時(shí)。加入另外的三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，0.999mmol)，并將反應(yīng)攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)在飽和NaHCO₃和20％MeOH的氯仿溶液之間分配。將水相用20％MeOH的氯仿溶液再次萃取，并將合并的有機(jī)萃取液通過疏水砂芯漏斗并濃縮。將該粗品(～110mg)通過色譜純化，用0-20％MeOH的DCM溶液洗脫，得到產(chǎn)物(46mg，27％)。將其冷凍干燥除去1,4-二噁烷，得到標(biāo)題化合物，其為淡棕色固體(45mg，25％))。

¹H NMRδH CDCl₃ 400MHz 1.38(m，2H)，1.91(t，2H)，2.25(dt，1H)，2.35(dt，1H)，2.58(m，1H)，2.71(m，2H)，2.96(br d，1H)，3.16(dd，1H)，4.06(s，2H)，4.40(dd，1H)，4.56(dd，1H)，5.04(m，1H)，6.40(d，1H)，7.78(d，1H)，7.83(s，1H)，8.26(s，1H)

MS(ES+)m/z 451(MH⁺)。

實(shí)施例50(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-色烯-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

在室溫，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(188mg，0.503mmol)和三乙胺(0.175ml，1.256mmol)在氯仿(4.5ml)和甲醇(0.5ml)中的溶液在室溫?cái)嚢?5min，然后在室溫滴加3,4-二氫-2H-色烯-7-甲醛(其合成參見WO2007067511實(shí)施例19(色滿-7-甲醛))(68mg，0.419mmol)在氯仿(2ml)中的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?h，然后一次性加入三乙酰氧基硼氫化鈉(444mg，2.096mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。LCMS顯示產(chǎn)物的混合物，殘留一些醛。加入另外的三乙酰氧基硼氫化鈉(267mg，1.258mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?h。將反應(yīng)用NaHCO₃(水溶液)(20ml)淬滅，并用20％MeOH/DCM(3x 30ml)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)MgSO₄干燥，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-50％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色透明油狀物(49mg，0.11mmol，26％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.28-1.42(m，2H)，1.78-1.87(m，2H)，1.97-2.01(m，2H)，2.17-2.31(m，2H)，2.47-2.55(m，1H)，2.62-2.68(m，2H)，2.74-2.77(m，2H)，2.95(d，1H)，3.07(dd，1H)3.71(m，2H)，4.17(t，2H)，4.35(dd，1H)，4.56(dd，1H)，4.96-5.02(m，1H)，6.23-6.31(m，2H)，6.72(s，1H)，6.77(dd，1H)，6.98(d，1H)，7.47-7.50(m，2H)。

MS(ES+)m/z 447(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿在2ml DCM中用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽，其為淡橙色粉末(51mg，25％)。LCMS與產(chǎn)物一致。

實(shí)施例51(1R)-1-({4-[(2,3-二氫-1-苯并呋喃-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

(a)2,3-二氫-1-苯并呋喃-6-甲醛

在-78℃，向6-溴-2,3-二氫-1-苯并呋喃(190mg，0.955mmol)在THF(4ml)中的溶液中加入n-BuLi(1.313ml，2.100mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌45min，然后滴加DMF(1.109ml，1.6M的己烷溶液，14.32mmol)在THF(2ml)中的溶液，并將反應(yīng)在-78℃攪拌10min，然后溫?zé)嶂潦覝?，并攪?h。LCMS顯示無起始原料剩余。然后將反應(yīng)在室溫?cái)嚢枇硗?.5h。將反應(yīng)混合物小心地倒入2M HCl(50ml)，并用乙酸乙酯(3x 50ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用飽和食鹽水(50ml)洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(用0-100％EtOAc/己烷洗脫)。將相關(guān)級(jí)分合并，并蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，其為透明、無色油狀物(44mg，0.297mmol，31％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)3.28(t，2H)，4.64(t，2H)，7.26(s，1H)，7.33-7.39(m，2H)，9.91(s，1H)。

(b)標(biāo)題化合物

在室溫，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(133mg，0.356mmol)和三乙胺(0.124ml，0.891mmol)在氯仿(4.5ml)和甲醇(0.5ml)中的溶液在室溫?cái)嚢?5min，然后在室溫滴加2,3-二氫-1-苯并呋喃-6-甲醛(44mg，0.297mmol)在氯仿(2ml)中的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)用NaHCO₃(水溶液)(20ml)淬滅，用20％MeOH/DCM(3x 30ml)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)MgSO₄干燥，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-50％MeOH/DCM)。將相關(guān)級(jí)分合并，并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為淡黃色透明油狀物(18mg，0.04mmol，26％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.40-1.53(m，2H)，1.85-1.92(m，2H)，2.16-2.30(m，2H)，2.54-2.68(m，3H)，2.98(d，1H)，3.08(dd，1H)，3.16(t，2H)，3.78(s，2H)，4.33-4.38(m，1H)，4.52-4.57(m，3H)，4.96-5.02(m，1H)，6.24(d，1H)，6.29(d，1H)，6.79(s，1H)，6.84(d,1H)，7.13(d，1H)，7.47-7.50(m，2H)。

MS(ES+)m/z 433(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿在2ml DCM中用1M HCl的乙醚溶液(0.04ml，0.04mmol)滴加處理，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽，其為橙色粉末(20mg，14％)。

實(shí)施例52(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-色烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽

將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(12mg，0.032mmol)和三乙胺(0.139ml，0.999mmol)在DCM(4.5ml)和甲醇(0.5ml)中的溶液在室溫?cái)嚢?min。加入3,4-二氫-2H-色烯-6-甲醛(市售可得)(45mg，0.277mmol)，并將所得溶液攪拌過夜18h。LCMS顯示有醛剩余且無胺剩余。加入另外的(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(120mg，0.321mmol)和另外的三乙胺(0.138ml，0.999mmol)，并將所得混合物攪拌1h。加入另外的三乙酰氧基硼氫化鈉(294mg，1.387mmol)，并將所得溶液攪拌60h。將反應(yīng)用DCM(10ml)和碳酸氫鈉溶液(10ml)稀釋，并在室溫?cái)嚢?0分鐘，并用甲醇:DCM(20％，3x150ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)和色譜純化(0-50％甲醇:DCM)。濃縮柱洗脫液，得到棕色油狀物，將其再次色譜純化(0-50％甲醇:DCM)。將相關(guān)級(jí)分合并，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為白色固體(27mg，0.06mmol，22％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.76-1.86(m，2H)，1.91-1.97(m，2H)，2.04-2.06(mm，2H)，2.15(t，1H)，2.24(t，1H)，2.62(dd，1H)，2.75-2.81(m，4H)，3.06-3.14(m，2H)，3.85(s，2H)，4.12(t，2H)，4.40(dd，1H)，4.51(dd，1H)，4.96-5.02(m，1H)，6.22-6.29(m，2H)，6.77(d，1H)，7.25-7.27(m，2H)，7.47-7.50(m，2H)。

MS(ES+)m/z 447(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿在氯仿(5ml)和甲醇(3ml)中用氯化氫的乙醚溶液(1M，0.06ml，0.06mmol)滴加處理，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽，其為白色固體(6mg，4％)。

實(shí)施例53(2R)-2-[(4-{[(5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

(a)5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯

將3-氟-1,2-苯二醇(5.278g，41.2mmol)在DMF(50ml)中的溶液用碳酸鉀(17.08g，124mmol)和1,2-二溴乙烷(3.91ml，45.3mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?2h。將反應(yīng)用水(200ml)處理，并用3x200ml(EtOAc)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用水(200ml)、飽和食鹽水(200ml)洗滌，干燥(MgSO₄)，蒸發(fā)和色譜純化(0-20％EtOAc-環(huán)己烷)，得到產(chǎn)物，其為透明油狀物(2.437g，38％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)4.22-4.39(m，4H)，6.60-6.82(m，3H)。

(b)6-溴-5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯

在0℃，將5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯(0.335g，2.173mmol)在甲醇(10ml)中的溶液用溴(0.134ml，2.61mmol)處理，并經(jīng)10min溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫?cái)嚢?8h。然后將反應(yīng)用飽和偏亞硫酸鈉水溶液(100ml)處理，用3x 100ml(DCM)萃取，將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，色譜純化(0-50％EtOAC:環(huán)己烷)，得到產(chǎn)物，其為透明油狀物，其在冰箱中固化，得到白色固體(351mg，59％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)4.20-4.39(m，4H)，6.52-6.65(m，1H)，6.91-7.05(m，1H)。

(c)5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛

在-78℃，在氮?dú)鈿夥障?，?-溴-5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯(146mg，0.627mmol)在THF(5ml)中的溶液用n-BuLi(0.551ml，1.378mmol)處理，并在-78℃攪拌15min，然后用DMF(0.243ml，3.13mmol)在THF(2.00ml)中的溶液處理。將反應(yīng)在-78℃攪拌10min，然后經(jīng)10min將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝兀⒃谑覝財(cái)嚢?.5h。將反應(yīng)用2M HCl(20ml)處理，并用乙酸乙酯(3x 100ml)萃取。將有機(jī)萃取物蒸發(fā)，干燥(MgSO₄)，過濾，蒸發(fā)，色譜純化(0-100％EtOAC:環(huán)己烷)，得到產(chǎn)物，其為白色固體(25mg，22％)。

MS(ES+)m/z 183(MH⁺)。

(d)標(biāo)題化合物

在室溫，在氬氣中，將(2R)-2-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例16A(j)，在手性hplc純化后，胺轉(zhuǎn)化為二鹽酸鹽)(51.3mg，0.137mmol)在氯仿(5ml)和甲醇(0.1ml)中的懸浮液用三乙胺(0.057ml，0.411mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?.25h。然后將溶液用5-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(24.95mg，0.137mmol)處理，并攪拌另外0.5h。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(174mg，0.822mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?h，加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(174mg，0.137mmol)，將反應(yīng)攪拌另外1h，然后將反應(yīng)用飽和NaHCO₃水溶液(20ml)處理，并用20％甲醇/DCM(3x 20ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO₄)和色譜純化(0-20％甲醇:DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為白色固體(29mg，0.062mmol，45％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.20-1.46(m，2H),1.73-1.95(m，2H)，2.15-2.39(m，2H)，2.41-2.55(m，1H)，2.61-2.75(m，2H)，2.88-3.00(m，1H)，3.10-3.20(m，1H)，3.78(s，2H)，4.22-4.42(m，5H)。4.51-4.60(m，1H)，4.95-5.09(m，1H)，6.38(d，1H)，6.62(m，1H)，6.71-6.80(m，1H)，7.76(d，1H)，7.81(s，1H)

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿(29mg)在DCM/MeOH 2:1(5ml)中用1M HCl的乙醚溶液62ul)處理，然后蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，其為單-HCl鹽(31mg，0.062mmol)，其為黃色固體。

實(shí)施例54(1R)-1-{[(2S)-2-({[(7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-{[(2S)-2-(氨基甲基)-4-嗎啉基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(HCl)(85mg，0.241mmol)(其制備參見實(shí)施例47(c))、7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(48.3mg，0.265mmol)(其合成參見WO2002056882，實(shí)施例23(a))和NaHCO₃(60.7mg，0.723mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到黃色懸浮液。加入硫酸鈉(171mg，1.205mmol)，將反應(yīng)攪拌過夜，此時(shí)加入三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.482mmol)。將反應(yīng)攪拌4h，此時(shí)LCMS顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物用10％MeOH的DCM溶液(20mL)稀釋，過濾，吸附在硅膠上并通過硅膠色譜純化，用0-10％MeOH/CHCl₃(1％NH₄OH)洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其中LCMS、¹H NMR與所需產(chǎn)物一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)2.03-2.10(m，1H)，2.33-2.49(m，2H)，2.51-2.68(m，2H)，2.83-2.95(m，2H)，2.99-3.07(m，1H)，3.39(s，2H)，3.41-3.50(m，1H)，3.55-3.63(m，1H)，3.68-3.80(m，3H)，4.42-4.51(m，2H)，4.79(s，2H)，5.08-5.18(m，1H)，6.22-6.32(m，2H)，6.58-6.62，(m，1H)，6.81-6.88(m，1H)，7.73-7.80(m，2H)。

MS(ES+)m/z 483(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿用5％MeOH/CHCl₃稀釋，并用1N HCl的乙醚溶液100uL處理，并濃縮，得到標(biāo)題化合物，其為二HCl鹽(55mg，0.099mmol，41.1％產(chǎn)率)，其為淡黃色固體。

實(shí)施例55(1R)-1-[((3S)-3-{[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]甲基}-1-吡咯烷基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽

(a)(3S)-3-{[(三氟乙?；?氨基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1,1-二甲基乙基酯

向100mL圓底燒瓶中加入(3S)-3-(氨基甲基)-1-吡咯烷甲酸1,1-二甲基乙基酯(市售可得)(750mg，3.74mmol)于DCM(20ml)中的溶液，得到無色溶液。加入三乙胺(1.044ml，7.49mmol)，并將反應(yīng)冷卻至0℃。加入三氟乙酸酐(0.635ml，4.49mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝赝瑫r(shí)攪拌14h。將溶液用100mL DCM稀釋，并用飽和NaHCO₃水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌。分離有機(jī)層，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾和濃縮。將殘余物接受硅膠色譜純化，得到產(chǎn)物(0.990g，3.34mmol，89％產(chǎn)率)，其為淡黃色油狀物。

MS(ES+)m/z 297(MH⁺)。

(b)2,2,2-三氟-N-[(3R)-3-吡咯烷基甲基]乙酰胺鹽酸鹽

在25℃，向100mL圓底燒瓶中加入(3S)-3-{[(三氟乙?；?氨基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1,1-二甲基乙基酯(830mg，2.80mmol)于DCM(25ml)中的溶液，得到無色溶液。加入4N HCl(3.50ml，14.01mmol)的二噁烷溶液，并將反應(yīng)攪拌過夜。將反應(yīng)在真空下濃縮，得到所需化合物，其為無色油狀物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步反應(yīng)。分離得到2,2,2-三氟-N-[(3R)-3-吡咯烷基甲基]乙酰胺(550mg，2.364mmol，84％產(chǎn)率)。

MS(ES+)m/z 197(MH⁺)。

(c)N-[((3S)-1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-3-吡咯烷基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺

0℃，向100mL圓底燒瓶中加入(1S)-1-(羥基甲基)-1,2,5,6-四氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮HCl(其制備參見實(shí)施例47(c))(350mg，1.589mmol)、三乙胺(0.266ml，1.907mmol)于DCM(20ml)中的溶液，得到橙色溶液。加入甲烷磺酰氯(0.135ml，1.748mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，并攪?h。LCMS顯示已經(jīng)形成甲磺酸酯。將反應(yīng)用DCM(100mL)稀釋，并用2X 25mL飽和NaHCO₃水溶液洗滌。分離有機(jī)相，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。將溶液在真空下濃縮，用乙腈(20.00ml)稀釋，并加入吡啶(0.500ml)。加入2,2,2-三氟-N-[(3R)-3-吡咯烷基甲基]乙酰胺(550mg，2.364mmol)，并將反應(yīng)加熱至80℃，并攪拌25h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)冷卻至室溫，并在真空下濃縮。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋，并用25mL飽和NaHCO₃溶液洗滌。將有機(jī)相分離，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。將粗產(chǎn)物在硅膠上純化，用0-15％MeOH/DCM洗脫，得到產(chǎn)物(240mg，0.602mmol，37.9％產(chǎn)率)，其為淡黃色油狀物。

MS(ES+)m/z 399(MH⁺)。

(d)N-[((3S)-1-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-3-吡咯烷基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺

在室溫，在氮?dú)庀拢?5mL圓底燒瓶中加入N-[((3S)-1-{[(2R)-4,9-二氧代-1,2,8,9-四氫-4H,7H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-2-基]甲基}-3-吡咯烷基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(240mg，0.602mmol)于1,4-二噁烷(5ml)中的溶液，得到橙色溶液。加入DDQ(205mg，0.904mmol)，并且反應(yīng)變得很深色。將反應(yīng)在油浴上加熱至80℃，并攪拌10h。將反應(yīng)冷卻至室溫、加入5％K₂CO₃水溶液(20mL)，并將反應(yīng)用DCM(3X100mL)萃取。將合并的有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，并將有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾和濃縮，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物加至硅膠柱上，并用0-20％MeOH/CHCl₃洗脫，得到產(chǎn)物(85mg，0.214mmol，35.6％產(chǎn)率)，其為橙色固體。

MS(ES+)m/z 397(MH⁺)。

(e)(1R)-1-{[(3S)-3-(氨基甲基)-1-吡咯烷基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

向25mL圓底燒瓶中加入N-[((3S)-1-{[(1R)-4,9-二氧代-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-1-基]甲基}-3-吡咯烷基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(85mg，0.214mmol)在甲醇(9ml)和水(1.00ml)中的溶液，得到黃色溶液。加入碳酸鉀(59.3mg，0.429mmol)，并將反應(yīng)攪拌過夜。LCMS顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)用20％MeOH/DCM(100mL)稀釋，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾和濃縮，得到產(chǎn)物(60mg，0.200mmol，93％產(chǎn)率)，其為橙色固體。

MS(ES+)m/z 301(MH⁺)。

(f)標(biāo)題化合物

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-{[(3S)-3-(氨基甲基)-1-吡咯烷基]甲基}-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(60mg，0.200mmol)、[1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-甲醛(33.4mg，0.200mmol)(其合成參見WO2004058144實(shí)施例61)和硫酸鈉(250mg，1.760mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1.00ml)中的溶液，得到橙色懸浮液。將反應(yīng)在氮?dú)庀聰嚢柽^夜。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(85mg，0.400mmol)，并將反應(yīng)攪拌3h。將反應(yīng)混合物用10％MeOH/DCM(20mL)稀釋，過濾，吸附在硅膠上，然后通過硅膠色譜純化，用0-10％MeOH/DCM(1％NH₄OH)洗脫，得到標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色油狀物。LCMS/NMR與所需產(chǎn)物一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)1.34-1.43(m，1H)，1.85-1.96(m，1H)，2.15-2.30(m，2H)，2.38-2.51(m，3H)，2.68-2.75(m，1H)，2.04-3.17(m，2H)，3.41-3.50(m，1H)，3.69(s，2H)，4.42-4.51(m，2H)，5.08-5.18(m，1H)，5.83(s，2H)，6.26-6.32(m，2H)，7.33(s，1H)，7.73-7.78(m，2H)，7.94(s，1H)。

MS(ES+)m/z 452(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿用10％MeOH/CHCl₃稀釋，加入100uL 1N HCl的乙醚溶液，并將混合物在真空下濃縮，得到標(biāo)題化合物，其為二鹽酸鹽(47mg，0.090mmol，44.9％產(chǎn)率)，其為黃褐色固體。

實(shí)施例56 7-{[(1-{[(1R)-3,8-二氧代-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-1-基]甲基}-4-哌啶基)氨基]甲基}-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例13(k)或15(d))(50mg，0.100mmol)在氯仿(4ml)和甲醇(0.121ml)中的懸浮液用三乙胺(0.587ml，4.21mmol)處理，并攪拌15min(懸浮液形成溶液)。然后加入7-甲?；?2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-5-甲腈(其合成參見WO06014580制備13或WO2007122258，實(shí)施例31(d))((18.95mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)攪拌30min。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(63.7mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)攪拌1h。1h后，LC-MS顯示一些亞胺中間體，因此加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(63.7mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)攪拌2h。之后，LCMS仍顯示亞胺中間體，加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(63.7mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)攪拌過夜(16h)，之后，LCMS顯示無起始原料。加入飽和NaHCO₃(10mL)，然后加入20％MeOH/DCM(20ml)，并將水相萃取，然后與有機(jī)層分離。將水相用20％MeOH/DCM(2x20ml)再次萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(NaSO₄)，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物在硅膠柱上純化(0-20％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物的游離堿(33mg，69.4％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.15-1.41(m，2H)，1.72-1.91(m，2H)，2.19-2.39(m，2H)，2.40-2.52(m，1H)，2.53-2.78(m，2H)，2.89-2.98(m，1H)，3.02-3.14(m，1H)，3.68(s，2H)，4.22-4.49(m，5H)，4.51-4.62(m，1H)，4.98-5.08(m，1H)，6.32(d，1H)，7.06(m，2H)，7.78(d，1H)，7.88(s，1H)。

MS(ES+)m/z 475(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM，并用一當(dāng)量1M HCl的乙醚溶液處理。得到標(biāo)題化合物，其為單HCl鹽(33mg，65％)。

實(shí)施例57(1R)-1-[(4-{[(7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例13(k))或15(d)(50mg，0.100mmol)在氯仿(3ml)和甲醇(0.150ml)中的懸浮液用三乙胺(0.042ml，0.301mmol)處理，并攪拌0.25h(懸浮液形成溶液)。然后加入7-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(其合成參見WO2002056882，實(shí)施例23(a))(18.25mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫過夜。然后加入更多三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，無起始原料剩余。加入飽和NaHCO₃(30mL)，然后加入20％MeOH/DCM(30mL)，并將水相萃取，然后與有機(jī)層分離。將水相用20％MeOH/DCM(2x30mL)再次萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液NaSO₄干燥，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化(0-20％MeOH/DCM)，得到35mg標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體(74.7％)。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.21-1.41(m，2H)，1.76-1.92(m，2H)，2.10-2.39(m，2H)，2.41-2.52(m，1H)，2.61-2.79(m，2H)，2.86-2.98(m，1H)，3.05-3.14(m，1H)，3.72(s，2H)，4.18-4.29(m，4H)，4.38-4.43(m，1H)，4.51-4.62(m，1H)，4.94-5.05(m，1H)，6.33(d，1H)，6.58(d，1H)，6.80(1H，d)，7.77(d，1H)，7.86(s，1H)。

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM/MeOH，并用1當(dāng)量1M HCl的Et2O溶液處理。將溶劑除去，并將固體在干燥器中(P₂O₅)干燥，得到標(biāo)題化合物，其為鹽酸鹽，其為深黃色固體(36mg)。

實(shí)施例58(1R)-1-[(4-{[(8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽

在室溫，在氮?dú)庀?，?1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例13(k)或15(d))(50mg，0.100mmol)在氯仿(25ml)和甲醇(1.250ml)中的懸浮液用三乙胺(0.042ml，0.301mmol)處理，并攪拌0.25h(懸浮液形成溶液)。然后加入8-氟-2,3-二氫-1,4-苯并二氧雜環(huán)己二烯-6-甲醛(其合成參見WO2007122258，實(shí)施例8(b))(19.62mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢琛?h后，仍有起始原料，因此加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將在室溫?cái)嚢柽^夜。仍有起始原料，因此加入三乙酰氧基硼氫化鈉(67.1mg，0.301mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?h。加入飽和NaHCO₃(30mL)，然后加入20％MeOH/DCM(30mL)，并將水相萃取，然后與有機(jī)層分離。將水相用20％MeOH/DCM(2x30mL)再次萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取液NaSO₄干燥，過濾和蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化(0-20％MeOH/DCM)，得到26mg標(biāo)題化合物的游離堿，其為黃色固體。

¹H NMRδH CDCl₃，(400MHz)1.20-1.41(m，2H)，1.72-1.89(m，2H)，2.09-2.35(m，2H)，2.42-2.52(m，1H)，2.55-2.78(m，2H)，2.85-2.99(m，1H)，3.08-3.15(m，1H)，3.63(s，2H)，4.22-4.48(m，5H)，4.51-4.63(m，1H)，4.95-5.06(m，1H)，6.32(d，1H)，6.61-6.72(m，2H)，7.75(d，1H)，7.89(s，1H)。

MS(ES+)m/z 468(MH⁺)。

將標(biāo)題化合物的游離堿溶于少量DCM/MeOH，并用1當(dāng)量1M HCl的Et2O溶液處理。將溶劑除去，并將固體在干燥器中(P₂O₅)干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，其為鹽酸鹽，其為黃色固體(26.6mg，與產(chǎn)物一致)。

實(shí)施例59(1R)-1-[(4-{[(2-氧代-2H-色烯-7-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(80mg，0.266mmol)、2-氧代-2H-色烯-7-甲醛(其合成參見WO2008009700實(shí)施例224)(46.4mg，0.266mmol)和NaHCO₃(100mg，1.190mmol)于二氯甲烷(DCM)(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到棕色溶液。加入硫酸鈉(200mg，1.408mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。15h后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(113mg，0.533mmol)，并將反應(yīng)在25℃在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物吸附在硅膠上，并使用0-10％MeOH/DCM(1％NH₄OH)純化，得到標(biāo)題化合物，其為游離堿(30mg，0.064mmol，24.07％產(chǎn)率)，其為黃褐色固體。LCMS和1H NMR與所需產(chǎn)物一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)1.20-1.39(m，2H)，1.72-1.89(m，2H)，1.90-2.09(m，1H)，2.13-2.31(m，2H)，2.39-2.50(m，1H)，2.56-2.70(m，2H)，2.90-3.10(m，2H)，3.83(s，2H)，4.32-4.58(m，2H)，4.98-5.18(m，1H)，6.20-6.39(m，3H)，7.19-7.28(m，2H)，7.39-7.51(m，3H)，7.62-7.71(m，1H)。

MS(ES+)m/z 459(MH⁺)。

實(shí)施例60(1R)-1-[(4-{[(2-氧代-2H-色烯-7-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(45mg，0.134mmol)、7-氯-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-甲醛(通過(1)用LiAlH₄還原7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-甲醛(其合成參見WO2003064421實(shí)施例15(c))，得到(7-氯-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基)甲醇，和然后(2)用MnO₂(29.2mg，0.147mmol)氧化制備)和NaHCO₃(100mg，1.190mmol)于二氯甲烷(DCM)(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到棕色懸浮液。加入硫酸鈉(200mg，1.408mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。15h后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(56.6mg，0.267mmol)，并將反應(yīng)在25℃在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物吸附在硅膠上，并使用0-10％MeOH/DCM(1％NH₄OH)純化，得到標(biāo)題化合物，其為游離堿(9.4mg，0.019mmol，14.57％產(chǎn)率)。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)1.49-1.70(m，2H)，2.00-2.17(m，2H)，2.28-2.49(m，2H)，2.72-2.81(m，1H)，2.89-2.94(m，1H)，3.05-3.20(m，3H)，3.38(s，2H)，3.50-3.58(m，1H)，4.18(s，2H)4.20-4.24(m，2H)，4.43-4.50(m，2H)，5.08-5.18(m，1H)，6.28-6.35(m，2H)，7.06(s，1H)，7.78-7.83(m，2H)。

MS(ES+)m/z 483/485(MH⁺)。

實(shí)施例61(1R)-1-[(4-{[(2-氧代-2H-色烯-7-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

向10mL圓底燒瓶中加入(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(75mg，0.223mmol)、7-氯-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-甲醛(通過(1)用LiAlH₄還原7-氯-3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-甲醛(其合成參見WO2003087098實(shí)施例306(e))，得到(7-氯-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基)甲醇，和然后(2)用MnO₂(47.8mg，0.223mmol)氧化制備)和NaHCO₃(100mg，1.190mmol)于DCM(4ml)和甲醇(1ml)中的溶液，得到棕色懸浮液。加入硫酸鈉(200mg，1.408mmol)，并將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。15h后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(94mg，0.445mmol)，并將反應(yīng)在25℃在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物吸附在硅膠上，并使用0-10％MeOH/DCM(1％NH4OH)純化，得到標(biāo)題化合物，其為游離堿(45mg，0.090mmol，40.5％產(chǎn)率)。LCMS和1H NMR與所需產(chǎn)物一致。

¹H NMRδH D-4MeOH，(400MHz)1.20-1.45(m，2H)，1.65-1.92(m，2H)，2.19-2.39(m，2H)，2.42-2.71(m，2H)，2.82-3.10(m，5H)，3.65-3.80(m，4H)，4.40-4.50(m，2H)，5.05-5.20(m，1H)，6.25-6.35(m，2H)，7.22(s，1H)，7.72-7.83(m，2H)。

MS(ES+)m/z 483/485(MH⁺)。

實(shí)施例62(1R)-1-({4-[(3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮

在室溫，在氬氣中，將(1R)-1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮二鹽酸鹽(其制備參見實(shí)施例5A(j))(0.075g，0.201mmol)在二氯甲烷(5ml)和甲醇(1ml)中的懸浮液用3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-甲醛(通過(1)用LiAlH₄還原3-氧代-3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-甲醛(其合成參見WO2003087098，實(shí)施例301(d))，得到3,4-二氫-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噻嗪-6-基甲醇，和然后(2)用MnO₂(0.036g，0.201mmol)氧化制備)、碳酸氫鈉(0.150g，1.786mmol)和硫酸鈉(0.300g，2.112mmol)處理，并在室溫?cái)嚢?h。然后將溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(0.128g，0.603mmol)處理，并攪拌過周末65小時(shí)。將溶液蒸發(fā)，溶于CH₃OH，吸附在硅膠上，并用硅膠色譜純化(0-15％CH₃OH的DCM溶液(含1％NH₄OH))，得到標(biāo)題化合物，其為游離堿(59mg，63％)，其為淺褐色固體。

¹H NMR DMSO-D6，(400MHz)1.02-1.27(m，2H),1.61-1.78(m，2H)，1.81-1.96(s，1H)，2.01-2.19(m，2H)，2.28-2.38(m，1H)，2.67-2.79(m，1H)，2.82-2.98(m，4H)，3.50(s，2H)，3.55-3.61(m，2H)，4.21-4.34(m，2H)，4.91-4.99(m，1H)，6.10-6.19(m，2H)，6.48-6.52(d，1H)，6.69-6.75(s，1H)，7.12-7.19(d，1H)，7.71-7.82(d，2H)

MS(ES+)m/z 465(MH⁺)。

實(shí)施例63 1-[(4-{[(3-氧代-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮鹽酸鹽(R:S的2:1混合物)

標(biāo)題化合物由1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(R:S的2:1混合物，其制備參見實(shí)施例11(d))和2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)，根據(jù)實(shí)施例12的通用方法制備。

¹H NMR、LC-MS和單-鹽酸鹽形成參見實(shí)施例6A。

實(shí)施例64 1-({4-[([1,3]氧硫雜環(huán)戊烯并[5,4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(S:R2:1的混合物)

標(biāo)題化合物由1-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-1,2-二氫-4H,9H-咪唑并[1,2,3-ij]-1,8-二氮雜萘-4,9-二酮(S:R的2:1混合物，類似于實(shí)施例11(a-d)，但使用7-(甲基氧基)-1-[(2R)-2-環(huán)氧乙烷基甲基]-3,4-二氫-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮(其合成參見實(shí)施例5(f)制備)和2,3-二氫[1,4]氧硫雜環(huán)己二烯并[2,3-c]吡啶-7-甲醛(其合成參見WO2004058144，實(shí)施例60)，根據(jù)實(shí)施例12的通用方法制備。

¹H NMR、LC-MS和單-鹽酸鹽形成參見實(shí)施例6A。

表1：使用指定起始原料，根據(jù)實(shí)施例5(k)的方法制得

制備A：6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪-3-甲醛

(a)3,4,6-三氯噠嗪

通過稍微改進(jìn)Kasnar et al,Nucleosides&Nucleotides(1994),13(1-3),459-79的方法制備。

將硫酸肼鹽(51g)懸浮于水(250ml)，加熱至回流，并滴加溴馬來酸酐(90.38g)。將混合物加熱回流4小時(shí)，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)用29g硫酸肼、53g溴馬來酸酐和130ml水重復(fù)。將沉淀通過過濾收集，用水和丙酮洗滌，并將批次合并在真空中干燥，得到4-溴-1,2-二氫-3,6-噠嗪二酮，其為白色固體(113g)。

將固體分兩批用三氯氧磷(2x200ml)處理，并加熱至回流保持3.5小時(shí)。將混合物冷卻，蒸發(fā)和與甲苯共沸。將殘余物在二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配，并用DCM萃取兩次。將有機(jī)萃取物干燥和蒸發(fā)。將該殘余物在二氯甲烷中再次溶解，并用硅膠色譜純化(300g)(DCM作為洗脫劑)，得到白色固體(101.5g，87％)。

(LC/MS分析顯示約20-30％雜質(zhì)，溴-二氯噠嗪的異構(gòu)體)。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 184/185/186(MH+)，三氯噠嗪。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 228/229/231(MH+)，溴-二氯噠嗪。

(b)2-[(3,6-二氯-4-噠嗪基)氧基]乙醇

經(jīng)40分鐘，將乙二醇(55ml)在四氫呋喃(200ml)中的溶液在大約0℃(冰浴冷卻)用氫化鈉(60％油中分散液，5.9g)處理。加入完成后，分批加入含有溴-二氯噠嗪的異構(gòu)體作為雜質(zhì)的3,4,6-三氯噠嗪(27g)，并用更多無水THF(50ml)洗滌，并將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，然后在室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物濃縮(至1/3體積)，然后用碳酸氫鈉水溶液稀釋，并用氯仿(5x)和乙酸乙酯(3x)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥和蒸發(fā)，并將固體濾除，并用CHCl₃(x3)洗滌和在真空烘箱中在40℃干燥過夜，得到白色固體(25.5g，83％)，含有一些溴-衍生物(10-15％)。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 209/211(MH+)。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 255/7(MH+)，溴-衍生物。

(c)3-氯-6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪

將含有一些溴-衍生物的2-[(3,6-二氯-4-噠嗪基)氧基]乙醇(15.46g；0.0703mol)在無水1,4-二噁烷(1.2L)中的溶液用氫化鋰(2.3g；0.28mol)分批處理，并在室溫在氬氣中攪拌1小時(shí)，然后在110℃加熱過夜。將反應(yīng)混合物用濕的1,4-二噁烷淬滅，然后用冰水淬滅。將溶液蒸發(fā)至一半體積，用5M鹽酸調(diào)節(jié)至pH 8，并蒸發(fā)至干。加入水，并將殘余物用氯仿萃取五次，干燥(硫酸鈉)和蒸發(fā)，得到白色固體(12.4g，約77％)(含有約15％溴物質(zhì))。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 173/5(Cl MH+)；217/9(Br MH+)

(d)3-乙烯基-6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪

將含有約15％溴物質(zhì)的3-氯-6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪(13.6g，0.079mol)在二甲氧基乙烷(400ml)中的溶液在氬氣中脫氣10min，然后加入四(三苯基膦)鈀(0)(2g)、碳酸鉀(10.33g)、2,4,6-三乙烯基三氧雜三硼雜環(huán)己烷吡啶復(fù)合物(11.32g)和水(55ml)。將混合物在95℃加熱48小時(shí)，并冷卻和蒸發(fā)至干。將混合物用碳酸氫鈉水溶液處理，并用DCM萃取(5x)。將萃取物干燥(硫酸鈉)，蒸發(fā)，并將殘余物硅膠色譜純化(500g)，用0-100％乙酸乙酯-己烷洗脫，得到產(chǎn)物(6.43g，50％)；[仍有一些不純級(jí)分(1.8g)]。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 165(MH+)。

(e)標(biāo)題化合物

將在冰中冷卻的3-乙烯基-6,7-二氫[1,4]二氧雜環(huán)己二烯并[2,3-c]噠嗪(11.58g)在1,4-二噁烷/水(600ml/180ml)中的溶液用水溶液四氧化鋨(4％w/v，25ml)和高碘酸鈉(43g)處理。將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)后，將混合物蒸發(fā)至干，并與1,4-二噁烷共沸。加入硅膠、1,4-二噁烷和氯仿，并將混合物蒸發(fā)至干過夜，然后加至硅膠柱(400g)并色譜純化，用氯仿然后用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到白色固體(7.55g，64％)。

MS(+ve離子電噴霧)m/z 167(MH+)。

生物活性

抗微生物活性分析：

使用臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI)推薦的操作，文件M7-A7，"Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically"，通過肉湯微量稀釋測(cè)定全細(xì)胞抗微生物活性。以范圍從0.016至16mcg/ml的連續(xù)兩倍稀釋度測(cè)試化合物。

將最小抑菌濃度(MIC)確定為抑制可見生長的化合物的最低濃度。鏡讀取器用于幫助確定MIC終點(diǎn)。

針對(duì)選自金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、釀膿鏈球菌、糞腸球菌和屎腸球菌的革蘭氏陽性生物體評(píng)價(jià)化合物。

此外，針對(duì)選自流感嗜血桿菌、粘膜炎莫拉菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、肺炎克雷伯菌和嗜麥芽窄食單胞菌的革蘭氏陰性生物體評(píng)價(jià)化合物。

如本申請(qǐng)中所述，除了實(shí)施例71-73和76-79之外，所列出的實(shí)施例中的每一個(gè)都以至少一種示例的鹽或游離堿形式進(jìn)行測(cè)試。除非另有說明，否則測(cè)試的實(shí)施例對(duì)至少一種上述生物體的菌株具有≤2μg/ml的MIC，除了實(shí)施例9對(duì)于至少一種上述生物體的菌株具有≤4μg/ml的MIC。對(duì)于上面列出的每種生物體的至少一種菌株，至少一個(gè)實(shí)施例具有≤2μg/ml的MIC。

結(jié)核分枝桿菌H37Rv抑制分析

在96孔平底、聚苯乙烯微量滴定板中進(jìn)行每種測(cè)試化合物的最小抑菌濃度(MIC)的測(cè)量。在純DMSO中進(jìn)行10次兩倍藥物稀釋，從400μM開始。將5μl這些藥物溶液加入95μl Middlebrook 7H9培養(yǎng)基中。(板布局的A-H行、1-10列)。使用異煙肼作為陽性對(duì)照，制備異煙肼的8次兩倍稀釋，從160μg/ml開始，并將5μl的該對(duì)照曲線加入95μl Middlebrook 7H9(Difco目錄號(hào)271310)+ADC培養(yǎng)基(Becton Dickinson目錄號(hào)211887)。(11列，A-H行)。將5μl純DMSO加入第12列(生長和空白對(duì)照)。

將接種物標(biāo)準(zhǔn)化至約1x10⁷cfu/ml，并在Middlebrook 7H9+ADC培養(yǎng)基和0.025％Tween 80(Sigma P4780)中稀釋100倍，以產(chǎn)生H37Rv菌株(ATCC25618)的最終接種物。將100μl該接種物加入到整個(gè)板中，除了G-12和H-12孔(空白對(duì)照)。將所有板置于密封箱中以防止外周孔干燥，并將它們?cè)?7℃靜止孵育6天。通過將一片刃天青(用于牛奶測(cè)試的刃天青片；參見330884Y VWR International Ltd)溶解在30ml無菌PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)中制備刃天青溶液。將25μl該溶液加入每個(gè)孔中。48小時(shí)后測(cè)量熒光(SpectramaxM5Molecular Devices，激發(fā)530nm，發(fā)射590nm)以測(cè)定MIC值。

實(shí)施例1-4、5A、6A、7-9、12、13A、14、15、16A、17A、19A、20、23-32、34、37-44、46-50、53-57、59和63在結(jié)核分枝桿菌H37Rv抑制分析中進(jìn)行了測(cè)試。實(shí)施例2、4、5A、6A、7、8、12、13A、14、16A、19A、20、23-26、28-32、34、37、39、40、42、44、46、49、50、56、59和63顯示出低于2.0μg/ml的MIC值。實(shí)施例4、5A、7、8、12、13A、14、16A、19A、25、26、30-32、37、40、49、50和56顯示出1.0μg/ml或更低的MIC值。

體外分析

進(jìn)行研究以評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物的體外活性。

具體地，本發(fā)明的實(shí)施例39(即，確定為(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)針對(duì)在2003至2007年間收集的30株淋病奈瑟球菌進(jìn)行了測(cè)試。

頭孢曲松和環(huán)丙沙星作為比較劑。根據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI)批準(zhǔn)的方法和指南(即，參見臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI))，批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)M07-A9，Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically，第九版，Wayne，PA，2012)，通過瓊脂稀釋測(cè)定實(shí)施例39和比較劑的最小抑菌濃度(MIC)。

實(shí)施例39((2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)的針對(duì)30株淋病奈瑟氏菌的分離菌株的MIC₉₀(抑制90％測(cè)試的分離菌株的MIC)為0.5μg/mL。

該MIC₉₀值是頭孢曲松(≤0.03μg/ml)的至少16倍，并且是環(huán)丙沙星(>2μg/mL)的最多1/8倍。實(shí)施例39((2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)的眾數(shù)值對(duì)9株測(cè)試的環(huán)丙沙星耐藥淋病奈瑟氏菌保持不變。

第二項(xiàng)研究通過CLSI瓊脂稀釋法測(cè)試了實(shí)施例39((2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)針對(duì)145株淋病奈瑟球菌分離菌株的效果，其中絕大多數(shù)菌株在2013年收集。實(shí)施例39((2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)對(duì)所有測(cè)試的分離菌株的MIC₉₀為0.5μg/mL。針對(duì)37株環(huán)丙沙星不敏感的分離菌株的亞組，實(shí)施例39((2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)的MIC₉₀為1μg/mL。

這些研究證明了實(shí)施例39((2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)針對(duì)淋病奈瑟球菌(包括環(huán)丙沙星耐藥菌株)的體外活性。

體內(nèi)分析數(shù)據(jù)

建立了淋病奈瑟球菌陰道定殖的小鼠模型以評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物的功效。兩個(gè)獨(dú)立的研究由同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

具體地，在單劑口服或同一天總共兩劑口服給藥后，在該模型中測(cè)試了實(shí)施例39(即，(2R)-2-({4-[(3,4-二氫-2H-吡喃并[2,3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-1,2-二氫-3H,8H-2a,5,8a-三氮雜苊烯-3,8-二酮鹽酸鹽)。使用雌二醇引發(fā)雌性小鼠用于定殖；給藥甲氧芐啶硫酸鹽和鏈霉素用于控制共生菌。在第0天，用淋病奈瑟球菌MS11(實(shí)施例39：MIC 1μg/ml)陰道內(nèi)接種小鼠。在第1天和第2天通過陰道拭子培養(yǎng)物證實(shí)成功建群。在第2天給藥實(shí)施例39的100mg/kg和200mg/kg的單劑口服劑量或各100mg/kg的總共兩次口服劑量。一直至第10天(處理后8天)每天收集陰道拭子用于定量培養(yǎng)。

在一項(xiàng)研究中，在實(shí)施例39給藥后1、2、6和12小時(shí)，從每組小鼠的末端收集血液樣品(對(duì)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)和劑量n＝3)，以允許評(píng)估PK參數(shù)。

到研究結(jié)束時(shí)，以單劑口服劑量100或200mg/kg或在同一天給藥的兩次100mg/kg劑量的實(shí)施例39分別消除了70-80％、90-100％和100％小鼠中淋病奈瑟球菌MS11的定殖，而接受鹽水載體的小鼠僅0-10％表現(xiàn)出細(xì)菌清除。這些劑量的fAUC_0-24值分別估計(jì)為8、22和16μg.h/mL。

在第一項(xiàng)研究中，每個(gè)實(shí)施例39劑量組中的一只小鼠表現(xiàn)出淋病奈瑟菌的連續(xù)幾天的初始清除，隨后在研究結(jié)束時(shí)再生長至大量生物體。盡管在隨訪研究中沒有觀察到這種再生長，評(píng)估了從GSK2140944處理的小鼠中回收的淋病奈瑟球菌MS11的菌落，并且與有機(jī)體的儲(chǔ)備培養(yǎng)物相比，沒有顯示對(duì)GSK2140944的易感性的任何改變。

應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明不限于上文闡述的實(shí)施方案，并且保留在闡述的實(shí)施方案和在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)進(jìn)行的所有修改的權(quán)利。

本文引用的各種對(duì)期刊、專利和其它出版物包括現(xiàn)有技術(shù)并且通過引用并入本文，如同完全闡述一樣。