本發(fā)明主要涉及包含(R)-(-)-2-(4-溴-2-氟芐基)-1,2,3,4-四氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-4-螺-3'-吡咯烷-1,2',3,5'-四酮的眼用混懸液制劑，特別是其可用于后眼段的疾病。
背景技術(shù)：
：后眼段組織如玻璃體、視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜和鞏膜是視覺(jué)表現(xiàn)的重要區(qū)域。如果該區(qū)域被損壞，它可能常常導(dǎo)致嚴(yán)重降低的視敏度或視力喪失。后眼段的典型疾病包括年齡相關(guān)性黃斑變性、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性黃斑水腫、黃斑水腫、近視性脈絡(luò)膜新生血管形成、視網(wǎng)膜靜脈阻塞、脈絡(luò)膜新生血管形成、葡萄膜炎、視網(wǎng)膜色素變性、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變和中心性漿液性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變。特別地，年齡相關(guān)性黃斑變性或糖尿病性視網(wǎng)膜病變是在諸如歐洲、美國(guó)和日本等發(fā)達(dá)國(guó)家中引起晚-中年至老年人視力喪失的主要疾病，這在眼科臨床以及全社會(huì)中是非常有問(wèn)題的疾?。▽?zhuān)利文獻(xiàn)1）。一般來(lái)說(shuō)，通過(guò)血液向后眼段（例如視網(wǎng)膜）的藥物遞送受到后眼段中的血液-視網(wǎng)膜屏障（BRB）的嚴(yán)重限制。當(dāng)在滴眼液中給藥時(shí)，大部分藥物可以通過(guò)淚液翻轉(zhuǎn)從眼表快速排出，然后通過(guò)鼻淚管轉(zhuǎn)移到全身循環(huán)的血液中（非專(zhuān)利文獻(xiàn)1）。因此，如果眼用制劑中的藥物的量為100，則在滴眼液中給予的遞送藥物的量在藥物轉(zhuǎn)移最多的角膜中為0.1-0.5；在前房水/虹膜和睫狀體中為0.01-0.1；在晶狀體和玻璃體中為約0.0001，即，已知遞送量太低（非專(zhuān)利文獻(xiàn)2）。此外，通常認(rèn)為藥物通過(guò)滴眼液中的給藥幾乎不能遞送到后眼段，因?yàn)楹笱鄱挝挥诰铙w或玻璃體的更后面。并且，通常認(rèn)為在低水溶性藥物的情況下使用的眼用混懸液比通常的眼用溶液更難以通過(guò)滴眼液給藥遞送到眼后段，因?yàn)檫@種藥物不是溶解于水中，因此其通常幾乎不被眼內(nèi)部位吸收（非專(zhuān)利文獻(xiàn)3）。在臨床實(shí)踐中存在一些眼用混懸液，但是使用限于在前眼段中的疾病例如結(jié)膜炎。認(rèn)為將藥物遞送到后眼段的手段只有向玻璃體的注入或手術(shù)，或者通過(guò)全身循環(huán)血液的全身給藥，即其他手段是非常困難的（專(zhuān)利文獻(xiàn)4，非-專(zhuān)利文獻(xiàn)4）。后眼段的疾病是引起嚴(yán)重癥狀的眼疾病，但是對(duì)其有用的藥物很少，此外，由于靶向部位是藥物難以遞送的后眼段，因此給藥受限。因此，現(xiàn)在通過(guò)將抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（抗-VEGF）注射入玻璃體、將類(lèi)固醇注射入玻璃體或眼球囊、光動(dòng)力療法（PDT）、玻璃體的手術(shù)等進(jìn)行疾病的治療。然而，所有這些當(dāng)前的治療，即注射到眼睛等，對(duì)于患者是非常侵入性的，并且對(duì)患者造成疼痛，因此期望開(kāi)發(fā)新的給藥，例如滴眼液。(R)-(-)-2-(4-溴-2-氟芐基)-1,2,3,4-四氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-4-螺-3'-吡咯烷-1,2',3,5'-四酮(雷尼司他)(下文中稱(chēng)為"化合物A")具有抑制醛糖還原酶的強(qiáng)效作用，并且該化合物也是一種低毒性化合物，因此該化合物可用作用于治療糖尿病并發(fā)癥的藥物(專(zhuān)利文獻(xiàn)2，專(zhuān)利文獻(xiàn)3)?，F(xiàn)有技術(shù)[專(zhuān)利參考文獻(xiàn)][專(zhuān)利文獻(xiàn)1]JP2009-196973A[專(zhuān)利文獻(xiàn)2]JP2516147B[專(zhuān)利文獻(xiàn)3]WO1999/020276[專(zhuān)利文獻(xiàn)4]JP2005-097275A[非專(zhuān)利參考文獻(xiàn)][非專(zhuān)利文獻(xiàn)1]"DrugDeliverytothePosteriorEyeSegment"YuukiTAKASHIMA,Thearchivesofpracticalpharmacy,72(2),117-121(2012)[非專(zhuān)利文獻(xiàn)2]StandardYakugakuSeries7"SeizaikanoScience",ThePharmaceuticalSocietyofJapan編輯，TokyoKagakuDoujin發(fā)行，第四章"Representativeformulation"22-2Ophthalmicformulation,p103-p105[非專(zhuān)利文獻(xiàn)3]"Tenganzai-notekiseishiyouhandbookQ&A"，ThePharmaceuticalManufacturers'AssociationofTokyo,Tenganzaikenkyukai等制造，JAPANOPHTHALMOLOGISTSASSOCIATION監(jiān)督，2011年9月，第一版，第5頁(yè)[非專(zhuān)利文獻(xiàn)4]"Studytoidentifyorallybioavailablecalpaininhibitorstodevelopanagentfortreatingaretinaldisease"YoshihisaSHIRASAKI,GraduateSchoolofNaturalScience&Technology,Doctoralthesisabstracts,AbstractofDissertationandAbstractofExaminationoutcome,P605-p610,2007年9月發(fā)行。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：（技術(shù)問(wèn)題）為了通過(guò)全身循環(huán)血液將有效濃度的藥物遞送到后眼段，因?yàn)檠?視網(wǎng)膜屏障（BRB），認(rèn)為有必要通過(guò)施用非常高的劑量來(lái)增加全身循環(huán)血液中的藥物濃度。為了避免這種高劑量的風(fēng)險(xiǎn)，本發(fā)明的目的是提供一種用于后眼段疾病并避免由于高劑量全身暴露引起的副作用的眼用制劑，另外還提供一種包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的穩(wěn)定的眼用制劑。（問(wèn)題的解決方案）本發(fā)明人進(jìn)行了廣泛的研究以達(dá)到上述目的，然后發(fā)現(xiàn)化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽在分散介質(zhì)中的混懸液的滴眼液給藥可以使藥物以治療所需的高轉(zhuǎn)移性遞送到后眼段，同時(shí)保持藥物的穩(wěn)定性和抑制全身暴露的量，此外還發(fā)現(xiàn)化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽對(duì)眼疾病如年齡相關(guān)性黃斑變性具有有用的藥理作用。也就是說(shuō)，本發(fā)明通過(guò)將化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽懸浮作為眼用制劑而完成。本發(fā)明的概述如下描述。(項(xiàng)1)一種眼用混懸液制劑，其包含(R)-(-)-2-(4-溴-2-氟芐基)-1,2,3,4-四氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-4-螺-3'-吡咯烷-1,2',3,5'-四酮(下文稱(chēng)為"化合物A")或其生理學(xué)上可接受的鹽。(項(xiàng)2)項(xiàng)1的制劑，其中化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽分散在分散介質(zhì)中。（項(xiàng)3）項(xiàng)2的制劑，其中所述混懸液中化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度為1nm至20μm。（項(xiàng)4）項(xiàng)3的制劑，其中所述混懸液中化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度為10nm至20μm。（項(xiàng)5）項(xiàng)2至4中任一項(xiàng)的制劑，其中所述分散介質(zhì)為水性分散介質(zhì)。（項(xiàng)6）項(xiàng)2至5中任一項(xiàng)的制劑，其中所述分散介質(zhì)包含分散劑和/或表面活性劑。（項(xiàng)7）項(xiàng)6的制劑，其中所述分散介質(zhì)包含分散劑和表面活性劑。（項(xiàng)8）項(xiàng)2至7中任一項(xiàng)的制劑，其中所述混懸液的pH為3至9。（項(xiàng)9）項(xiàng)2至8中任一項(xiàng)的制劑，其中所述混懸液的滲透壓為20mOsm至1000mOsm。（項(xiàng)10）項(xiàng)2至9中任一項(xiàng)的制劑，其包含每1mL所述混懸液中1mg至500mg的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽。（項(xiàng)11）項(xiàng)2至10中任一項(xiàng)的制劑，其中溶解于所述混懸液中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽與所述制劑中所有化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的比例為0.001%至10%。（項(xiàng)12）項(xiàng)2至11中任一項(xiàng)的制劑，其中溶解于所述混懸液中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽與所述制劑中所有化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的比例為0.001%至1%。（項(xiàng)13）項(xiàng)1至12中任一項(xiàng)的制劑，其用于治療前眼段中的疾病和/或后眼段中的疾病。（項(xiàng)14）項(xiàng)13的制劑，其中所述疾病是與VEGF相關(guān)的疾病。（項(xiàng)15）項(xiàng)13或14的制劑，其中所述疾病是年齡相關(guān)性黃斑變性、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性黃斑水腫、近視性脈絡(luò)膜新生血管形成、視網(wǎng)膜靜脈阻塞和/或白內(nèi)障。（項(xiàng)16）一種試劑盒，其包含下述（1）和（2）的組合：（1）包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的制劑和（2）包含分散介質(zhì)的制劑。（項(xiàng)17）項(xiàng)16的試劑盒，其中制劑（1）中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度為1nm至20μm。（項(xiàng)18）項(xiàng)17的試劑盒，其中制劑（1）中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度為10nm至20μm。（項(xiàng)19）項(xiàng)16至18中任一項(xiàng)的試劑盒，其中制劑（1）或制劑（2）可包含分散劑和/或表面活性劑。（項(xiàng)20）項(xiàng)16至19中任一項(xiàng)的試劑盒，其用于治療前眼段中的疾病和/或后眼段中的疾病。（項(xiàng)21）用于治療與VEGF相關(guān)的疾病的藥物，其包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽。（項(xiàng)22）項(xiàng)21的藥物，其中所述疾病是年齡相關(guān)性黃斑變性和/或糖尿病性視網(wǎng)膜病變。（項(xiàng)23）項(xiàng)2至4中任一項(xiàng)的制劑，其中所述混懸液包含分散劑和/或表面活性劑。（項(xiàng)24）項(xiàng)23的制劑，其中所述混懸液包含分散劑和表面活性劑。（本發(fā)明的效果）本發(fā)明可以提供包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的穩(wěn)定的眼用制劑，其不僅對(duì)前眼段的疾病，而且對(duì)后眼段的疾病具有治療作用，并且可以避免由于高劑量全身暴露導(dǎo)致的副作用。化合物A在水中的溶解度低，因此如果制備包含化合物A的水溶液制劑，其濃度應(yīng)該低。然而，通過(guò)作為混懸液制備包含化合物A的制劑，該制劑將變成高度濃縮的制劑，預(yù)期其以實(shí)際的給藥頻率（例如每天1次至6次）將足夠量的藥物遞送至患病部位。此外，化合物A還有另一個(gè)問(wèn)題，即溶液狀態(tài)的穩(wěn)定性非常差，溶液中的化合物可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)分解，但是包含化合物A的混懸液制劑可以提供具有耐受分解的能力，并且對(duì)于實(shí)際儲(chǔ)存還具有良好的穩(wěn)定性的眼用制劑。本發(fā)明的眼用制劑可以對(duì)主要通過(guò)侵入性方法治療的后眼段中的疾病提供突破性治療，對(duì)患者的負(fù)擔(dān)較小。附圖說(shuō)明圖1表示關(guān)于眼用混懸液制劑中化合物A的含量和粒度的儲(chǔ)存穩(wěn)定性的結(jié)果。上圖的縱軸表示混懸液制劑中化合物A的含量（%），橫軸表示時(shí)間（hr）。下圖的縱軸表示混懸液制劑中化合物A的平均粒度（nm），橫軸表示時(shí)間（天）。圖2表示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（I-1）。在四個(gè)圖的上方三個(gè)圖中，縱軸表示各組織中化合物A的濃度（第一、第二和第三圖分別顯示眼用制劑A1、眼用制劑Z和口服給藥的結(jié)果）。縱軸的單位對(duì)于視網(wǎng)膜和角膜中的濃度為μg/g，對(duì)于血漿中的濃度為μg/mL。橫軸表示各組織（從左側(cè)，視網(wǎng)膜、角膜和血漿）。在四個(gè)圖的最低圖中，縱軸表示視網(wǎng)膜/血漿的比率，橫軸表示各給予的制劑（從左側(cè)，口服給藥、眼用制劑Z、眼用制劑A1）。視網(wǎng)膜/血漿的比率表示“在視網(wǎng)膜中化合物A的濃度（μg/g）/在血漿中化合物A的濃度（μg/mL）”。圖3表示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（I-2）。在每個(gè)圖中，縱軸表示化合物A在各組織（從上側(cè)，視網(wǎng)膜、角膜和血漿）中的濃度?？v軸的單位對(duì)于視網(wǎng)膜和角膜中的濃度為μg/g，對(duì)于血漿中的濃度為μg/mL。橫軸表示每種給予的制劑（從左側(cè)，眼用制劑Z和眼用制劑A1）。圖4表示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（II）。在每個(gè)圖中，縱軸表示化合物A在各組織（從上側(cè)，視網(wǎng)膜、角膜和血漿）中的濃度。橫軸表示滴眼液的給藥數(shù)（從左側(cè)，1次/眼、3次/眼、5次/眼）。圖5表示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（III）。在四個(gè)圖的上部三個(gè)圖中，縱軸表示各組織中化合物A的濃度（第一、第二和第三圖分別顯示視網(wǎng)膜、角膜和血漿的結(jié)果）。橫軸表示各給予的混懸液制劑，以及各混懸液制劑中化合物A的各平均粒度（nm）。在四個(gè)圖的最低圖中，縱軸表示視網(wǎng)膜/血漿的比率，橫軸表示各給予的混懸液制劑，以及各混懸液制劑中化合物A的各平均粒度（nm）。視網(wǎng)膜/血漿的比率表示“化合物A在視網(wǎng)膜中的濃度（μg/g）/化合物A在血漿中的濃度（μg/mL）”。圖6顯示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（IV）。在每個(gè)圖中，縱軸表示化合物A在各組織（從上側(cè)，視網(wǎng)膜、角膜和血漿）中的濃度?？v軸的單位對(duì)于視網(wǎng)膜和角膜中的濃度為μg/g，對(duì)于血漿中的濃度為μg/mL。橫軸表示每種給予的混懸液制劑和每種混懸液制劑的pH。圖7表示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（V）。在圖中，縱軸表示化合物A在視網(wǎng)膜中的各濃度（μg/g）。橫軸表示各給予的混懸液制劑以及各混懸液制劑中化合物A、B或C的各平均粒度（nm）。圖8顯示化合物A對(duì)于抗VEGF作用的影響。在圖中，縱軸表示HREC的距離遷移，其是在傷口之后不久的每個(gè)傷口寬度的距離遷移（%）。橫軸表示各測(cè)試條件[DMSO（%），使用藥物（醛糖還原酶抑制劑或Lucentis?（通用名：雷珠單抗））及其劑量，VEGF濃度（ng/mL）]。圖9表示在大鼠中至后眼段的轉(zhuǎn)移性的評(píng)價(jià)（III-2）。在每個(gè)圖中，縱軸表示化合物A在各組織（從上側(cè)，視網(wǎng)膜、角膜和血漿）中的濃度。橫軸表示每種給予的混懸液制劑的濃度。圖2、圖3、圖4至圖9的右上方的“均值±se”意指每個(gè)指示的值表示每組中的平均值，并且每個(gè)誤差范圍表示se（標(biāo)準(zhǔn)誤差）?！皀”表示每組的樣本數(shù)量。具體實(shí)施方式本發(fā)明的制劑是眼用制劑，其特征在于化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽（下文中，其可以作為整體稱(chēng)為“本發(fā)明的藥物”）懸浮在分散介質(zhì)中。本發(fā)明的制劑包括包含化合物A或其生理學(xué)可接受的鹽和分散介質(zhì)的眼用混懸液，以及通過(guò)將化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽分散在分散介質(zhì)中來(lái)制備使用的混懸液的試劑盒。本發(fā)明的制劑中的活性成分化合物A可以是游離形式或與生理學(xué)上可接受的，即藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)堿形成的鹽形式。無(wú)機(jī)和有機(jī)堿包括例如堿金屬如鈉和鉀，氫氧化銨，異丙胺，二乙胺，乙醇胺，哌啶和賴氨酸。并且，本發(fā)明的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽也可以是水合物或溶劑合物的形式，因此本發(fā)明中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽包括這樣的水合物和溶劑合物。其詳細(xì)情況在專(zhuān)利文獻(xiàn)2中描述?；衔顰或其生理學(xué)上可接受的鹽例如可以根據(jù)專(zhuān)利文獻(xiàn)2制備。本文中使用的術(shù)語(yǔ)“混懸液”是指化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽作為固體分散在分散介質(zhì)中的狀態(tài)，其還包括其中本發(fā)明的藥物部分溶解在分散介質(zhì)中的混懸液。如果本發(fā)明的藥物由于儲(chǔ)存而在混懸液中沉淀或聚集，則在使用之前可以松散地?fù)u動(dòng)該混懸液以恢復(fù)到常規(guī)懸浮狀態(tài)，這也包括在本發(fā)明的混懸液中。然而，本發(fā)明不包括其中藥物被分散、乳化或包封在油和脂肪液滴中的制劑，例如脂質(zhì)體和乳液制劑。具體地，本發(fā)明的制劑中的藥物顆粒不需要用脂肪或油成分包衣，并且本發(fā)明不包括例如，其中本發(fā)明藥物包封在脂質(zhì)體中的混懸液制劑，或其中包含本發(fā)明的藥物的油和脂肪液滴分散在水中的水包油乳液制劑。溶解在混懸液中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽與制劑中的所有化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的比例通常為0.001%至10%，從至眼后段的視網(wǎng)膜的轉(zhuǎn)移性、化學(xué)穩(wěn)定性和粒度的物理穩(wěn)定性等的觀點(diǎn)來(lái)看優(yōu)選0.001%至5%，進(jìn)一步優(yōu)選0.001%至2%，更優(yōu)選0.001%至1%，甚至更優(yōu)選0.001%至0.5%，和特別優(yōu)選0.001至0.1%。優(yōu)選地，本發(fā)明的制劑不包括具有增溶作用以增強(qiáng)本發(fā)明藥物的溶解度的成分作為添加劑，但可包括這樣的具有增溶作用的成分，除非成分的量可影響本發(fā)明藥物的溶解度。這種具有增溶作用的成分包括例如環(huán)糊精。本文中的“分散體”是指化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽均勻地懸浮在分散介質(zhì)中的狀態(tài)，其還包括暫時(shí)混懸液和部分聚集的混懸液，除非它們作為眼用制劑使用存在問(wèn)題。懸浮在混懸液制劑中的固體化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度不應(yīng)受到限制，但是從制造可處理性和至后眼段的轉(zhuǎn)移性的觀點(diǎn)來(lái)看，優(yōu)選為20μm或更小，更優(yōu)選2μm或更小，甚至更優(yōu)選為700nm或更小，甚至更優(yōu)選為650nm或更小，甚至更優(yōu)選為460nm或更小，甚至更優(yōu)選為300nm或更小，甚至更優(yōu)選為230nm或更小，特別優(yōu)選為200nm或更小。并且，懸浮在本發(fā)明的混懸液制劑中的固體化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度優(yōu)選為1nm或更大，更優(yōu)選為5nm或更大，甚至更優(yōu)選為10nm或更大。平均粒度的范圍優(yōu)選為10nm至20μm或1nm至20μm，更優(yōu)選為10nm至2μm或1nm至2μm，更優(yōu)選為10nm至700nm或1nm至700nm，甚至更優(yōu)選為1nm至650nm，進(jìn)一步優(yōu)選為1nm至460nm，甚至更優(yōu)選為1nm至300nm，甚至更優(yōu)選為10nm至300nm或5nm至300nm，甚至更優(yōu)選為1nm至230nm，甚至更優(yōu)選為5nm至230nm，甚至更優(yōu)選為5nm至200nm，特別優(yōu)選為10nm至200nm或10nm至230nm。本文中使用的平均粒度是指懸浮在混懸液制劑中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽、微粉化的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽、或固體化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的平均粒度。本文中使用的平均粒度是指通過(guò)下述裝置和方法獲得的平均粒度。當(dāng)在混懸液制劑中測(cè)量平均粒度時(shí)，可以將混懸液的濃度稀釋至其可測(cè)量的濃度。上述具有可接受的粒度的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽可通過(guò)濕磨或干磨制備。濕磨制備可以通過(guò)用攪拌器、均化器等將化合物攪拌或分散在合適的溶劑（用于研磨）中進(jìn)行?；蛘撸梢允褂脻袷絿娚淠C(jī)如StarBurst，以及球磨機(jī)，珠磨機(jī)，均質(zhì)混合機(jī)，均化器等，通過(guò)在合適的溶劑（用于研磨）中研磨化合物來(lái)制備研磨的化合物。例如，在用于研磨的溶劑中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽可以用行星式球磨機(jī)（LP-4/2，ITOMANUFACTURINGCO.，LTD.）研磨，其中化合物的含量為1-500mg/mL，速度為30-370rpm。干磨制備可以用下述裝置進(jìn)行：氣流型粉碎機(jī)，如螺旋噴射磨機(jī)，Jet-O-Mill，逆流磨機(jī)和噴射磨機(jī)；剪切型粉碎機(jī)，例如錘磨機(jī)，篩粉機(jī)和樣品磨；滾動(dòng)球磨機(jī)，例如球磨機(jī)，珠磨機(jī)等等。此外，除了通過(guò)分散、研磨等使顆粒更小的分解(break-down)方法之外，本文中使用的研磨的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽也可以通過(guò)使用噴霧干燥、結(jié)晶或冷凍干燥的裝配(build-up)方法來(lái)制備。如果制劑在最后步驟中是/成為用于滴眼液的懸浮狀態(tài)，則眼用制劑可以分類(lèi)在本發(fā)明中。例如，在通過(guò)干磨制備本發(fā)明的制劑的情況下，可以用上述研磨裝置研磨化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽，以使粒度達(dá)到期望，具體地，每個(gè)上述平均粒度，然后懸浮在分散介質(zhì)中以獲得制劑。本發(fā)明的制劑還包括在使用中制備混懸液的實(shí)施方案（即試劑盒），即分別制備化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽和分散介質(zhì)，以及在使用時(shí)懸浮化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽在分散介質(zhì)中。在通過(guò)濕磨制備本發(fā)明的制劑的情況下，化合物A或其生理學(xué)可接受的鹽和用于研磨的溶劑的混合物可以用上述研磨裝置研磨，用于研磨的溶劑可以通過(guò)冷凍干燥或其它方式除去，然后將凍干產(chǎn)物懸浮在分散介質(zhì)中以獲得制劑。本發(fā)明的制劑還包括分別制備凍干產(chǎn)物和分散介質(zhì)并在使用時(shí)將凍干產(chǎn)物懸浮在分散介質(zhì)中的實(shí)施方案（即試劑盒）。即，本發(fā)明的實(shí)施方案中也包括含有下述（1）和（2）的組合的試劑盒：（1）包含本發(fā)明的藥物的凍干組合物和（2）分散介質(zhì)。如下所示，當(dāng)化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽與包含表面活性劑、分散劑等的用于研磨的溶劑一起研磨，并且通過(guò)冷凍干燥或其它方式除去用于研磨的溶劑時(shí)，化合物A或其生理學(xué)可接受的鹽的凍干產(chǎn)物可以包含表面活性劑、分散劑等，以及還包含一部分用于研磨的溶劑。在上述情況下，分散介質(zhì)可以用作用于研磨的溶劑，并且研磨的混懸液也可以通過(guò)任選地在不冷凍干燥的情況下稀釋而作為本發(fā)明的制劑提供。本發(fā)明的制劑還包括在一次注射或一周或其它時(shí)期用完的制劑，以及在使用時(shí)制備混懸液的制劑，其使用限于在制備混懸液后一周、一個(gè)月或其它時(shí)期。本文使用的分散介質(zhì)是指可以使化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽分散在液體制劑中的生物相容性溶劑，并且可以包括單組分溶劑和多組分溶劑，只要化合物A在分散介質(zhì)中的溶解度優(yōu)選為0.4mg/mL或更低，更優(yōu)選為0.1mg/mL或更低。具體地，分散介質(zhì)包括水性溶劑以及油性溶劑，例如蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油和液體石蠟。并且，其可以包括兩種或更多種溶劑的混合物。本文使用的優(yōu)選分散介質(zhì)是水性分散介質(zhì)。水性分散介質(zhì)是指相對(duì)于全部分散介質(zhì)溶劑含有90w/w%或更多水，優(yōu)選為95w/w%或更多水，更優(yōu)選為99w/w%或更多水的水性溶劑。特別優(yōu)選的作為分散介質(zhì)的溶劑是水。水以外的水性分散介質(zhì)中的溶劑包括乙醇、甘油、丙二醇、茴香油、苯乙醇、單乙醇胺、乙酸、冰醋酸、鹽酸、芐醇和聚乙二醇。然而，如上所述，本文使用的分散介質(zhì)不包括用于水包油乳液制劑的分散介質(zhì)，其中包含本發(fā)明的藥物的油和脂肪液滴分散在水中。本文使用的分散介質(zhì)可以含有添加劑，例如分散劑、表面活性劑、潤(rùn)濕劑、張度劑、緩沖劑、防腐劑、pH調(diào)節(jié)劑。優(yōu)選地，分散介質(zhì)包括表面活性劑和/或分散劑。本文中使用的優(yōu)選的分散介質(zhì)包括水，更優(yōu)選的分散介質(zhì)是含有表面活性劑或分散劑的水，甚至更優(yōu)選包含表面活性劑和分散劑兩者的水。此外，本文中使用的優(yōu)選分散介質(zhì)還包括含有表面活性劑或分散劑的水性溶劑，和含有表面活性劑和分散劑兩者的水性溶劑。本文使用的分散介質(zhì)的pH通常為3-9，優(yōu)選3-8，更優(yōu)選4-7，特別優(yōu)選4-6。分散介質(zhì)的pH可以用下述pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)。本文中使用的用于研磨的溶劑是指用于濕磨化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的溶劑，其中化合物A的溶解度優(yōu)選為0.4mg/mL或更低。具體地，本文中使用的用于研磨的溶劑包括水、多元醇（例如甘油、丙二醇和聚乙二醇）、庚烷和己烷。并且，其可以包括兩種或更多種溶劑的混合物。優(yōu)選的混合溶劑是相對(duì)于全部溶劑包含90w/w%或更多水，和任選地包括上述多元醇的水性溶劑，更優(yōu)選包括相對(duì)于全部溶劑95w/w%或更多水，特別優(yōu)選99w/w%或更多水。本文中使用的優(yōu)選的用于研磨的溶劑是水，其適當(dāng)時(shí)可以含有添加劑，例如表面活性劑、分散劑和鹽，以有助于研磨化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽。上述分散介質(zhì)可以用作用于研磨的溶劑。本發(fā)明的制劑可以在滅菌后提供，其中滅菌可以通過(guò)例如過(guò)濾、輻射或高壓釜處理化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽在分散介質(zhì)中的混懸液來(lái)進(jìn)行。適當(dāng)時(shí)，化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽、凍干混懸液、分散介質(zhì)和任選加入的添加劑可以分別滅菌。并且，制備本發(fā)明的眼用制劑的全部過(guò)程或部分過(guò)程也可在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。考慮到顆粒的狀態(tài)、顆粒的尺寸等，本發(fā)明中的粒度例如以下面解釋的方式測(cè)量，但不應(yīng)限于此。對(duì)于分散在混懸液制劑中的固體化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽，其粒度為1nm-5μm，優(yōu)選10nm-5μm；通過(guò)用分散介質(zhì)稀釋混懸液制劑以將混懸液制劑中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的含量調(diào)節(jié)至約200-500μg/mL，然后用測(cè)量?jī)x器ZetaSizernanoS（MalvernInstrumentsLtd，MalvernUK）測(cè)量稀釋的樣品，進(jìn)行其粒度的測(cè)量。通過(guò)動(dòng)態(tài)光散射進(jìn)行粒度的測(cè)量/計(jì)算，其中材料RI和分散劑RI為1.33，并且所計(jì)算的粒度的Z均值的平均值顯示為測(cè)量的粒度。對(duì)于分散在混懸液制劑中的固體化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽，其粒度為5μm或更大；通過(guò)用分散介質(zhì)稀釋混懸液制劑以將混懸液制劑中的化合物A的含量調(diào)節(jié)至約10-50μg/mL，用超聲波（15秒）和攪拌器（速度：1200rpm）分散稀釋的混懸液，用激光衍射粒度分析儀：HEROS/BR-multi和濕分散裝置：CUVETTE（SympatecGmbH）[范圍R3，使用50mL池，觸發(fā)條件（時(shí)間基準(zhǔn)：1000.00ms，測(cè)定：10s實(shí)際時(shí)間）]測(cè)量分散的樣品，并通過(guò)計(jì)算模式HRLD計(jì)算粒度的X50值，進(jìn)行其粒度的測(cè)量。X50值顯示為測(cè)量值。對(duì)于干磨化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽，使用激光衍射粒度分析儀：HEROS/BR-multi和干分散裝置（SympatecGmbH）[范圍R3，觸發(fā)條件（開(kāi)始：ch.25≥0.5%，停止：ch.25≤0.5%，持續(xù)2秒或10秒作為實(shí)際時(shí)間），分散壓力2.0巴]進(jìn)行其粒度的測(cè)量，并且由計(jì)算模式HRLD計(jì)算的X50值顯示為測(cè)量值。本文使用的表面活性劑是在其分子中具有親水基團(tuán)和疏水基團(tuán)（親脂基團(tuán)）的材料；當(dāng)其濃度高于某一濃度時(shí)可形成膠束、囊泡或?qū)訝罱Y(jié)構(gòu)；可以使極性物質(zhì)和非極性物質(zhì)混合均勻；具有降低表面張力的作用；并且具有6,000或更小的分子量；并且它是有助于潤(rùn)濕化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的納米顆粒的添加劑。本文所用的具體表面活性劑包括聚山梨醇酯80、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽、聚乙二醇40硬脂酸酯、甘油、丙二醇、硫酸軟骨素鈉、單硬脂酸鋁、烷基烯丙基聚醚醇、膽固醇、蔗糖脂肪酸酯、脫水山梨糖醇脂肪酸酯、脫水山梨糖醇倍半油酸酯、角鯊?fù)椤⒂仓?、鯨蠟醇、聚西托醇1000、癸二酸二乙酯、十二烷基苯磺酸鈉、脫水山梨醇三油酸酯、壬基苯氧基聚氧乙烯乙磺酸酯銨、聚氧乙烯油胺、聚氧乙烯十八烷基醚、聚氧乙烯鯨蠟基醚、聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯、聚氧乙烯山梨醇聚醚蜂蠟、聚氧乙烯壬基苯基醚、聚氧乙烯聚氧丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯鯨蠟基醚、聚乙二醇35蓖麻油、聚山梨酯20、聚山梨醇酯60、聚乙二醇400、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、脫水山梨醇單油酸酯、甘油單硬脂酸酯、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、月桂基二甲基氧化胺溶液、十二烷基硫酸鈉、月桂酸二乙醇酰胺、月桂酰肌氨酸鈉、聚桂醇(lauromacrogol)、聚氧乙烯月桂基醚磷酸鈉和聚氧乙烯油基醚磷酸酯。優(yōu)選地，其包括聚山梨酯80、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽、聚乙二醇40硬脂酸酯、甘油、丙二醇、硫酸軟骨素鈉、單硬脂酸鋁、聚乙二醇4000和聚乙二醇6000；更優(yōu)選聚山梨醇酯80、烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽和聚氧乙烯氫化蓖麻油。并且，可以使用兩種或更多種表面活性劑，優(yōu)選2-3種表面活性劑。表面活性劑的量?jī)?yōu)選為相對(duì)于混懸液總量的0.001-5重量%。本文使用的分散劑是作為分子量為6,000或更大的聚合物的添加劑，并且可以進(jìn)入納米顆粒之間的空間以有助于防止聚集。本文中使用的具體分散劑包括羧基乙烯基聚合物、聚乙烯吡咯烷酮（聚維酮）、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素（羥丙甲纖維素）、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、聚乙烯醇、羧基甲基纖維素鈉（羧甲纖維素鈉）、泰洛沙泊、印度膠、阿拉伯樹(shù)膠、阿拉伯膠粉、刺梧桐樹(shù)膠、黃原膠、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物RS、丙二醇藻酸酯、羧甲基淀粉鈉、瓊脂粉、琥珀酸二辛酯磺酸鈉和糊精。優(yōu)選地，其包括羧基乙烯基聚合物、羥乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮（聚維酮）、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素（羥丙甲纖維素）、聚乙烯醇、羧基甲基纖維素鈉（羧甲纖維素鈉）和泰洛沙泊；更優(yōu)選羧基乙烯基聚合物、羥乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮（聚維酮）、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素（羥丙甲纖維素）和聚乙烯醇。并且，可以使用兩種或更多種分散劑。分散劑的量?jī)?yōu)選為相對(duì)于混懸液總量的0.001-5重量%。潤(rùn)濕劑包括乙醇、油酸、硅酸鎂、輕質(zhì)無(wú)水硅酸和磷酸膽堿。張度劑包括氯化鈉、氯化鉀、山梨醇、葡萄糖、蔗糖、D-甘露醇、乙醇、油酸、硅酸鎂、輕質(zhì)無(wú)水硅酸和磷酸膽堿，優(yōu)選氯化鈉。緩沖劑包括磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、乙酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉和氨丁三醇，優(yōu)選磷酸氫二鈉和檸檬酸。防腐劑包括季銨鹽，例如苯扎氯銨、芐索氯銨和氯化十六烷基吡啶；對(duì)羥基苯甲酸酯，例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯甲酸丁酯；苯甲醇；苯乙醇；山梨酸和山梨酸鹽；葡萄糖酸洗必太溶液。pH調(diào)節(jié)劑包括鹽酸、檸檬酸、冰醋酸、磷酸、磷酸二氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉和磷酸氫二鈉水合物。合適時(shí)任選地含有上述添加劑的本發(fā)明的眼用混懸液制劑可以用化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽制備，其中化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的量通常為每1mL分散介質(zhì)中1至500mg，優(yōu)選5至300mg，更優(yōu)選10至300mg，更優(yōu)選10至200mg，特別優(yōu)選20至300mg，25至300mg，10至150mg或25至230mg，但本發(fā)明不應(yīng)限于上述量。本發(fā)明的混懸液制劑的pH通常為3-9，優(yōu)選3-8，更優(yōu)選4-7，特別優(yōu)選4-6。混懸液的pH可以用上述pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)。本發(fā)明的混懸液制劑的滲透壓通常為20-1000mOsm，優(yōu)選100-700mOsm，更優(yōu)選180-500mOsm，特別優(yōu)選200-360mOsm?；鞈乙旱臐B透壓可以用上述張度劑調(diào)節(jié)。上述混懸液的滲透壓可以用例如通過(guò)離心混懸液獲得的上清溶液測(cè)量。例如，可以使用滲透壓測(cè)量裝置“OSMOSTATOM-6040”（ARKRAY，Inc.）來(lái)進(jìn)行測(cè)量。在不抑制本發(fā)明的藥理學(xué)作用的情況下，本發(fā)明的制劑可以包含其它活性成分。根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽可以抑制VEGF刺激對(duì)細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用，如下面的試驗(yàn)實(shí)施例所示。因此，本發(fā)明的制劑中的化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽預(yù)期對(duì)各種眼科疾病具有治療效果，因?yàn)樵摶衔锞哂幸种迫┨沁€原酶的作用、抑制VEGF產(chǎn)生的作用、和抑制VEGF刺激對(duì)細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用的作用。此外，本發(fā)明的包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的混懸液制劑特別地具有良好的至后眼段的轉(zhuǎn)移性，因此本發(fā)明的混懸液制劑還預(yù)期在治療上適用于需要向后眼段給藥的后眼段的疾病，例如年齡相關(guān)性黃斑變性、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、糖尿病性黃斑水腫、黃斑水腫、近視性脈絡(luò)膜新生血管形成、視網(wǎng)膜靜脈阻塞、脈絡(luò)膜新生血管形成、葡萄膜炎、色素性視網(wǎng)膜炎、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變和中樞性漿液性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變，但本發(fā)明的目標(biāo)疾病不應(yīng)限于這些疾病。特別地，預(yù)期本發(fā)明的制劑治療性地應(yīng)用于與VEGF相關(guān)的疾病、由VEGF介入引起的疾病或由VEGF介入發(fā)生的疾病后的疾病。此外，當(dāng)將本發(fā)明的制劑治療性地應(yīng)用于需要向前眼段給藥的前眼段的疾病（例如角膜炎、結(jié)膜炎、新生血管性青光眼、干眼癥和白內(nèi)障），或者藥物需要穿過(guò)血液-水性屏障（BAB）或角膜轉(zhuǎn)運(yùn)的疾病時(shí)，也預(yù)期本發(fā)明的制劑具有顯著的治療效果。本發(fā)明的眼用混懸液制劑的劑量和給藥應(yīng)基于藥物功效、給藥途徑、癥狀、年齡、體重等適當(dāng)?shù)卮_定。本發(fā)明中優(yōu)選的劑量和給藥是例如以滴眼液給予包含1-500mg/mL化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的混懸液制劑，其量為各眼睛每次1-2滴，一天總共1次至約6次。通常，滴眼液中的一滴的量為20-80μL，優(yōu)選30-50μL。本發(fā)明中的給藥期間應(yīng)根據(jù)癥狀的嚴(yán)重程度等來(lái)決定，包括例如，1或多個(gè)周，優(yōu)選約1周至約4周，更優(yōu)選約4或更多周。本發(fā)明的制劑也可用于除了人以外的哺乳動(dòng)物的眼科疾病，例如猴、牛、馬、狗和貓。實(shí)施例下面通過(guò)參照實(shí)施例、參考例、比較例、試驗(yàn)等詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，但不應(yīng)限于此。參考例1：化合物A的制備化合物A根據(jù)T.Negoro等人J.Med.Chem.1998,41,4118-4129中所述的方法制備。向其粗產(chǎn)物（10g）中加入活性炭（50%濕度，0.8g）和2-丙醇（101g），將反應(yīng)溶液加熱至其回流溫度（約84℃）并在相同溫度下靜置30分鐘。將反應(yīng)溶液在相同溫度下過(guò)濾，用2-丙醇（13.8g）洗滌。將得到的濾液加熱至75℃或更高，冷卻至60℃，在60℃下保持1小時(shí)，然后冷卻至0℃。在過(guò)濾器上收集沉淀的固體并真空干燥，得到化合物A，為白色晶體（9.3g）。XRD;2θ=11.5,15.4,15.7,16.3,16.9,18.2,19.3,20.1,20.9,21.6,22.2,23.3,24.0,24.7,25.1,26.4,27.5,28.4,28.8,29.6,29.9,30.9,31.9,32.4。差示掃描量熱法（DSC）顯示外推熔融起始溫度為186.7℃的吸熱峰。上述粉末X射線衍射的測(cè)量使用粉末X射線衍射系統(tǒng)XRD-6100（ShimadzuCorp.）進(jìn)行，其各條件如下：X射線管：CuKα（波長(zhǎng)1.54埃），管電壓：30.0kV，管電流：20.0mA，驅(qū)動(dòng)軸：θ-2θ，測(cè)量范圍：5-40度，步寬：0.020度，速度：2.00（度/分），計(jì)數(shù)時(shí)間：0.60秒。使用ThermoPlus2（RigakuCorporation）在流動(dòng)空氣下在25℃至250℃之間進(jìn)行上述差示掃描量熱法（DSC）的測(cè)量，其中在鋁容器中稱(chēng)量的樣品為約10mg，升溫速度為5℃/分鐘。使用噴射磨機(jī)將上述得到的化合物A?；?，改變研磨條件，得到三種具有不同平均粒度的化合物A。所得三種化合物A的平均粒度為1.43μm、6.29μm和21.98μm。使用上述激光衍射粒度分析儀測(cè)量用噴射磨機(jī)（干磨）進(jìn)行粒化所得到的化合物A的平均粒度，以在計(jì)算模式LD中算出的粒度的X50值表示。參考例2：分散介質(zhì)的制備（pH5.0）向0.9%（w/v）氯化鈉的0.02mol/L水性磷酸氫二鈉的水溶液（a）中加入0.9%（w/v）氯化鈉的0.01mol/L水性檸檬酸的水溶液（b）以將溶液（a）的pH調(diào)節(jié)至5.0（加入比（a）：（b）=約1:1），得到pH5.0的檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖液。將20g羥丙基甲基纖維素溶解在380g純水中，制備400g5%羥丙基甲基纖維素水溶液，向其中加入1600gpH5.0的檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖溶液，以制備2000g1%羥丙基甲基纖維素水溶液。將500mg27-33%的烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽水溶液溶解在400g的1%羥丙基甲基纖維素水溶液中，再向其中加入2.5g聚山梨醇酯80，然后將混合物溶解。通過(guò)加入1%羥丙基甲基纖維素水溶液使溶液的重量為500g，用1mol/L鹽酸水溶液將溶液的pH調(diào)節(jié)至5.0，得到分散介質(zhì)（pH5.0）。制備的分散介質(zhì)（pH5.0）的組成如下所示。[表1]成分量檸檬酸0.76mg/g磷酸氫二鈉1.13mg/g氯化鈉7.2mg/g羥丙基甲基纖維素9.9mg/g27-33%烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽水溶液1mg/g聚山梨醇酯805mg/g鹽酸少量實(shí)施例1：眼用混懸液制劑的制備將4g用噴射磨機(jī)?；幕衔顰（平均粒度：1.43μm）和12mL參考例2中制備的分散介質(zhì)（pH5.0）放入螺紋瓶中，將混合物用攪拌器攪拌30分鐘。然后，將整個(gè)樣品混合物轉(zhuǎn)移到研磨罐中。用4mL分散介質(zhì)洗滌螺紋瓶，并將洗滌溶液也放入研磨罐中。向多個(gè)制備的研磨罐中的每一個(gè)加入50g具有以下限定的各直徑尺寸的氧化鋯珠。將研磨罐安放在行星式球磨機(jī)（LP-4/2,ITOMANUFACTURINGCO.,LTD.）中，并將其中的內(nèi)容物在300rpm下研磨2小時(shí)。用篩子過(guò)濾各研磨溶液以除去珠，然后用攪拌器/消泡劑“THINKYMIXERAR-250”（THINKYCORPORATION）脫泡30秒，得到混懸液制劑A1、A2、A3和B-D?；鞈乙褐苿〢1、A2和A3：所用珠粒的直徑尺寸為0.5mm?；鞈乙褐苿〣：使用珠粒的直徑尺寸為2.0mm?；鞈乙褐苿〤：使用珠粒的直徑尺寸為3.0mm?；鞈乙褐苿〥：所用珠粒的直徑尺寸為5.0mm。將2.2g噴射研磨的化合物A（平均粒度：1.43μm、6.29μm或21.98μm）和10mL分散介質(zhì)（pH5.0）加入到螺紋瓶中，并用攪拌器攪拌10分鐘，得到混懸液制劑E、F或G。通過(guò)上述方法測(cè)量懸浮在混懸液制劑A1至A3和B至G中的化合物A的各平均粒度。所得到的各平均粒度如下所示?；鞈乙褐苿〢1:209.0nm混懸液制劑A2:195.2nm混懸液制劑A3:227.0nm混懸液制劑B:451.2nm混懸液制劑C:609.9nm混懸液制劑D:801.2nm混懸液制劑E:1944nm混懸液制劑F:9560nm混懸液制劑G:20430nm參考例3：各眼用混懸液制劑中藥物的定量分析向100μL的各混懸液制劑A1至A3和B至G中加入800μL的1%HPMC和100μL的乙腈，將各混合物用渦旋振蕩。將100μL各振蕩混合物放入10mL量瓶中，向其中加入1%HPMC/乙腈（1:1），混合物完全溶解。用1%HPMC/乙腈（1:1）將溶液的總體積精確調(diào)節(jié)至10mL，得到其每種分析樣品。使用超高效液相色譜儀（SHIMADZU），使用柱YMC-PackProC185μm150x4.6mm分析混懸液制劑A1至A3和B至G中的各化合物A的含量（其為溶解化合物A和懸浮化合物A的組合含量）。分析結(jié)果如下所示。混懸液制劑A1:200.1mg/mL混懸液制劑A2:216.2mg/mL混懸液制劑A3:207.1mg/mL混懸液制劑B:211.0mg/mL混懸液制劑C:195.6mg/mL混懸液制劑D:218.8mg/mL混懸液制劑E:135.4mg/mL混懸液制劑F:201.8mg/mL混懸液制劑G:224.5mg/mL。參考例4：制備分散介質(zhì)（pH3.0）向0.9%（w/v）氯化鈉的0.02mol/L磷酸氫二鈉水溶液的水溶液（c）中加入0.9%（w/v）氯化鈉的0.01mol/L水性檸檬酸的水溶液（d），以將溶液（c）pH調(diào)節(jié)至3.0（加入比（c）：（d）=約2:8），得到pH3.0的檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖溶液。將得到的pH3.0的檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖液以與上述pH5.0檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖溶液的情況類(lèi)似的方式處理，得到分散介質(zhì)（pH3.0）。制備的分散介質(zhì)（pH3.0）的組成如下所示。[表2]成分量檸檬酸1.22mg/g磷酸氫二鈉0.45mg/g氯化鈉7.2mg/g羥丙基甲基纖維素9.9mg/g27-33%烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽水溶液1mg/g聚山梨醇酯805mg/g鹽酸少量參考例5：制備分散介質(zhì)（pH8.0）向0.9%（w/v）氯化鈉的0.02mol/L磷酸氫二鈉水溶液的水溶液（e）中加入0.9%（w/v）氯化鈉的0.02mol/L的磷酸二氫鈉水溶液的水溶液（f），以將溶液（e）的pH調(diào)節(jié)至8.0（加入比（e）：（f）=約19:1），得到pH8.0的磷酸鹽緩沖溶液。將得到的pH8.0的磷酸鹽緩沖溶液以與上述pH5.0的檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖溶液的情況類(lèi)似的方式處理（條件是使用1mol/L氫氧化鈉水溶液代替1mol/L鹽酸水溶液），得到分散介質(zhì)（pH8.0）。制備的分散介質(zhì)（pH8.0）的組成如下所示。[表3]成分量磷酸二氫鈉0.10mg/g磷酸氫二鈉2.15mg/g氯化鈉7.2mg/g羥丙基甲基纖維素9.9mg/g27-33%烷基二氨基乙基甘氨酸鹽酸鹽水溶液1mg/g聚山梨醇酯805mg/g氫氧化鈉少量實(shí)施例2：眼用混懸液制劑的制備使用直徑為1.0mm的珠和分散介質(zhì)（參考例4的pH3.0、參考例2的pH5.0或參考例5的pH8.0），以類(lèi)似于實(shí)施例1的方式制備混懸液制劑H、I或J。得到的混懸液制劑的各pH如下所示?；鞈乙褐苿〩(pH3):3.09混懸液制劑I(pH5):5.07混懸液制劑J(pH7):7.10懸浮在混懸液制劑H、I和J中的化合物A的各平均粒度通過(guò)上述方法測(cè)量。所得到的各平均粒度如下所示。混懸液制劑H(pH3):352.1nm混懸液制劑I(pH5):263.2nm混懸液制劑J(pH7):256.0nm以上述方式分析混懸液制劑H、I和J中的各化合物A的含量，分析結(jié)果如下所示?；鞈乙褐苿〩(pH3):217.9mg/mL混懸液制劑I(pH5):220.0mg/mL混懸液制劑J(pH7):222.4mg/mL比較例1：包含化合物A的眼用溶液制劑的制備向0.9%（w/v）氯化鈉的0.1mol/L磷酸二氫鈉水溶液的溶液中加入0.9%（w/v）氯化鈉的0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液的溶液，將溶液的pH調(diào)節(jié)至8.0，用純水將溶液稀釋1.25倍（以下稱(chēng)為“pH8.0溶液”）。向所得到的1mL溶液中加入400μg噴射研磨的化合物A和0.08mL乙醇，將化合物A溶解，得到溶液制劑Z。比較例2：包含[5-[(1Z,2E)-2-甲基-3-苯基亞丙烯基]-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基]乙酸或(2S,4S)-6-氟-2',5'-二氧代螺[色烷-4,4'-咪唑烷]-2-甲酰胺的眼用混懸液制劑的制備將2g的[5-[(1Z,2E)-2-甲基-3-苯基亞烯丙基]-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基]乙酸（以下稱(chēng)為“化合物B”）和6mL的參考例2中制備的分散介質(zhì)（pH5.0）裝入螺紋瓶中，并將混合物用攪拌器攪拌30分鐘。然后，將整個(gè)樣品混合物轉(zhuǎn)移到研磨罐中。用2mL分散介質(zhì)洗滌螺紋瓶，并將洗滌溶液也放入研磨罐中。向研磨罐中加入50g直徑為1.0mm的珠。將研磨罐放置在行星式球磨機(jī)（LP-4/2,ITOMANUFACTURINGCO.,LTD.）中，并將其中的內(nèi)容物在300rpm下研磨6小時(shí)。用篩子過(guò)濾研磨的溶液以除去珠粒，然后用攪拌器/消泡劑“THINKYMIXERAR-250”（THINKYCORPORATION）脫泡30秒，得到混懸液制劑X1。另外，將1.84g的(2S,4S)-6-氟-2',5'-二氧代螺[色烷-4,4'-咪唑烷]-2-甲酰胺（以下稱(chēng)為“化合物C”）和6mL參考例2中制備的分散介質(zhì)（pH5.0）裝入螺紋瓶中，用攪拌器攪拌混合物30分鐘。將得到的樣品以與上述化合物B類(lèi)似的方式處理，得到混懸液制劑Y1。將1.1g化合物B和5mL參考例2中制備的分散介質(zhì)（pH5.0）放入螺紋瓶中，并將混合物用攪拌器攪拌10分鐘，得到混懸液制劑X2。以類(lèi)似的方式，也從化合物C制備混懸液制劑Y2。以與化合物A的平均粒度的測(cè)量類(lèi)似的方式測(cè)量懸浮在混懸液制劑X1、Y1、X2和Y2中的化合物B和化合物C的各平均粒度。所獲得的各平均粒度如下所示。混懸液制劑X1:555.7nm混懸液制劑Y1:290.8nm混懸液制劑X2:8970nm混懸液制劑Y2:5430nm混懸液制劑X1、Y1、X2和Y2中的化合物B和化合物C的各含量以上述方式分析，并且分析結(jié)果顯示如下?；鞈乙褐苿1:215.4mg/mL混懸液制劑Y1:214.1mg/mL混懸液制劑X2:187.7mg/mL混懸液制劑Y2:196.8mg/mL本文的實(shí)施例和參考例的結(jié)果概述如下。[表4]試驗(yàn)1：包含化合物A的眼用混懸液制劑的儲(chǔ)存穩(wěn)定性的評(píng)價(jià)關(guān)于眼用混懸液制劑，根據(jù)以下程序評(píng)價(jià)在37℃下儲(chǔ)存的化合物A的含量變化和在25℃下儲(chǔ)存的化合物A的粒度變化。根據(jù)實(shí)施例1中所述的程序，用分散介質(zhì)（pH5.0）和直徑為0.5mm的珠制備眼用混懸液制劑。通過(guò)上述方法分析所得眼用混懸液制劑中化合物A的含量和懸浮化合物A的平均粒度。分析結(jié)果分別為220.95mg/mL和170.2nm。將制備的眼用混懸液制劑在37℃下儲(chǔ)存規(guī)定時(shí)間，然后進(jìn)行超聲波處理以使其均勻化。向100μL的眼用混懸液制劑中加入800μL的1%HPMC和100μL的乙腈，并將混合物用渦旋振蕩。將100μL的振蕩混合物放入10mL量瓶中，向其中加入1%HPMC/乙腈（1:1）以將溶液的總體積精確地調(diào)節(jié)至10mL。使用得到的溶液作為化合物A的分析樣品。使用柱YMC-PackProC185μm150x4.6mm，用超高效液相色譜儀（SHIMADZU）分析每個(gè)儲(chǔ)存時(shí)間的每個(gè)樣品。分析結(jié)果示于圖1。隨后，根據(jù)實(shí)施例1中所述的程序，用分散介質(zhì)（pH5.0）制備眼用混懸液制劑。在研磨中，使用直徑為0.5mm的珠粒2小時(shí)，然后將珠粒變?yōu)橹睆綖?.02mm的珠粒，將混合物研磨2小時(shí)。通過(guò)上述方法分析所得眼用混懸液制劑中化合物A的含量和懸浮化合物A的平均粒度。分析結(jié)果分別為168.5mg/mL和180.5nm。將制備的眼用混懸液制劑在25℃下儲(chǔ)存，通過(guò)上述方法分析每個(gè)時(shí)間段儲(chǔ)存的樣品的平均粒度。分析結(jié)果示于圖1。圖1顯示本發(fā)明的眼用混懸液制劑中的化合物A的含量即使在儲(chǔ)存72小時(shí)后也沒(méi)有降低很多。并且，即使在儲(chǔ)存14天后，其平均粒度也沒(méi)有變化。該結(jié)果表明本發(fā)明的眼用制劑在化學(xué)和物理上是穩(wěn)定的，并且不需要在寒冷地方儲(chǔ)存，即可以在環(huán)境溫度下儲(chǔ)存。試驗(yàn)2：在大鼠中評(píng)價(jià)至后眼段的轉(zhuǎn)移性（I-1）和（I-2）對(duì)于糖尿病大鼠模型的雙眼，其中化合物A作為混懸液制劑（200mg/mL）以一般耐受劑量懸浮的眼用混懸液制劑A1，或其中化合物A溶解（400μg/mL）的眼用溶液制劑Z，以滴眼液以5分鐘的間隔以5μL的量施用于一只眼睛中（其為大鼠滴眼液的最大耐受劑量），共5次。給藥后60分鐘，測(cè)量角膜、視網(wǎng)膜和血漿中化合物A的各濃度。滴眼液對(duì)一次的耐受體積具有限制，這與其它劑型不同。因此，從最大耐受劑量的滴眼液獲得的藥物向目標(biāo)組織的遞送量是重要的。耐受體積根據(jù)動(dòng)物種類(lèi)而變化，并且大鼠中的最大體積對(duì)于一只眼睛為5μL。化合物A在水中的溶解度非常低，因此在制備其眼用溶液制劑時(shí)，向溶液中加入添加劑以使化合物A的溶解度高于原始溶解度，從而制備眼用溶液制劑Z（400μg/mL）。此外，DiabeticRetinopathy,INTECH,Phapter15"ProphylacticMedicalTreatmentofDiabeticRetinopathy",AkihiroKakehashi等人公開(kāi)了向SDT大鼠口服重復(fù)給予化合物A的實(shí)驗(yàn)，其中使得視網(wǎng)膜毛細(xì)血管變?nèi)醪⑶乙种埔暰W(wǎng)膜中VEGF產(chǎn)生的化合物A的劑量為1.0mg/kg。在本試驗(yàn)中，化合物A的劑量（1.0mg/kg）經(jīng)口重復(fù)給藥，每天一次，持續(xù)21天。在最終給藥后60分鐘，測(cè)量角膜、視網(wǎng)膜和血漿中的化合物A的各濃度。結(jié)果示于圖2和圖3。圖2顯示通過(guò)眼用混懸液制劑A1的滴眼給藥、眼用溶液制劑Z的滴眼給藥和口服重復(fù)給藥，至血漿、角膜和視網(wǎng)膜的化合物A的遞送量（濃度）?；衔顰到血漿、角膜和視網(wǎng)膜的各遞送比率如下所示。通過(guò)滴眼給予眼用混懸液制劑A1的各組織中化合物A的濃度比率為血漿：角膜：視網(wǎng)膜=約1：101：33.5。通過(guò)滴眼給予眼用溶液制劑Z的各組織中化合物A的濃度比率為血漿：角膜：視網(wǎng)膜=約1：1689：1。并且，通過(guò)口服重復(fù)給藥，各組織中化合物A的濃度比率為血漿：角膜：視網(wǎng)膜=約1:1:1。另外，各給藥組的各視網(wǎng)膜/血漿比[視網(wǎng)膜/血漿比=（視網(wǎng)膜中的化合物A濃度（μg/g））/（血漿中的化合物A濃度（μg/mL））]顯示如下。眼用混懸液制劑A1的給藥組的視網(wǎng)膜/血漿比=33.5。眼用溶液制劑Z的給藥組的視網(wǎng)膜/血漿比=1.1?？诜貜?fù)給藥組的視網(wǎng)膜/血漿比=1.0。在滴眼液中給予眼用溶液制劑Z的大鼠中，視網(wǎng)膜/血漿比為1.1，與通過(guò)口服給藥的視網(wǎng)膜/血漿比（1.0）幾乎相同。該結(jié)果表明，大部分眼用溶液制劑Z通過(guò)鼻淚管進(jìn)入全身循環(huán)的血液，然后到達(dá)視網(wǎng)膜。另一方面，在給予本發(fā)明的眼用混懸液制劑A1的大鼠中，視網(wǎng)膜/血漿比為33.5，是口服給予SDT大鼠有效劑量的化合物A用于糖尿病性視網(wǎng)膜病變所得的視網(wǎng)膜/血漿比（1.0）或給予眼用溶液制劑Z所得的視網(wǎng)膜/血漿比（1.1）的30多倍。這表明眼用混懸液制劑可通過(guò)直接遞送途徑遞送到視網(wǎng)膜。在試驗(yàn)2中給予大鼠眼用混懸液制劑A1和眼用溶液制劑Z的各組織中的化合物A的各濃度示于圖3。在給予眼用溶液制劑Z的大鼠中，雖然化合物A的濃度比原始溶解度高（400μg/mL），但是向視網(wǎng)膜的遞送率低（0.0473μg/g），即，不認(rèn)為這項(xiàng)試驗(yàn)預(yù)示治療效果。另一方面，在給予眼用混懸液制劑A1的大鼠中，到達(dá)視網(wǎng)膜的遞送率足夠高（342μg/g），足以預(yù)期是治療效果，其中化合物A在制劑中的濃度是作為混懸液的一般耐受劑量（200mg/mL）。在滴眼液中給予的混懸液制劑中的化合物A的濃度是溶液制劑的500倍[（200mg/mL）/（400μg/mL）]，但是其在源自混懸液制劑的視網(wǎng)膜中的量比溶液制劑高得多（7230倍[（342μg/g）/（0.0473μg/g）]。另一方面，對(duì)于至前眼段的角膜的遞送和至血漿的遞送，其來(lái)自混懸液制劑的角膜和血漿中的各個(gè)量?jī)H分別為溶液制劑的14倍和232倍，盡管以滴眼液給予的混懸液制劑中的化合物A的量是溶液制劑的500倍。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，包含化合物A的眼用混懸液制劑可以以比通過(guò)全身循環(huán)的口服給藥或通過(guò)眼用溶液制劑的滴眼液更加足夠的濃度的化合物A遞送。因此，認(rèn)為包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的眼用混懸液制劑在其作用與其副作用之間具有足夠的分離，因此可以使包括視網(wǎng)膜在內(nèi)的后眼段中的疾病安全地得到治療。試驗(yàn)3：在大鼠中評(píng)價(jià)至后眼段的轉(zhuǎn)移性（II）對(duì)SD大鼠的雙眼，眼用制劑A2以滴眼液以對(duì)一只眼睛5μL的量以5分鐘的間隔給予一次、三次或五次。給藥后60分鐘，測(cè)量角膜、視網(wǎng)膜和血漿中化合物A的各濃度。結(jié)果示于圖4。如圖4所示，眼用混懸液制劑使得化合物A在血漿中的濃度隨給藥頻率而增加。然而，視網(wǎng)膜中的濃度不受給藥頻率的影響，即在一次給藥中將所需量的化合物A遞送至視網(wǎng)膜。從該結(jié)果，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)包含化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽的眼用混懸液制劑可以通過(guò)這樣的低的給藥頻率抑制循環(huán)水平的升高，并且還使制劑充分遞送到視網(wǎng)膜中。試驗(yàn)4：在大鼠中評(píng)價(jià)至后眼段的轉(zhuǎn)移性（III）對(duì)SD大鼠的雙眼，以滴眼液以對(duì)于一只眼睛5μL的量給予眼用制劑A3或眼用制劑B-G一次。給藥后60分鐘，測(cè)量角膜、視網(wǎng)膜和血漿中化合物A的各濃度。結(jié)果示于圖5。另外，用分散介質(zhì)稀釋眼用制劑A3以制備具有不同濃度的化合物A（20mg/mL）的眼用混懸液制劑，然后將稀釋的制劑給予SD大鼠。給藥后60分鐘，測(cè)量角膜、視網(wǎng)膜和血漿中化合物A的各濃度（III-2）。結(jié)果示于圖9。如圖5所示，平均粒度越小，視網(wǎng)膜中的化合物A的濃度越高。然而，在角膜和血漿中，對(duì)于化合物A的濃度沒(méi)有大的差異，只要平均粒度小于9560nm。與口服給藥或用溶液眼部給藥（口服給藥：1.0，用溶液眼部給藥：1.1）相比，使用混懸液制劑的眼部給藥顯示出更高的視網(wǎng)膜/血漿比（約4-12），甚至對(duì)于具有各種平均粒度的所有眼用混懸液制劑也是如此。并且，包含平均粒度為700nm或更小的化合物A的眼用混懸液制劑在視網(wǎng)膜中的濃度與血漿中的濃度之間具有較大的差異?？紤]到該結(jié)果，認(rèn)為眼用混懸液制劑可以表現(xiàn)出高效果并且還減少副作用。如圖9所示，混懸液制劑中化合物A的濃度越高，視網(wǎng)膜中化合物A的濃度越高。通常認(rèn)為，至后眼段的藥物遞送取決于溶解在水中的藥物的量。然而，在該試驗(yàn)中，令人驚奇的是，無(wú)論溶解的化合物A的量如何，化合物A到視網(wǎng)膜的遞送量隨著化合物A的懸浮狀態(tài)的濃度而增加。并且，用混懸液制劑的眼部給藥顯示比口服給藥或用溶液眼部給藥（口服給藥：1.0，用溶液眼部給藥：1.1）更高的視網(wǎng)膜/血漿比（約12），與混懸液濃度無(wú)關(guān)。試驗(yàn)5：在大鼠中評(píng)價(jià)至后眼段的轉(zhuǎn)移性（IV）對(duì)SD大鼠的雙眼，以滴眼液以對(duì)于一只眼睛5μL的量給予眼用制劑H（pH3）、眼用制劑I（pH5）或眼用制劑J（pH7）一次。給藥后60分鐘，測(cè)量角膜、視網(wǎng)膜和血漿中化合物A的各濃度。結(jié)果示于圖6。如圖6所示，眼用制劑I（pH5）、眼用制劑H（pH3）和眼用制劑J（pH7）全部顯示足以能夠治療后眼段的疾病的至視網(wǎng)膜的遞送水平。特別地，眼用制劑I（pH5）顯示出向視網(wǎng)膜的非常高的遞送。然而，至角膜和血漿的遞送不受pH的這種影響。試驗(yàn)6：在大鼠中評(píng)價(jià)至后眼段的轉(zhuǎn)移性（V）對(duì)SD大鼠的雙眼，以滴眼液以對(duì)一只眼睛5μL的量給予眼用制劑I、眼用制劑F、眼用制劑G、眼用制劑X1、眼用制劑X2、眼用制劑Y1或眼用制劑Y2一次。給藥后60分鐘，測(cè)量視網(wǎng)膜中化合物A的各濃度。結(jié)果示于圖7。如圖7所示，包含化合物A的眼用混懸液制劑比包含化合物B或C的眼用混懸液制劑多得多地遞送到視網(wǎng)膜。甚至當(dāng)眼用混懸液制劑中的化合物A具有9560nm的平均粒度時(shí)，需要量的化合物A被遞送到視網(wǎng)膜。然而，在化合物B或化合物C的情況下，具有任何平均粒度的化合物幾乎不能遞送到視網(wǎng)膜。試驗(yàn)7：化合物A關(guān)于VEGF刺激對(duì)細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用的抑制作用通過(guò)JDiabetesComplications.2012;26(5):369-77中描述的實(shí)驗(yàn)方法（細(xì)胞遷移測(cè)定）評(píng)價(jià)化合物A的抗VEGF作用。在實(shí)驗(yàn)中，使用從CellSystemCo.，LTD.獲得的正常人視網(wǎng)膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞（HREC），并且本文使用的細(xì)胞培養(yǎng)物是CS-C培養(yǎng)基（CellSystemCo.，LTD.）。將化合物A、化合物B或化合物C溶解在二甲基亞砜（DMSO）中，將各溶液用細(xì)胞培養(yǎng)物稀釋?zhuān)詫MSO中的濃度調(diào)整為0.1%，將各0.1%溶液用于實(shí)驗(yàn)。對(duì)于Lucentis，將其制劑原液用細(xì)胞培養(yǎng)物稀釋?zhuān)渲邢♂尡葹槊?mL細(xì)胞培養(yǎng)物中50μL制劑原液，并且將稀釋的溶液用于實(shí)驗(yàn)。將HREC接種在6孔板中，并孵育直至匯合率為80-90%。在測(cè)定通過(guò)VEGF刺激的細(xì)胞遷移之前20-24小時(shí)，將細(xì)胞培養(yǎng)物更換為含有0.1%胎牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)物。然后，用200μL移液管吸頭在每孔一點(diǎn)處損傷培養(yǎng)細(xì)胞單層，并用顯微鏡測(cè)量傷口的寬度。損傷后，取決于每個(gè)試驗(yàn)條件，將細(xì)胞培養(yǎng)物改變?yōu)楹蠽EGF、每種醛糖還原酶抑制劑（化合物A、化合物B、化合物C）或Lucentis的細(xì)胞培養(yǎng)物。改變細(xì)胞培養(yǎng)物后約18小時(shí)，用顯微鏡測(cè)量傷口的每個(gè)寬度，并通過(guò)比較該寬度與剛剛損傷的寬度來(lái)評(píng)價(jià)抗VEGF作用。結(jié)果示于圖8。如圖8所示，結(jié)果表明VEGF刺激促進(jìn)了HREC遷移，而Lucentis和醛糖還原酶抑制劑抑制了遷移。用1nM（（0.42ng/mL）L）化合物A抑制HREC遷移的作用與100nM（（28ng/mL）/L）化合物C的水平相同，并且比1000nM（（320ng/mL）/L）化合物B更有效。另外，化合物A的遷移抑制比其它醛糖還原酶抑制劑的遷移抑制更有效，如下表所示的作用比所示。并且1nM化合物A的遷移抑制與抗VEGF抗體Lucentis處于相同的水平。[表5]AR抑制劑AR抑制作用,Ki(nM)化合物A0.23(X1.0)化合物C1.9(X8.3)化合物B62(X270)DiabeticRetinopathy,INTECH,Phapter15,"ProphylacticMedicalTreatmentofDiabeticRetinopathy",AkihiroKakehashi等人顯示向非肥胖2型糖尿病模型的SDT大鼠重復(fù)口服給予化合物A可以減弱視網(wǎng)膜毛細(xì)血管并抑制視網(wǎng)膜中的VEGF產(chǎn)生，該發(fā)現(xiàn)表明，在促進(jìn)VEGF生產(chǎn)之前預(yù)防性給予化合物A用于與VEGF相關(guān)的疾病，預(yù)計(jì)抑制進(jìn)展到一定水平。然而，該文獻(xiàn)沒(méi)有清楚表明，化合物A通過(guò)降低已經(jīng)產(chǎn)生的VEGF的作用對(duì)疾病發(fā)作后的治療有效。另外，非專(zhuān)利文獻(xiàn)1僅顯示了口服給藥的數(shù)據(jù)，但沒(méi)有顯示通過(guò)滴眼給藥抑制進(jìn)展的可能性。本試驗(yàn)已經(jīng)清楚表明，化合物A或其生理學(xué)上可接受的鹽可以抑制VEGF刺激對(duì)細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用，并且還顯示對(duì)已經(jīng)產(chǎn)生的VEGF的抗VEGF作用。該發(fā)現(xiàn)表明，本發(fā)明可以在發(fā)病后治療與VEGF相關(guān)的疾病，例如年齡相關(guān)性黃斑變性和糖尿病性視網(wǎng)膜病變。并且，化合物A的抗VEGF作用比其它醛糖還原酶抑制劑更有效力，并且其與作為抗VEGF抗體制劑的Lucentis處于相同的水平。參考例6：混懸液制劑樣品（1）至（4）的制備樣品（1）的制備：根據(jù)實(shí)施例1的步驟，使用分散介質(zhì)（pH5.0）和直徑為0.5mm的珠制備包含化合物A（250mg/mL）的眼用混懸液制劑。樣品（2）的制備：根據(jù)參考例2，通過(guò)使用聚氧乙烯氫化蓖麻油代替在參考例2的步驟中的聚山梨醇酯80，制備包含0.3%聚氧乙烯氫化蓖麻油的分散介質(zhì)（pH5.0）。將15mL分散介質(zhì)和5g化合物A放入螺紋瓶中，并將混合物進(jìn)行超聲5分鐘。將全部?jī)?nèi)容物轉(zhuǎn)移到用于研磨的注射器StarBurstMini（SuginoMachineLimited），并將螺紋瓶用5mL分散介質(zhì)洗滌，并將洗滌溶液也放入注射器中。將注射器中的內(nèi)容物在245MPa的研磨壓力下研磨30分鐘，以制備包含化合物A（250mg/mL）的眼用混懸液制劑。樣品（3）的制備：將1g噴射研磨的化合物A加入到10g甘油中，并將混合物用攪拌器攪拌1小時(shí)，以制備包含化合物A的混懸液制劑。樣品（4）的制備：將1g噴射研磨的化合物A加入到10g水中，并將混合物用攪拌器攪拌1小時(shí)，以制備包含化合物A的混懸液制劑。試驗(yàn)8：化合物A的溶解度的評(píng)價(jià)使用離心分離機(jī)HITACH-GX（HitachiKokiCo.,Ltd.）將樣品（1）至（4）各500μL離心分離（150,000rpm，10分鐘，5℃）。向100μL得到的上清液中加入800μL1%HPMC和100μL乙腈或水，混合物用渦流振蕩，得到其各分析樣品。使用柱YMC-PackProC185μm150x4.6mm，用超高效液相色譜（SHIMADZU）分析溶解在每個(gè)樣品中的各化合物A的含量。分析結(jié)果示于表6中。表6顯示，溶解在水性混懸液中的化合物A的百分比非常小。[表6]以上述方式分析懸浮在樣品（1）和（2）中的化合物A的各平均粒度。結(jié)果分別為244.2nm和276.7nm。在25℃下儲(chǔ)存一個(gè)月和兩個(gè)月的樣品（2）中的各粒度分別為277.3nm和256.9nm。工業(yè)適用性考慮到這些實(shí)施例、參考例、試驗(yàn)等，本發(fā)明的眼用制劑具有良好的至后眼段的轉(zhuǎn)移性，并且可以適合用于治療眼科疾病，例如后眼段的疾病。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3