發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及利用鐵碳水化合物復(fù)合物(ironcarbohydratecomplex)的妊娠非人哺乳動物中貧血(anaemia)的治療。本發(fā)明總體上改善了非人哺乳動物的血紅蛋白水平和/或?qū)蟠鷾y量的參數(shù)，如死產(chǎn)率、哺乳期中的死亡率、血紅蛋白水平的增加和哺乳期中的生長率?，F(xiàn)有技術(shù)多個研究表明，盡管在獸醫(yī)實踐中很少診斷，但貧血在母豬中是非常普遍的。近期丹麥的研究表明，在大規(guī)模商業(yè)丹麥畜群中59％的母豬具有低于110g/l的血液血紅蛋白(hb)濃度(jensen等人，2014年)，其被認(rèn)為是妊娠母豬的下限參考值(thorn，2010)。貧血的最常見原因是鐵缺乏。因為鐵參與氧的傳輸，在dna的合成中以及在維持細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能的許多其他過程中(morris等人，1995年)，低鐵狀態(tài)將會對母豬及其后代幼崽的健康和生產(chǎn)具有多種可見和不可見的影響。最近已經(jīng)顯示，在妊娠期間高的母豬血紅蛋白水平與降低的死產(chǎn)小豬率有關(guān)(jensen等人，2014年)。早期已經(jīng)在比現(xiàn)有品種少育的母豬中研究了母豬中血紅蛋白水平和死產(chǎn)率之間的關(guān)系(archibald和hancock，1939年，moore等人，1965年，zaleski和hacker，1993年)。也已經(jīng)顯示，死產(chǎn)小豬具有比活產(chǎn)小豬低的血紅蛋白值(svetina等人，2006年；zaleski和hacker，1993年)，并且75％的死產(chǎn)小豬在分娩期間死亡(glastonbury，1977年；leenhouwers等人，1999年)。此外，母豬中的血紅蛋白水平與后代小豬的血紅蛋白水平有關(guān)(jensen和nielsen，2013年)。針對觀察到的高血紅蛋白水平對死產(chǎn)率的影響的最明顯的解釋是母豬和小豬中降低的缺氧風(fēng)險以及分娩期間小豬的增加的活力。因此，母豬中血紅蛋白水平的改善可以開啟降低死產(chǎn)的有效手段。在丹麥，死產(chǎn)損失平均為1.7只小豬/窩幼崽(vinther，2013年)并且由此在豬生產(chǎn)中帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟和福利問題。為了降低死產(chǎn)數(shù)量的畜群干預(yù)通常難以應(yīng)用并且僅可以很少地有助于傳染或管理因素。標(biāo)準(zhǔn)程序是在哺乳期為小豬補鐵并且工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)是在生命的初期期間注射200mg元素鐵(單質(zhì)鐵，elementaliron)。直到實現(xiàn)所得的血紅蛋白生產(chǎn)，小豬僅依賴于在在妊娠期間從母豬子宮內(nèi)的胎盤獲得的鐵。通過在預(yù)期產(chǎn)仔之前7周和4周注射2g量的gleptosil來增加母豬中血紅蛋白的水平的嘗試是不成功的(auvigne，2009)。對于具有在血液中的107.7至117.3g/l的血紅蛋白的母豬，鐵碳水化合物的腸胃外施用不導(dǎo)致血液血紅蛋白濃度的增加。在高血紅蛋白水平下出生的小豬直到斷奶時具有增加的存活機會，并且本發(fā)明的一個目的是為妊娠母豬提供鐵補充，其可以增加母豬的血紅蛋白水平和/或改善對后代幼崽測量的參數(shù)。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明涉及一種在增加妊娠非人哺乳動物中血液血紅蛋白濃度的方法中使用的鐵碳水化合物復(fù)合物，其中對具有105g/l以下的血液血紅蛋白水平的所述妊娠非人哺乳動物施用一個或多個劑量的包含1800mg以上/劑量的元素鐵的量的鐵碳水化合物復(fù)合物。在另一個方面中，本發(fā)明涉及一種在降低來自妊娠非人哺乳動物的死產(chǎn)后代率的方法中使用的鐵碳水化合物復(fù)合物，其中對具有105g/l以下的血液血紅蛋白水平的所述妊娠非人哺乳動物施用一個或多個劑量的包含1800mg以上/劑量的元素鐵的量的鐵碳水化合物復(fù)合物。在又一個方面中，本發(fā)明涉及一種在增加出生后3天內(nèi)和/或在斷奶時的后代幼崽的血液血紅蛋白濃度的方法中使用的鐵碳水化合物復(fù)合物，其中對具有105g/l以下的血液血紅蛋白水平的妊娠非人哺乳動物施用一個或多個劑量的包含1800mg以上/劑量的元素鐵的量的鐵碳水化合物復(fù)合物。在又一個方面中，本發(fā)明涉及一種在增加非人哺乳動物的后續(xù)產(chǎn)次(subsequentparity)中的窩產(chǎn)仔數(shù)(胎仔數(shù)，littersize)的方法中使用的鐵碳水化合物復(fù)合物，其中對具有105g/l以下的血液血紅蛋白水平的所述妊娠非人哺乳動物施用一個或多個劑量的包含1800mg以上/劑量的元素鐵的量的鐵碳水化合物復(fù)合物。由于與胎兒生長相關(guān)的血量的損失增加和代謝的改變，在妊娠期間的缺鐵性貧血被認(rèn)為是大多數(shù)哺乳動物的常見問題。其已被詳細(xì)地研究并且在人類中通常被治療。在非人哺乳動物中，缺鐵性貧血在豬中是最充分了解的，并且大多數(shù)工作關(guān)注于處于全乳飲食的小豬中的缺鐵性貧血，其中這種病癥是地方病。不同于大多數(shù)其他非人哺乳動物，缺鐵性貧血及其治療也已經(jīng)在妊娠母豬中進行了研究，并且因此本發(fā)明基于母豬作為妊娠非人哺乳動物的實例。盡管在本文中主要使用豬作為示例性非人哺乳動物來描述本發(fā)明，但對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說顯而易見的是，可以對任何非人哺乳動物進行本發(fā)明。在本發(fā)明的某個方面中，所述非人哺乳動物是豬、馬、駱駝、綿羊、山羊或牛。血液血紅蛋白水平降低至105g/l以下的早期警示是降低的鐵蛋白濃度水平，因為鐵蛋白水平表示生物體的鐵儲存。如果未根據(jù)本發(fā)明的方法治療妊娠非人哺乳動物，本發(fā)明因此還涵蓋對具有預(yù)測血液血紅蛋白水平降低至105g/l以下的低鐵蛋白水平的妊娠非人哺乳動物的預(yù)防性治療。本發(fā)明上下文中的劑量可以是單次施用或者在同一天進行的兩次以上施用。備選地，可以將兩次以上施用在5天以下如4、3或2天的時間段內(nèi)施用于非人哺乳動物。每次施用可以通過腸或腸胃外途徑提供。在本發(fā)明的優(yōu)選方面中，劑量是腸胃外施用的。優(yōu)選的腸胃外施用是通過注射或輸注。在某個實施方案中，在同一天對非人哺乳動物的頸部的每一側(cè)施用兩次注射或輸注。根據(jù)本發(fā)明，在妊娠期間對非人哺乳動物施用一個或多個劑量，如二、三、四、五、六個或更多個劑量。此外，當(dāng)施用兩個以上劑量時，在每個劑量之間的時間間隔是1周以上，如2周、3周、4周、5周、6周或更長。當(dāng)施用兩個劑量時，第一個劑量在預(yù)期產(chǎn)仔之前15至3周施用并且第二個劑量在預(yù)期產(chǎn)仔之前8至1周施用。據(jù)信本發(fā)明的鐵碳水化合物復(fù)合物增加貧血的非人哺乳動物如母豬中的血液血紅蛋白。這本身是重要的，因為其改善了母豬的健康和總體幸福感。此外，在某些實施方案中，本發(fā)明的發(fā)明人現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，向貧血的妊娠母豬施用本發(fā)明的鐵碳水化合物復(fù)合物對母豬的后代也具有效果。因此，當(dāng)在母豬產(chǎn)仔之前向妊娠貧血母豬施用鐵碳水化合物復(fù)合物一次或多次時，施用也會增加后代小豬的血液血紅蛋白水平。作為第一種效果，向母豬施用將會降低死產(chǎn)小豬率。死產(chǎn)意指肺充氣(inflate)。在另一個實施方案中，木乃伊化(mummified)小豬的比率降低。木乃伊化小豬被定義為其中肺沒有充氣的小豬。因此，較高百分?jǐn)?shù)的幼崽將會是活產(chǎn)的。當(dāng)使用術(shù)語窩產(chǎn)仔數(shù)時，其應(yīng)被理解為死產(chǎn)和活產(chǎn)小豬的總大小或數(shù)量。此外，向母豬施用可以增加后代幼崽的血液血紅蛋白濃度、存活、健康和/或生長，直到斷奶。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，平均死產(chǎn)后代率為12％以下，如11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更低。在本發(fā)明的另一個方面，直到斷奶時的平均存活率為80％以上，如81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、96％、97％、98％、99％或更高。平均存活率基于活產(chǎn)小豬(即減去死產(chǎn)或木乃伊化小豬的小豬的總數(shù)量)和在斷奶時存活的小豬計算。因此，與未向妊娠貧血母豬施用鐵碳水化合物復(fù)合物的情況相比，從產(chǎn)仔直到斷奶時，來自一窩的更多后代將會存活。此外，在斷奶時后代將會更健康，例如以健康參數(shù)表示，如增多的體重增加或較高的血液血紅蛋白濃度。當(dāng)將鐵碳水化合物復(fù)合物施用于妊娠貧血母豬時，與未將鐵碳水化合物復(fù)合物施用于妊娠貧血母豬的情況相比，到斷奶時后代將會獲得更多的體重和/或較高的血液血紅蛋白濃度。在某個實施方案中，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)觀察到，當(dāng)根據(jù)本發(fā)明將鐵碳水化合物復(fù)合物施用于妊娠的貧血母豬時，在哺乳期向小豬腸內(nèi)或腸胃外施用額外的鐵的需求降低。因此，本發(fā)明簡化了豬養(yǎng)殖者的工作并且改善了母豬和后代二者的總體幸福感。借助本發(fā)明的治療，可以在后續(xù)產(chǎn)次中將平均窩產(chǎn)仔數(shù)增加至其中平均窩產(chǎn)仔數(shù)為13以上，如14、15、16、17或更多的水平。此外，在妊娠母豬中的平均血紅蛋白濃度增加了1％以上，如2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、40％、50％或更高。此外，在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，平均死產(chǎn)后代率降低了1％以上，如2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、40％、50％或更高。在本發(fā)明的某個實施方案中，直到斷奶時后代幼崽的平均血液血紅蛋白濃度增加了1％以上，如2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、40％、50％或更高。在本發(fā)明的一個方面中，妊娠母豬在后續(xù)產(chǎn)次中的平均窩產(chǎn)仔數(shù)增加了1％以上，如2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、40％、50％或更高。根據(jù)本發(fā)明治療的母豬可以處于如通過背膘厚度(backfatthickness)反映的各種健康狀況。在一個優(yōu)選的方面中，母豬具有17mm、16mm、15mm、14mm、13mm、12mm、11mm、10mm或更小的背膘厚度。同樣地，母豬可以已經(jīng)具有一個或多個產(chǎn)次；優(yōu)選地，對于治療的母豬來說，母豬的產(chǎn)次為2、3、4、5、6、7、8、9或更高。在本發(fā)明的上下文中，鐵碳水化合物復(fù)合物是適于施用于豬的鐵離子或者包含fe3+和/或fe2+的鐵粒子與碳水化合物的任意復(fù)合物。在本發(fā)明的某個方面中，優(yōu)選的是，鐵碳水化合物復(fù)合物可以滲入母豬的胎盤，從而進入胎兒中。鐵碳水化合物復(fù)合物對于技術(shù)人員來說是熟知的并且適合的鐵碳水化合物復(fù)合物的具體選擇在技術(shù)人員的知識范圍內(nèi)。在一個優(yōu)選的實施方案中，將鐵碳水化合物復(fù)合物配制為可注射獸醫(yī)組合物，其具有與碳水化合物復(fù)合的在5-25％(w/v)例如50-250g/l的區(qū)間內(nèi)的元素鐵的含量。獸醫(yī)組合物可以包含通常在該領(lǐng)域中應(yīng)用的助劑。此外，包含鐵碳水化合物復(fù)合物的獸醫(yī)組合物可以含有或可以不含有防腐劑(preservative)，如1-10g/l的量的苯酚。在某個實施方案中，苯酚的量小于1g/l。如果需要，以備選方式獲得消毒。鐵碳水化合物復(fù)合物可以選自多種的不同物質(zhì)。優(yōu)選地，鐵碳水化合物復(fù)合物選自包括下列各項的組：鐵羧基麥芽糖、鐵聚葡萄糖山梨糖醇羧甲基醚復(fù)合物、鐵甘露糖醇復(fù)合物、鐵葡聚糖、鐵氫化葡聚糖(ironhydrogenateddextran)、羧基烷基化還原寡糖和多糖、鐵蔗糖、葡萄糖酸鐵(irongluconate)、鐵糊精、鐵氫化糊精、鐵聚麥芽糖、鐵氫化聚麥芽糖、鐵聚異麥芽糖、鐵氫化聚異麥芽糖、鐵糖復(fù)合物(ironsaccharidecomplex)、焦磷酸鐵、鐵山梨糖醇、葡庚酸、氧化糊精、氧化葡聚糖、氧化寡糖和多糖或它們的混合物。在某個實施方案中，鐵與葡聚糖葡庚糖酸配合。這種鐵碳水化合物復(fù)合物也被稱為葡庚糖酐鐵(gleptoferron)并且可作為gleptosil(alstoelimitedanimalhealth，york，gb)和ursoferran(serumwerkbernburgag，bernburg，d)獲得。在另一個實施方案中，鐵與氫化葡聚糖復(fù)合。商業(yè)上的鐵氫化葡聚糖復(fù)合物是可獲得自pharmacosmosa/s，holbaek，denmark的uniferon、cosmofer、monofer、和diafer。本發(fā)明的鐵碳水化合物復(fù)合物的碳水化合物組分可以具有任何適合的分子量。通常優(yōu)選使用具有這樣的分子量的碳水化合物組分，其中所述鐵碳水化合物復(fù)合物的碳水化合物組分的重均分子量(mw)是800至80,000道爾頓，優(yōu)選800至10,000道爾頓。在該范圍內(nèi)的重均分子量可以更容易從妊娠母豬遞送至胎兒。在一個優(yōu)選的方面中，鐵碳水化合物復(fù)合物的表觀分子量是500.000道爾頓以下，如400.000道爾頓以下的表觀分子量。鐵碳水化合物復(fù)合物的劑量通常基于元素鐵進行計算并且通常在1800mg至10.000mg的范圍內(nèi)。在某個實施方案中，所述劑量為1900mg、2000mg、2100mg、2200mg、2300mg、2400mg、2500mg、2600mg、2700mg、2800mg、2900mg、3000mg、3100mg、3200mg、3300mg、3400mg、3500mg、3600mg、3700mg、3800mg、3900mg、4000mg4100mg、4200mg、4300mg、4400mg、4500mg、4600mg、4700mg、4800mg、4900mg、5000mg、5100mg、5200mg、5300mg、5400mg、5500mg、5600mg、5700mg、5800mg、5900mg、6000mg、6100mg、6200mg、6300mg、6400mg、6500mg、6600mg、6700mg、6800mg、6900mg、7000mg、7100mg、7200mg、7300mg、7400mg、7500mg、7600mg、7700mg、7800mg、7900mg、8000mg、8100mg、8200mg、8300mg、8400mg、8500mg、8600mg、8700mg、8800mg、8900mg、9000mg、9100mg、9200mg、9300mg、9400mg、9500mg、9600mg、9700mg、9800mg、9900mg、10000mg或更高。在某些情況中，可以適合的是施用1650mg，如1700mg，如1750mg以上元素鐵的劑量。在該范圍內(nèi)的劑量將可應(yīng)用于典型大小(size)的母豬，例如具有約250kg的體重(bw)。因為母豬的重量隨著品種和營養(yǎng)變化，所以在一些實施方案中劑量可以基于母豬的體重更好地表示。因此，鐵(即元素鐵)的劑量可以在6mg/kgbw至30mg/kgbw的范圍內(nèi)，如7mg/kgbw、8mg/kgbw、9mg/kgbw、10mg/kgbw、11mg/kgbw、12mg/kgbw、13mg/kgbw、14mg/kgbw、15mg/kgbw、16mg/kgbw、17mg/kgbw、18mg/kgbw、19mg/kgbw、20mg/kgbw、21mg/kgbw、22mg/kgbw、23mg/kgbw、24mg/kgbw、25mg/kgbw、26mg/kgbw、27mg/kgbw、28mg/kgbw、29mg/kgbw、30mg/kgbw或更高。本發(fā)明的鐵碳水化合物復(fù)合物適于在其中將鐵碳水化合物復(fù)合物注射到具有105g/l以下的血液血紅蛋白水平的母豬中的方法中使用。然而，預(yù)期的是，鐵碳水化合物復(fù)合物將會對所有母豬具有所需效果，而與血液血紅蛋白水平無關(guān)。因此，預(yù)期的是，如果母豬具有約110g/l以下，如109g/l、108g/l、107g/l、106g/l或更低的血液血紅蛋白水平，所述鐵碳水化合物復(fù)合物也可以是有效的。通常，治療的母豬具有105g/l以下，如104g/l、103g/l、102g/l、101g/l、100g/l、95g/l、90g/l、85g/l、80g/l、75g/l、70g/l、65g/l、60g/l、55g/l、50g/l、45g/l、40g/l或更低的血液血紅蛋白水平。具有在這些水平的血液血紅蛋白的母豬可以通常被稱為“貧血的”。要用鐵碳水化合物復(fù)合物治療的母豬通常屬于第二產(chǎn)次或更高。通常認(rèn)為，母豬的血液血紅蛋白水平將會隨著產(chǎn)次增加而降低(normand等人，2012年)，并且本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)施用于第二或更高產(chǎn)次如第三產(chǎn)次、第四產(chǎn)次、第五產(chǎn)次、第六產(chǎn)次、第七產(chǎn)次、第八產(chǎn)次、第九產(chǎn)次或者更高的母豬時，本發(fā)明的鐵碳水化合物復(fù)合物是尤其有效的。然而，預(yù)期的是，如果施用于第一產(chǎn)次的貧血母豬，所述鐵碳水化合物復(fù)合物也將會是有效的。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面中，本發(fā)明的鐵碳水化合物復(fù)合物用于通過注射的腸胃外施用，例如肌內(nèi)(im)、皮下(sc)或靜脈內(nèi)(iv)注射。im注射是優(yōu)選的，任選地作為推注注射(bolusinjection)。產(chǎn)仔的預(yù)期時間對于技術(shù)人員來說是熟知的并且可以根據(jù)受精或妊娠日期來計算。因此根據(jù)受精或妊娠日期計算施用時機的確定。為了獲得對小豬的最佳效果，通常據(jù)信，應(yīng)當(dāng)在產(chǎn)仔之前最遲1周，優(yōu)選在2-4周進行最后劑量施用。在妊娠的最后20天內(nèi)，預(yù)期胎兒的重量加倍。第一個劑量通常應(yīng)當(dāng)在產(chǎn)仔之前15周遞送。然而，以上適應(yīng)癥僅是指導(dǎo)性的并且在產(chǎn)仔之前15周至2周的優(yōu)選階段之外施用的鐵碳水化合物復(fù)合物可以提供有價值的效果。在妊娠期間，并且優(yōu)選在母豬產(chǎn)仔之前15周至2周的時間段內(nèi)，在一個或多個時間點向妊娠貧血母豬施用鐵碳水化合物復(fù)合物的劑量，如二、三、四、五、六個或更多個劑量。因此，在每次施用時，向妊娠貧血母豬施用(例如，im、sc或iv)配制為鐵碳水化合物復(fù)合物的1,800mg至10,000mg元素鐵。在每次施用時的劑量可以是相同的或者劑量可以是不同的。例如，第一次注射可以大于第二次注射，如大500mg、1000mg、1500mg、2000mg，或反之亦然。通常，在產(chǎn)仔之前9周至3周的時間段內(nèi)施用兩個劑量是足夠的。每個劑量之間的時間間隔可以為1周以上，如2周、3周、4周、5周、6周或更長。鐵碳水化合物復(fù)合物可以連同其他獸醫(yī)藥物一起施用。另一獸醫(yī)藥物類型的實例包括疫苗，如prrs疫苗?？股匾部梢赃B同鐵碳水化合物復(fù)合物一起施用?？股氐膶嵗ò⒚卓ㄐ?amikacin)、氨基青霉素(aminopenicillin)、阿莫西林(amoxicillin)、阿奇霉素(azithromycin)、頭孢菌素(ceohalospirin)、環(huán)丙沙星(ciprofloxacin)、克林霉素(clinamycin)、多西環(huán)素(doxycycline)、恩氟沙星(enrofloxacin)、紅霉素(erythromycin)、青霉素(penicillin)、慶大霉素(gentamicin)、卡那霉素(kanamycin)、林可霉素(lincomycin)、馬波沙星(marbofloxacin)、甲硝唑(metronidazole)、新生霉素(novobiocin)、奧比沙星(orbifloxacin)、青霉素g(penicilling)、青霉素酶抗性青霉素(penicillininase-resistantpenicillin)、磺胺地索辛(sulfadimethoxine)、四環(huán)素(tetracycline)、噻苯噠唑(thiabendazole)、新霉素(neomycin)、地塞米松(dexamethasone)、甲氧芐啶(trimethoprim)和泰樂菌素(tylosin)。在某個方面中，鐵碳水化合物復(fù)合物連同促紅細(xì)胞生成素(erythropoietine)一起施用以刺激血細(xì)胞的生成。作為元素鐵計算的鐵碳水化合物復(fù)合物的總量為至少1,800mg以上的元素鐵。在一個優(yōu)選的實施方案中，元素鐵的總量是2,000mg、2,500mg、3,000mg、3,500mg、4,000mg、4,500mg、5,000mg、6,000mg、7,000mg、8,000mg、9,000mg、10,000mg元素鐵或更高。還預(yù)期的是，鐵的總量可以分為多次施用，其中的一些可以含有小于1800mg/l。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及一種鐵碳水化合物復(fù)合物，其在增加血液血紅蛋白濃度的方法中使用，在降低死產(chǎn)小豬率的方法中使用，在增加直到斷奶時的后代幼崽的存活、健康和/或生長的方法中使用，或者在增加窩產(chǎn)仔數(shù)的方法中使用。以下描述了支持本發(fā)明的實驗方案。1材料和方法1.1目標(biāo)和研究群體研究在商業(yè)母豬畜群中進行，其是丹麥的密集母豬畜群的代表。研究群體由具有低血紅蛋白值的妊娠母豬和它們的直到斷奶時的后代幼崽組成。選擇在妊娠的60-80天之間的妊娠母豬用于研究。1.2研究設(shè)計研究是隨機臨床試驗。在研究開始之前獲得了來自丹麥動物實驗監(jiān)察委員會(danishanimalexperimentsinspectorate)和丹麥醫(yī)療管理局(danishmedicalagency)的批準(zhǔn)。根據(jù)協(xié)議進行研究。1.3研究單元研究單元是母豬和它們的后代幼崽。1.4畜群選擇在專業(yè)的獸醫(yī)豬實踐合作下選擇的5個畜群中進行丹麥母豬中的貧血的發(fā)病率(prevalence)研究。選擇具有高的貧血發(fā)病率的畜群用于研究。1.4.1畜群選擇標(biāo)準(zhǔn)1.至少1000只母豬的畜群規(guī)模2.畜群數(shù)據(jù)的良好記錄保持3.有積極性的畜群所有者4.僅在第4天通過注射200mg鐵葡聚糖對小豬進行鐵補充1.4.2畜群淘汰標(biāo)準(zhǔn)1.向母豬口服或注射提供額外的鐵(除了在飼料制劑中)2.使畜群繁育或繁殖3.分娩誘發(fā)，例如使用前列腺素(prostaglandin)4.可能會影響死產(chǎn)的明顯傳染病或管理問題1.5樣本大小用于估算發(fā)病率所需的樣本大小通過以下等式計算：n＝(z(1-α/2)2σ2)/l2(j.p.t.m等人，2001年)n＝所選取的樣本的數(shù)量α＝0.05(95％的置信水平)＝＞z(1-0.05/2)＝z0.975＝1.96σ＝標(biāo)準(zhǔn)偏差l＝預(yù)期的絕對誤差在其中50％母豬患有貧血(＜100ghb/升)的畜群中，50只動物的樣本大小足以確定具有+/-13％的容許偏差的發(fā)病率。1.6用于臨床試驗的母豬的鑒別將會在孕期的第60-80天鑒別來自對應(yīng)于200只動物的每周批次的足夠數(shù)量的所有一胎多子(multiparous)母豬。第一個產(chǎn)次的母豬將被排除。將會通過haemocue測量來進行在200只母豬中的血紅蛋白的初始測量。具有低于100g/l的血紅蛋白的健康母豬將會包括在研究中。1.7血液取樣在試驗開始(孕期的第十一周)和預(yù)期產(chǎn)仔之前一周時，限制母豬并且在edta和普通vacutainer管中從頸靜脈取樣5ml血液。將會根據(jù)在章節(jié)4.6.3和4.8中描述的通過完全血液學(xué)檢查(completehaematology)、血清鐵、tibc和血清鐵蛋白對樣品進行分析。還將會根據(jù)在章節(jié)4.9中描述的計算轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度。1.8母豬的血液學(xué)將會首先通過haemocue來測試所有200edta穩(wěn)定的血液樣品的血紅蛋白濃度。該測試所需的設(shè)備將會由pharmacosmos提供。100只貧血母豬的選擇將會基于該測試。將會在哥本哈根大學(xué)(universityofcopenhagen)對來自100只所選母豬的樣品進行完全血液學(xué)檢查(基線測量)。分析血液樣品的紅細(xì)胞計數(shù)(rbc)、白細(xì)胞計數(shù)(總白細(xì)胞計數(shù)和白細(xì)胞分類計數(shù))、血小板、平均血小板體積(mpv)、紅細(xì)胞分布寬度(rdw)、血紅蛋白濃度(hb)、血紅蛋白分布寬度(hdw)、紅細(xì)胞比容(hct)、平均細(xì)胞體積(mcv)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白(mch)和平均細(xì)胞血紅蛋白濃度(mchc)。還將會分析網(wǎng)狀細(xì)胞指標(biāo)，其包括網(wǎng)狀細(xì)胞計數(shù)(絕對值和相對值)、網(wǎng)狀細(xì)胞血紅蛋白含量(chr)、平均網(wǎng)狀細(xì)胞紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(chcmr)、網(wǎng)狀細(xì)胞細(xì)胞體積(mcvr)、網(wǎng)狀細(xì)胞紅細(xì)胞分布寬度(rdwr)和網(wǎng)狀細(xì)胞血紅蛋白分布寬度(hdwr)。儲存血清樣品，直到鑒別用于臨床試驗的研究母豬。1.9母豬數(shù)據(jù)的記錄對于每只母豬，進行以下記錄：母豬的年齡、第一次受精的年齡、在之前產(chǎn)次中死胎和活產(chǎn)小豬的數(shù)量、受精日期、產(chǎn)仔日期以及母豬的產(chǎn)次。2用于臨床試驗的樣本規(guī)模計算計算動物組之間的差所需的每組中的樣本規(guī)模通過以下等式計算(graat等人，2001年)n＝2×(zα+zβ)2*sd2/δ2其中n＝每組中所需的母豬的數(shù)量zα、zβ＝在指定的置信和檢驗力(power)水平下的標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差δ＝估算的差異常數(shù)2意味著在兩組中sd相等。我們假設(shè)在0.05的α、z0.05＝1.96和80％的檢驗力、z0.20＝0.84下的雙向檢驗。基于之前的研究，假定兩組之間的血紅蛋白的差(δ)是10g/l并且將sd設(shè)定為15g/l。當(dāng)假定治療和對照組之間的血紅蛋白濃度差為9g/l時，每組需要50只母豬。2.1冷凍樣品的實驗室分析如果可能，分析從所選擇的100只母豬(50只在治療組中并且50只在對照組中)獲得的血清樣品的血清鐵、總鐵結(jié)合能力(tibc)和血清鐵蛋白。在哥本哈根大學(xué)中央實驗室(centrallaboratory，universityofcopenhagen)分析血清鐵和總鐵結(jié)合能力，而在教授ritzmanns實驗室，ludwig-maximilians-münchen進行血清鐵蛋白測量。2.2轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度(tfs)的計算使用以下式計算所有血液樣品的轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度：tfs(％)＝血清鐵/tibc×100。2.3背膘厚度的測量使用超聲裝置完成母豬的基線背膘測量。根據(jù)制造商的指導(dǎo)，在背部的中線每一側(cè)上7cm的最后的浮肋處進行測量。將會在試驗開始時、在產(chǎn)仔時和剛好斷奶之前時進行背膘測量。2.4母豬的隨機化將所選擇的母豬隨機分配至兩組：1.對照組2.治療組使用借助母豬的耳標(biāo)編號搖號來進行隨機化。2.5母豬的治療試驗和對照物質(zhì)的制備和用于注射的設(shè)備將會由pharmacosmos提供。-第一個劑量在治療組中的母豬將會在孕期的第70天(產(chǎn)仔之前6周)在頸部區(qū)域肌內(nèi)接受12.5ml(2,500mg)的鐵注射(uniferon)。對照組將會在同一天在頸部區(qū)域肌內(nèi)接受12.5ml的等滲鹽水。相應(yīng)地備注并且治療歸因于鐵注射的任何反應(yīng)。-第二個劑量在第84天，在第一個劑量的鐵之后兩周(產(chǎn)仔之前4周)，母豬將會在頸部區(qū)域肌內(nèi)接受12.5ml(2,500mg)的鐵注射(uniferon)的第二個劑量。此外，對照母豬將會接受第二個劑量的等滲鹽水。2.6小豬的母豬的管理在整個研究階段期間在農(nóng)場根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作管理所有母豬。2.7死產(chǎn)小豬的記錄和分類在產(chǎn)仔時收集在一窩幼崽中的所有完全發(fā)育的死亡小豬。對死亡小豬進行尸檢并且對肺進行測試。如果肺在水中下沉，則認(rèn)為小豬是死產(chǎn)。死產(chǎn)小豬分類如下：1.非新鮮死產(chǎn)：顯示出變質(zhì)的跡象，棕色的皮膚顏色——這些小豬很可能在產(chǎn)仔開始前多于一周時死亡(randall和penny1967年)。2.分娩前死產(chǎn)：未顯示出外部的腐爛跡象，但是其全部腹部器官由于溶血和自溶而具有相同的磚紅色顏色——這些豬在產(chǎn)仔之前幾天內(nèi)在子宮內(nèi)死亡(bille等人，1974年)。3.分娩中死產(chǎn)：正常的腹部器官顏色，但是在氣管中存在黏液和/或胎糞，說明小豬在產(chǎn)仔期間死亡。記錄了木乃伊化胎兒但是其不包括在試驗中。如果實際可行，則針對每只死產(chǎn)和活產(chǎn)小豬，記錄性別并且獲得個體體重。2.8小豬的血液學(xué)從每窩幼崽的兩只活產(chǎn)小豬的子集中從前腔靜脈收集血液。在該特定幼崽中的全部小豬中隨機選擇這些小豬。根據(jù)rootwelt等人，2012年的指導(dǎo)收集來自每窩幼崽的兩只死胎小豬的血液。根據(jù)章節(jié)1.8和2.1中描述的對血液進行完全血液學(xué)檢查，包括血清鐵、tibc和血清鐵蛋白。還將會測量每只小豬中的乳酸鹽。2.9母豬中的不良反應(yīng)在研究期間，預(yù)期在斷奶時剔除20％的母豬。在這些母豬之中，為了便于對注射位置反應(yīng)的研究，選擇10只動物。肉眼評估注射位置以確定由于注射而導(dǎo)致的組織損傷的程度。用于組織學(xué)檢查的樣品將固定在福爾馬林中。在治療的動物中的總出生小豬的數(shù)量將會與對照組的那些進行比較。將記錄接近斷奶的母豬的背膘厚度。3統(tǒng)計學(xué)分析采用sas9.3用于數(shù)據(jù)分析。使用一般線性模型，使用sas中的procglm程序，相比在鐵注射前后的母豬的血液學(xué)。使用一般線性模型，使用procglm程序，計算對照組和治療組母豬之間的母豬的血液學(xué)的差異。解釋性的因素將包括基線hb值、總出生小豬的數(shù)量和母豬的產(chǎn)次。使用廣義線性模型，使用proclogistic程序，計算在每個對照組和治療組母豬中小豬死產(chǎn)的概率。在該程序中，在基線測量的hb、總出生小豬的數(shù)量、母豬的產(chǎn)次、小豬的性別是考慮用于分析的解釋性變量。使用線性混合模型，使用procmixed程序，以母豬作為隨機因素，執(zhí)行在存活和死產(chǎn)小豬之間的血液學(xué)差異。其他解釋性變量將會包括窩產(chǎn)仔數(shù)、母豬的產(chǎn)次和母豬的血紅蛋白。實施例1從顯示出高貧血發(fā)病率的畜群中選擇100只母豬。由于實際原因，以兩個批次進行研究。匯總?cè)繑?shù)據(jù)。在試驗開始時(即孕期的第8周)、在預(yù)期產(chǎn)仔之前約一周和產(chǎn)仔之后4周，在edta中從頸靜脈取樣5ml血液。將血液樣品分別標(biāo)記為hb_s1、hb_s2和hb_s3。分析樣品并且確定血液血紅蛋白濃度(hb)。將所選擇的母豬隨機分配至兩組：1.對照組(c)2.治療組(t)使用借助母豬的耳標(biāo)編號搖號來進行隨機化。每組包括50只母豬。在治療組中的母豬將會在孕期的第70天(產(chǎn)仔之前6周)在頸部區(qū)域肌內(nèi)遞送相當(dāng)于2500mg鐵的12.5ml鐵葡聚糖(uniferon，20％)的第一個劑量。對照組在同一天在頸部區(qū)域肌內(nèi)接受12.5ml的等滲鹽水。相應(yīng)地備注并且治療歸因于鐵注射的任何反應(yīng)。在第84天，在第一個劑量的鐵之后兩周(產(chǎn)仔之前4周)，母豬在頸部區(qū)域肌內(nèi)接受12.5ml(2,500mg)的鐵注射(uniferon)的第二個劑量。此外，對照母豬將會接受第二劑量的等滲鹽水。表1：母豬中的hb在產(chǎn)仔時收集在一窩幼崽中的所有完全發(fā)育的死亡小豬。對死亡小豬進行尸檢并且對肺進行測試。如果肺在水中下沉，則認(rèn)為小豬是死產(chǎn)。記錄了木乃伊化胎兒但是其不包括在試驗中。如果實際可行，則針對每只死產(chǎn)和活產(chǎn)小豬，記錄性別并且獲得個體體重。表2：死產(chǎn)小豬的總數(shù)要注意的是，對于具有低于105g/l的基線hb的母豬來說，在表1中所示的母豬中的血紅蛋白濃度增加。具體地，具有＜105g/l的低基線hb的貧血母豬，從試驗開始時到預(yù)期產(chǎn)仔之前一周，與對照組的0.28g/l相比，經(jīng)歷了1.40g/l的增加，并且從開始時到產(chǎn)仔之后4周，與對照組的0.22相比，經(jīng)歷了1.66g/l的增加。結(jié)果顯示，貧血的妊娠母豬受益于鐵碳水化合物復(fù)合物的施用。對于具有高于105g/l的基線hb的母豬來說，δ(hb_s1，hb_s2)和δ(hb_s1，hb_s3)是負(fù)的，說明這些動物未受益于治療。當(dāng)用鐵碳水化合物復(fù)合物治療具有＜105g/l的基線的母豬時，在表2中的死產(chǎn)率從對照組中的7.9％降低至治療組中的6.6％。結(jié)果表明，通過施用鐵碳水化合物復(fù)合物降低了死產(chǎn)后代率。相反，當(dāng)基線hb高于105g/l時，死產(chǎn)率從對照組中的6.6％降低至治療組中的6.4％，說明對于該組母豬來說沒有獲得死產(chǎn)率的改善。參考文獻(xiàn)archibald，r.，hancock，e.e.i.，1939.irondeficiency-stillbirthofswine.canadianjournalofcomparativemedicine3，134.bille，n.，nielsen，n.c.，larsen，j.l.，svendsen，j.，1974.preweaningmortalityinpigs.2.theperinatalperiod.nordiskveterinaermedicin，26，294-313.graat，e.a.m.，frankena，k.，bos，h.，2001.principlesandmethodsofsamplinginanimaldiseasesurveys，in：noordhuizen，j.p.t.m.，frankena，k.，thrusfield，m.v.，graat，e.a.m.(eds.)applicationofquantitativemethodsinveterinaryepidemiology.wageningenpers，wageningen，thenetherlands，pp.45-46.jensen，a.k.，pedersen，k.s.，nielsen，j.p.，2013.associationbetweenbloodhaemoglobinconcentrationinsowsandneonatalpiglets.inproceedingsofthe5thesphm，edinburgh，uk.jensen，a.k.，nielsen，j.p.，2014.associationbetweenstillbornpigletsandhaemoglobinconcentrationinsowsatfarrowing.inproceedingsofthe6thesphm，sorrento，italy.moore，r.，redmond，h.，livingstonjr，c.，1965.irondeficiencyanemiaasacauseofstillbirthsinswine.journaloftheamericanveterinarymedicalassociation147，746.morris，c.j.，earl，j.r.，trenam，c.w.，blake，d.r.，1995.reactiveoxygenspeciesandiron-adangerouspartnershipininflammation.theinternationaljournalofbiochemistryandcellbiology27，109-122.randall，g.c.b.，penny，r.h.c.，1967.stillbirthinpigs：thepossibleroleofanoxia.veterinaryrecord81，359-361.rootwelt，v.，reksen，o.，farstad，w.，framstad，t.，2012.associationsbetweenintrapartumdeathandpiglet，placental，andumbilicalcharacteristics.journalofanimalscience90，4289-4296.svetina，a.，vrabac，l.，m.，turk，r.，2006.relationbetweenerythrocyteparametersandstillbirthinpiglets.veterinarskiarhiv76，297-303.thorn，c.2010.hematologyofthepig.inschalm′sveterinaryhematology6thedition，wiley-blackwell，ames，iowa，weiss，d.，wardrop，k.，eds.(iowa，wiley-blackwell)，p.848.vintherj.，2013.nationalaverageproductivityinpigproductionin2012(landsgennemsnitforproductivitetisvineproduktionen2012).videncenterforsvineproduktionzaleski，h.m.，hacker，r.r.，1993.variablesrelatedtotheprogressofparturitionandprobabilityofstillbirthinswine.thecanadianveterinaryjournal34，109.auvigne，v.，etal.，2010.anaemiainthehyperprolificsow：effectofinjectableironadministrationandrelationwithfatteringscore.當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12