相關(guān)專利和專利申請的交叉參考該申請為專利合作條約申請且要求2014年10月31日提交的美國臨時(shí)申請no.62/073,821和2014年7月7日提交的美國臨時(shí)申請no.62/189,252的優(yōu)先權(quán)，它們都以其整體在此引入作為參考。本發(fā)明大體涉及降低化學(xué)降解物形成的方法，例如由在固體狀態(tài)的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽如催產(chǎn)素中形成二聚體所導(dǎo)致的那些降解物。還涉及具有改善的物理或化學(xué)穩(wěn)定性的藥物組合物、所述組合物的吸入器和劑型、以及制備方法和使用所述組合物治療疾病和/或病癥的方法。
背景技術(shù)：
：催產(chǎn)素為九氨基酸多肽。其系統(tǒng)名稱為半胱氨酸-酪氨酸-異亮氨酸-谷氨酰胺-天冬酰胺-半胱氨酸-脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-酰胺(cys–tyr–ile–gln–asn–cys–pro–leu–gly–nh2)，且其化學(xué)名(iupac)為1-({(4r,7s,10s,13s,16s,19r)-19-氨基-7-(2-氨基-2-氧代乙基)-10-(3-氨基-3-氧代丙基)-16-(4-羥基苯甲?；?-13-[(1s)-1-甲基丙基]-6,9,12,15,18-五氧代-1,2-二硫雜-5,8,11,14,17-五氮雜環(huán)二十碳烷-4-基}羰基)-l-脯氨酰-l-亮氨酰甘氨酰胺。催產(chǎn)素具有的分子量為1007道爾頓。一國際單位(iu)催產(chǎn)素相當(dāng)于約2微克(μg或mcg)純肽。催產(chǎn)素在哺乳動物生理學(xué)中起著許多非常重要的作用，包括在分娩前和分娩期間誘導(dǎo)子宮收縮，以及在分娩后協(xié)助血液凝固。因此，催產(chǎn)素的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥包括分娩誘導(dǎo)、收縮規(guī)律的改善以及產(chǎn)后出血的預(yù)防。雖然催產(chǎn)素在發(fā)達(dá)國家以品牌名稱和通用形式可容易獲得，但它們主要是靜脈內(nèi)(iv)和肌內(nèi)(im)可注射劑型，和很少見的鼻內(nèi)形式?？勺⑸湫问降拇弋a(chǎn)素的全球可用性受到催產(chǎn)素?zé)岵环€(wěn)定并且需要冷藏以避免化學(xué)降解這一事實(shí)的阻礙。這種熱敏感性使得該產(chǎn)品在世界上缺乏持續(xù)供電的地區(qū)的可行性非常有限。此外，作為注射劑，該劑型需要無菌針頭和訓(xùn)練有素的醫(yī)護(hù)人員適當(dāng)?shù)亟o藥該產(chǎn)品，這在資源貧乏的環(huán)境中可能難以得到保證。目前治療的這些局限性有非常嚴(yán)重的影響。在發(fā)展中國家在分娩期間死于可由催產(chǎn)素治療的并發(fā)癥的產(chǎn)婦數(shù)達(dá)到每年數(shù)十萬例。在發(fā)展中國家獲得催產(chǎn)素有可能在十年內(nèi)預(yù)防數(shù)千萬的產(chǎn)后出血病例、和數(shù)百萬的死亡?，F(xiàn)有的水性形式所面臨的挑戰(zhàn)已經(jīng)使得許多小組試圖將催產(chǎn)素配制為熱穩(wěn)定的干粉。各種吸入性催產(chǎn)素制劑在專利和科學(xué)文獻(xiàn)中公開。為了解決這一需求，wo130016754描述了可吸入肽(例如催產(chǎn)素)的熱穩(wěn)定制劑，其中催產(chǎn)素作為可呼吸的干粉復(fù)合物，通過噴霧干燥溶液制備，其具有賦形劑如碳水化合物(例如海藻糖)和氨基酸(例如l-亮氨酸)。據(jù)報(bào)道，與可注射形式相比，這種可吸入的干粉形式的催產(chǎn)素被認(rèn)為是熱穩(wěn)定的，并且更適合在資源貧乏的炎熱的氣候中用于治療。此外，這種可吸入形式可以從簡單的單位劑量吸入器遞送，因此能夠在沒有無菌針頭或經(jīng)過專門培訓(xùn)的醫(yī)務(wù)人員的幫助下進(jìn)行給藥，從而允許進(jìn)行自我給藥或通過分娩助理給藥。這種干粉制劑的研究雖然非常有前途，但可以通過例如改善這些制劑的化學(xué)穩(wěn)定性來改善，例如通過例如減少與肽相關(guān)的雜質(zhì)和其它在儲存時(shí)由于物理化學(xué)不穩(wěn)定性形成的降解物。催產(chǎn)素物質(zhì)中已知和潛在的雜質(zhì)是甲酰亞胺基催產(chǎn)素、乙酰基催產(chǎn)素以及催產(chǎn)素的α-二聚體和β-二聚體。(參見例如，世界衛(wèi)生組織，oxytocin:adoptedtextfortheinternationalpharmacopoeia(june2010))。如國際藥典所述，“胺甲?；弋a(chǎn)素(carbimidooxytocin)”具有化學(xué)名，n-(l-半胱氨酰-l-酪氨酰-l-異亮氨酰-l-谷氨酰胺酰-l-天冬酰胺酰-l-半胱氨酰-l-脯氨酰-l-亮氨酰甘氨酰基)脲環(huán)-(1→6)-二硫化物，和以下結(jié)構(gòu):“乙?；弋a(chǎn)素”具有化學(xué)名乙?；?l-半胱氨酰-l-酪氨酰-l-異亮氨酰-l-谷氨酰胺酰-l-天冬酰胺酰-l-半胱氨酰-l-脯氨酰-l-亮氨酰甘氨酰胺環(huán)-(1→6)-二硫化物，和以下結(jié)構(gòu):“α-催產(chǎn)素二聚體”具有化學(xué)名l-半胱氨酰-l-酪氨酰-l-異亮氨酰-l-谷氨酰胺酰-l-天冬酰胺酰-l-半胱氨酰-l-脯氨酰-l-亮氨酰甘氨酰胺二聚體(1→1':6→6')-雙二硫化物，和以下結(jié)構(gòu):和“β-催產(chǎn)素二聚體”具有以下化學(xué)名l-半胱氨酰-l-酪氨酰-l-異亮氨酰-l-谷氨酰胺酰-l-天冬酰胺酰-l-半胱氨酰-l-脯氨酰-l-亮氨酰甘氨酰胺二聚體(1→6':1'→6)-雙二硫化物，和以下結(jié)構(gòu):根據(jù)歐洲藥典，為了符合歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)，任何雜質(zhì)的限制為1.5％，總限量最多為5％雜質(zhì)(見歐洲藥典7.0，催產(chǎn)素，01/2008：0780修正6.0)。如美國藥典對催產(chǎn)素所述，測定中得到的測定制劑的色譜圖中雜質(zhì)的反應(yīng)總和不超過催產(chǎn)素峰面積的5％(參見usp35officialmonograph，oxytocin，p.4192-1493(2012年8月))。以下發(fā)明代表了這種粉末制劑的進(jìn)一步改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在開發(fā)熱穩(wěn)定的干粉催產(chǎn)素產(chǎn)品時(shí)，申請人認(rèn)識到降解物的形成，如α-催產(chǎn)素二聚體和β-催產(chǎn)素二聚體雜質(zhì)是由以下引起的：一個(gè)催產(chǎn)素分子的二硫鍵斷裂、與在相鄰的類似“打開”的催產(chǎn)素分子上存在的游離巰基重新形成二硫鍵。申請人認(rèn)為，不受任何特定理論的束縛，在催產(chǎn)素的環(huán)結(jié)構(gòu)中存在的氨基酸的陰離子部分附近提供帶正電荷(+2)的物質(zhì)將保持單個(gè)催產(chǎn)素分子的環(huán)中的二硫鍵的各個(gè)巰基部分足夠接近，以致在二硫鍵斷裂的情況下，巰基基團(tuán)將保持彼此接近達(dá)足夠的時(shí)間，以在所述單個(gè)催產(chǎn)素分子中而不是與相鄰的另一個(gè)催產(chǎn)素分子的游離巰基重新形成二硫鍵，從而減少α-催產(chǎn)素二聚體和β-催產(chǎn)素二聚體雜質(zhì)的形成。基于這一原理，申請人設(shè)計(jì)了一種減少固態(tài)、治療活性的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽(如催產(chǎn)素、加壓素等)中的二聚體雜質(zhì)形成的方法，其通過包括摩爾相等量或更大量的二價(jià)陽離子物質(zhì)。因此，在第一方面，本發(fā)明提供了一種用于增加固態(tài)形式(例如干粉)的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽如催產(chǎn)素的物理化學(xué)穩(wěn)定性的方法，其包括：在固相復(fù)合顆粒中，提供相對每摩爾量的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽，摩爾相等量或更大量的二價(jià)陽離子，其中所述顆粒包含所述具有環(huán)的多肽、所述摩爾相等量或更大量的二價(jià)陽離子物質(zhì)、一種或多種碳水化合物和一種或多種疏水性氨基酸。在本文中，“具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽”是指具有由二硫鍵封閉的環(huán)結(jié)構(gòu)的治療活性多肽。當(dāng)所述二硫鍵斷裂時(shí)，這種二硫鍵封閉的環(huán)可以打開，且所述打開的環(huán)形成鏈。二硫鍵可能會重新形成，從而導(dǎo)致鏈再次采取其原始結(jié)構(gòu)。環(huán)本身可以由任意數(shù)目的氨基酸組成，這些氨基酸足夠長以形成這種可以被二硫鍵封閉的環(huán)，但不會如此長以使得二價(jià)陽離子物質(zhì)不再與環(huán)的氨基酸組分的陰離子區(qū)相互作用，從而將構(gòu)成二硫鍵的巰基亞組分保持在鄰近的位置，從而使得如果二硫鍵被破壞則可以重新形成二硫鍵。在一個(gè)方面，本方法涉及具有環(huán)的多肽，其為九肽，其中9個(gè)氨基酸中的6個(gè)形成二硫鍵-封閉的環(huán)，如加壓素或催產(chǎn)素。在優(yōu)選的方面，具有環(huán)的多肽是催產(chǎn)素。在本申請中使用乙酸催產(chǎn)素形式的催產(chǎn)素?？梢詼y量二聚體雜質(zhì)含量，例如通過測量包含二價(jià)陽離子物質(zhì)的給定的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽干粉制劑中α-催產(chǎn)素二聚體和/或β-催產(chǎn)素二聚體的量，并將其與類似的缺乏這種二價(jià)陽離子的干粉制劑比較。這種測試?yán)缈梢砸匀魏魏线m的方式進(jìn)行，例如通過使用反相高效液相色譜法進(jìn)行。對于催產(chǎn)素，這種方法可以在例如歐洲藥典7.0，催產(chǎn)素，01/2008:0780修正的6.0中發(fā)現(xiàn)；或在美國藥典，關(guān)于催產(chǎn)素，35官方專著，催產(chǎn)素，4192-1493頁(2012年8月)中找到。在本發(fā)明的一些含催產(chǎn)素的制劑中，在劑型制備60天或更久以后，根據(jù)峰面積響應(yīng)，α-催產(chǎn)素二聚體的百分比是總肽含量的1.75％a/a(面積/面積)或更少，其通過hplc測定(在下面討論的條件下)；在其他實(shí)施方案中，在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的1.5％a/a或更少w/w；或在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的1.25％a/a或更少w/w；或在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的1.0％a/a或更少w/w；或在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的0.75％a/a或更少a/a，如在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的0.6％a/a或更少w/w。在本發(fā)明含催產(chǎn)素的制劑的其它實(shí)施方案中，在劑型制備60天或更久以后，根據(jù)峰面積響應(yīng)，β-催產(chǎn)素二聚體的百分比為總肽含量的1.75％a/a或更少，如通過hplc測定；在其它實(shí)施方案中，在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的1.5％a/a或更少；或在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的1.25％a/a或更少；或在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的1.0％a/a或更少；或在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的0.75％a/a或更少，如在劑型制備60天或更久以后，為總肽含量的0.6％a/a或更少。因此，在本發(fā)明另一方面，本發(fā)明提供包含大量干粉復(fù)合顆粒的藥物組合物，各復(fù)合顆粒包括：(i)一定量生理活性的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽；(ii)相對于多肽的量摩爾相等量或更大量的二價(jià)陽離子物質(zhì)；(iii)一種或多種碳水化合物；和(iv)一種或多種氨基酸。在本發(fā)明的該另外一個(gè)方面，所述復(fù)合顆粒具有的平均空氣動力學(xué)粒度小于10μm(mmad)，如約5μm至0.5μm，如約3μm至約0.5μm。對于全身治療有效的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽，這些顆粒被適當(dāng)制定尺寸以適合遞送至肺的肺泡區(qū)域。在本發(fā)明該方面的一些實(shí)施方案中，所述具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽包括催產(chǎn)素(例如乙酸催產(chǎn)素)。復(fù)合顆粒中催產(chǎn)素的量為所述大量復(fù)合顆粒的質(zhì)量的20％或更少，例如，15％或更少，或約10％或更少。在不同實(shí)施方案中，包含催產(chǎn)素的復(fù)合顆粒的百分比w/w獨(dú)立地為所述復(fù)合顆粒的20％或更少、19％或更少、18％或更少、17％或更少、16％或更少、15％或更少、14％或更少、13％或更少、12％或更少、11％或更少、10％或更少、9％或更少、8％或更少、7％或更少、6％或更少、5.0％或更少、4.0％或更少、3.0％或更少、2.0％或更少、或1％或更少。在這種復(fù)合顆粒的給定吸入劑量的藥物組合物中提供的催產(chǎn)素的量足以提供與通過可用的靜脈內(nèi)或肌內(nèi)給藥可實(shí)現(xiàn)的大致相等的血液水平。因此，催產(chǎn)素被配制為在給定的治療中遞送相當(dāng)于10iu(～20mcg)催產(chǎn)素肌內(nèi)注射產(chǎn)品的全身暴露。根據(jù)以下因素，本發(fā)明的藥物組合物的一些實(shí)施方案可以含有約10mcg至800mcg催產(chǎn)素，所述因素包括但不限于，肌內(nèi)注射的全身生物利用度、吸入的藥物組合物的沉積性能和吸入的劑量的生物利用度。其它合適的范圍可選自約25至600mcg的吸入劑量。其它可供選擇的范圍包括50至400mcg催產(chǎn)素。例如，如果假定(臨床數(shù)據(jù)未定)肌內(nèi)注射的催產(chǎn)素例如為50％或更少的全身生物利用度，并且體外級聯(lián)碰撞數(shù)據(jù)表明，吸入產(chǎn)品的標(biāo)稱劑量的約20％沉積在肺的可發(fā)生全身吸收的區(qū)域，則預(yù)測與之相當(dāng)?shù)奈雱┝繛?0至400mcg，其中沉積的肺劑量的全身生物利用度在假定的肌內(nèi)生物利用度的25％至200％的范圍內(nèi)。在這種情況下，200mcg劑量反映了為肌內(nèi)生物利用度的50％的肺的生物利用度。在本發(fā)明該進(jìn)一步的方面，所述二價(jià)陽離子物質(zhì)包括提供二價(jià)陽離子，如be2+、ca2+、mg2+、sr2+、ba2+、ra2+、fe2+、zn2+和/或cu2+的物質(zhì)。該二價(jià)陽離子物質(zhì)可以任何合適的形式存在，如合適的鹽等，其為可溶的，允許二價(jià)陽離子的解離，且其為藥學(xué)上可接受的。在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，所述二價(jià)陽離子物質(zhì)包括、基本上由以下組成、或由以下組成：提供ca2+的物質(zhì)。在不同實(shí)施方案中，該二價(jià)陽離子物質(zhì)為鹽形式。這些鹽的實(shí)例包括鈣鹽，如乳酸鈣、硫酸鈣、檸檬酸鈣、氯化鈣、乙酸鈣或其任意組合。在各種實(shí)施方案中，該二價(jià)陽離子物質(zhì)以化學(xué)穩(wěn)定化的量存在，認(rèn)為二價(jià)陽離子物質(zhì)與多肽的摩爾比如獨(dú)立地為大于或等于(≥)1:1，≥2:1、≥3:1、≥4:1、≥5:1、≥6:1、≥7:1、≥8:1、≥9:1、≥10:1、≥15:1、≥20:1、≥25:1、≥50:1。二價(jià)陽離子物質(zhì)的量不應(yīng)太以致于不利地影響復(fù)合顆粒的物理穩(wěn)定性或霧化性能。在具體實(shí)施方案中，該二價(jià)陽離子物質(zhì)存在的量為相對催產(chǎn)素的量少于5摩爾當(dāng)量，如4.75摩爾當(dāng)量或更少、4.5摩爾當(dāng)量或更少、4.25摩爾當(dāng)量或更少、4.0摩爾當(dāng)量或更少、3.75摩爾當(dāng)量或更少、3.5摩爾當(dāng)量或更少、3.25摩爾當(dāng)量或更少、3.0摩爾當(dāng)量或更少。二價(jià)陽離子物質(zhì)以任何合適的量存在。在一些實(shí)施方案中，該二價(jià)陽離子物質(zhì)(鹽)占復(fù)合顆粒的5.0％w/w或更少。因此，在這些實(shí)施方案中，該二價(jià)陽離子物質(zhì)獨(dú)立地占復(fù)合顆粒的5.0％w/w或更少、4.5％w/w或更少、4％w/w或更少、3.5％w/w或更少、3％w/w或更少、2.5％w/w或更少、2.0％w/w或更少、1.5％w/w或更少、或1％或更少、0.75％w/w或更少、0.5％w/w或更少、0.25％w/w或更少、0.1％w/w或更少、0.01％w/w或更少，該量取決于存在的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽的量。復(fù)合顆粒的碳水化合物組分，可包括，單獨(dú)或以任何組合的二糖(例如，海藻糖、蔗糖等)；環(huán)糊精(例如，2-羥丙基-β-環(huán)糊精等)；多糖(例如，菊糖、棉子糖、麥芽糊精、葡聚糖等)，和/或糖醇(例如，甘露醇和山梨醇等)。優(yōu)選非還原糖和糖醇，因?yàn)檫€原糖可增加多肽組分中的雜質(zhì)形成，如加合物的形成。在一個(gè)或多個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述碳水化合物包括、由以下組成、或基本上由以下組成：海藻糖。在噴霧干燥的蛋白質(zhì)制劑中，碳水化合物通常作為水替代物和玻璃狀穩(wěn)定劑。復(fù)合顆粒應(yīng)占顆粒足夠的百分比，以防止在噴霧干燥和儲存時(shí)多肽的聚集，如占復(fù)合顆粒的10％至90％w/w，例如，占復(fù)合顆粒的25％-80％w/w。因此，在一些實(shí)施方案中，所述復(fù)合顆粒的碳水化合物組分獨(dú)立地占復(fù)合顆粒的90％w/w或更少、85％w/w或更少、80％w/w或更少、75％w/w或更少、70％w/w或更少、65％w/w或更少、60％w/w或更少、55％w/w或更少、50％w/w或更少、45％w/w或更少、40％w/w或更少、35％w/w或更少、30％w/w或更少、25％w/w或更少、20％w/w或更少、15％w/w或更少、或10％w/w或更少。復(fù)合顆粒的氨基酸組分作為疏水殼形成物，可包括，單獨(dú)或以任何組合的氨基酸如甘氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、正亮氨酸，和它們的修飾形式。本文中使用的氨基酸，包括以下氨基酸的二肽和三肽：甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、正亮氨酸(包括，但不限于三亮氨酸)。在一些實(shí)施方案中，對于包含二亮氨?；娜垠w，該三聚體的第三個(gè)氨基酸組分可為以下之一：亮氨酸(leu)、纈氨酸(val)、異亮氨酸(isoleu)、色氨酸(try)、丙氨酸(ala)、蛋氨酸(met)、苯丙氨酸(phe)、酪氨酸(tyr)、組氨酸(his)和脯氨酸(pro)。"亮氨酸"，無論是作為單一氨基酸或作為肽的氨基酸組分存在，是指氨基酸亮氨酸，其可為外消旋混合物或?yàn)槠鋎-或l-形式。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，復(fù)合顆粒的一種或多種氨基酸，包括、基本上由以下組成、或由以下組成：l-亮氨酸。在本發(fā)明一個(gè)方面，該氨基酸即疏水性殼形成組分可占復(fù)合顆粒質(zhì)量的40.0％或更少。因此，疏水性殼形成物質(zhì)可獨(dú)立地為復(fù)合顆粒的40％w/w或更少、35％w/w或更少、30％w/w或更少、25％w/w或更少、20％w/w或更少、15％w/w或更少、或10％w/w或更少。在其它實(shí)施方案中，疏水性殼形成組分占復(fù)合顆粒的約40％至10％，例如，復(fù)合顆粒的約25.0％至15.0％。在一些實(shí)施方案中，該疏水性殼形成組分占復(fù)合顆粒的約22％至約18％，例如，占復(fù)合顆粒的約20.0％。復(fù)合顆?？梢詷?gòu)成通過干粉吸入器遞送的制劑或如下所述配制在加壓的液體推進(jìn)劑制劑中且通過mdi遞送的制劑的唯一內(nèi)含物?；蛘撸疚乃龅膹?fù)合顆?？梢孕纬蔀樗幬镏苿溥M(jìn)一步包含不可呼吸尺寸的藥學(xué)上可接受的賦形劑的干粉載體/稀釋劑顆粒。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，復(fù)合顆?？梢耘c合適的載體/稀釋劑物質(zhì)部分混合，該載體/稀釋劑物質(zhì)部分可以是無定形粉末、結(jié)晶粉末或無定形和結(jié)晶粉末的組合的形式。合適的載體/稀釋劑物質(zhì)包括：(a)碳水化合物，包括非還原糖，如二糖(例如，海藻糖、蔗糖等)；環(huán)糊精(例如，2-羥丙基-β-環(huán)糊精等)；和/或多糖(例如，菊糖、棉子糖、麥芽糊精、葡聚糖等)；環(huán)糊精(例如，2-羥丙基-β-環(huán)糊精)；(b)氨基酸(例如，甘氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、賴氨酸等)；(c)從有機(jī)酸和堿制備的有機(jī)鹽(例如，檸檬酸鈉、抗壞血酸鈉、葡糖酸鎂、葡糖酸鈉、胺丁三醇鹽酸鹽等)；(d)肽和蛋白質(zhì)(例如，阿司帕坦、人血清白蛋白、明膠，等)；和/或(e)糖醇(例如，甘露醇、木糖醇等)，單獨(dú)或以任何組合形式。乳糖作為本制劑中的載體/稀釋劑是不利的，因?yàn)樗c催產(chǎn)素反應(yīng)，通過在催產(chǎn)素的末端氨基上進(jìn)行的美拉德反應(yīng)，導(dǎo)致快速的雜質(zhì)形成。在一些實(shí)施方案中，載體/稀釋劑顆粒包含一種或多種糖醇、基本上由一種或多種糖醇組成或由一種或多種糖醇組成。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，載體/稀釋劑顆粒包含甘露醇、基本上由甘露醇組成或由甘露醇組成。載體/稀釋劑顆?？赏ㄟ^以下制備，例如，從較大顆粒研磨而形成，或可生成為合適定尺寸的顆粒，例如通過噴霧干燥。載體/稀釋劑顆粒通常為不可呼吸尺寸。在本發(fā)明的該方面，合適的載體/稀釋劑顆粒組合物(不含添加劑物質(zhì))具有的mmad大于(>)10微米尺寸。例如，載體/稀釋劑部分具有的mmad為大于10μm至約500μm，如>10μm至50μm、50μm-100μm、100μm-150μm。在一些其它實(shí)施方案中，載體部分的mmad為大于35μm至100μm。在本發(fā)明該方面的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，該藥物制劑進(jìn)一步包含添加劑物質(zhì)，其中所述添加劑物質(zhì)包括一種或多種硬脂酸鹽，如硬脂酸鈣、硬脂酸鎂，和/或一種或多種氨基酸，以任何組合。在一種或多種具體實(shí)施方案中，該添加劑物質(zhì)包括、基本上由以下組成、或由以下組成：硬脂酸鎂。在藥物制劑中加入添加劑物質(zhì)的實(shí)施方案中，添加劑通常為載體/稀釋劑部分的質(zhì)量的10％或更少。在這樣的實(shí)施方案中，添加劑物質(zhì)可以與載體/稀釋劑組合，并且一起形成載體/稀釋劑-添加劑共混物。例如，本發(fā)明該方面的共混物獨(dú)立地包括，例如，約99.75:0.25％w/w、約99.50:0.50％w/w、約99.25:0.75％w/w、約99.0:1.0％w/w、約98.75:1.25％w/w、約98.50:1.50％w/w、約98.25:1.75％w/w、約98.0:2.0％w/w、約97.75:2.25％w/w、約97.50:2.50％w/w、約97.25:2.75％w/w、約97.0:3.0％w/w、約96.75:3.25％w/w、約96.50:3.50％w/w、約96.25:3.75％w/w、約96.0:4.0％w/w、約95.75:4.25％w/w、約95.50:4.5％w/w、約95.25:4.75％w/w、約95.0:5.0％w/w、約94.75:5.25％w/w、約94.50:5.5％w/w、約94.25:5.75％w/w、約94.0:6.0％w/w、約93.75:6.25％w/w、約93.50:6.5％w/w、約93.25:6.75％w/w、93.0:7.0％w/w、約92.75:7.25％w/w、約92.50:7.5％w/w、約92.25:7.75％w/w、92.0:8.0％w/w、約91.75:8.25％w/w、約91.50:8.5％w/w、約91.25:8.75％w/w、91.0:9.0％w/w、約90.75:9.25％w/w、約90.50:9.5％w/w、約90.25:9.75％w/w、或90.0:10.0％w/w的載體/稀釋劑質(zhì)量：添加劑物質(zhì)質(zhì)量。添加劑物質(zhì)的顆?？蔀榭珊粑虿豢珊粑某叽绶秶?。在一些實(shí)施方案中，在與組合物的一種或多種其它組分顆粒(即，與載體/稀釋劑顆粒部分，或組合的載體/稀釋劑和復(fù)合顆粒，或與復(fù)合顆粒部分)混合之前，添加劑部分的顆粒具有的mmd為100μm或更少，例如，獨(dú)立地，95μm或更少、90μm或更少、85μm或更少、80μm或更少、75μm或更少、70μm或更少、60μm或更少、50μm或更少、40μm或更少、30μm或更少、20μm或更少、或10μm或更少。在其它實(shí)施方案中，所述添加劑物質(zhì)部分包括平均粒度(例如平均質(zhì)量直徑)獨(dú)立地為10μm或更少、例如、9μm或更少、8μm或更少、7μm或更少、6μm或更少、5μm或更少、4μm或更少、3μm或更少、2μm或更少、或1微米或更少的添加劑物質(zhì)顆粒。在藥物制劑包含復(fù)合顆粒、載體/稀釋劑載體顆粒和添加劑物質(zhì)的實(shí)施方案中，這些組分可以以任何合適的方式混合，其是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將會認(rèn)識到的。例如，添加劑物質(zhì)可以與載體/稀釋劑顆?；旌弦孕纬奢d體/稀釋劑-添加劑預(yù)混物。然后預(yù)混物可與含有治療活性多肽(例如催產(chǎn)素)的復(fù)合顆?；旌稀；蛘撸梢詫⑻砑觿┪镔|(zhì)與復(fù)合顆?；旌?，然后可將混合的復(fù)合顆粒-添加劑物質(zhì)與載體稀釋劑顆?；旌?。或者，復(fù)合顆粒、載體/稀釋劑顆粒和添加劑物質(zhì)可以同時(shí)混合。物質(zhì)的混合可以通過任何合適的方式進(jìn)行，包括高剪切研磨、機(jī)械融合、超離心研磨、噴射研磨、高壓勻化、球磨、攪拌珠磨、空氣噴射研磨、針磨(pinmilling)、錘磨或刀銑削、共振聲混合或其他合適的方法/機(jī)制。載體/稀釋劑物質(zhì)可以與添加劑物質(zhì)組合，例如可以共同噴霧干燥所述兩種物質(zhì)的一種或多種溶液或懸浮液原料以產(chǎn)生含有添加劑物質(zhì)的載體/稀釋劑顆粒?；旌蠌?qiáng)度，即干粉總質(zhì)量中復(fù)合顆粒的百分比與載體/稀釋劑部分(可以含有或不含有添加劑)的百分比可用于控制在單一吸入中遞送的催產(chǎn)素的劑量。混合強(qiáng)度將通過考慮以下因素來確定：如復(fù)合顆粒中催產(chǎn)素的百分比、實(shí)現(xiàn)給定劑量所需的復(fù)合顆粒的量以及給定劑量容器(例如泡罩或膠囊)的填充重量。因此，在將復(fù)合顆粒與載體/稀釋劑(具有或不具有添加劑物質(zhì))顆?；旌匣蚬不斓膶?shí)施方案中，含活性成分的部分(復(fù)合物)與含惰性物質(zhì)的部分(載體/稀釋劑(具有或不具有添加劑物質(zhì)))的比例可為.001：99.999至99.999。在本文所述的實(shí)施方案中，干粉藥物組合物中的復(fù)合顆粒的百分比可以獨(dú)立地占藥物組合物的例如大于(>)0.001％、>0.01％、>0.1％、>1.0％、>2.0％、>3％、>4％、>5.0％、>6％、>7％、>8％、>9％、>10％、>11％、>12％、>13％、>14％、>15％、>16％、>17％、>18％、>19％、>20％、>21％、>22％、>23％、>24％、>25％、>26％、>27％、>28％、>29％、>30％、>31％、>32％、>33％、>34％、>35％、>36％、>37％、>38％、>39％、>40％、>41％、>42％、>43％、>44％、>45％、>46％、>47％、>48％、>49％、>50％、>51％、>52％、>53％、>54％、>55％、>56％、>57％、>58％、>59％、>60％、>61％、>62％、>63％、>64％、>65％、>66％、>67％、>68％、>69％、>70％、>71％、>72％、>73％、>74％、>75％、>76％、>77％、>78％、>79％、>80％、>81％、>82％、>83％、>84％、>85％、>86％、>87％、>88％、>89％、>90％、>91％、>92％、>93％、>94％、>95％、>96％、>97％、>98％、或>99％。因此，在本發(fā)明一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供藥物制劑，包括：(a)多個(gè)復(fù)合顆粒，所述復(fù)合顆粒的每一個(gè)包括、由以下組成、或基本上由以下組成：(i)藥理學(xué)有效量的催產(chǎn)素，(ii)相對催產(chǎn)素的量，摩爾相等量或更大量的包括ca2+的二價(jià)陽離子物質(zhì),(iii)碳水化合物，所述碳水化合物包括海藻糖，和(iv)氨基酸，l-亮氨酸，其中所述復(fù)合顆粒具有的mmad為約5μm至約0.5μm,(b)不可呼吸尺寸的載體/稀釋劑顆粒，所述載體/稀釋劑顆粒包括甘露醇；和(c)混合量的硬脂酸鎂。在本發(fā)明另一方面，本發(fā)明提供制備用于藥物制劑的復(fù)合顆粒的方法，包括:(a)在藥學(xué)上可接受的液體中溶解和/或懸浮以下物質(zhì)以形成原料：(i)一定量的可逆的具有環(huán)的多肽(例如，加壓素或催產(chǎn)素)，(ii)相對可逆的具有環(huán)的多肽的量，摩爾相等量或更大量的二價(jià)陽離子物質(zhì)，(iii)氨基酸，和(iv)碳水化合物；和(2)從該原料去除液體以制備顆粒。其中所述顆粒具有的質(zhì)量中值空氣動力學(xué)直徑為約0.5μm至約7μm。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過噴霧干燥、冷凍干燥等來實(shí)現(xiàn)除去液體的步驟。本發(fā)明的另一方面是提供一種通過經(jīng)由肺全身遞送催產(chǎn)素從而治療可由催產(chǎn)素治療的病癥(例如，產(chǎn)后出血)的方法，包括以下步驟：(a)提供含有至少一劑量的藥物制劑的吸入器，其包含：大量干粉形式的復(fù)合顆粒，所述復(fù)合顆粒包括：催產(chǎn)素、相對所述催產(chǎn)素至少一摩爾當(dāng)量的二價(jià)陽離子、氨基酸和碳水化合物。(b)通過激活所述吸入器分散所述復(fù)合顆粒，(c)通過吸入將所述復(fù)合顆粒遞送到個(gè)體肺的肺泡區(qū)域以實(shí)現(xiàn)全身吸收。特別希望這種方法和組合物足夠方便以允許自我給藥，即使離開醫(yī)院或醫(yī)務(wù)人員，并且能夠以相對較少的吸入次數(shù)遞送期望的總劑量，所述吸入次數(shù)優(yōu)選少于10次，更優(yōu)選少于4次，甚至更優(yōu)選2次，最優(yōu)選1次吸入。通過參考說明書的其余部分和附圖，對本發(fā)明的性質(zhì)和優(yōu)點(diǎn)的進(jìn)一步理解將變得顯而易見。附圖簡述圖1是催產(chǎn)素從其半胱氨酸-半胱氨酸連接的(二硫鍵)環(huán)取向轉(zhuǎn)變?yōu)榫€性形式以形成催產(chǎn)素的α-二聚體和β-二聚體的可逆過程的示意圖。圖2是根據(jù)本發(fā)明方法的催產(chǎn)素的示意圖，其顯示相互作用的導(dǎo)致形成環(huán)結(jié)構(gòu)的半胱氨酸-半胱氨酸二硫鍵，和推測的二價(jià)陽離子的位置在固態(tài)時(shí)穩(wěn)定二硫鍵的功能。圖3是在強(qiáng)制降解研究中，繪制催產(chǎn)素降解物隨時(shí)間的％α二聚體(對應(yīng)每一測試天數(shù)的第二和第四條棒圖)和β二聚體(對應(yīng)每一測試天數(shù)的第三和第六條棒圖)，與本發(fā)明的藥物制劑(具有cacl2(對應(yīng)每一所示天數(shù)的第4-6條棒圖))和對照(沒有cacl2(對應(yīng)每一所示天數(shù)的第1-3條棒圖)相比較。圖4是繪制本發(fā)明的兩種藥物制劑的fpm(通過ngi)的圖示(n＝3+/-測量的單個(gè)值的最大值/最小值)，一種藥物制劑已經(jīng)與載體/稀釋劑顆粒共混，一種并未共混。圖5是比較散裝(冷凍干燥)催產(chǎn)素、不含二價(jià)陽離子物質(zhì)的噴霧干燥復(fù)合混合物和具有2％氯化鈣的相似混合物的總雜質(zhì)和含濕量的圖示。圖6是含有0％、1％、2％和4％二價(jià)陽離子的顆粒組合物的復(fù)合顆粒的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度的圖示。圖7是含有0％、1％、2％和4％二價(jià)陽離子物質(zhì)的顆粒組合物的復(fù)合顆粒的含濕量的圖示。圖8是含有0％、1％、2％和4％二價(jià)陽離子物質(zhì)的顆粒組合物的復(fù)合顆粒的粒度分布的圖示。圖9進(jìn)一步描述催產(chǎn)素分子，其中用點(diǎn)劃線圈出葡萄糖加合物的主要反應(yīng)點(diǎn)(nh2)，用虛線圓圈表示二聚體和三-硫化物反應(yīng)點(diǎn)(s-s)。圖10描繪催產(chǎn)素–葡萄糖加合物。圖11描繪催產(chǎn)素的α-二聚體。圖12描繪催產(chǎn)素的β-二聚體。圖13描繪催產(chǎn)素的三-硫化物降解物。圖14為總降解物含量百分比的圖示。圖15顯示二聚體含量。圖16顯示葡萄糖加合物含量。圖17表示三-硫化物降解物含量。本發(fā)明的具體實(shí)施方案的詳述在本申請中使用以下術(shù)語，并且意圖具有所示的含義。在用于顆粒生產(chǎn)的原料的情況下使用的“水性”將被理解為至少部分地由水構(gòu)成的液體，但可以包括其它與水可混溶的液體，例如作為共溶劑的液體，如醇(如乙醇、異丙醇)。無論如何，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，根據(jù)本發(fā)明的方法，水性液體必須適合于噴霧干燥?！案煞邸笔侵父鶕?jù)具體配方，通常含有小于約10％的水分，優(yōu)選小于約6％的水分，最優(yōu)選含有少于約3％的水分的粉末組合物?！胺勰笔侵杆鑫镔|(zhì)包括自由流動的顆粒，其尺寸被選擇為允許滲入肺的肺泡，優(yōu)選直徑小于10μm，優(yōu)選小于7μm，最優(yōu)選小于5μm，以及優(yōu)選直徑在5μm至0.5μm的范圍內(nèi)。本文所用的“細(xì)顆粒質(zhì)量”或“fpm”是指在ngi級聯(lián)碰撞的階段3、4和5中沉積的顆粒的質(zhì)量，其大致等于空氣動力學(xué)尺寸為約5μm至約1微米的顆粒，流速為每分鐘60升。根據(jù)ngi的產(chǎn)品說明書，第3階段收集空氣動力學(xué)尺寸為4.4μm至2.8μm的顆粒，第4階段收集2.8μm至1.7μm的顆粒，第5階段收集1.7μm至0.92μm的顆粒?！百|(zhì)量中值直徑”或“mmd”是顆粒平均幾何尺寸的量度，因?yàn)楸景l(fā)明的藥物組合物的復(fù)合顆粒可以是多分散的(即由一定范圍的粒度組成)，或者可能會破裂或附聚。通過激光衍射可以確定本文報(bào)道的mmd值，但可以使用任何數(shù)量的常用技術(shù)來測量平均粒度(例如電子顯微鏡、光散射、激光衍射)?？梢栽谂c載體/稀釋劑顆粒共混之前確定例如本文所述的復(fù)合顆粒的mmd值?！百|(zhì)量中值空氣動力學(xué)直徑”或“mmad”是分散顆粒的空氣動力學(xué)尺寸的量度。空氣動力學(xué)直徑用于描述霧化粉末的沉降行為，并且是在空氣中具有與顆粒相同沉降速度的單位密度球的直徑?？諝鈩恿W(xué)直徑包括顆粒形狀、顆粒的密度和物理尺寸。如本文所用，除非另有說明，mmad是指通過級聯(lián)碰撞(優(yōu)選地通過ngi)確定的霧化粉末的空氣動力學(xué)粒度分布的中點(diǎn)或中值。“下一代撞擊器(ngi)”是指一種級聯(lián)撞擊器，用于根據(jù)其沉積行為將氣霧顆粒分類成尺寸級分，其包含七個(gè)撞擊階段和最終的微孔收集器，并且其可從例如mspcorporation(shoreline，mn，usa)商購。撞擊器描述于例如美國專利6453758、65343301和6595368；英國專利gb2351155、gb2371001和gb2371247中，且其在吸入器中的應(yīng)用詳述于uspharmacopeia29：601，“aerosols，nasalsprays，metered-doseinhalers，anddrypowderinhalers”?！安豢珊粑叽纭笔侵妇哂写笥?0μm，例如大于約20μm，例如大于35μm，在一些實(shí)施方案中大于50μm的空氣動力學(xué)尺寸的顆粒。通常，在本申請中用作載體/稀釋劑物質(zhì)的這種不可呼吸的顆粒具有的mmad為15-500μm尺寸。“藥學(xué)上可接受的載體/稀釋劑”是指可任選地包括在本發(fā)明的組合物中，并且被攝入肺中，對受試者，特別是受試者的肺沒有顯著的不利的毒理作用的賦形劑顆粒。藥學(xué)上可接受的載體/稀釋劑可以包括一種或多種改善藥物制劑的化學(xué)或物理穩(wěn)定性的添加劑賦形劑物質(zhì)。載體/稀釋劑顆粒(具有或不具有添加劑)在本文中可以稱為“載體部分”或“載體/稀釋劑部分”?！八幚韺W(xué)有效量”或“生物活性劑的生理有效量”是在本文所述的可霧化組合物中存在的活性劑的量，當(dāng)這種組合物被肺部施用時(shí)其需要在待治療受試者的血液中提供所需水平的活性劑，以得到預(yù)期的生理反應(yīng)。精確的量將取決于許多因素，例如活性劑、組合物的活性、所用的遞送裝置、組合物的物理特性、預(yù)期的患者使用(即，每天施用的劑量數(shù))、患者考慮因素等等，并且可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員基于本文提供的信息容易地確定。所有這里提及的鹽包括無水形式和所有水合形式的鹽?？s寫:“％w/w”以重量計(jì)的含量百分比“a/a”面積/面積“cacl2”氯化鈣“ca2+”二價(jià)鈣陽離子“cs”化學(xué)穩(wěn)定性“dsc”差示掃描量熱法“fpf”細(xì)顆粒部分“hplc”高壓液相色譜法“im”肌內(nèi)“iu”國際單位“iv”靜脈內(nèi)(iv)“kf”karlfischer“mg2+”二價(jià)鎂陽離子“ngi”下一代撞擊器“t:l:o”以％w/w計(jì)的海藻糖:亮氨酸:催產(chǎn)素“t:l:c:o”以％w/w計(jì)的海藻糖:亮氨酸:cacl2:催產(chǎn)素“uv”紫外線吸收“μm”微米“wc”水含量多種本發(fā)明的實(shí)施方案的描述本發(fā)明涉及減少一些化學(xué)降解物的形成的方法，例如與可吸入粉末形式的具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽(如催產(chǎn)素)相關(guān)的二聚體降解產(chǎn)物、以及用于制備具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性的藥物組合物的方法、組合物本身、以及它們在治療中的用途。這種組合物還應(yīng)該是物理化學(xué)穩(wěn)定的，優(yōu)選由粉末制劑組成，其能夠耐受熱和/或濕氣保持適當(dāng)?shù)臅r(shí)間。催產(chǎn)素的主要降解途徑被充分證明，其為在催產(chǎn)素分子中形成胱氨酸官能團(tuán)的兩個(gè)半胱氨酸氨基酸的二硫鍵的熱刺激斷裂。如圖1所示，分子活性形式的催產(chǎn)素(最上面的化合物)在兩個(gè)半胱氨酸之間形成環(huán)結(jié)構(gòu)，這兩個(gè)半胱氨酸是序列中的第一和第六個(gè)氨基酸。然而，環(huán)是可斷裂的，并且一旦斷裂(如中間化合物所示)，該鍵可以重新形成為分子的活性形式(如頂部和中間化合物之間的可逆箭頭所示)，或作為當(dāng)前市售產(chǎn)品中的兩種主要降解物之一，即α-二聚體或β-二聚體(如圖1的底部所示)，當(dāng)這種鍵是與另一相鄰催產(chǎn)素分子的胱氨酸重新形成而不是在同一分子內(nèi)重新形成時(shí)，可形成兩種二聚體中的任一種。據(jù)信，活性形式的環(huán)結(jié)構(gòu)可以包含足夠的極性基團(tuán)，其適當(dāng)排列形成中心帶正電荷的原子周圍的復(fù)合物，并且這種帶正電荷的原子可能限制一旦二硫鍵斷裂催產(chǎn)素環(huán)結(jié)構(gòu)能夠打開的程度。這種排列如圖2所示，其描繪了位于環(huán)結(jié)構(gòu)內(nèi)的二價(jià)陽離子(例如ca2+，mg2+)。如果這種環(huán)結(jié)構(gòu)保持足夠長的時(shí)間，以使鍵在沒有環(huán)結(jié)構(gòu)打開的情況下重新組成，則分子的原始活性形式將被恢復(fù)。在溶液相中，由于所有組分都是可移動的，因此這個(gè)優(yōu)點(diǎn)可能很小；除了非常牢固的復(fù)合物之外的任何東西都是短暫的，并且還有時(shí)間打開環(huán)。然而，在金屬離子不能逸出復(fù)合物的固相基質(zhì)中，它將提供持久的環(huán)保持和穩(wěn)定的作用。如本文所述，本發(fā)明一方面提供增加具有二硫鍵-封閉的環(huán)的多肽固態(tài)組合物(例如，催產(chǎn)素)的物理化學(xué)穩(wěn)定性的方法(例如，通過減少二聚體降解物的量)，包括在固體-相中提供相對催產(chǎn)素的量至少摩爾相等量的二價(jià)陽離子。在一些實(shí)施方案中，二價(jià)陽離子物質(zhì)與多肽的摩爾比為1:1至50:1。在具體實(shí)施方案中，二價(jià)陽離子物質(zhì)與多肽的摩爾比為1:1至少于5:1。在該方法一些實(shí)施方案中，二價(jià)陽離子物質(zhì)提供，例如、ca2+、mg2+、fe2+、zn2+和/或cu2+，例如以合適的鹽形式。(例如cacl2等)。在該方法中，合適的碳水化合物(例如，海藻糖)和/或疏水氨基酸(例如，l-亮氨酸)可包含在所述固態(tài)組合物中，其在本文進(jìn)一步討論。因?yàn)榇弋a(chǎn)素與加壓素結(jié)構(gòu)類似，例如，精氨酸加壓素的氨基酸序列為cys-tyr-phe-gln-asn-cys-pro-arg-gly，其中半胱氨酸殘基形成二硫鍵。賴氨酸加壓素具有代替精氨酸的賴氨酸。本文的討論同樣適用于含有二硫橋接鍵的其它化合物。在本發(fā)明的另一方面，催產(chǎn)素存在于復(fù)合顆粒中，還包含摩爾相等量或更大量的二價(jià)陽離子物質(zhì)、至少一種氨基酸和至少一種碳水化合物賦形劑。認(rèn)為碳水化合物在復(fù)合顆粒中是有益的，不僅用作水替代物和結(jié)構(gòu)組分，而且還有助于增加環(huán)結(jié)構(gòu)重新形成的可能性(優(yōu)先于優(yōu)選二聚體形成)，并增加制劑的玻璃轉(zhuǎn)化溫度(tg)?？梢詼y量物理化學(xué)穩(wěn)定性，例如與不含這種二價(jià)陽離子的干粉制劑相比，α(α)-催產(chǎn)素二聚體和/或β(β)催產(chǎn)素二聚體形成量的減少。在具體實(shí)施方案中，該復(fù)合顆粒包含催產(chǎn)素；二價(jià)陽離子物質(zhì)，氯化鈣；氨基酸，l-亮氨酸；和碳水化合物，甘露醇。如本文所述，本發(fā)明的另一方面提供包含大量復(fù)合顆粒的藥物制劑，每個(gè)所述復(fù)合顆粒包含：催產(chǎn)素，相對所述催產(chǎn)素摩爾相等量或更大量的一種或多種二價(jià)陽離子物質(zhì)，氨基酸，和碳水化合物，其中所述顆粒具有的空氣動力學(xué)粒度為約5μm至0.5μm，且適合遞送至肺的肺泡區(qū)域。在本發(fā)明的各個(gè)方面的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，所選擇的賦形劑形成無定形玻璃基質(zhì)，催產(chǎn)素被分散其中，其基本上是非結(jié)晶的，或者沒有實(shí)質(zhì)的結(jié)晶區(qū)域或規(guī)則的重復(fù)結(jié)構(gòu)分子順序。在一些實(shí)施方案中，復(fù)合顆粒的氨基酸內(nèi)含物包括l-亮氨酸，并且l-亮氨酸占所述制劑的干組分的5-40％重量。更優(yōu)選地，l-亮氨酸將占復(fù)合顆粒的10至40％重量。如將理解的，霧化顆粒沉積在肺中，取決于空氣動力學(xué)因素，以及其它因素如密度、空氣流動速度和方向性等。在空氣動力學(xué)上，本發(fā)明的復(fù)合顆粒被設(shè)計(jì)成尺寸小于7μm，優(yōu)選小于5μm，但大于約0.5μm。因此，它們被設(shè)計(jì)成沉積在患者肺的肺泡區(qū)域中。因此，可以產(chǎn)生復(fù)合顆粒，其空氣動力學(xué)尺寸獨(dú)立地小于7μm，更優(yōu)選小于約6μm，例如獨(dú)立地為約5μm或更小，約4μm或更小，約3μm或更小，約2μm或更小或約1μm至約0.5μm。本發(fā)明的藥物組合物預(yù)期用于遞送至肺，并且將具有小于約7μm(例如約6μm至約0.5μm)的質(zhì)量中值空氣動力學(xué)直徑(mmad)。因此，這種復(fù)合顆粒的組合物可以具有以下mmad：獨(dú)立地小于約7μm，更優(yōu)選小于約6μm，例如獨(dú)立地為約5μm或更小，約4μm或更小，約3μm或更小，約2μm或更小或約1μm至約0.5μm。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選組合物將基本上不含滲透增強(qiáng)劑。“滲透增強(qiáng)劑”是促進(jìn)催產(chǎn)素(或其他藥物)通過粘膜或上皮滲透的表面活性化合物，并被提出用于鼻內(nèi)、直腸內(nèi)和陰道內(nèi)藥物制劑中。示例性的滲透增強(qiáng)劑包括膽汁鹽，例如?；悄懰猁}、甘膽酸鹽和脫氧膽酸鹽；夫西地酸鹽(fusidates)，例如?；敲摎浞蛭鞯厮猁}；和生物相容的洗滌劑，例如吐溫，月桂醇聚醚-9等。然而，在肺制劑中使用滲透促進(jìn)劑通常是不期望的，因?yàn)榉沃械纳掀ぱ浩琳峡墒艿竭@種表面活性化合物的不利影響。在催產(chǎn)素的情況下，認(rèn)為希望避免被設(shè)計(jì)為將催產(chǎn)素加速遞送至血液的物質(zhì)，因?yàn)榇弋a(chǎn)素相關(guān)的大多數(shù)副作用與cmax相關(guān)。催產(chǎn)素通常是無定形物質(zhì)。干粉催產(chǎn)素優(yōu)選通過在導(dǎo)致具有在上述范圍內(nèi)的粒度的基本無定形粉末的條件下噴霧干燥制備。用于形成包含所需尺寸范圍的顆粒的催產(chǎn)素粉末的優(yōu)選方法是噴霧干燥，其中將純的散裝乙酸催產(chǎn)素溶解在含有溶解的其它賦形劑的溶液中，使總?cè)芙夤腆w含量為5％w/w。如果需要，可以調(diào)節(jié)溶液的ph。然后可將溶液在諸如buchi、niro等的商業(yè)供應(yīng)商的常規(guī)噴霧干燥設(shè)備中進(jìn)行噴霧干燥，得到基本無定形的顆粒產(chǎn)物。本發(fā)明的催產(chǎn)素粉末可以任選地與適用于呼吸給藥和肺部給藥的藥物載體或賦形劑組合。當(dāng)期望減少遞送給患者的粉末中的催產(chǎn)素濃度時(shí)，這樣的載體可以簡單地用作填充劑，但也可用于增強(qiáng)催產(chǎn)素組合物的穩(wěn)定性并改善粉末在粉末分散裝置中的分散性，以提供催產(chǎn)素的更有效和可再現(xiàn)的遞送，并改善催產(chǎn)素的處理特性，例如流動性和一致性，以促進(jìn)制造和粉末填充。合適的載體/稀釋劑物質(zhì)可以是無定形粉末、結(jié)晶粉末或無定形粉末和結(jié)晶粉末的組合的形式。合適的物質(zhì)包括碳水化合物、非還原糖，如二糖，如海藻糖、蔗糖等；環(huán)糊精，如2-羥丙基-β-環(huán)糊精；和多糖，如棉子糖，麥芽糊精，葡聚糖等；(b)氨基酸，如甘氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、賴氨酸等；(c)從有機(jī)酸和堿制備的有機(jī)鹽，如檸檬酸鈉、抗壞血酸鈉、葡糖酸鎂、葡糖酸鈉、胺丁三醇鹽酸鹽等；(d)肽和蛋白質(zhì)，如阿司帕坦、人血清白蛋白、明膠，等；(e)糖醇，如甘露醇、木糖醇等。在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，所述載體/稀釋劑顆粒包括糖醇，(例如，甘露醇)。乳糖作為本制劑中的載體/稀釋劑是不利的，因?yàn)樗c催產(chǎn)素反應(yīng)，導(dǎo)致快速的雜質(zhì)形成。載體可以單獨(dú)制備成干粉形式并通過共混與干粉催產(chǎn)素組合。單獨(dú)制備的粉末載體通常是結(jié)晶的(以避免吸水)，但在一些情況下可能是無定形的或結(jié)晶物和無定形物的混合物?？梢赃x擇載體顆粒的尺寸以改善所述大量復(fù)合顆粒的流動性；通常這種載體顆粒在25μm至200μm的范圍內(nèi)。在該尺寸范圍內(nèi)的載體顆粒通常不會滲入肺的肺泡區(qū)域，并且在吸入之前通常會與遞送裝置中的催產(chǎn)素分離。因此，滲入肺的肺泡區(qū)域的顆粒將基本上由以下組成：選擇的活性藥物成分(例如催產(chǎn)素)、化學(xué)穩(wěn)定化量的二價(jià)陽離子(其以相對催產(chǎn)素摩爾相等量或更大量存在)、以及氨基酸和碳水化合物。優(yōu)選的載體/稀釋劑物質(zhì)是尺寸在上述范圍內(nèi)的結(jié)晶甘露醇。在另外的實(shí)施方案中，將載體/稀釋劑顆粒與添加劑物質(zhì)(例如硬脂酸鎂)混合。在一些實(shí)施方案中，包含載體/稀釋劑部分的顆粒具有不可呼吸的尺寸。這樣的載體/稀釋劑部分可以在受控的尺寸范圍內(nèi)形成，以便賦予藥物制劑所需的特性或?qū)傩?。例如，稀釋?載體部分可以包括空氣動力學(xué)尺寸在下限和上限之間的顆粒。合適的范圍可以獨(dú)立地選擇，例如，在以下范圍內(nèi)：大于(>)10μm至500μm、>10μm至400μm、>10μm至300μm、>10μm至200μm、>10μm至100μm、>10μm至50μm、20μm至500μm、20μm至400μm、20μm至300μm、20μm至200μm、20μm至100μm、20μm至50μm、30μm至500μm、30μm至400μm、30μm至300μm、30μm至100μm、30μm至50μm、35μm至500μm；35μm至400μm、35μm至300μm、35μm至200μm、35μm至100μm、35μm至50μm、40μm至500μm；40μm至400μm、40μm至300μm、40μm至200μm、40μm至100μm；40μm至50μm、45μm至500μm；45μm至400μm、45μm至300μm、45μm至200μm、45μm至100μm；45μm至50μm、50μm至500μm、50μm至400μm、50μm至300μm、50μm至200μm、50μm至100μm；60μm至500μm、60μm至400μm、60μm至300μm、60μm至200μm、60μm至100μm；75μm至500μm、75μm至400μm、75μm至300μm、75μm至200μm、75μm至100μm；100μm至500μm、100μm至400μm、100μm至300μm、100μm至200μm、150μm至500μm、150μm至400μm、150μm至300μm、150μm至200μm、200μm至500μm、200μm至400μm、and200μm至300μm、250μm至500μm、250μm至400μm、and250μm至300μm、300μm至500μm、300μm至400μm、350μm至500μm、350μm至400μm、和400μm至500μm，和在前述各個(gè)范圍子集之間的適當(dāng)范圍。如上所述，本發(fā)明的含催產(chǎn)素的藥物制劑優(yōu)選地被布置成使得每個(gè)吸入劑量等于靜脈內(nèi)或肌肉內(nèi)可實(shí)現(xiàn)的血液水平。因此，催產(chǎn)素配制成以單次吸入劑量遞送，全身暴露量相當(dāng)于10iu(～20mcg)催產(chǎn)素肌內(nèi)注射產(chǎn)品。在本申請的多個(gè)方面，給定劑量中遞送或包含的活性的含封閉環(huán)的多肽的量取決于多種因素，如肽的全身生物利用度、遞送到肺內(nèi)的所需區(qū)域的吸入復(fù)合顆粒的標(biāo)稱劑量的百分比、以及給定劑量容器(例如，膠囊、泡罩、定量容器等)的填充重量，所有這些可以由普通技術(shù)人員確定。在替代實(shí)施方案中，施用可以是每天一次，或每天幾次，例如2、3、4或8次，每次給予例如1或更多劑量，以實(shí)現(xiàn)期望的血液水平。根據(jù)規(guī)格，遞送劑量的給藥時(shí)間優(yōu)選小于2分鐘，通常小于30秒，優(yōu)選小于20秒。藥物制劑可以通過干粉吸入器以干粉形式存在，或者配制成在合適的加壓液體推進(jìn)劑中的懸浮液并通過定量吸入器遞送。遞送裝置：干粉吸入器包含本文所述的大量復(fù)合顆粒的藥物組合物可以定量為單個(gè)劑量，并以多種方式遞送，本發(fā)明的另外方面涉及遞送定量的本發(fā)明組合物的劑型和吸入器。在這些方面，本發(fā)明的組合物是可從干粉吸入器遞送的干粉組合物的形式，或作為從加壓的定量吸入器遞送的加壓液體推進(jìn)劑懸浮液制劑。因此，在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及適于通過作為干粉吸入給藥于患者的劑型。在本發(fā)明的一個(gè)方面，我們提供了一種含有一種或多種預(yù)計(jì)量劑量的本發(fā)明組合物的干粉吸入器?！案煞畚肫鳌被颉癲pi”是指一種裝置，其含有一種或多種劑量的干粉形式的本發(fā)明藥物組合物、將一劑量干粉暴露于空氣流中的機(jī)械裝置、以及管口形式的出口，使用者可以通過該出口吸入，以將暴露劑量的藥物組合物夾帶在氣流中并進(jìn)入肺的目標(biāo)區(qū)域。本發(fā)明的藥物組合物可以包含在含有預(yù)定量的藥物組合物的劑量容器內(nèi)。在一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，劑量容器可以是膠囊或藥筒。例如，膠囊可以包括羥丙基甲基纖維素、明膠或塑料等。在一些實(shí)施方案中，膠囊將具有粉末容量，例如每個(gè)膠囊約50mg或更少；例如40mg或更少；35mg或更少；30mg或更少；25mg或更少，或每個(gè)膠囊20mg或更少，或其他合適的量。膠囊被填充的程度符合與劑量容器(例如膠囊、泡罩或定量容器)的總內(nèi)部體積相關(guān)的公式，可為性能相關(guān)的，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定的。在單位劑量吸入器中，膠囊/藥筒(每個(gè)膠囊/藥筒一個(gè)劑量)通常被裝載到吸入裝置中，通常由患者按需裝載。該裝置具有破裂、刺穿或以其他打開膠囊的方式，使得當(dāng)劑量在裝置管口處吸入時(shí)能夠被夾帶到患者的肺中。作為這樣的設(shè)備的市售例子，可以提及glaxosmithkline的rotahalertm(例如在us4353365中描述)，boehringeringelheim的handihalertm或novartis的breezhalertm。含有本文所述的藥物組合物的多劑量干粉形式可以采用多種不同的形式。例如，多劑量可以包括一系列密封的泡罩，其中組合物密封地包含在泡罩袋中，并且被布置為盤形或細(xì)長條。使用這種多劑量形式的代表性吸入裝置包括以下裝置：由glaxosmithkline銷售的諸如diskhalertm、diskustm和elliptatm吸入器。例如在us4,627,432和us4,811,731中描述了diskhalertm。例如，在us5,873,360(gb2242134a)中描述了diskustm吸入裝置。例如，在us8,511,304、us8,161,968和8,746,242中描述了ellipta吸入器。再次，劑量容器(泡罩等)可以是可破裂的、可剝離的或以其他方式可開啟的，一次一個(gè)，并且一劑干粉組合物通過在吸入裝置的管口吸氣而給藥，如本領(lǐng)域已知。或者，本發(fā)明的組合物可以經(jīng)由基于干粉儲存器的裝置內(nèi)計(jì)量的干粉吸入器施用，其中本發(fā)明的藥物組合物以散裝的形式提供在吸入器的儲存器中。吸入器包括計(jì)量機(jī)構(gòu)，用于從儲存器計(jì)量出單個(gè)劑量的組合物，所述儲存器暴露于吸入通道，其中計(jì)量的劑量能夠被在裝置的管嘴處吸氣的患者吸入。這種類型的市售設(shè)備是astrazeneca的turbuhalertm、schering的twisthalertm和innovata的clickhalertm。除了從被動設(shè)備遞送之外，本發(fā)明的組合物可以從主動設(shè)備(activedevice)遞送，其用來遞送和解聚組合物的劑量的能量并非來自患者的吸氣作用導(dǎo)出的能量。藥物組合物可以基本上由本文所述的干粉形式的復(fù)合顆粒組成?；蛘撸幬锝M合物可以包含可與載體/稀釋劑顆粒例如甘露醇混合的復(fù)合顆粒，有或沒有其它賦形劑物質(zhì)(即，添加劑)如潤滑劑，還包含氨基酸或其它被指明在這樣的載體/稀釋劑制劑中具有有益性質(zhì)的賦形劑，它們組合形成微細(xì)粉末。在本發(fā)明一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的干粉組合物具有的含濕量為低于約10％重量的水，如含濕量為約9％重量或更低；如約9％重量、8％重量、7％重量、6％重量、5％重量、4％重量、3％重量、2％重量、或1％重量或更低的水。在一個(gè)或多個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，該干粉藥物組合物具有的含濕量為低于約3％重量的水，如1％重量或更低。含濕量可以通過任何合適的技術(shù)來確定，例如體積滴定和/或庫侖滴定(例如karlfisher滴定)。在各種實(shí)施方案中，dpi劑型(例如膠囊或泡罩)、或含有藥物制劑的dpi整體，也可以與其它構(gòu)造物結(jié)合使用，例如但不限于用于儲存和容納dpi或劑型的外包裝，其具有或不具有干燥劑物質(zhì)或含濕量控制物質(zhì)，該干燥劑物質(zhì)或含濕量控制物質(zhì)可以作為小袋包含在其中，或與所選擇的物質(zhì)成一體(即，所選擇的物質(zhì)具有干燥劑特性)。遞送裝置：定量吸入器在本發(fā)明的另一方面，本文所述的藥物組合物可以配制在合適的液體加壓液體推進(jìn)劑中，用于計(jì)量劑量(mdi)?！岸课肫鳌被颉癿di”是指包括罐、覆蓋罐的固定蓋和位于蓋中的制劑計(jì)量閥的單元。mdi系統(tǒng)包括合適的引導(dǎo)裝置。合適的引導(dǎo)裝置包括例如閥致動器和圓柱形或錐形通道，通過它們，藥物可以經(jīng)由計(jì)量閥(例如管口致動器)被從填充的罐輸送到患者的鼻子或口中。本文詳述的藥物組合物可以制備成于用于mdi的液化推進(jìn)劑中的懸浮顆粒。因此，本發(fā)明的另外方面提供了含有本文所述的藥物制劑的定量吸入器以及其中使用的液體推進(jìn)劑藥物制劑本身。這樣的吸入器可以是通常包括用閥(例如計(jì)量閥)封閉的罐(例如鋁罐)的定量吸入器(mdi)的形式，并且該罐安裝到致動器上，具有管口，并且填充有含有本文所述的藥物組合物的液體加壓液體推進(jìn)劑制劑。合適裝置的實(shí)例包括定量吸入器，如(gsk)如(chiesi)、skyefinetm和skyedrytm(skyepharma)。當(dāng)配制用于定量吸入器時(shí)，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物被配制為于加壓液體推進(jìn)劑中的懸浮液。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，盡管在mdi中使用的推進(jìn)劑可以是cfc-11和/或cfc-12，但優(yōu)選推進(jìn)劑是臭氧友好的、非cfc推進(jìn)劑，例如1,1,1,2-四氟乙烷(hfc134a)、1,1,1,2,3,3,3-七氟正丙烷(hfc-227)、hcfc-22(二氟氯甲烷)、hfa-152(二氟乙烷和異丁烯)，單獨(dú)或以任何組合的形式。這樣的制劑可以僅由推進(jìn)劑和本文所述的復(fù)合顆粒組成，或者還可以包括一種或多種表面活性劑物質(zhì)，例如聚乙二醇、二甘醇單乙醚、聚氧乙烯脫水山梨醇單月桂酸酯、聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯、丙氧基化聚乙二醇和聚氧乙烯月桂基醚、油酸、卵磷脂或低聚乳酸衍生物，例如如wo94/21229和wo98/34596中所述，用于將組合物懸浮在其中，并且還可以包括增溶劑(共溶劑可以包括例如乙醇)、制劑的潤濕和乳化組分和/或用于潤滑mdi的閥組分，以提高溶解度，或改善味道。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，罐的金屬內(nèi)表面涂覆有氟聚合物，更優(yōu)選與非氟聚合物共混。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，罐的金屬內(nèi)表面涂覆有聚四氟乙烯(ptfe)和聚醚砜(pes)的聚合物共混物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，罐的整個(gè)金屬內(nèi)表面涂覆有聚四氟乙烯(ptfe)和聚醚砜(pes)的聚合物共混物。計(jì)量閥被設(shè)計(jì)成每次致動遞送計(jì)量的制劑，并且包括墊圈以防止推進(jìn)劑通過閥的泄漏。墊圈可以包括任何合適的彈性體物質(zhì)，例如低密度聚乙烯，氯丁基，溴丁基，epdm，黑色和白色丁二烯-丙烯腈橡膠，丁基橡膠和氯丁橡膠。合適的閥可以從氣霧劑工業(yè)中眾所周知的制造商商購獲得，例如來自valois，法國(例如df10、df30、df60)、bespakplc、uk(例如bk300、bk357)和3m-neotechnicltd，uk(例如spraymisertm)。在各種實(shí)施方案中，mdi還可以與其它構(gòu)造物結(jié)合使用，例如但不限于用于儲存和容納mdi的包裝，包括美國專利號6,119,853；6,179,118；6,315,112；6,352,152；6,390,291；和6,679,374中所述的那些，以及劑量計(jì)數(shù)器單元，例如但不限于美國專利6,360,739和6,431,168中所述的那些。用于藥物氣霧劑制造領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的常規(guī)批量制造方法和機(jī)器可用于制備用于商業(yè)生產(chǎn)填充罐的大規(guī)模批料。因此，例如，在用于制備懸浮氣霧劑制劑的一種批量制造方法中，將計(jì)量閥壓接到鋁罐上以形成空罐。將顆粒藥物加入到加料容器中，并將液化推進(jìn)劑與任選的賦形劑一起通過加料容器加壓填充到制造容器中。藥物懸浮液在再循環(huán)之前混合到填充機(jī)中，然后將藥物懸浮液的一等分試樣通過計(jì)量閥填充到罐中。在制備溶液氣霧劑制劑的一個(gè)示例性批量制造方法中，將計(jì)量閥壓接到鋁罐上以形成空罐。液化的推進(jìn)劑與任選的賦形劑和溶解的藥物一起通過加料容器加壓填充到制造容器中。在替代方法中，將液化制劑的一等分試樣在足夠冷的條件下加入到敞口的罐中，以確保制劑不蒸發(fā)，然后將計(jì)量閥壓接到罐上。通常，在制備用于藥物用途的批次中，每個(gè)填充的罐被檢查稱重，用批號編碼，并且在出廠試驗(yàn)之前被包裝成貨盤用于儲存。本發(fā)明的制劑可以通過例如在超聲處理或高剪切混合器的幫助下，在合適的容器中將藥物制劑的復(fù)合顆粒分散在選定的推進(jìn)劑中來制備，在有或沒有其它組分的情況下。該方法期望在受控的濕度條件下進(jìn)行。根據(jù)本發(fā)明的氣霧劑制劑的化學(xué)和物理穩(wěn)定性和藥物可接受性可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的技術(shù)來確定。因此，例如，組分的化學(xué)穩(wěn)定性可以通過hplc測試來確定，例如，在產(chǎn)品的長期儲存之后確定。物理穩(wěn)定性數(shù)據(jù)可以從其它常規(guī)分析技術(shù)獲得，例如通過泄漏測試，通過閥遞送測定(每次致動的平均噴射重量)，通過劑量再現(xiàn)性測試(每次致動的活性成分)和噴霧分布分析來獲得。根據(jù)本發(fā)明的懸浮氣霧劑制劑的穩(wěn)定性可以通過常規(guī)技術(shù)測量，例如通過使用背向光散射儀測量絮凝尺寸分布，或通過用ngi測量粒度分布或其他級聯(lián)碰撞分析方法來測量。mdi罐通常包括能夠承受所使用的推進(jìn)劑的蒸氣壓的容器，例如塑料或塑料涂覆的玻璃瓶或優(yōu)選金屬罐，例如鋁或其合金，其可任選地被陽極化處理、漆涂覆和/或塑料涂覆(例如通過參考wo96/32099并入本文，其中部分或全部內(nèi)表面涂覆有一種或多種碳氟聚合物，任選地與一種或多種非碳氟聚合物組合)，該容器用計(jì)量閥封閉。所述蓋可以通過超聲波焊接、螺絲配合或壓接固定在罐上。本文教導(dǎo)的mdi可以通過本領(lǐng)域的方法制備(例如參見byron，上文和wo96/32099)。優(yōu)選地，罐裝配有蓋組件，其中藥物計(jì)量閥位于蓋中，并且所述蓋被原位壓接。因此，作為本發(fā)明的另一方面提供一種藥物氣霧劑制劑，其包含一定量的如前所述的復(fù)合顆粒，以及作為推進(jìn)劑的碳氟化合物或含氫氯氟烴，任選與表面活性劑和/或共溶劑組合。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，其提供了一種藥物氣霧劑制劑，其中推進(jìn)劑選自1,1,1,2-四氟乙烷，1,1,1,2,3,3,3-七氟正丙烷及其混合物。本發(fā)明的制劑可以通過加入合適的緩沖劑來緩沖。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及適于經(jīng)由定量吸入器通過吸入給予患者的劑型。在懸浮氣霧劑制劑的情況下，催產(chǎn)素復(fù)合顆粒的粒度應(yīng)當(dāng)例如允許在給予氣霧劑制劑時(shí)將基本上所有的藥物吸入肺中，因此理想的小于10μm，特別是在從7μm，例如0.5至5μm，例如約1至約3μm的范圍。通過說明而非限制的方式提供以下實(shí)施例。實(shí)驗(yàn)i物質(zhì)和方法物質(zhì)表1中列出使用的物質(zhì)表1：物質(zhì)可以通過首先產(chǎn)生噴霧干燥用原料溶液來制備噴霧干燥的顆粒，其中：(1)稱量配方量的賦形劑；(2)將一部分純凈水加入到賦形劑中，并攪拌溶解；(3)催乳素按照配方稱重，并加到賦形劑溶液的表面并使其溶解；(4)加入余量的純凈水達(dá)到規(guī)定的總重量；和(5)通過滴加乙酸來調(diào)節(jié)溶液的ph至目標(biāo)ph4。所述制劑詳述于表2。表2：噴霧干燥制劑樣品1(對照)樣品2催產(chǎn)素(％w/w)55催產(chǎn)素所需量(g)0.27900.2790海藻糖(％w/w)74.9373.42海藻糖所需量(g)4.14044.0299亮氨酸(％w/w)2020亮氨酸所需量(g)1.0001.000cacl2(％w/w)n/a1.51cacl2所需量(g)n/a0.100噴霧干燥使用sdmicro(geaniro)制備噴霧干燥的制劑。使用表3中的噴霧干燥參數(shù)。表3：噴霧干燥參數(shù)參數(shù)設(shè)置干燥氣體流速(kg/hr)30霧化氣體流速(kg/hr)5入口溫度(℃)150出口溫度(℃)70溶液進(jìn)料速率(g/min)控制以靶向出口溫度(約12.5g/min)二次干燥制備用于二次干燥的批次，其通過取下蓋子并用不掉毛的清潔布代替，該清潔布用扎帶扎在瓶子的頸部周圍以原位固定。二次干燥在gallenkamp真空烘箱中完成(環(huán)境溫度下)。使用e2m5edwards真空泵(assetpmp163070)和buchi真空控制器(biomax65766)以設(shè)置低于5mbar的真空。在所記錄的時(shí)間中將該批次在真空下保持。載體/稀釋劑-添加劑預(yù)混物的制備：將99.0g甘露糖醇(mmad為60μm，其中10％的顆粒小于10％μm)與1.0g硬脂酸鎂(mgst)混合，以產(chǎn)生99％載體/稀釋劑:1％添加劑物質(zhì)的混合物。將其置于配有刀片的qmm摻合機(jī)中并暴露于高剪切共混(例如在600rpm下10分鐘)以獲得組分的良好混合。干粉混合制劑將8g載體/稀釋劑-添加劑預(yù)混物與2g復(fù)合顆?；旌弦孕纬?0/20w/w％共混物，如下：使用以下方法進(jìn)行turbula混合：(1)將所需量的噴霧干燥復(fù)合顆粒制劑稱取到20ml容器中；(2)稱量所需量的預(yù)混合物(1％mgst在甘露醇中，之前在qmm(高剪切混合機(jī))上制造；(3)將預(yù)混合物加入容器中；(4)手動翻滾30秒；(5)固定容器；(6)使用紙巾將容器放入turbula混合器罐中，所述紙巾用于鋪墊罐子；(7)以42rpm混合30分鐘。分析測試1.通過hplc測量化學(xué)穩(wěn)定性：催產(chǎn)素藥物相關(guān)的雜質(zhì)含量將一定量樣品1(對照物質(zhì))和樣品2(含有1.5％cacl2)(二者均含有混合的載體/稀釋劑與添加劑物質(zhì))置于敞口的玻璃小瓶中，然后將小瓶在加速條件(40℃/20％相對濕度(rh))放置。使用反相高效液相色譜定期檢查部分樣品物質(zhì)，以確定α-催產(chǎn)素二聚體和β-催產(chǎn)素二聚體含量。藥物相關(guān)雜質(zhì)含量的測定方法采用反相梯度hplc法，使用表4所示的條件進(jìn)行。表4.色譜條件該hplc研究的結(jié)果示于圖3?？梢钥闯?，在對照樣品(樣品1)中，α-催產(chǎn)素二聚體和β-催產(chǎn)素二聚體二者的形成明顯大于樣品2。通常，在對照樣品中，到第7天由hpla確定的α-催產(chǎn)素二聚體和β-催產(chǎn)素二聚體二者的量相對于總肽含量超過了總肽含量的0.5％。在第0天和第21天之間，對照樣品中這些雜質(zhì)的百分比翻了一倍，并且從第0天到第87天大約為四倍。相比之下，含有二價(jià)二聚體物質(zhì)的樣品2在87天穩(wěn)定性研究中，維持低水平(～0.5％或更低)的α-催產(chǎn)素二聚體和β-催產(chǎn)素二聚體。2.ngi測定的細(xì)顆粒質(zhì)量通過與上述類似的方法制備噴霧干燥的復(fù)合顆粒，但不含cacl2。使所述顆粒的一部分與載體/稀釋劑顆粒+添加劑物質(zhì)(甘露醇+硬脂酸鎂)共混，并且一部分噴霧干燥的物質(zhì)未共混(即缺乏載體/稀釋劑+添加劑的樣品)。然后使用以60l/min運(yùn)行的ngi對所述每部分物質(zhì)樣品進(jìn)行fpm分析。這種測試的結(jié)果如圖4所示。這些結(jié)果表明，當(dāng)在30、90和180天比較，fpm(即以60升/分鐘運(yùn)行的ngi的階段3、4和5)在6個(gè)月的時(shí)間內(nèi)保持相對穩(wěn)定。3.使用karlfisher滴定測定的含濕量圖5顯示了散裝催產(chǎn)素、不含二價(jià)陽離子物質(zhì)的噴霧干燥復(fù)合共混物、以及具有2％氯化鈣的類似復(fù)合物的總雜質(zhì)和含水量。這些結(jié)果表明，盡管在初始、25℃/60％rh和45℃/70％rh條件下兩種共混物中的含濕量幾乎相同，但與同樣在25℃/60％rh和45℃/70％rh的對照共混物相比，在含1.5％氯化鈣的復(fù)合物中雜質(zhì)降低。實(shí)驗(yàn)ii研究了復(fù)合顆粒中二價(jià)陽離子物質(zhì)(例如cacl2)的存在對催產(chǎn)素組分隨時(shí)間的整體穩(wěn)定性的影響。制備含各種量(0至4％w/w)的二價(jià)陽離子物質(zhì)(cacl2)催產(chǎn)素，然后分析復(fù)合顆粒樣品的催產(chǎn)素化學(xué)降解。在這些實(shí)施例中，添加一定量的提供二價(jià)陽離子的成分(cacl2)伴隨著噴霧干燥物質(zhì)中碳水化合物組分(海藻糖)的量的相應(yīng)減少。材料和設(shè)備:表5步驟1：制備制劑使用procept4m8-trix噴霧干燥器(proceptnv，zelzate，belgium)制造，各自具有相同的噴霧干燥條件。改變加入到原料溶液中的cacl2的量。使用來自以前實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)的數(shù)據(jù)，試驗(yàn)使用如表6所示的最干燥制劑的可變參數(shù)。這些制劑的其他恒定參數(shù)包括：原料固體含量＝5％，ph＝4.0，旋風(fēng)空氣速率＝0.15m3.min-1，噴嘴直徑＝0.4mm。表6.制備后，將收集容器直接移動到低濕度環(huán)境(<20％rh)并密封。將樣品在5℃下保存在密封瓶中，然后分析或轉(zhuǎn)移到進(jìn)行穩(wěn)定性測試的小瓶中。步驟2：分析制備后，通過karlfischer(kf)立即分析每種制劑的含濕量。通過差示掃描量熱法(dsc)測定玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(tg)。測定粒度分布(mastersizer)和降解物含量(通過高壓液相色譜(hplc)，如上文在實(shí)驗(yàn)i的討論中所述的那樣)(如下表9所述)。將所有制劑分配到小瓶中，所述小瓶保持在加速和標(biāo)準(zhǔn)溫度條件下2周、1個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月，如下所詳述。穩(wěn)定性方案所使用的穩(wěn)定性方案如下所示，且基于在50℃和25℃和40℃溫度下的加速穩(wěn)定性測量結(jié)果，反映了ich指南值：將樣品儲存在2-8℃的冰箱中，且在密封(封閉)條件下，在25℃和40℃的控制烘箱中；將樣品在環(huán)境濕度(約10％rh)的非密封(敞口)容器中的50℃烘箱中儲存；在下表7中的時(shí)間表規(guī)定的時(shí)間點(diǎn)分析樣品中的催產(chǎn)素和相關(guān)物質(zhì)含量。表7.穩(wěn)定性方案1待分析。結(jié)果物理分析(緊接制備后)在制備后立即對所有制劑的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度、含濕量和粒度分布進(jìn)行分析，以確保樣品間變化最小。圖6(tg)、圖7(含濕量)和圖8(粒度分布)中的圖顯示了參數(shù)結(jié)果，表明在所有cacl2濃度無顯著變化，如下表8所示：表8.物理分析數(shù)據(jù)化學(xué)穩(wěn)定性使用uv-hplc測定法分析制劑的降解，在下列表9所示的條件下操作。表9色譜條件在緊接制備后，在50℃/環(huán)境濕度下儲存兩周后、在50℃/環(huán)境濕度下儲存1個(gè)月后和在40℃在熱封的干燥袋中在密封的小瓶中儲存3個(gè)月后，進(jìn)行hplc分析，如表7所示。對總降解物含量的貢獻(xiàn)最顯著的降解物是(α和β)二聚體、三-硫化物和葡萄糖相關(guān)的加合物，其描述在圖9-13中。在這些圖中，圖9描繪了催產(chǎn)素分子，其中葡萄糖加合物的主要反應(yīng)點(diǎn)(nh2)用點(diǎn)劃線圈出(葡萄糖被認(rèn)為是實(shí)驗(yàn)中使用的海藻糖中的雜質(zhì))，二聚體和三-硫化物反應(yīng)點(diǎn)(s-s)以虛線圈出。圖10是催產(chǎn)素-葡萄糖加合物的描述。圖11描繪了α-二聚體。圖12是β-二聚體的描述。圖13描繪了催產(chǎn)素三-硫化物降解物。穩(wěn)定性測定的結(jié)果總結(jié)在圖14-17中，其代表下表10中列出的數(shù)據(jù)。圖14顯示了總降解物含量百分比。圖15顯示二聚體含量。圖16顯示葡萄糖加合物含量。最后，圖17表示三-硫化物降解物含量?？偨到馕锖亢妥铒@著降解物的總體趨勢(參見表10和圖14-17)是在所有穩(wěn)定條件下和所有時(shí)間點(diǎn)當(dāng)在制劑中包含cacl2時(shí)，它們的形成減少。這通過以下顯示：在含有％w/w或0.02％w/wcacl2的制劑中發(fā)生了最高百分比降解，和在含有2％w/w和4％w/wcacl2的制劑發(fā)生最低降解物形成。在50℃和環(huán)境濕度下存儲1個(gè)月的樣品中觀察到總降解物含量和二聚體含量的最顯著差異。然而，三-硫化物和葡萄糖加合物含量在50℃下2周至在50℃下1個(gè)月的儲存期間未顯示顯著增加。1％w/w或更大的cacl2含量似乎顯著降低了所有這些降解物的形成。這些結(jié)果表明，在研究的制劑中包含二價(jià)陽離子物質(zhì)(例如cacl2)導(dǎo)致催產(chǎn)素二聚體形成的減少。在加速穩(wěn)定性研究中，在50℃和環(huán)境濕度下保存1個(gè)月，1％w/wcacl2含量或更高含量能夠?qū)⒍垠w形成降低到不超過零，這可能有助于為最小cacl2含量設(shè)定制劑規(guī)格。除了二聚體形成的減少之外，包含cacl2也可以減少三-硫化物降解物和葡萄糖相關(guān)的加合物降解物的形成。雖然不希望受到任何特定科學(xué)理論的約束，但這些結(jié)果表明ca2+離子的存在會干擾這兩種降解物的形成。三-硫化物降解物減少可以通過與二聚體形成的減少相同的機(jī)理來解釋。如果ca2+離子穩(wěn)定催產(chǎn)素環(huán)，則形成三-硫化物所需的二硫鍵的斷裂將被破壞。此外，三-硫化物可以由二聚體的不完全分裂形成，因此如果形成較少的二聚體，則預(yù)期形成較少的三-硫化物降解物。最后，葡萄糖加合物形成的減少可以通過以下事實(shí)來解釋：ca2+離子在催產(chǎn)素環(huán)附近的存在可能在構(gòu)象上削弱催產(chǎn)素的n-末端半胱氨酸殘基上的胺與葡萄糖反應(yīng)形成該降解物。雖然已經(jīng)通過說明和實(shí)施例的方式對前述發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)描述，但是為了清楚理解的目的，顯而易見的是，可以在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)實(shí)施一些改變和修改。當(dāng)前第1頁12