本發(fā)明涉及一種精制銀杏黃酮提取工藝。
背景技術(shù)：
銀杏，又名白果樹、公孫樹, 是我國特有樹種。銀杏的葉、果、樹皮均可入藥, 尤以葉的藥用價值最高。銀杏葉的化學(xué)成分較為復(fù)雜，其提取物中主要含有黃酮類化合物和二萜類化合物，銀杏黃酮能夠增加腦血管血液流量，改善腦血管血液循環(huán)功能，保護(hù)腦細(xì)胞，擴(kuò)張冠狀動脈，預(yù)防心絞痛及心肌梗塞，預(yù)防血栓形成，提高機(jī)體免疫能力。
現(xiàn)有的銀杏葉黃酮類化合物的提取方法有有機(jī)溶劑提取法、超臨界點純化提取法、水提取法，但是都存在提取率低，成本高的缺陷。
由于銀杏黃酮極高的藥用價值，使其提取方法成為國內(nèi)外研發(fā)領(lǐng)域的熱點話題之一，怎樣能夠提高其提取率，降低提取成本，成為眾多科研機(jī)構(gòu)一直關(guān)注的問題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)不足，提供精制銀杏黃酮提取工藝，其提取效率高，并且有效降低了提取成本，從而有效的降低了生產(chǎn)成本。
為了達(dá)到上述技術(shù)效果本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
一種精制銀杏黃酮提取工藝，包括如下步驟：
（1）將原料銀杏葉提取物加入30℃~75℃的水中，溶解，形成銀杏葉提取物溶液；
將銀杏葉提取物溶液進(jìn)行離心分離，收集濾液；將濾渣用濃度為0.1%~0.15%的磷酸氫二鈉溶液在55℃~60℃下溶解，離心并收集濾液；
合并上述濾液；
（2）將步驟（1）中合并后的濾液pH調(diào)至4.5~5.0，再向該濾液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅰ進(jìn)行萃取，取水相萃余液；
所述有機(jī)溶劑Ⅰ為乙酸乙酯和石油醚混合溶液或乙酸乙酯和正庚烷混合溶液，所述乙酸乙酯和石油醚的體積比或乙酸乙酯和正庚烷的體積比為3:1~6:1；
（3）將步驟（2）中水相萃余液pH調(diào)整至6.50~8.50，向水相萃余液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅱ進(jìn)行萃取，取酯相萃取液，將萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液進(jìn)行冷凍干燥，得到精制黃酮；
所述有機(jī)溶劑Ⅱ包括乙酸乙酯和正丁醇，所述乙酸乙酯和正丁醇的體積比為3:1~6:1。
作為優(yōu)選的，所述步驟（1）水溫為55℃，所述原料銀杏葉提取物與水的質(zhì)量體積濃度（w/v）為1g/20ml-25ml。
作為優(yōu)選的，所述步驟（2）中乙酸乙酯和石油醚的體積比或乙酸乙酯和正庚烷的體積比為4:1。
作為優(yōu)選的，所述步驟2中采用稀磷酸和氫氧化鈉組合或稀鹽酸和氫氧化鈉組合。
作為優(yōu)選的，所述步驟（3）中萃余液pH值為7.5。
作為優(yōu)選的，所述有機(jī)溶劑Ⅱ中乙酸乙酯與正丁醇的體積比為4:1。
作為優(yōu)選的，所述溶解用水為注射用水。
本發(fā)明提供一種精制銀杏黃酮提取工藝，包括如下步驟：
（1）將原料銀杏葉提取物加入30℃~75℃的水中，超聲波震蕩溶解，形成銀杏葉提取物溶液；
將銀杏葉提取物溶液進(jìn)行離心分離，收集濾液；將濾渣用濃度為0.1%~0.15%的磷酸氫二鈉溶液在55℃~60℃下超聲溶解，離心并收集濾液；
合并上述濾液；
（2）將步驟（1）中合并后的濾液pH調(diào)至4.5~5.0，再向該濾液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅰ進(jìn)行萃取，取水相萃余液；
所述有機(jī)溶劑Ⅰ為乙酸乙酯和石油醚混合溶液或乙酸乙酯和正庚烷混合溶液，所述乙酸乙酯和石油醚的體積比或乙酸乙酯和正庚烷的體積比為3:1~6:1；
（3）將步驟（2）中水相萃余液pH調(diào)整至6.50~8.50，向水相萃余液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅱ進(jìn)行萃取，取酯相萃取液，將萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液進(jìn)行冷凍干燥，得到精制黃酮；
所述有機(jī)溶劑Ⅱ包括乙酸乙酯和正丁醇，所述乙酸乙酯和正丁醇的體積比為3:1~6:1。
本發(fā)明所公開的技術(shù)方案能夠快捷有效并且穩(wěn)定的將銀杏葉提取物中的黃酮提取出來，最終提取物的總黃酮平均含量遠(yuǎn)高于市場上同類型產(chǎn)品，并且所采用的萃取劑成本低，可回收,降低了生產(chǎn)成本,適用于推廣使用。
本發(fā)明實施例公開了一種精制銀杏黃酮提取工藝。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的產(chǎn)品已經(jīng)通過較佳實施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的產(chǎn)品
和方法進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
具體實施方式
實施例1
一種精制銀杏黃酮提取工藝，其包括如下步驟：
（1）將原料銀杏葉提取物中加入55℃的水，超聲波震蕩溶解2min，形成銀杏葉提取物溶液；所述原料銀杏葉提取物為1g，水為20mL，所述原料銀杏葉提取物與水的質(zhì)量體積濃度（w/v）為1g/20ml；
將銀杏葉提取物溶液進(jìn)行離心分離，收集濾液；將濾渣用0.1%磷酸氫二鈉溶液在55℃下超聲溶解溶解15min，離心并收集濾液；
合并兩次得到的濾液；
（2）將步驟（1）中合并后的濾液用稀磷酸和氫氧化鈉溶液將pH調(diào)至4.5~5.0，再向該濾液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅰ進(jìn)行萃取3次，取水相萃余液；其中酯相分離并收集備用，在其它工序中使用；
所述有機(jī)溶劑Ⅰ包括乙酸乙酯以及石油醚，所述乙酸乙酯與石油醚的體積比為4:1； （調(diào)整pH的試劑組合可以更換為稀鹽酸和氫氧化鈉組合）；
（3）將步驟（2）中水相萃余液用稀氫氧化鈉溶液調(diào)整pH至7.5，向水相萃余液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅱ進(jìn)行萃取3次，合并酯相萃取液，將合并后的萃取液減壓濃縮并回收溶劑，將濃縮后的萃取液進(jìn)行冷凍干燥，得到精制黃酮；以上所述有機(jī)溶劑Ⅱ包括乙酸乙酯和正丁醇，所述乙酸乙酯和正丁醇的體積比為4:1。
實施例2
一種精制銀杏黃酮提取工藝，其包括如下步驟：
（1）將原料銀杏葉提取物中加入30℃的水，超聲震蕩溶解2min，形成銀杏葉提取物溶液；所述原料銀杏葉提取物為1g，水為20mL，所述原料銀杏葉提取物與水的質(zhì)量體積濃度（w/v）為50g/L；
將銀杏葉提取物溶液進(jìn)行離心分離，收集濾液；將濾渣用0.1%磷酸氫二鈉溶液在55℃下超聲溶解15min，離心并收集濾液；
合并上述濾液；
（2）將步驟（1）中合并后的濾液pH調(diào)至4.5~5.0，再向該濾液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅰ進(jìn)行萃取3次，取水相萃余液；
所述有機(jī)溶劑Ⅰ包括乙酸乙酯以及石油醚，所述乙酸乙酯與石油醚的體積比為3:1；
（3）將步驟（2）中水相萃余液用稀氫氧化鈉溶液調(diào)整pH至6.50，向水相萃余液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅱ進(jìn)行萃取3次，合并酯相萃取液，將合并后的萃取液減壓濃縮并回收溶劑，將濃縮后的萃取液進(jìn)行冷凍干燥，得到精制黃酮；
以上所述有機(jī)溶劑Ⅱ包括乙酸乙酯和正丁醇，所述乙酸乙酯和正丁醇的體積比為3:1。
實施例3
一種精制銀杏黃酮提取工藝，其包括如下步驟：
（1）將原料銀杏葉提取物中加入75℃的水，超聲波震蕩溶解2min，形成銀杏葉提取物溶液；所述原料銀杏葉提取物為1g，水為20mL，所述原料銀杏葉提取物與水的質(zhì)量體積濃度（w/v）為50g/L；
將銀杏葉提取物溶液進(jìn)行離心分離，收集濾液；將濾渣用0.1%磷酸氫二鈉溶液在60℃下超聲溶解15min，離心并收集濾液；
合并上述濾液；
（2）將步驟（1）中合并后的濾液pH調(diào)至4.5~5.0，再向該濾液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅰ進(jìn)行萃取3次，取水相萃余液；
所述有機(jī)溶劑Ⅰ包括乙酸乙酯以及石油醚，所述乙酸乙酯與石油醚的體積比為6:1；
（3）將步驟（2）中水相萃余液用稀氫氧化鈉溶液調(diào)整pH至8.50，向水相萃余液中加入等體積的有機(jī)溶劑Ⅱ進(jìn)行萃取3次，合并酯相萃取液，將合并后的萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液進(jìn)行冷凍干燥，得到精制黃酮；
以上所述有機(jī)溶劑Ⅱ包括乙酸乙酯和正丁醇，所述乙酸乙酯和正丁醇的體積比為6:1。
實施例4
本實施例為對照例，相對于實施例1~3不同之處在于其中：所述原料銀杏葉提取物為1g，水為25mL，所述原料銀杏葉提取物與水的質(zhì)量體積濃度（w/v）為40g/L。
實施例5
本實施例為對照例，相對于實施例1~3不同之處在于其中：機(jī)溶劑Ⅰ為乙酸乙酯和正庚烷。
以上實施例中，所用到的溶解用水均為注射用水，所述質(zhì)量體積濃度即溶質(zhì)質(zhì)量與溶劑體積之比，即w/v。
以上實施例中所用到的“銀杏葉提取物”為符合國家標(biāo)準(zhǔn)的原料，其有效成分含量：銀杏黃酮（參照國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法分析，以槲皮素、山奈酚以及異鼠李素為對照品計算），含量不低于24%；銀杏內(nèi)酯（以銀杏內(nèi)酯A、B、C以及白果內(nèi)酯總量計算），含量不低于6%。銀杏酸的含量不超過國家標(biāo)準(zhǔn)。
通過測定實施例1得到的最終產(chǎn)品的總黃酮平均含量為46.14%，實施例2得到的最終產(chǎn)品中的總黃酮平均含量為42.60%，實施例3得到的最終產(chǎn)物中總黃酮平均含量為41.56%；以上實施例總黃酮的含量均高于市場上同類型產(chǎn)品的總黃酮含量28%~33.5%。實施例4與實施例5所得到產(chǎn)品與相應(yīng)對照的實施例所得到的產(chǎn)品中平均總黃酮含量相同，即兩者最終測定總黃酮平均含量差值為0.01%~0.05%，符合實驗允許誤差值。
對比實施例1~3，顯然實施例1所得到的產(chǎn)品總黃酮平均含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于市場上同類型產(chǎn)品的總黃酮含量，并且其總黃酮平均含量遠(yuǎn)高于其它實施例的總黃酮平均含量。
表1 為實施例1所得產(chǎn)品用HPLC進(jìn)行測量，得到銀杏葉精制提取物中總黃酮的含量測定結(jié)果。
表1實施例1產(chǎn)品中總黃酮平均含量結(jié)果
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。