本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，特別涉及一種芹菜籽提取物及其制劑和制法。

背景技術(shù)：

芹菜籽，為傘形科植物芹菜Apium graveolens L.的種子，芹菜籽治療關(guān)節(jié)疼痛在澳洲已有百年的歷史，被視為傳統(tǒng)民間偏方，芹菜籽提取物具有降尿酸、降血壓、血脂等多種功效，以降尿酸的功效最為顯著。國(guó)內(nèi)大多數(shù)研究人員針對(duì)芹菜的根、莖、葉提取物及芹菜籽精油進(jìn)行相關(guān)的研究和報(bào)道，但較少涉及到芹菜籽提取物的相關(guān)研究；中國(guó)專利CN100569241C公開了一種芹菜籽乙酸乙酯萃取物，制備方法如下：芹菜干燥種子10kg，以15～20倍量75～95％(V/V)乙醇滲漉提取或以4～5倍量75～95％(V/V)乙醇加熱提取3～4次，每次加熱1～1.5小時(shí)；提取液于55℃減壓濃縮至近無乙醇，得濃縮液；于濃縮液中加1～2倍量水稀釋混懸后，用稀釋液三分之一體積的60～90℃沸程的石油醚，萃取2～3次，分出石油醚層并回收石油醚，得石油醚萃取物；水層再用三分之一體積乙酸乙酯萃取4次，分出乙酸乙酯層并回收乙酸乙酯得芹菜籽乙酸乙酯萃取物，并公開所述提取物用于制備防治痛風(fēng)藥物、抗炎藥物或保健食品藥物中的應(yīng)用。現(xiàn)有芹菜籽提取物的提取方法存在提取步驟復(fù)雜、生藥率低、基本沒有精制方法、重復(fù)性差等諸多不足，難以工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的特征在于提供一種芹菜籽提取物及其制備方法，得到的芹菜籽提取物具有較佳的藥學(xué)性能，能有效降低尿酸；制備方法工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)率高，重現(xiàn)性好。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明具體技術(shù)方案如下：

一種芹菜籽提取物，所述芹菜籽提取物的制備方法如下：

a.取芹菜干燥種子，粉碎，加入體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液回流提取1-2次，每次加入乙醇水溶液為芹菜干燥種子2-4倍體積量，回流時(shí)間為0.5-1.5h；收集并合并提取液，減壓濃縮至無醇，得稠浸膏；

b.將步驟a所得的稠浸膏混懸于芹菜干燥種子0.5-1倍體積的水中，然后用萃取試劑萃取2-4次，每次加入萃取試劑量為稠浸膏0.2-0.4倍體積量，萃取完畢后合并有機(jī)相，干燥，減壓濃縮，得芹菜籽提取物；

其中，所述萃取試劑選自：乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚、正己烷中的一種或幾種。

優(yōu)選地，所述制備方法還包括如下精制方法：

c.將粗提物以0.2-0.5g/ml的濃度溶于乙酸乙酯中，上硅膠層析柱；

d.梯度洗脫：洗脫流量為7-10ml/min，先用石油醚洗脫8-10個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為7:1的石油醚和二氯甲烷混合液洗脫10-12個(gè)柱體積，收集流分；再用體積比為9:4:1的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫3-5個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為5:7:3的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫15-20個(gè)柱體積，收集流分，將收集的流分合并，減壓濃縮，即得精制芹 菜籽提取物。

本發(fā)明所提供的芹菜籽提取物，在降低尿酸方面具有非常好的效果，有利于對(duì)高尿酸血癥的治療和人腎臟的保護(hù)。

另一方面，提供了一種芹菜籽提取物的制備方法，所述制備方法具體步驟如下：

a.取芹菜干燥種子，粉碎，加入體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液回流提取1-2次，每次加入乙醇水溶液為芹菜干燥種子2-4倍體積量，回流時(shí)間為0.5-1.5h；收集并合并提取液，減壓濃縮至無醇，得稠浸膏；

b.將步驟a所得的稠浸膏混懸于芹菜干燥種子0.5-1倍體積的水中，然后用萃取試劑萃取2-4次，每次加入萃取試劑量為稠浸膏0.2-0.4倍體積量，萃取完畢后合并有機(jī)相，干燥，減壓濃縮，得粗提物；

其中，所述萃取試劑選自：乙酸乙酯(EA)、二氯甲烷(DCM)、石油醚(PE)或正己烷(Hex)中的一種或幾種；優(yōu)選地為質(zhì)量比為1:1-1:4的乙酸乙酯和正己烷的混合液，進(jìn)一步優(yōu)選，乙酸乙酯和正己烷的質(zhì)量比為1:2；

c.將粗提物以0.2-0.5g/ml的濃度溶于乙酸乙酯中，上硅膠層析柱；

d.梯度洗脫：洗脫流量為7-10ml/min，優(yōu)選為8ml/min；先用石油醚洗脫8-10個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為7:1的石油醚和二氯甲烷混合液洗脫10-12個(gè)柱體積，收集流分；再用體積比為9:4:1的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫3-5個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為5:7:3的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫15-20個(gè)柱體積，收集流分，將收集的流分合并，減壓濃縮， 即得所述芹菜籽提取物。

進(jìn)一步地，為了提高產(chǎn)物收率，在回流提取步驟設(shè)有超聲波輔助，所述超聲波頻率為60-80KHz。

本發(fā)明所提供的芹菜籽提取物的制備方法，經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)、合理的統(tǒng)籌和對(duì)比總結(jié)而出，具有工藝簡(jiǎn)單、提取次數(shù)少、藥物產(chǎn)率高、條件溫和等優(yōu)點(diǎn)；所述純化精制步驟合理，純化產(chǎn)率較高，經(jīng)過該純化步驟后所得的芹菜籽提取物中包含的活性成分較現(xiàn)有技術(shù)提高12-15％，可適于工業(yè)化生產(chǎn)。

另一方面，本發(fā)明還提供了芹菜籽提取物與藥學(xué)上可接受的輔料制成的軟膠囊劑，所述軟膠囊包括軟膠囊填充物和囊材，所述軟膠囊填充物包括如下重量份的原料：芹菜籽提取物10-25份、稀釋劑20-35份、崩解劑3-6份、粘合劑1-2份。

優(yōu)選地，所述稀釋劑為重量份數(shù)比為2:3的N-十二烷胺木糖甙和麻油的混合物；所述崩解劑為重量份數(shù)比為1:2:2的交聯(lián)聚維酮、月桂醇硫酸鈉和月桂酰肌氨酸的混合物。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述囊材主要由如下重量份數(shù)的原料制備而成,明膠10、醋酸纖維素酞酸酯1.2、出芽短梗孢糖0.8、水10、二氧化鈦2.8、半乳糖1.9。

本發(fā)明所提供的軟膠囊劑，各輔料與芹菜在提取物之間無反應(yīng)，且能提高膠囊劑內(nèi)芹菜籽提取物的生物利用度，充分發(fā)揮膠囊劑的療效，且含量均勻度高；經(jīng)過嚴(yán)格篩選輔料的種類和工藝參數(shù)，選取了上述原料制備形成的囊材，與芹菜籽提取物相配合，解決了藥物遇濕熱不穩(wěn)定的問題，進(jìn)一步保證膠囊劑的穩(wěn)定性，使芹菜籽提取物的穩(wěn)定性進(jìn)一步增加。

另外，本發(fā)明還提供芹菜籽提取物在制備降低尿酸的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的芹菜籽提取物，在降低尿酸方面具有非常好的效果，有利于對(duì)高尿酸血癥的治療和人腎臟的保護(hù)；此外，本發(fā)明所提供的芹菜籽提取物的制備方法，經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)、合理的統(tǒng)籌和對(duì)比總結(jié)而出，具有工藝簡(jiǎn)單、提取次數(shù)少、藥物產(chǎn)率高、條件溫和等優(yōu)點(diǎn)，為芹菜籽提取物的可工業(yè)化生產(chǎn)提供了較優(yōu)的選擇；本發(fā)明將芹菜籽提取物與輔料制備成軟膠囊劑，不但提高了患者的攜帶和使用的方便性，且優(yōu)化輔料配方，提高芹菜籽提取物的生物利用度，增強(qiáng)芹菜籽提取物及軟膠囊的穩(wěn)定性；使膠囊的貯存條件變得更加溫和。

附圖說明

圖1回流時(shí)間對(duì)產(chǎn)率的影響圖；

圖2柱層析溫度對(duì)柱層析產(chǎn)率的影響圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種芹菜籽提取物，由下述步驟制備而得：

a.取芹菜干燥種子，粉碎，加入2倍體積量的體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液回流提取1.5h；收集提取液，減壓濃縮至無醇，得稠浸膏；

b.將步驟a所得的稠浸膏混懸于原料1倍體積的水中，然后用體積比為3:1的石油醚和乙酸乙酯的混合液萃取2次，每次加入萃取試劑量為原料0.2倍體積量，萃取完畢后合并有機(jī)相，干燥，減壓濃縮，得芹菜籽提取物；

實(shí)施例2

一種芹菜籽提取物，由下述步驟制備而得：

a.取芹菜干燥種子，粉碎，加入體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液回流提取2次，每次加入乙醇水溶液為2.5倍體積量，回流時(shí)間為0.5h，收集并合并提取液，減壓濃縮至無醇，得稠浸膏；

b.將步驟a所得的稠浸膏混懸于原料0.5倍體積的水中，然后乙酸乙酯或二氯甲烷萃取4次，每次加入萃取試劑量為原料0.4倍體積量，萃取完畢后合并有機(jī)相，干燥，減壓濃縮，得粗提物；

c.將粗提物以0.2g/ml的濃度溶于乙酸乙酯中，上硅膠層析柱；

d.梯度洗脫：洗脫流量為7ml/min，先用石油醚洗脫10個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為7:1的石油醚和二氯甲烷混合液洗脫12個(gè)柱體積，收集流分；再用體積比為9:4:1的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫3個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為5:7:3的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫15個(gè)柱體積，收集流分，將收集的流分合并，減壓濃縮，即得芹菜籽提取物。

實(shí)施例3

一種制備芹菜籽提取物的制備方法，所述制備方法步驟如下：

a.提?。喝∏鄄烁稍锓N子，粉碎，加入4倍體積量的體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液回流提取1h，同時(shí)進(jìn)行超聲波輔助；收集提取液，減壓濃縮至無醇，得稠浸膏；

b.萃?。簩⒉襟Ea所得的稠浸膏混懸于原料0.9倍體積的水中，然后用質(zhì)量比為1:2的乙酸乙酯和正己烷的混合溶液萃取3次，每次加入萃取試劑量為原料0.3倍體積量，萃取完畢后合并有機(jī)相，干燥，減壓濃縮即得所述芹菜籽提取物；

c.將粗提物以0.5g/ml的濃度溶于乙酸乙酯中，上硅膠層析柱；

d.梯度洗脫：洗脫流量為10ml/min，先用石油醚洗脫8個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為7:1的石油醚和二氯甲烷混合液洗脫10個(gè)柱體積，收集流分；再用體積比為9:4:1的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫5個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為5:7:3的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫20個(gè)柱體積，收集流分，將收集的流分合并，減壓濃縮，即得芹菜籽提取物。

實(shí)施例4

一種制備芹菜籽提取物的制備方法，所述制備方法步驟如下：

a.提?。喝∏鄄烁稍锓N子，粉碎，加入4倍體積量的體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液回流提取1h，同時(shí)進(jìn)行超聲波輔助；收集提取液，減壓濃縮至無醇，得稠浸膏；

b.萃取：將步驟a所得的稠浸膏混懸于原料0.9倍體積的水中，然后用質(zhì)量比為1:2的乙酸乙酯和正己烷的混合溶液萃取3次，每次加入萃取試劑量為原料0.3倍體積量，萃取完畢后合并有機(jī)相，干燥，減壓濃縮即得所述芹菜籽提取物；

c.將粗提物以0.5g/ml的濃度溶于乙酸乙酯中，上硅膠層析柱；

d.梯度洗脫：洗脫流量為8ml/min，先用石油醚洗脫9個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為7:1的石油醚和二氯甲烷混合液洗脫11個(gè)柱體積，收集流分；再用體積比為9:4:1的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫4個(gè)柱體積，除去流分；再用體積比為5:7:3的石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脫17個(gè)柱體積，收集流分，將收集的流分合并，減壓濃縮，即得芹菜籽提取物。

實(shí)施例5軟膠囊劑

軟膠囊填充物：

囊材：

制備方法：

1)將明膠、水、半乳糖和醋酸纖維素酞酸酯常規(guī)混合并加熱熔融成膠液后，加入二氧化鈦和出芽短梗孢糖混合均勻后，過膠體磨后壓制成膠皮待用；

2)將實(shí)施例2所制備的芹菜籽提取物、N-十二烷胺木糖甙、麻油和三分之二的交聯(lián)聚維酮、月桂醇硫酸鈉和月桂酰肌氨酸混合物混合均勻后，粉碎成微粉待用；將聚維酮溶于75％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液中形成溶液，將微粉溶于溶液中混合均勻，然后制成濕丸，將濕丸與剩余交聯(lián)聚維酮、月桂醇硫酸鈉和月桂酰肌氨酸混合物混合均勻，干燥后得微丸；

3)將微丸與步驟1)所得的膠皮壓制，即得軟膠囊劑。

實(shí)施例6軟膠囊劑

軟膠囊填充物：

囊材：

制備方法：按照實(shí)施例4所述的制備方法進(jìn)行制備。

實(shí)施例7軟膠囊劑

軟膠囊填充物：

囊材：

制備方法：按實(shí)施例4所述的方法進(jìn)行制備。

對(duì)照實(shí)施例1軟膠囊劑

軟膠囊填充物：

囊材：

制備方法：

1)將明膠、水和半乳糖常規(guī)混合并加熱熔融成膠液后，加入二氧化鈦混合均勻后，過膠體磨后壓制成膠皮待用；

2)將實(shí)施例2所制備的芹菜籽提取物、N-十二烷胺木糖甙、麻油和三分之二的交聯(lián)聚維酮、月桂醇硫酸鈉和月桂酰肌氨酸混合物混合均勻 后，粉碎成微粉待用；將聚維酮溶于75％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液中形成溶液，將微粉溶于溶液中混合均勻，然后制成濕丸，將濕丸與剩余交聯(lián)聚維酮、月桂醇硫酸鈉和月桂酰肌氨酸混合物混合均勻，干燥后得微丸；

3)將微丸與步驟1)所得的膠皮壓制，即得軟膠囊劑。

對(duì)照實(shí)施例2軟膠囊劑

軟膠囊填充物：

囊材：

制備方法：

1)將明膠、水和甘油常規(guī)混合并加熱熔融成膠液后，加入二氧化鈦混合均勻后，過膠體磨后壓制成膠皮待用；

2)將實(shí)施例2所制備的芹菜籽提取物、山梨醇和海藻酸混合均勻后，粉碎成微粉，將甲基纖維素溶于75％體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液中形成溶液，將微粉溶于溶液中混合均勻，然后制成濕丸，將濕丸與羧甲基纖素鈉混合均勻，干燥后得微丸；

3)將微丸與步驟1)所得的膠皮壓制，即得軟膠囊劑。

試驗(yàn)1芹菜籽提取物降高尿酸血癥的藥效研究

1實(shí)驗(yàn)方法

(1)芹菜籽提取物對(duì)正常小鼠血清尿酸的影響：ICR小鼠72只，SPF級(jí)，雌雄各半，體重18.2～22.9g，按性別、體重隨機(jī)分為6組，分別為空白對(duì)照組、別嘌醇片組(39mg/kg)、中國(guó)專利CN 100569241中公開的芹菜籽乙酸乙酯萃取物作為陽性對(duì)照組(3.3g芹菜籽/kg)、芹菜籽提取物低、中、高劑量組(3.3、9.9、29.7g芹菜籽/kg)，每組12只動(dòng)物。各組小鼠按20mL/kg灌胃給予相應(yīng)劑量的藥液，空白對(duì)照組灌胃給予等體積花生油，1次/日，連續(xù)14天。末次給藥前禁食不禁水12h，末次給藥后1h，各組小鼠眼眶靜脈叢采血，檢測(cè)血清尿酸水平。

(2)芹菜籽提取物對(duì)氧嗪酸鉀鹽所致小鼠高尿酸血癥模型的影響：ICR小鼠70只，SPF級(jí)，雄性，體重24.1～27.9g，按體重隨機(jī)分為7組，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、別嘌醇片組(39mg/kg)、中國(guó)專利CN100569241中公開的芹菜籽乙酸乙酯萃取物作為陽性對(duì)照組(9.9g/kg)，芹菜籽提取物低、中、高劑量組(3.3、9.9、29.7g/kg)，每組10只動(dòng)物。各組小鼠按20mL/kg灌胃給予相應(yīng)劑量的藥液，正常對(duì)照組灌胃給予等體積蒸餾水，模型對(duì)照組灌胃給予等體積花生油，1次/日，連續(xù)7天。末次給藥前禁食不禁水12h，給藥前1h，除正常對(duì)照組外，其余各組小鼠腹腔注射液氧嗪酸鉀鹽300mg/kg，各組小鼠分別于造模前及末次給藥1h后，眼眶靜脈叢采血，檢測(cè)血清尿酸水平，結(jié)果見表1。

(3)芹菜籽提取物對(duì)腺嘌呤和乙胺丁醇所致大鼠高尿酸血癥模型的影響：SD大鼠70只，SPF級(jí)，雄性，體重198.4～228.4g，按體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、別嘌醇片組(27mg/kg)、中國(guó)專利CN100569241中公開的芹菜籽乙酸乙酯萃取物作為陽性對(duì)照組(5.1g/kg)，芹菜籽提取物低、中、高劑量組(1.7、5.1、15.3g/kg)， 每組10只動(dòng)物。各組大鼠按10mL/kg灌胃給予相應(yīng)劑量的藥液，正常對(duì)照組灌胃給予等體積蒸餾水，模型對(duì)照組灌胃給予等體積花生油，1次/日，連續(xù)17天。除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠均于給藥第10天上午開始灌胃腺嘌呤(300mg/kg)和乙胺丁醇(250mg/kg)，復(fù)制大鼠高尿酸血癥模型，下午按10mL/kg灌胃給予相應(yīng)藥液。末次給藥前禁食不禁水12h，末次給藥后1h，各組大鼠眼眶靜脈叢采血，檢測(cè)血清尿酸水平，結(jié)果見表2。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1芹菜籽提取物對(duì)氧嗪酸鉀鹽所致小鼠高尿酸血癥模型的影響

注：與陽性對(duì)照組相比P^a＜0.05，P^b＜0.01，與別嘌醇片組相比P^c＜0.05.

表2芹菜籽提取物對(duì)腺嘌呤和乙胺丁醇所致大鼠高尿酸血癥模型的影響

注：與陽性對(duì)照組相比P^a＜0.05，P^b＜0.01，與別嘌醇片組相比P^c＜0.05.

(1)芹菜籽提取物對(duì)正常小鼠血清尿酸的影響：小鼠連續(xù)14天灌胃給予不同劑量的芹菜籽提取物(3.3、9.9、29.7g/kg)，其中低劑量芹菜籽提取物就能顯著降低正常小鼠血清尿酸水平。

(2)芹菜籽提取物對(duì)氧嗪酸鉀鹽所致小鼠高尿酸血癥模型的影響：連續(xù)給藥7天，小鼠采用腹腔注射氧嗪酸鉀復(fù)制高尿酸血癥模型，造模后小鼠血清UA顯著升高；芹菜籽提取物低、中、高劑量(3.3、9.9、29.7g/kg)均能顯著降低小鼠造模后血清UA水平，且造模后低、中、高劑量均能顯著減小造模后小鼠血清UA升高程度，低劑量組與陽性對(duì)照組相比具有差異性，中劑量組與高劑量組與陽性對(duì)照組相比具有顯著差異性，高劑量組與現(xiàn)有別嘌醇片相比效果更優(yōu)。

(3)芹菜籽提取物對(duì)腺嘌呤和乙胺丁醇所致大鼠高尿酸血癥模型的影響：大鼠采用連續(xù)7天灌胃給予腺嘌呤加乙胺丁醇復(fù)制高尿酸血癥模型，造模后大鼠血清UA顯著升高，芹菜籽提取物低、中、高劑量(1.7、5.1、15.3g/kg)均能顯著降低模型大鼠血清尿素氮BUN水平、血清肌酸CRE水平和血清UA水平，與陽性對(duì)照組相比具有顯著差異。

由上述試驗(yàn)結(jié)果可知，芹菜籽提取物對(duì)高尿酸血癥有顯著預(yù)防及治療作用，并對(duì)腎臟具有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠給藥均無死亡，且其他器官無異常，毒性較微。

試驗(yàn)2芹菜籽提取物的最佳提取條件試驗(yàn)研究

取20kg芹菜籽，使用實(shí)施例3所述的方法進(jìn)行提取，在保證其他實(shí)驗(yàn)條件不變的情況下，分別改變提取試劑、回流時(shí)間或柱層析溫度等單因素，考察提取的收率變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3、圖1和圖2。

表3不同提取試劑對(duì)產(chǎn)率的影響

由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，EA/Hex為最佳的提取試劑，生藥產(chǎn)率可達(dá)9.2％，純EA作為提取試劑，粗產(chǎn)物量較高，但雜質(zhì)較多，純化后總產(chǎn)率相對(duì)于EA/Hex作為提取試劑稍差。

表4乙酸乙酯和正己烷不同比例對(duì)產(chǎn)率的影響

由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，隨著正己烷的含量的減少，產(chǎn)率逐漸增加，當(dāng)正己烷/乙酸乙酯＝1:2時(shí)產(chǎn)率達(dá)到最高，正己烷含量進(jìn)一步增加，產(chǎn)率下降。

由圖1可知，回流0.5h產(chǎn)率較低，回流1h之后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，產(chǎn)率不再增加，考慮到節(jié)約成本的原則，可選擇回流1h為最佳回流時(shí)間；由圖2可知，本發(fā)明所述的提取方法中，過柱純化產(chǎn)率較高，保證其他條件不變的情況下，單獨(dú)改變過柱溫度，考察到隨著溫度的升高，過柱產(chǎn)率增大，到40℃時(shí)為最佳，溫度進(jìn)一步升高后至50-55℃后，產(chǎn)率下降，硅膠對(duì)產(chǎn)品的吸附性增大。

綜合的，本發(fā)明所述的芹菜籽提取物的制備方法，提取次數(shù)少、提取條件溫和、方法簡(jiǎn)單和純化效率高等優(yōu)點(diǎn)，且大大提高了天然藥物的生藥提取產(chǎn)率，最高可達(dá)9.3％，為工業(yè)化生產(chǎn)提供了有效途徑。

試驗(yàn)3軟膠囊劑穩(wěn)定性試驗(yàn)研究

3.1加速試驗(yàn)

取實(shí)施例5、實(shí)施例7、對(duì)照實(shí)施例1和對(duì)照實(shí)施例2所述的軟膠囊劑，在恒溫40℃±2℃下，相對(duì)濕度為75％±5％的恒濕條件下放置6個(gè)月，在試驗(yàn)期間1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月末分別取樣一次，按中國(guó)藥典中的規(guī)定，檢測(cè)膠囊劑的性狀、含芹菜素的標(biāo)示量(％)，加速試驗(yàn)結(jié)果見表5；

表5本發(fā)明的樣品及對(duì)照品的加速試驗(yàn)結(jié)果

從表中可看出本發(fā)明的軟膠囊劑，實(shí)施例7在高溫高濕的環(huán)境下，放置6個(gè)月后，沒有破裂和裂痕，且含有芹菜素的標(biāo)示量未發(fā)生明顯的變化；實(shí)施例7與實(shí)施例5的區(qū)別僅在于囊材原料的重量配比 不同，實(shí)施例5的穩(wěn)定性稍差，含有芹菜素的標(biāo)示量下降6％左右；實(shí)施例7與對(duì)照實(shí)施例的區(qū)別在于囊材原料不同，對(duì)照實(shí)施例所述的芹菜籽提取物軟膠囊高溫高濕環(huán)境下放置2-3個(gè)月后，表面粗糙，且含芹菜素的標(biāo)示量顯著下降；由此可知，本發(fā)明的軟膠囊劑穩(wěn)定性顯著提高。

3.2長(zhǎng)期試驗(yàn)

取實(shí)施例5、實(shí)施例7、對(duì)照實(shí)施例1和對(duì)照實(shí)施例2所述的軟膠囊劑，在溫度25℃±2℃下，相對(duì)濕度為60％±10％的條件下放置24個(gè)月，每3個(gè)月取樣一次，分別于0個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月、18個(gè)月、24個(gè)月取樣，檢測(cè)膠囊劑的性狀、含芹菜素的標(biāo)示量(％)，長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果見表6；

表6本發(fā)明的樣品和對(duì)照品的長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果

從表中可看出本發(fā)明的軟膠囊劑，長(zhǎng)時(shí)間放置，該軟膠囊劑的性狀符合標(biāo)準(zhǔn)、含有芹菜素的量未發(fā)生明顯的變化；而對(duì)照實(shí)施例軟膠囊劑長(zhǎng)時(shí)間放置放置9-12個(gè)月后，該膠囊劑的表面出現(xiàn)斑點(diǎn)，并發(fā)生破裂現(xiàn)象；并且含丹芹菜素的量顯著下降；表明本發(fā)明的軟膠囊劑與對(duì)照軟膠囊劑相比，長(zhǎng)時(shí)間放置性質(zhì)穩(wěn)定。