相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求于2005年10月14日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)系列號(hào)60/726,911的權(quán)益，其全部?jī)?nèi)容以及全部目的通過(guò)引用并入本文。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及替比法尼(tipifarnib)的新型制劑，其適合于靜脈(IV)施用。本發(fā)明還涉及該制劑的用途、制備該制劑的方法以及通過(guò)向所述患者施用所述制劑治療患者的方法。

發(fā)明背景

替比法尼被描述于WO 97/21701。替比法尼的化學(xué)名稱是(R)-(+)-6-[氨基-(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)喹啉酮。替比法尼的商品名是該化合物的絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型未在上述專利說(shuō)明書描述的實(shí)施例中確證，但是該化合物由詞頭“(B)”標(biāo)識(shí)以說(shuō)明它是從柱色譜法分離的第二化合物。發(fā)現(xiàn)由此獲得的該化合物具有(R)-(+)-構(gòu)型。還由其發(fā)表的代碼編號(hào)R115777提及的此化合物具有以下結(jié)構(gòu)：

替比法尼是一種在酸性pH下具有非常好的水溶性的堿。其水解為R110127，其中胺官能度被羥基官能度取代。水解降解的速率在酸性條件下最低，但仍然非?？?。R110127具有以下結(jié)構(gòu)：

替比法尼是一種在體外和體內(nèi)對(duì)人法呢基轉(zhuǎn)移酶(FTase)有效的和選擇性的非肽模擬競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。此化合物在體外納摩爾濃度下具有抗增殖作用，并且在數(shù)個(gè)體外和體內(nèi)模型中以及在臨床中作為單一療法具有抗腫瘤作用。替比法尼的主要的抗腫瘤作用包括抑制血管發(fā)生、抑制細(xì)胞凋亡、以及直接抗增殖。

法尼基化靶標(biāo)，例如(但不限于)Ras、RhoB和磷脂?；〈?3激酶(PI₃K)/絲氨酸-蘇氨酸激酶AKT(它們與細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)和增殖有關(guān))通常在AML中突變或失調(diào)。法尼基化的抑制阻止了體外骨髓白血病細(xì)胞生長(zhǎng)和祖先集落形成。與正常骨髓細(xì)胞相比，從癌癥患者獲得的白血病細(xì)胞對(duì)替比法尼的生長(zhǎng)抑制作用明顯更敏感。特異性下游效應(yīng)器(通過(guò)該效應(yīng)器，法尼基化的抑制作用產(chǎn)生抗白血病活性)的鑒別是正在進(jìn)行的研究的主題。替比法尼在血液惡性腫瘤患者和實(shí)體瘤患者中顯示出臨床活性的征兆；所述血液惡性腫瘤包括但不限于急性骨髓內(nèi)源性白血病、髓增生異常綜合征和多發(fā)性骨髓瘤；所述實(shí)體瘤包括但不限于惡性膠質(zhì)瘤和乳腺癌。

迄今為止，一些研究者已測(cè)定了替比法尼口服施用之后的藥代動(dòng)力學(xué)。替比法尼的劑量遞增試驗(yàn)是在28名晚期癌癥患者中進(jìn)行的。在50-至500-mg b.i.d.劑量范圍內(nèi)，在口服施用之后2至5小時(shí)達(dá)到68-1458ng/mL的峰濃度范圍。觀察到替比法尼的血漿濃度呈線性增加。在此研究中觀察到的替比法尼谷和峰血漿濃度是在抗白血病的活性范圍內(nèi)。

口服施用之后替比法尼被廣泛地代謝。由人肝細(xì)胞的體外研究的數(shù)據(jù)顯示，替比法尼經(jīng)歷了直接的葡萄糖醛酸化。診斷抑制劑和異源性表達(dá)系統(tǒng)的試驗(yàn)也表明，與其它CYP450酶如CYP2C19、CYP2A6、CYP2D6和CYP2C8/9/10相比，CYP3A4是替比法尼的主要代謝通路。在若干臨床前試驗(yàn)中，如同法尼基轉(zhuǎn)移酶和抗增殖劑，替比法尼的代謝產(chǎn)物是無(wú)活性的。然而，其個(gè)別代謝物的藥代動(dòng)力學(xué)未在人體中研究。在[¹⁴C]替比法尼口服施用于健康男性受試者的血漿樣品中發(fā)現(xiàn)替比法尼的若干代謝物。這些代謝物包括替比法尼葡萄糖醛酸(glucuronide)結(jié)合物以及通過(guò)氧化脫甲基、脫氨基和失甲基-咪唑部分而形成的代謝產(chǎn)物。母體化合物的葡萄糖醛酸化(glucuronidation)是生物轉(zhuǎn)化的主要途徑。然而，未研究將替比法尼施用于癌癥受試者之后替比法尼的代謝。此外，替比法尼代謝產(chǎn)物配置情況(其可發(fā)生在不同途徑施用之后)潛在的差異未作系統(tǒng)性的試驗(yàn)。

此外，由于腫瘤性阻塞、手術(shù)處理、并發(fā)的口腔感染、明顯的味覺(jué)反?；蚴秤麥p退、或者惡心和嘔吐，癌癥患者經(jīng)?？诜z入受損。因此，仍然希望有用于另一種施用途徑例如靜脈施用的制劑。

發(fā)明概述

本發(fā)明的目的是提供給口服施用成問(wèn)題的患者施用替比法尼的另選施用(即胃腸外)途徑。本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途徑，作為連續(xù)輸注或短期輸注(短于1小時(shí)至數(shù)小時(shí)；每天一次或多次)，其可提供對(duì)替比法尼的充分暴露，使得產(chǎn)生與目前每天兩次口服施用替比法尼相似的臨床結(jié)果。特別地，本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途徑，作為連續(xù)輸注或每天兩次2小時(shí)輸注，其可提供與目前每天兩次口服施用替比法尼相似的暴露。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供治療全身和血液惡性腫瘤以及特別是實(shí)體癌的方法。

附圖簡(jiǎn)述

圖1：“表1”：參與本項(xiàng)研究的患者的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)。

圖2：“表2”：2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.施用之后平均(±SD)替比法尼血漿C_max和AUC_0-10h值。

圖3：“表3”：連續(xù)靜脈輸注施用之后平均(±SD)替比法尼血漿C_max和AUC_0-10h值。

圖4：“表4”：替比法尼全身暴露量：2小時(shí)靜脈輸注對(duì)口服給藥。

圖5：“表5”：替比法尼全身暴露量：連續(xù)靜脈輸注對(duì)口服給藥。

圖6：“表6”：口服施用、2-小時(shí)靜脈輸注和連續(xù)靜脈輸注之后，替比法尼-葡萄糖醛酸的平均(±SD)血漿藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

圖7：“表7”：口服施用、2-小時(shí)靜脈輸注和連續(xù)靜脈輸注之后，R130525的平均(±SD)血漿藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

圖8：3個(gè)4-天治療方案的連續(xù)施用之后替比法尼的平均(±SD)血漿濃度-時(shí)間圖。

圖9：替比法尼的游離分?jǐn)?shù)和總血漿濃度間的關(guān)系。

圖10：3個(gè)4-天治療方案的連續(xù)施用之后替比法尼和衍生的代謝產(chǎn)物的平均(±SD)血漿濃度-時(shí)間圖。

發(fā)明說(shuō)明

本發(fā)明提供了給口服施用成問(wèn)題的患者施用替比法尼的另選施用(即胃腸外)途徑。本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途徑，作為連續(xù)輸注或短期輸注(短于1小時(shí)至數(shù)小時(shí)；每天一次或多次)，其可提供對(duì)替比法尼的充分暴露，使得產(chǎn)生與目前每天兩次口服施用替比法尼相似的臨床結(jié)果。特別地，本發(fā)明的目的是提供施用替比法尼的靜脈途徑，作為連續(xù)輸注或每天兩次2小時(shí)輸注，其可提供與目前每天兩次口服施用替比法尼相似的暴露。

本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供替比法尼的干燥制劑，其可用溶液增溶而得到可以靜脈施用的替比法尼的制劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道適合靜脈施用制劑的限制條件。下文將討論多種限制條件。靜脈施用的所述制劑應(yīng)當(dāng)具有一定的pH。進(jìn)入靜脈的溶液不得太呈堿性也不得太呈酸性。該制劑不應(yīng)含有進(jìn)入血液中時(shí)會(huì)產(chǎn)生副反應(yīng)的賦形劑。此外，該制劑一旦進(jìn)入血液中時(shí)應(yīng)當(dāng)使所述活性成分保持可溶。列舉的這些限制條件不是窮盡的。

本發(fā)明的制劑包含適宜量的替比法尼。這些量將取決于所得IV制劑將是否用于單劑量施用或者其將是否用于連續(xù)IV施用。

該制劑優(yōu)選包含其它的一些環(huán)糊精或其衍生物。也可使用其它增溶劑。優(yōu)選的環(huán)糊精是羥丙基β-環(huán)糊精。也可使用其它環(huán)糊精類。

任選的，也可使用甘露醇或另一糖，例如特里阿糖(trealose)或蔗糖。甘露醇或其它糖確保凍干物質(zhì)的快速溶解。當(dāng)不存在甘露醇時(shí)，會(huì)觀察到一些僅緩慢溶解的膠狀聚集物。在甘露醇存在下，這些聚集物不會(huì)出現(xiàn)或者出現(xiàn)較小的量。此外，甘露醇確保改善凍干物質(zhì)的外觀形狀。沒(méi)有甘露醇時(shí)，凍干物質(zhì)可出現(xiàn)破裂，使得凍干物質(zhì)從外觀上看少有吸引人的外觀。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供治療全身性(in general)和血液惡性腫瘤以及特別是實(shí)體癌的方法。

本發(fā)明提供了抑制細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長(zhǎng)的方法，其通過(guò)施用本發(fā)明的藥物制劑。細(xì)胞異常生長(zhǎng)是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴于正常調(diào)節(jié)機(jī)制(例如接觸抑制的喪失)。其包括以下的異常生長(zhǎng)：(1)腫瘤細(xì)胞(腫瘤)表達(dá)活化的ras癌基因；(2)腫瘤細(xì)胞，其中ras蛋白由于另一基因的致癌突變而被活化；(3)其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞，其中發(fā)生ras活化。此外，文獻(xiàn)中認(rèn)為，ras癌基因不但通過(guò)直接影響腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，而且間接地即促進(jìn)腫瘤誘發(fā)血管生成，而有助于體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)。因此，藥理學(xué)靶向突變體ras癌基因可認(rèn)為是抑制了體內(nèi)實(shí)體瘤生長(zhǎng)，其部分地通過(guò)抑制腫瘤誘發(fā)血管生成實(shí)現(xiàn)。

本發(fā)明還提供了抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法，其通過(guò)將本發(fā)明的本藥物制劑施用于需要該治療的受試者，例如哺乳動(dòng)物(更特別地是人)。特別是，本發(fā)明提供了抑制表達(dá)活化ras癌基因的腫瘤生長(zhǎng)的方法，其通過(guò)施用本發(fā)明的藥物制劑?？梢员灰种频哪[瘤的不限制的實(shí)例是，肺癌(例如腺癌)、胰腺癌(例如胰腺癌如外分泌腺的胰腺癌)、結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、淋巴系的造血腫瘤(例如急性淋巴細(xì)胞性白血病、B-細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤)、髓細(xì)胞性白血病(例如急性骨髓性白血病(AML))、甲狀腺(例如小囊)癌、骨髓增生異常綜合征(MDS)、間質(zhì)源腫瘤(例如纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤)、黑素瘤、畸胎癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、皮膚良性腫瘤(例如角化棘皮瘤)、乳腺癌、腎癌、卵巢癌、膀胱癌、表皮癌。

本發(fā)明還提供了抑制良性和惡性增殖性疾病的方法，其中ras蛋白由于基因中的致癌突變而被異常地活化，即ras基因自身未通過(guò)突變至致癌突變而活化成致癌型，所述的抑制是通過(guò)將本文所述的藥物制劑施用于需要該治療的受試者而完成的。例如，良性增殖障礙神經(jīng)纖維瘤病，或者其中ras因酪氨酸激酶癌基因的突變或過(guò)表達(dá)而被活化的腫瘤，它們可通過(guò)本發(fā)明的藥物制劑而被抑制。

因此，本發(fā)明公開了用作藥物的本發(fā)明的藥物制劑，以及式(I)的這些化合物在制備用于治療一種或多種上述病況的藥物中的用途。

術(shù)語(yǔ)和定義

為提供更簡(jiǎn)要的說(shuō)明，本文給出的一些數(shù)量表述未用術(shù)語(yǔ)“約”限定。應(yīng)理解為，不論此術(shù)語(yǔ)“約”是否明確使用，本文給出的每一個(gè)數(shù)量表示實(shí)際給出的值，并且它還表示接近此給出值，這是根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員可合理推知的，包括由于此給出值的試驗(yàn)和/或測(cè)定條件的近似值。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“受試者”是指動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人，其為治療、觀察或試驗(yàn)的對(duì)象。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“治療有效量”表示活性化合物或藥物的量，其在組織系統(tǒng)、動(dòng)物或人中誘發(fā)由研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師探求的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)答，此應(yīng)答包括所治疾病或障礙的至少一種癥狀減輕，和/或所治疾病或障礙的至少一種癥狀的發(fā)生率和/或嚴(yán)重度減少。

術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”是指具有相同分子式和相同共價(jià)鍵合原子順序但空間取向不同的異構(gòu)體。

術(shù)語(yǔ)“光學(xué)異構(gòu)體”表示相同結(jié)構(gòu)的異構(gòu)體，其僅在其基團(tuán)的空間排布上不同。光學(xué)異構(gòu)體在不同方向上旋轉(zhuǎn)偏振光的平面。術(shù)語(yǔ)“旋光度”表示光學(xué)異構(gòu)體旋轉(zhuǎn)偏振光平面的程度。

術(shù)語(yǔ)“外消旋物”或“外消旋混合物”表示兩個(gè)對(duì)映體物種的等摩爾混合物，其中每一分離的種類以相反方向旋轉(zhuǎn)偏振光平面以致該混合物沒(méi)有旋光度。

術(shù)語(yǔ)“對(duì)映體”表示一種立體異構(gòu)體，它與其鏡像不是不可疊合的。術(shù)語(yǔ)“非對(duì)映體”表示不是對(duì)映體的立體異構(gòu)體。

術(shù)語(yǔ)“手性分子”表示具有至少一個(gè)對(duì)映體對(duì)的分子。這是與非手性分子相反的，該非手性分子可以與其鏡像疊合。

手性分子的兩個(gè)不同鏡像體也稱為左旋的(左手的，縮寫L)或右旋的(右手的，縮寫D)，這取決于它們以何種方式旋轉(zhuǎn)偏振光。符號(hào)“R”和“S”表示在立體源(stereogenic)碳原子周圍的基團(tuán)的構(gòu)像。

由外消旋混合物分離到的對(duì)映體富集形式的實(shí)例包括右旋對(duì)映體，其中該混合物基本上沒(méi)有左旋異構(gòu)體。在本上下文中，基本上沒(méi)有表示左旋異構(gòu)體根據(jù)以下公式，可以(在一個(gè)范圍內(nèi))占少于該混合物的25％、少于10％、少于5％、少于2％或少于1％：

類似地，由外消旋混合物分離到的對(duì)映體富集形式的實(shí)例包括左旋對(duì)映體，其中該混合物基本上沒(méi)有右旋異構(gòu)體。在本上下文中，基本上沒(méi)有表示右旋異構(gòu)體根據(jù)以下公式，可以(在一個(gè)范圍內(nèi))占少于該混合物的25％、少于10％、少于5％、少于2％或少于1％：

術(shù)語(yǔ)“幾何異構(gòu)體”表示取代基原子因碳-碳雙鍵、環(huán)烷基環(huán)或橋接雙環(huán)系統(tǒng)關(guān)系而取向不同的異構(gòu)體。在碳-碳雙鍵兩側(cè)的取代基原子(氫除外)可以是E或Z構(gòu)型。在“E”構(gòu)型中，所述的取代基在碳-碳雙鍵關(guān)系中的對(duì)側(cè)。在“Z”構(gòu)型中，所述的取代基定位在碳-碳雙鍵關(guān)系中的同側(cè)。

與環(huán)系統(tǒng)連接的取代基原子(氫除外)可以是順式或反式構(gòu)型。在“順式”構(gòu)型中，所述取代基在環(huán)平面關(guān)系的同側(cè)；在“反式”構(gòu)型中，所述取代基在環(huán)平面關(guān)系的對(duì)側(cè)。具有“順式”和“反式”種類的混合體的化合物命名為“順/反”。

異構(gòu)表示符號(hào)(“R”、“S”、“E”和“Z”)表示原子構(gòu)型，并且將如文獻(xiàn)中所定義的使用。

本發(fā)明化合物可以通過(guò)異構(gòu)體特異性合成或從異構(gòu)體混合物拆分制備成單一異構(gòu)體。常規(guī)的拆分技術(shù)包括：將異構(gòu)體對(duì)的每一異構(gòu)體的游離堿(或游離酸)使用旋光酸(或堿)結(jié)合形成旋光鹽(接著分步結(jié)晶和游離堿再生)，通過(guò)與適宜的手性助劑反應(yīng)形成異構(gòu)體對(duì)的每一異構(gòu)體的酯或酰胺(接著分步結(jié)晶或色譜分離并除去手性助劑)，或者使用各種公知的色譜法分離中間體或終產(chǎn)物的異構(gòu)體混合物。

此外，本發(fā)明化合物可具有一種或多種多晶形或者無(wú)定形結(jié)晶形式，并且它們也將包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。此外，一些化合物可以與水形成溶劑合物(即水合物)或與普通有機(jī)溶劑(例如有機(jī)酯如乙醇化物等)形成溶劑合物，并且它們也將包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

描述以下實(shí)施例以有助于理解本發(fā)明，并且不希望也不解釋為以任何方式限制本發(fā)明所附權(quán)利要求中所述的內(nèi)容。

實(shí)驗(yàn)部分

制劑

用于凍干的替比法尼10mg/ml可注射溶液(制劑1)

用于重構(gòu)(reconsititute)替比法尼可注射凍干粉的溶液(制劑2)

構(gòu)櫞酸一水合物 1.97mg

無(wú)水磷酸氫二鈉 4.44mg

注射用水qs ad 1000μl

使pH＝6.0±0.5

制劑的制備

制劑1

將10ml的制劑1填充到20ml管形瓶中，再冷凍干燥(每瓶100mg替比法尼)。使用之前，將凍干粉溶解于8.6ml的制劑2中，獲得10ml的替比法尼10mg/ml可注射溶液(pH～4-5)。然后將這一替比法尼10mg/ml溶液用0.9％NaCl溶液稀釋成需要濃度(0.5至2mg/ml)。

制劑1的pH值是非常酸的，以便(1)為了增溶替比法尼，(2)制備期間具有最小量的R110127形成(優(yōu)選地冷溫度10℃下進(jìn)行制備)。

當(dāng)用制劑2重構(gòu)時(shí)，將羥丙基-β-環(huán)糊精加至制劑1中以增溶替比法尼。重構(gòu)溶液的pH值為4.5。如果不存在羥丙基-β-環(huán)糊精，在此pH值下，替比法尼會(huì)沉淀。在此pH值下，向外周靜脈(手臂)輸注期間局部刺激的風(fēng)險(xiǎn)是可接受的水平。

在人體試驗(yàn)中，當(dāng)施用較長(zhǎng)時(shí)間(例如24小時(shí))時(shí)，在輸注位置發(fā)現(xiàn)有一些血栓性靜脈炎。這可能是由于羥丙基-β-環(huán)糊精本身而非載體引起的。因此決定不通過(guò)外周靜脈而通過(guò)中央靜脈施用。中央靜脈具有更高的血貯量(debit)，從而輸液的混合和稀釋更快、更高。由于當(dāng)通過(guò)中央靜脈輸注時(shí)，輸液的pH值較不關(guān)鍵，確定用WFI(注射用水)重構(gòu)而不用制劑2重構(gòu)。通過(guò)將制劑1的冷凍干燥粉末用WFI重構(gòu)獲得的溶液的pH值為～3。該重構(gòu)溶液可通過(guò)中央靜脈施用。

制備方法

(a)制劑1的制備(10L批量)

(1)向適宜的容器中加入2kg的羥丙基-β-環(huán)糊精。

(2)向(1)中加入500g甘露醇。

(3)向(2)中加入8kg注射用水，攪拌直至溶解。

(4)向(3)中加入164.0g HCl 10％，攪拌至均勻。

(5)向(4)中加入100g R115777，混合成溶液。

(6)經(jīng)無(wú)菌0.22μm濾膜過(guò)濾。

(7)將10ml的(6)填充到20ml管形瓶中。

(b)制劑1的冷凍干燥

(8)塞住管形瓶，轉(zhuǎn)移到凍干盤(lyo trays)。

(9)將(8)轉(zhuǎn)移到冷凍干燥機(jī)。

(10)冷凍干燥：-冷凍：-40℃，環(huán)境壓力

-首次干燥：10℃，0.1mbar

-第二次干燥：30℃，0.01mbar

(11)壓瓶。

臨床試驗(yàn)

方法和材料

此隨機(jī)、標(biāo)簽公開(open-label)、對(duì)照試驗(yàn)是根據(jù)良好臨床操作規(guī)范(good clinical practice)進(jìn)行的。在該試驗(yàn)之前獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并且患者在參與的知情同意書上簽字。

替比法尼是以100-mg口服片劑或含有100mg替比法尼和2.0g羥丙基-β-環(huán)糊精(HPβCD)的瓶裝凍干粉劑提供的。靜脈輸注前立即用制劑2重構(gòu)該凍干粉。將此等分部分稀釋于0.9％NaCl，再通過(guò)注射器以適宜的輸注管線施用藥物。

研究受試者

病理學(xué)確認(rèn)為癌癥的18歲或更大的男性和女性，對(duì)治愈性治療不順從，他們是本項(xiàng)研究的入選者。要求患者具有ECOG(東方協(xié)作腫瘤集團(tuán)，Eastern Cooperative Oncology Group)體質(zhì)狀態(tài)≤2。其它要求包括在入組研究之前至少4周內(nèi)無(wú)放射治療和/或化學(xué)治療(對(duì)于亞硝基脲和絲裂霉素C為6周)，充分的口服攝食以維持合理的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)。

如果有明顯異常的血液狀態(tài)，即由以下判斷的：中性白細(xì)胞計(jì)數(shù)＜1,500/mm³、血小板計(jì)數(shù)＜100,000/mm³、血清膽紅素＞2.0mg/dL、轉(zhuǎn)氨酶＞5倍的規(guī)定正常值上限、或者肌酸酐＞1.5mg/dL，則排除這樣的患者。在口服施用替比法尼期間，不允許同時(shí)施用質(zhì)子泵抑制劑(例如奧美拉唑、蘭索拉唑、泮托拉唑)(僅在循環(huán)1中，當(dāng)進(jìn)行PK評(píng)價(jià)時(shí)，以避免任何可能的干擾)。進(jìn)行過(guò)胃腸(GI)道手術(shù)而容易因受損胃酸或脫離上部GI道而干擾藥物吸收的患者未入選。根據(jù)研究者的意見(jiàn)，任何并發(fā)癥的存在均將成為參與本項(xiàng)研究的風(fēng)險(xiǎn)，并且特定級(jí)別≥2的外周神經(jīng)病當(dāng)作不合格患者。

研究計(jì)劃

本研究第一(劑量確定)期的目標(biāo)是檢驗(yàn)充分耐受的靜脈劑量方案。期望此方案相當(dāng)于50％-60％的臨床相關(guān)口服劑量(200mg)，其基于在健康男性志愿者中預(yù)先試驗(yàn)確定的絕對(duì)生物利用度。第一組3名受試者接受接下來(lái)不間斷的4天連續(xù)的替比法尼治療：30mg作2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.，于第1-4天；接著200mg作口服施用b.i.d.，于第5-8天；接著每天60mg作連續(xù)輸注，于第9-12天。類似地，第二組3名受試者接受類似的4天替比法尼治療：60mg作2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.，接著200mg作口服施用b.i.d.，接著每天120mg作連續(xù)靜脈輸注。在每一個(gè)所述的4-天口服或i.v.治療之間沒(méi)有清洗(washout)期。

在所述組中第二和第三名受試者僅在第一受試者完成第一靜脈和口服治療(即8-天期間)而無(wú)劑量限制毒性(DLT)時(shí)才開始。如果在第一或第二組中DLT發(fā)生于3名受試者中的1名，則將3名追加的受試者加到那組中。如果超過(guò)1名以上受試者經(jīng)歷DLT(在首先的3名受試者中或在延長(zhǎng)組的6名受試者中)，將劑量遞增終止，在那組中的其它受試者以同一劑量完成他們的治療。

本研究第一(i.v.-口服跨接)期是在不同的患者組中完成的。將全身暴露于替比法尼，接著所選的2-小時(shí)和連續(xù)靜脈方案(從前面的劑量確定期)與200-mg b.i.d.口服方案之后暴露比較。當(dāng)劑量確定期的第二組的至少2名受試者直至第21天尚未觀察到DLT，則開始所述跨接期。為了，補(bǔ)償潛在的順序作用，在所選靜脈方案中，將總計(jì)24名受試者隨機(jī)以1∶1比率分配到兩個(gè)治療程序中的一個(gè)中。

順序1∶100mg b.i.d.作2-小時(shí)靜脈輸注施用，于第1-4天；接著200mg口服片劑b.i.d.，于第5-8天；然后200mg/天作連續(xù)4-天靜脈輸注施用，于第9-12天。

順序2∶200mg/天作連續(xù)4-天靜脈輸注施用，于第1-4天；接著200mg口服片劑b.i.d.，于第5-8天；然后100mg b.i.d.作2-小時(shí)靜脈輸注施用，于第9-12天。

口服劑量的替比法尼是在攝食后立即給予。替比法尼的輸注是通過(guò)前臂外周靜脈或較高劑量時(shí)通過(guò)中央脈管線施用的。

血漿取樣和分析

在劑量確定期和跨接期，藥物動(dòng)力學(xué)取樣是在每一治療的第4天從早晨給藥開始的10-小時(shí)期間進(jìn)行的。全血樣品是在口服施用之前即刻以及口服施用之后0.5、1、2、3、4、6、8和10小時(shí)取樣。對(duì)于2-小時(shí)靜脈輸注，血液樣品是在給藥之前即刻以及給藥之后1、2(即正好在輸液結(jié)束之前)、2.25、3、4、6、8和10小時(shí)取樣。血液樣品是在連續(xù)靜脈輸注開始之前即刻以及連續(xù)靜脈輸注開始之后2、4、6、8和10小時(shí)取樣。

每一PK樣品收集的血液最少7mL。將全血樣品立即置于冰中，并在采集之后2小時(shí)內(nèi)離心(10min，1000xg)。將分離的血漿立即于≤-18℃下冷凍直至分析。

將血漿樣品在室溫下解凍，再使用以前公開的方法對(duì)各個(gè)樣品分析替比法尼。向1-ml份的人血漿中加入200ng的內(nèi)標(biāo)(R121550，一種結(jié)構(gòu)類似物)。加入1ml的NaOH(0.1M)之后，將樣品用4ml的含有10％異戊醇的庚烷萃取兩次。將合并的有機(jī)相用2ml的HCl(2M)反萃取。用濃氨堿化之后，水相用5ml的含有5％異戊醇的庚烷萃取一次。在氮?dú)夂?5℃下將此萃取物蒸發(fā)，再將殘余物溶解于100微升的注入溶劑(乙酸銨0.01M/乙腈/甲醇；50/25/25)。將15μl萃取物注入配有240nm波長(zhǎng)UV檢測(cè)器的HPLC(Agilent)中。在填充3μm C18BDS-Hypersil(Alltech)的10em x 4.6mm色譜柱中進(jìn)行分離。在0.8ml/min的流速下，以0.01M乙酸銨/乙腈(52/48)的等度開始洗脫，直到感興趣的化合物洗脫，接著梯度至90％乙腈?？偟倪\(yùn)行時(shí)間為14min。此分析在2.00至5000ng/ml的范圍內(nèi)有效。

替比法尼的代謝物，尤其是R130525、R107252和R104209，是使用LC-MS/MS測(cè)定的。這些代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)表示于圖11。為了測(cè)定葡萄糖醛酸化代謝物的存在，還在用大腸桿菌β-葡萄糖醛酸酶(Boehringer Ingelheim GmbH，Ingelheim，德國(guó))脫結(jié)合(deconjugation)之后分析血漿樣品。以如下說(shuō)明制備樣品：每份0.2mL人血漿或每份1.0mL的稀釋的、脫結(jié)合的血漿樣品中加入3種內(nèi)標(biāo)以每種5ng的混合物：穩(wěn)定的同位素標(biāo)記的化合物R198838用于替比法尼和R130525；兩種結(jié)構(gòu)類似物R107252和R121704分別用于R101763和R104209。加入1mL的0.1M NaOH之后，將樣品用3mL的含有10％異戊醇的庚烷萃取兩次。將合并的有機(jī)級(jí)分在氮?dú)庀抡舭l(fā)，再將該殘余物重構(gòu)于100μL的甲醇和100μL的0.002M乙酸銨的混合物中。在C₁₈BDS-Hypersil 3μm(3.2mm I.D.×50mm)柱上進(jìn)行色譜分離。注射體積為25μL。等度流動(dòng)相是由0.002M甲酸銨(甲酸調(diào)至pH4)/乙腈(44/56)組成，泵速為0.5mL/分鐘。通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜法用Turboionspray電離(正離子模式)檢測(cè)。以下質(zhì)量躍遷用于監(jiān)測(cè)不同的化合物和內(nèi)標(biāo)物：替比法尼：489.1→407.1；R198838：492.1→407.1；R130525：475.1→393.1；R101763：394.0→139.0；R104209+R107252：408.0→139.0；以及R121704：422.1→139.0。脫結(jié)合之后對(duì)于每一代謝物在0.50-1250ng/ml的范圍內(nèi)以及對(duì)于替比法尼在10.0-25000ng/ml的范圍內(nèi)，該分析是有效的。

替比法尼蛋白結(jié)合分析

將替比法尼用[¹⁴C]在不對(duì)稱碳原子上特異性地標(biāo)記。在第4天連續(xù)靜脈輸注替比法尼開始之后4小時(shí)，從24名患者取7-mL血樣。血漿用[¹⁴C]-替比法尼以500ng/ml加強(qiáng)。在配備相同的大-1(macro-1)特富龍(Teflon)池和Diachema 10.17透析膜(MW截止值為10,000)的Dianorm系統(tǒng)中，將該加強(qiáng)的血漿樣品經(jīng)用pH 7.17的0.067M磷酸鹽緩沖液在下37℃經(jīng)平衡透析4小時(shí)。以一式兩份的100-μl份的加強(qiáng)的血漿在平衡透析之前和之后測(cè)定放射性水平；并在透析之后、在Packard Tri-Carb 1900TR液體閃爍譜儀上，以與甲醇混合的透析池的緩沖液隔室中的內(nèi)容物1000-μl的一式兩份測(cè)定放射性水平。用比色雙縮脲(biureet)法(試劑盒為Roche Diagnostics 1929917)測(cè)定總蛋白濃度。用比色溴甲酚綠法試劑盒Roche Diagnostics 1970909測(cè)定白蛋白濃度。用免疫-比濁法(試劑盒為Roche Diagnostics 1557602)測(cè)定α₁-酸糖蛋白濃度。所有這些測(cè)定是在Roche Hitachi Modular分析儀上進(jìn)行的。

如通過(guò)放射性測(cè)定透析池的緩沖液(C_u)隔室和血漿(C)隔室所測(cè)定的，非結(jié)合替比法尼的分?jǐn)?shù)(f_u)是以非結(jié)合濃度(C_u)與總濃度(C)的比值計(jì)算的：f_u＝C_u/C。結(jié)合分?jǐn)?shù)f_b＝1-f_u。

非隔室藥代動(dòng)力學(xué)分析

通過(guò)非隔室方法使用WinNonlin第3.1版程序(Pharsight Corporation，Cary，NC)，分析了從每一施用期的第4天早晨給藥開始的10-小時(shí)替比法尼的各個(gè)血漿濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)。從0至10小時(shí)時(shí)間的濃度對(duì)時(shí)間曲線下面積(AUC_0-10h)是使用線性梯形法計(jì)算的。最大血漿濃度(C_max)、穩(wěn)態(tài)血漿濃度(C_ss，僅對(duì)于連續(xù)靜脈輸注)、以及達(dá)到血漿濃度峰值時(shí)間(t_max)為觀測(cè)值。替比法尼口服施用后的生物利用度是基于AUC_0-10h值根據(jù)[AUC_po×DOSE_iv/(AUC_iv×DOSE_po)]×100％計(jì)算的。

統(tǒng)計(jì)分析

人口統(tǒng)計(jì)信息概括為中值、最小值和最大值。替比法尼及其代謝物的藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)也使用描述統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行概括。替比法尼口服和靜脈施用之后，來(lái)自可得到全部3個(gè)治療的藥代動(dòng)力學(xué)樣品的受試者的全身暴露量(血漿C_max和AUC_0-10h)是使用ANOVA來(lái)評(píng)價(jià)的。對(duì)于替比法尼的C_max和AUC_0-10h，計(jì)算了在靜脈輸注(試驗(yàn))對(duì)口服施用(參照)的最小二乘法平均比值附近的估計(jì)點(diǎn)和對(duì)應(yīng)90％置信區(qū)間。使用SAS第6.12版統(tǒng)計(jì)軟件程序(SAS Institute，Cary，NC)，用對(duì)數(shù)-變換的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行該分析。

臨床評(píng)價(jià)

取得完整的病歷，在基線和治療期間進(jìn)行體格檢查(包括生命體征)、血液學(xué)檢測(cè)和臨床化學(xué)檢測(cè)。為評(píng)價(jià)心血管安全性，在篩查、第一周期和治療結(jié)束時(shí)記錄12-極線(lead)E.C.G.。雖然目標(biāo)的腫瘤應(yīng)答不是本研究的主要目標(biāo)，仍嘗試獲得適合的測(cè)量結(jié)果以評(píng)價(jià)應(yīng)答。根據(jù)一般毒性標(biāo)準(zhǔn)(Common Toxicity Criteria，CTC，第2.0版)，對(duì)所有不良事件和臨床相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室異常進(jìn)行分級(jí)。

結(jié)果

受試者配置情況

總計(jì)入組32名受試者(10名男性和22名女性)；6名受試者參與劑量確定期，26名受試者參與跨接期。在此項(xiàng)研究中31名受試者被診斷為晚期實(shí)體瘤。1名受試者有高危骨髓增生異常綜合征。在跨接期，12名受試者隨機(jī)分配為接受治療順序1(2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d./口服施用b.i.d./連續(xù)靜脈輸注)，14名受試者接受治療順序2(連續(xù)靜脈輸注/口服施用b.i.d./2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.)。隨機(jī)分配到治療順序1的1名受試者在第4天從本項(xiàng)研究中退出，原因是違反協(xié)議規(guī)定；治療順序2的1名受試者在第8天退出，原因是由于疾病進(jìn)展的肝衰竭。

招募到本研究的32名受試者的人口數(shù)據(jù)概述于表I(圖1)?；颊吣挲g范圍為35至70歲，體重范圍為48至92kg，身高范圍為149至176cm。第3組(跨接期)的兩個(gè)隨機(jī)分組之間沒(méi)有明顯差異。

替比法尼靜脈劑量的測(cè)定

第一組由3名受試者組成，他們接受4-天替比法尼方案：30mg每天兩次作2-小時(shí)靜脈輸注，接著200mg每天兩次作口服施用，再每天60mg作連續(xù)輸注。平均地，與在這些個(gè)體接受200mg口服劑量之后的暴露量相比較，基于AUC_0-10h用30mg b.i.d.作2-小時(shí)靜脈輸注和每天60mg作連續(xù)靜脈輸注的替比法尼全身暴露量分別低約64％和59％(表II至IV)(圖2至4)。靜脈施用之后未觀察到劑量限制毒性。因此，靜脈施用劑量被升高到下一劑量水平。

在第二組中，3名另外的受試者接受4-天方案：60mg替比法尼每天兩次作2-小時(shí)靜脈輸注，接著每天120mg作連續(xù)輸注。與200mg口服劑量之后的暴露量相比較，在這些靜脈方案之后替比法尼全身暴露量分別低約47％和46％(表II至IV)(圖2至4)。此外，在這組中未觀察到DLT。根據(jù)這些結(jié)果，每天兩次100mg作2-小時(shí)輸注施用的方案和200-mg/天連續(xù)輸注被選定為靜脈至口服跨接研究。

替比法尼的血漿藥代動(dòng)力學(xué)

正如所期望的，替比法尼血漿濃度-時(shí)間圖的形狀依賴于施用途徑和給藥方案(圖1)?？诜┯煤?-小時(shí)靜脈輸注之后替比法尼的血漿峰濃度明顯。相比之下，藥物施用期間連續(xù)靜脈輸注產(chǎn)生相對(duì)恒定的血漿濃度而無(wú)明顯峰。

最大血漿濃度是在口服施用200mg b.i.d.的替比法尼達(dá)4個(gè)連續(xù)日之后約2小時(shí)觀察到的(表IV)(圖4)。在29名受試者中t_max的范圍為0.5至3小時(shí)；1名受試者最大濃度在8小時(shí)。4天b.i.d.口服給藥之后，C_max和AUC_0-10h算術(shù)平均值(±SD，n＝24)分別為994±487ng/mL和3990±1671ng·h/mL。

當(dāng)100mg劑量作2-小時(shí)靜脈輸注給予時(shí)，與200mg口服劑量相比，觀察到更高的替比法尼血漿濃度(表IV)(圖4)。平均地，當(dāng)替比法尼作2-小時(shí)靜脈輸注施用時(shí)(100mg b.i.d.)，比當(dāng)口服施用時(shí)(200mg b.i.d.)，C_max和AUC_0-10h值分別高出48.0％和19.3％(表IV)(圖4)。90％置信區(qū)間落的上限在80％至125％的生物等效性范圍之外。與口服施用之后相比，2-小時(shí)靜脈輸注之后觀察到的更高暴露量不被認(rèn)為是臨床顯著的。

口服施用(200mg b.i.d.)和連續(xù)靜脈輸注(每天200mg)之后第4天的平均AUC_0-10h值相似(表V)(圖5)。90％置信區(qū)間的下限落在80％至125％的范圍內(nèi)；然而，擴(kuò)大的上限稍微超出了這一范圍(表V)(圖5)。根據(jù)由AUC_0-10h測(cè)定的總?cè)肀┞读?，連續(xù)輸注給藥的效果與口服途徑給藥相似。然而，圖形的形狀是不同的，連續(xù)輸注之后未出現(xiàn)替比法尼峰濃度。

劑量標(biāo)準(zhǔn)化之后，口服片劑制劑的平均絕對(duì)生物利用度(口服對(duì)2小時(shí)i.v.)為46.3％。類似地，口服片劑制劑的平均絕對(duì)生物利用度(口服對(duì)連續(xù)靜脈輸注)為40.9％。

作連續(xù)靜脈輸注(200mg/天)或者作2-小時(shí)靜脈輸注(100mg b.i.d.)施用之后，替比法尼全身暴露是可比的。此外，盡管血漿濃度-時(shí)間圖的形狀不同，平均AUC_0-10h值是相似的。90％置信區(qū)間的上限和下限(81.1％至100.3％)落在80％至125％的范圍內(nèi)。

總之，當(dāng)該化合物作口服片劑(200mg b.i.d.)、經(jīng)2-小時(shí)靜脈輸注(100mg b.i.d.)、或經(jīng)連續(xù)靜脈輸注(200mg/天)施用時(shí)，由給藥之后在10-小時(shí)間隔期間血漿AUC_0-10h所測(cè)定的替比法尼全身暴露量是可比的。通過(guò)3次治療觀察到平均AUC_0-10h值的狹窄范圍(3990至4487ng·h/mL)。當(dāng)考慮圖形的形狀時(shí)，2-小時(shí)靜脈輸注更加相似于口服施用。

血漿中替比法尼的蛋白結(jié)合

在全部分析的樣品中，替比法尼廣泛地與血漿蛋白結(jié)合(圖2)。在連續(xù)靜脈輸注開始之后4小時(shí)抽取的血漿樣品中，平均游離(未結(jié)合)分?jǐn)?shù)為0.62％(范圍為0.45至0.88％)。替比法尼的未結(jié)合分?jǐn)?shù)不依賴于211ng/mL至812ng/mL范圍內(nèi)的總藥物血漿濃度。從某些受試者在口服施用之后或2-小時(shí)靜脈輸注之后取得的樣品，其蛋白結(jié)合沒(méi)有可用的數(shù)據(jù)。然而，在200mg b.i.d.口服施用達(dá)4天之后在10小時(shí)給藥間隔期間，中值血漿濃度在159ng/mL至788ng/mL的范圍內(nèi)。

血清白蛋白、α₁-酸糖蛋白和總蛋白的平均濃度(范圍)分別為4.1g/100mL(3.1至4.7g/mL)、131mg/100mL(90至218mg/100mL)和6.8g/100mL(4.7至7.9g/mL)。

血漿中替比法尼的代謝產(chǎn)物

替比法尼代謝產(chǎn)物的血漿藥代動(dòng)力學(xué)是在口服片劑(200mg b.i.d.)、2-小時(shí)靜脈輸注(60和100mg b.i.d.)、或連續(xù)靜脈輸注(120和200mg/天)施用4天之后于第4、8和12天進(jìn)行分析的。分析的代謝產(chǎn)物包括R130525、R101763、R104209、替比法尼-葡萄糖醛酸、R130525-葡萄糖醛酸、R104209-葡萄糖醛酸。這些代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)已由Garner RC et al確證。在全身循環(huán)中觀察到的主要代謝產(chǎn)物為R130525和替比法尼-葡萄糖醛酸(圖3)。靜脈途徑測(cè)定的替比法尼的主要和次要代謝產(chǎn)物與口服施用的那些相同。

一般地，替比法尼-葡萄糖醛酸代謝產(chǎn)物的全身暴露量(C_max和AUC_0-10h)隨靜脈施用的替比法尼劑量的增加而增加(表VI)(圖6)。平行比較在第12天替比法尼-葡萄糖醛酸代謝產(chǎn)物暴露量沒(méi)有從前面11天施用累積(數(shù)據(jù)未顯示)。替比法尼-葡萄糖醛酸相對(duì)于替比法尼的AUC_0-10h值的平均比值為：口服施用為18.6，100mg 2-小時(shí)靜脈輸注為7.5，200mg連續(xù)靜脈輸注為8.6?？傮w上，與靜脈施用相比，口服給予替比法尼之后在血漿中葡萄糖醛酸對(duì)母體化合物的濃度比更高。這可能是由于通過(guò)肝臟的首過(guò)效應(yīng)(即，母體化合物在全身吸收之前即損失)，此首過(guò)效應(yīng)與經(jīng)口服途徑給藥有關(guān)。

R130525代謝產(chǎn)物的全身暴露量(C_max和AUC_0-10h)隨靜脈施用的替比法尼劑量的增加而增加(表VII)(圖7)。R130525相對(duì)于替比法尼的AUC_0-10h值的平均比值為：口服施用為五分之一，2-小時(shí)靜脈輸注和連續(xù)靜脈輸注約為十分之一。

口服施用200mg替比法尼之后，替比法尼的其它代謝產(chǎn)物也在血漿中測(cè)定，包括：R101763(C_max：14.8ng/mL，AUC_0-10h：101ng·h/mL)、R104209(C_max：69.7ng/mL，AUC_0-10h：447ng·h/mL)、R130525-葡萄糖醛酸(C_max：53.0ng/mL，AUC_0-10h：320ng·h/mL)、R10176-葡萄糖醛酸(C_max：12.0ng/mL，AUC_0-10h：63.9ng·h/mL)、R104209-葡萄糖醛酸(C_max：64.0ng/mL，AUC_0-10h：434ng·h/mL)。這些代謝物的濃度比R130525和替比法尼-葡萄糖醛酸的濃度更低。靜脈施用之后這些代謝物的暴露量低于口服施用之后的暴露量。

臨床評(píng)價(jià)

對(duì)全部受試者進(jìn)行了毒性評(píng)價(jià)。一名受試者在3天之后發(fā)現(xiàn)她不符合本項(xiàng)研究資格而退出；沒(méi)有不良事件的報(bào)道。一名受試者有骨髓增生異常綜合征。此受試者有3-4級(jí)嗜中性白血球減少癥的時(shí)期，通過(guò)劑量減少和推遲處理。血小板計(jì)數(shù)保持正常。未觀察到明顯的非血液學(xué)毒性。

在9/30名患者(30％)中觀察到3或4級(jí)藥物相關(guān)性血液學(xué)毒性嗜中性白血球減少癥。在1名患者(3％)中觀察到發(fā)熱性嗜中性白血球減少癥。主要的藥物相關(guān)性非血液學(xué)毒性(主要是1級(jí))為疲勞(60％)、惡心(40％)、食欲減退(20％)、嘔吐(17％)和腹瀉(13％)。在3名患者中觀察到靜脈炎，全部是通過(guò)外周小靜脈途徑IV推注給藥；當(dāng)使用中央靜脈IV推注給藥時(shí)未觀察到靜脈炎。

對(duì)31名受試者進(jìn)行了有效性評(píng)價(jià)：MDS的受試者有8個(gè)月的血液學(xué)改善(血紅蛋白持續(xù)增加，其根據(jù)International Working Group標(biāo)準(zhǔn)對(duì)MDS的應(yīng)答)。未觀察到客觀的腫瘤應(yīng)答，并且14名受試者疾病穩(wěn)定達(dá)至少6個(gè)月。

討論

“劑量確定″期的目的是確定替比法尼的靜脈劑量方案，此方案將產(chǎn)生與200mg口服施用一天兩次相比相似的暴露量。更一般地說(shuō)，此目的是確定靜脈劑量和時(shí)間表，此靜脈劑量和時(shí)間表將提供如目前口服施用所產(chǎn)生的相似作用的充分暴露量。在低劑量靜脈方案的第一組和第二組中，替比法尼的全身暴露量比200mg口服施用的全身暴露量低得多。在本項(xiàng)研究的“跨接”期，考慮到在這些低劑量方案之后沒(méi)有劑量限制毒性，最后的靜脈施用劑量被升高到100mg b.i.d.作2-小時(shí)輸注和200mg/天作連續(xù)輸注。

平均地，當(dāng)替比法尼作口服片劑(200mg b.i.d.)、2-小時(shí)靜脈輸注(100mg b.i.d.)或連續(xù)靜脈輸注(200mg/天)施用時(shí)，替比法尼的暴露量(AUC_0-10h)是可比的并且在一狹窄的范圍內(nèi)(3990至4487ng·h/mL)。當(dāng)考慮2個(gè)靜脈方案的圖形形狀時(shí)，2小時(shí)輸注更加接近于模仿的口服施用。

口服施用200mg替比法尼b.i.d.劑量之后，平均C_max和AUC_0-10h值分別為994ng/mL和3990ng·h/mL。這與前面口服施用150-和300-mg的替比法尼每天兩次的研究非常符合(平均C_max分別為443和974；平均AUC_0-12h值分別為2495和4674ng·h/mL)。

在進(jìn)食條件下施用替比法尼片劑的平均口服生物利用度為46.3％(就2-小時(shí)靜脈輸注b.i.d.而言)和40.9％(就連續(xù)靜脈輸注而言)。這些結(jié)果代表了近似絕對(duì)口服生物利用度，因?yàn)樵谧詈笏幬锸┯弥笱獫{樣品僅采集了10小時(shí)。然而，清楚的是，當(dāng)與食物施用時(shí)替比法尼具有相對(duì)良好的生物利用度。

以前人體研究表明，替比法尼經(jīng)過(guò)廣泛代謝，并且未變化的母體化合物在血漿中占相對(duì)較小的組成?？诜┯弥?，未變化的替比法尼的濃度比未沉淀樣品中的總放射性濃度低，平均為四十二分之一，并且比脫蛋白樣品低，約為八分之一。在尿中沒(méi)有未變化的藥物排泄，并且在糞便(faces)中替比法尼回收低于7％的口服施用劑量。在本項(xiàng)研究中獲得一致的結(jié)果。替比法尼-葡萄糖醛酸的血漿AUC_0-10h值比替比法尼高，是3-至30-倍。由于替比法尼在其結(jié)構(gòu)中具有氨基和酮基，直接結(jié)合是可期待的。重要的是，用NIH 3T3H-ras細(xì)胞系和法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶作體外研究表明，替比法尼的葡萄糖醛酸-代謝產(chǎn)物不是法呢基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑。在本項(xiàng)研究和以前的研究中，在患者血漿中測(cè)定了通過(guò)氧化生物轉(zhuǎn)化形成的替比法尼的其它代謝產(chǎn)物，包括R130525和R104209及其各自的葡萄糖醛酸化結(jié)合物，以及R101763。

替比法尼的兩種優(yōu)勢(shì)代謝產(chǎn)物即葡萄糖醛酸結(jié)合物和N-脫烷基化物R130525的暴露量隨所施用的替比法尼靜脈劑量的增加而增加。在所研究的劑量范圍內(nèi)這些途徑顯然未飽和。每一途徑施用之后R130525的相對(duì)暴露量是可以比較的。相反，葡萄糖醛酸化代謝產(chǎn)物的血漿濃度在口服給藥之后比靜脈施用之后高，大約是2倍?？诜┯弥笤诟闻K中的首過(guò)代謝期間更廣泛的葡萄糖醛酸化最有可能解釋替比法尼-葡萄糖醛酸相對(duì)濃度的這種途徑-依賴性差異。此外，本項(xiàng)研究確證的代謝產(chǎn)物與施用途徑無(wú)關(guān)。該結(jié)果還說(shuō)明了首過(guò)代謝對(duì)每一代謝產(chǎn)物暴露量的代謝產(chǎn)物-特異性影響。

在此試驗(yàn)中，癌癥患者離體測(cè)量的替比法尼的血漿蛋白結(jié)合值非常接近于用5名健康男子血漿樣品體外試驗(yàn)獲得的值(99.22％結(jié)合)。在此體外研究中，將來(lái)自這些健康受試者的空白血漿樣品1000ng/mL的¹⁴C-替比法尼加強(qiáng)，并且測(cè)定方法與當(dāng)前的試驗(yàn)中所使用的相同。替比法尼的體外血漿蛋白結(jié)合還與100至5000ng/mL范圍內(nèi)的總替比法尼濃度無(wú)關(guān)。

總之，2-小時(shí)靜脈方案的血漿濃度-時(shí)間圖形與口服施用之后的圖形非常相似。替比法尼的全身暴露量當(dāng)每天兩次給予100mg作2-小時(shí)靜脈輸注或者經(jīng)口服途徑給予200mg時(shí)的給藥之后最初10小時(shí)是可比的。沒(méi)有與靜脈替比法尼相關(guān)的罕見(jiàn)的不良事件。