本發(fā)明屬于天然植物提取物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物的制備方法。

背景技術(shù)：

辣椒，別名：牛角椒、長辣椒、菜椒、燈籠椒，拉丁文名：Capsicum annuum L.，茄科、辣椒屬一年或有限多年生草本植物。為重要的蔬菜和調(diào)味品，種子油可食用、果亦有驅(qū)蟲和發(fā)汗之藥效。在中國主要分布在四川，貴州，湖南，云南，陜西、河北、新疆和內(nèi)蒙古等地。我國是世界主要的辣椒出口國，出口量居世界前列，生產(chǎn)的干辣椒已銷往日本、俄羅斯、歐洲、非洲等國家和地區(qū)。

辣椒營養(yǎng)豐富，其中維生素C含量在蔬菜中位于首位，還有其他多種營養(yǎng)成分；干辣椒可以加工成辣椒粉、辣椒絲、辣椒油，從辣椒中提取的辣椒紅色素是無毒無害的天然著色劑，辣椒中的辛辣成分廣泛應(yīng)用于餐飲、醫(yī)藥等行業(yè)。

我們通過對辣椒的化學成分進行分析研究，發(fā)現(xiàn)辣椒中含有一種非常重要的生物活性物質(zhì)—神經(jīng)酰胺，已知神經(jīng)酰胺是細胞膜的組成成分—鞘磷脂的基本單位，又是體內(nèi)一類重要的生物活性物質(zhì)，具有屏障，粘合，保濕，提高免疫和防癌抗癌的作用?，F(xiàn)在對神經(jīng)酰胺的開發(fā)應(yīng)用主要是在化妝品中作為一種保濕劑，近年來神經(jīng)酰胺產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于化妝品和制藥行業(yè)中。

含有神經(jīng)酰胺成分的產(chǎn)品有天然和化學合成兩類，化妝品方面應(yīng)用以天然神經(jīng)酰胺產(chǎn)品為主；又因動物來源的神經(jīng)酰胺產(chǎn)品因瘋牛病、禽流感的影響，安全性被廣泛質(zhì)疑，急需植物來源的神經(jīng)酰胺產(chǎn)品化妝品及制藥業(yè)的市場需求，具有廣闊前景；因神經(jīng)酰胺在生物體中含量較少，尋找神經(jīng)酰胺原料來源成為神經(jīng)酰胺產(chǎn)品研究開發(fā)首要問題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物的制備方法，該方法通過從辣椒中提取神經(jīng)酰胺類物質(zhì)，工藝簡單，可控。本發(fā)明制備方法從辣椒中提取了神經(jīng)酰胺類成分，為辣椒精深加工綜合利用提供了一條新途經(jīng)。

本發(fā)明的目的之一是提供一種含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物的制備方法，包括以下步驟：

含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）將辣椒粉用有機溶劑提取，得到提取液；

（2）提取液過濾后加入堿性水溶液，攪拌、靜止、分離出有機溶劑層；

（3）向有機溶劑層加入酸性水溶液，攪拌、靜止、分離出有機溶劑層；

（4）負壓下加熱濃縮除去有機溶劑得一次濃縮物；

（5）向一次濃縮物中加入已烷攪拌后靜止、過濾除去雜質(zhì)物，將濾液在負壓下加熱濃縮除去已烷得二次濃縮物；

（6）再向上述二次濃縮物中加入丙酮，攪拌、過濾、洗滌濾出物并真空干燥，得到含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物。

本發(fā)明所述步驟（2）中的堿性水溶液為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀的水溶液，質(zhì)量濃度為0.1-2.0%，加入體積為提取液體積的1/5-1/2。

本發(fā)明所述步驟（3）中的酸性水溶液為磷酸和/或檸檬酸的水溶液，質(zhì)量濃度為0.5-3.0%，加入體積為提取液體積的1/5-1/1。

本發(fā)明所述步驟（1）中的有機溶劑為石油醚、乙醚、乙酸乙酯中的任意一種或幾種。

本發(fā)明所述步驟（1）中的辣椒粉為以辣椒為原料，涼曬后去柄去籽，粉碎得到，辣椒粉為20-80目；所述步驟（1）中的有機溶劑加入量為辣椒粉質(zhì)量的5-10倍體積，所述質(zhì)量單位為kg，所述體積單位為L；萃取溫度為30-60℃；萃取時間為1.5-2.5小時。

本發(fā)明所述步驟（2）中的攪拌時間為0.5-1.5小時，靜止時間為0.5-1.5小時；所述步驟（3）中的攪拌時間為1.0-3.0小時，靜止時間為0.5-1.5小時。

本發(fā)明所述步驟（4）中，加熱溫度35-55℃，負壓0.095MPa。

本發(fā)明所述步驟（5）中已烷加入體積為一次濃縮物質(zhì)量的5-10倍體積，所述質(zhì)量單位為kg，所述體積單位為L；所述步驟（6）中丙酮加入量為二次濃縮物質(zhì)量的3-15倍體積，所述質(zhì)量單位為kg，所述體積單位為L；

本發(fā)明所述步驟（5）中攪拌時間為0.5-1.5小時，靜止時間為0.5-1.5小時；加熱溫度50-55℃，負壓0.095MPa；所述步驟（6）中攪拌時間為0.5-1.5小時；靜止時間為0.5-1.5小時，真空干燥溫度為5-20℃。

本發(fā)明所述步驟（2）、步驟（3）、步驟（5）、步驟（6）中的攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘。

本發(fā)明提供的一種辣椒中的神經(jīng)酰胺，特征波譜數(shù)據(jù)分析顯示，其結(jié)構(gòu)組成如下：

辣椒提取物中神經(jīng)酰胺成分質(zhì)譜法定性分析方法：

儀器和質(zhì)譜條件：超高效液相色譜串聯(lián)四級桿飛行時間質(zhì)譜儀（UPLC/Q-TOF-MS）；色譜柱watersC18柱（150mm×2.1mm，1.7μm）；流動相體積比：乙腈/異丙醇/水=1：3：6；梯度洗脫；柱溫40℃；流速：0.2ml/min；進樣量：5μL。

辣椒中的神經(jīng)酰胺類成分在堿性水溶液中受溫度和時間的影響，會造成含量損失；辣椒有機溶劑提取液先用堿性水溶液處理，再用酸性水溶液處理，能夠降低神經(jīng)酰胺類成分的過程損失和除去雜質(zhì)物。

采用上述技術(shù)方案產(chǎn)生的有益效果在于：1、通過研究我們首次從辣椒中提取分離得到神經(jīng)酰胺類成分，并采用質(zhì)譜法進行定性分析；2、經(jīng)過大量的試驗發(fā)現(xiàn)，辣椒中的神經(jīng)酰胺類成分在堿性水溶液中受溫度和時間的影響，會造成含量損失；辣椒有機溶劑提取液先用堿性水溶液處理，再用酸性水溶液處理，能夠降低神經(jīng)酰胺類成分的過程損失和除去雜質(zhì)物；3、我國是辣椒種植大國，產(chǎn)銷量居世界前列，充足的辣椒原料可滿足規(guī)?；崛∩窠?jīng)酰胺產(chǎn)品需要；4、這種從辣椒中提取神經(jīng)酰胺的工藝方法，為辣椒精深加工綜合利用提供了一條新途經(jīng)。

附圖說明

圖1為實施例1中得到提取物中神經(jīng)酰胺的高分辨率質(zhì)譜圖。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明。

實施例1

（1）稱取2.0千克涼曬后辣椒，去柄去籽，粉碎為20-80目辣椒粉后重量為1.10千克；加入盛有5.5升乙酸乙酯的容器內(nèi)，60℃提取1.5小時；

（2）過濾后得到乙酸乙酯提取液5.2升，加入2.0%氫氧化鈉水溶液2.6升，攪拌1.5小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止1小時，分離得到乙酸乙酯提取液；

（3）向乙酸乙酯提取液中加入0.5%磷酸水溶液2.5升，攪拌0.5小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止0.5小時，分離得到乙酸乙酯提取液；

（4）在溫度55℃，負壓0.095MPa下濃縮除去殘留溶劑，得到一次濃縮物68.4克；

（5）向一次濃縮物中加入已烷520毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止0.5小時，過濾得到濾液500毫升；在溫度50℃，負壓0.095MPa下濃縮除去殘留溶劑，得到二次濃縮物65.5克；

（6）再向二次濃縮物中加入丙酮250毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止時間為1小時，過濾后用丙酮300毫升分三次洗滌丙酮濾出物；然后將丙酮濾出物在5℃真空干燥后，得到含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物1.22克，其中，神經(jīng)酰胺含量為2.65%。

實施例2

（1）稱取2.0千克涼曬后辣椒，去柄去籽，粉碎為20-80目辣椒粉后重量為1.12千克；加入盛有7.5升石油醚的容器內(nèi)，50℃提取2小時；

（2）過濾后得到石油醚提取液7.2升，加入1.0%氫氧化鈉水溶液2.0升，攪拌1小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止1小時，分離得到石油醚提取液；

（3）向石油醚提取液中加入1.5%檸檬酸水溶液2.0升，攪拌1小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止1小時，分離得到石油醚提取液；

（4）在溫度45℃，負壓0.095MPa下濃縮除去殘留溶劑，得到一次濃縮物67.0克；

（5）向一次濃縮物中加入已烷480毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止0.5小時，過濾得到濾液，在溫度52℃，負壓0.095MPa下濃縮除去殘留溶劑，得到二次濃縮物64.5克；

（6）再向二次濃縮物中加入丙酮300毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止時間為1.5小時，過濾后再用丙酮360毫升分三次洗滌丙酮濾出物；然后將丙酮濾出物在10℃真空干燥后，得到含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物0.61克，其中，神經(jīng)酰胺含量為3.31%。

實施例3

（1）稱取2.0千克涼曬后辣椒，去柄去籽，粉碎為20-80目辣椒粉后重量為1.07千克；加入盛有8.0升乙醚的容器內(nèi)，40℃提取2小時；

（2）過濾后得到乙醚提取液7.5升，加入0.8%氫氧化鈉水溶液2.0升，攪拌1小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止1小時，分離得到乙醚提取液；

（3）向乙醚提取液中加入2.0%磷酸水溶液2.0升，攪拌1小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止1.5小時，分離得到乙醚提取液；

（4）在溫度35℃，負壓0.095MPa下濃縮除去殘留溶劑，得到一次濃縮物61.3克；

（5）向一次濃縮物中加入已烷500毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止0.5小時，過濾得到濾液，在溫度53℃，負壓0.095MPa下濃縮除去殘留溶劑，得到二次濃縮物59.5克；

（6）再向二次濃縮物中加入丙酮300毫升，攪拌1小時，，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止時間為1小時，過濾后再用丙酮330毫升分三次洗滌丙酮濾出物；然后將丙酮濾出物在15℃真空干燥后，得到含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物0.38克，其中，神經(jīng)酰胺含量為5.32%。

實施例4

（1）稱取2.0千克涼曬后辣椒，去柄去籽，粉碎為20-80目辣椒粉后重量為1.20千克；加入盛有10升混合溶劑（石油醚和乙酸乙酯等體積混合后）的容器內(nèi)，30℃提取2.5小時；

（2）過濾后得到混合溶劑提取液9.5升，加入0.1%氫氧化鈉水溶液1.9升，攪拌0.5小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止0.5小時，分離得到混合溶劑提取液；

（3）向混合溶劑提取液中加入3.0%檸檬酸水溶液1.52升，攪拌1.5小時，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止1.5小時，分離得到混合溶劑提取液；

（4）在溫度35℃，負壓0.095MPa下蒸餾除去殘留溶劑，得到一次濃縮物73.0克；

（5）向一次濃縮物中加入已烷500毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止0.5小時，過濾得到濾液，在溫度55℃，負壓0.095MPa下蒸餾除去殘留溶劑，得到二次濃縮物71.2克；

（6）再向二次濃縮物中加入丙酮250毫升，攪拌1小時，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分鐘，靜止時間為1.5小時，過濾后再用丙酮300毫升分三次洗滌丙酮濾出物；然后將丙酮濾出物在20℃真空干燥后，得到含神經(jīng)酰胺成分的辣椒提取物0.78克，其中，神經(jīng)酰胺含量為2.58%。

以上實施例僅用以說明而非限制本發(fā)明的技術(shù)方案，盡管參照上述實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解：依然可以對本發(fā)明進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明的精神和范圍的任何修改或局部替換，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當中。