本發(fā)明涉及植物提取物，具體地說(shuō)，涉及藤黃提取物在治療肺動(dòng)脈高壓中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)病因復(fù)雜，由多種心、肺或肺血管疾病引起。以肺小動(dòng)脈血管重構(gòu)、肺動(dòng)脈血管平滑肌增殖的病理特征。表現(xiàn)為肺循環(huán)壓力和阻力增加，可出現(xiàn)右心負(fù)荷增大，右心功能不全，肺血流減少，從而引起一系列臨床表現(xiàn)，病程中肺動(dòng)脈高壓常呈進(jìn)行性發(fā)展。增強(qiáng)肺動(dòng)脈血管張力導(dǎo)致右心衰的嚴(yán)重威脅人類生命健康的疾病。特別是特發(fā)性動(dòng)脈性PAH患者多在出現(xiàn)癥狀后2年左右才能確診，而確診后的自然病程在2.5-3.4年。PAH分為“原發(fā)性”和“繼發(fā)性”兩類，隨著對(duì)肺動(dòng)脈高壓認(rèn)識(shí)的逐步深入，2003年世界衛(wèi)生組織(WHO)“肺動(dòng)脈高壓會(huì)議”按照病因、病理生理、治療方案及預(yù)后特點(diǎn)對(duì)肺動(dòng)脈高壓進(jìn)行分類，2004年美國(guó)胸科醫(yī)師學(xué)院(ACCP)和歐洲心血管病學(xué)會(huì)(ESC)對(duì)此進(jìn)行了修訂，該分類方法對(duì)肺動(dòng)脈高壓患者的治療具有指導(dǎo)意義。傳統(tǒng)的治療方法包括吸氧、強(qiáng)心、利尿、鈣通道阻滯劑和抗凝劑輔助治療劑等，主要起到癥狀的緩解作用。近年來(lái)靶向治療藥物的研發(fā)與推廣使用(主要包括前列環(huán)素藥物類、磷酸二酯酶-5抑制劑、內(nèi)皮素受體拮抗劑以及新近探索的可溶性鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激動(dòng)劑、5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)子抑制劑、生長(zhǎng)因子抑制劑、Rho激酶抑制劑等)以及活體肺移植等治療方法大大改善了患者的預(yù)后。這些藥物能一定程度的緩解PAH的癥狀，患者接受治療情況下的中位生存時(shí)間僅為2.7年，目前肺動(dòng)脈高壓仍缺乏特效的治愈方法，因此，尋找新的特異性治療藥物顯得尤為重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種治療效果確切，治療成本低的肺動(dòng)脈高壓治療藥物。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

第一方面，本發(fā)明提供了藤黃提取物在制備治療肺動(dòng)脈高壓藥物中的應(yīng)用，以藤黃提取物作為活性成分制備治療肺動(dòng)脈高壓的藥物。

進(jìn)一步地，所述應(yīng)用以藤黃提取物作為唯一活性成分制備治療肺動(dòng)脈高壓的藥物。

更進(jìn)一步地，所述藤黃提取物至少包括結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)所示的化合物A和/或結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)所示的化合物B：

需要說(shuō)明的是，所述藤黃提取物可通過(guò)本領(lǐng)域的常規(guī)方法如醇提、層析等從藤黃(Garcinia morella Desv)等中提取獲得。

所述化合物A和化合物B可通過(guò)商業(yè)途徑購(gòu)買或者利用市售原料，通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中傳統(tǒng)的化合物合成方法合成(所述提取方法可參見(jiàn)公開(kāi)號(hào)為CN105213366A的中國(guó)專利申請(qǐng))。合成后可以通過(guò)柱色譜法、高效液相色譜法或結(jié)晶等方式進(jìn)一步純化。

本發(fā)明還進(jìn)一步提供了結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)所示的化合物A與結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)所示的化合物B在制備治療肺動(dòng)脈高壓藥物中的應(yīng)用。

作為優(yōu)選，所述藥物為口服制劑。本發(fā)明經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將所述藤黃提取物或結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)所示的化合物A或結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)所示的化合物B制備的藥物經(jīng)口灌胃患肺動(dòng)脈高壓的大鼠，具有明顯的治療效果。

本發(fā)明通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所述藤黃提取物與上述化合物對(duì)低氧和藥物誘導(dǎo)所致的肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型有明顯的治療作用。

但需要說(shuō)明的是，本發(fā)明所述的肺動(dòng)脈高壓涵蓋已知多種致病機(jī)理導(dǎo)致的肺動(dòng)脈高壓，如動(dòng)脈性肺動(dòng)脈高壓(包括特發(fā)性、可遺傳性、藥物和毒物所致及新生兒持續(xù)性)、左心疾病相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓(包括心臟收縮功能不全、舒張功能不全和瓣膜病)、肺部疾病或低氧血癥所致肺動(dòng)脈高壓(包括慢性阻塞性肺疾病、肺間質(zhì)性疾病、睡眠呼吸暫停綜合征、慢性高原病)、慢性血栓栓塞性肺動(dòng)脈高壓，以及其他不明因素所致肺動(dòng)脈高壓，其中，對(duì)于低氧血癥所致的肺動(dòng)脈高壓應(yīng)用效果更為顯著。

第二方面，本發(fā)明提供一種治療肺動(dòng)脈高壓的藥物組合物，所述藥物組合物的活性成分為結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)所示的化合物A和/或結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)所示的化合物B。

所述藥物組合物的制劑形式可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括：片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)婌F劑、滴劑、貼劑；優(yōu)選口服劑型，如：膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹劑、膏劑等。所述的口服劑型可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤(rùn)劑，必要時(shí)可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。適宜的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑；適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉；適宜的潤(rùn)滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤(rùn)劑包括十二烷基硫酸鈉。

本發(fā)明所述藥物組合物的治療有效用量介于0.1～500mg/kg體重/天之間。本發(fā)明所述藥物組合物的優(yōu)選有效用量介于0.5～300mg/kg體重/天之間；更優(yōu)選為l0～100mg/kg體重/天之間。所述的“治療有效用量”可用于相關(guān)疾病的單一用藥或聯(lián)合用藥治療。

所述治療肺動(dòng)脈高壓的藥物組合物(藥劑)優(yōu)選使用方法為口服，優(yōu)選的劑量為每天10～50mg/Kg，每天固定的時(shí)間灌胃處理一次。

本發(fā)明的有益效果在于：

本發(fā)明通過(guò)試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)了藤黃提取物抑制肺動(dòng)脈高壓的作用，在藤黃提取物和肺動(dòng)脈高壓的致病的分子機(jī)理研究上做出了新的突破，為防治繼發(fā)性肺動(dòng)脈高壓的新藥篩選和臨床治療提供理論依據(jù)和靶標(biāo)。

本發(fā)明進(jìn)一步確定了藤黃提取物中的結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)所示的化合物A和結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)所示的化合物B對(duì)肺動(dòng)脈高壓的治療作用，尤其適合治療低氧血癥所致的肺動(dòng)脈高壓。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案具有較強(qiáng)的臨床意義，可為肺動(dòng)脈高壓預(yù)防措施和治療方法優(yōu)化提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

附圖說(shuō)明

圖1為低氧處理后對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組大鼠平均肺動(dòng)脈壓和右心室收縮壓的對(duì)比。

圖2為低氧處理后對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組大鼠右心室占比的對(duì)比。。

圖3為低氧處理后對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組大鼠動(dòng)脈中層壁厚比的對(duì)比。

圖4為低氧處理后對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組大鼠管壁中層橫截面積比的對(duì)比。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。需要理解的是以下實(shí)施例的給出僅是為了起到說(shuō)明的目的，并不是用于對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限制。本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不背離本發(fā)明的宗旨和精神的情況下，可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種修改和替換。

下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。

實(shí)施例1化合物A、化合物B對(duì)低氧所致肺動(dòng)脈高壓的影響試驗(yàn)

雄性Sprague Dawley(SD)大鼠購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，體重200±20g，隨機(jī)分為7組(每組n＝10只)(普通飼料購(gòu)自軍科院，每天讓小鼠自由采食)，即第一組正常氧對(duì)照組、第二組缺氧模型對(duì)照組、第二組缺氧模型玉米油對(duì)照組、第四組化合物A低劑量組(10mg/kg/d)、第五組化合物A高劑量組(50mg/kg/d)、第六組藤黃提取物B(10mg/Kg/天)；第七組飼藤黃提取物B(50mg/Kg/天)。正常對(duì)照組大鼠在常壓常氧(21％O₂)環(huán)境飼養(yǎng)，其余各組大鼠置于全自動(dòng)調(diào)節(jié)常壓低氧艙內(nèi)(氧濃度11％O₂)飼養(yǎng)，進(jìn)行不間斷性低氧，持續(xù)6周化合物A和B治療組是建模開(kāi)始2周后，每天灌胃給藥1次，持續(xù)4周。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組在建模開(kāi)始2周后，于每次缺氧前灌胃給予相當(dāng)量的溶劑作為對(duì)照。

1、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)測(cè)定：自大鼠右側(cè)頸外靜脈插入充有肝素溶液(0.9％氯化鈉溶液+肝素10U/m1)的聚乙烯塑料微導(dǎo)管，導(dǎo)管的另一端與微型壓力傳感器相連監(jiān)測(cè)壓力變化，在壓力波形的引導(dǎo)下，導(dǎo)管經(jīng)上腔靜脈進(jìn)入右房、三尖瓣口、右室(RV)，最后進(jìn)入肺動(dòng)脈干，測(cè)定平均肺動(dòng)脈壓(mPAP)及右心室收縮期末壓力(RVSP)等。穩(wěn)定30分鐘后，應(yīng)用POWERLAB多道智能生理信號(hào)采集和記錄系統(tǒng)采集、記錄和分析各項(xiàng)指標(biāo)，結(jié)果如圖1所示。

2、右心室(RV)肥厚指標(biāo)的測(cè)定：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，剖胸取出小鼠心臟，剪去心房組織。沿室間隔邊緣分離出RV，左心室(LV)和室間隔(S)，用濾紙吸干水分后稱量RV，LV和S的重量，以RV/(LV+S)比值來(lái)反映RV肥厚程度(圖2)。

3、肺血管病理檢測(cè)：從右肺下葉相同部位取組織塊，置于10％中性甲醛(pH7.4)中固定2天。常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，蘇木精-伊紅染色及彈力纖維染色(Hart改良法染色彈力纖維，Van Gieson復(fù)染)，光鏡下觀察肺小動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化。并用圖像分析儀測(cè)量彈力纖維染色切片中與呼吸性細(xì)支氣管及肺泡管伴行的肺小動(dòng)脈(直徑小于100μm)的外徑(ED)、動(dòng)脈中層壁厚(MT)、管壁中層橫截面積(MA)、血管管腔橫截面積(VA)和血管總橫截面積(TAA)，然后分別計(jì)算血管壁中層厚度占外徑的百分比(MT％)(圖3)，血管壁中層橫截面積占血管總橫截面積的百分比(MA％)(圖4)，反映肺小血管管壁增厚程度。每只大鼠肺切片共測(cè)量6～10條肺小動(dòng)脈的上述指標(biāo)，計(jì)算出均數(shù)作為該只大鼠的血管指標(biāo)并行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組大鼠肺血管病理指標(biāo)和右心室肥厚的影響

根據(jù)圖2～圖4的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，正常對(duì)照組右心室無(wú)增厚，缺氧對(duì)照組右心室明顯肥厚，右心室肥厚指數(shù)RV/(LV+S)明顯升高。病理檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：缺氧對(duì)照組右心室可見(jiàn)肥大的心肌細(xì)胞，肺小動(dòng)脈壁增厚，管腔狹窄。而藤黃化合物A和B兩個(gè)劑量組都對(duì)肺動(dòng)脈的病理重塑有改善作用，包括減小動(dòng)脈中層壁厚比，管壁中層橫截面積比以及降低右心室肥大，且有一定的劑量依賴性。在同等劑量下藤黃化合物A比化合物B的效果顯著。

所述化合物A與化合物B由藤黃提取物中中分離得到的，經(jīng)驗(yàn)證，藤黃提取物也具有上述功能與作用。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。