本發(fā)明公開了一種醫(yī)用水凝膠眼貼的制備方法，屬于醫(yī)用輔助材料制備技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，全身麻醉因其效果確切、患者安靜舒適等優(yōu)點受到了廣大手術(shù)醫(yī)生的歡迎，并且在臨床上得到了推廣和應(yīng)用。臨床上，全身麻醉、面神經(jīng)麻痹、深度昏迷的患者時常伴有因角膜失去知覺出現(xiàn)的功能性眼瞼閉合不全引發(fā)的暴露性角膜炎，患者出現(xiàn)畏光、流淚、結(jié)膜炎和異物感的局限性眼痛，所以在臨床護理中應(yīng)采取相應(yīng)的保護措施。

水凝膠是利用親水性高分子材料溶于水得到溶液，再經(jīng)交聯(lián)后得到。它是一類具有三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的聚合物，在水中能夠吸收大量水分而溶脹，并在溶脹之后能夠繼續(xù)保持其原有結(jié)構(gòu)而不被溶解。其主要成份是以親水性樹脂，純化水，保濕劑，交聯(lián)劑遇水膨脹的交聯(lián)聚合物。主要用于外用凝膠貼劑。

水凝膠貼是當(dāng)今世界上一種科技含量高、應(yīng)用范圍廣、使用方便的新型外用貼敷劑。在七十年代初期，日本、歐洲等國已開始研制醫(yī)用水凝膠貼劑，隨著醫(yī)藥工業(yè)的不斷發(fā)展，這種新劑型近年來在我國有所發(fā)展。

水凝膠貼基質(zhì)載藥量大，保濕性強，與皮膚的相容性好，耐老化，可以反復(fù)揭貼，隨時終止給藥，劑量準確，血藥濃度平衡無峰谷現(xiàn)象，可減少毒副作用，在工業(yè)生產(chǎn)中無有機溶劑污染，符合醫(yī)藥GMP標(biāo)準和國家環(huán)保要求。

但是，現(xiàn)有的醫(yī)用水凝膠眼貼產(chǎn)品透明度較低，不利于護理人員觀察患者情況，且保濕性、生物相容性較差，會對一些皮膚敏感的患者造成一定刺激性，較大程度限制了水凝膠眼貼的使用范圍。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題：針對現(xiàn)有的醫(yī)用水凝膠眼貼產(chǎn)品透明度較低，不利于護理人員觀察患者情況，且保濕性、生物相容性較差，對皮膚敏感的患者造成一定刺激性的問題，提供一種醫(yī)用水凝膠眼貼的制備方法，該方法將牛肉膏、蛋白胨等滅菌培養(yǎng)制得活化培養(yǎng)基，隨后以納豆表面的粘性物質(zhì)為原料，進行活化培養(yǎng)，再置于種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)制得種子菌懸液，然后與檸檬酸、甘油等經(jīng)攪拌發(fā)酵后離心分離，隨后再加入乙醇攪拌過濾，得到水凝膠，將水凝膠與海藻酸鈉、濃硫酸一起攪拌反應(yīng)，得到的海藻酸鈉改性聚谷氨酸與中草藥提取液、透明質(zhì)酸、甘油等攪拌成混合物，隨后倒入模具自然冷卻，再進行冷凍和靜置處理，拆模后即得一種醫(yī)用水凝膠眼貼，本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼保濕效果好、透明度高，且生物相容性好，不會對皮膚造成任何刺激，且適用于各種皮膚敏感的患者，具有較好的應(yīng)用前景。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

（1）依次稱取5～10g牛肉膏、10～20g蛋白胨、5～10g酵母膏、5～10g葡萄糖和15～20g瓊脂放入培養(yǎng)皿中，再加入800～1000mL去離子水，用玻璃棒攪拌均勻，然后轉(zhuǎn)移至滅菌罐中，在100～110℃高溫滅菌10～20min，制得活化培養(yǎng)基；

（2）用接種環(huán)挑取2～4g納豆表面的粘性物質(zhì)到活化培養(yǎng)基上，之后轉(zhuǎn)移至恒溫培養(yǎng)箱，在30～40℃培養(yǎng)24～48h，從活化后的菌種中挑取5～8環(huán)有拉絲的菌落轉(zhuǎn)移至種子培養(yǎng)基中，于35～40℃搖床振蕩培養(yǎng)16～24h，得到種子菌懸液，再以10～20%的接種量的種子菌懸液接種到發(fā)酵罐中，再稱取10～20g檸檬酸、5～10g甘油、2～4gL-谷氨酰胺、6～8g谷氨酸和500～600mL去離子水一起倒入發(fā)酵罐中，攪拌均勻后，于30～40℃溫度下，發(fā)酵2～3天；

（3）發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液移入到離心機中，以6000～8000r/min進行離心處理20～30min，得到上清液，再加入100～200mL無水乙醇，攪拌10～20min，過濾，得到水凝膠，將水凝膠加入到帶有溫度計和回流裝置的三口燒瓶中，將燒瓶置于水浴鍋中，升溫至60～70℃，再依次加入10～20g海藻酸鈉、3～5mL質(zhì)量濃度為98%濃硫酸，攪拌反應(yīng)2～3h，得到海藻酸鈉改性聚谷氨酸；

（4）稱取5～10g紫錐菊、3～5g茯苓加入到多功能提取罐中，再加入400～500mL去離子水浸泡30～40min，升溫至80～90℃，提取40～50min，過濾，得到濾液，將濾液加入到上述海藻酸鈉海藻酸鈉改性聚谷氨酸中，攪拌10～20min，再依次加入5～10g透明質(zhì)酸、3～5g甘油、2～4g蓖麻油，攪拌1～2h，得到混合物，將混合物倒入到模具中，自然冷卻1～2h，得到半成品，然后在-25～-15℃冷凍10～12h，再置于室溫下10～12h，拆模后即得一種醫(yī)用水凝膠眼貼。

所述的種子培養(yǎng)基的組成為3～5g葡萄糖、4～6g蛋白胨、0.5～0.8g氯化鈉、0.5～0.8g牛肉膏、0.5～0.8g酵母膏和800～1000mL去離子水。

本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼透明高，透光率為95～98%，其保濕性好，24h內(nèi)保持含水率在85～90%，且鎖水能力強，有效延長了本發(fā)明的使用時間，可讓患者持續(xù)使用24～48h，經(jīng)檢測，使用本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠眼貼3～5天后，患者未出現(xiàn)皮膚過敏或不適現(xiàn)象。

本發(fā)明的有益效果是：

（1）本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼保濕效果好、透明度高，有利于護理人員觀察患者情況；

（2）本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼生物相容性好，對皮膚無刺激，且制備方法簡單，適合大面積推廣及應(yīng)用。

具體實施方式

首先依次稱取5～10g牛肉膏、10～20g蛋白胨、5～10g酵母膏、5～10g葡萄糖和15～20g瓊脂放入培養(yǎng)皿中，再加入800～1000mL去離子水，用玻璃棒攪拌均勻，然后轉(zhuǎn)移至滅菌罐中，在100～110℃高溫滅菌10～20min，制得活化培養(yǎng)基；隨后用接種環(huán)挑取2～4g納豆表面的粘性物質(zhì)到活化培養(yǎng)基上，之后轉(zhuǎn)移至恒溫培養(yǎng)箱，在30～40℃培養(yǎng)24～48h，從活化后的菌種中挑取5～8環(huán)有拉絲的菌落轉(zhuǎn)移至種子培養(yǎng)基中，于35～40℃搖床振蕩培養(yǎng)16～24h，得到種子菌懸液，再以10～20%的接種量的種子菌懸液接種到發(fā)酵罐中，再稱取10～20g檸檬酸、5～10g甘油、2～4gL-谷氨酰胺、6～8g谷氨酸和500～600mL去離子水一起倒入發(fā)酵罐中，攪拌均勻后，于30～40℃溫度下，發(fā)酵2～3天；待發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液移入到離心機中，以6000～8000r/min進行離心處理20～30min，得到上清液，再加入100～200mL無水乙醇，攪拌10～20min，過濾，得到水凝膠，將水凝膠加入到帶有溫度計和回流裝置的三口燒瓶中，將燒瓶置于水浴鍋中，升溫至60～70℃，再依次加入10～20g海藻酸鈉、3～5mL質(zhì)量濃度為98%濃硫酸，攪拌反應(yīng)2～3h，得到海藻酸鈉改性聚谷氨酸；再稱取5～10g紫錐菊、3～5g茯苓加入到多功能提取罐中，再加入400～500mL去離子水浸泡30～40min，升溫至80～90℃，提取40～50min，過濾，得到濾液，將濾液加入到上述海藻酸鈉海藻酸鈉改性聚谷氨酸中，攪拌10～20min，再依次加入5～10g透明質(zhì)酸、3～5g甘油、2～4g蓖麻油，攪拌1～2h，得到混合物，將混合物倒入到模具中，自然冷卻1～2h，得到半成品，然后在-25～-15℃冷凍10～12h，再置于室溫下10～12h，拆模后即得一種醫(yī)用水凝膠眼貼。

所述的種子培養(yǎng)基的組成為3～5g葡萄糖、4～6g蛋白胨、0.5～0.8g氯化鈉、0.5～0.8g牛肉膏、0.5～0.8g酵母膏和800～1000mL去離子水。

實例1

首先依次稱取5g牛肉膏、10g蛋白胨、5g酵母膏、5g葡萄糖和15g瓊脂放入培養(yǎng)皿中，再加入800mL去離子水，用玻璃棒攪拌均勻，然后轉(zhuǎn)移至滅菌罐中，在100℃高溫滅菌10min，制得活化培養(yǎng)基；隨后用接種環(huán)挑取2g納豆表面的粘性物質(zhì)到活化培養(yǎng)基上，之后轉(zhuǎn)移至恒溫培養(yǎng)箱，在30℃培養(yǎng)24h，從活化后的菌種中挑取5環(huán)有拉絲的菌落轉(zhuǎn)移至種子培養(yǎng)基中，于35℃搖床振蕩培養(yǎng)16h，得到種子菌懸液，再以10%的接種量的種子菌懸液接種到發(fā)酵罐中，再稱取10g檸檬酸、5g甘油、2gL-谷氨酰胺、6g谷氨酸和500mL去離子水一起倒入發(fā)酵罐中，攪拌均勻后，于30℃溫度下，發(fā)酵2天；待發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液移入到離心機中，以6000r/min進行離心處理20min，得到上清液，再加入100mL無水乙醇，攪拌10min，過濾，得到水凝膠，將水凝膠加入到帶有溫度計和回流裝置的三口燒瓶中，將燒瓶置于水浴鍋中，升溫至60℃，再依次加入10g海藻酸鈉、3mL質(zhì)量濃度為98%濃硫酸，攪拌反應(yīng)2h，得到海藻酸鈉改性聚谷氨酸；再稱取5g紫錐菊、3g茯苓加入到多功能提取罐中，再加入400mL去離子水浸泡30min，升溫至80℃，提取40min，過濾，得到濾液，將濾液加入到上述海藻酸鈉海藻酸鈉改性聚谷氨酸中，攪拌10min，再依次加入5g透明質(zhì)酸、3g甘油、2g蓖麻油，攪拌1h，得到混合物，將混合物倒入到模具中，自然冷卻1h，得到半成品，然后在-15℃冷凍10h，再置于室溫下10h，拆模后即得一種醫(yī)用水凝膠眼貼。

所述的種子培養(yǎng)基的組成為3g葡萄糖、4g蛋白胨、0.5g氯化鈉、0.5g牛肉膏、0.5g酵母膏和800mL去離子水。

經(jīng)實例檢測，本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼透明高，透光率為95%，其保濕性好，24h內(nèi)保持含水率在85%,且鎖水能力強，有效延長了本發(fā)明的使用時間，可讓患者持續(xù)使用24h，經(jīng)檢測，使用本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠眼貼3天后，患者未出現(xiàn)皮膚過敏或不適現(xiàn)象。

實例2

首先依次稱取8g牛肉膏、15g蛋白胨、8g酵母膏、8g葡萄糖和18g瓊脂放入培養(yǎng)皿中，再加入900mL去離子水，用玻璃棒攪拌均勻，然后轉(zhuǎn)移至滅菌罐中，在105℃高溫滅菌15min，制得活化培養(yǎng)基；隨后用接種環(huán)挑取3g納豆表面的粘性物質(zhì)到活化培養(yǎng)基上，之后轉(zhuǎn)移至恒溫培養(yǎng)箱，在35℃培養(yǎng)36h，從活化后的菌種中挑取7環(huán)有拉絲的菌落轉(zhuǎn)移至種子培養(yǎng)基中，于38℃搖床振蕩培養(yǎng)20h，得到種子菌懸液，再以15%的接種量的種子菌懸液接種到發(fā)酵罐中，再稱取15g檸檬酸、8g甘油、3gL-谷氨酰胺、7g谷氨酸和550mL去離子水一起倒入發(fā)酵罐中，攪拌均勻后，于35℃溫度下，發(fā)酵2.5天；待發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液移入到離心機中，以7000r/min進行離心處理25min，得到上清液，再加入150mL無水乙醇，攪拌15min，過濾，得到水凝膠，將水凝膠加入到帶有溫度計和回流裝置的三口燒瓶中，將燒瓶置于水浴鍋中，升溫至65℃，再依次加入15g海藻酸鈉、4mL質(zhì)量濃度為98%濃硫酸，攪拌反應(yīng)2.5h，得到海藻酸鈉改性聚谷氨酸；再稱取8g紫錐菊、4g茯苓加入到多功能提取罐中，再加入450mL去離子水浸泡35min，升溫至85℃，提取45min，過濾，得到濾液，將濾液加入到上述海藻酸鈉海藻酸鈉改性聚谷氨酸中，攪拌15min，再依次加入8g透明質(zhì)酸、4g甘油、3g蓖麻油，攪拌1.5h，得到混合物，將混合物倒入到模具中，自然冷卻1.5h，得到半成品，然后在-20℃冷凍11h，再置于室溫下11h，拆模后即得一種醫(yī)用水凝膠眼貼。

所述的種子培養(yǎng)基的組成為4g葡萄糖、5g蛋白胨、0.7g氯化鈉、0.7g牛肉膏、0.7g酵母膏和900mL去離子水。

經(jīng)實例檢測，本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼透明高，透光率為97%，其保濕性好，24h內(nèi)保持含水率在88%，且鎖水能力強，有效延長了本發(fā)明的使用時間，可讓患者持續(xù)使用36h，經(jīng)檢測，使用本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠眼貼4天后，患者未出現(xiàn)皮膚過敏或不適現(xiàn)象。

實例3

首先依次稱取10g牛肉膏、20g蛋白胨、10g酵母膏、10g葡萄糖和20g瓊脂放入培養(yǎng)皿中，再加入1000mL去離子水，用玻璃棒攪拌均勻，然后轉(zhuǎn)移至滅菌罐中，在110℃高溫滅菌20min，制得活化培養(yǎng)基；隨后用接種環(huán)挑取4g納豆表面的粘性物質(zhì)到活化培養(yǎng)基上，之后轉(zhuǎn)移至恒溫培養(yǎng)箱，在40℃培養(yǎng)48h，從活化后的菌種中挑取8環(huán)有拉絲的菌落轉(zhuǎn)移至種子培養(yǎng)基中，于40℃搖床振蕩培養(yǎng)24h，得到種子菌懸液，再以20%的接種量的種子菌懸液接種到發(fā)酵罐中，再稱取20g檸檬酸、10g甘油、4gL-谷氨酰胺、8g谷氨酸和600mL去離子水一起倒入發(fā)酵罐中，攪拌均勻后，于40℃溫度下，發(fā)酵3天；待發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液移入到離心機中，以8000r/min進行離心處理30min，得到上清液，再加入200mL無水乙醇，攪拌20min，過濾，得到水凝膠，將水凝膠加入到帶有溫度計和回流裝置的三口燒瓶中，將燒瓶置于水浴鍋中，升溫至70℃，再依次加入20g海藻酸鈉、5mL質(zhì)量濃度為98%濃硫酸，攪拌反應(yīng)3h，得到海藻酸鈉改性聚谷氨酸；再稱取10g紫錐菊、5g茯苓加入到多功能提取罐中，再加入500mL去離子水浸泡40min，升溫至90℃，提取50min，過濾，得到濾液，將濾液加入到上述海藻酸鈉海藻酸鈉改性聚谷氨酸中，攪拌20min，再依次加入10g透明質(zhì)酸、5g甘油、4g蓖麻油，攪拌2h，得到混合物，將混合物倒入到模具中，自然冷卻2h，得到半成品，然后在-25℃冷凍12h，再置于室溫下12h，拆模后即得一種醫(yī)用水凝膠眼貼。

所述的種子培養(yǎng)基的組成為5g葡萄糖、6g蛋白胨、0.8g氯化鈉、0.8g牛肉膏、0.8g酵母膏和1000mL去離子水。

經(jīng)實例檢測，本發(fā)明制備的醫(yī)用水凝膠眼貼透明高，透光率為98%，其保濕性好，24h內(nèi)保持含水率在90%，且鎖水能力強，有效延長了本發(fā)明的使用時間，可讓患者持續(xù)使用48h，經(jīng)檢測，使用本發(fā)明的醫(yī)用水凝膠眼貼5天后，患者未出現(xiàn)皮膚過敏或不適現(xiàn)象。