本發(fā)明涉及一種醫(yī)用膠黏劑，尤其涉及一種溫度響應型高分子生物醫(yī)用膠黏劑及其合成方法，屬于高分子材料領域和生物醫(yī)學材料領域。

背景技術：

醫(yī)用膠黏劑是一類新型的生物醫(yī)學材料，臨床上已用多種切口膠粘劑代替縫線，其優(yōu)點是方便、快捷，不用拆線，傷口愈合后瘢痕很小。醫(yī)用膠粘劑種類已經(jīng)很多，按照用途可分為軟組織用膠粘劑、牙科用膠粘劑、骨水泥和皮膚膠粘劑等。軟組織用膠粘劑已臨床應用的有α-氰基丙烯酸酯、血纖維蛋白和聚氨酯膠粘劑。但這些膠粘劑也具有一些難以克服的缺點，如α-氰基丙烯酸酯雖然粘合時間短、固化快，但是膠層脆性強、強度低、且分解過程會產(chǎn)生甲醛；血纖維蛋白盡管生物相容性、止血效果好，但強度低、易滲漏。相比之下，高分子水凝膠既具有止血鎮(zhèn)痛作用，也具有良好的生物相容性、彈性和強度。因此，高分子水凝膠作為軟組織膠黏劑的研究逐漸受到研究者的重視。受軟體動物貽貝的啟發(fā)，將鄰苯二酚官能團引入到高分子鏈中，通過化學交聯(lián)原位形成水凝膠體系，具有很好的組織粘合作用，可用于腸、皮膚等軟組織的粘合。已報道的這類水凝膠體系有改性殼聚糖/聚乙二醇、改性殼聚糖/聚醚、殼聚糖/3,4-二羥基苯丙酸、聚乙二醇/聚己內酯/二羥基苯丙酸、檸檬酸/聚乙二醇/多巴胺等。相比于商業(yè)化的醫(yī)用膠黏劑，斷裂強度和抗拉強度分別提高都有較大提高。如Mathiowitz等報道了一種帶有二羥基苯丙氨酸側基的聚丙烯酸衍生物水凝膠型膠黏劑，經(jīng)活體大鼠腸粘結試驗測試，這種新的膠黏劑的斷裂強度和抗拉強度分別提高了2.5和2.8倍。除了類多巴胺結構外，胍基和磷酸膽堿都是帶有電荷的生物有機官能團，可與組織蛋白鏈發(fā)生電荷作用，因而也可用來進行醫(yī)學粘合。Okuro等合成了一種帶有九個胍基的水溶性樹狀分子，可原位與組織蛋白作用而凝膠化，是一種典型的“分子膠水”。Yu等在樹狀聚乙二醇的端基修飾上磷酸膽堿片段，其在粘合時可形成類生物膜，生物相容性好，傷口愈合快。此外，Strehin等用N-羥基琥珀酰亞胺將硫酸軟骨素的羧基酯化，再與伯胺反應，進而以六臂的端氨基聚乙二醇作為交聯(lián)劑形成水凝膠，其可與組織蛋白的氨基共價結合，達到粘合的目的。Serrero等用殼聚糖和改性淀粉(氧化麥芽糖糊精)作為膠黏劑用于組織粘附。然而，這些水凝膠型膠黏劑仍然存在或固化較慢、或強度不足、或易發(fā)生體液滲漏等諸多不足，仍需進一步改善。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有醫(yī)用膠黏劑存在的不足，提供一種固化速度快、降解性能好，黏結強度高的溫度響應型高分子生物醫(yī)用膠黏劑；

本發(fā)明的另一目的是提供上述溫度響應型高分子生物醫(yī)用膠黏劑的合成方法。

一、溫度響應型高分子生物醫(yī)用膠黏劑的合成

本發(fā)明是以多羥基或多氨基超支化聚合物為引發(fā)劑，以四氫呋喃為溶劑，以末端有N-羰基內酸酐（NCA）的氨基酸為功能單體，氮氣保護，于室溫聚合反應48~72h，反應結束后，粗產(chǎn)物用三乙胺-乙醇的混合溶液沉淀而得。

所述末端有N-羰基內酸酐（NCA）的氨基酸為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐（Glu-EG₂-NCA）、L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐（DOPA-NCA）、精氨酸-N-羰基內酸酐（Arg-NCA）、半胱氨酸-N-羰基內酸酐（Cys-NCA）或ε-N-丙烯酰胺賴氨酸-N-羰基內酸酐（AM-Lys-NCA）中至少兩種。

所述多羥基超支化聚合物是以1,4-丁二醇和金屬鉀反應引發(fā)環(huán)氧丙醇開環(huán)，得到超支化聚縮水甘油醚，再加入金屬鉀，反應得到的超支化多羥基聚合物醇鉀。

超支化聚縮水甘油醚的合成見文獻S. Roller, H. Zhou, R. Haag, Mol Divers 2005, 9, 305.），其結構為：

超支化多羥基聚合物醇鉀的結構為：

。

所述多氨基超支化聚合物為超支化聚酰胺-胺，其產(chǎn)品牌號:CYD-130A。

所述引發(fā)劑與功能單體（總量）的摩爾量為1：620~1：1030。

所述功能單體為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐（Glu-EG₂-NCA）、L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐（DOPA-NCA）時，二者的摩爾比為1:0.9~1:1.1。

所述功能單體為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐（Glu-EG₂-NCA）、L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐（DOPA-NCA）、精氨酸-N-羰基內酸酐（Arg-NCA）時，三者的摩爾比為1:0.9:0.58~1:1.1:0.63。

所述功能單體為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐（Glu-EG₂-NCA）、L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐（DOPA-NCA）、精氨酸-N-羰基內酸酐（Arg-NCA）、半胱氨酸-N-羰基內酸酐（Cys-NCA）時，四者的摩爾比為1:0.9:0.58:0.58~1:1.1:0.63:0.63。

所述功能單體為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐（Glu-EG₂-NCA）、L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐（DOPA-NCA）、精氨酸-N-羰基內酸酐（Arg-NCA）、ε-N-丙烯酰胺賴氨酸-N-羰基內酸酐（AM-Lys-NCA）時，四者的摩爾比為1:0.9:0.58:0.58~1:1.1:0.63:0.64。

二、溫度響應型生物醫(yī)用膠黏劑的性能

1、溫敏性測試

測試方法：最低臨界溶解溫度(LCST)是聚合物溫敏性能的重要表征參數(shù)。通過測定聚合物溶液的透光率隨溫度變化的曲線，取當透光率降到起始透光率50%時所對應的溫度定義為其LCST值。聚合物溫敏性能是基于聚合物親水性與疏水性作用的相對平衡。配制濃度為0.3mg/mL的聚合物水溶液，通過紫外可見分光光度計(UV-VIS)在500 nm 處，測定不同溫度下溶液的透光率變化曲線，從而得到其LCST值。

測定結果：通過測定聚合物溶液的透光率隨溫度變化的曲線，可以獲得其最低臨界溶解溫度(LCST)，圖1為以超支化多羥基聚合物醇鉀作引發(fā)劑制備的膠黏劑溶液的透光率隨溫度變化曲線。從圖1中我們可以看出此類聚合物的LCST值大約為33 ℃。圖2為以超支化聚酰胺-胺作引發(fā)劑制備的膠黏劑溶液的透光率隨溫度變化曲線。從圖2中我們可以看出此類聚合物的LCST值大約為31 ℃。

2、黏結性能測試

粘結強度測試方法：豬皮先用0.9%的氯化鈉溶液清洗，再用pH=7.4的PBS緩沖液浸泡過夜，用來測試。將所得的聚合物溶于pH=7.4的PBS緩沖液中，配制為質量分數(shù)為10%，然后將其分別溶于0.06 mg/mL的辣根過氧化物酶和質量分數(shù)為0.06%的過氧化氫溶液中，分別用于兩塊豬皮表面，然后將兩塊豬皮壓在一起，同時給一定的壓力，采用ASTM測試標準，按10 mm/min的速率進行粘在一起的豬皮，直到拉開為止，記錄數(shù)據(jù)，平行測三組。

測試結果：圖3為實施例1-4制備的膠黏劑溶液的黏結強度測試結果。由圖3、圖4的測試結果發(fā)現(xiàn)，隨著測試時間的增加，所制備的膠黏劑黏結強度逐漸上升。同時隨著引入功能單體種類的增加，得到的膠黏劑黏結強度也逐漸上升。這是由于精氨酸中的胍基陽離子可以和蛋白質中的羧基等發(fā)生電荷重合而產(chǎn)生交聯(lián)，半胱氨酸中的巰基可以和蛋白質中的巰基發(fā)生氧化反應生成二硫鍵，同時半胱氨酸中的巰基和丙烯酰胺賴氨酸中的雙鍵可發(fā)生點擊反應，使其黏結強度提高。

圖5為實施例1-4制備的膠黏劑溶液分別在25℃和37℃的條件下的黏結強度測試結果。圖6為實施例5-8制備的膠黏劑溶液分別在25℃和37℃的條件下的黏結強度測試結果。由圖5、圖6的測試結果發(fā)現(xiàn)，37℃時膠黏劑的固化速率明顯比25℃的快。是由于在該物質中引入了二乙二醇單甲醚，使我們得到的膠黏劑具有溫度響應性，從而當溫度達到37℃時，該膠黏劑迅速固化，可以防止體液滲漏。而37℃是正常人體溫度，所以該發(fā)明適合作為醫(yī)用膠黏劑。

綜上所述，本發(fā)明以多羥基超支化醇鉀或超支化聚酰胺-胺為引發(fā)劑，以L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯（Glu-EG₂）和3,4-二羥基苯丙氨酸（DOPA）的殘基作為膠粘基團的超支化聚合物膠粘劑HPGMD，在膠黏劑HPGMD的基礎上，為提高固化速率和粘結強度，引入精氨酸片段，得到膠黏劑HPGMDA/PAMAMGMD；為進一步提高粘結強度，在膠黏劑HPGMDA/PAMAMGMDA的基礎上，分別引入半胱氨酸片段和丙烯?；馁嚢彼崞?，得到膠黏劑HPGMDAC/PAMAMGMDAC及HPGMDAL/PAMAMGMDAL，此膠黏劑可在使用時即時混合。上述膠黏劑的性能優(yōu)于文獻報道的絕大多數(shù)類似仿生高分子膠黏劑。這是由于精氨酸中的胍基可以和蛋白質中的羧基等進行交聯(lián)，半胱氨酸中的巰基可以和蛋白質中的巰基發(fā)生氧化反應生成二硫鍵，同時半胱氨酸中的巰基和丙烯酰胺賴氨酸中的雙鍵可發(fā)生點擊反應，使其抗拉強度增強。另外，此膠黏劑是以人體所需氨基酸為原料，因此具有良好的生物相容性、無毒副作用、在組織內可被降解代謝。

附圖說明

圖1為以超支化多羥基聚合物醇鉀作引發(fā)劑制備的膠黏劑溶液的透光率隨溫度變化曲線。圖2為以超支化聚酰胺-胺作引發(fā)劑制備的膠黏劑溶液的透光率隨溫度變化曲線。

圖3為實施例1-4制備的膠黏劑溶液的黏結強度測試結果。

圖4為實施例5-8制備的膠黏劑溶液的黏結強度測試結果。

圖5為實施例1-4制備的膠黏劑溶液分別在25℃和37℃的條件下的黏結強度測試結果。

圖6為實施例5-8制備的膠黏劑溶液分別在25℃和37℃的條件下的黏結強度測試結果。

具體實施方式

下面通過具體實施例對本發(fā)明溫度響應型生物醫(yī)用膠黏劑的合成方法及性能做進一步說明。

實施例1：HP(DOPA-Glu-EG₂)的制備

Glu-EG₂的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的50 mL三頸燒瓶中加入2.5 g（16.99mmol）谷氨酸和15mL（129.21mmol）的二乙二醇單甲醚，將2 mL濃硫酸加入到恒壓滴液漏斗中，在氮氣保護，0℃的條件下緩慢加入到三頸燒瓶中在冰浴下反應12 h，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物倒入50 mL三乙胺和50 mL乙醇的混合物中，得到白色沉淀，離心，將所的白色沉淀用10mL甲醇溶解，再將溶液倒入100mL的乙醚中的白色沉淀，離心，所得白色沉淀產(chǎn)物，真空干燥，得白色固體即為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯（Glu-EG₂），產(chǎn)率為55%。

Glu-EG2-NCA的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的100 mL三頸燒瓶中加入1 g（4.02mmol）Glu-EG₂以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃30 mL，恒壓滴液漏斗中加入10 mL溶有1.94 g（6.54mmol）三光氣的四氫呋喃溶液。升溫至50 ℃左右，在磁力攪拌下將恒壓滴液漏斗中的三光氣溶液緩慢加入到三頸燒瓶中。反應至溶液成為淡黃色透明溶液后再反應30 min。這時通氮氣將殘余的三光氣及HCl氣體帶入到含有飽和NaOH溶液的吸收裝置中。經(jīng)過尾氣吸收處理后，濃縮反應液，加入適量的正己烷，靜置，有淡黃色固體析出，過濾得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用正己烷和乙酸乙酯重結晶，得到白色晶體即為L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐（Glu-EG₂-NCA）。

DOPA-NCA的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的50mL三頸燒瓶中加入0.5g（2.54mmol）3,4-二羥基苯丙氨酸（DOPA）以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃 20mL，恒壓滴液漏斗中加入10mL 溶有0.5g(1.69mmol)三光氣的四氫呋喃溶液。升溫至50℃左右，在磁力攪拌下將恒壓滴液漏斗中的三光氣溶液緩慢加入到三頸燒瓶中。反應至溶液成為淡黃色透明溶液后再反應30min。這時通氮氣將殘余的光氣及HCl氣體帶入到含有飽和NaOH溶液的吸收裝置中。經(jīng)過尾氣吸收處理后，濃縮反應液，加入適量的正己烷。靜置，有淡黃色油狀物析出，反復沉淀幾次，所得淡黃色油狀物即為L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐（DOPA-NCA）。

HP(DOPA-Glu-EG₂)的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的50 mL三頸燒瓶中加入1.65 g（6.00mmol）L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐(Glu-EG₂-NCA)以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃10 mL，恒壓滴液漏斗中加入用3mL無水四氫呋喃溶解的引發(fā)劑超支化聚縮水甘油醚0.05 g（0.0192mmol），緩慢加入到三頸燒瓶中，反應72h，得淡黃色粘稠狀物質。再在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐(DOPA-NCA)1.34 g（6.00mmol），緩慢加入到三頸燒瓶中，反應72h，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物。在粗產(chǎn)物中加入無水乙醇，產(chǎn)生淡黃色沉淀，所得的淡黃色油狀物即為HP(DOPA-Glu-EG₂)。

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在90 Kpa左右。

實施例2：HP(Arg-DOPA-Glu-EG₂)制備

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG₂-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

HP(DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例1；

Arg-NCA的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的100mL 三頸燒瓶中加入芐氧羰基精氨酸6.6g（21.43mmol）及溶劑四氫呋喃30mL。在恒壓滴液漏斗中加入5mL含有1mL三溴化磷（10.64mmol））的四氫呋喃溶液。氮氣保護，冰浴下滴加到三頸燒瓶中，然后室溫反應16h。反應結束后反應液分層，將反應上層的四氫呋喃液傾倒出來，下層油狀物用大量的四氫呋喃反復洗滌，得到無色透明油狀物為精氨酸-N-羰基內酸酐（Arg-NCA）。

HP(Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的精氨酸-N-羰基內酸酐(Arg-NCA) 0.76 g（3.80mmol），緩慢加入到步驟的三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用無水乙醇洗滌，所得淡黃色油狀物即為HP(Arg-DOPA-Glu-EG₂)。

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在100 Kpa左右。

實施例3：HP(Cys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG₂-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

HP(DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例1；

Arg-NCA的制備：同實施例2；

HP(Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例2；

Cys-NCA的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的100mL三頸燒瓶中加入1 g(8.25mmol)半胱氨酸以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃30mL，恒壓滴液漏斗中加入10mL溶有1.47 g(4.96mmol)三光氣的四氫呋喃溶液。升溫至50 ℃左右，在磁力攪拌下將恒壓滴液漏斗中的三光氣溶液緩慢加入到三頸燒瓶中。反應至溶液成為淡黃色透明溶液后再反應30min。這時通氮氣將殘余的光氣及HCl氣體帶入到含有飽和NaOH溶液的吸收裝置中。經(jīng)過尾氣吸收處理后，濃縮反應液，加入適量的正己烷。靜置，有淡黃色固體析出，過濾得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用正己烷和乙酸乙酯重結晶，得到白色晶體即半胱氨酸-N-羰基內酸酐（Cys-NCA）。

HP(Cys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的半胱氨酸-N-羰基內酸酐( Cys-NCA) 0.56 g(3.80mol)，緩慢加入到步驟的三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用無水乙醇洗滌，得淡黃色油狀物即為HP(Cys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)。

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在108Kpa左右。

實施例4：HP(AM-Lys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG₂-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

HP(DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例1；

Arg-NCA的制備：同實施例2；

HP(Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例2；

AM-Lys-NCA的制備：

丙烯酰胺賴氨酸銅鹽：在裝有磁力攪拌器、溫度計裝置的50mL圓底燒瓶中加入1 g(5.47mmol)賴氨酸鹽酸鹽同時加入12 mL水，在90 ℃下回流，將0.66 g(2.99 mmol)堿式碳酸銅緩慢地加入到賴氨酸鹽酸鹽的溶液中，攪拌10 min，然后冷卻，并過濾不溶性殘留物，在濾液中加入5.8 mL丙酮，然后加入2.74 mL 2 mol/L的氫氧化鉀溶液，將該混合溶液加到裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的100mL三頸燒瓶中，在兩個恒壓滴液漏斗中分別加入0.552 mL(6.79mmol)丙烯酰氯和3.08 mL 2 mol/L的氫氧化鉀溶液，在冰浴下緩慢滴入到反應體系中，反應12 h，過濾丙烯酰胺賴氨酸銅絡合物的沉淀物，依次用水，甲醇，乙醚洗滌。所得到的藍色固體為丙烯酰胺賴氨酸銅絡合物。

丙烯酰胺賴氨酸的制備：將上步所得到的丙烯酰胺賴氨酸銅絡合物0.21 g(0.43mmol)加入到裝有磁力攪拌器、溫度計、氮氣保護裝置的100mL圓底燒瓶中，同時加入3 mL水和3 mL溶有0.079 g (0.54mmol)8-羥基喹啉的氯仿溶液，室溫攪拌12 h左右，就會有綠色沉淀在三氯甲烷層出現(xiàn)，過濾除去沉淀，將濾液轉移到分液漏斗中，除去三氯甲烷層，再用三氯甲烷洗3-4次，將剩下的水層濃縮至白色固體，然后用四氫呋喃和水重結晶，得到白色晶體為丙烯酰胺賴氨酸，產(chǎn)率為45%。

AM-Lys-NCA的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的100mL三頸燒瓶中加入2 g(10.00mmol)上步所得到的丙烯酰胺賴氨酸以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃40mL，同時加入阻聚劑對苯二酚0.011g(0.1mmol)，在恒壓滴液漏斗中加入20mL溶有1.78 g（5.99mmol）三光氣的四氫呋喃溶液。升溫至50 ℃左右，在磁力攪拌下將恒壓滴液漏斗中的三光氣溶液緩慢加入到三頸燒瓶中。反應至溶液成為淡黃色透明溶液后再反應30min。這時通氮氣將殘余的光氣及HCl氣體帶入到含有飽和NaOH溶液的吸收裝置中。經(jīng)過尾氣吸收處理后，濃縮反應液，加入適量的正己烷。靜置，有淡黃色固體析出，過濾得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用正己烷和乙酸乙酯重結晶，得到白色晶體即ε-N-丙烯酰胺賴氨酸-N-羰基內酸酐（AM-Lys-NCA），收率60%。

HP(AM-Lys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的ε-N-丙烯酰胺賴氨酸-N-羰基內酸酐(AM-Lys- NCA) 0.86 g(3.84mmol)，緩慢加入到步驟的三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物用無水乙醇洗滌，得淡黃色油狀物即為HP(AM-Lys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)。其結構式如下：

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在117Kpa左右。

實施例5：PAMAM(DOPA-Glu-EG₂)的制備

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG2-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

PAMAM(DOPA-Glu-EG₂)的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的50 mL三頸燒瓶中加入0.62 g（2.25mmol）L-谷氨酸-β-二乙二醇單甲醚酯-N-羰基內酸酐(Glu-EG2-NCA)以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃10 mL，恒壓滴液漏斗中加入用3mL無水四氫呋喃溶解的引發(fā)劑超支化聚酰胺-胺0.05 g（0.0072mmol），緩慢加入到三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質。再在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的L-3,4-二羥基苯甲基氨基乙酸-N-羰基內酸酐(DOPA-NCA) 0.51 g（2.25mmol），緩慢加入到三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物。在粗產(chǎn)物中加入無水乙醇，產(chǎn)生淡黃色沉淀，所得的淡黃色油狀物即為PAMAM(DOPA-Glu-EG₂)。通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在93 Kpa左右。

實施例6：PAMAM(Arg-DOPA-Glu-EG₂)制備

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG2-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

PAMAM(DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例5；

Arg-NCA的制備：同實施例2；

PAMAM(Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的精氨酸-N-羰基內酸酐(Arg-NCA) 0.29 g（1.44mmol），緩慢加入到步驟的三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用無水乙醇洗滌，所得淡黃色油狀物即為PAMAM(Arg-DOPA-Glu-EG₂)。

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃左右，黏結強度約在102 Kpa左右。

實施例7：PAMAM(Cys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG₂-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

PAMAM(DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例5；

Arg-NCA的制備：同實施例2；

PAMAM(Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例6；

Cys-NCA的制備：在裝有磁力攪拌器、溫度計、恒壓滴液漏斗和氮氣保護裝置的100mL三頸燒瓶中加入1 g(8.25mmol)半胱氨酸以及經(jīng)過無水處理的四氫呋喃30mL，恒壓滴液漏斗中加入10mL溶有1.47 g(4.96mmol)三光氣的四氫呋喃溶液。升溫至50 ℃左右，在磁力攪拌下將恒壓滴液漏斗中的三光氣溶液緩慢加入到三頸燒瓶中。反應至溶液成為淡黃色透明溶液后再反應30min。這時通氮氣將殘余的光氣及HCl氣體帶入到含有飽和NaOH溶液的吸收裝置中。經(jīng)過尾氣吸收處理后，濃縮反應液，加入適量的正己烷。靜置，有淡黃色固體析出，過濾得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用正己烷和乙酸乙酯重結晶，得到白色晶體即半胱氨酸-N-羰基內酸酐（Cys-NCA）。

PAMAM (Cys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的半胱氨酸-N-羰基內酸酐( Cys-NCA) 0.22g(1.44mmol)，緩慢加入到步驟的三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用無水乙醇洗滌，得淡黃色油狀物即為PAMAM(Cys-Arg-DOPA- Glu -EG₂)。

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在110Kpa左右。

實施例8：PAMAM(AM-Lys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：

Glu-EG₂的制備：同實施例1；

Glu-EG₂-NCA的制備：同實施例1；

DOPA-NCA的制備：同實施例1；

PAMAM(DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例5；

Arg-NCA的制備：同實施例2；

PAMAM(Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：同實施例6；

AM-Lys-NCA的制備：同實施例4；

PAMAM(AM-Lys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)的制備：在恒壓滴液漏斗中加入用10mL無水四氫呋喃溶解的ε-N-丙烯酰胺賴氨酸-N-羰基內酸酐(AM-Lys- NCA) 0.33 g(1.44mmol)，緩慢加入到步驟的三頸燒瓶中，反應三天，得淡黃色粘稠狀物質即為粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物用無水乙醇洗滌，得淡黃色油狀物即為PAMAM(AM-Lys-Arg-DOPA-Glu-EG₂)。

通過對聚合物的溫敏性和黏結性能的檢測發(fā)現(xiàn)其響應溫度在37±0.5℃，黏結強度約在120Kpa左右。