本發(fā)明屬于天然藥物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及到一種使用低醇循環(huán)方式從銀杏葉中獲得銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯的方法。
背景技術(shù)：
銀杏葉提取物（黃酮和內(nèi)酯）（Limlclis）是存在于銀杏植物葉片中的一類黃酮類和萜類化合物。2015年國(guó)家藥品食品監(jiān)督管理局對(duì)銀杏葉提取物進(jìn)行相應(yīng)整頓，原來由鹽酸提取銀杏黃酮的工藝被淘汰，使用傳統(tǒng)的甲醇提取工藝，成本很大，這已經(jīng)成為阻礙企業(yè)發(fā)展的瓶頸。因此在這種情況下，一種用低醇提取銀杏黃酮的生產(chǎn)工藝應(yīng)運(yùn)而生。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為銀杏葉提取物的開發(fā)利用提供一條簡(jiǎn)單方便、節(jié)能、環(huán)保的途徑，對(duì)降低試劑耗量、降低環(huán)境污染，減少生產(chǎn)周期提供一種高效提取分離銀杏葉提取物的工藝。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采取的技術(shù)方案如下：
一種從銀杏葉中獲得銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯的方法，其特征在于，使用低醇循環(huán)方式，以銀杏葉為原料，采用20%甲醇熱回流提取，直接層析并收集流出液，再對(duì)流出液進(jìn)行澄清除雜處理、得到的澄清流出液，用于下一批原料的提取，完成循環(huán)提取。
具體來說，本發(fā)明包括如下步驟：
1）獲取原料，其中，原料含量檢測(cè)按2010版藥典方法進(jìn)行檢測(cè)，原料含量要求銀杏黃酮（Flavone）≥0.6%、銀杏內(nèi)酯（Lactone）≥0.25%；
2）對(duì)原料進(jìn)行粉碎處理，原料粗粉至直徑≤3cm；
3）對(duì)原料使用20%甲醇熱浸法提取三次，提取溫度80o C,每次1小時(shí)，料液比1：10：10：7，并最終控制渣中有效成份占原料總目標(biāo)物不得高于10%；
4）提取液板框壓濾，得到清液；清液上層析柱，控制流速為1-1.5bv/h，收集流出液;
5）用2-3bv的純水洗脫層析柱，至顏色透亮，不再有渾濁即可，再用80%甲醇洗脫2.5-3bv;
6）收集80%醇洗脫液并濃縮，濃縮溫度小于80攝氏度，濃縮比重為1.02即可噴粉；
7）用1-1.5bv新甲醇對(duì)層析柱進(jìn)行沖洗，濃縮水沉，清液繼續(xù)上柱；層析柱再用1-1.5bv純水沖至無醇味；
8）收集的流出液進(jìn)行澄清處理，使用10%氫氧化鈉的澄清石灰水，調(diào)流出液ph11-12，過濾得到清液，清液再用草酸調(diào)ph至7，產(chǎn)生鈣鹽沉淀和其他沉淀，靜置30min；
9）過濾處理液，對(duì)清液進(jìn)行適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充甲醇至醇度為20%；
10）處理后的清液繼續(xù)進(jìn)行提取，完成循環(huán)。
本發(fā)明采取了上述方法以后，能夠充分地降低對(duì)甲醇的消耗，減少了環(huán)境污染，減少原料有效物質(zhì)損失和生產(chǎn)周期，是一種高效提取分離銀杏葉提取物的方法，具有很好的技術(shù)效果。
此工藝與傳統(tǒng)工藝相比生產(chǎn)成本大幅下降，生產(chǎn)周期有所減少，原料利用率有所增加，生產(chǎn)污水幾乎沒有產(chǎn)生，而且生產(chǎn)過程沒有使用到鹽酸，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)符合新的規(guī)定是銀杏葉生產(chǎn)廠家的不二之選。
降低成本是生產(chǎn)企業(yè)核心目標(biāo)，使用低醇循環(huán)方式從銀杏葉中獲得銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯的生產(chǎn)工藝滿足目前銀杏葉提取物的生產(chǎn)需求。與傳統(tǒng)工藝相比，提取溶劑采用醇度與醇秏都大幅降低，節(jié)約原料成本。低醇不用濃縮直接層析，在洗脫過程中不用低醇洗脫減少生產(chǎn)周期，同時(shí)吸附后的流出液經(jīng)澄清處理后又用于生產(chǎn)提取，減少了處理廢水的費(fèi)用，并且提高了原料的利用率。
附圖說明
圖1是本發(fā)明的生產(chǎn)工藝流程示意圖。
具體實(shí)施方式
以下將結(jié)合附圖及實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施方式，借此對(duì)本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段來解決技術(shù)問題，并達(dá)成技術(shù)效果的實(shí)現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。需要說明的是，只要不構(gòu)成沖突，本發(fā)明中的各個(gè)實(shí)施例以及各實(shí)施例中的各個(gè)特征可以相互結(jié)合，所形成的技術(shù)方案均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
一種從銀杏葉中獲得銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯的方法，其特征在于包括如下步驟：
1）獲取原料，其中，原料含量檢測(cè)按2010版藥典方法進(jìn)行檢測(cè)，原料含量要求銀杏黃酮（Flavone）≥0.6%、銀杏內(nèi)酯（Lactone）≥0.25%；
2）對(duì)原料進(jìn)行粉碎處理，原料粗粉至直徑≤3cm；
3）對(duì)原料使用20%甲醇熱浸法提取三次，提取溫度80o C,每次1小時(shí)，料液比1：10：10：7，并最終控制渣中有效成份占原料總目標(biāo)物不得高于10%；
4）提取液板框壓濾，得到清液；清液上層析柱，控制流速為1-1.5bv/h，收集流出液;
5）用2-3bv的純水洗脫層析柱，至顏色透亮，不再有渾濁即可，再用80%甲醇洗脫2.5-3bv;
6）收集80%醇洗脫液并濃縮，濃縮溫度小于80攝氏度，濃縮比重為1.02即可噴粉；
7）用1-1.5bv新甲醇對(duì)層析柱進(jìn)行沖洗，濃縮水沉，清液繼續(xù)上柱；層析柱再用1-1.5bv純水沖至無醇味；
8）收集的流出液進(jìn)行澄清處理，使用10%氫氧化鈉的澄清石灰水，調(diào)流出液ph11-12，過濾得到清液，清液再用草酸調(diào)ph至7，產(chǎn)生鈣鹽沉淀和其他沉淀，靜置30min；
9）過濾處理液，對(duì)清液進(jìn)行適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充甲醇至醇度為20%；
10）處理后的清液繼續(xù)進(jìn)行提取，完成循環(huán)。
所述步驟（6）中，在操作嚴(yán)格的條件下，水沖完直接用80%洗脫，節(jié)約生產(chǎn)周期。最終得到銀杏黃酮含量≥24%，銀杏內(nèi)酯≥6%的銀杏提取物產(chǎn)品。
所述步驟（8）中，流出液澄清處理過程，要邊加試劑邊攪拌。
本發(fā)明采取了上述方法以后，能夠充分地降低對(duì)甲醇的消耗，減少了環(huán)境污染，減少原料有效物質(zhì)損失和生產(chǎn)周期，是一種高效提取分離銀杏葉提取物的方法，具有很好的技術(shù)效果。
為了確定本發(fā)明的最佳工藝步驟，發(fā)明人進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究工作，具體實(shí)驗(yàn)情況如下：
1、提取甲醇的醇度
銀杏原料分別采用醇度為80%，60%，40%，20%，0%甲醇熱浸法提取，確定提取環(huán)節(jié)為20%甲醇熱浸法提取1小時(shí)，重復(fù)3次。雖然20%提取率不高，但是醇耗相對(duì)較低，在提取三次的情況下，20%醇提取率可以達(dá)到90%。而水的提取率只有65%。
2、不同種類醇對(duì)提取和層析的影響
對(duì)比20%甲醇和20%乙醇提取率，以及分別層析，樹脂對(duì)有效物質(zhì)的吸附率，20%乙醇由于成本高，吸附率較底，故被淘汰。依據(jù)該實(shí)驗(yàn)，20%甲醇提取銀杏葉并層析為最佳條件。
3、不同百分含量的甲醇對(duì)提取和層析的影響
對(duì)比10%，20%，40%的甲醇對(duì)銀杏葉提取率和樹脂吸附率，10%的甲醇提取率最低，吸附率最大，而40%甲醇提取率與20%甲醇提取率相當(dāng)，且吸附率最小，但層析后有效物質(zhì)含量20%醇最多。因此20%甲醇為最佳提取醇度。
4、流出液澄清處理?xiàng)l件，過程注意事項(xiàng)
流出液理論上依然是20%醇液，但由于提取過程和層析過程中有損失，通常流出液的醇度只有15%左右，因此提取前要補(bǔ)充甲醇。其次，由于流出液含有葉綠素，蛋白質(zhì)糖，銀杏酸類等雜質(zhì)，以及含有少量的被包裹的銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯，因此使用堿液調(diào)ph可以使包裹的銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯分散出來，并且銀杏酸和Ca2+可以產(chǎn)生沉淀。由于澄清石灰水難以讓渾濁液變澄清，所以必須加入氫氧化鈉，ph分別為7-8、9-10、11、12、13-14時(shí)，ph=7-8沒有沉淀，ph=9-10有沉淀，液體顏色加深乳濁液存在，有效成分未分散開，ph=11-12有沉淀，不渾濁。Ph=13-14有沉淀，不渾濁。所以調(diào)ph=11-12最佳。過濾后清液調(diào)酸會(huì)使葉綠素，蛋白質(zhì)等析出，多余的ca2+和草酸結(jié)合沉淀，并且能與其他雜質(zhì)絮凝?？紤]到提取，因此調(diào)ph=7，靜置一小時(shí)后，過濾液進(jìn)行下一批次提取。
最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。