本發(fā)明屬于骨質疏松治療領域，具體涉及一種改善骨質疏松的組合物及其用途。
背景技術：
骨質疏松發(fā)病率已躍居世界各種常見病的第七位，也有報道顯示居常見疾病的第六位。骨質疏松癥主要患病人群是中老年人，特別是絕經后的女性。我國人口老齡化加快，老年人口所占比例不斷增加，加上環(huán)境的惡化等因素，骨質疏松癥的發(fā)病率將明顯增加。目前我國骨質疏松癥發(fā)病絕對人數已居世界首位。
老年人骨質疏松發(fā)病率較高，全球有2億骨質疏松患者，骨質疏松嚴重影響老年人生活質量，50歲以上人群中，1/2的女性、1/5的男性在他們的一生中都會出現(xiàn)骨質疏松性骨折，一旦患者經歷了第一次骨質疏松性骨折，繼發(fā)性骨折的危險明顯加大。我國老年人居于世界首位，現(xiàn)有骨質疏松癥患者9000萬，占總人口的7.1％。隨著社會老齡化的進程，骨質疏松癥的發(fā)病率呈上升趨勢，根據劉彩念等人的調查分析預測：隨著老齡人口的增加，骨質疏松患者也不斷增加，到2020年時患病人數將超過1.5億。以上預測只是考慮未來人口數和老年人口比例對骨質疏松發(fā)病人數的影響，但實際上還有其它因素的影響，比如其它疾病或藥物等一些因素誘發(fā)的繼發(fā)性骨質疏松將會增加，發(fā)病人數將會超過以上預測值。那時全世界一半以上的骨質疏松性骨折將發(fā)生在亞洲，絕大部分在我國。
異位鈣化亦稱異位骨化。除正常生理鈣化外，在骨骼組織以外發(fā)生的鈣鹽沉積。這種改變通常發(fā)生于骨骼的肌腱附著處、韌帶、血管壁、骨筋膜等處。鈣離子由骨骼系統(tǒng)的析出，常導致骨質疏松癥的發(fā)生，故有的學者主張將異位鈣化作為骨質疏松的間接征象。
血管鈣化(血管異位鈣化)是動脈粥樣硬化、糖尿病、腎病、衰老和高血壓等多種疾病的病理生理基礎,是心血管疾病的主要危險因子。血管異位鈣化和骨質疏松往往同時發(fā)生，且隨著年齡的增加而明顯增加，尤其是在老年人、雌激素缺乏和自身免疫性疾病中較多見，也是老齡化社會中致殘、致死的主要原因。近來人群縱向研究發(fā)現(xiàn)血管鈣化和骨質疏松的程度平行：骨質喪失越多，血管鈣化進程越嚴重，兩者之間有著密切的聯(lián)系。但是血管鈣化的病理機制尚無形成系統(tǒng)性的研究，針對性的治療藥物也十分缺乏。
目前大多數骨質疏松的人群補鈣比較盲目，特別是老年病人，缺乏醫(yī)生指導，在不知情是否具有異位骨化病癥或風險的情況下用常規(guī)的補鈣劑補鈣，盡管可獲得較高的血鈣濃度，但鈣并不在骨組織沉積，而是在異位沉積，發(fā)生或加重異位鈣化，特別是血管鈣化最容易發(fā)生，大大增加心血管事件風險。
技術實現(xiàn)要素：
為解決上述技術問題，本發(fā)明的目的在于提供一種改善骨質疏松的組合物，該組合物可以補鈣，抑制或逆轉異位鈣化，并促進鈣轉移至骨骼，增加骨的形成。
本發(fā)明的上述目的是通過以下技術方案實現(xiàn)的：
一種改善骨質疏松的組合物，組合物包括橄欖果汁凍干粉30-50重量份、氨基葡萄糖鹽酸鹽80-120重量份、碳酸鈣80-120重量份和茯苓提取物40-60重量份。
作為優(yōu)選，本發(fā)明的組合物包括橄欖果汁凍干粉35-45重量份、氨基葡萄糖鹽酸鹽90-110重量份、碳酸鈣90-110重量份和茯苓提取物45-55重量份。
作為優(yōu)選，本發(fā)明的組合物包括橄欖果汁凍干粉40-45重量份、氨基葡萄糖鹽酸鹽100-110重量份、碳酸鈣100-110重量份和茯苓提取物45-50重量份。
作為優(yōu)選，本發(fā)明的組合物包括橄欖果汁凍干粉40重量份、氨基葡萄糖鹽酸鹽100重量份、碳酸鈣107.5重量份和茯苓提取物50重量份。
作為優(yōu)選，本發(fā)明所述的橄欖果汁凍干粉含橄欖多酚不低于6％。
作為優(yōu)選，本發(fā)明的組合物還包括黃精提取物40-60重量份。
作為優(yōu)選，本發(fā)明所述的黃精提取物為50重量份。
正常的骨代謝有骨吸收和骨形成兩個方面。如骨骼中的鈣被析出進入血液后沉積于骨以外的組織即形成異位鈣化，常見的有軟組織鈣化和血管鈣化。鈣化的血管舒張功能降低、僵硬性增加，往往導致血栓形成和動脈粥樣斑塊破裂等嚴重后果。血管鈣化往往與骨質疏松同時發(fā)生并隨著年齡的增加而增加,兩者的共同因素即鈣的沉積部位的改變。鈣從骨組織中流失導致骨質疏松,而鈣沉積于動脈血管壁上則導致血管鈣化。
基于人們對骨質疏松長期以來的認識，認為骨質疏松必然是因為缺鈣，因此現(xiàn)有手段治療骨質疏松，通常補充大量的鈣劑和促進鈣吸收的補充劑，前者如各類鈣質：葡萄糖酸鈣、碳酸鈣、檸檬酸鈣等等，后者如維生素D或其衍生物類等。然而這類補鈣物質對伴有異位鈣化的患者，特別是老年患者并不理想。因為伴有異位鈣化的患者其骨質疏松的原因既包括鈣質的缺乏，還包括機體對鈣化過程的調控失常，表現(xiàn)出骨組織被破骨細胞分解釋放鈣入血，以及血鈣沉積到非骨組織形成異位鈣化，對于這樣的患者，僅僅補充鈣并不能改善骨質疏松的情況，反而會加重異位鈣化，如果是血管鈣化，則加重心血管事件的風險。
本發(fā)明的發(fā)明人長期致力于研發(fā)可逆轉異位鈣化并改善骨質疏松的產品，通過將橄欖果汁凍干粉、氨基葡萄糖鹽酸鹽、碳酸鈣和茯苓提取物進行有機組合，獲得本發(fā)明的組合物，可實現(xiàn)不加重異位鈣化甚至逆轉異位鈣化的同時改善骨質疏松的功能。
橄欖果汁凍干粉、氨基葡萄糖鹽酸鹽和碳酸鈣是現(xiàn)有多種改善骨質疏松產品中常用的原料，碳酸鈣在胃酸中溶解性好，機體吸收率可達39％，能補充機體所需的鈣；橄欖果汁凍干粉含有效成分橄欖多酚，具有較強的自由基清除能力及較高的抗氧化活性，能對抗骨質疏松的一個危險因子—氧化應激；氨基葡萄糖鹽酸鹽的氨基葡萄糖是天然的氨基單糖，是軟骨基質主要成分蛋白多糖的前體物質，可以刺激軟骨細胞合成有正常多聚體結構的蛋白多糖，修復和重建關節(jié)軟骨，而且抑制損傷軟骨的基質金屬蛋白酶和磷脂酶A2的活性，阻斷白細胞介素1和α-腫瘤壞死因子對軟骨的破壞作用。
本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)茯苓提取物具有抑制和逆轉異位鈣化，特別是血管鈣化的功能，將其與橄欖果汁凍干粉、氨基葡萄糖鹽酸鹽和碳酸鈣配伍，經試驗證明具有較好的增加骨密度改善骨質疏松的效果并且可以抑制和逆轉血管鈣化，降低骨折和血管鈣化誘發(fā)心血管事件的風險。
本發(fā)明所述提取物的制備方法為：將藥材加4-10倍量水先浸泡0.2-1h后，加熱煎煮提取2次，每次煎煮時間為1-2h，過濾，收集濾液，減壓濃縮，干燥，過80目篩后，即得。
本發(fā)明還提供了含有上述組合物的制劑，這些制劑可以是丸劑、片劑、膠囊劑、散劑或顆粒劑，通過將本發(fā)明的組合物與常規(guī)輔料按常規(guī)方法即可制備。
本發(fā)明還提供了以上組合物在制備改善骨質疏松癥的產品中的應用，作為優(yōu)選，所述骨質疏松癥伴異位鈣化，作為更優(yōu)的選擇，所述異位鈣化為血管鈣化。
具體實施方式
以下通過具體實施方式，對本發(fā)明的上述內容做進一步的詳細說明。但不應該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
表1配方
橄欖果汁凍干粉含橄欖多酚不低于6％，購自帝斯曼維生素(上海)有限公司；
氨基葡萄糖鹽酸鹽購自青島海普生物技術有限公司；
碳酸鈣購自北京惠康源生物科技有限公司。
實施例1
茯苓提取物和黃精提取物的制備
1、分別取黃精和茯苓置于提取罐中，加藥材10倍量水先浸泡0.5h后，加熱煎煮提取2次，每次煎煮時間為2h，120目不銹鋼濾網過濾，收集濾液，合并兩次濾液，備用；
2、取上述水提取液置單效加熱器中減壓濃縮至相對密度為1.10-1.15(60℃熱測)，工藝參數：溫度70℃，壓力0.06-0.09Mpa。
3、取上述濃縮液置高速離心噴霧干燥機噴霧干燥(入口溫度150-180℃，出口溫度80-90℃)，得噴霧干燥粉，過80目篩后，分別得黃精提取物和茯苓提取物細粉。
實施例2
按表1中實施例2對應的配方稱取原料，茯苓提取物和黃精提取物按實施例1制備，各原料過80目篩得到細粉備用。先橄欖果汁凍干粉、茯苓提取物和黃精提取物細粉混合20min得混合粉I，再與氨基葡萄糖鹽酸鹽混合20min得混合粉II。將2500g糊精和25g甜菊糖苷混合20min得混合粉III。最后將碳酸鈣、混合粉II和混合粉III充分混合20min，進行包裝，制成1000袋，得到改善骨質疏松的散劑。
實施例3-8
按表1中實施例3-7對應的配方稱取原料，按實施例2的方法制備。
實施例9增加骨密度功能試驗
1材料和方法
1.1樣品根據實施例2、實施例6、實施例8得到的產品分別作為樣品1、2和3，人體推薦劑量為1袋/日/人。
1.2試驗動物及飼料：SPF級雌性大鼠100只，合格證號：SCXK(川)2008-24，由成都達碩生物科技有限公司提供，動物飼養(yǎng)：動物在屏障級動物房內飼養(yǎng)(許可證號：四川省實驗動物管理委員會SYXK(川)2008-011號)。整個實驗過程中，動物自由攝食和飲水，室溫20-26℃，相對濕度40-70％。
1.3飼料：低鈣飼料，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物研究所提供，低鈣飼料配方(克％)：酪蛋白10，黃豆粉15，小麥粉54，花生油4，纖維素2，AIN-76混合鹽2.6，AIN-76混合維生素1，氯化膽堿0.2，DL-蛋氨酸0.2，淀粉11，實測每公斤飼料含鈣量789.5mg，加入碳酸鈣使飼料的鈣含量達到實測150mg/100g，作為低鈣飼料。
1.4主要儀器與試劑：原子吸收分光光度計，DPX-L雙能X線骨密度儀，電子天平。
1.5試驗方法大鼠用基礎飼料適應性喂飼7天后，根據體重，隨機分組：低鈣對照組、樣品1、樣品2和樣品3各三個劑量組，每組10只，三個劑量組:417、833、1667mg/kg BW組，(分別相當于人體攝入量的5/10/20倍)。三個樣品各個劑量組分別取樣品4.17、8.33、16.67g加蒸餾水配制成100mL溶液灌胃，低鈣對照組灌胃等量的蒸餾水，每天一次，連續(xù)灌胃90天，每周稱體重并按體重調整灌胃量。實驗結束后股動脈放血處死動物，取出右側股骨，于105℃烘箱中，烤至衡重，稱量骨重，采用DPX-L雙能X線骨密度儀測定左骨頭骨密度，以骨的平均骨密度代表該骨的骨密度。采用原子吸收分光光度法測定右股骨頭鈣含量。
1.6實驗數據統(tǒng)計：使用PEMS3.1統(tǒng)計軟件包，對各指標的組間差異作方差分析。
2結果
2.1樣品對大鼠骨重的影響
表2樣品對大鼠骨重的影響
注：*與陰性對照組比較，P<0.05，**與陰性對照組比較，P<0.01
由上表可見，樣品1、2和3各劑量組與陰性對照組比較，均能增加右股骨骨重，且差異具有顯著性(P<0.05)，且樣品1的中、高劑量組差異非常顯著(P<0.01)。
2.2樣品對大鼠骨密度及含鈣量的影響
表3樣品對大鼠骨密度及含鈣量的影響
注：*與陰性對照組骨密度比較，P<0.05，**與陰性對照組骨密度比較，P<0.01；#與陰性對照組骨鈣含量比較，P<0.05，##與陰性對照組骨鈣含量比較，P<0.01。
由上表可見，樣品1、2和3各劑量組與陰性對照組比較，骨密度和骨鈣含量均有所增加，樣品1與陰性對照組比較骨密度和骨鈣含量差異均具有顯著性(P<0.05)。
有上述實驗可知，本發(fā)明的組合物具有增加低鈣動物骨密度的功能。
實施例10樣品對異位鈣化大鼠的影響實驗
1.1儀器與試劑標準飼料配方:水分10.0％、碳水化合物60.0％、粗脂肪4.5％、粗纖維5.0％、粗蛋白20.5％。維生素D乳劑由上海信誼金朱藥業(yè)有限公司提供；實施例2和8制得的產品作為樣品1和2；全自動生物化學分析儀。
1.2動物分組及模型的建立
1.0～1.5月齡健康雄性SD大鼠(實驗動物生產許可證號：SCK(桂)2009-0002，實驗動物質量合格證號：0001299)41只,體重150～180g。適應性喂養(yǎng)一周后,隨機分為正常對照組(n＝10)、模型組(n＝11)和2個樣品組(每組n＝10)。分組當天定為實驗0時,分別在0、24和48h給予模型組和樣品組維生素D3乳劑灌胃,劑量為每天400 000IU/kg；對照組在同一時刻給予等容量對照乳劑灌胃。實驗全程3組大鼠均飼以標準飼料。實驗第4天至第9周結束,樣品組分別每天給樣品1和2 83.33mg/kg(常用劑量轉換而得)溶于生理鹽水1mL中灌胃,另2組分別給予等容量生理鹽水灌胃。第4周末處死模型組1只大鼠取主動脈做病理切片,動脈鈣化模型成立。實驗過程中大鼠自由進食進水?？傮w實驗前后各大鼠體重無明顯差異(P>0.05)。
1.3血管壁鈣和骨組織鈣測定取腎動脈上1cm到髂總分叉處腹主動脈段,烘干稱重,濃硝酸硝化適當稀釋后電極法測定血管壁鈣。取右側股骨組織,去離子水沖洗,加入30％H2O2浸泡30min，再用去離子水沖洗至澄清,置烘箱內,110℃烘干2h。用陶瓷器皿研磨骨至粉碎狀，稱重，以2mL 14mol/L濃HNO3加熱硝化成澄清液體，去離子水適當稀釋降低酸度。自動生物化學儀酶法測定骨組織鈣。
1.4統(tǒng)計學處理數據以表示；計量資料采用t檢驗或方差分析(3組間兩兩比較采用LSD檢驗)；計數資料采用χ2檢驗。用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計數據處理。
2.結果
2.1各組血管壁鈣含量和骨組織鈣含量變化模型組與對照組比較血管壁鈣含量明顯增加(P<0.01)。樣品組與模型組比較血管壁鈣含量降低了28.8％(P<0.01)。
表4樣品對大鼠血管壁鈣和骨組織鈣的影響
注：##與對照組比較，P<0.01；**與模型組比較，P<0.01。
由上表可見，模型組與對照組比較，血管壁鈣顯著增加，骨組織鈣顯著降低，說明用維生素D3構建異位鈣化的骨質疏松模型成功，樣品1組的血管壁鈣和骨組織鈣與模型組比較，均有差異，且差異非常顯著(P<0.01)，樣品2組的血管壁鈣和骨組織鈣與模型組比較，差異并不顯著(P>0.05)，樣品1能明顯改善血管壁的鈣沉積，促進異位鈣向骨轉移。
小結
本發(fā)明的組合物可以促進低鈣大鼠對鈣的吸收和利用，增加骨密度，而且由于本發(fā)明的組合物含有茯苓提取物/和黃精提取物，還具有促進異位鈣化的骨質疏松大鼠鈣吸收的作用，并且促進吸收的鈣向骨組織沉積，抑制或逆轉血管鈣化。