本發(fā)明屬于中藥復(fù)方制劑技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物。
背景技術(shù)：
雞白痢沙門氏菌?。ê喎Q雞白?。┦俏：︷B(yǎng)雞業(yè)最嚴(yán)重的疾病之一。目前，國內(nèi)對雞白痢沙門氏菌病的防治主要采取定期檢疫，淘汰陽性雞，凈化雞場措施，包括在飲水或飼料中添加抗生素，應(yīng)用減毒活菌苗、滅活菌苗、脂多糖抗原、高免卵黃液等進(jìn)行免疫預(yù)防。但受疫病防治和市場經(jīng)濟利益驅(qū)動等因素的影響，許多養(yǎng)雞場都存在大量使用甚至濫用抗生素的情況，隨之產(chǎn)生的細(xì)菌耐藥性和抗生素殘留等問題十分嚴(yán)峻。雞白痢沙門氏菌的耐藥性在逐年增加，既往常用于防治雞白痢沙門氏菌病的青霉素、四環(huán)素、磺胺類等藥物現(xiàn)已效果不佳甚至完全無效。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種中藥組合物，能夠抑制雞白痢沙門氏菌的生長，增強雞的免疫力，預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：
1．預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物，按重量份計由以下組分組成：馬齒莧8-29份，白頭翁1-28份，蒼術(shù)4-26份，陳皮2-13份，五倍子9-30份，白芍6-29份和厚樸3-15份。
馬齒莧為馬齒莧科植物馬齒莧（Portulaca oleracea L）的干燥地上部分。性味酸、寒，具有清熱利濕、涼血解毒的功效?，F(xiàn)代研究表明，馬齒莧含有類黃酮、生物堿、多糖、三萜醇類、兒茶酚胺類等多種有效活性成分，對大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌均有抑制作用，對細(xì)菌性痢疾、急性胃腸炎等有良好的治療效果。
白頭翁為毛茛科植物白頭翁（Pulsatilla chinensis (Bge) Regel）的干燥根。味苦，性寒，歸胃經(jīng)，具有清熱解毒、涼血止痢的功效?，F(xiàn)代研究表明，白頭翁含有白頭翁皂甙、白樺脂酸、胡蘿卜甙、原白頭翁素及白頭翁素等多種有效活性成分；原白頭翁素和白頭翁素有抗多種細(xì)菌和病毒的功效，其中對白喉桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、結(jié)核桿菌、魏氏梭菌等有明顯的抑制作用。同時，白頭翁還具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛及抗痙攣的作用，對由于細(xì)菌引起的腸道出血性痢疾和腸痙攣性痢疾有良好的治療作用。
蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)Atractylodes lancea(Thunb.) DC.或北蒼術(shù)Atractylodes chinensis (DC.) Koidz.的干燥根莖。性味溫、辛、苦，具有燥濕健脾、祛風(fēng)散寒、明目的功效，用于治療濕盛困脾、倦怠嗜臥、脘痞腹脹、食欲不振、嘔吐、泄瀉、痢疾等?，F(xiàn)代研究表明，蒼術(shù)含有倍半萜類、聚乙烯炔類、糖苷類等多種有效活性成分。
陳皮為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟果皮。性味溫、辛、苦，歸肺、脾經(jīng)，具有理氣健脾、燥濕化痰的功效，用于治療脘腹脹滿、食少吐瀉、咳嗽痰多?，F(xiàn)代研究表明，陳皮含有揮發(fā)油、黃酮類、多糖類、生物堿等多種有效活性物質(zhì)。
五倍子為漆樹科植物鹽膚木Rhus chinensis Mill.或青麩楊Rhus potaniniiMaxim.或紅麩楊Rhus punjabensis Stew.var.sinica(Diels) Rehd.et Wils.葉上的蟲癭，主要由五倍子蚜Melaphis chinensis(Bell) Baker寄生而形成。性味寒、酸、澀，歸肺、大腸、腎經(jīng)，具有斂肺降火、澀腸止瀉、收濕斂瘡、斂汗、止血的功效，用于治療肺虛久咳、肺熱咳嗽、外傷出血、便血痔血、皮膚濕爛、久瀉久痢、自汗盜汗、瘡毒、消渴等癥。現(xiàn)代研究表明，五倍子含有酚酸類、沒食子酰葡萄糖類、萜類、黃酮類等活性成分，對金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌以及傷寒、副傷寒、痢疾、炭疽、白喉、綠膿桿菌等均有明顯的抑菌或殺菌作用。
白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.的干燥根。性味涼、苦酸，歸肝、脾經(jīng)，具有平肝止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗的功效，用于治療頭痛眩暈、脅痛、腹痛、四肢攣痛、血虛萎黃、月經(jīng)不調(diào)、自汗、盜汗等。現(xiàn)代研究表明，白芍含有單萜及單萜苷類、三萜、鞣質(zhì)、芳香酸、黃酮等有效活性成分，對金黃色葡萄球菌有抑制作用。
厚樸為木蘭科植物厚樸Magnolia officinalis Rehd.et Wils.或凹葉厚樸Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd. et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。性味溫、苦、辛，歸脾、胃、肺、大腸經(jīng)，具有行氣消積、燥濕除滿、降逆平喘的功效?，F(xiàn)代研究表明，厚樸含有厚樸酚、異厚樸酚、揮發(fā)油、生物堿等有效活性成分，有很好的抑菌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤作用及潛在的抗?jié)冏饔?，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、芽孢桿菌、假絲酵母、毛霉、枯青霉有很好的抑制作用。
優(yōu)選的，所述預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物按重量份計由以下組分組成：馬齒莧11份，白頭翁1份，蒼術(shù)4 份，陳皮6份，五倍子28份，白芍29份和厚樸9份。
優(yōu)選的，所述預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物按重量份計由以下組分組成：馬齒莧28份，白頭翁11份，蒼術(shù)13 份，陳皮4份，五倍子29份，白芍9份和厚樸6份。
優(yōu)選的，所述預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物按重量份計由以下組分組成：馬齒莧8份，白頭翁12份，蒼術(shù)17份，陳皮10份，五倍子26份，白芍7份和厚樸15份。
優(yōu)選的，所述預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物按重量份計由以下組分組成：馬齒莧14份，白頭翁21份，蒼術(shù)22份，陳皮2份，五倍子30份，白芍20份和厚樸3份。
優(yōu)選的，所述預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物按重量份計由以下組分組成：馬齒莧25份，白頭翁22份，蒼術(shù)26 份，陳皮8份，五倍子27份，白芍18份和厚樸12份。
最優(yōu)選的，所述預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物按重量份計由以下組分組成：馬齒莧29份，白頭翁28份，蒼術(shù)19 份，陳皮13份，五倍子9份，白芍6份和厚樸4份。
雞白痢沙門氏菌病發(fā)病急，痢下清稀，在肛門處有粘稠糞便粘在肛門口周圍及附近羽毛形成的干燥結(jié)節(jié)，屬熱痢。病邪以濕熱為主，或為陽盛之體受邪，邪從熱化則為濕熱痢。從臨床癥狀來看，該病主癥濕熱，為致病菌所致的腸道氣血阻滯，疫毒之氣壅阻腸道，濕熱郁結(jié)于腸。根據(jù)雛雞的生理特點，不宜大量選用苦寒和止瀉的藥物，而應(yīng)遵循“扶正祛邪”、“標(biāo)本兼顧”的指導(dǎo)思想，確立“清熱燥濕，涼血解毒”為主的治療原則，并需隨時顧護(hù)胃氣。因而，上述最優(yōu)選組方選用清熱解毒、治療菌痢的馬齒莧、白頭翁為君藥，健脾和胃、可治脾胃虛弱的蒼術(shù)和理氣健脾、燥濕化痰的陳皮為臣藥，同時佐以收斂止瀉的五倍子，白芍平肝止痛，厚樸行氣燥濕治療兼證。
．由所述的預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物制成的提取液。
優(yōu)選的，所述提取液為水提液。
．由所述的預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物制成的中藥制劑。
優(yōu)選的，所述中藥制劑為顆粒劑。
本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明提供了一種預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物，具有清熱燥濕，涼血解毒的功效，能夠抑制雞白痢沙門氏菌的生長，增強雞的免疫力，預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病，而且原料來源廣泛，成本低廉，毒副作用小。
具體實施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。
一、預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物、其提取液與顆粒劑的制備
預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物，其優(yōu)選組方如表1所示。
預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物，其提取液的制備方法如下：
（1）按重量份取表1各組方藥材，混合，粉碎；
（2）將步驟（1）所得藥粉，加水浸泡后煎煮，過濾，收集濾液，再次加水煎煮，過濾，合并兩次濾液，得煎煮液；
（3）將步驟（2）所得煎煮液濃縮至含生藥1g/mL，即得中藥組合物的提取液。
預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病的中藥組合物，其顆粒劑的制備方法如下：
（1）向中藥組合物的提取液中加入占中藥組合物提取液總重量30%的玉米淀粉與1%的蔗糖，迅速攪拌至混合均勻；
（2）向步驟（1）所得混合物中加水，揉搓至干燥的分散體狀，然后過12目篩制成濕顆粒；
（3）將步驟（2）所得濕顆粒于60℃干燥8小時，即得中藥組合物的顆粒劑。
二、中藥組合物對雞白痢沙門氏菌的體外抑菌試驗（牛津杯法）
取無污染的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，分成6組，每組3個重復(fù)，用棉簽將濃度為1×105 CFU/mL的雞白痢沙門氏菌菌液均勻地涂抹在培養(yǎng)基的表面，再在培養(yǎng)基表面直接垂直放上3個牛津杯（即內(nèi)徑6mm、外徑8mm、高10mm的圓形小管），輕輕加壓，使牛津杯與培養(yǎng)基無空隙接觸，在牛津杯中加入中藥組合物的提取液240μL，然后37℃培養(yǎng)16-18小時，根據(jù)抑菌圈大小判定本發(fā)明中藥組合物6個優(yōu)選組方的抑菌效果。結(jié)果見表2，本發(fā)明中藥組合物的6個優(yōu)選組方均有抑制雞白痢沙門氏菌的功效。
三、中藥組合物對雞白痢沙門氏菌的最低抑菌濃度（MIC）
取無菌96孔板，第1列和第11列每孔加入滅菌的普通肉湯60μL，第2列每孔加入中藥組合物的提取液60μL，然后逐次倍比稀釋至第10列（每孔終體積為60μL），第10列的稀釋后多余液體棄掉，第1列至第10列再每孔加入濃度為1×105 CFU/mL的雞白痢沙門氏菌菌液10μL，每孔終體積為70μL。第1列為陽性對照，第11列為肉湯空白對照，以能抑制細(xì)菌生長的中藥組合物提取液的最高稀釋度作為MIC。本發(fā)明中藥組合物6個優(yōu)選組方每個平行試驗3次。結(jié)果見表3。
四、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后的治療效果與血液生理指標(biāo)的影響
將150只一日齡雛雞隨機分為空白組，模型組，陽性藥物組，中藥組合物高、中、低劑量組?？瞻捉M和模型組均給予生理鹽水，陽性藥物組給予0.5g/只雞痢靈散拌料飼喂，中藥組合物高、中、低劑量組分別給予0.5g/只、0.3g/只、0.1g/只由中藥組合物（組方6）制成的顆粒劑拌料飼喂，每天2次，連續(xù)7天。給藥第8天，模型組與各藥物組雛雞腹腔注射含有4.9×107 CFU雞白痢沙門氏菌的菌液進(jìn)行體內(nèi)攻毒。然后在各藥物組中每組選出造模成功的雛雞20只進(jìn)行藥物治療，空白組和模型組均給予生理鹽水，陽性藥物組給予0.5g/只雞痢靈散拌料飼喂，中藥組合物高、中、低劑量組分別給予0.5g/只、0.3g/只、0.1g/只由中藥組合物（組方6）制成的顆粒劑拌料飼喂，每天2次，連續(xù)7天。
1、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后的治療效果
結(jié)果見表4，中藥組合物高劑量組對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后的治療效果與陽性藥物組相當(dāng)，且連續(xù)給藥14天后，雛雞沒有出現(xiàn)藥物中毒引起的死亡，也沒有任何的異常反應(yīng)，表明本發(fā)明的中藥組合物對雞白痢沙門氏菌病有良好的治療效果且毒副作用小。
2、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后血液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，抽取心血，分別用紅細(xì)胞計數(shù)法、白細(xì)胞計數(shù)法、白細(xì)胞分類計數(shù)法計數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量，計算淋巴細(xì)胞的比值。結(jié)果見表5，模型組雛雞血液中白細(xì)胞數(shù)量升高，淋巴細(xì)胞比值降低，與空白組相比差異極顯著（P<0.01），紅細(xì)胞數(shù)量升高，與空白組相比差異顯著（P<0.05）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞血液中白細(xì)胞數(shù)量降低，淋巴細(xì)胞比值升高，與模型組比較差異極顯著（P<0.01），與空白組相比差異不顯著（P>0.05）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞血液中紅細(xì)胞數(shù)量降低，與模型組相比差異顯著（P<0.05），高、中劑量組與空白組相比差異不顯著（P>0.05），低劑量組與空白組相比差異顯著（P<0.05）。
4、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后血液中IL-2含量的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，抽取心血，低溫離心后取上層血清，用雞IL-2試劑盒檢測雛雞血液中IL-2的含量。結(jié)果見表6，模型組雛雞血液中IL-2含量升高，與空白組相比差異極顯著（P<0.01）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞血液中IL-2含量降低，與模型組相比差異極顯著（P<0.01），高、中劑量組與空白組相比差異不顯著（P>0.05），低劑量組與空白組相比差異顯著（P<0.05）。
5、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后血液中IFN-γ含量的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，抽取心血，低溫離心后取上層血清，用雞IFN-γ試劑盒檢測雛雞血液中IFN-γ的含量。結(jié)果見表7，模型組雛雞血液中IFN-γ含量與空白組相比差異不顯著（P>0.05）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞血液中IFN-γ含量與模型組、空白組相比差異不顯著（P>0.05）。
6、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后血液中IgM含量的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，抽取血液，用雞IgM試劑盒檢測雛雞血液中IgM的含量。結(jié)果見表8，模型組雛雞血液中IgM含量降低，與空白組相比差異極顯著（P<0.01）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞血液中IgM含量升高，與模型組相比差異極顯著（P<0.01），與空白組相比差異不顯著（P>0.05）。
7、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后血液中IgG含量的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，抽取血液，用雞IgG試劑盒檢測雛雞血液中IgG的含量。結(jié)果見表9，模型組雛雞血液中IgG含量降低，與空白組相比差異極顯著（P<0.01）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞血液中IgG含量升高，與模型組相比差異極顯著（P<0.01），與空白組相比差異不顯著（P>0.05）。
8、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后盲腸組織的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，采用石蠟組織切片法觀察盲腸組織的顯微形態(tài)，比較各組雛雞盲腸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化和細(xì)胞病變情況。結(jié)果顯示，空白組雛雞盲腸黏膜上皮、固有層皆完整，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞排列整齊；模型組雛雞盲腸粘膜層嚴(yán)重脫落，未見腸道上皮細(xì)胞，與空白組比較有明顯病理變化；陽性藥物組和中藥組合物高、中劑量組雛雞盲腸黏膜上皮、固有層皆完整，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞排列整齊；中藥組合物低劑量組雛雞盲腸黏膜層有輕微脫落，柱狀細(xì)胞的細(xì)胞核濃縮、細(xì)胞質(zhì)水泡變性。
9、中藥組合物對雛雞感染雞白痢沙門氏菌病后盲腸組織中SIgA含量的影響
試驗結(jié)束后，隨機選取各組雛雞，取盲腸組織勻漿，離心取上清液，用雞SIgA試劑盒檢測盲腸組織中SIgA的含量。結(jié)果見表10，模型組雛雞盲腸組織中SIgA含量降低，與空白組相比差異極顯著（P<0.01）；中藥組合物高、中、低劑量組雛雞盲腸組織中SIgA含量升高，與模型組相比差異極顯著（P<0.01），與空白組相比差異不顯著（P>0.05）。
綜合上述試驗結(jié)果可以看出，本發(fā)明的中藥組合物能夠抑制雞白痢沙門氏菌的生長，能夠?qū)㈦u白痢沙門氏菌病感染動物的淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞的數(shù)量調(diào)控至正常水平，能夠?qū)L-2、免疫球蛋白IgM與IgG、分泌型免疫球蛋白slgA的含量調(diào)控至正常水平，還能夠阻止雞白痢沙門氏菌侵襲腸道組織引起的腸黏膜層脫落，說明本發(fā)明的中藥組合物能夠抑制雞白痢沙門氏菌的生長，增強雞的免疫力，預(yù)防和治療雞白痢沙門氏菌病。
最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過參照本發(fā)明的優(yōu)選實施例已經(jīng)對本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍。