本發(fā)明屬于生物材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗感染醫(yī)用粘合劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

α-氰基丙烯酸類(lèi)衍生物粘合劑是一類(lèi)瞬間粘合劑，單組分、無(wú)溶劑、粘接時(shí)無(wú)需壓力，可常溫下迅速固化，粘結(jié)后無(wú)需特殊處理。由于其鋪展性好，固化后無(wú)色透明，用量小，粘結(jié)強(qiáng)度高，在外科手術(shù)中得到了廣泛的應(yīng)用，主要用于各種創(chuàng)傷傷口、外科整容、計(jì)劃生育等外科各類(lèi)手術(shù)，具有閉合傷口、皮膚移植、官腔器官連接以及腎、肝、脾等臟器損傷的止血等作用，同時(shí)，其在骨科、眼科、耳鼻喉科、消化內(nèi)科等多學(xué)科均表現(xiàn)出巨大的發(fā)展前景。

α-氰基丙烯酸衍生物粘合劑由于α-碳原子上—CN，—COOR等極性基團(tuán)的誘導(dǎo)效應(yīng)，β-位的碳原子有很強(qiáng)的吸電性，在微量陰離子存在的條件下就能產(chǎn)生瞬間聚合反應(yīng)，使液態(tài)的粘合劑瞬間變成固態(tài)的粘合媒介物，從而起到粘合作用。生物體組織含有豐富的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的大分子線性化合物，大分子兩端還有—NH2和—COOH基團(tuán)，因此有利于α-氰基丙烯酸衍生物在生物體組織上的快速聚合。

α-氰基丙烯酸衍生物具有室溫下快速固化、無(wú)需固化劑、粘結(jié)力強(qiáng)、化學(xué)性能穩(wěn)定、不降解出有害物質(zhì)的特點(diǎn)，并具有良好的生物相容性，與理想醫(yī)用粘合劑大部分的要求相符，在醫(yī)療界受到越來(lái)越多的重視，在骨和軟骨粘合、皮膚切口閉合、組織肌肉粘合、神經(jīng)血管粘合、栓塞、止血等領(lǐng)域有重要應(yīng)用前景。但目前的粘合劑抗感染功能欠佳，傷口在粘合過(guò)程中很容易產(chǎn)生細(xì)菌感染，引起炎癥，從而影響傷口的治愈。因此，如何賦予醫(yī)用粘合劑抗感染的性能是新一代醫(yī)用粘合劑面臨挑戰(zhàn)的科學(xué)問(wèn)題。

中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN 105536037 A公開(kāi)了一種抗菌醫(yī)用粘合劑及其制備方法，該抗菌醫(yī)用粘合劑通過(guò)將甲基丙烯酸羥丙酯、甲基丙烯酸叔丁酯、丙烯酸異丙酯、丙烯酸異丁酯、明膠、甘油、脫脂蟬蛹粉、纖維蛋白膠、海藻酸鈉、L-谷氨酸和去離子水加熱，攪拌溶解后經(jīng)超聲、消毒處理制得，具有較高粘結(jié)強(qiáng)度和抗壓強(qiáng)度，但其成分復(fù)雜，抗菌效果有待提高。

中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN 105879108 A公開(kāi)了一種醫(yī)用廣譜抗菌粘合劑的制備方法，該方法為將醫(yī)用粘合劑α-氰基丙烯酸酯與醫(yī)用三氯生按1％-10％比例混合即得，制備得到的粘合劑穩(wěn)定性好、抗菌性能明確，但存在組織刺激性較大，粘合強(qiáng)度不足，固話速度不理想等一些問(wèn)題。

因此，現(xiàn)有技術(shù)中仍缺少一種具有抗細(xì)菌感染、可室溫下快速固化、粘結(jié)力強(qiáng)、生物相容性好的醫(yī)用粘合劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明提供一種抗感染醫(yī)用粘合劑，該抗感染醫(yī)用粘合劑具有負(fù)載藥物和緩慢釋放藥物的功能，在骨和軟骨粘合、皮膚切口閉合、組織肌肉粘合、神經(jīng)血管粘合、栓塞、止血等應(yīng)用過(guò)程中可以快速粘合并能長(zhǎng)時(shí)間防止細(xì)菌感染，促進(jìn)傷口愈合；同時(shí)，其還具有粘結(jié)力強(qiáng)、化學(xué)性能穩(wěn)定和生物相容性好等特點(diǎn)。

本發(fā)明還提供上述抗感染醫(yī)用粘合劑的制備方法，該制備方法重復(fù)性好，操作性強(qiáng)。

一種抗感染醫(yī)用粘合劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)β-環(huán)糊精的氨基化修飾：

往β-環(huán)糊精懸浮液中滴加NaOH溶液，待懸浮液變澄清后，將對(duì)甲苯磺酰氯的乙腈溶液逐滴加入到澄清液中，攪拌反應(yīng)1.5-3h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽濾，濾液在溫度為0-8℃的條件下靜置36-60h，沉淀析出，收集沉淀物并干燥，得到磺?；?環(huán)糊精；其中，所述β-環(huán)糊精懸浮液的濃度為1×10^-5-5×10^-5mol/L；NaOH溶液的濃度為0.1-0.5mol/L；對(duì)甲苯磺酰氯的乙腈溶液的濃度為1×10^-5-5×10^-5mol/L；

將磺?；?環(huán)糊精和己二胺溶于二甲基甲酰胺中進(jìn)行氨基化取代反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，加入丙酮，沉淀析出；收集沉淀物，用體積分?jǐn)?shù)為40-60％的甲醇的水溶液將沉淀物溶解，加入丙酮，沉淀析出；收集沉淀物，重復(fù)以上重結(jié)晶操作2-4次，去除沒(méi)有參加反應(yīng)的己二胺，最后收集沉淀物并干燥，得到氨基化β-環(huán)糊精；

(2)β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體的合成：

將氰乙酸溶解于pH為6.8-7.4的磷酸鹽緩沖液，制得氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液，往氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺進(jìn)行羧基活化反應(yīng)，加入步驟(1)制得的氨基化β-環(huán)糊精，攪拌條件下進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后將溶液用去離子水透析，最后干燥，得到β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體；

(3)β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體的合成：

將固體甲醛溶解于甲醇制備甲醛的甲醇溶液，加熱攪拌至固體甲醛全部溶解后停止加熱，加入哌啶和步驟(2)制得的β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體，加熱回流，進(jìn)行縮聚反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入石油醚，攪拌，用分水器除去水層，然后蒸餾除去石油醚；加入五氧化二磷，加熱攪拌使縮聚物發(fā)生裂解反應(yīng)，反應(yīng)2.5-3.5h后在通入二氧化硫氣態(tài)阻聚劑的條件下進(jìn)行蒸餾，收集β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體；

(4)載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的制備：

將步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體和藥物溶解于甲醇中，攪拌下進(jìn)行預(yù)聚合反應(yīng)和藥物負(fù)載，反應(yīng)1-2h后，真空干燥，得到載藥預(yù)聚合產(chǎn)物；

(5)抗感染醫(yī)用粘合劑的制備：

取步驟(4)制得的載藥預(yù)聚合產(chǎn)物與步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體攪拌混合，成為完全溶解的透明液體，通入二氧化硫氣體，制得具有抗感染性能的醫(yī)用粘合劑。

優(yōu)選的，所述步驟(1)中，β-環(huán)糊精和對(duì)甲苯磺酰氯的摩爾比為1:1。

優(yōu)選的，所述步驟(1)中，磺?；?環(huán)糊精和己二胺的摩爾比為1:10-1:20；磺酰化β-環(huán)糊精溶于二甲基甲酰胺后的濃度為0.1-0.5mol/mL；氨基化取代反應(yīng)的反應(yīng)溫度為60-80℃，反應(yīng)時(shí)間為2-24h。

優(yōu)選的，所述步驟(2)中，氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液的濃度為0.1-0.5mol/L；氰乙酸和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的摩爾比為(1:3)-(1:30)；1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為(1:1)-(10:1)；羧基活化反應(yīng)的時(shí)間為0.5-6h。

優(yōu)選的，所述步驟(2)中，氰乙酸和氨基化β-環(huán)糊精的摩爾比為1:1；酰胺化反應(yīng)的時(shí)間為4-24h。

優(yōu)選的，所述步驟(3)中，甲醛的甲醇溶液的濃度為0.03-0.12mol/L；哌啶和甲醇的體積比為(0.001:1)-(0.005:1)；固體甲醛和β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體的摩爾比為1:1；石油醚和甲醇的體積比為1:1；五氧化二磷和β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體的質(zhì)量比為(1:1)-(3:1)。

優(yōu)選的，所述步驟(4)中，藥物選自紅霉素、青霉素G和頭孢吡肟中的一種。

優(yōu)選的，所述步驟(4)中，藥物在甲醇中的濃度為0.05-0.5mg/mL；β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體在甲醇中的濃度為0.1-0.5g/mL。

優(yōu)選的，所述步驟(5)中，載藥預(yù)聚合產(chǎn)物和β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體的質(zhì)量比為(1:2)-(1:9)；以載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的重量計(jì)，二氧化硫氣體的濃度為10-100ppm。

一種抗感染醫(yī)用粘合劑，通過(guò)上述制備方法制備得到。

β-環(huán)糊精具有“內(nèi)疏水，外親水”的特殊分子結(jié)構(gòu)，可以和許多藥物通過(guò)可逆的非共價(jià)相互作用形成復(fù)合物，藥物與β-環(huán)糊精結(jié)合得越牢固，藥物釋放就越緩慢；但是，當(dāng)藥物/β-環(huán)糊精復(fù)合物溶液在生理體液中被稀釋時(shí)，會(huì)馬上發(fā)生復(fù)合物的分解，而無(wú)法實(shí)現(xiàn)藥物的緩慢釋放。

本發(fā)明通過(guò)把β-環(huán)糊精鍵合到醫(yī)用粘合劑分子中，降低了生理體液對(duì)復(fù)合物的稀釋作用，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)藥物的緩慢釋放，同時(shí)，通過(guò)負(fù)載具有抗感染性能的藥物，可賦予醫(yī)用粘合劑抗感染的性能，β-環(huán)糊精對(duì)藥物的緩釋作用可使醫(yī)用粘合劑能長(zhǎng)時(shí)間防止細(xì)菌感染，促進(jìn)傷口愈合。

本發(fā)明通過(guò)β-環(huán)糊精修飾氰乙酸并進(jìn)一步與甲醛反應(yīng)制備出具有載藥功能的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體，然后β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體在甲醇的作用下預(yù)聚合并進(jìn)行藥物負(fù)載，最后將載藥預(yù)聚合產(chǎn)物和β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體混合，得到具有抗感染性能的醫(yī)用粘合劑。β-環(huán)糊精具有“內(nèi)腔疏水，外腔親水”的特殊分子結(jié)構(gòu)，通過(guò)疏水作用力、氫鍵和范德華力等作用對(duì)藥物有強(qiáng)的吸附能力，可以對(duì)抗感染藥物進(jìn)行負(fù)載與緩慢釋放，從而使粘合劑具有抗細(xì)菌感染性能。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

(1)本發(fā)明提供的抗感染醫(yī)用粘合劑具有負(fù)載藥物和緩慢釋放藥物的功能，在骨和軟骨粘合、皮膚切口閉合、組織肌肉粘合、神經(jīng)血管粘合、栓塞、止血等應(yīng)用過(guò)程中可以快速粘合并能長(zhǎng)時(shí)間防止細(xì)菌感染；

(2)本發(fā)明提供的抗感染醫(yī)用粘合劑具有室溫下快速固化、粘結(jié)力強(qiáng)、化學(xué)性能穩(wěn)定和生物相容性好等特點(diǎn)。

(3)本發(fā)明提供的抗感染醫(yī)用粘合劑的制備方法成本低，重復(fù)性好，操作性強(qiáng)，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1本發(fā)明抗感染醫(yī)用粘合劑的合成示意圖。

圖2本發(fā)明實(shí)施例1制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體的核磁共振氫譜圖。

圖3本發(fā)明實(shí)施例1制得的抗感染醫(yī)用粘合劑的藥物釋放曲線圖。

圖4本發(fā)明實(shí)施例1制得的抗感染醫(yī)用粘合劑的3T3細(xì)胞存活率圖。

圖5本發(fā)明實(shí)施例1制得的抗感染醫(yī)用粘合劑的抗乙型鏈球菌粘附圖，其中，(a)表示載藥前的醫(yī)用粘合劑的抗乙型鏈球菌粘附效果，(b)表示載藥后的醫(yī)用粘合劑的抗乙型鏈球菌粘附效果。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。

實(shí)施例1 抗感染醫(yī)用粘合劑的制備

(1)β-環(huán)糊精的氨基化修飾：

往500mL濃度為2.5×10^-5mol/L的β-環(huán)糊精懸浮液中緩慢滴加20mL濃度為0.25mol/L的NaOH溶液，懸浮液變澄清，將50mL濃度為2.5×10^-4mol/L的對(duì)甲苯磺酰氯的乙腈溶液逐滴加入到澄清液中，逐漸有白色沉淀生成，攪拌反應(yīng)2h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽濾，分離出未反應(yīng)的對(duì)甲苯磺酰氯，濾液在溫度為4℃的條件下靜置48h，有大量白色沉淀析出，減壓抽濾收集沉淀物，真空干燥48h，得到磺?；?環(huán)糊精；

將3mmol磺酰化β-環(huán)糊精和50mmol己二胺溶于10mL二甲基甲酰胺中，在溫度為70℃的條件下攪拌反應(yīng)12h，進(jìn)行氨基化取代反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，加入丙酮，有白色沉淀物析出；減壓抽濾分離出白色沉淀物，收集沉淀物，用體積分?jǐn)?shù)為50％的甲醇的水溶液將沉淀物溶解，加入丙酮，白色沉淀物析出；減壓抽濾分離出白色沉淀物，收集沉淀物，重復(fù)以上重結(jié)晶操作3次，去除沒(méi)有參加反應(yīng)的己二胺，最后收集沉淀物并真空干燥48h，得到氨基化β-環(huán)糊精；

(2)β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體的合成：

將氰乙酸溶解于pH為7.0的磷酸鹽緩沖液，制得100mL濃度為0.25mol/L的氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液，往氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液中加入0.375mol 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.075mol N-羥基琥珀酰亞胺進(jìn)行羧基活化反應(yīng)3h，加入0.025mol步驟(1)制得的氨基化β-環(huán)糊精，攪拌條件下進(jìn)行酰胺化反應(yīng)12h，反應(yīng)結(jié)束后將溶液用去離子水透析7d，最后真空干燥48h，得到β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體；

(3)β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體的合成：

將固體甲醛溶解于甲醇制備100mL濃度為0.06mol/L的甲醛的甲醇溶液，加熱攪拌至固體甲醛全部溶解后停止加熱，加入0.25mL哌啶和0.006mol步驟(2)制得的β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體，加熱回流，進(jìn)行縮聚反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入100mL石油醚，攪拌，用分水器除去水層，然后蒸餾除去石油醚；加入15.6g五氧化二磷，加熱攪拌使縮聚物發(fā)生裂解反應(yīng)，反應(yīng)3h后在通入二氧化硫氣態(tài)阻聚劑的條件下進(jìn)行蒸餾，收集β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體；

附圖2的核磁氫譜結(jié)果顯示，制備得到的產(chǎn)物即為β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體。

(4)載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的制備：

將12.5g步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體和15mg青霉素G溶解于50mL甲醇中，攪拌下進(jìn)行預(yù)聚合反應(yīng)和藥物負(fù)載，反應(yīng)1h后，真空干燥48h，得到載藥預(yù)聚合產(chǎn)物；

(5)抗感染醫(yī)用粘合劑的制備：

取10g步驟(4)制得的載藥預(yù)聚合產(chǎn)物與40g步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體攪拌混合，成為完全溶解的透明液體，以載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的重量計(jì)，通入50ppm二氧化硫氣體，制得具有抗感染性能的醫(yī)用粘合劑。

實(shí)施例1制得的抗感染醫(yī)用粘合劑的粘度(25±1℃)為0.156Pa·S；水面固化時(shí)間為7s；粘接強(qiáng)度為35.3MPa；儲(chǔ)存穩(wěn)定性(70±2℃)≥120h；小鼠經(jīng)口LD₅₀為12.8g/kg；藥物持續(xù)釋放時(shí)間≥24h，其藥物釋放曲線圖如附圖3所示；附圖4的3T3細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示抗感染醫(yī)用粘合劑組3T3細(xì)胞細(xì)胞存活率與空白對(duì)照組相比，無(wú)顯著差異，說(shuō)明實(shí)施例1制備的抗感染醫(yī)用粘合劑安全、無(wú)毒性；附圖5結(jié)果說(shuō)明實(shí)施例1制備的抗感染醫(yī)用粘合劑對(duì)乙型鏈球菌具有良好的抑菌效果。

實(shí)施例2 抗感染醫(yī)用粘合劑的制備

(1)β-環(huán)糊精的氨基化修飾：

往500mL濃度為1×10^-5mol/L的β-環(huán)糊精懸浮液中緩慢滴加20mL濃度為0.1mol/L的NaOH溶液，懸浮液變澄清，將50mL濃度為1×10^-4mol/L的對(duì)甲苯磺酰氯的乙腈溶液逐滴加入到澄清液中，逐漸有白色沉淀生成，攪拌反應(yīng)2h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽濾，分離出未反應(yīng)的對(duì)甲苯磺酰氯，濾液在溫度為4℃的條件下靜置48h，有大量白色沉淀析出，減壓抽濾收集沉淀物，真空干燥48h，得到磺?；?環(huán)糊精；

將5mmol磺?；?環(huán)糊精和100mmol己二胺溶于10mL二甲基甲酰胺中，在溫度為60℃的條件下攪拌反應(yīng)24h，進(jìn)行氨基化取代反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，加入丙酮，有白色沉淀物析出；減壓抽濾分離出白色沉淀物，收集沉淀物，用體積分?jǐn)?shù)為50％的甲醇的水溶液將沉淀物溶解，加入丙酮，白色沉淀物析出；減壓抽濾分離出白色沉淀物，收集沉淀物，重復(fù)以上重結(jié)晶操作3次，去除沒(méi)有參加反應(yīng)的己二胺，最后收集沉淀物并真空干燥48h，得到氨基化β-環(huán)糊精；

(2)β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體的合成：

將氰乙酸溶解于pH為7.4的磷酸鹽緩沖液，制得100mL濃度為0.1mol/L的氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液，往氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液中加入0.03mol 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.03mol N-羥基琥珀酰亞胺進(jìn)行羧基活化反應(yīng)6h，加入0.01mol步驟(1)制得的氨基化β-環(huán)糊精，攪拌條件下進(jìn)行酰胺化反應(yīng)4h，反應(yīng)結(jié)束后將溶液用去離子水透析7d，最后真空干燥48h，得到β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體；

(3)β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體的合成：

將固體甲醛溶解于甲醇制備100mL濃度為0.03mol/L的甲醛的甲醇溶液，加熱攪拌至固體甲醛全部溶解后停止加熱，加入0.1mL哌啶和0.003mol步驟(2)制得的β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體，加熱回流，進(jìn)行縮聚反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入100mL石油醚，攪拌，用分水器除去水層，然后蒸餾除去石油醚；加入3.9g五氧化二磷，加熱攪拌使縮聚物發(fā)生裂解反應(yīng)，反應(yīng)3h后在通入二氧化硫氣態(tài)阻聚劑的條件下進(jìn)行蒸餾，收集β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體；

(4)載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的制備：

將5g步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體和2.5mg紅霉素溶解于50mL甲醇中，攪拌下進(jìn)行預(yù)聚合反應(yīng)和藥物負(fù)載，反應(yīng)1h后，真空干燥48h，得到載藥預(yù)聚合產(chǎn)物；

(5)抗感染醫(yī)用粘合劑的制備：

取5g步驟(4)制得的載藥預(yù)聚合產(chǎn)物與45g步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體攪拌混合，成為完全溶解的透明液體，以載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的重量計(jì)，通入10ppm二氧化硫氣體，制得具有抗感染性能的醫(yī)用粘合劑。

實(shí)施例2制得的抗感染醫(yī)用粘合劑的粘度(25±1℃)為0.1Pa·S；水面固化時(shí)間為5s；粘接強(qiáng)度為30MPa；儲(chǔ)存穩(wěn)定性(70±2℃)≥120h；小鼠經(jīng)口LD₅₀為12.7g/kg；藥物持續(xù)釋放時(shí)間≥24h；3T3細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示抗感染醫(yī)用粘合劑組3T3細(xì)胞細(xì)胞存活率與空白對(duì)照組相比，無(wú)顯著差異，說(shuō)明實(shí)施例2制備的抗感染醫(yī)用粘合劑安全、無(wú)毒性；乙型鏈球菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)施例2制備的抗感染醫(yī)用粘合劑對(duì)乙型鏈球菌具有良好的抑菌效果。

實(shí)施例3 抗感染醫(yī)用粘合劑的制備

(1)β-環(huán)糊精的氨基化修飾：

往500mL濃度為5×10^-5mol/L的β-環(huán)糊精懸浮液中緩慢滴加20mL濃度為0.5mol/L的NaOH溶液，懸浮液變澄清，將50mL濃度為5×10^-4mol/L的對(duì)甲苯磺酰氯的乙腈溶液逐滴加入到澄清液中，逐漸有白色沉淀生成，攪拌反應(yīng)2h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽濾，分離出未反應(yīng)的對(duì)甲苯磺酰氯，濾液在溫度為4℃的條件下靜置48h，有大量白色沉淀析出，減壓抽濾收集沉淀物，真空干燥48h，得到磺?；?環(huán)糊精；

將1mmol磺?；?環(huán)糊精和10mmol己二胺溶于10mL二甲基甲酰胺中，在溫度為80℃的條件下攪拌反應(yīng)2h，進(jìn)行氨基化取代反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，加入丙酮，有白色沉淀物析出；減壓抽濾分離出白色沉淀物，收集沉淀物，用體積分?jǐn)?shù)為50％的甲醇的水溶液將沉淀物溶解，加入丙酮，白色沉淀物析出；減壓抽濾分離出白色沉淀物，收集沉淀物，重復(fù)以上重結(jié)晶操作3次，去除沒(méi)有參加反應(yīng)的己二胺，最后收集沉淀物并真空干燥48h，得到氨基化β-環(huán)糊精；

(2)β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體的合成：

將氰乙酸溶解于pH為6.8的磷酸鹽緩沖液，制得100mL濃度為0.5mol/L的氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液，往氰乙酸的磷酸鹽緩沖液溶液中加入1.5mol 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和0.15mol N-羥基琥珀酰亞胺進(jìn)行羧基活化反應(yīng)0.5h，加入0.05mol步驟(1)制得的氨基化β-環(huán)糊精，攪拌條件下進(jìn)行酰胺化反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后將溶液用去離子水透析7d，最后真空干燥48h，得到β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體；

(3)β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體的合成：

將固體甲醛溶解于甲醇制備100mL濃度為0.12mol/L的甲醛的甲醇溶液，加熱攪拌至固體甲醛全部溶解后停止加熱，加入0.5mL哌啶和0.012mol步驟(2)制得的β-環(huán)糊精化氰基乙酰胺單體，加熱回流，進(jìn)行縮聚反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入100mL石油醚，攪拌，用分水器除去水層，然后蒸餾除去石油醚；加入46.8g五氧化二磷，加熱攪拌使縮聚物發(fā)生裂解反應(yīng)，反應(yīng)3h后在通入二氧化硫氣態(tài)阻聚劑的條件下進(jìn)行蒸餾，收集β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體；

(4)載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的制備：

將25g步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體和25mg頭孢吡肟溶解于50mL甲醇中，攪拌下進(jìn)行預(yù)聚合反應(yīng)和藥物負(fù)載，反應(yīng)1h后，真空干燥48h，得到載藥預(yù)聚合產(chǎn)物；

(5)抗感染醫(yī)用粘合劑的制備：

取15g步驟(4)制得的載藥預(yù)聚合產(chǎn)物與35g步驟(3)制得的β-環(huán)糊精化氰基丙烯酰胺單體攪拌混合，成為完全溶解的透明液體，以載藥預(yù)聚合產(chǎn)物的重量計(jì)，通入100ppm二氧化硫氣體，制得具有抗感染性能的醫(yī)用粘合劑。

實(shí)施例3制得的抗感染醫(yī)用粘合劑的粘度(25±1℃)為0.2Pa·S；水面固化時(shí)間為10s；粘接強(qiáng)度為40MPa；儲(chǔ)存穩(wěn)定性(70±2℃)≥120h；小鼠經(jīng)口LD₅₀為12.9g/kg；藥物持續(xù)釋放時(shí)間≥24h；3T3細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示抗感染醫(yī)用粘合劑組3T3細(xì)胞細(xì)胞存活率與空白對(duì)照組相比，無(wú)顯著差異，說(shuō)明實(shí)施例3制備的抗感染醫(yī)用粘合劑安全、無(wú)毒性；乙型鏈球菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)施例3制備的抗感染醫(yī)用粘合劑對(duì)乙型鏈球菌具有良好的抑菌效果。

以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明。對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。