本發(fā)明涉及藥物藥品、食品與化妝品技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種水稻胚胎素，具體述及該水稻胚胎素的制作方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人類疾病雖然有上千種，然而真正的疾病只有一種，那就是細胞病，任何一個器官的細胞新陳代謝出了問題，細胞死亡達到一定程度，那么這個器官才會生病，導(dǎo)致細胞故障主要的原因是二方面：一是細胞營養(yǎng)、氧氣供應(yīng)不足，二是代謝廢物不能及時排出導(dǎo)致細胞中毒所致，而現(xiàn)在對疾病的認識只是疾病的表現(xiàn)，而不是真正的原因，在治療上多為對癥治療(如疼痛、發(fā)熱等的處理)或?qū)怪委?對腫瘤的切除，放、化療等)，絕大多數(shù)疾病都是對癥治。本研究是采用水稻胚胎素這組生物分子激活人體內(nèi)干細胞分裂出新的功能細胞替代損傷與死亡的細胞，且恢復(fù)及正常功能，達到從根本上治療疾病的目的。
1912年，瑞士科學(xué)家卡爾教授首次發(fā)現(xiàn)羊胚胎細胞中有一種能使細胞恢復(fù)活力的神奇物質(zhì)--羊胚胎素；1931年，尼翰教授首次通過注射的方式將小羊的甲狀旁腺細胞應(yīng)用于一位在手術(shù)中甲狀旁腺受損的臨危病人挽救了其生命；1937年，尼翰教授第一次將活細胞療法應(yīng)用到大腦神經(jīng)細胞，以后，尼翰教授將活細胞療法擴展應(yīng)用到肝臟、胰腺、腎臟、心臟、十二指腸、胸腺和脾臟。由于羊胚胎素來源于羊的胚胎細胞，與人類細胞有諸多方面不同，臨床應(yīng)用時有許多禁忌癥，如過度敏感性人群，甲狀腺機能亢進、嚴重的高血壓患者，孕期婦女使用、腫瘤患者等不能應(yīng)用。
由于鮮活細胞不能長時間保存，1949年尼翰教授和瑞士雀巢公司的科學(xué)家共同協(xié)作，首次研制出凍干活細胞進行細胞活化治療；1955年瑞士Dr.Alfred Pfister醫(yī)學(xué)博士部分解決了細胞提取時(凍干或凍結(jié))造成的損傷和惡化過程與保存技術(shù)的缺陷。
1970年Martin Evans首次從小鼠胚囊中分離出與體外培養(yǎng)出小鼠胚胎干細胞(embryonic stem cell，ESCs，簡稱ES、EK或ESC細胞。)；1998年美國科學(xué)家體外培養(yǎng)人胚胎干細胞成功，此后國內(nèi)外學(xué)者采用不同的干細胞治療不同的疾病，其短期治療效果可以肯定，但目前存在以下問題：無論是羊胎素還是胚胎干細胞，由于是異種(羊)與異體都存在著免疫排斥反應(yīng)、過敏、體外培養(yǎng)時污染細菌引起全身感染等嚴重并發(fā)癥。
1980年，由于鮮活羊胚胎素缺乏嚴格的消毒抑菌措施，無法長期保存，發(fā)生感染的危險性很大，瑞士醫(yī)學(xué)界一直致力于發(fā)展提純，消毒，殺菌，保存技術(shù)，但仍不能達到長時間保存的目的。
1983年，愛德華·貝馳博士繼承尼翰羊胚胎素活性療法的成就，發(fā)展出個性化的治療技術(shù)，提純?yōu)樾》肿拥摹叭鞴倬A素”，更加易于吸收；幫助人體活化和新生出結(jié)構(gòu)完整，功能活躍的新細胞；替換由于各種致害因素所導(dǎo)致的衰老病變細胞，增強各生命系統(tǒng)的功能，恢復(fù)人體精力和體力，達到更加顯著的抗衰老療效。
1998年美國科學(xué)家體外培養(yǎng)人胚胎干細胞成功。
此后，國內(nèi)外學(xué)者采用不同的干細胞治療不同的疾病，其短期治療效果可以肯定，但目前存在以下問題：無論是羊胎素還是人胚胎干細胞，由于是異種(羊)與異體細胞，用后病人都存在著免疫排斥反應(yīng)、過敏、體外培養(yǎng)時污染細菌引起全身感染等嚴重并發(fā)癥。人胚胎干細胞還存在著倫理與法律問題。要避免這些問題，近160多年來，科學(xué)家夢想從植物的分生組織或形成層中分離出植物干細胞，但雖然做過許多艱苦的努力，卻一直沒有獲得成功，甚至有人認為這是不可能實現(xiàn)的神話。
2005年，韓國云火科學(xué)技術(shù)院在世界首次成功分離與培養(yǎng)了植物干細胞，并將其命名為多貝爾(Ddobyul)。研究證明，植物干細胞具有強大的抗氧化和抗衰老活性，能顯著提高人體免疫力和抗癌能力。
植物干細胞(Plant stem cell)包含有關(guān)于植物發(fā)育和生長的所有程式，擁有永恒生命力的細胞(immortal cell)，是植物生命力的根源(origin)。植物干細胞存在于被稱為分生組織的特殊構(gòu)造內(nèi)，具有非常驚人的再生能力。這些使得植物可以在數(shù)百年間不斷生長，并生成全新的器官。在干細胞臨床試驗應(yīng)用上研究證明，動物干細胞可以分化成為組織細胞，動物干細胞修補受損組織可以確定，但植物干細胞與動物干細胞差別巨大，植物干細胞只能分化成為其他類型的植物細胞，絕對不可能分化出人類細胞。所以，直接采用植物干細胞用于修補人類組織細胞的損傷是不現(xiàn)實的。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，因植物干細胞不能直接用于修補人類細胞的損傷，那么植物干細胞的有效成份是否能激活人類自身干細胞分裂，來實現(xiàn)修復(fù)與補充人類組織細胞，達到疾病康復(fù)的目的呢？本發(fā)明人提出一種水稻胚胎素制作方法及應(yīng)用，且證明植物胚胎素能修復(fù)機體損傷的細胞和激活機體內(nèi)休眠狀態(tài)的干細胞分裂，產(chǎn)生新的細胞替代死亡的細胞，且發(fā)揮其作用，達到從根本上防治疾病的效果，且操作簡便，功效廣泛，從而解決了這一技術(shù)難題。
本發(fā)明者選用水稻作為研究對象。水稻(拉丁學(xué)名：Oryza sativa英文：rice)作為一種生物，是草本稻屬的一種，水稻原產(chǎn)中國，七千年前中國長江流域就種植水稻。為一年生，禾本科植物，單子葉，性喜溫濕。稻是人類的主要糧食，也可用于釀酒、制糖等食用，其根性甘，平，歸心，肝經(jīng)，用于陰虛發(fā)熱，自汗盜汗，口渴咽干。隨現(xiàn)代科學(xué)發(fā)展對谷芽研究證明，谷芽中含有大量蛋白質(zhì)酶，維生素A，B族維生素，淀粉及蛋白質(zhì)等多類營養(yǎng)物質(zhì)，提取其成份作為藥用。
本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
一種水稻胚胎素的制作方法，包括以下步驟：
(1)精選稻種；
(2)育苗，在播種前8天進行晾曬，晾曬1～2天后用1％的石灰水浸泡2～3天，然后用水浸泡4～5天，催芽8天；
(3)收集水稻胚胎并獲取水稻胚胎干細胞；
(4)對水稻胚胎干細胞進行細胞破壁處理，之后依次進行去雜處理，離心處理，得到水稻多能胚胎素；
所述水稻胚胎干細胞為多能水稻胚胎干細胞。
優(yōu)選的，所述步驟(3)中，將收集到的水稻胚胎清洗后切碎，加入3～5倍的蒸餾水后粉碎打漿，獲得含有水稻胚胎干細胞的水稻胚胎漿，再通過200目過濾后得到水稻胚胎干細胞。
優(yōu)選的，所述步驟(4)中，所述細胞破壁處理采用低溫高速珠磨法將水稻胚胎干細胞破壁，所述離心處理為在5℃-50℃的溫度條件下，3000r/min，離心10-15分鐘。
優(yōu)選的，還包括對得到的水稻胚胎素進行滅菌處理，60℃溫度下持續(xù)10小時。
本發(fā)明還提供一種水稻胚胎素，采用上述制作方法得到。
優(yōu)選的，所述水稻胚胎素包括42％的輔酶Q10,6％的氨基酸，5％的表皮生長因子，41％的熊果甙，核酸，泛酸，假馬齒莧，表皮修復(fù)因子，超氧化物歧化酶，所述水稻胚胎素的純度為98％以上。
本發(fā)明還提供一種水稻胚胎素的用途，用于制備治療心腦血管、糖尿病、胃十二指腸潰瘍、肝炎、腎功能衰竭的慢性疾病的藥物以及抗衰老與美容制品。
優(yōu)選的，所述藥物或制品的劑型包括口服丸劑、口服液、外敷乳劑、注射給藥劑。
優(yōu)選的，所述水稻胚胎素在制備藥物或制品中占單位劑量藥物或制品的1％-12％。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：從水稻胚胎干細胞中分離得到水稻多能胚胎素混合物(多為小分子肽)經(jīng)口服或局部外用可直接吸收。REF進入人體后可激活自身休眠干細胞分化出新的細胞替補死亡的細胞，達到復(fù)原臟器的作用，它既超過目前干細胞移植的治療作用，又無干細胞移植后可能出現(xiàn)的并發(fā)癥，如免疫排斥反應(yīng)，用藥途征方便、安全，還可避免人胚胎素倫理與法律的問題，為從根本上防治各類、各種疾病，尤其是慢性、疑難性疾病，抗衰老、延長壽命、美容等是最佳的自然養(yǎng)生療法。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行詳細描述，本部分的描述僅是示范性和解釋性，不應(yīng)對本發(fā)明的保護范圍有任何的限制作用。
本發(fā)明是通過從水稻胚胎干細胞(rice embryonic stem cell，RES)中提取的水稻胚胎素(rice embryo factor，REF)，用于防治目前被視為各類不治之癥性疾病，尤其是各類慢性、疑難性疾病和抗衰老與美容。
REF的作用原理：REF可替代人胚胎素(HEF)，能保持細胞活力，延長工作細胞的壽命；修復(fù)損傷細胞，恢復(fù)細胞的功能；延長體內(nèi)干細胞的壽命；激活體內(nèi)休眠細胞，補充有效的工作細胞；激活自身休眠干細胞，分化不同組織細胞，以替代更新衰老、損傷和死亡的細胞，使組織器官復(fù)原，達到源頭根治疾病，逆轉(zhuǎn)青春的效果。
水稻胚胎干細胞，存在于水稻胚胎中，從水稻育苗第8天的水稻胚(水稻1～3片葉稻苗時)，包括子葉、胚芽、胚軸、胚根和胚乳，袪除稻殼、各類危險因子與雜質(zhì)，水稻胚胎中存在大量的水稻胚胎干細胞，不需完全分離出水稻胚胎干細胞，故一塊收集，而獲得水稻胚胎干細胞和水稻其他細胞。
對水稻胚胎(稻苗)清潔，用無菌蒸餾水反復(fù)沖洗、切碎，按1：5的比例加入無菌蒸餾水粉碎打漿，獲得水稻胚胎漿，含水稻胚胎干細胞、水稻其他組織細胞、植物纖維、組織液等成份，過濾去植物纖維，保留水稻胚胎干細胞、水稻其他組織細胞、組織液等成份。
水稻胚胎干細胞采用低溫高速珠磨法破壁處理，包括細胞壁與細胞核模，同時可使與細胞尺度相當(dāng)?shù)南x卵、細菌也會被殺滅，最后經(jīng)離心后獲得水稻胚胎素。
本發(fā)明水稻胚胎素為多能胚胎素。
本發(fā)明REF由于取8天內(nèi)水稻胚胎內(nèi)，其絕大部分均為多能胚胎干細胞，所以獲取的胚胎素均為多能胚胎素，其作用能保持細胞活力，延長工作細胞的壽命；修復(fù)損傷細胞，恢復(fù)細胞的功能；激活體內(nèi)休眠細胞，補充有效的工作細胞；保護自身干細胞的衰減和促進干細胞生成；激活自身休眠干細胞分化出各類細胞，替補死亡的細胞，達到復(fù)原臟器的作用，用于治療各類疾病，尤其是慢性或疑難性疾病與抗衰老療效非常顯效，該產(chǎn)可長期保存、無毒性、無排異反應(yīng)，用藥口服與外用、方便、安全，還可避免人胚胎素倫理與法律的問題。
實施例1
水稻胚胎素的制作方法
1.獲取水稻胚胎組織
1.1精選稻種：
選擇稻種的要求：優(yōu)選來自高產(chǎn)、健康無病、當(dāng)年稻種。本實施例從廣州農(nóng)科所種子基地獲取優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗病的雜交水稻組合(品種)。根據(jù)產(chǎn)量要求不同，稻種數(shù)量各異，可以10、100、500千克為一基數(shù)，本發(fā)明根據(jù)試驗與實驗用量以500千克水稻為一個基數(shù)。
1.2正確育苗：
在播種前8d進行曬種，曬1～2d后用1％的石灰水浸泡2～3d，以利于消毒殺菌，促進種子萌發(fā)。然后用清水洗凈再用冷水浸泡4～6d，使種子充分吸水，注意換水和攪拌，最后濾起催芽8d，可見胚葉、胚芽、胚軸、胚根和胚乳時，胚苗約1.5cm左右，即為水稻胚胎。
1.3清潔胚苗：
收集水稻胚胎時，按清潔操作，隨后用無菌純水浸泡胚苗30min，袪除各類危險因子，如雜質(zhì)，反復(fù)沖洗水稻胚胎組織后置入無菌袋中。
2.從水稻胚胎中獲取干細胞
2.1水稻胚胎中提取胚胎干細細作以下處理
2.1.1從水稻胚胎中提取多能水稻干細胞：
水稻胚胎干細胞存在于水稻胚胎中，從水稻育苗第8d的水稻胚(水稻1～3片葉稻苗時)，包括子葉、胚芽、胚軸、胚根和胚乳，袪除稻殼、各類危險因子與雜質(zhì)，水稻胚胎中存在大量的水稻胚胎干細胞，不需完全分離出水稻胚胎干細胞，故一塊收集，而獲得水稻胚胎干細胞和其他水稻細胞。
2.1.2對水稻胚胎(稻苗)清潔：
用無菌蒸餾水反復(fù)沖洗、切碎，加入1：5的無菌蒸餾水粉碎打漿，獲得水稻胚胎漿，內(nèi)含水稻胚胎干細胞、其他水稻組織細胞、植物纖維、組織液等。
2.1.3胚胎漿過濾：
通過200目過濾器，濾去植物纖維和雜質(zhì)，保留水稻胚胎干細胞、水稻其他組織細胞和組織液。
2.1.4水稻干細胞的鑒定：
本實施例采用基因檢測，同時還要作核型分析以確定所培養(yǎng)細胞的核型正常，以及開展體內(nèi)、體外的分化實驗對獲得的水稻干細胞進行鑒定。
3.從水稻胚胎干細胞中萃取胚胎素
3.1破碎細胞：
目前已發(fā)展了多種細胞破碎方法，以便適應(yīng)不同用途和不同類型的細胞壁破碎。破碎方法可規(guī)納為機械法和非機械法兩大類。①機械法：包括高壓勻漿破碎法(homogenization)、振蕩珠擊破碎法(Skaking Bead)、高速攪拌珠研磨破碎法(fine grinding)、超聲波破碎法(ultrasonication)等。②非機械法：滲透壓沖擊破碎法(osmotic shock)、凍融破碎法(freezing and thawing)、酶溶破碎法(enzyme lysis)、化學(xué)破碎法(chemical treatment)和去垢劑破碎法(detergents)等，根據(jù)環(huán)境條件，分別選用。本發(fā)明將水稻胚胎漿采用低溫高速珠磨法破壁處理，包括細胞壁與細胞核膜，細胞破壁后胚胎漿呈懸浮狀液體，即RESC液。所采用的細胞破碎方法可使與細胞尺度相當(dāng)?shù)南x卵、細菌同時殺滅。
3.2 RESC液去脂：
采用冷凍法去除細胞溶液中的脂肪。
3.3 REF的提?。?/p>
采用離心機在≤50℃，且≥5℃的溫度條件下，3000r/min左右離心15分鐘，去除下部沉淀物，收集上部懸浮液，將懸浮液過截留分子量為800000道爾頓以上的中空纖維超濾器，得超濾液，即為REF液，待檢測。本實施例中采用離心方式既可去除其他雜質(zhì)和不破壞多肽結(jié)構(gòu)，又能獲得更多的水稻胚胎素，操作也更方便。設(shè)定離心機溫度在5℃-50℃之間，既可以使提取的胚胎素呈液狀，且有較大的限象溫度，確保提取的胚胎素不會失活，優(yōu)選設(shè)定離心機溫度在5℃-30℃，進一步優(yōu)選5℃-10℃，本實施例中采用5℃。
3.4 REF的收集：
根據(jù)后續(xù)產(chǎn)品制作與配制要求，可將REF液冷凍干燥后得到類白色疏松團塊即水稻胚胎素(固體)，或?qū)⑸鲜龀瑸V液經(jīng)超濾濃縮至50％濃度的REF(液體)分裝保存，待檢測。
4. REF的檢測
4.1光學(xué)顯微鏡的檢測：
采用光學(xué)或電子顯微鏡觀察，無雜質(zhì)、無細胞、見小顆?；旌弦后w即為本實施例提取制備的水稻胚胎素。
4.2生化的檢測：
①蛋白含量的測定：按凱氏氮法采用分光光度計測量法，檢測到蛋白質(zhì)的含量；②分子量的鑒定：采用三氯乙酸氮溶指數(shù)(THA-NSI)進行肽含量檢測方法對懸浮液內(nèi)容物進行檢測，分子量在180～1000道爾頓以下，為小肽、寡肽和多肽的物質(zhì)為REF。經(jīng)生化分析胚胎素主要成分輔酶Q10、核酸、泛酸、脂類、多肽、氨基酸、熊果甙、假馬齒莧、SOD(超氧化物歧化酶)等，其他成分需進一步研究。③純度鑒定：采用區(qū)帶電泳法鑒定，具體操作見臨床生化技術(shù)；④免疫活性鑒定：采用雙向瓊脂擴散試驗。
4.3主要成分：
經(jīng)生化分析本實施例提取的胚胎素主要成分為：輔酶Q10占42％,氨基酸占6％，EGF(表皮生長因子)占5％，熊果甙，核酸，泛酸，假馬齒莧，ERF(表皮修復(fù)因子)，SOD(超氧化物歧化酶)等41％，水稻胚胎素的純度為98％以上，其他成分需進一步研究。
4.4成分特點：
輔酶Q10：是一種維他命，也是一種脂溶性醌，高效抗氧化劑，能防止心律不齊，過敏癥，心絞痛，浮腫，高血壓及消滅多余脂肪。它在延緩衰老方面起到非常重要的作用。輔酶Q10和維他命C、E很相似，幫助起中和作用。
泛酸：我們熟知的維他命5，能潛在的控制煩惱、失望、焦慮、頭痛、慢性疲勞等，還能幫助改善酒精或煙草引起的性功能障礙。
假馬齒莧：研究表明，假馬齒莧能支持大腦的學(xué)習(xí)和記憶部分。假馬齒莧有抗氧化性，能保護決定記憶的區(qū)域及減少腦部壓力。傳統(tǒng)應(yīng)用已表明，假馬齒莧對促進大腦功能有直接作用，如加強集中注意力和改善記憶。
5. REF的滅菌處理
5.1通過細胞破壁法
破壁時細菌也破膜而失活。5.2巴斯特滅菌處理(滅菌與滅毒)：
60℃，連續(xù)10h。達到徹底滅菌，又可保持水稻胚胎素的活性。通常采用高溫度消毒需短時消毒，不超過6個小時。本實施例采用連續(xù)長時間較高溫度進行消毒，完全徹底的去除病毒，同時確保胚胎素的生物活性，在后續(xù)臨床試驗中可見發(fā)揮出了高效的生物活性。
6. REF的安全性檢驗
6.1進行動物急性毒性試驗、動物過敏性試驗、家兔熱源試驗。
6.2細菌培養(yǎng)檢驗。
7. REF的劑型與濃度(含量)配制
所述水稻胚胎素在制備藥物或制品中占單位劑量藥物的1％-12％。所述單位劑量為配制藥物或制品最小單位的量中所含胚胎素的百分含量，如一顆丹丸所含胚胎素的百分含量，一瓶藥酒所含胚胎素的百分濃度，一片面膜所含胚胎素的百分含量。
7.1丹劑
7.1.1 REF保肝解毒茶丹：
在保肝解毒茶丹加入5％的REF，配制成REF保肝解毒茶丹。
7.1.2 REF保心通絡(luò)茶丹：
在保心通絡(luò)茶丹加入5％的REF，配制成REF保心通絡(luò)茶丹。
7.1.3 REF保胰穩(wěn)糖茶丹：
在保胰穩(wěn)糖茶丹加入5％的REF，配制成REF保胰穩(wěn)糖茶丹。
7.1.4 REF保脾養(yǎng)胃茶丹：
在保脾養(yǎng)胃茶丹加入5％的REF，配制成REF保脾養(yǎng)胃茶丹。
7.1.5 REF保肺增氧茶丹：
在保肺增氧茶丹加入5％的REF，配制成REF保肺增氧茶丹。
7.1.6 REF保腎養(yǎng)元茶丹：
在保腎養(yǎng)元茶丹加入5％的REF，配制成REF保腎養(yǎng)元茶丹。
7.2藥酒
7.2.1 REF藥酒：
50℃米酒配制成5％濃度的REF酒。
7.2.2功夫?qū)氈チ諶EF藥酒：
用功夫?qū)氈チ志婆渲瞥?％濃度的功夫?qū)氈チ諶EF酒。
7.3口服液
7.3.1 REF口服液：
用純凈滅菌蒸餾水配制成5％濃度的REF口服液。
7.3.2 REF野生蜂蜜口服液：
用純凈滅菌蒸餾水先配制成12％的野生蜂蜜液，再配制成5％濃度的REF野生蜂蜜液。
7.4飲料
7.4.1 REF礦泉水：
用礦泉水配制成1％濃度的REF飲料。
7.4.2 REF飲料：
在自配飲料中加入1％濃度的REF，配制成REF飲料。
7.5化妝品
7.5.1REF保潔面霜：
在的保潔面霜中加5％REF，制作成REF保潔面霜。
7.5.2面膜
7.5.2.1 REF保膚保濕面膜：
在保膚保濕面膜中加5％REF，制作成REF保膚保濕面膜。
7.5.2.2 REF保膚祛痘面膜：
在保膚祛痘面膜中加5％REF，制作成REF保膚祛痘面膜。
7.5.2.3 REF保膚祛斑面膜：
在保膚祛斑面膜中加5％REF，制作成REF保膚祛斑面膜。
7.5.2.4 REF保膚定春面膜：
在保膚定春面膜中加5％REF，制作成REF保膚定春面膜。
7.5.3 REF保膚精華液：
在保膚精華液中加5％REF，制作成REF保膚精華液。
7.6外用藥
7.6.1 REF噴霧劑：
在自配的噴霧劑中10％REF，制作成REF噴霧劑。
8.包裝
8.1丹劑包裝
8.1.1 REF保肝解毒茶丹：
采用玻璃小瓶，0.3g，30粒密封包裝。
8.1.2 REF保心通絡(luò)茶丹：
采用玻璃小瓶，0.3g，30粒密封包裝。
8.1.3 REF保胰穩(wěn)糖茶丹：
采用玻璃小瓶，0.3g，30粒密封包裝。
8.1.4 REF保脾養(yǎng)胃茶丹：
采用玻璃小瓶，0.3g，30粒密封包裝。
8.1.5 REF保肺增氧茶丹：
采用玻璃小瓶，0.3g，30粒密封包裝。
8.1.6 REF保腎養(yǎng)元茶丹：
采用玻璃小瓶，0.3g，30粒密封包裝。
8.2藥酒包裝
8.2.1 REF藥酒：
采用玻璃瓶50ml，陶瓷瓶500ml密封包裝。
8.2.2功夫?qū)氈チ諶EF藥酒：
采用玻璃瓶50ml，陶瓷瓶500ml密封包裝。
8.3口服液包裝
8.3.1 REF口服液：
采用玻璃瓶10ml密封包裝。
8.3.2 REF野生蜂蜜口服液：
采用玻璃瓶10ml密封包裝。
8.4飲料包裝
8.4.1 REF礦泉水：
采用塑料瓶500ml罐裝。(
8.4.2 REF飲料：
采用鐵罐250ml罐裝。
8.5化妝品包裝
8.5.1 REF護膚霜：
采用玻璃瓶90克罐裝。
8.5.2面膜包裝
8.5.2.1 REF保膚保濕面膜：
采用塑料袋包裝。
8.5.2.2 REF保膚祛痘面膜：
采用塑料袋包裝。
8.5.2.3 REF保膚祛斑面膜：
采用塑料袋包裝。
8.5.3 REF保膚精華液：
采用玻璃瓶100ml包裝。
8.6 REF噴霧劑：
PET塑料瓶100ml包裝。
9.儲藏方法
9.1茶丹儲藏
9.1.1 REF保肝解毒茶丹：
放置5℃以下，保存1年以上。
9.1.2 REF保心通絡(luò)茶丹：
放置5℃以下，保存1年以上。
9.1.3 REF保胰穩(wěn)糖茶丹：
放置5℃以下，保存1年以上。
9.1.4 REF保脾養(yǎng)胃茶丹：
放置5℃以下，保存1年以上。
9.1.5 REF保肺增氧茶丹：
放置5℃以下，保存1年以上。
9.1.6 REF保腎養(yǎng)元茶丹：
放置5℃以下，保存1年以上。
9.2藥酒儲藏
9.2.1 REF藥酒：
放置常溫(25℃)下存放20年。
9.2.2功夫?qū)氈チ諶EF藥酒：
放置常溫(25℃)下存放20年。
9.3 口服液儲藏
9.3.1 REF口服液：
常溫保存365天，置涼暗處保存。
9.3.2 REF野生蜂蜜口服液：
常溫保存365天，置涼暗處保存。
9.4飲料儲藏
9.4.1 REF飲料：
常溫保存365天，置涼暗處保存。
9.4.2 REF飲料：
常溫保存365天，置涼暗處保存。
9.5化妝品儲藏
9.5.1 REF護膚霜：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃3～4年。
9.5.2面膜儲藏
9.5.2.1 REF保膚保濕面膜：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃2～3年。
9.5.2.2 REF保膚祛痘面膜：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃2～3年。
9.5.2.3 REF保膚祛斑面膜：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃2～3年。
9.5.2.4 REF保膚定春面膜：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃2～3年。
9.5.3精華素：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃2～3年。
9.6外用藥
9.6.1 REF噴霧劑：
常溫保存365天，置涼暗處保存，0～4℃2年。
實施例2
REF治療動物實驗
選用大小白鼠、兔、犬、猴做出不同創(chuàng)傷與不同15種疾病的模型，應(yīng)用對照與REF干預(yù)先后治療500只以上不同的動物實驗，模型包括以下各系統(tǒng)9種代表性疾病：(1)犬顱腦損傷模型；(2)猴腦缺血模型；(3)犬慢性阻塞性肺疾病模型；(4)犬胃、十二指腸潰瘍模型；(5)犬肝硬變(肝硬化)模型；(6)犬急性心肌梗死動型；(7)犬糖尿病模型；(8)犬腎功能衰竭模型；(9)犬燒傷模型(REF治療動物實驗為本發(fā)明創(chuàng)新)；(10)其他模型。各組動物模型標(biāo)準(zhǔn)按實驗要求統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)；療效標(biāo)準(zhǔn)按相關(guān)疾病療效標(biāo)準(zhǔn)。本研究證明：對各系統(tǒng)9種代表性疾病治療療效均較好，其結(jié)果見表1。
表1 REF干預(yù)與常規(guī)治療15種疾病療效比較(X±S)
與對組比*P<0.01
實施例3
REF的臨床應(yīng)用試驗
1. REF治療的疾?。?/p>
胚胎素治療適應(yīng)于各系統(tǒng)疾病，包括亞健康、促進兒童正常生長、發(fā)育、免疫系統(tǒng)缺陷性疾病、傳染疾病、腫瘤(各類良惡性腫瘤)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)疾病、心血管系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、骨骼及肌肉系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病、泌尿系統(tǒng)疾病、生殖系統(tǒng)疾病、性功能疾病、外周血管疾病、膚疾病，眼、耳、鼻、咽、喉疑難性疾病，抗衰老和美容等。
2. REF治療的疾病例數(shù)：
各類疾病與抗衰老的治療方法先后治療病人2000余例。
3. REF的治療方案：
①REF的選擇：根據(jù)不同的疾病程度選擇不同的劑型的REF產(chǎn)品。
②療程方案：短療程10次；中療程30次；長程療程60次。③療程方案：短療程適用于抗衰老；中療程適用于抗衰老+慢性疾病；長療程適用于慢性疾病或惡性腫瘤。
4. REF的治療方法
4.1 REF丹劑藥品(REF保肝解毒茶丹、REF保心通絡(luò)茶丹、REF保胰穩(wěn)糖茶丹、REF保脾養(yǎng)胃茶丹、REF保肺增氧茶丹、REF保腎養(yǎng)元茶丹6種)服用方法：
短療程：3.0g，口服，3次/日，連續(xù)10d；
中療程：3.0g，口服，3次/日，連續(xù)30d；
長療程：3.0g，口服，3次/日，每年連續(xù)60次，連續(xù)3年。
4.2 REF藥酒(REF藥酒、功夫?qū)氈チ諶EF藥酒2種)服用方法：
短療程：30ml，口服，2次/日，連續(xù)10d；
中療程：30ml，口服，2次/日，連續(xù)30d；
長療程：30ml，口服，2次/日，每年連續(xù)60次，連續(xù)3年。
4.3 REF口服液(REF口服液、REF野生蜂蜜口服液2種)服用方法：
短療程：10ml，口服，2次/日，連續(xù)10d；
中療程：10ml，口服，2次/日，連續(xù)30d；
長療程：10ml，口服，2次/日，每年連續(xù)60次，連續(xù)3年。
4.4 REF飲料(REF礦泉水、REF飲料2種)飲用方法：
短療程：1瓶(500ml、250ml)，口服，2次/日，連續(xù)10d；
中療程：10ml，口服，2次/日，連續(xù)30d；
長療程：10ml，口服，2次/日，每年連續(xù)60次，連續(xù)3年。
4.5 REF護膚霜應(yīng)用方法：
潔面后外涂用，2次/日，可長期應(yīng)用，本研究應(yīng)用30天觀察療效。
4.6 REF噴霧劑應(yīng)用方法：
創(chuàng)面清創(chuàng)后噴灑，2次/日，治愈為止。
4.7 REF面膜(REF保膚保濕面膜、REF保膚祛痘面膜、REF保膚祛斑面膜、REF保膚定春面膜4種)，1次/日，可長期應(yīng)用。
5. REF的治療效果
5.1應(yīng)用REF系列產(chǎn)品癥狀變化情況
根據(jù)本技術(shù)治療2000余例病人統(tǒng)計結(jié)果全部有效，應(yīng)用REF系列產(chǎn)品癥狀變化時間表2。
應(yīng)用REF系列產(chǎn)品癥狀變化時間表2
5.2 REF系列產(chǎn)品干預(yù)與常規(guī)治療20種疾病病人療效比較
本發(fā)明先后治療各系統(tǒng)不同的各種疾病2000余例，主要各系統(tǒng)代表性疾病50種臨床治療觀察結(jié)果見表2。各組疾病按診斷標(biāo)準(zhǔn)，療效標(biāo)準(zhǔn)按相關(guān)疾病療效標(biāo)準(zhǔn)。各系統(tǒng)疾病，采用REF系列產(chǎn)品干預(yù)與常規(guī)治療20種疾病病人療效比較其療效見表3。
表3 REF系列產(chǎn)品干預(yù)與常規(guī)治療20種疾病病人療效比較(X±S)
與對組比*P<0.01
5.3其他疾病未作對比試驗500例以上，有效率均在98％以上。見表4。
表4 REF干預(yù)未作對比試驗疾病病人療效
其他疾病500例以上，有效率均在98％以上。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。