本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方制劑及其制備方法，特別是治療2型糖尿病中藥復(fù)方制劑及其制備方法，屬于中醫(yī)治療糖尿病技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
糖尿病是一組由于胰島素分泌和（或）作用缺陷所引起的以慢性高血糖為特征的代謝性疾病。國(guó)際糖尿病聯(lián)盟（IDF）于2013年11月14日——聯(lián)合國(guó)糖尿病日公布第六版《國(guó)際糖尿病聯(lián)盟糖尿病地圖》顯示，2013年全球約有3.82億成年人患有糖尿病，約510萬人死亡，平均每6秒鐘就有1人死于糖尿病，并預(yù)計(jì)到2035年，該病患者人數(shù)會(huì)上升至5.92億，成為危害人類健康的主要疾病，其中，2型糖尿病（T2DM）占糖尿病總?cè)藬?shù)的90%～95%。迫于嚴(yán)峻的流行形勢(shì)，世界各國(guó)及國(guó)際組織對(duì)T2DM的研究均給予高度關(guān)注。
T2DM發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，西藥針對(duì)不同的患病機(jī)制，其作用靶點(diǎn)比較清楚，效應(yīng)較強(qiáng)。但是，2型糖尿病患者是一個(gè)有機(jī)聯(lián)系的整體，糖尿病患者機(jī)體的許多代謝環(huán)節(jié)同時(shí)存在失調(diào)，單純作用于某一靶點(diǎn)藥物難以發(fā)揮最佳治療效果，帶來副作用也相對(duì)明顯，原發(fā)性失效、繼發(fā)性失效問題也較嚴(yán)重。如果我們?cè)?型糖尿病早期就應(yīng)用具有整體調(diào)節(jié)及多靶點(diǎn)治療藥物勢(shì)必提高治療效果、控制病情發(fā)展及減少并發(fā)癥的發(fā)生。因此，研究整體調(diào)節(jié)、多靶點(diǎn)治療及副作用低的中藥藥物已成為2型糖尿病藥物研究的一個(gè)方向。
目前市場(chǎng)上治療糖尿病的藥物繁多，經(jīng)檢索，中國(guó)專利公開了以下治療糖尿病有關(guān)的中藥制劑的報(bào)道，現(xiàn)摘錄如下：
l、中國(guó)專利<申請(qǐng)?zhí)?gt;00108421<發(fā)明名稱>一種治療糖尿病的藥物及其制備方法<申請(qǐng)人>韓萬明劉萍，山西省陽泉市李家莊第一人民醫(yī)院分院<文摘>本發(fā)明公開了一種新的治療糖尿病的藥物，它是以生黃芪、生地、丹參、生山藥、荔枝核、元參、蒼術(shù)、枸杞子、烏梅、玉米須、五味子、天花粉、瓜蒂、肉桂、蠶蛹、鬼箭羽，海蛤殼、雞內(nèi)金、葛根、桑葉、黃精為原料，根據(jù)每味中藥不同的特性分別經(jīng)過凍干、曬干、煅燒、除塵、粉碎，按比例配制，再經(jīng)熟化，滅菌后制成散劑。
2、中國(guó)專利<申請(qǐng)?zhí)?gt;99120424<發(fā)明名稱>一種治療糖尿病的藥物及其制備方法<申請(qǐng)人>邵玉君<文摘>本發(fā)明公開了一種治療糖尿病的中成藥及其制備方法，這種中成藥將松花粉、雞內(nèi)金、黃芪、太子參、黃柏、玉米須、知母、地黃、黃精、桑白皮、山藥、荔枝核、丹參、山茱萸、大黃和五味子16味中藥料，根據(jù)其有效成分和理化性質(zhì)分為四組，分別采用水煎、水煎醇沉、乙醇提取和粉碎后直接入藥的工藝，制備成膠囊，治療糖尿病。
現(xiàn)有技術(shù)存在的問題為反彈性高，藥物組成繁雜，成本過高，成分不易控制，副作用較大等諸多不足。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑及其制備方法，藥物組方合理、使用安全、療效顯著、副作用小、價(jià)格適中、制作方便、藥源豐富、服用方便，具有降低2型糖尿病患者的血糖、血脂、血液粘度的作用，解決背景技術(shù)存在的上述問題。
本發(fā)明目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：
一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑，該中藥復(fù)方制劑是由下述重量份的原料藥物制成：
姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，荷葉5～30份。
一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑的制備方法，該方法是水提法，包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，荷葉5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計(jì)，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏；
b．干燥，粉碎成細(xì)粉作為活性成分；
c．將步驟b所述的活性成分與藥學(xué)上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑的制備方法，該方法是水提法，包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，荷葉5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計(jì)，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏，作為活性成分；
b．將步驟a所述的活性成分與藥學(xué)上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
我們?cè)诙嗄甑腡2DM研究中發(fā)現(xiàn)，該病多中年后發(fā)病，且肥胖者居多，以過食肥甘、久坐少動(dòng)等為誘因，且符合“元?dú)獠粍俟葰馄淙朔识粔邸庇^點(diǎn)及肥甘厚味不得化氣而生痰濕脂濁壅積體內(nèi)的基本特點(diǎn)?；诖宋覀冋J(rèn)為脂濁壅積、郁久化熱為2型糖尿病的主要病理機(jī)制，故擬定以清熱、泄?jié)?、化瘀為主要功效的降糖?fù)方，全方由姜黃、大黃、女貞子、荷葉、澤瀉、葡萄籽組成，諸藥合用使肺之郁熱得以疏解,又可通降清竅之濁邪，臨床應(yīng)用中獲得了較好的降糖效果。
在醫(yī)學(xué)研究中，從中醫(yī)藥理論出發(fā)，經(jīng)過基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)并結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)，認(rèn)為消渴病常見病機(jī)為：脂濁壅積、郁久化熱，病久兼有血瘀（瘀血）。根據(jù)糖尿病患者臨床表現(xiàn)為多飲、多食、多尿、消瘦、神疲乏力等癥狀，創(chuàng)立了清熱、泄?jié)?、化瘀的治療法則，在該治療法則的指導(dǎo)下加以組方。
本發(fā)明的每一味原料藥物的功效及其在處方中的作用闡述如下：
1、姜黃：【來源】本品為姜科植物姜黃Curcuma longa L.的干燥根莖?！拘晕丁啃?、苦，溫。【歸經(jīng)】歸脾、肝經(jīng)?！净瘜W(xué)成分】姜黃含揮發(fā)油4.5％、6％。揮發(fā)油中含姜黃酮58％、姜油烯25％、水芹烯1％、1，8-桉葉素1％、香檜烯0.5％、龍腦0.5％、去氫姜黃酮等。還含姜黃素0.3％、1.1％、4.8％及阿拉伯糖1.1％，果糖12％、葡萄糖28％，脂肪油、淀粉、草酸鹽等?！竟δ苤髦巍科蒲袣?，通經(jīng)止痛。用于胸脅剌痛，閉經(jīng)，癓瘕，風(fēng)濕肩臂疼痛，跌撲腫痛。
2、大黃：【來源】本品為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L。 唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim。 ex Balf?；蛩幱么簏SRheum officinale Baill。的干燥根及根莖。【性味】苦，寒?！練w經(jīng)】歸脾、胃、大腸、肝、心包經(jīng)?！净瘜W(xué)成分】掌葉大黃、大黃及雞爪大黃的根狀莖和根中含有蒽醌類化合物約3%，包括游離和結(jié)合狀態(tài)的大黃酚（chrysophanol）、大黃酸（rhein）、蘆薈大黃素（aloe-emodin）、大黃素（emodin）、蜈蚣苔素（parietin，C22H22O10）、大黃素甲醚（emodinmonomethyl ether），其主要的瀉下成分為結(jié)合性大黃酸蒽酮-番瀉甙A. B. C（sennoside A. B. C）其中番瀉甙A（sennoside A）為主要有效成分。此外，尚含鞣質(zhì)約5%以及游離沒食子酸、桂皮酸及其脂類等。葉含槲皮甙，惟掌葉大黃的葉以金絲桃甙（hyperoside）含量最多?！竟δ苤髦巍繛a熱通腸，涼血解毒，逐瘀通經(jīng)。用于實(shí)熱便秘，積滯腹痛，瀉痢不爽，濕熱黃疸，血熱吐衄，目赤，咽腫，腸癰腹痛，癰腫疔瘡，瘀血經(jīng)閉，跌打損傷，外治水火燙傷；上消化道出血。酒大黃善清上焦血分熱毒。用于目赤咽腫，齒齦腫痛。熟大黃瀉下力緩，瀉火解毒。用于火毒瘡瘍。大黃炭涼血化瘀止血。用于血熱有瘀出血癥。
3、澤瀉：【來源】本品為澤瀉科植物澤瀉Alisma orientalis （Sam.）Juzep.的干燥塊莖。【性味】甘，寒?！練w經(jīng)】歸腎、膀胱經(jīng)?！净瘜W(xué)成分】【化學(xué)成分】塊莖中分出五種三萜類化合物：澤瀉醇A、澤瀉醇B，乙酸澤瀉醇A酯、乙酸澤瀉醇B酯和表澤瀉醇A；另含揮發(fā)油（內(nèi)含糠醛）、小量生物堿、天門冬素、一種植物甾醇、一種植物甾醇甙、脂肪酸（棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸）；還含樹脂、蛋白質(zhì)和多量淀粉（23％）?！竟δ苤髦巍坷”悖鍧駸?。用于小便不利，水腫脹滿，泄瀉尿少，痰飲眩暈，熱淋澀痛；高血脂。
4、女貞子: 【來源】 本品為木犀科植物女貞Ligustrum lucidum Ait. 的干燥成熟果實(shí)。【性味】 甘、苦，涼?！練w經(jīng)】 歸肝、腎經(jīng)?！净瘜W(xué)成份】 含女貞子甙（nuzhenide）、洋橄欖苦甙（oleuropein）、齊墩果酸（oleanolic acid）、4-羥基-B-苯乙基-B-D-葡萄糖甙、樺木醇（betulin）等?！竟δ苤髦巍?滋補(bǔ)肝腎，明目烏發(fā)。用于眩暈耳鳴，腰膝酸軟，須發(fā)早白，目暗不明。
5、葡萄籽：【來源】本品為葡萄科植物葡萄Vitis vinifera L.的種子?！拘晕丁课陡饰⑺?，性平?！練w經(jīng)】入肝、腎、肺經(jīng)?！净瘜W(xué)成份】多酚類：葡萄籽中含有多酚類物質(zhì)(GPS),主要有兒茶素類和原花青素類。兒茶素類化合物包括兒茶素、表兒茶素及其沒食子酸酯，是葡萄籽中主要的單聚體，也是原花青素寡聚體和多聚體的構(gòu)成單位。油脂類：葡萄籽中含有豐富的油脂，約占其重量的12%～15%，油中含有大量的不飽和脂肪酸，其中亞油酸的含量在58%～78%之間。揮發(fā)成分：葡萄籽中還含有少量的揮發(fā)性成分，這些物質(zhì)大多屬于醇、酚、萜類物質(zhì)，都具有較高的生物活性。其它成分：葡萄籽中除了含有上述多種物質(zhì)外，還含有粗蛋白、氨基酸和維生素A、E、D、K、P及多種微量元素，如鈣、鋅、鐵、鎂、銅、鉀、鈉、錳、鈷等?！竟δ苤髦巍烤哂醒a(bǔ)肝腎、益氣血、養(yǎng)胃生津、利小便之功效。
6、荷葉：【來源】為荷葉科植物荷葉Linum usitatissimum L.的根、莖、葉?！拘晕丁课缎粒桓?；性平。【歸經(jīng)】肝；胃；大腸經(jīng)?！净瘜W(xué)成分】葉、莖含黃酮甙：葒草素（orientin），異葒草素（isoorientin），牡荊素（vitexin），異牡荊素（isovitexin），光牡荊素（lucenin）I、Ⅱ，6-C-木糖基-8-C-葡萄糖基芹菜素（vicenin-Ⅰ），6，8-二-C-葡萄糖基芹菜素（vicenin Ⅱ）?！竟δ苤髦巍科礁危换钛?。主肝風(fēng)頭痛；跌打損傷；癰腫疔瘡。
本發(fā)明的上述組合藥物可以作為中醫(yī)治療消渴?。ㄌ悄虿。┑呐浞剑浞浇馀c功能主治：本方中姜黃為君藥，氣味辛苦，大寒無毒，行氣散郁，能入心脾二經(jīng)建功辟疫，活血化瘀，行氣疏肝，通經(jīng)止痛，具有抗炎、抗氧化的活性；大黃為臣藥，味苦，大寒無毒，上下通行，蓋亢甚之陽，非此莫抑，苦能瀉火，苦能補(bǔ)虛，一舉而兩得之。姜黃、大黃，降陰中之濁陰。一升一降，內(nèi)外通和，而雜氣之流毒頓消矣。女貞子補(bǔ)腎滋陰，養(yǎng)肝明目，安五臟，養(yǎng)精神解內(nèi)熱之消渴為佐藥。荷葉平肝活血；澤瀉、葡萄籽健脾益氣，潤(rùn)燥，利水道，使?jié)駶崽碉嫃男”愠?，三者共為使藥。諸藥合用使肺之郁熱得以疏解,又可通降清竅之濁邪。
本發(fā)明的中藥制劑供2型糖尿病患者煎湯服用，更適合現(xiàn)代制藥企業(yè)提取有效成分，制成顆粒劑、膠囊劑、口服液等藥劑學(xué)上的任何劑型，由于黃酮苷類易溶于水，具有很強(qiáng)降血糖作用，生物堿易溶于水具有顯著降血糖作用；多糖類易溶于水，具有較強(qiáng)的降血糖作用，苷類一般溶于水，皂苷易溶于熱水，能促進(jìn)胰島素釋放，調(diào)節(jié)血糖代謝；多肽類一般可溶于水。
本發(fā)明具有如下特點(diǎn)：①本發(fā)明在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明后，優(yōu)選上述中藥，加以科學(xué)配伍、制作，使各藥物相互配合，取長(zhǎng)補(bǔ)短，協(xié)同作用，諸藥合用，標(biāo)本兼治，增強(qiáng)療效。②本發(fā)明所用原料毒性小，克服了其它降糖藥物特別是西藥的毒副作用，及其長(zhǎng)期使用西藥后對(duì)肝腎的損害的缺點(diǎn)。按日劑量和療程使用本發(fā)明產(chǎn)品是安全的。本產(chǎn)品與二甲雙胍進(jìn)行比較，其降糖作用與二甲雙胍效果相當(dāng)，與西藥相比沒有毒副作用。③經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床驗(yàn)證本發(fā)明產(chǎn)品能使2型糖尿病患者空腹血糖和餐后2小時(shí)血糖降低，而且維持時(shí)間較長(zhǎng)，同時(shí)也使高血脂者膽固醇和甘油三酯降低，療效顯著。④組方科學(xué)，原料易得，生成工藝先進(jìn)，簡(jiǎn)便易行，可操作性強(qiáng)，產(chǎn)品價(jià)格適中，適合工業(yè)化制備。⑤制備過程中根據(jù)各中藥的有效成份、性質(zhì)及制劑要求，采用水提法、物理滅菌方法，因而產(chǎn)品有效成分含量高，穩(wěn)定，不易變質(zhì)，有利于長(zhǎng)期保存。
本發(fā)明有益效果：藥物組方合理、使用安全、療效顯著、副作用小、價(jià)格適中、制作方便、藥源豐富、服用方便，原料易得，生成工藝先進(jìn)，可操作性強(qiáng)。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。
一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑，該中藥復(fù)方制劑是由下述重量份的原料藥物制成：
姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，荷葉5～30份。
一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑的制備方法，該方法是水提法，包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，荷葉5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計(jì)，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏；
b．干燥，粉碎成細(xì)粉作為活性成分；
c．將步驟b所述的活性成分與藥學(xué)上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
一種治療糖尿病的中藥復(fù)方制劑的制備方法，該方法是水提法，包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，荷葉5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計(jì)，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏，作為活性成分；
b．將步驟a所述的活性成分與藥學(xué)上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
具體實(shí)施例：
實(shí)施例l：顆粒劑的制備
按照下列重量份稱取原料藥物：姜黃20份，大黃20份，澤瀉15份，女貞子15份，葡萄籽15份，荷葉15份。
將上述中藥材混合加水煎煮兩次，水的加入量是藥物混合物重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，煎煮液過濾，濾液合并，靜置十二小時(shí)，取上清液濃縮至相對(duì)密度為1. 20-1.30 (50-70℃)，與上述200目極細(xì)粉混勻?yàn)榻喾郏〗喾郏汉旱矸郏何⒕Юw維素一5：1：2：2，混勻，制粒，干燥，制成顆粒，即得產(chǎn)品名稱為降糖顆粒。
實(shí)施例2：顆粒劑的制備
按照下列重量份稱取原料藥物：姜黃20份，大黃20份，澤瀉15份，女貞子15份，葡萄籽15份，荷葉15份。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，水的加入量是藥物混合物重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，將煎煮液過濾．合并濾液，濃縮至浸膏，干燥，粉碎成200目細(xì)粉；加入適量的輔料淀粉，混勻，制得產(chǎn)品名稱為降糖顆粒。
實(shí)施例3：膠囊劑的制備
按照下列重量份稱取原料藥物：姜黃20份，大黃20份，澤瀉15份，女貞子15份，葡萄籽15份，荷葉15份。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，水的加入量是藥物混合物重量份的8倍，每次煎煮2小時(shí)，過濾，濾液合并，靜置十二小時(shí)，取上清液濃縮至適量干燥，裝入膠囊，即得產(chǎn)品名稱為降糖膠囊。
實(shí)施例4：口服液的制備
按照重量計(jì)（每重量份為l公斤）稱取原料藥物：姜黃20公斤，大黃20公斤，澤瀉15公斤，女貞子15公斤，葡萄籽15公斤，荷葉15公斤。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，每次加8倍量水，每次煎煮加水的重量是藥物混合物重量的8倍，每次煎煮2小時(shí)，過濾，合并濾液，靜置十二小時(shí)，取上清液濃縮至適量，與上述極細(xì)粉混合，再加入調(diào)味劑、防腐劑適量，混勻，制成產(chǎn)品名稱為降糖口服液。
實(shí)施例5：丸劑的制備
按照重量計(jì)（每重量份為l公斤）稱取原料藥物：姜黃20公斤，大黃20公斤，澤瀉15公斤，女貞子15公斤，葡萄籽15公斤，荷葉15公斤。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，每次煎煮加水的重量是原料藥物總重量的8倍。每次煎煮2小時(shí)，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏，干燥，粉碎成細(xì)粉；加入適量的諸入淀粉等輔料，混勻，水泛為丸，用百草霜包衣，撞光，干燥，即得產(chǎn)品名稱為降糖丸。
本發(fā)明制備方法中的賦形劑、輔料的加入量，依據(jù)制備過程中的具體情況，靈活掌握，也就是文中所述的“適量”。
服用方法：顆粒劑，每天3次，每次一袋，每袋10克；膠囊劑，每天3次，每次3粒，每粒0. 35克；口服液，每天3次，每次l0ml；丸劑：每天3次，每次30粒，每粒0.1克。飯前或飯后服用。
注意：兒童或低血糖者不宜服用。本發(fā)明經(jīng)華北理工大學(xué)中醫(yī)學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室急性毒性實(shí)驗(yàn)證明，本品急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)顯示無明顯毒性。
本發(fā)明藥理實(shí)驗(yàn)如下：
降糖顆粒對(duì)2型糖尿病大鼠血糖的影響
（一）材料與方法
(1)陽性對(duì)照藥雙益降糖顆粒：由魯南厚普制藥有限公司提供。(批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥≯隹字210950075)
(2)動(dòng)物 wistar大鼠，購于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所北京康藍(lán)生物技術(shù)有限公司，SPF級(jí)，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK<京>2009-0004，體重120±209。均為雄性。
(3)試劑 鏈脲佐菌素由北京博愛港商貿(mào)中心提供。
(4)方法 取70只wistar大鼠，隨機(jī)分為7組，即空白對(duì)照組（鹽水），模型組，西藥對(duì)照組，中藥對(duì)照組，本藥高劑量組，中劑量組，低劑量組。每周稱體重1次，并相應(yīng)調(diào)整投藥量，連用4周，對(duì)照組單給鹽水并隨時(shí)觀察大鼠活動(dòng)情況，于給藥4周，從尾尖采血測(cè)定每組大鼠的血糖等，于4周處死給藥組對(duì)照組全部動(dòng)物，并剖取主要臟器，送病理組織室檢查。
（二）結(jié)果
(1)對(duì)動(dòng)物一般情況的影響 給藥組大鼠與空白對(duì)照組相比，一般情況無明顯異常。
(2)血糖檢查結(jié)果 本發(fā)明藥物與模型組相比餐后血糖及空腹血糖顯著降低（P<0.05）,與二甲雙胍組、雙益降糖顆粒組相比較餐后血糖及空腹血糖無顯著性差異(P>0.05)（表1）。
本發(fā)明中各原料藥物的測(cè)試影響：
1、本發(fā)明中的 姜黃素對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟和肝臟病理改變的影響
方法：將100只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為兩組:10只大鼠為空白對(duì)照組,90只大鼠為T2DM造模組,采用小劑量鏈脲佐菌素(30mg/kg BW)聯(lián)合高糖高脂飼料誘導(dǎo)T2DM模型組。模型誘導(dǎo)成功后,符合T2DM標(biāo)準(zhǔn)的大鼠39只,隨機(jī)分為4組:T2DM模型對(duì)照組、姜黃素低劑量組(50 mg/kg BW)、姜黃素中劑量組(150 mg/kg BW)和姜黃素高劑量組(250 mg/kg BW),給予干預(yù)。45天后,從各組大鼠中隨機(jī)選取4只進(jìn)行病理檢測(cè),觀察T2DM大鼠腎臟和肝臟的病變進(jìn)展情況。結(jié)果與對(duì)照組相比,T2DM模型組的大鼠血糖、血脂均明顯升高(P<0.05)。與T2DM模型對(duì)照組比較,姜黃素干預(yù)各組T2DM大鼠腎臟和肝臟的病理改變均有不同程度的改善。結(jié)論姜黃素能夠改善T2DM大鼠肝、腎組織的病理變化。
2、姜黃素對(duì)糖尿病大鼠脊髓背角 TNF-α表達(dá)的影響
方法：30只SD雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(Con)、糖尿病組(DM)和姜黃素治療組(DM+Cur),每組10只;利用腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)制備大鼠糖尿病模型,DM+Cur組為糖尿病模型制備成功后給予姜黃素治療,同時(shí)Con組和DM組給予等量的生理鹽水。利用ELISA方法檢測(cè)各組大鼠脊髓背角TNF-α分子的含量,利用RT-PCR方法比較各組大鼠脊髓背角TNF-αmRNA的表達(dá)。結(jié)果:成功制備Ⅰ型糖尿病(TIDM)大鼠模型,該模型具有高血糖、質(zhì)量減輕、多飲、多食、多尿等特點(diǎn),ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示Con組、DM組和DM+Cur組大鼠脊髓背角TNF-α分子含量分別為:21±6 pg/mL、145±11 pg/mL以及80±7pg/mL,DM組TNF-α分子含量明顯高于Con組(P<0.05),給予姜黃素治療后,DM+Cur組TNF-α顯著下降,但仍高于Con組(P<0.05)。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示DM組大鼠脊髓背角TNF-αmRNA高于Con組,給予姜黃素治療后,DM+Cur組TNF-αmRNA較DM組有所降低,這一趨勢(shì)與ELISA結(jié)果相一致。結(jié)論:STZ誘導(dǎo)的TIDM大鼠脊髓背角TNF-α表達(dá)增加,中藥姜黃素可以降低TIDM大鼠髓背角TNF-α的表達(dá)。
3、大黃對(duì)糖尿病大鼠血管病變保護(hù)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究
方法:制備糖尿病大鼠模型,并給予大黃干預(yù),8周后,取血測(cè)定一氧化氮(NO)及內(nèi)皮素-1(ET-1)。取胸主動(dòng)脈環(huán)觀察不同累積濃度的乙酰膽堿(Ach)對(duì)去甲腎上腺素(NE)引起的血管收縮的抑制率。另留取一段胸主動(dòng)脈制備病理切片,SP法免疫組化染色,觀察細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)及血管細(xì)胞間黏附分子-1(VCAM-1)的陽性表達(dá)。結(jié)果:大黃組與模型組相比能明顯抑制升高的血漿ET-1(P<0.05);升高NO的水平(P<0.05);但均達(dá)不到正常組的水平(P<0.05)。模型組血管環(huán)對(duì)NE的收縮反應(yīng)明顯強(qiáng)于正常對(duì)照組及大黃組(P<0.05),且大黃組對(duì)NE的收縮反應(yīng)亦強(qiáng)于正常對(duì)照組(P<0.05)。在相同Ach濃度下,模型組及大黃組胸主動(dòng)脈環(huán)對(duì)Ach的舒張作用明顯弱于正常組(P<0.05),而大黃組強(qiáng)于模型組(P<0.05)。大黃組能明顯抑制糖尿病大鼠胸主動(dòng)脈ICAM-1及VCAM-1表達(dá)(P<0.05)。結(jié)論:大黃具有降低大鼠ET-1及升高NO的作用,能夠保護(hù)糖尿病大鼠內(nèi)皮依賴的血管舒張功能,且能夠抑制ICAM-1及VCAM-1的表達(dá),具有抗動(dòng)脈硬化作用。
4、大黃酚對(duì)糖尿病腦病大鼠海馬中BDNF、iNOS和氧化應(yīng)激的影響
方法:應(yīng)用水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大黃酚對(duì)糖尿病大鼠模型學(xué)習(xí)記憶的影響;應(yīng)用試劑盒法檢測(cè)不同實(shí)驗(yàn)組海馬中膽堿酯酶(AChE),膽堿乙?；D(zhuǎn)移酶(ChAT),腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF),誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)(CAT、SOD、GSH)的活性。結(jié)果大黃酚改善了糖尿病大鼠模型的學(xué)習(xí)記憶能力,增強(qiáng)了糖尿病大鼠模型組海馬中AChE和BDNF的活性,抑制了模型組海馬中ChAT、iNOS、CAT、SOD和GSH的活性。結(jié)論大黃酚可能通過增強(qiáng)BDNF的活性,下調(diào)iNOS的功能及抗氧化途徑從而對(duì)糖尿病腦病產(chǎn)生保護(hù)作用,其可能成為臨床上治療糖尿病腦病的新型藥物。
5、大黃素對(duì)2型糖尿病小鼠血糖、胰島素水平的影響
方法:血糖均均≥13.9 mmol/L的SPF級(jí)KKAy小鼠40只,隨機(jī)分為模型組(灌服無菌水)、低、中、高劑量大黃素治療組[分別予12.5、25、50 mg/(kg.d)大黃素灌胃]和吡格列酮治療組[予1.95 mg/(kg.d)灌胃],連續(xù)給藥8周。8周后測(cè)定各組小鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS),并計(jì)算胰島素敏感指數(shù)(ISI);用RT-PCR法測(cè)定小鼠骨骼肌和脂肪組織中PI3-K及GluT4的mRNA。結(jié)果與模型組比較,低、中、高劑量大黃素治療組和吡格列酮治療組小鼠的FPG、FINS、ISI均明顯降低(P均<0.05),且呈劑量依賴性。高劑量大黃素治療組組FINS、ISI均高于吡格列酮治療組(P均<0.05)。與模型組相比,低、中、高劑量大黃素治療組及吡格列酮治療組小鼠PI3-K、GluT4的mRNA明顯增高(P均<0.05)。結(jié)論大黃素具有良好的降血糖、降低胰島素水平和提高胰島素敏感度作用,其機(jī)制可能與PI3-K、GluT4基因有關(guān)。
6、澤瀉提取物對(duì)鏈脲佐菌素高血糖小鼠的治療和保護(hù)作用
方法：①給小鼠腹腔注射STZ 15 0mg?kg-1造成糖尿病動(dòng)物模型。igRAE 1.5、3.0g?kg-1,分別于給藥前和給藥后 1、2和 5h測(cè)定血糖 ;連續(xù)治療 15d后測(cè)血糖和血脂。②連續(xù)igRAE 1.5、3.0g?kg-13d ,再ipSTZ 10 5mg?kg-1,并繼續(xù)治療 3d ,用放免法測(cè)血清胰島素 ,取胰腺在光鏡下觀察胰島組織學(xué)變化。結(jié)果RAE治療給藥可明顯降低STZ糖尿病小鼠的血糖和甘油三酯。防治給藥可明顯對(duì)抗STZ誘發(fā)的血糖升高及胰島組織學(xué)改變 ,并能升高血清胰島素水平。結(jié)論RAE對(duì)STZ糖尿病小鼠有明顯的治療和保護(hù)作用。
7、澤瀉提取物對(duì)正常及四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的影響
方法 :給小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶 90mg?kg- 1 ,造成糖尿病模型。測(cè)定血糖 (Glu)、甘油三酯 (Trig)、膽固醇 (Chol)、胰淀粉酶 (Amy)和血清胰島素 (Ins)。光鏡下觀察胰腺和胰島的組織學(xué)變化。結(jié)果 :RAE可使正常小鼠血糖明顯降低。治療 7天可使四氧嘧啶小鼠Glu和Trig降低。光鏡下觀察RAE治療后的四氧嘧啶小鼠 ,胰島保持正常組織學(xué)形態(tài)。RAE還可升高血清Ins水平及對(duì)抗四氧嘧啶誘發(fā)的Amy降低。
8、女貞子降血糖作用
用女貞子水煎劑15,30g/kg給小鼠灌胃10日,可以降低正常小鼠的血糖,對(duì)四氧嘧啶引起的小鼠糖尿病有預(yù)防及治療作用,并可對(duì)抗腎上腺素或葡萄糖引起的血糖升高。
女貞子中齊墩果酸抗糖尿病效果
女貞子是我國(guó)傳統(tǒng)的中藥，通常用來治療癌癥、肝炎等疾病，在降血糖方面雖有報(bào)道，但缺乏系統(tǒng)深入的研究。
8、葡萄籽多酚抗糖尿病大鼠非酶糖基化實(shí)驗(yàn)研究
觀察葡萄籽多酚(GSPE)對(duì)糖尿病大鼠體內(nèi)非酶糖基化反應(yīng)的影響,評(píng)價(jià)其對(duì)糖尿病慢性并發(fā)癥(DCC)的干預(yù)效果。方法Wistar大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg造成糖尿病模型,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、氨基胍(150mg?kg-1?d-1)治療組、GSPE低、中、高3個(gè)劑量(50、150、450mg?kg-1?d-1)治療組,每組12只,另12只設(shè)為正常對(duì)照組。常規(guī)喂養(yǎng)12周后取大鼠血清及臟器,比較各組腎重/體重比值,用熒光法比較各組腎皮質(zhì)非酶糖基化終產(chǎn)物(AGEs),全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血糖、總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)。結(jié)果與空白對(duì)照組比較,GSPE可以顯著降低糖尿病大鼠腎重/體重比值(P<001),減少腎皮質(zhì)AGEs(P<001),GSPE中、高劑量組與氨基胍治療組作用相似;GSPE對(duì)血糖、TG無顯著影響,僅GSPE中劑量組TC與正常對(duì)照組比較差異有顯著性(P<001)。結(jié)論GSPE能夠抑制體內(nèi)非酶糖基化反應(yīng),是其防治DCC的主要作用機(jī)制之一。
9、葡萄籽提取物原花青素對(duì)糖尿病小鼠的抗氧化作用
方法:以四氧嘧啶小鼠制備糖尿病模型,將造模成功后的小鼠,分為模型組、GSEP低、中、高3個(gè)劑量(50、100、150 mg/kg)組,另設(shè)正常對(duì)照組。連續(xù)給藥28 d后,空腹12 h后,取全血和肝臟,測(cè)定全血和肝組織中超氧歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量。結(jié)果經(jīng)口給予小鼠GSEP 28 d后,高劑量組小鼠全血和肝組織中SOD和GSH-Px活性均明顯高于模型組(P<0.05),中、高劑量組小鼠全血和肝組織中丙二醛(MDA)含量均明顯低于模型組(均P<0.05)。結(jié)論 GSEP對(duì)糖尿病小鼠具有明顯的抗氧化保護(hù)作用。
10. 荷葉總生物堿及其鹽的提取和降脂作用的比較
方法：利用醇提取生物堿,酸水提取荷葉生物堿鹽,再經(jīng)大孔吸附樹脂(藥材與樹脂的比例1∶2)純化,用乙醇-水洗脫,再分別對(duì)2型糖尿病(NIDDM)大鼠模型進(jìn)行降血脂實(shí)驗(yàn),以血清甘油三酯和膽固醇為指標(biāo),比較其降血脂作用的差異,采用SPSS8.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理。[結(jié)果]荷葉生物堿鹽組的降血脂作用明顯優(yōu)于堿組。[結(jié)論]荷葉生物堿鹽組的降血脂作用強(qiáng)于生物堿。
11. 唐山產(chǎn)荷葉中荷葉總黃酮對(duì)2型糖尿病大鼠糖、脂代謝作用研究
方法:采用腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)和高能量飼料誘導(dǎo)T2DM大鼠模型,以荷葉總黃酮低、中、高劑量持續(xù)給藥30d后測(cè)空腹血糖(FBG)、血脂、糖化血紅蛋白(HbAlc)、胰島素(Ins)的含量及口服糖耐量實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:荷葉總黃酮可顯著降低T2DM模型大鼠的FBG、HbAlc、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)及低密度脂蛋白(LDL)及糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)中糖負(fù)荷后120min血糖水平,顯著升高高密度脂蛋白(HDL)和Ins、胰島素敏感指數(shù)(ISI)水平。結(jié)論:荷葉總黃酮能有效地降低T2DM模型大鼠的血糖,增加胰島素敏感性,糾正脂代謝紊亂,調(diào)節(jié)血脂。