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      一種治療腹瀉的中藥組合物及制備方法和應(yīng)用與流程

      文檔序號:12210073閱讀:241來源:國知局
      一種治療腹瀉的中藥組合物及制備方法和應(yīng)用與流程
      本發(fā)明涉及中藥
      技術(shù)領(lǐng)域
      ,具體涉及一種用于治療腹瀉的中藥組合物及制備方法和應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      :腹瀉是一種常見癥狀,俗稱“拉肚子”,是指排便次數(shù)明顯超過平日習慣的頻率,糞質(zhì)稀薄,水分增加,每日排便量超過200g,或含未消化食物或膿血、黏液。腹瀉常伴有排便急迫感、肛門不適、失禁等癥狀。腹瀉分急性和慢性兩類。急性腹瀉發(fā)病急劇,病程在2~3周之內(nèi)。慢性腹瀉指病程在兩個月以上或間歇期在2~4周內(nèi)的復(fù)發(fā)性腹瀉。目前市場上缺少真正有效的成藥。技術(shù)實現(xiàn)要素:發(fā)明目的:為了解決上述問題,本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療腹瀉的中藥組合物及制備方法和應(yīng)用。技術(shù)方案:本發(fā)明的目的是通過如下的方案實現(xiàn)的:一種治療腹瀉的中藥組合物,它由如下重量份數(shù)的原料藥提取制備得到:金絲草25-30份、狹眼鳳尾蕨16-20份、山皮條10-14份、蒔蘿子20-25份、梅花刺根10-20份、葛根8-16份、甘草3-7份。所述治療腹瀉的中藥組合物,它由如下重量份數(shù)的原料藥提取制備得到:金絲草28份、狹眼鳳尾蕨18份、山皮條12份、蒔蘿子23份、梅花刺根15份、葛根12份、甘草5份。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法包括如下步驟:取金絲草、狹眼鳳尾蕨、山皮條、蒔蘿子、梅花刺根、葛根、甘草藥材合并,粉碎,放入中藥前處理機器處理,處理后藥材加水煎煮兩次,加水量為藥材重量的10倍量,煎煮2h,合并煎液,濃縮至65℃時相對密度為1.10,加乙醇使含醇量的體積百分比達65%,攪拌,靜置,過濾,濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.20并回收乙醇,將濃縮液放入浸膏烘干機烘干,添加輔料制成膠囊劑、片劑、顆粒劑。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法中中藥前處理機器包括裝置殼體,在所述裝置殼體的頂面有進料斗,在所述裝置殼體的側(cè)壁底部有中藥導(dǎo)出通道,在所述裝置殼體內(nèi)設(shè)有傾斜導(dǎo)料板,所述傾斜導(dǎo)料板的頂端通過旋轉(zhuǎn)軸連接在裝置殼體的內(nèi)壁上且處于進料斗的正下方,所述傾斜導(dǎo)料板的底端與中藥導(dǎo)出通道相連通,其特征在于:在所述裝置殼體的底壁上固定有振動座,在所述振動座上固定有旋轉(zhuǎn)電機,在所述旋轉(zhuǎn)電機的主軸上設(shè)有輪盤,在所述輪盤的盤面與傾斜導(dǎo)料板的底端之間設(shè)有振動桿,所述振動桿的底端通過銷軸連接在輪盤的盤面上且所述振動桿的頂端固定在傾斜導(dǎo)料板的底端底面,在所述裝置殼體的側(cè)壁頂部設(shè)有條形通孔,所述條形通孔與中藥導(dǎo)出通道設(shè)置在同一側(cè)面上,在所述裝置殼體的外壁上固定的U型雜質(zhì)收集體,在所述條形通孔內(nèi)設(shè)有中心軸,在所述裝置殼體上有與所述中心軸通過皮帶傳動連接的驅(qū)動電機,還設(shè)有磁吸圓環(huán),所述磁吸圓環(huán)的內(nèi)壁通過筋桿固定在中心軸上,所述磁吸圓環(huán)的邊緣抵接在傾斜導(dǎo)料板上且磁吸圓環(huán)的外側(cè)邊緣與U型雜質(zhì)收集體的側(cè)邊頂端抵壓接觸。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法中中藥前處理機器中所述U型雜質(zhì)收集體的頂端設(shè)有傾斜刮板,所述傾斜刮板抵接在磁吸圓環(huán)的表面。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法中中藥前處理機器中所述傾斜導(dǎo)料板為塑料材料板體,所述傾斜刮板的寬度與磁吸圓環(huán)的寬度相同。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法中浸膏烘干機包括箱體,設(shè)置在所述箱體內(nèi)的承載網(wǎng)板,在所述箱體的底壁上設(shè)有熱風進口,在所述箱體的頂部有箱門,其特征在于:在所述箱體的內(nèi)壁上有豎向?qū)蚧?,在所述箱體上側(cè)壁上設(shè)有槽孔,所述槽孔連通箱體的內(nèi)腔與外部,所述承載網(wǎng)板的中部通過旋轉(zhuǎn)軸連接在箱體內(nèi),所述槽孔與所述豎向?qū)蚧垡孕D(zhuǎn)軸為中心對稱設(shè)置,在所述承載網(wǎng)板的一端固定有升降滑塊,在所述承載網(wǎng)板的另一端固定有抵壓支桿,所述升降滑塊設(shè)置在豎向?qū)蚧蹆?nèi)且所述抵壓支桿穿過所述槽孔伸出箱體,在所述升降滑塊與所述豎向?qū)蚧鄣牡妆谥g設(shè)有受力拉簧,所述受力拉簧的底端固定在豎向?qū)蚧鄣牡妆谏锨沂芰傻捻敹斯潭ㄔ谏祷瑝K上,在所述箱體的外壁上固定有驅(qū)動電機,在所述驅(qū)動電機的主軸上固定有偏心輪,在所述偏心輪的凸起輪邊上固定有抵壓凸塊,所述偏心輪在驅(qū)動電機的帶動下旋轉(zhuǎn)并使抵壓凸塊接觸并抵接在抵壓支桿上。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法中浸膏烘干機中所述承載網(wǎng)板的邊緣設(shè)有豎向擋網(wǎng),所述豎向擋網(wǎng)的底邊焊接固定在承載網(wǎng)板的邊緣上。所述治療腹瀉的中藥組合物,制備方法中浸膏烘干機中所述抵壓凸塊為弧形塊,且在所述抵壓凸塊的表面設(shè)有防滑凸紋,所述防滑凸紋設(shè)置在與抵壓支桿的接觸面上,所述防滑凸紋的高度為5-10mm。所述治療腹瀉的中藥組合物在制備抑制大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞增殖藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明中原料金絲草,拉丁文名Pogonatherumcrinitum(Thunb.)Kunth.金絲草屬,禾本科,單子葉植物綱,被子植物門。生長在生于河邊、墻隙、山坡和潮濕田圩。清熱,解暑,利尿。用于感冒高熱,中暑,尿路感染,腎炎水腫,黃疸型肝炎,糖尿病,小兒久熱不退。本發(fā)明以全草入藥。狹眼鳳尾蕨為鳳尾蕨科植物狹眼鳳尾蕨的全草。拉丁名:PterisbiauritaL.,止痢;收斂止血。主治泄瀉;痢疾;外傷出血。山皮條為豆科植物四川木藍的根或全株。治肚腹冷痛,胸膈氣脹,癆熱,瘡毒。本發(fā)明以全株入藥。蒔蘿子為傘形科植物蒔蘿的果實,溫脾腎,開胃,散寒,行氣,解魚肉毒。梅花刺根為薔薇科植物扁核木的根。清熱解毒,活血止痛,止咳消積。主瘡瘍腫痛,風濕痹痛,月經(jīng)不調(diào),跌打損傷,風熱咳嗽,食積停滯。其余均為藥典品種。有益效果:從中醫(yī)理論看,本方中金絲草、狹眼鳳尾蕨、山皮條清熱,解暑,利尿為君藥,蒔蘿子、梅花刺根、葛根溫脾腎,開胃,散寒,行氣為臣藥,甘草為佐使藥,諸藥相合,共奏清熱消炎、開胃散寒作用,用于治療腹瀉。本發(fā)明處方設(shè)計合理,配伍嚴謹,經(jīng)長期的臨床驗證,療效確切。組成為中藥材,無毒副作用,價格便宜。本發(fā)明中藥前處理機器的結(jié)構(gòu)設(shè)計新穎,其通過旋轉(zhuǎn)電機配合振動桿使處于傾斜導(dǎo)料板上的中藥緩慢下移,同時設(shè)有磁吸圓環(huán),由于磁吸圓環(huán)的表面在旋轉(zhuǎn)時會抵接在傾斜導(dǎo)料板上,從而可以將中藥內(nèi)的金屬雜質(zhì)吸除,在磁吸圓環(huán)旋轉(zhuǎn)時,會通過U型雜質(zhì)收集體的豎邊頂面刮動,從而將吸附的金屬雜質(zhì)刮除并收集,從而可以保證磁吸圓環(huán)的吸附能力,解決了傳統(tǒng)技術(shù)中去除中藥中金屬雜質(zhì)效率低的技術(shù)不足,使用穩(wěn)定性好且大大提高了去除金屬雜質(zhì)的效率。本浸膏烘干機的結(jié)構(gòu)設(shè)置合理,其操作便捷,可有效且快速的實現(xiàn)對藥物浸膏進行攪動,從而有利于藥物浸膏均勻烘干,一定程度上可大大提高藥物浸膏的烘干效率,解決了傳統(tǒng)技術(shù)中烘干效率較低的技術(shù)不足,適用性強且實用性好。附圖說明圖1為中藥前處理機器的結(jié)構(gòu)示意圖圖2為藥物浸膏烘干裝置的結(jié)構(gòu)示意圖具體實施方式以下通過實施例形式,對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明,但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例,凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。實施例1:取金絲草25份、狹眼鳳尾蕨20份、山皮條10份、蒔蘿子25份、梅花刺根10份、葛根16份、甘草3份藥材,粉碎,放入中藥前處理機器處理,處理后藥材加水煎煮兩次,加水量為藥材重量的10倍量,煎煮2h,合并煎液,濃縮至65℃時相對密度為1.10,加乙醇使含醇量的體積百分比達65%,攪拌,靜置,過濾,濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.20并回收乙醇,將濃縮液放入浸膏烘干機烘干,添加淀粉制成片劑。上述中藥前處理機器見圖1,包括裝置殼體1,在所述裝置殼體1的頂面有進料斗2,在所述裝置殼體1的側(cè)壁底部有中藥導(dǎo)出通道3,在所述裝置殼體1內(nèi)設(shè)有傾斜導(dǎo)料板4,所述傾斜導(dǎo)料板4的頂端通過旋轉(zhuǎn)軸5連接在裝置殼體1的內(nèi)壁上且處于進料斗2的正下方,所述傾斜導(dǎo)料板4的底端與中藥導(dǎo)出通道3相連通,在所述裝置殼體1的底壁上固定有振動座6,在所述振動座6上固定有旋轉(zhuǎn)電機7,在所述旋轉(zhuǎn)電機7的主軸上設(shè)有輪盤8,在所述輪盤8的盤面與傾斜導(dǎo)料板4的底端之間設(shè)有振動桿9,所述振動桿9的底端通過銷軸10連接在輪盤8的盤面上且所述振動桿9的頂端固定在傾斜導(dǎo)料板4的底端底面,在所述裝置殼體1的側(cè)壁頂部設(shè)有條形通孔11,所述條形通孔11與中藥導(dǎo)出通道3設(shè)置在同一側(cè)面上,在所述裝置殼體1的外壁上固定的U型雜質(zhì)收集體12,在所述條形通孔11內(nèi)設(shè)有中心軸13,在所述裝置殼體1上有與所述中心軸13通過皮帶傳動連接的驅(qū)動電機14,皮帶連接在中心軸的一側(cè)即可,還設(shè)有磁吸圓環(huán)15,所述磁吸圓環(huán)15的內(nèi)壁通過筋桿16固定在中心軸13上,所述磁吸圓環(huán)15的邊緣抵接在傾斜導(dǎo)料板4上且磁吸圓環(huán)15的外側(cè)邊緣與U型雜質(zhì)收集體12的側(cè)邊頂端抵壓接觸。本實施例中,旋轉(zhuǎn)電機和驅(qū)動電機均為市場上常規(guī)的電機,其只需要按照對應(yīng)的說明進行連接使用即可。在所述U型雜質(zhì)收集體的頂端設(shè)有傾斜刮板16,所述傾斜刮板抵接在磁吸圓環(huán)的表面。所述傾斜導(dǎo)料板為塑料材料板體。所述傾斜刮板的寬度與磁吸圓環(huán)的寬度相同。所述藥物浸膏烘干裝置見圖2,包括箱體1,設(shè)置在所述箱體1內(nèi)的承載網(wǎng)板2,在所述箱體1的底壁上設(shè)有熱風進口3,在所述箱體1的頂部有箱門4,在所述箱體1的內(nèi)壁上有豎向?qū)蚧?,在所述箱體1上側(cè)壁上設(shè)有槽孔6,所述槽孔6連通箱體1的內(nèi)腔與外部,所述承載網(wǎng)板2的中部通過旋轉(zhuǎn)軸7連接在箱體1內(nèi),所述槽孔6與所述豎向?qū)蚧?以旋轉(zhuǎn)軸7為中心對稱設(shè)置,在所述承載網(wǎng)板2的一端固定有升降滑塊8,在所述承載網(wǎng)板2的另一端固定有抵壓支桿9,所述升降滑塊8設(shè)置在豎向?qū)蚧?內(nèi)且所述抵壓支桿9穿過所述槽孔6伸出箱體1,在所述升降滑塊8與所述豎向?qū)蚧?的底壁之間設(shè)有受力拉簧10,所述受力拉簧的底端固定在豎向?qū)蚧鄣牡妆谏锨沂芰傻捻敹斯潭ㄔ谏祷瑝K上,在所述箱體1的外壁上固定有驅(qū)動電機11,在所述驅(qū)動電機11的主軸上固定有偏心輪12,在所述偏心輪12的凸起輪邊上固定有抵壓凸塊13,所述偏心輪12在驅(qū)動電機11的帶動下旋轉(zhuǎn)并使抵壓凸塊接觸并抵接在抵壓支桿上。本實施例中,驅(qū)動電機為市場上常規(guī)的電機,其只需要按照對應(yīng)的連接說明進行連接使用即可。在所述承載網(wǎng)板的邊緣設(shè)有豎向擋網(wǎng)14,所述豎向擋網(wǎng)的底邊焊接固定在承載網(wǎng)板的邊緣上??梢苑乐顾幬锝嗟綦x承載網(wǎng)板。所述抵壓凸塊為弧形塊,且在所述抵壓凸塊的表面設(shè)有防滑凸紋15,所述防滑凸紋設(shè)置在與抵壓支桿的接觸面上。可以增加抵壓凸塊與抵壓支桿之間的摩擦力。所述防滑凸紋的高度為5-10mm。其工作原理簡述如下:在使用時將藥物浸膏堆放在承載網(wǎng)板上,在干燥中根據(jù)需要啟動驅(qū)動電機,此時驅(qū)動電機會帶動偏心輪旋轉(zhuǎn),在偏心輪旋轉(zhuǎn)時,抵壓凸塊會接觸抵壓支桿并帶動抵壓支桿向下移動,此時承載網(wǎng)板會以旋轉(zhuǎn)軸為中心使升降滑塊上升,從而將受力拉簧拉伸蓄力,而藥物浸膏會向一側(cè)移動,當偏心輪繼續(xù)旋轉(zhuǎn)時,抵壓凸塊會逐漸脫離抵壓支桿,在抵壓支桿脫離的瞬間,升降滑塊在受力拉簧的復(fù)位拉力作用下使承載網(wǎng)板的另一端瞬間復(fù)位從而將藥物浸膏拋起并跌落至承載網(wǎng)板上,從而實現(xiàn)對藥物浸膏的攪動,有利于使藥物浸膏均勻烘干。實施例2:取金絲草30份、狹眼鳳尾蕨16份、山皮條14份、蒔蘿子20份、梅花刺根20份、葛根8份、甘草7份藥材,粉碎,放入中藥前處理機器處理,處理后藥材加水煎煮兩次,加水量為藥材重量的10倍量,煎煮2h,合并煎液,濃縮至65℃時相對密度為1.10,加乙醇使含醇量的體積百分比達65%,攪拌,靜置,過濾,濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.20并回收乙醇,將濃縮液放入浸膏烘干機烘干,添加淀粉,制粒壓片制成片劑。中藥前處理機器、浸膏烘干機同實施例1。實施例3:取金絲草28份、狹眼鳳尾蕨18份、山皮條12份、蒔蘿子23份、梅花刺根15份、葛根12份、甘草5份藥材,粉碎,放入中藥前處理機器處理,處理后藥材加水煎煮兩次,加水量為藥材重量的10倍量,煎煮2h,合并煎液,濃縮至65℃時相對密度為1.10,加乙醇使含醇量的體積百分比達65%,攪拌,靜置,過濾,濾液減壓濃縮至65℃時相對密度為1.20并回收乙醇,將濃縮液放入浸膏烘干機烘干,添加淀粉,制粒壓片制成片劑。中藥前處理機器、浸膏烘干機同實施例1。實施例4:本發(fā)明對腹瀉的臨床試驗資料實驗對象的一般資料:采用本發(fā)明共治療60例,年齡最大者49歲,年齡最小者19歲,男性32例,女性28例。診斷標準:1.大便稀薄或如水樣,次數(shù)增多,可伴腹脹、腹痛等癥。2.急性暴瀉起病突然,病程短,可伴惡寒、發(fā)熱等癥。3.慢性久瀉起病緩慢,病程較長,反復(fù)發(fā)作,時輕時重。4.飲食不當,受寒涼或情緒變化可誘發(fā)。5.大便常規(guī)可見少許紅細胞,大便培養(yǎng)致病菌陽性或陰性。6.必要時作X線鋇灌腸或纖維腸鏡檢查。治療方法:用法用量:采用本發(fā)明實施例1所制備的膠囊劑,其用法與用量為每次8粒,每日3次,溫水送服,一個周為一療程,共治療4療程。療效評價標準:顯效:在7d內(nèi)患者腹瀉等臨床癥狀消失;有效:在10d內(nèi)患者腹瀉等臨床癥狀消失,無效:>10d,患者未能達到上述標準或癥狀加重。實驗結(jié)果:所收治的60例病例中,經(jīng)1個月治療,其中顯效35例,有效21例,無效4例,總有效率達93.3%。表明本發(fā)明對治療腹瀉患者有極其顯著的效果。實施例5:本發(fā)明中有效成分葛根素含量測定實驗研究資料1.實驗藥物:本發(fā)明按實施例1-3方法制備。對照組采用不使用中藥前處理機器處理,而使用普通浸膏烘干機制備。2.儀器:高效液相色譜儀系統(tǒng)包括高效液相色譜儀(Waters515);P200高壓泵;Waters2487紫外檢測器及GJ605型高壓六通進樣閥;色譜柱為HypersilODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm);數(shù)據(jù)采集及處理采用HS色譜數(shù)據(jù)工作站V4.0+(杭州英譜科技)3.測定條件:采用高效液相色譜法,按2015年版藥典方法,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;柱溫:25℃;流動相:甲醇-水為75:25;檢測波長:270nm;流速:1ml/min。理論板數(shù)按葛根素峰計算均應(yīng)不低于2000。4.實驗結(jié)果各實施例中葛根素含量測定結(jié)果樣品來源葛根素含量(mg/片)實施例13.73實施例24.32實施例33.98對照組1.23根據(jù)上表的試驗結(jié)果可知,本發(fā)明實施例1-3制備的本發(fā)明片劑中有效成分含量明顯高于對照組。實施例6:本發(fā)明中重金屬含量測定實驗研究資料1.實驗藥物:本發(fā)明按實施例1-3方法制備。對照組采用不進行中藥前處理,使用普通浸膏烘干機制備。2.方法:用原子分光光度法測定了上述藥物的鉛、鎘和汞含量。結(jié)果表明,樣品來源鉛(mg/kg)鎘(mg/kg)汞(mg/kg)實施例10.030.250.33實施例20.020.270.44實施例30.010.290.37對照組0.340.752.39根據(jù)試驗結(jié)果可知,本發(fā)明實施例1-3制備的本發(fā)明片劑中重金屬含量明顯低于對照組。實施例7:本發(fā)明抑制大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞增殖的實驗研究資料1.實驗材料1.1實驗用細胞株:大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞,南京醫(yī)科大學實驗室細胞庫,DMEM+10%FBS常規(guī)培養(yǎng)。1.2實驗藥物:研究藥物:本發(fā)明按實施例1方法制備。藥液儲液:稱取100mg本發(fā)明,溶于5ml無水乙醇中,0.2μm濾器過濾,500μldoff管分裝,-20℃存儲,同時0.2μm濾器過濾無水乙醇以備對照組之用。1.3實驗試劑DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419);NaHCO3(上海久億化學試劑有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387);Trypsin(AMRESCO公司批號:2010/04);EDTA(AMRESCO公司批號:2009/10);PenicillinGSodiumSalt(AMRESCO公司批號:2010242);StreptomycinSulfate(AMRESCO公司批號:2010382);無水乙醇(南京化學試劑有限公司批號:080310182);MTT(Biosharp批號:0793);PBS(實驗室自配);1.4實驗器材萊卡倒置顯微鏡(德國Leica型號:DM1L);可見-紫外光微孔板檢測儀(美國MD公司型號:SPECTRAMAX190);CO2培養(yǎng)箱(FORMA型號:3111);超凈臺(蘇凈集團安泰公司制造型號:SW-CJ-ZFD);純水儀(美國Spring公司型號:S/N020579);精密移液器(法國吉爾森公司型號:P2);電子天平(德國賽多利斯有限公司型號:BT323S);全自動高壓滅菌鍋(日本SANYO公司型號:MLS-3020);臺式電熱鼓風干燥箱(上海精密實驗設(shè)備公司型號:DHG9123A);冰箱(西門子公司型號:KG18V21TI);液氮罐(CBS型號:2001);低速離心機(上海安亭科學儀器廠型號:KA-1000);0.2μm濾器(MILLIPORE型號:SLGP033RB);10cm培養(yǎng)皿(NEST公司)、96孔培養(yǎng)板(NEST公司);細胞計數(shù)板;離心管、移液管、Tips若干。2實驗方法1)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2進行常規(guī)培養(yǎng)(10cm培養(yǎng)皿),當細胞生長至對數(shù)期時,收集細胞,棄去培養(yǎng)液,PBS輕洗3遍,加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA,37℃消化2min后,向其中加入5ml完全培養(yǎng)基中和反應(yīng),吹打細胞后將其轉(zhuǎn)入離心管中,1000rpm離心5min,調(diào)整細胞懸液濃度3×104個/ml。2)將細胞種入96孔培養(yǎng)板中,每孔加入細胞懸液180μl,培養(yǎng)板放入細胞培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2)常規(guī)培養(yǎng)。3)根據(jù)細胞生長情況,一般長至50%-70%,加入本發(fā)明溶液,繼續(xù)培養(yǎng)24h。4)24h后加入20μlMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),繼續(xù)培養(yǎng)4h。5)4h后扣板法倒去上清,用吸水紙輕輕拍干,每孔加入200μl二甲基亞砜,置搖床上低速振蕩10min,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490nm處測量各孔的吸光值。6)同時設(shè)置本底(不加細胞,只加培養(yǎng)液),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜),每組設(shè)定6個復(fù)孔。7)結(jié)果以藥物對細胞的抑制率表示:細胞增值抑制率(%)=(對照孔OD值-給藥孔OD值)/對照孔OD值×100%。實驗重復(fù)3次。3.統(tǒng)計處理采用MicrosoftExcel2003軟件中的相關(guān)分析和Studentt檢驗,數(shù)據(jù)以mean±S.D.表示。4.實驗結(jié)果MTT法實驗后統(tǒng)計結(jié)果顯示,與對照組比較,當劑量達到5mg/ml時,對大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞增殖抑制有差異(P<0.05),劑量在10mg/ml時該差異具有顯著性(P<0.01),當劑量達到15-20mg/ml時有極顯著性差異(P<0.001)。本發(fā)明對大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞增殖抑制影響研究注:與對照組比較,*P<0.01;**P<0.0015.實驗結(jié)論:本發(fā)明可以抑制大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞增殖,減少大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC-12細胞的細胞生長數(shù)目,該作用呈劑量依賴性。當前第1頁1 2 3 
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