1.一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液,其特征在于每1000ml pH=7的磷酸鹽緩沖液中包含:桑葉多糖1-8g、云芝多糖0.1-5g、地黃多糖1-5g和胸腺五肽0.1-5g。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液,其特征在于每1000ml pH=7的磷酸鹽緩沖液中包含:桑葉多糖2-6g、云芝多糖0.5-2g、地黃多糖1-3g和胸腺五肽0.5-1g。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液,其特征在于所述桑葉多糖的制備包括以下步驟:
(1)將桑葉粉碎后過70-100目篩,得桑葉粉末,置于干燥環(huán)境中貯存?zhèn)溆茫?/p>
(2)將步驟(1)中所得桑葉粉末按料液比1:20-50g/ml加入75-85℃水中浸提100-120min,每間隔20-30min攪拌一次;
(3)對步驟(2)中浸提完畢的料液進行過濾,收集濾液;對所得濾液進行減壓濃縮得濃縮液,減壓濃縮條件為:溫度50-60℃,轉速50r/min,真空度600-700mmHg;
(4)向步驟(3)中所得濃縮液中加入無水乙醇,于4℃冰箱中醇沉20-24h后,以5000-6000 r/min的轉速離心15-20min,收集不溶物;
(5)利用無水乙醚對步驟(4)中所得不溶物浸洗5-8次,再加入蒸餾水,離心,收集澄清液;
(6)對步驟(5)中所得澄清液進行真空冷凍干燥,得桑葉多糖。
4.根據(jù)權利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液,其特征在于所述云芝多糖的制備包括以下步驟:
a. 將干燥的云芝碎片置于90-100℃水中煮提9-10h,過濾,收集濾液;
b.將步驟a中所得濾液濃縮至原體積的1/2,再加入3-4倍體積的95%乙醇,置于25-27℃環(huán)境中靜置沉淀20-24h,得沉淀液;
c.將步驟b中所得沉淀液3000-4000r/min的轉速離心15-20min,將所得沉淀物置于常溫下干燥,即得云芝多糖。
5.根據(jù)權利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液,其特征在于所述地黃多糖的制備包括以下步驟:
A.稱取地黃,按液固比30-40:1加入蒸餾水,加熱至90-110℃,浸提2-3h,過濾,收集濾液;
B.將步驟A中所得濾液濃縮至原體積的1/3-1/2,用sevag試劑法除去蛋白,上清液加氯仿離心,水層加80%-90%乙醇沉淀,沉淀物分別用丙酮和乙醇洗滌2 次,真空干燥得地黃多糖。
6.根據(jù)權利要求1或2所述的一種豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗用稀釋液,其特征在于所述pH=7的磷酸鹽緩沖液的制備方法如下:
d.稱取下列原料組分:氯化鈉6-10g、氯化鉀0.05-0.5g、磷酸氫二鈉1-1.2g、磷酸二氫鉀0.05-0.5g、氯化鈣0.05-0.2g和六水氯化鎂0.05-0.2g,混合均勻備用;
e.向步驟d中所得原料組分的混合物中加入1000mL的雙蒸水,充分溶解后,在116℃條件下高壓滅菌30min,即得pH=7的磷酸鹽緩沖液。