本發(fā)明屬于醫(yī)藥學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種中藥復(fù)方試劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)治療性功能障礙歷來(lái)以補(bǔ)腎壯陽(yáng)法為主。^[1]補(bǔ)腎是指應(yīng)用補(bǔ)腎的藥物，治療腎虛癥的一種方法；壯陽(yáng)主要是指壯腎陽(yáng)，興陽(yáng)事，恢復(fù)或亢奮性功能?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí)，眾多的補(bǔ)腎壯陽(yáng)中成藥及方劑是通過(guò)性激素及促性腺素、附性器官、“陽(yáng)痿”動(dòng)物模型和免疫等方面的影響，而顯示出其壯陽(yáng)的藥理學(xué)效應(yīng)。且人體的生長(zhǎng)發(fā)育和衰老與腎氣的關(guān)系極為密切。衰老的遲早、老化的速度及壽命的長(zhǎng)短，很大程度上決定于腎氣的強(qiáng)弱。因此，補(bǔ)腎也是中醫(yī)藥學(xué)中延緩衰老的主要方法。此傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方是國(guó)家十二五傣藥學(xué)科重點(diǎn)資助項(xiàng)目，云南少數(shù)民族傣族民間醫(yī)生長(zhǎng)期運(yùn)用此方治療腎虛證，取得了較好的療效。采用中藥治療腎虛證不僅作用溫和且療效持久，還能改善病人整體癥狀，提高生活質(zhì)量，避免并發(fā)癥，減少副反應(yīng)延長(zhǎng)壽命。因此，研究此中藥復(fù)方制劑補(bǔ)腎壯陽(yáng)的藥效及作用機(jī)制，既可以為民族藥廣泛運(yùn)用于臨床提供部分實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也是研發(fā)補(bǔ)腎壯陽(yáng)藥的有效途徑之一。

綜上所述，在過(guò)去中藥復(fù)方制劑補(bǔ)腎壯陽(yáng)的藥方中，大都是以補(bǔ)氣補(bǔ)陽(yáng)的藥物為主，而缺乏滋陰的藥物調(diào)節(jié)，其結(jié)果陽(yáng)盛而陰不足。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種中藥復(fù)方試劑及其制備方法，旨在解決背景技術(shù)的問(wèn)題。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種中藥復(fù)方試劑，該中藥復(fù)方試劑由傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB藥物和水組成，所述傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB藥物按質(zhì)量比由3味中藥組成，即鐵皮石斛8；肉蓯蓉15：西洋參8，目標(biāo)濃度—藥物和水的質(zhì)量比為1:1。

本發(fā)明另一目的在于提供一種中藥復(fù)方制劑的制備方法，該中藥復(fù)方制劑的制備方法包括：

取傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材2公斤，加入傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材8倍質(zhì)量的純凈水浸泡30min，煎煮35min，濾過(guò)，得第一濾液；

取藥渣，加入傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材的6倍質(zhì)量的純凈水煎煮30min，濾過(guò)，得第二濾液；

取藥渣，加入傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材的4倍質(zhì)量的純凈水煎煮25min，濾過(guò)，得第三濾液；

合并第一濾液、第二濾液、第三濾液；靜置12h后，取上清液濃縮，得到中藥復(fù)方制劑。

本發(fā)明另一目的在于提供一種驗(yàn)證權(quán)上述的中藥復(fù)方制劑藥效的雄性大鼠模型。

本發(fā)明另一目的在于提供一種雄性大鼠模型的構(gòu)建方法，該雄性大鼠模型的構(gòu)建方法為：

取SD雄性大鼠40只，SD雌性大鼠40只自主飲食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，1周后將雄性大鼠編號(hào)，隨機(jī)分為4組：空白組﹑中成藥龜鹿補(bǔ)腎片組﹑萬(wàn)艾可組、傣藥DRB補(bǔ)腎壯陽(yáng)方組；

空白組給予等體積蒸餾水，灌胃體積5ml·kg^-1，每天2次；中成藥龜鹿補(bǔ)腎片組以0.93g/kg、傣藥DRB補(bǔ)腎壯陽(yáng)方組以3.24g/kg提取物灌胃，每天2次，共3周；

萬(wàn)艾可組0.09g/kg于最后一天實(shí)驗(yàn)前1h灌胃給藥，灌胃體積均為1ml/100g；

每天稱量雄性SD大鼠的食量，每周測(cè)量雄性SD大鼠大鼠的體重。

進(jìn)一步，中成藥龜鹿補(bǔ)腎片的制備為：

龜鹿補(bǔ)腎片用研缽研磨成細(xì)粉，加入超純水溶解，調(diào)配至濃度為0.81g/ml。

本發(fā)明提供的中藥復(fù)方試劑及其制備方法，(4結(jié)果就是提供支持積極效果的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，)與空白組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥萬(wàn)艾可能明顯縮短雄性大鼠捕捉潛伏期、明顯增加捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)；中成藥龜鹿補(bǔ)腎片能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期、增加捕捉次數(shù)、縮短交配潛伏、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)；傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期，增加捕捉次數(shù)，能明顯縮短交配潛伏期，增加20min內(nèi)交配次數(shù)?？梢姳景l(fā)明中藥復(fù)方制劑具有提高雄性大鼠性行為的作用。

與空白組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥龜鹿補(bǔ)腎片可升高雄性大鼠血清睪丸酮含量，降低雌二醇含量；傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB可升高雄性大鼠血清睪丸酮含量，降低雌二醇含量?？梢姳景l(fā)明傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB與性激素調(diào)節(jié)有關(guān)。

本發(fā)明劑量的設(shè)置為按人用日劑量折算的大鼠等效量的3倍。本發(fā)明中有鐵皮石斛這一強(qiáng)有力的滋陰藥，陰陽(yáng)互補(bǔ)；發(fā)揮其補(bǔ)腎壯陽(yáng)的藥效。同時(shí)，鐵皮石斛又是目前國(guó)內(nèi)力推的藥材，全國(guó)十多個(gè)省都在大力發(fā)展，屬于九大仙草之一的藥物。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的中藥復(fù)方試劑的制備方法流程圖。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的應(yīng)用原理作進(jìn)一步描述。

本發(fā)明實(shí)施例提供的中藥復(fù)方試劑，該中藥復(fù)方試劑由傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB藥物和水組成，所述傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB藥物按質(zhì)量比由3味中藥組成，即鐵皮石斛8；肉蓯蓉15：西洋參8，目標(biāo)濃度—藥物和水的質(zhì)量比為1:1。

如圖1所示：本發(fā)明實(shí)施例提供的中藥復(fù)方制劑的制備方法，方法包括：

S101：取傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材2公斤，加入傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材8倍質(zhì)量的純凈水浸泡30min，煎煮35min，濾過(guò)，得第一濾液；

S102：取藥渣，加入傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材的6倍質(zhì)量的純凈水煎煮30min，濾過(guò)，得第二濾液；

S103：取藥渣，加入傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材的4倍質(zhì)量的純凈水煎煮25min，濾過(guò)，得第三濾液；

S104：合并第一濾液、第二濾液、第三濾液；靜置12h后，取上清液濃縮，得到中藥復(fù)方制劑。

本發(fā)明實(shí)施例提供一種驗(yàn)證權(quán)上述的中藥復(fù)方制劑藥效的雄性大鼠模型。

本發(fā)明實(shí)施例提供一種雄性大鼠模型的構(gòu)建方法，該雄性大鼠模型的構(gòu)建方法為：

取SD雄性大鼠40只，SD雌性大鼠40只自主飲食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，1周后將雄性大鼠編號(hào)，隨機(jī)分為4組：空白組﹑中成藥龜鹿補(bǔ)腎片組﹑萬(wàn)艾可組、傣藥DRB補(bǔ)腎壯陽(yáng)方組；

空白組給予等體積蒸餾水，灌胃體積5ml·kg^-1，每天2次；中成藥龜鹿補(bǔ)腎片組以0.93g/kg、傣藥DRB補(bǔ)腎壯陽(yáng)方組以3.24g/kg提取物灌胃，每天2次，共3周；

萬(wàn)艾可組0.09g/kg于最后一天實(shí)驗(yàn)前1h灌胃給藥，灌胃體積均為1ml/100g；

每天稱量雄性SD大鼠的食量，每周測(cè)量雄性SD大鼠大鼠的體重。

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的應(yīng)用原理進(jìn)一步說(shuō)明。

1.試驗(yàn)簡(jiǎn)介

1.1觀察和檢測(cè)指標(biāo)的選擇

本發(fā)明選擇的觀察指標(biāo)為大鼠性行為參數(shù)，檢測(cè)指標(biāo)為血清中睪酮和雌二醇含量。

大鼠性行為參數(shù)：撲捉潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第一次撲捉雌鼠的時(shí)間，)；20分鐘內(nèi)雄鼠撲捉雌鼠的次數(shù)；交配潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次與雌鼠交配的時(shí)間)；20分鐘內(nèi)交配次數(shù)。以上參數(shù)用以評(píng)價(jià)大鼠性欲、性喚醒的啟動(dòng)速度、勃起功能的高低。

雄鼠性行為是按一定次序進(jìn)行的連續(xù)過(guò)程，通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)觀察可發(fā)現(xiàn)，大鼠交配有以下特點(diǎn)：首先，雄鼠在騎跨雌鼠之前，一般會(huì)去主動(dòng)嗅雌鼠的肛門生殖器區(qū)，然后開始騎跨雌鼠。如果雌鼠的發(fā)情狀態(tài)良好，就有一個(gè)“弓背”動(dòng)作，所謂的弓背，就是雌鼠的脊柱向下彎曲成弓形，尾巴偏向一側(cè)，陰部暴露于正后方，可能這種姿勢(shì)更有利于交配。接下來(lái)就是騎跨和插入，當(dāng)雄鼠陰莖插入到雌鼠陰道時(shí)，伴隨雄鼠后腿及骨盆向前推動(dòng)，此時(shí)雄鼠的背常常彎曲成弓形，前爪緊抱著雌鼠的背部。經(jīng)過(guò)多次的插入達(dá)到射精，射精時(shí)雄鼠會(huì)出現(xiàn)劇烈的顫動(dòng)，在此過(guò)程中，雄鼠前肢緊抱著雌鼠持續(xù)數(shù)秒。射精后，雄鼠有長(zhǎng)達(dá)數(shù)分鐘的不應(yīng)期。雄鼠每次插入以后，常常會(huì)有一個(gè)舔自己陰部的動(dòng)作，而且，雄鼠的每一次騎跨并不一定伴有插入。

1.2.選擇龜鹿補(bǔ)腎片作為陽(yáng)性對(duì)照藥

本發(fā)明的試驗(yàn)使用的龜鹿補(bǔ)腎片這種中成藥作為陽(yáng)性藥。龜鹿補(bǔ)腎膠囊收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十七冊(cè)，龜鹿補(bǔ)腎片由龜鹿補(bǔ)腎膠囊改劑型而成，由菟絲子(炒)、淫羊藿(蒸)、續(xù)斷(蒸)、鎖陽(yáng)(蒸)、狗脊(蒸)、酸棗仁(炒)、制何首烏、炙甘草、陳皮(蒸)等17味藥材組成。本方枸杞子、肉蓯蓉、巴戟天均入腎經(jīng)，能溫腎助陽(yáng)、補(bǔ)命門之火兼益精氣；炙黃芪補(bǔ)益中氣，以消除陽(yáng)明之氣衰；陰陽(yáng)互損，腎陽(yáng)虛損日久，必然導(dǎo)致腎陰之不足，故又以熟地滋補(bǔ)腎陰兼補(bǔ)肝血；龜鹿二味均為骨肉有情之品，既可滋腎壯陽(yáng)，填精補(bǔ)髓，又可防止補(bǔ)陽(yáng)藥物燥熱傷陰之弊，使陰陽(yáng)保持相對(duì)平衡。諸藥合用，具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)，填精補(bǔ)髓，益氣補(bǔ)中之功，故臨床應(yīng)用每可取得滿意效果。

且藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)本藥具有提高小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)炭粒的廓清能力，能促進(jìn)雄性幼鼠及去勢(shì)小鼠生殖系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育，包皮腺指數(shù)、精囊腺指數(shù)、睪丸指數(shù)，提高腎陽(yáng)虛雄性大鼠血清中皮質(zhì)醇、睪丸酮、腎上腺素、去甲腎上腺素的含量，說(shuō)明龜鹿補(bǔ)腎片能增強(qiáng)非特異性免疫功能，具有雄激素樣作用。

1.3選擇萬(wàn)艾可作為陽(yáng)性對(duì)照藥

目前，臨床治療性功能障礙的一線口服藥物主要是萬(wàn)艾可。萬(wàn)艾可藥物于1998年美國(guó)上市，由于其獨(dú)特的效果，尤其是能全面地治療各種原因引起的性功能障礙，一經(jīng)問(wèn)世，便受到世人的矚目。為評(píng)價(jià)枸櫞酸西地那非的療效。Ochiai A等進(jìn)行了一項(xiàng)研究。在1999年3月和2003年3月之間，281個(gè)ED患者接受了枸櫞酸西地那非(50mg)治療。在281個(gè)病人中，有206個(gè)可供評(píng)估。其中，服用枸櫞酸西地那非后完成性交的總成功率為77.2％。功能性和器質(zhì)性ED男性的成功率分別為91.4％和65.5％。16名患者發(fā)生了輕微短暫的副作用(8％)，僅2人(1％)發(fā)生了嚴(yán)重的副作用(水腫和眩暈)。西地那非治療ED成功率高、耐受性好，可被推薦為ED首選用藥。

通過(guò)本發(fā)明實(shí)驗(yàn)，得出結(jié)論：傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB可縮短雄性大鼠捕捉潛伏期、明顯增加大鼠捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)，體內(nèi)血清睪酮含量明顯升高，體內(nèi)雌二醇含量明顯降低，為臨床治療和進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)依據(jù)。

2.材料

2.1動(dòng)物

SD大鼠共80只，分別為雄性大鼠40只，雌性大鼠40只，體重200+20g,由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供。SPF級(jí)，合格證號(hào)：0018412。動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，食固體飼料、墊料由蘇州雙獅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料科技有限公司提供。

2.2藥物與試劑

傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB，由云南省高校民族醫(yī)藥現(xiàn)代研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供；龜鹿補(bǔ)腎片，廣東心寶制藥有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：20150808；睪酮(T)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，伊萊瑞特生物科技有限公司，產(chǎn)品貨號(hào)：E-EL-0072c；雌二醇(E2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，伊萊瑞特生物科技有限公司，產(chǎn)品貨號(hào)：E-EL-0065c。

2.3儀器

VariceKna全波長(zhǎng)掃描式多功能酶標(biāo)分析儀(北京普朗新技術(shù)有限公司)、Primo R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(Thermofisher公司)、REVCO UxF300雙門立式超低溫冰箱(Thermofisher公司)、Smart 2Pure Uv/VF超純水機(jī)(Thermofisher公司)、海爾BCD-226TX冰箱(海爾公司)、BS224電子天平(北京賽爾利斯儀器系統(tǒng)有限公司)、HW-1000超級(jí)恒溫水浴槽(成都泰盟科技有限公司)、101型電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)、微量移液器等。

3方法

3.1制備

3.1.1中藥復(fù)方制劑制備方法的確定

傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB由3味中藥組成，根據(jù)臨床使用經(jīng)驗(yàn)和相關(guān)文獻(xiàn)研究，臨床用藥為水煎劑，故采用水提法。

3.1.2中藥復(fù)方制劑的制備

傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB藥材由云南省高校民族醫(yī)藥現(xiàn)代研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。取傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB原藥材2公斤，加入8倍量的純凈水浸泡30min，煎煮35min，濾過(guò)；繼續(xù)以6倍純凈水煎煮30min，濾過(guò)；繼續(xù)以4倍純凈水煎煮25min，濾過(guò)。合并濾液，靜置12h后，取上清液濃縮至目標(biāo)濃度。

3.1.3陽(yáng)性藥溶液的制備

龜鹿補(bǔ)腎片用研缽研磨成細(xì)粉，加入超純水溶解，調(diào)配至濃度為0.81g/ml。

3.2分組、給藥

取SD雄性大鼠40只，SD雌性大鼠40只自主飲食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，1周后將雄性大鼠編號(hào)，隨機(jī)分為4組：空白組﹑中成藥組(龜鹿補(bǔ)腎片0.93g/kg)﹑萬(wàn)艾可組、傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB組(3.24g/kg)?？瞻捉M給予等體積蒸餾水，灌胃體積5ml·kg^-1，每天2次，陽(yáng)性對(duì)照組以0.93g/kg(按人給藥劑量換算)、傣藥DRB組以3.24g/kg(按人給藥劑量換算)提取物灌胃，每天2次，共3周。萬(wàn)艾可組(0.09g/kg)于最后一天實(shí)驗(yàn)前1h灌胃給藥，灌胃體積均為1ml/100g。每天稱量雄性SD大鼠的食量，每周測(cè)量雄性SD大鼠大鼠的體重。

3.3交配實(shí)驗(yàn)

3.3.1發(fā)情雌鼠的準(zhǔn)備

為消除雌性大鼠在進(jìn)行交配實(shí)驗(yàn)時(shí)動(dòng)情期的不同，進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，并同時(shí)注射雌激素，方法為：雌性大鼠在10％水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉下，背部朝上固定于鼠板上，在大鼠最末肋骨下，腋中線和距脊柱外側(cè)約2cm交叉處剪除長(zhǎng)毛，切開皮膚和背肌，有乳白色發(fā)亮的脂肪團(tuán)，其中便包埋著卵巢。用小鑷子輕夾脂肪團(tuán)，拉出切口外，分離脂肪，即見粉紅色卵巢。取一絲線將卵巢下輸卵管及脂肪一并結(jié)扎，剪下卵巢，將子宮角送回腹腔，然后摘取對(duì)側(cè)卵巢，術(shù)后肌注青霉素20萬(wàn)U/kg抗感染治療3天，常規(guī)飼養(yǎng)，3周后進(jìn)行交配試驗(yàn)，試驗(yàn)前48小時(shí)皮下注射苯甲酸雌二醇0.2mg/只，4小時(shí)前再次經(jīng)皮下注射黃體酮0.4mg/只。

3.4檢測(cè)指標(biāo)

3.4.1性行為學(xué)指標(biāo)檢查

于末次給藥后1h晚上7-11時(shí)進(jìn)行，將雄性大鼠單獨(dú)放入籠中(55cm×35cm×20cm)5min，使其適應(yīng)環(huán)境。^[11]保持安靜，使用微弱的燈光照明，將光線調(diào)暗至能夠觀察即可。10分鐘后將發(fā)情雌鼠輕放入雄鼠籠內(nèi)，觀察記錄撲捉潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第一次撲捉雌鼠的時(shí)間，)；20分鐘內(nèi)雄鼠撲捉雌鼠的次數(shù)；交配潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次與雌鼠交配的時(shí)間)；20分鐘內(nèi)交配次數(shù)。以上參數(shù)用以評(píng)價(jià)大鼠性欲、性喚醒的啟動(dòng)速度、勃起功能的高低。

3.4.2血清標(biāo)本采集

測(cè)定時(shí)間為實(shí)驗(yàn)第29天，將上述已測(cè)完性行為學(xué)的大鼠用10％水合氯醛0.3mL/100g腹腔注射麻醉后，腹主動(dòng)脈取血6mL，分2份各3mL，存于真空采血管中，4℃混勻，3000r/min離心15分鐘，取上置血清，放置于-20℃冰箱保存，待測(cè)血清睪酮和雌二醇的含量。采用酶標(biāo)儀試劑盒測(cè)定，操作依照試劑盒說(shuō)明書。

3.4.3大鼠血清睪酮、雌二醇含量的測(cè)定

采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清睪酮、雌二醇的含量。

3.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，計(jì)量資料符合正態(tài)分布、方差齊者用t檢驗(yàn)；方差不齊者用校正t檢驗(yàn)；多組比較用單因素方差分析，兩兩比較采用最小差異法(LSD)；不符合正態(tài)分布者用秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用x²檢驗(yàn)，以α＝0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

4結(jié)果

4.1傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB對(duì)大鼠性行為的影響

傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB對(duì)大鼠性行為的影響結(jié)果見表1。各數(shù)值使用單因素方差分析法。

表1傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB對(duì)大鼠性行為的影響

注：與空白組比較*P<0.05，ΔP<0.01.

由表1可以看出：與空白組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥萬(wàn)艾可能明顯縮短雄性大鼠捕捉潛伏期、明顯增加捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，p<0.01，差異有非常顯著性意義；中成藥龜鹿補(bǔ)腎片也能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期(p<0.05)，增加捕捉次數(shù)(p<0.05)，縮短交配潛伏期(p<0.05)、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)(p<0.01)；傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期(p<0.05)，增加捕捉次數(shù)(p<0.05)，能明顯縮短交配潛伏期(p<0.01)，增加20min內(nèi)交配次數(shù)(p<0.05)。

4.2傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB對(duì)大鼠血清睪酮、雌二醇含量的影響

傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB對(duì)大鼠血清睪酮、雌二醇含量的影響結(jié)果見表2。各數(shù)值使用單因素方差分析法。

表2傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB對(duì)雄性大鼠血清睪酮、雌二醇含量的影響(n＝10,x±s)

注：與空白組比較*P<0.05,ΔP<0.01.

試驗(yàn)結(jié)果表明，龜鹿補(bǔ)腎片、傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB均可升高雄性大鼠血清睪丸酮含量，降低雌二醇含量(p<0.05)，說(shuō)明對(duì)性激素有一定影響。

5討論：

本發(fā)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與空白組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥萬(wàn)艾可能明顯縮短雄性大鼠捕捉潛伏期、明顯增加捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)；中成藥龜鹿補(bǔ)腎片能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期、增加捕捉次數(shù)、縮短交配潛伏、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)；傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期，增加捕捉次數(shù)，能明顯縮短交配潛伏期，增加20min內(nèi)交配次數(shù)?？梢娭兴帍?fù)方制劑具有提高雄性大鼠性行為的作用。

與空白組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥龜鹿補(bǔ)腎片可升高雄性大鼠血清睪丸酮含量，降低雌二醇含量；傣藥補(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB可升高雄性大鼠血清睪丸酮含量，降低雌二醇含量?？梢姶鏊幯a(bǔ)腎壯陽(yáng)方DRB與性激素調(diào)節(jié)有關(guān)。

劑量的設(shè)置為按人用日劑量折算的大鼠等效量的3倍。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。