本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)用品或日用品
技術(shù)領(lǐng)域：
，更具體地，涉及一種治療HPV感染的蛋白質(zhì)組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：人乳頭瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)屬于乳頭瘤病毒科的乳頭瘤病毒屬，為球形無(wú)包膜的小型雙鏈環(huán)狀DNA病毒。目前已發(fā)現(xiàn)其有200種以上，根據(jù)感染部位分類包括上皮型(例如1、5、8、14、20、21、25和47型)和黏膜型(例如6、11、16、18、31、33、35、39、41、45、51、52、56、58、59、68、70型)，根據(jù)是否致癌可將HPV分為高危型和低危型。HPV的致病機(jī)制是HPV對(duì)皮膚和黏膜上皮細(xì)胞有高度親嗜性，在感染宿主皮膚或黏膜上皮細(xì)胞后，可在細(xì)胞核內(nèi)自我復(fù)制或整合到宿主細(xì)胞DNA中，并隨宿主細(xì)胞同步復(fù)制并轉(zhuǎn)錄。病毒復(fù)制誘導(dǎo)上皮增殖，使表皮變厚伴棘層增生和某種程度表皮角化，最終導(dǎo)致上皮增殖形成乳頭狀瘤，亦稱為疣。疣一般是良性的，其中HPVDNA是游離的。但某些型別的HPV具有誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的能力，其DNA可整合到宿主上皮細(xì)胞的染色體中，促進(jìn)細(xì)胞DNA的合成，使皮膚特別是黏膜上皮細(xì)胞變?yōu)橛郎?xì)胞，從而誘發(fā)癌前病變或惡性腫瘤。HPV感染可導(dǎo)致多種病變，其臨床表現(xiàn)亦多種多樣。孕婦和免疫力低下的人群感染后病情將更為嚴(yán)重。常見(jiàn)有以下幾種：宮頸炎、宮頸糜爛、皮膚乳頭狀瘤、生殖器疣、尖銳濕疣、扁平疣等，甚至導(dǎo)致惡性腫瘤，如子宮癌。目前HPV陽(yáng)性主要是以外治為主，內(nèi)治為輔。外治的方法包括藥物治療、冷凍治療、激光治療、微波治療、電燒治療及手術(shù)治療等。藥物治療方便，易于操作，但有些藥物有灼傷粘膜的可能。注射干擾素、白介素等免疫增強(qiáng)劑會(huì)起到一定作用，但其療效在學(xué)術(shù)界尚存爭(zhēng)議，而且大部分人會(huì)產(chǎn)生一定的副作用，并且相關(guān)藥物價(jià)格昂貴。貽貝(MytilusedulisLinnaeus)是一種海洋軟體動(dòng)物，屬于雙殼貝類，俗稱“青口”和“淡菜”，遍布世界各沿岸國(guó)家。貽貝種類繁多，僅中國(guó)沿海就有30多種，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的有10多種，其中紫貽貝、翡翠貽貝和厚殼貽貝是主要的養(yǎng)殖品種。貽貝富含蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、鈣、磷、鐵、核黃素、尼克酸等營(yíng)養(yǎng)元素，而且具有很高的藥用價(jià)值。胰蛋白酶(Trypsin,Parenzyme)，EC3.4.21.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。胰臟制造的前體胰蛋白酶原分泌到小腸后，腸肽酶使其活化，成為胰蛋白酶。胰蛋白酶是肽鏈內(nèi)切酶，它能選擇性地水解多肽鏈的賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基。胰蛋白酶不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。目前，胰蛋白酶主要是用于細(xì)胞培養(yǎng)，本發(fā)明人在中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)?zhí)?01610883795.4提出了含有胰蛋白酶和貽貝軟組織提取物的蛋白質(zhì)組合物用于治療婦科炎癥，所述婦科炎癥主要是由霉菌、葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、淋病雙球菌、結(jié)核桿菌、滴蟲(chóng)和阿米巴蟲(chóng)等引起的炎癥。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：出人意料地，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶的組合可用于治療HPV感染。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明涉及包括貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶的蛋白質(zhì)組合物在制備用于HPV感染的藥物中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述蛋白質(zhì)組合物按重量份可以包括：貽貝軟組織提取物0.1-20份，以及胰蛋白酶0.2-20份。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，按組合物的重量計(jì)，貽貝軟組織提取物可以是例如0.1份、0.15份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份、0.65份、0.7份、0.75份、0.8份、0.85份、0.9份、0.95份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等，以及胰蛋白酶可以是例如0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份、0.65份、0.7份、0.75份、0.8份、0.85份、0.9份、0.95份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述蛋白質(zhì)組合物中：貽貝軟組織提取物與胰蛋白酶可以分別隔離存在或可以混合存在。這里，“隔離存在”是指兩種成分以保持各自性質(zhì)的互不干擾的獨(dú)立包裝存在?！盎旌洗嬖凇笔侵竷煞N成分混合存在于一個(gè)包裝中。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述蛋白質(zhì)組合物中：貽貝軟組織提取物與胰蛋白酶可以是干粉。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述蛋白質(zhì)組合物中：貽貝軟組織提取物與胰蛋白酶可以是液體。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述蛋白質(zhì)組合物配制為液體后的最終pH值為2.5-9.0，例如，優(yōu)選pH值為4.5-8.0，或者，例如優(yōu)選pH值為5.5-7.0。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述貽貝軟組織提取物是以貽貝除貝殼以外的所有組分為原料，經(jīng)過(guò)酸性水溶液提取而獲得的上清液，其中蛋白質(zhì)含量為0.2-15mg/ml，pH值1.0-6.0。特別地，所述貽貝軟組織提取物可以是以足絲為原料經(jīng)過(guò)酸性水溶液提取而獲得的上清液。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)方面，所述貽貝包括紫貽貝、翡翠貽貝、厚殼貽貝中的一種、兩種或三種。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述酸性水溶液可以選自：乙酸-乙酸鈉緩沖液、乙酸、檸檬酸、高氯酸等，但不限于此。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述貽貝軟組織提取物的蛋白質(zhì)含量可以為例如0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml、0.6mg/ml、0.7mg/ml、0.8mg/ml、0.9mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml、2.5mg/ml、3.0mg/ml、3.5mg/ml、4.0mg/ml、4.5mg/ml、5.0mg/ml、5.5mg/ml、6.0mg/ml、6.5mg/ml、7.0mg/ml、7.5mg/ml、8.0mg/ml、8.5mg/ml、9.0mg/ml、9.5mg/ml、10.0mg/ml、10.5mg/ml、11.0mg/ml、11.5mg/ml、12.0mg/ml、12.5mg/ml、13.0mg/ml、13.5mg/ml、14.0mg/ml、14.5mg/ml和15.0mg/ml等，但不限于此。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述胰蛋白酶可以是從市場(chǎng)上常規(guī)購(gòu)買的。替代地，所述胰蛋白酶可以是通過(guò)鹽析、柱層析等方法制備的。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，本發(fā)明提供一種包括貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶的蛋白質(zhì)組合物用于治療HPV感染。本發(fā)明的另一方面涉及一種治療HPV感染的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物由本發(fā)明的貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶組成。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述治療可以包括緩解性治療和預(yù)防性治療。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述HPV感染可以是低危型HPV感染，或高危型HPV感染，特別是高危型HPV感染，例如HPV16、18、31、33、35、39、41、45、51、52、56、58、59、68、70型。本發(fā)明的另一方面涉及一種治療婦科炎癥的藥物組合物，其中，所述藥物組合物可以包括貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物還可以包括其它活性成分。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物還可以包括藥學(xué)上可接受的載體。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物可以是全身給藥或局部給藥，優(yōu)選局部給藥。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物可以是片劑。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物可以是液體劑。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物可以是泡沫劑。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物可以是凝膠劑。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述藥物組合物可以是泡騰片。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述載體可以包括任何以及所有的溶劑、鹽、分散介質(zhì)、包衣材料、表面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(例如抗菌劑、抗真菌劑)、等滲劑、吸收延遲劑、藥物穩(wěn)定劑、粘合劑、賦形劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、甜味劑、矯味劑、染料等和它們中一種、多種或全部的組合，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的(例如參見(jiàn)Remington'sPharmaceuticalSciences,18thEd.MackPrintingCompany,1990,pp.1289-1329)。除了與活性成分不相容的載體外，可考慮在治療用或藥物組合物中使用的任何常規(guī)載體。本發(fā)明的又一個(gè)目的涉及上述本發(fā)明的蛋白質(zhì)組合物或藥物組合物在治療HPV感染，尤其是高危型HPV感染中的應(yīng)用。本發(fā)明的又一個(gè)目的涉及上述本發(fā)明的蛋白質(zhì)組合物用作治療HPV感染的消毒產(chǎn)品。本發(fā)明的又一個(gè)目的在于上述本發(fā)明的蛋白質(zhì)組合物用作針對(duì)HPV感染的養(yǎng)護(hù)和保健產(chǎn)品。本發(fā)明的又一個(gè)目的涉及一種治療HPV感染的方法，包括給予本發(fā)明的蛋白組合物或藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，向有需要的受試者給予根據(jù)本發(fā)明的蛋白質(zhì)組合物，所述蛋白質(zhì)組合物是包括貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶或是由其組成的。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶可以是混合存在于組合物中。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方式，所述貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶可以是分別隔離存在于組合物中。這里，當(dāng)將貽貝軟組織提取物與胰蛋白酶組合給藥時(shí)，給藥可以是順序給藥或者同時(shí)給藥，優(yōu)選可以是順序給藥。對(duì)于順序給藥來(lái)說(shuō)，可以將貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶以任何順序給藥。例如，可以先給予貽貝軟組織提取物再給予胰蛋白酶，以此順序交替給藥持續(xù)整個(gè)治療，或者可以先給予胰蛋白酶再給予貽貝軟組織提取物，以此順序交替給藥持續(xù)整個(gè)治療，或者可以在治療的每一天以不同順序給藥。采用本發(fā)明的胰蛋白酶與貽貝軟組織提取物的蛋白質(zhì)組合物，能夠殺滅HPV病毒。另外，本發(fā)明的蛋白質(zhì)組合物吸附于炎癥創(chuàng)面，形成細(xì)胞支架促進(jìn)炎癥創(chuàng)面的快速愈合并能維持患病部位細(xì)胞的正常狀態(tài)。同時(shí)，由于貽貝軟組織提取物中含有的蛋白成分的分子量大，不會(huì)透皮或經(jīng)皮吸收，可持久穩(wěn)定在患病部位發(fā)揮作用，延長(zhǎng)作用時(shí)間，起到長(zhǎng)效治療的作用。本發(fā)明制備的治療HPV感染的組合物可迅速清除病灶部位上皮糜爛組織，隔離病原微生物，促進(jìn)炎癥消除，修復(fù)創(chuàng)面，消除異味，維持菌群平衡，療程短、治愈率高，且無(wú)任何毒副作用，不產(chǎn)生依賴性。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例以治療婦科炎癥的組合物為例進(jìn)行說(shuō)明，但不限于此，上述本發(fā)明提出的各種包含貽貝軟組織提取物及胰蛋白酶的產(chǎn)品均適用于本發(fā)明。實(shí)施例1：貽貝軟組織提取物的制備方法。取貽貝去殼，收集軟組織300g，分成三份，每份加入100ml含量0.3％的下表1中的酸性溶液，勻漿10min后離心得到上清液即為貽貝軟組織提取物。測(cè)定上清液中蛋白含量和pH值，蛋白含量測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法。表1實(shí)例酸性溶液蛋白質(zhì)含量pH值1檸檬酸2.6mg/ml4.52乙酸3.5mg/ml3.23高氯酸3.0mg/ml1.0實(shí)施例2：一種治療HPV感染的蛋白質(zhì)組合物包含貽貝軟組織提取物與胰蛋白酶的組合物由以下組分構(gòu)成：貽貝軟組織提取物干粉15mg，胰蛋白酶干粉20mg，分別加入純化水充分溶解后得到口服溶液劑。收集經(jīng)HPVDNA分型檢測(cè)均感染高危型HPV病毒(包括16、18、31、33、35、39、45、51型等)但無(wú)臨床癥狀的女性患者30例，隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組服用實(shí)施例2制備的組合物，先服用貽貝軟組織提取物口服溶液劑10ml，間隔30min后服用胰蛋白酶口服溶液劑10ml，每日1次，用藥期間禁止性生活及盆浴，月經(jīng)期暫停，連續(xù)使用2周。對(duì)照組不使用任何治療措施。所有患者的治療后至復(fù)查期內(nèi)的性生活全程使用避孕套。兩組患者在治療前和停藥1個(gè)月后均進(jìn)行HPV檢測(cè)。結(jié)果顯示，使用本發(fā)明后73.3％的患者HPV病毒載量檢測(cè)低于1.00RLU/Co(HC2法)，而對(duì)照組僅有13.3％。試驗(yàn)組的患者HPV病毒載量平均下降了78.26％，而對(duì)照組的HPV病毒載量反而平均升高了4.65％。表明本發(fā)明的組合物具有治療HPV感染的作用。實(shí)施例3：一種治療HPV感染的蛋白質(zhì)組合物包含貽貝軟組織提取物、胰蛋白酶的組合物由以下組分構(gòu)成：貽貝軟組織提取物干粉10mg，胰蛋白酶干粉15mg，貽貝軟組織提取物和胰蛋白酶過(guò)篩,將可壓性淀粉、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉混合，用5％的羥丙甲纖維素水溶液制粒、60℃烘干，將處方量的低取代羥丙基纖維素、微粉硅膠、胰蛋白酶、貽貝軟組織提取物混合均勻后與顆?；旌希盅b后制成顆粒劑。收集30例宮頸HPV感染患者，年齡在20-50之間，病程3-21個(gè)月。宮頸HPV感染診斷標(biāo)準(zhǔn)為：取宮頸脫落細(xì)胞，檢測(cè)樣本的RLU/Co≥1.0，診斷為宮頸HPV感染陽(yáng)性。藥品用量為服用實(shí)施例3制備的治療HPV感染的顆粒劑，每日先服用胰蛋白酶10g，間隔30min后服用貽貝軟組織提取物10g，每日一次。連續(xù)用藥治療2周后復(fù)查。療效標(biāo)準(zhǔn)：連續(xù)用藥2周后復(fù)查HPV-DNA，RLU/Co＜1.0時(shí)即痊愈；RLU/Co＜10.0時(shí)即為有效；RLU/Co＞10.0時(shí)即為無(wú)效。臨床結(jié)果：30例患者中，痊愈21例，痊愈率70％，有效4例，有效率(含痊愈)83.33％，無(wú)效5例，無(wú)效率為16.67％。結(jié)論：本發(fā)明治療HPV感染的組合物對(duì)HPV感染的患者具有很好的治療作用。實(shí)施例4：一種治療HPV感染的蛋白質(zhì)組合物包含貽貝軟組織提取物、胰蛋白酶的組合物由以下組分構(gòu)成：貽貝軟組織提取物干粉8.5mg，胰蛋白酶干粉10.5mg，加入生理鹽水充分溶解制成噴劑。病情治療案例一：安某臨床診斷：生殖器尖銳濕疣，HPV陽(yáng)性；臨床治療：取實(shí)施例4制備的噴劑外用，每日3次，每次噴于患處3-5下，2周為一個(gè)療程，共3個(gè)療程。停藥后疣體干癟部分脫落，停藥20天后做HPV檢測(cè)，結(jié)果顯示為陽(yáng)轉(zhuǎn)陰。病情治療案例二：田某某臨床診斷：生殖器皰疹，HPV陽(yáng)性；臨床治療：取實(shí)施例4制備的噴劑外用，每日2次，每次噴于患處3-5下，一個(gè)月為一個(gè)療程，共1個(gè)療程。停藥后皰疹消失，停藥后20天后做HPV檢測(cè)，結(jié)果顯示陽(yáng)轉(zhuǎn)陰。當(dāng)然，本發(fā)明還可有其它多種實(shí)施例，在不背離本發(fā)明精神及其實(shí)質(zhì)的情況下，熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員可根據(jù)本發(fā)明作出各種相應(yīng)的改變和變形，但這些相應(yīng)的改變和變形都應(yīng)屬于本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍。本申請(qǐng)主張2016年10月8日遞交的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)?zhí)?01610883795.4的優(yōu)先權(quán)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3