本發(fā)明涉及一種改善胰島素早期分泌性能的制劑。

背景技術(shù)：

糖尿病是以高血糖狀態(tài)為主要癥狀的代謝性疾病。已知持續(xù)的慢性高血糖不僅并發(fā)腎病、視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)癥等細(xì)小血管障礙，而且會促進(jìn)心肌梗塞、腦梗塞等動(dòng)脈硬化性疾病的發(fā)病。即，糖尿病可以說是不僅左右qol而且也是大幅左右壽命的疾病。糖尿病中存在多種病型，主要的病型為1型糖尿病和2型糖尿病。

其中，2型糖尿病是由于胰島β細(xì)胞的胰島素分泌性能的降低、以及由于肝臟、骨骼肌、脂肪等靶組織中的胰島素感受性降低(胰島素抵抗性)而導(dǎo)致胰島素的效果相對不足而造成高血糖。現(xiàn)在，急劇增加的作為生活習(xí)慣病的糖尿病是2型糖尿病，過量飲食、高脂肪食、運(yùn)動(dòng)不足等歐美型的生活習(xí)慣作為環(huán)境因素強(qiáng)烈影響其發(fā)病。

另外，在日本人中，就2型糖尿病而言，相比于胰島素抵抗性，在多數(shù)情況下主要原因是胰島素分泌性能、特別抑制糖攝取后的急劇的血糖值上升所需要的胰島素早期分泌性能的降低，希望有改善胰島素的早期分泌性能的方法。

另一方面，作為關(guān)于乳酸菌的報(bào)告，報(bào)道了抑制革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁的多糖－聚糖復(fù)合體抑制血糖值和尿糖的上升(專利文獻(xiàn)1)以及干酪乳桿菌的菌體(死菌體)具有血糖上升抑制作用(非專利文獻(xiàn)1)。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開平8－59492號公報(bào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：endocrinejournal1997,44(3),357-365

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明所要解決的課題

然而，現(xiàn)有的血糖值降低劑太過于關(guān)注空腹時(shí)的高血糖的改善，而存在引起低血糖的風(fēng)險(xiǎn)，其中，以磺?；蛩厮?、列奈(glinide)藥為代表的胰島素分泌促進(jìn)劑不僅提高飲食后的早期分泌(第一時(shí)相的追加分泌)，而且提高后期分泌(第二時(shí)相的追加分泌)和空腹時(shí)的基礎(chǔ)分泌，因此在低血糖風(fēng)險(xiǎn)之外，還會引起胰島β細(xì)胞的疲勞，存在引起進(jìn)一步的胰島素分泌性能降低和高血糖的問題。為了解決這樣的問題，還由于如上所述，日本人的2型糖尿病主要原因是胰島素早期分泌性能的降低，所以希望開發(fā)出僅改善早期分泌性能的制劑。

因此，本發(fā)明的課題在于提供新的胰島素早期分泌性能改善劑。

用于解決課題的方法

因此，本發(fā)明的發(fā)明人為了解決上述課題而進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不僅乳酸菌的死菌體，而且活菌也具有特異的優(yōu)異的胰島素早期分泌性能改善作用，從而完成了本發(fā)明。

即，本發(fā)明提供如下的〔1〕～〔9〕。

〔1〕一種胰島素早期分泌性能改善劑，其以含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物為有效成分。

〔2〕如〔1〕所述的胰島素早期分泌性能改善劑，其中，每1天攝取乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上。

〔3〕如〔1〕或〔2〕所述的胰島素早期分泌性能改善劑，其中，乳酸菌為屬于乳桿菌屬的乳酸菌。

〔4〕如〔1〕～〔3〕中任一項(xiàng)所述的胰島素早期分泌性能改善劑，其中，乳酸菌為干酪乳桿菌。

〔5〕如〔1〕～〔4〕中任一項(xiàng)所述的胰島素早期分泌性能改善劑，其中，乳酸菌為干酪乳桿菌yit9029株。

〔6〕含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物在用于制造胰島素早期分泌性能改善劑中的使用。

〔7〕用于胰島素早期分泌性能改善的、含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物。

〔8〕一種胰島素早期分泌性能改善方法，其中，將含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物以有效量投予或攝取至需要其的對象。

〔9〕如〔8〕所述的胰島素早期分泌性能改善方法，其中，每1天攝取乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上。

發(fā)明的效果

本發(fā)明的胰島素早期分泌性能改善劑是發(fā)現(xiàn)了乳酸菌的活菌具有特別強(qiáng)的作用而獲得的。通過僅改善胰島素的早期分泌性能，低血糖風(fēng)險(xiǎn)和由胰島β細(xì)胞的疲勞引起的進(jìn)一步誘發(fā)高血糖的危險(xiǎn)性低。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的胰島素早期分泌性能改善劑的有效成分是含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物。如后述的實(shí)施例所示，在含有大量死菌的乳酸菌中，沒有胰島素早期分泌的改善效果，因此本發(fā)明的效果是乳酸菌的活菌特有的。這里所說的活菌例如能夠通過將用生理鹽水或林格氏液適當(dāng)稀釋的組合物涂布于添加bcp的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基或添加莫匹羅星的tos丙酸培養(yǎng)基等適于乳酸菌測定的培養(yǎng)基，對在37℃保持3天后出現(xiàn)的乳酸菌的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)而測定。此外，在專性厭氧菌的情況下，放入脫氣并填充了二氧化碳和/或氮的厭氧罐中保持即可。

作為乳酸菌，沒有特別限定，可以列舉乳桿菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、片球菌屬、明串珠菌屬、雙歧桿菌屬等。其中，優(yōu)選乳桿菌屬、雙歧桿菌屬，更優(yōu)選乳桿菌屬。

進(jìn)而，作為乳桿菌屬的乳酸菌，可以列舉干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、玉米乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、加氏乳桿菌等。其中，優(yōu)選干酪乳桿菌，干酪乳桿菌中更優(yōu)選干酪乳桿菌yit9029株(fermbp-1366)。

乳酸菌的活菌，如后述實(shí)施例所示，具有改善胰島素早期分泌指數(shù)的效果。其中，胰島素早期分泌指數(shù)是指，在75g口服葡萄糖負(fù)荷試驗(yàn)中，從葡萄糖負(fù)荷前的空腹時(shí)血糖與空腹時(shí)血中胰島素、葡萄糖負(fù)荷后30分鐘的血糖與血中胰島素按照下式所計(jì)算的胰島素早期分泌指數(shù)。

健康人的胰島素早期分泌指數(shù)為0.4以上，胰島素早期分泌性能異常的人的胰島素早期分泌指數(shù)小于0.4。胰島素早期分泌指數(shù)小于0.4的人被認(rèn)為患有糖尿病的可能性高。

本發(fā)明中，胰島素早期分泌性能改善是指使這樣的胰島素早期分泌指數(shù)達(dá)到健康人的水平、例如使胰島素早期分泌指數(shù)為0.4以上、優(yōu)選為0.4～5.0。另外，還意味著并且不使第二時(shí)相的胰島素的追加分泌增加，優(yōu)選不使葡萄糖負(fù)荷后60分鐘后的血中胰島素濃度、或者葡萄糖負(fù)荷后120分鐘后的血中胰島素濃度增加。

使胰島素早期分泌指數(shù)低于0.4的人每1天攝取乳酸菌1×10¹¹個(gè)細(xì)胞時(shí)，胰島素早期分泌指數(shù)得到改善。另一方面，在乳酸菌的活菌的攝取量少的情況下，得不到胰島素早期分泌指數(shù)的改善效果。

因此，優(yōu)選每1天攝取含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物，更優(yōu)選每1天攝取含有乳酸菌的活菌1×10¹¹個(gè)細(xì)胞以上的組合物，更加優(yōu)選每1天攝取含有乳酸菌的活菌1×10¹¹個(gè)細(xì)胞～1×10¹²個(gè)細(xì)胞的組合物。

本發(fā)明的胰島素早期分泌性能改善劑的攝取對象者沒有特別限定，優(yōu)選胰島素早期分泌指數(shù)低于0.4的人，即，2型糖尿病患者或2型糖尿病預(yù)備群的人，特別優(yōu)選以2型糖尿病預(yù)備群的人為對象。其中，2型糖尿病預(yù)備群是指胰島素早期分泌指數(shù)低于0.4、且空腹時(shí)血糖值100mg/dl以上和/或葡萄糖負(fù)荷120分鐘血糖值130mg/dl以上的人，是指相當(dāng)于糖尿病患者和健康者的邊界區(qū)域的人。

本發(fā)明的胰島素早期分泌性能改善劑優(yōu)選每1天分1～3次口服攝取。另外，作為攝取期間，優(yōu)選1周以上連續(xù)攝取，更優(yōu)選4周以上連續(xù)攝取，特別優(yōu)選8周以上連續(xù)攝取。

本發(fā)明的胰島素早期分泌性能改善劑只要是含有乳酸菌的活菌1×10¹⁰個(gè)細(xì)胞以上的組合物，則其制劑形態(tài)沒有限定，例如能夠設(shè)為慣用的醫(yī)藥品制劑。作為這樣的制劑，可以列舉例如片劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑等固體劑；溶液劑、懸浮劑、乳劑等液劑；凍結(jié)干燥劑等，這些制劑能夠通過制劑上的常規(guī)方法，與適當(dāng)?shù)尼t(yī)藥用無毒性載體混合來制備。作為這樣的醫(yī)藥用無毒性載體，可以列舉例如葡萄糖、乳糖、蔗糖、淀粉、甘露糖、糊精、脂肪酸甘油酯、聚乙二醇、羥乙基淀粉、乙二醇、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯、氨基酸、明膠、白蛋白、水、生理鹽水等。另外，根據(jù)需要也可以適當(dāng)添加穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、結(jié)合劑、張度劑、賦形劑等慣用的添加劑。

另外，從攝取的容易性、攝取的持續(xù)性等方面出發(fā)，乳酸菌的活菌優(yōu)選以發(fā)酵物的形態(tài)使用。

這里，作為發(fā)酵物，適合使用由作為有效成分的乳酸菌活菌發(fā)酵得到的發(fā)酵乳、發(fā)酵豆奶、發(fā)酵果汁、發(fā)酵植物液等。這些發(fā)酵物的制造能夠根據(jù)常規(guī)方法制造。例如發(fā)酵乳，在滅菌后的乳培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)乳酸菌活菌，將其進(jìn)行均質(zhì)化處理，得到發(fā)酵乳基料。此時(shí)，接著添加混合另外制備的糖漿溶液，用勻漿器等均質(zhì)化，再添加香料，能夠制成最終制品。

另外，在培養(yǎng)時(shí)，也可以在乳酸菌中并用其他的微生物，例如，糖酵母屬、假絲酵母屬、紅酵母屬、畢赤氏酵母屬、裂殖糖酵母屬、圓酵母屬、接合糖酵母屬等酵母類；曲霉菌屬、青霉菌屬、散囊菌屬、紅曲霉菌屬、毛霉菌屬、鏈孢霉菌屬、根霉菌屬等絲狀菌等進(jìn)行發(fā)酵，但優(yōu)選僅用乳酸菌發(fā)酵。

實(shí)施例

接下來，列舉實(shí)施例，對本發(fā)明更詳細(xì)地進(jìn)行說明。

制造例1(本發(fā)明組合物的制造)

在接種了干酪乳桿菌(lactobacilluscasei)yit9029株、37℃發(fā)酵后的脫脂乳粉溶液中混合糖漿，添加香料后，進(jìn)行均質(zhì)化，填充在容器中，得到本發(fā)明組合物。該發(fā)酵乳制品100ml中的干酪乳桿菌的活菌數(shù)為1×10¹¹個(gè)細(xì)胞。

另外，作為安慰劑，使用不含干酪乳桿菌、添加與發(fā)酵乳制品同等的乳酸調(diào)整了風(fēng)味的組合物。此外，關(guān)于其他的組成，與本發(fā)明組合物相同。

試驗(yàn)1(實(shí)施例)

(實(shí)驗(yàn)方法)

對于胰島素早期分泌指數(shù)低于0.4的男性19名(胰島素早期分泌指數(shù)、空腹時(shí)血糖值、葡萄糖負(fù)荷120分鐘后血糖值的平均值分別為0.28、107mg/dl和172mg/dl)以及17名(胰島素早期分泌指數(shù)、空腹時(shí)血糖值、葡萄糖負(fù)荷120分鐘后血糖值的平均值分別為0.29、111mg/dl和178mg/dl)，分別使其1天1支(100ml)攝取8周制造例1的含有干酪乳桿菌活菌1×10¹¹個(gè)細(xì)胞的組合物(以下，稱為本發(fā)明組合物)或者不含干酪乳桿菌的安慰劑。此外，對于被測者，指示在試驗(yàn)中盡量不改變試驗(yàn)參加前的飲食、飲酒、睡眠等的生活習(xí)慣；避免大幅脫離通常范圍的過度運(yùn)動(dòng)、節(jié)食、過食。

(結(jié)果)

將攝取前、4周后、8周后的胰島素早期分泌指數(shù)表示在表1中。如表1所示，通過每1天攝取干酪乳桿菌活菌1×10¹¹個(gè)細(xì)胞，與安慰劑相比較，確認(rèn)到胰島素早期分泌改善。另外，雖然沒有表示結(jié)果，但在每1天攝取干酪乳桿菌活菌的組中，作為胰島素的基礎(chǔ)分泌量的指標(biāo)的空腹時(shí)血中胰島素濃度幾乎沒有變化。此外，作為第二時(shí)相的追加分泌量的指標(biāo)的、75g葡萄糖負(fù)荷后60分鐘后的血中胰島素濃度(表2)和120分鐘后的血中胰島素濃度(表3)減少，因此確認(rèn)到本發(fā)明組合物不使胰島素的基礎(chǔ)分泌和第二時(shí)相的追加分泌增加。由此，確認(rèn)到通過每天攝取干酪乳桿菌活菌1×10¹¹個(gè)細(xì)胞，能夠特異性地改善胰島素的早期分泌性能。

[表1]

(單位(μu/ml)/(mg/dl))

※值為平均值

[表2]

(單位μu/ml)

[表3]

(單位μu/ml)

試驗(yàn)2(比較實(shí)驗(yàn))

(實(shí)驗(yàn)方法)

對于胰島素早期分泌指數(shù)低于0.4的男性8名(胰島素早期分泌指數(shù)、空腹時(shí)血糖值、葡萄糖負(fù)荷120分鐘后血糖值的平均值分別為0.24、117mg/dl和173mg/dl)和7名(胰島素早期分泌指數(shù)、空腹時(shí)血糖值、葡萄糖負(fù)荷120分鐘后血糖值的平均值分別為0.16、121mg/dl和189mg/dl)，分別使其每1天1包(2g)攝取8周每2g含有干酪乳桿菌活菌4×10⁹個(gè)細(xì)胞和死菌2×10¹¹個(gè)細(xì)胞的粉末、或者不含干酪乳桿菌的安慰劑。將攝取前、8周后的胰島素早期分泌指數(shù)表示在表4中。其中，粉末是指相對于含有干酪乳桿菌yit9029株的活菌和死菌的凍結(jié)干燥粉末，加入將脫脂乳粉和海藻糖以2比1混合得到的粉末，調(diào)整為上述菌數(shù)的粉末，安慰劑是指將脫脂乳粉和海藻糖以2比1混合得到的制劑。此外，粉末所含的死菌數(shù)通過由dapi染色法測定粉末所含的干酪乳桿菌的總菌數(shù)，從其中去除活菌數(shù)后而求得的。

(結(jié)果)

如表4所示，在每天攝取干酪乳桿菌活菌4×10⁹個(gè)細(xì)胞的情況下，確認(rèn)到在第8周胰島素早期分泌指數(shù)下降，胰島素早期分泌性能沒有改善。

[表4]

(單位(μu/ml)/(mg/dl))

※值為平均值