本發(fā)明涉及一種高分子材料技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及配合物、其制備方法及水凝膠。

背景技術(shù)：

由于實體腫瘤生長過快，造成了相對于正常生理組織更高的間質(zhì)壓力及流體壓力，促使化療過程中不宜于在局部形成有效的藥物濃度；另外腫瘤組織的微環(huán)境復雜，也是影響藥物擴散的重要原因。但靜脈注射給藥的方法因化療藥物毒副作用大，無法僅通過提高藥物劑量的方法來維持藥物在病灶部位的有效濃度。腫瘤局部化療是增加藥物病灶部位有效濃度，克服生理性給藥障礙的有效方法，近年來受到廣泛的研究和關(guān)注。目前，已有植入性片劑等在臨床應(yīng)用，但固體藥物制劑的植入手術(shù)操作復雜，不僅易導致出血、感染等并發(fā)癥，還會促進腫瘤的擴散和轉(zhuǎn)移。

溫度敏感水凝膠是一種重要的物理凝膠類型，因其操作簡便、可注射、成膠條件溫和等優(yōu)點，已在藥物載體、3D細胞培養(yǎng)、組織工程等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。作為藥物載體，溫度敏感水凝膠能夠在局部提供一個類似于藥物倉庫的作用，不僅可以持續(xù)提供有效的藥物濃度，而且在空間上更直接的將藥物遞釋到病灶部位，相對于全身治療，更加直接有效，特別對于毒副作用較大的藥物，是一種非常有發(fā)展?jié)摿Φ慕o藥手段。但對于該類型的藥物載體來說，前期的藥物爆釋行為是一個不容忽視的問題，這不僅會使水凝膠載體的作用被削弱，影響治療效果，而且前期爆釋的藥物會造成較大的局部組織毒性。因此，減少藥物爆釋行為，實現(xiàn)藥物的釋放的可控性，對于發(fā)揮水凝膠載體優(yōu)勢是非常必要的。

順鉑藥物在我國屬于常用化療藥物之一，具有抗癌譜廣、療效確切等特點，臨床用于卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肺癌、食道癌、鼻咽癌及成骨肉瘤等多種實體腫瘤均能顯示療效。但由于其副作用大往往給病人造成巨大的心理和生理的傷害。如果能夠?qū)崿F(xiàn)該類藥物的局部緩釋治療，對于減少病人全身治療的副作用、提高病人生活質(zhì)量以及改善晚期病人腫瘤壓迫等均具有很好的潛在應(yīng)用價值和社會效益。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種配合物，本發(fā)明提供的配合物形成的水凝膠具有緩釋作用。

本發(fā)明提供了一種配合物，由藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物配合形成，

其中，

所述藥物為鉑類藥物；

所述R₁獨立的選自-CH₂-、-(CH₂)₂；R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；

m、n、x、y、p、q為聚合度，10≤m≤227、10≤n≤226、1≤x≤100、1≤y≤50、2≤p≤50、2≤q≤50。

優(yōu)選的，所述鉑類藥物選自順鉑，其次可選擇：卡鉑、奧沙利鉑、洛鉑和奈達鉑中的一種或幾種。

優(yōu)選的，所述藥物占所述配合物的質(zhì)量百分比為0.01％～30％。

優(yōu)選的，所述聚合物占所述配合物的質(zhì)量百分比為2％～40％。

優(yōu)選的，所述R₂選自選自氫離子、鈉離子、鉀離子鎂離子及其亞群、氨基酸離子或銨離子。

本發(fā)明提供了一種配合物的制備方法，包括以下步驟：

藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物在水性介質(zhì)中發(fā)生配合反應(yīng)，生成配合物；

其中，所述藥物為鉑類藥物；

所述R₁獨立的選自-CH₂-、-(CH₂)₂；R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；

m、n、x、y、p、q為聚合度，10≤m≤227、10≤n≤226、1≤x≤100、1≤y≤50、2≤p≤50、2≤q≤50。

優(yōu)選的，所述反應(yīng)溫度為0～37℃。

優(yōu)選的，所述水性介質(zhì)為水、生理鹽水、緩沖溶液、組織培養(yǎng)液或體液。

本發(fā)明提供了一種水凝膠，包括上述技術(shù)方案所述的配合物。

優(yōu)選的，所述水凝膠還包括調(diào)節(jié)劑，所述調(diào)節(jié)劑選自山梨醇、多糖、羥甲基纖維素鈉、甘油、丙二醇、甘露醇、膠原和明膠中的一種或幾種。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種配合物，由藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物配合形成，所述藥物選自鉑類藥物、烷化劑類藥物和蛋白多肽類藥物中的一種或幾種；其中，所述R₁獨立的選自-CH₂-、-(CH₂)₂；R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；m、n、x、y、p、q為聚合度，10≤m≤227、10≤n≤226、1≤x≤100、1≤y≤50、2≤p≤50、2≤q≤50。本發(fā)明的聚合物包含端氨基化的聚乙二醇單甲醚引發(fā)得到的式(I)結(jié)構(gòu)的聚氨基酸或由端氨基化的聚乙二醇引發(fā)得到的式(II)結(jié)構(gòu)的聚氨基酸。本發(fā)明所述聚氨基酸的PEG鏈段和聚氨基酸鏈段均具有不同的聚合度，可以通過調(diào)節(jié)嵌段比例，以及乙酯基團與羧基的比例，獲得具有不同結(jié)構(gòu)的嵌段聚合物，以及不同相變溫度的水凝膠。本發(fā)明提供的嵌段聚合物具有多種調(diào)節(jié)手段，使得形成的溫度敏感型水凝膠的可調(diào)節(jié)性好，擴充了對溫度敏感型水凝膠相變行為的調(diào)節(jié)手段，有利于該類型溫度敏感水凝膠進一步的應(yīng)用。同時，水凝膠材料除了含有谷氨酸乙酯鏈段外，還通過谷氨酸、賴氨酸、天冬氨酸的引入，增加了羧基、氨基等活性功能基團，這些基團可以通過與藥物分子之間的靜電作用、配位作用以及共價鍵合等相互作用，實現(xiàn)對水溶性藥物的釋放行為的調(diào)節(jié)，減少藥物的突釋行為；這有利于通過該凝膠載體實現(xiàn)對藥物在體內(nèi)的緩釋作用。本發(fā)明提供的水凝膠具有良好的生物相容性和生物可降解性，其降解周期為2周～數(shù)月，有利于其作為藥物載體在體內(nèi)的進一步應(yīng)用，而且降解得到的產(chǎn)物為氨基酸、乙醇和聚乙二醇，可被機體吸收或者通過體內(nèi)代謝排出體外，對人體基本無害；因此，該水凝膠具有廣闊的應(yīng)用前景。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實施例1制備的嵌段聚合物的核磁共振氫譜圖；

圖2為本發(fā)明實施例2制備的嵌段聚合物的核磁共振氫譜圖；

圖3為本發(fā)明實施例6獲得順鉑配合物水凝膠相圖；

圖4為本發(fā)明實施例7獲得順鉑配合物水凝膠SEM微觀結(jié)構(gòu)圖；

圖5為實施例8獲得順鉑配合物水凝膠的流變學研究結(jié)果；

圖6為實施例9獲得順鉑配合物水凝膠的細胞MTT實驗結(jié)果。

具體實施方式

本發(fā)明提供了一種配合物，由藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物配合形成，

其中，所述R₁獨立的選自-CH₂-、-(CH₂)₂；R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；

m為聚合度，10≤m≤227，優(yōu)選為20≤m≤185，更優(yōu)選為30≤m≤115；

n為聚合度，10≤n≤226；優(yōu)選為20≤n≤180，更優(yōu)選為30≤n≤112；

x為聚合度，1≤x≤100；優(yōu)選為5≤x≤80；更優(yōu)選為3≤x≤50；

y為聚合度，1≤y≤50；優(yōu)選為2≤y≤40；更優(yōu)選為3≤y≤30；

p為聚合度，2≤p≤50；優(yōu)選為2≤p≤40；更優(yōu)選為3≤p≤30；

q為聚合度，2≤q≤50；優(yōu)選為2≤q≤40；更優(yōu)選為3≤q≤30。

本發(fā)明所述藥物為鉑類藥物；優(yōu)選選自順鉑，其次可選擇：卡鉑、奧沙利鉑、洛鉑和奈達鉑中的一種或幾種。

本發(fā)明的藥物不限于鉑類藥物，也可以與其他化療藥物、生物治療藥物中的一種或幾種等聯(lián)用。

在本發(fā)明中，所述藥物占所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為0.01％～30％；更優(yōu)選為1％～25％；最優(yōu)選為4％～20％。

所述聚合物占所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為2％～40％；更優(yōu)選5％～30％；最優(yōu)選為6％～25％。

在本發(fā)明中，R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；優(yōu)選選自氫離子、鈉離子、鉀離子鎂離子及其亞群、氨基酸離子或銨離子。

本發(fā)明提供的配合物的分子量優(yōu)選為500～20000，更優(yōu)選為1000～10000，最優(yōu)選為1500～6000。PEG鏈段所占聚合物質(zhì)量比優(yōu)選為10％～90％，更優(yōu)選為30％～70％，最優(yōu)選為40％～60％。所述谷氨酸乙酯嵌段鏈段在氨基酸嵌段的含量優(yōu)選為20％～99％，更優(yōu)選為40％～90％，最優(yōu)選為50％～70％。

相應(yīng)的，本發(fā)明提供了一種配合物的制備方法，包括以下步驟：

藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物在水性介質(zhì)中發(fā)生配合反應(yīng)，生成配合物；

其中，所述R₁獨立的選自-CH₂-、-(CH₂)₂；R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；

m為聚合度，10≤m≤227，優(yōu)選為20≤m≤185，更優(yōu)選為30≤m≤115；

n為聚合度，10≤n≤226；優(yōu)選為20≤n≤180，更優(yōu)選為30≤n≤112；

x為聚合度，1≤x≤100；優(yōu)選為5≤x≤80；更優(yōu)選為3≤x≤50；

y為聚合度，1≤y≤50；優(yōu)選為2≤y≤40；更優(yōu)選為3≤y≤30；

p為聚合度，2≤p≤50；優(yōu)選為2≤p≤40；更優(yōu)選為3≤p≤30；

q為聚合度，2≤q≤50；優(yōu)選為2≤q≤40；更優(yōu)選為3≤q≤30；

本發(fā)明所述藥物選自但不限于鉑類藥物，也可以與其他化療藥物、生物治療藥物中的一種或幾種等聯(lián)用。

在本發(fā)明中，所述藥物占所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為0.01％～30％；更優(yōu)選為1％～25％；最優(yōu)選為4％～20％。

所述聚合物所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為2％～40％；更優(yōu)選5％～30％；最優(yōu)選為8％～25％。

在本發(fā)明中，R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；優(yōu)選選自選自氫離子、鈉離子、鉀離子鎂離子及其亞群、氨基酸離子或銨離子。

在本發(fā)明中，所述具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物為擔載藥物的載體，以順鉑為例，順鉑中的Pt與所述聚合物的羧基形成配位鍵，得到順鉑配合物；優(yōu)選的，全部順鉑分子與所述聚合物形成配位鍵，但不一定限于全部的順鉑分子和聚合物的羧基形成配位鍵，也包含部分順鉑分子之間以其他任何的物理方式擔載于載體材料上；所述順鉑與聚合物發(fā)生配合作用，可以分子間配合，也可以是分子內(nèi)配合，對此，本發(fā)明并無特殊限制。

本發(fā)明提供的配合物的制備方法，藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物在水性介質(zhì)中發(fā)生配合反應(yīng)，生成配合物。

優(yōu)選首先將聚合物溶于水性介質(zhì)中，加入藥物，攪拌，進行配合作用，得到載藥配合物溶液。本發(fā)明所述攪拌優(yōu)選為在冰浴的條件下機械攪拌。所述配合作用的時間優(yōu)選為12～96小時，更優(yōu)選為24～72小時；所述配合作用的溫度優(yōu)選為0℃～40℃；更優(yōu)選為0℃～35℃。

該溶液可以在4℃冰箱保存?zhèn)溆?，可保存?shù)月。使用時，將上述溶液震蕩或機械攪拌后，在30～37℃放置一段時間或注射入人體內(nèi)，即可。上述配合物配制一周以內(nèi)使用最佳。

在本發(fā)明中，所述水性介質(zhì)優(yōu)選為水、生理鹽水、緩沖溶液、組織培養(yǎng)液或體液。所述水性介質(zhì)占所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為60％～98％；更優(yōu)選為70％～90％。

本發(fā)明對所述具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物的來源也沒有特殊限制，優(yōu)選按照以下方法制備：

具有式Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇，與式Ⅵ結(jié)構(gòu)γ-烷基-L-谷氨酸乙酯-N-羧酸內(nèi)酸酐和氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐發(fā)生聚合反應(yīng)，脫保護，得到式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物；

其中，m為聚合度，10≤m≤227；

n為聚合度，10≤n≤226。

本發(fā)明中，所述具有式(IV)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式(V)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇優(yōu)選按照以下方法制備：

聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇與氫氧化鉀、對甲基磺酰氯發(fā)生酯化反應(yīng)，得到甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯；

所述甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯與氨水進行氨解反應(yīng)，得到具有式(IV)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式(V)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇。

首先，將聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇和甲苯共沸除水后繼續(xù)除去甲苯，再向其中加入有機溶劑，得到聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇溶液。其中，所述聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇的數(shù)均分子量為550～10000，優(yōu)選為1000～8000，更優(yōu)選為1500～5000，所述有機溶劑優(yōu)選為二氯甲烷，所述聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇的質(zhì)量與有機溶劑的體積比優(yōu)選為1g:(1～20)mL，更優(yōu)選為1g:(3～18)mL，最優(yōu)選為1g:(5～15)mL。

向得到的聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇溶液中加入氫氧化鉀和甲基磺酰氯，進行酯化反應(yīng)，得到甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯。其中，所述氫氧化鉀與聚乙二醇單甲醚的摩爾比優(yōu)選為(1～10):1，更優(yōu)選為(3～8):1，最優(yōu)選為(4～7):1；所述氫氧化鉀與聚乙二醇的摩爾比優(yōu)選為(2～20):1，更優(yōu)選為(5～18):1，最優(yōu)選為(8～14):1；所述氫氧化鉀與甲基磺酰氯的摩爾比優(yōu)選為(1～10):(10～30)，更優(yōu)選為(3～8):(18～26)，最優(yōu)選為(4～7):(15～24)。

本發(fā)明優(yōu)選在-10℃～10℃、無水條件下，更優(yōu)選在-8℃～8℃下，最優(yōu)選為-5℃～5℃下，向所述聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇溶液中加入氫氧化鉀，同時滴加甲基磺酰氯，在得到的混合溶液中，所述聚乙二醇單甲醚或聚乙二醇與三乙胺、甲基磺酰氯進行酯化反應(yīng)，得到甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯。在上述溫度下優(yōu)選反應(yīng)0.5小時～4小時，更優(yōu)選為1小時～3.5小時，最優(yōu)選為1.5小時～2.5小時，然后優(yōu)選升溫至12℃～40℃，更優(yōu)選為18℃～35℃，最優(yōu)選為15℃～28℃，優(yōu)選在攪拌條件下繼續(xù)反應(yīng)10小時～72小時，更優(yōu)選為15小時～60小時，最優(yōu)選為20小時～48小時。

酯化反應(yīng)完畢后，將得到的反應(yīng)液過濾，濾去沉淀物，濾液濃縮后，優(yōu)選用乙醚沉降，然后再進行過濾、洗滌，優(yōu)選在10℃～40℃溫度下進行真空干燥，更優(yōu)選為15℃～38℃，最優(yōu)選為20℃～30℃，所述干燥時間優(yōu)選為15小時～35小時，更優(yōu)選為18小時～30小時，最優(yōu)選為22小時～28小時，得到甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯。

將得到的甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯和氯化銨溶于氨水中，其中所述甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯的質(zhì)量、氯化銨的質(zhì)量與氨水的體積比優(yōu)選為1g:(0.2～3.5)g:(30～70)mL，更優(yōu)選為1g:(0.5～3)g:(35～55)mL，最優(yōu)選為1g:(1～1.8)g:(40～50)mL。

在氨水中，所述甲基磺酸聚乙二醇單甲醚酯或甲基磺酸聚乙二醇酯進行氨解反應(yīng)，得到具有式(IV)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式(V)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇。所述氨化反應(yīng)的溫度優(yōu)選為10℃～40℃，更優(yōu)選為15℃～35℃，最優(yōu)選為20℃～30℃，所述氨化反應(yīng)時間優(yōu)選為40小時～100小時，更優(yōu)選為50小時～85小時，最優(yōu)選為60小時～75小時。

氨解反應(yīng)完成后，將得到的反應(yīng)液優(yōu)選用二氯甲烷萃取、然后用氯化鈉水溶液洗滌、無水硫酸鈉干燥，將得到的濾液濃縮，然后用乙醚沉降，將得到的沉降物過濾、洗滌，優(yōu)選在10℃～40℃溫度下進行真空干燥，更優(yōu)選為15℃～35℃，最優(yōu)選為20℃～30℃，所述干燥時間優(yōu)選為15小時～35小時，更優(yōu)選為18小時～30小時，最優(yōu)選為20小時～28小時，得到具有式(IV)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有(V)結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇。

本發(fā)明對于所述γ-烷基-L-谷氨酸乙酯-N-羧酸內(nèi)酸酐的來源不進行限定，可以為市售，優(yōu)選按照以下方法制備：

L-谷氨酸和醇類化合物發(fā)生酯化反應(yīng)，得到γ-烷基-L-谷氨酸酯；

所述γ-烷基-L-谷氨酸酯與雙(三氯甲基)碳酸酯進行縮合反應(yīng)，得到γ-烷基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐。

首先將L-谷氨酸與醇類化合物混合并攪拌，并在攪拌條件下向其中滴加濃硫酸，在濃硫酸存在且攪拌的條件下，L-谷氨酸與醇類化合物進行酯化反應(yīng)，得到γ-烷基-L-谷氨酸酯。所述醇類化合物優(yōu)選為甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇或正丁醇，所述L-谷氨酸與醇類化合物的摩爾比優(yōu)選為1:(0.8～8)，更優(yōu)選為1:(1.5～6)，最優(yōu)選為1：(3～4)，所述L-谷氨酸與濃硫酸的摩爾比優(yōu)選為1:(0.5～5)，更優(yōu)選為1:(0.8～3)，最優(yōu)選為1:(1.2～2)。所述L-谷氨酸與醇類化合物混合的溫度優(yōu)選為0℃～30℃，更優(yōu)選為0℃～20℃，最優(yōu)選為0℃～10℃，所述酯化反應(yīng)的溫度優(yōu)選為20℃～50℃，更優(yōu)選為25℃～45℃，最優(yōu)選為28℃～40℃，所述酯化反應(yīng)時間優(yōu)選為5小時～35小時，更優(yōu)選為7小時～33小時，最優(yōu)選為10小時～30小時。

L-谷氨酸與醇類化合物的酯化反應(yīng)完成后，優(yōu)選用三乙胺和乙醇的混合溶液中和得到的反應(yīng)液，然后將得到的混合溶液離心、重結(jié)晶、干燥，得到γ-烷基-L-谷氨酸酯。本發(fā)明中，所述三乙胺與乙醇的體積比優(yōu)選為1:(0.5～1.5)，更優(yōu)選為1:(0.7～1.3)，最優(yōu)選為1:(0.8～1.2)，所述三乙胺與濃硫酸的摩爾比優(yōu)選為(0.7～3):1，更優(yōu)選為(0.8～2.0):1，最優(yōu)選為(0.9～1.2):1。

得到γ-烷基-L-谷氨酸酯后，優(yōu)選在無水條件下，用無水的有機溶劑溶解所述γ-烷基-L-谷氨酸酯與雙(三氯甲基)碳酸酯，在有機溶劑中，γ-烷基-L-谷氨酸酯與雙(三氯甲基)碳酸酯進行縮合反應(yīng)，得到γ-烷基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐。所述γ-烷基-L-谷氨酸酯與雙(三氯甲基)碳酸酯的摩爾比優(yōu)選為1:(0.1～1.2)，更優(yōu)選為1:(0.3～1)，最優(yōu)選為1:(0.5～0.8)，所述有機溶劑優(yōu)選為四氫呋喃，所述γ-烷基-L-谷氨酸酯與雙(三氯甲基)碳酸酯的反應(yīng)溫度優(yōu)選為30℃～80℃，更優(yōu)選為40℃～70℃，最優(yōu)選為50℃～60℃，所述縮合反應(yīng)時間優(yōu)選為0.1小時～5小時，更優(yōu)選為0.15小時～3小時，更優(yōu)選為0.2小時～2小時。

縮合反應(yīng)結(jié)束后，將得到的反應(yīng)液優(yōu)選用石油醚沉降，將得到的沉降物分離，然后將得到的分離產(chǎn)物洗滌、重結(jié)晶、干燥，得到γ-烷基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐。

本發(fā)明所述氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐包括但不限于式Ⅶ、式Ⅷ和式Ⅸ中的一種；

上述結(jié)構(gòu)氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐可以是苯基作為保護基團，也可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其余保護基團，本發(fā)明人對此并不進行限定。

本發(fā)明對于所述式Ⅶ、式Ⅷ和式Ⅸ的氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐的來源不進行限定，市售的即可。

在本發(fā)明中，具有式Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇，與式Ⅵ結(jié)構(gòu)γ-烷基-L-谷氨酸乙酯-N-羧酸內(nèi)酸酐和氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐發(fā)生聚合反應(yīng)，得到反應(yīng)產(chǎn)物；優(yōu)選具體包括以下步驟：

將所述具有式Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇溶于第一有機溶劑，得到第一溶液。優(yōu)選具體為：

將所述具有式Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇與無水甲苯共沸除水后繼續(xù)除去甲苯，然后將其溶于第一有機溶劑，得到第一溶液。

本發(fā)明對所述第一溶液的濃度沒有特殊限制。所述第一有機溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或三氯甲烷，更優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺。所述具有Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇的質(zhì)量與第一有機溶劑的體積比優(yōu)選為1g:(10mL～50mL)，更優(yōu)選為1g:(15mL～45mL)，最優(yōu)選為1g:(25mL～35mL)，所述共沸的溫度優(yōu)選為110℃～150℃，更優(yōu)選為115℃～140℃，最優(yōu)選為125℃～135℃，所述共沸的時間優(yōu)選為1小時～10小時，更優(yōu)選為1.5小時～7.5小時，最優(yōu)選為2小時～3小時。

將所述γ-烷基-L-谷氨酸乙酯-N-羧酸內(nèi)酸酐Ⅵ和氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐(VII/VIII/IX)溶于第二有機溶劑，得到第二溶液，本發(fā)明對所述第二溶液的濃度沒有特殊限制。所述第二有機溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或三氯甲烷，更優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺。

得到第一溶液和第二溶液后，在氮氣氣氛下，將所述第一溶液與第二溶液混合并不斷攪拌，在得到的混合溶液中，所述端氨基化的聚乙二醇單甲醚或端氨基化的聚乙二醇與γ-烷基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐及氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐發(fā)生聚合反應(yīng)，得到反應(yīng)產(chǎn)物。所述端氨基化的聚乙二醇或端氨基化的聚乙二醇單甲醚與氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐的摩爾比優(yōu)選為1:(5～150)，更優(yōu)選為1:(10～50)。所述聚合反應(yīng)溫度優(yōu)選為10℃～50℃，更優(yōu)選為15℃～45℃，更優(yōu)選為20℃～40℃，所述聚合反應(yīng)時間優(yōu)選為10小時到120小時，更優(yōu)選為20小時到90小時，最優(yōu)選為24小時到72小時。

聚合反應(yīng)結(jié)束后，優(yōu)選用乙醚進行沉降，對得到的沉降物進行抽濾、洗滌、真空干燥，得到反應(yīng)產(chǎn)物。

得到反應(yīng)產(chǎn)物用HBr醋酸脫除芐基后，經(jīng)透析獲得具有式I或式II結(jié)構(gòu)的聚合物。

所述用HBr醋酸脫除芐基條件優(yōu)選為：將反應(yīng)產(chǎn)物溶于二氯乙酸中；所述反應(yīng)物與二氯乙酸的比例優(yōu)選為1g：1～50mL，更優(yōu)選為1g：5～30mL，最優(yōu)選為1g:8～12mL。之后將反應(yīng)體系升溫至特定溫度；所述溫度優(yōu)選為20～40℃，更優(yōu)選為25～35℃，最優(yōu)選為28～32℃。加入33％的HBr醋酸溶液進行反應(yīng)，加入量優(yōu)選為1g：1～5mL，更優(yōu)選為1g：2.5～4.0mL，最優(yōu)選為2.8～3.2mL。反應(yīng)在攪拌條件下反應(yīng)一定時間，該時間優(yōu)選為0.5～5h，更優(yōu)選為0.7～3h，最優(yōu)選為1～2h。得到聚合物。

本發(fā)明所述聚合物還可以采用以下方法制備：

將所述具有式Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇溶于第一有機溶劑，得到第一溶液。優(yōu)選具體為：

將所述具有式Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇與無水甲苯共沸除水后繼續(xù)除去甲苯，然后將其溶于第一有機溶劑，得到第一溶液。

本發(fā)明對所述第一溶液的濃度沒有特殊限制。所述第一有機溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或三氯甲烷，更優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺。所述具有Ⅳ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇單甲醚或具有式Ⅴ結(jié)構(gòu)的端氨基化的聚乙二醇的質(zhì)量與第一有機溶劑的體積比優(yōu)選為1g:(10mL～50mL)，更優(yōu)選為1g:(15mL～45mL)，最優(yōu)選為1g:(25mL～35mL)，所述共沸的溫度優(yōu)選為110℃～150℃，更優(yōu)選為115℃～140℃，最優(yōu)選為125℃～135℃，所述共沸的時間優(yōu)選為1小時～10小時，更優(yōu)選為1.5小時～7.5小時，最優(yōu)選為1.8小時～2.2小時。

將所述γ-烷基-L-谷氨酸乙酯-N-羧酸內(nèi)酸酐Ⅵ溶于第二有機溶劑，得到第二溶液，本發(fā)明對所述第二溶液的濃度沒有特殊限制。所述第二有機溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或三氯甲烷，更優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺。

將氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐(VII/VIII/IX)溶于第二有機溶劑，得到第三溶液；

得到第一溶液和第二溶液后，在氮氣氣氛下，將所述第一溶液與第二溶液混合并不斷攪拌，反應(yīng)；所述反應(yīng)溫度優(yōu)選為10℃～40℃，更優(yōu)選為15℃～35℃，更優(yōu)選為20℃～30℃，所述聚合反應(yīng)時間優(yōu)選為10小時到60小時，更優(yōu)選為20小時到50小時，最優(yōu)選為24小時到48小時。再在氮氣的保護條件下加入第三溶液，繼續(xù)反應(yīng)，得到反應(yīng)產(chǎn)物。所述端氨基化的聚乙二醇或端氨基化的聚乙二醇單甲醚與氨基酸衍生物-N-羧酸內(nèi)酸酐的摩爾比優(yōu)選為1:(5～150)，更優(yōu)選為1:(10～50)。所述聚合反應(yīng)溫度優(yōu)選為10℃～50℃，更優(yōu)選為15℃～45℃，更優(yōu)選為20℃～40℃，所述聚合反應(yīng)時間優(yōu)選為10小時到120小時，更優(yōu)選為20小時到90小時，最優(yōu)選為24小時到72小時。

聚合反應(yīng)后的操作上述已經(jīng)有清楚的描述，在此不再贅述。

聚合反應(yīng)結(jié)束后，優(yōu)選用乙醚進行沉降，對得到的沉降物進行抽濾、洗滌、真空干燥，脫除芐基后，經(jīng)透析獲得具有包含具有式I或式II結(jié)構(gòu)的聚合物材料。

本發(fā)明所述聚合物材料的分子量優(yōu)選為500～20000，更優(yōu)選為1000～10000，最優(yōu)選為1500～6000。PEG鏈段所占聚合物質(zhì)量比優(yōu)選為為10％～90％，更優(yōu)選為30％～70％，最優(yōu)選為40％～60％。所述谷氨酸乙酯嵌段鏈段在氨基酸嵌段的含量優(yōu)選為20％～99％，更優(yōu)選為40％～90％，最優(yōu)選為50％～80％。

本發(fā)明提供了一種水凝膠，包括上述技術(shù)方案所述的配合物。

在本發(fā)明中，所述水凝膠的制備方法優(yōu)選具體為：

將配合物優(yōu)選首先將聚合物溶于水性介質(zhì)中，加入藥物，機械漿攪拌，進行配合作用，得到載藥配合物溶液。本發(fā)明所述攪拌優(yōu)選為在冰浴的條件下攪拌。所述配合作用的時間優(yōu)選為12～96小時，更優(yōu)選為24～72小時；所述配合作用的溫度優(yōu)選為0℃～40℃；更優(yōu)選為0℃～35℃。

該溶液可以在4℃冰箱保存?zhèn)溆?，可保存?shù)月。使用時，將上述溶液震蕩或機械攪拌后，在30～37℃放置或注射入人體內(nèi)，即可得到水凝膠。上述配合物配制一周以內(nèi)使用最佳。

在本發(fā)明中，所述水凝膠還包括調(diào)節(jié)劑，所述調(diào)節(jié)劑選自山梨醇、多糖、羥甲基纖維素鈉、甘油、丙二醇、甘露醇、膠原和明膠中的一種或幾種。

也就是說，上述聚合物溶于水性介質(zhì)中，與藥物混合，可與調(diào)節(jié)劑混合，制備得到水凝膠。

本發(fā)明通過上述羥甲基纖維素鈉、山梨醇等調(diào)節(jié)劑可以進一步調(diào)節(jié)凝膠的固化問題和調(diào)控藥物的釋放行為。

在本發(fā)明中，所述調(diào)節(jié)劑的用量占水凝膠的質(zhì)量百分比優(yōu)選為1～20％；更優(yōu)選為2～18％。所述藥物占所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為0.01％～30％；更優(yōu)選為1％～25％；最優(yōu)選為4％～20％。所述聚合物所述配合物的質(zhì)量百分比優(yōu)選為2％～40％；更優(yōu)選5％～30％；最優(yōu)選為8％～25％。

所述溶劑優(yōu)選為水、生理鹽水、緩沖溶液、組織培養(yǎng)液或體液；更優(yōu)選為緩沖溶液或生理鹽水，最優(yōu)選為緩沖溶液。

本發(fā)明采用以下方法對所述水凝膠的相圖進行了測試：

將上述技術(shù)方案得到的配合物溶解于緩沖溶液中，得到配合物溶液。所述緩沖溶液優(yōu)選為磷酸鹽緩沖溶液，所述緩沖溶液的pH優(yōu)選為5.0～8.0，更優(yōu)選為6.5～7.5。將不同濃度的上述聚合物溶液通過試管倒置法測定配合物溶液的成膠溫度，得到材料的溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變相圖；將得到的配合物溶液優(yōu)選在恒溫水浴中放置15分鐘，所述恒溫水浴的溫度優(yōu)選為30℃～45℃，更優(yōu)選為35℃～40℃，得到水凝膠。

本發(fā)明提供了一種配合物，由藥物與具有式(I)或式(II)結(jié)構(gòu)的聚合物配合形成，所述藥物選自但不限于鉑類藥物，也可以與烷化劑類藥物和蛋白多肽類藥物中的一種或幾種聯(lián)用；其中，所述R₁獨立的選自-CH₂-、-(CH₂)₂；R₂獨立的選自H離子、金屬陽離子或有機陽離子；m、n、x、y、p、q為聚合度，10≤m≤227、10≤n≤226、1≤x≤100、1≤y≤50、2≤p≤50、2≤q≤50。本發(fā)明的聚合物包含端氨基化的聚乙二醇單甲醚引發(fā)得到的式(I)結(jié)構(gòu)的聚氨基酸或由端氨基化的聚乙二醇引發(fā)得到的式(II)結(jié)構(gòu)的聚氨基酸。本發(fā)明所述聚氨基酸的PEG鏈段和聚氨基酸鏈段均具有不同的聚合度，可以通過調(diào)節(jié)嵌段比例，以及乙酯基團與羧基的比例，獲得具有不同結(jié)構(gòu)的嵌段聚合物，以及不同相變溫度的水凝膠。本發(fā)明提供的嵌段聚合物具有多種調(diào)節(jié)手段，使得形成的溫度敏感型水凝膠的可調(diào)節(jié)性好，擴充了對溫度敏感型水凝膠相變行為的調(diào)節(jié)手段，有利于該類型溫度敏感水凝膠進一步的應(yīng)用。同時，水凝膠材料除了含有谷氨酸乙酯鏈段外，還通過谷氨酸、賴氨酸、天冬氨酸的引入，增加了羧基、氨基等活性功能基團，這些基團可以通過與藥物分子之間的靜電作用、配位作用以及共價鍵合等相互作用，實現(xiàn)對水溶性藥物的釋放行為的調(diào)節(jié)，減少藥物的突釋行為；這有利于通過該凝膠載體實現(xiàn)對藥物在體內(nèi)的緩釋作用。本發(fā)明提供的水凝膠具有良好的生物相容性和生物可降解性，其降解周期為2周～數(shù)月，有利于其作為藥物載體在體內(nèi)的進一步應(yīng)用，而且降解得到的產(chǎn)物為氨基酸、乙醇和聚乙二醇，可被機體吸收或者通過體內(nèi)代謝排出體外，對人體基本無害；因此，該水凝膠具有廣闊的應(yīng)用前景。

為了進一步說明本發(fā)明，以下結(jié)合實施例對本發(fā)明提供的配合物、其制備方法及水凝膠進行詳細描述。

實施例1

將6.0g、數(shù)均分子量為2000的端氨基化的聚乙二醇單甲醚與200mL甲苯在130℃下共沸3h除水，然后減壓抽干剩余的甲苯；將得到的固體溶解于100mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第一溶液；將9.0g的γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐和4.75gγ-芐基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐溶解于160mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第二溶液；在氮氣氛圍中，將所述第一溶液與第二溶液混合，在室溫、氮氣保護條件下攪拌反應(yīng)80h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽干N,N-二甲基甲酰胺，然后將得到的固體溶解于氯仿中，再用乙醚進行沉降，抽濾，干燥后，得到聚乙二醇單甲醚-聚氨基酸酯嵌段聚合物。得到未脫保護的聚合物材料1。將上述所得材料溶解于120mL的二氯乙酸中，30℃使材料完全溶解，然后加入36mL的HBr溶液，30℃反應(yīng)1小時，將該溶液加入到乙醚中沉降，得到固體用DMF溶解，并用冰乙醚二次沉降，并真空干燥；粗產(chǎn)物用DMF溶解，蒸餾水透析3天，凍干，獲得聚乙二醇單甲醚-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-L-谷氨酸)共聚物13.3g。

對得到的共聚物進行核磁共振分析，結(jié)果如圖1所示，圖1為本發(fā)明實施例1制備得到的共聚物的核磁共振氫譜圖；結(jié)果表明，實施例1所制備聚合物包含13個L-谷氨酸乙酯單元和5.0個L-谷氨酸單元。

實施例2

將3.1g、數(shù)均分子量為2000的端氨基化的聚乙二醇單甲醚與100mL甲苯在120℃下共沸3h除水，然后減壓抽干剩余的甲苯；將得到的固體溶解于30mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第一溶液；將4.7g的γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐和1.2gγ-芐基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐溶解于62mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第二溶液；在氮氣氛圍中，將所述第一溶液與第二溶液混合，在室溫、氮氣保護條件下攪拌反應(yīng)70h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽干N,N-二甲基甲酰胺，然后將得到的固體溶解于氯仿中，再用乙醚進行沉降，抽濾，干燥后，得到聚乙二醇單甲醚-聚氨基酸酯嵌段聚合物。得到未脫保護的聚合物材料1。將上述所得材料溶解于56mL的二氯乙酸中，30℃使材料完全溶解，然后加入16mL的HBr溶液，30℃反應(yīng)1.2小時，將該溶液加入到乙醚中沉降，得到固體用DMF溶解，并用冰乙醚二次沉降，并真空干燥；粗產(chǎn)物用DMF溶解，蒸餾水透析3天，凍干，獲得聚乙二醇單甲醚-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-L-谷氨酸)共聚物4.53g。

對得到的共聚物進行核磁共振分析，結(jié)果如圖2所示，圖2為本發(fā)明實施例2制備得到的嵌段共聚物的核磁共振氫譜圖；結(jié)果表明，實施例2所制備聚合物包含12個L-谷氨酸乙酯單元和3個L-谷氨酸單元單元。

實施例3

將3.0g、數(shù)均分子量為2000的端氨基化的聚乙二醇單甲醚與100mL甲苯在130℃下共沸2h除水，然后減壓抽干剩余的甲苯；將得到的固體溶解于100mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第一溶液；將5.5g的γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐溶解于160mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第二溶液；在氮氣氛圍中，將所述第一溶液與第二溶液混合，在室溫、氮氣保護條件下攪拌反應(yīng)72h；反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液用蒸餾水透析3天，凍干，得到聚乙二醇單甲醚-聚γ-乙基-L-谷氨酸酯聚合物4.37g。

對得到的共聚物進行核磁共振分析，結(jié)果表明，本發(fā)明實施例3所制備聚合物包含14個L-谷氨酸乙酯單元。

實施例4

將4.5g、數(shù)均分子量為10000的端氨基化的聚乙二醇與150mL甲苯在130℃下共沸3h除水，然后減壓抽干剩余的甲苯；將得到的固體溶解于60mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第一溶液；將9.0g的γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐和2.73β-芐基-L-天冬氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐溶解于70mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第二溶液；在氮氣氛圍中，將所述第一溶液與第二溶液混合，在35℃、氮氣保護條件下攪拌反應(yīng)125h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽干N,N-二甲基甲酰胺，然后將得到的固體溶解于氯仿中，再用乙醚進行沉降，抽濾，干燥后，得到聚乙二醇單甲醚-聚氨基酸酯嵌段聚合物。得到未脫保護的聚合物材料1。將上述所得材料溶解于90mL的二氯乙酸中，30℃使材料完全溶解，然后加入30mL的HBr溶液，30℃反應(yīng)1.0小時，將該溶液加入到乙醚中沉降，得到固體用DMF溶解，并用冰乙醚二次沉降，并真空干燥；粗產(chǎn)物用DMF溶解，蒸餾水透析3天，凍干，得到聚乙二醇單甲醚-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-L-天冬氨酸)10.11g。

對得到的共聚物進行核磁共振分析，結(jié)果表明，本發(fā)明實施例3所制備聚合物包含88.3個L-谷氨酸乙酯單元和16.0個L-天冬氨酸單元。

實施例5

將1.0g、數(shù)均分子量為5000的端氨基化的聚乙二醇單甲醚與20mL甲苯在130℃下共沸2h除水，然后減壓抽干剩余的甲苯；將得到的固體溶解于20mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第一溶液；將1.0g的γ-乙基-L-谷氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐和1.2gβ-芐基-L-天冬氨酸酯-N-羧酸內(nèi)酸酐溶解于20mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，得到第二溶液；在氮氣氛圍中，將所述第一溶液與第二溶液混合，在30℃、氮氣保護條件下攪拌反應(yīng)90h；反應(yīng)結(jié)束后，減壓抽干N,N-二甲基甲酰胺，然后將得到的固體溶解于氯仿中，再用乙醚進行沉降，抽濾，干燥后，得到聚乙二醇單甲醚-聚氨基酸酯嵌段聚合物。得到未脫保護的聚合物材料1。將上述所得材料1溶解于20mL的二氯乙酸中，30℃使材料完全溶解，然后加入30mL的HBr溶液，30℃反應(yīng)1.0小時，將該溶液加入到乙醚中沉降，得到固體用DMF溶解，并用冰乙醚二次沉降，并真空干燥；粗產(chǎn)物用DMF溶解，蒸餾水透析3天，凍干，得到聚乙二醇單甲醚-聚(γ-乙基-L-谷氨酸酯-L-天冬氨酸)聚合物1.86g。

對得到的共聚物進行核磁共振分析，結(jié)果表明，本發(fā)明實施例4所制備聚合物包含16.0個L-谷氨酸乙酯單元和15.2個L-天冬氨酸單元。

實施例6

將本發(fā)明實施例1制備的嵌段聚合物配制成質(zhì)量濃度為10％、12％、14％，含1g/L的順鉑藥物的PB溶液，并通過機械攪拌在冰浴條件下攪拌24小時以上，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

采用小管倒置法觀察其在5℃～60℃的粘度變化，以小管倒置時，30s內(nèi)不發(fā)生流動為凝膠化判斷標準。每個溫度下平衡10分鐘，升溫速率為2℃/min。

圖3為本發(fā)明實施例1得到的不同濃度的順鉑配合物溶液隨溫度變化的相圖。由圖可知，該順鉑配合物的溶液在溫度升高時可以形成水凝膠；該順鉑配合物溶液形成凝膠的溫度可以控制在人體體溫附近，有利于其作為可注射凝膠藥物制劑的進一步應(yīng)用。

實施例7

將本發(fā)明實施例2制備的嵌段聚合物及0.8g順鉑配制成質(zhì)量濃度為8％的水溶液，并通過機械攪拌在冰浴條件下攪拌24小時以上，在35℃水浴中靜置10分鐘，冷卻至室溫，通過液氮速凍法將凝膠快速冷凍；凍干后進行掃描電鏡測試，獲得凝膠微觀形態(tài)照片。從圖4中可見，配合物水凝膠材料具有聯(lián)通的大孔結(jié)構(gòu)，這有利于藥物從凝膠材料中的釋放。

實施例8

將本發(fā)明實施例2制備的嵌段聚合物及1.2g順鉑配制成質(zhì)量濃度為1mg/mL,聚合物濃度為8％的水溶液，并通過機械攪拌在冰浴條件下攪拌48小時以上。將上述溶液300μL置于旋轉(zhuǎn)流變儀上，通過變?yōu)闇y試模量的變化。如圖5可見，圖5為本發(fā)明實施例8獲得順鉑配合物水凝膠的流變學研究結(jié)果；由圖可以看出，配合物水溶液隨著溫度的升高逐漸發(fā)生凝膠化的轉(zhuǎn)變，在37℃時，其儲存模量在220Pa以上，

這對于藥物傳輸來說已經(jīng)足夠，而較低的強度不會對周圍組織造成壓迫，這更有利于該凝膠制劑的進一步應(yīng)用。

實施例9

將本發(fā)明實施例2制備的嵌段聚合物及順鉑配制成不同順鉑濃度的聚合物濃度為8％的水溶液，并通過機械攪拌在冰浴條件下攪拌48小時以上。以HeLa細胞系為研究對象，將2萬/孔細胞種于24孔板中，培養(yǎng)過夜。如圖6所示，圖6為實施例9獲得順鉑配合物水凝膠的細胞MTT實驗結(jié)果。以純順鉑藥物(圖6a)、實施例2獲得順鉑配合物凝膠(圖6b)、獲得實施例3的載順鉑水凝膠(圖6c)為實驗組，進行細胞毒性研究。通過實驗結(jié)果可見，通過實施例2所獲得的載藥水凝膠毒性較低，具有最大IC50值，這說明藥物與羧基的作用減緩了藥物的釋放，表現(xiàn)出緩釋的行為。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。