【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及多酚提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種降血糖龍眼核多酚提取方法。

背景技術(shù)：

龍眼，為無患子科植物龍眼的果實，性溫味甘，益心脾，補氣血，具有良好有滋養(yǎng)補益作用，可用于心脾虛損氣血不足所致的失眠健忘驚悸眩暈等癥，中國為世界龍眼生產(chǎn)大國，主產(chǎn)于廣東廣西福建四川等地種植面積超過，龍眼肉產(chǎn)量在萬噸以上。龍眼核為龍眼的種仁，直徑0.8-1.2cm，表皮紅褐色，有光澤，一端有長橢圓形灰白色種臍，質(zhì)堅硬。氣味微淡而微苦。龍眼核的質(zhì)量占龍眼果實質(zhì)量的17％左右。由于沒有進(jìn)行綜合利用，每年廢棄的龍眼核質(zhì)量達(dá)幾十萬噸。

龍眼除了龍眼果肉具有很高的營養(yǎng)價值外，其種子也有顯著功效。龍眼核含有豐富的淀粉、還原糖、粗纖維、蛋白質(zhì)、果膠、多酚等天然產(chǎn)物，同時還含有多種礦物元素、維生素以及人體必須氨基酸等營養(yǎng)素。其中淀粉含量為60.88％，還原糖含量為9.67％，粗纖維含量為6.85％，蛋白質(zhì)含量為5.58％，果膠含量為5.19％，多酚含量為4.72％，脂肪含量為3.23％。而其中的多酚又被稱為“第七類營養(yǎng)素”，多酚即多羥基苯，如苯二酚、苯三酚等，是植物及微生物中產(chǎn)生的酚類次生代謝產(chǎn)物，具有抗氧化、抗凝血、與金屬離子的絡(luò)合等特性。多酚作為天然抗氧化劑，具有抗衰老、抗輻射、清體自由基等功能，對心腦血管疾病的防治，如冠心病、動脈粥樣硬化、腦血栓等方面具有良好功效。對龍眼深加工的廢棄物龍眼核的開發(fā)利用，已成為近幾年兩廣、福建等龍眼主要產(chǎn)地的食品、農(nóng)產(chǎn)品加工方向的一個研究熱點。而現(xiàn)階段對于龍眼核多酚提取及純化工藝研究，仍未見有具有實際生產(chǎn)意義的工藝方法的報道，這主要是由于目前絕大多數(shù)的研究其目的只是為了進(jìn)行物質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物活性分析，所述規(guī)模仍只停留在實驗室階段，并且設(shè)備投入、生產(chǎn)成本偏高，工藝復(fù)雜，引入的添加、雜質(zhì)成分較多，成品的純度和活性也有待進(jìn)一步的提高。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

鑒于以上內(nèi)容，有必要提供一種降血糖龍眼核多酚提取方法，以充分利用龍眼核的營養(yǎng)保健價值。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種降血糖龍眼核多酚提取方法，包括以下步驟：

(1)龍眼核洗凈烘干；

(2)將烘干后的龍眼核粉碎，得到龍眼核粉；

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到初級酶解物；

(4)將初級酶解物加入纖維素酶進(jìn)行酶解，得到酶解物；

(5)將酶解物中加入硫酸鈉溶液，攪拌均勻后經(jīng)微波提取工藝提取得到浸出液；

(6)將浸出液減壓過濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；

(7)將龍眼核多酚粗提物加水配成溶液，流過大孔樹脂進(jìn)行吸附；

(8)將吸附后的樹脂過濾，用35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。

進(jìn)一步的，所述龍眼核烘干使龍眼核最終失水率達(dá)25％-32％，所述烘干溫度為45-55℃，烘干時間為15-30h。

進(jìn)一步的，所述龍眼核粉碎成30-40目。

進(jìn)一步的，所述步驟3)中按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化30-60分鐘。

進(jìn)一步的，所述步驟4)中按初級酶解物的0.3％加入1200u纖維素酶，在ph4.5、溫度40℃下酶解3h。

進(jìn)一步的，所述步驟5)中加入20％-40％的硫酸鈉溶液，所述微波提取工藝為在3300mhz微波頻率，在500w-1000w的微波功率下，輔助提取20-180秒。

進(jìn)一步的，所述微波提取工藝為每隔10-15s微波功率依次設(shè)置為600w、700w、800w、700w、600w、700w、800w。

進(jìn)一步的，所述微波提取工藝為每隔15-20s微波功率依次設(shè)置為700w、800w、700w、800w。

進(jìn)一步的，所述步驟7)將所述多酚粗提物加水配成20mg/ml的溶液，流過大孔樹脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃。

進(jìn)一步的，所述步驟8)的大孔樹脂類型為d-101。

本發(fā)明從龍眼核提取多酚的方法，為經(jīng)過多次試驗后得到的優(yōu)選試驗參數(shù)，每個步驟均可有效提高龍眼核多酚的提取率及純度。

本發(fā)明先利用烘干技術(shù)合理控制龍眼核水分，降低龍眼核內(nèi)多酚氧化酶活性，在下一步酶解過程中減少多酚的損失。使用淀粉酶及纖維素酶分別酶解龍眼核，使龍眼核多酚更易析出利于下一步多酚的提取。使用硫酸鈉溶液作為浸出液，可以更有效的提取龍眼核降血糖有效活性成分。

當(dāng)微波在3300mhz微波頻率，在500w-1000w的微波功率下對龍眼核細(xì)胞壁破壞力最佳，使得龍眼核中的多酚溶出并擴散，如果繼續(xù)加大功率，則會破壞多酚性質(zhì)，導(dǎo)致提取率降低。更佳的當(dāng)微波功率呈波浪形循環(huán)時，龍眼核細(xì)胞在一高一低兩個功率循環(huán)震蕩下，可最大限度使多酚析出，提高提取率。

經(jīng)過多次試驗驗證經(jīng)多次實驗驗證，大孔樹脂類型為d-101吸附率和解析率均較高，對于龍眼核降血糖有效活性成分吸收效果最佳。使用35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫率較高達(dá)到93.7％。

【具體實施方式】

實施例1

(1)龍眼核洗凈，在溫度為45℃下進(jìn)行15h烘干，使龍眼核最終失水率達(dá)25％；

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成30目，得到龍眼核粉；

(3)按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化30分鐘，得到初級酶解物；

(4)將初級酶解物加入纖維素酶進(jìn)行酶解，按初級酶解物的0.3％加入1200u纖維素酶，在ph4.5、溫度40℃下酶解3h，得到酶解物；

(5)將酶解物中加入20％的硫酸鈉溶液，攪拌均勻后在微波頻率為3300mhz，每隔10s將微波功率依次設(shè)置為600w、700w、800w、700w、600w、700w、800w。

(6)將浸出液減壓過濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；

(7)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過型號為d-101大孔樹脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(8)將吸附后的樹脂過濾，用35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。

實施例2

(1)龍眼核洗凈，在溫度為55℃下進(jìn)行30h烘干，使龍眼核最終失水率達(dá)32％；

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成40目，得到龍眼核粉；

(3)按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化60分鐘，得到初級酶解物；

(4)將初級酶解物加入纖維素酶進(jìn)行酶解，按初級酶解物的0.3％加入1200u纖維素酶，在ph4.5、溫度40℃下酶解3h，得到酶解物；

(5)將酶解物中加入40％的硫酸鈉溶液，攪拌均勻后在微波頻率為3300mhz，每隔20s將微波功率依次設(shè)置為700w、800w、700w、800w。

(6)將浸出液減壓過濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；

(7)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過型號為d-101大孔樹脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(8)將吸附后的樹脂過濾，用35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。

實施例3

(1)龍眼核洗凈，在溫度為47℃下進(jìn)行22h烘干，使龍眼核最終失水率達(dá)30％；

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成35目，得到龍眼核粉；

(3)按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化45分鐘，得到初級酶解物；

(4)將初級酶解物加入纖維素酶進(jìn)行酶解，按初級酶解物的0.3％加入1200u纖維素酶，在ph4.5、溫度40℃下酶解3h，得到酶解物；

(5)將酶解物中加入30％的硫酸鈉溶液，攪拌均勻后在微波頻率為3300mhz，每隔12s微波功率依次設(shè)置為500w、600w、700w、600w、500w、600w、700w。

(6)將浸出液減壓過濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；

(7)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過型號為d-101大孔樹脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(8)將吸附后的樹脂過濾，用35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。

實施例4

(1)龍眼核洗凈，在溫度為46℃下進(jìn)行17h烘干，使龍眼核最終失水率達(dá)29％；

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成33目，得到龍眼核粉；

(3)按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化45分鐘，得到初級酶解物；

(4)將初級酶解物加入纖維素酶進(jìn)行酶解，按初級酶解物的0.3％加入1200u纖維素酶，在ph4.5、溫度40℃下酶解3h，得到酶解物；

(5)將酶解物中加入30％的硫酸鈉溶液，攪拌均勻后在微波頻率為3300mhz，每隔12s微波功率依次設(shè)置為700w、800w、900w、1000w、900w、800w、700w、800w、900w、1000w。

(6)將浸出液減壓過濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；

(7)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過型號為d-101大孔樹脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(8)將吸附后的樹脂過濾，用35％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。

以上所述，僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，故不能依此限定本發(fā)明實施的范圍，即依本發(fā)明專利范圍及說明書內(nèi)容所作的等效變化與修飾，皆應(yīng)仍屬本發(fā)明涵蓋的范圍內(nèi)。