本發(fā)明涉及一種促進棕色脂肪組織生成，治療肥胖的中藥組合物及其制備方法。
背景技術：
肥胖是指人體脂肪組織過度蓄積導致機體正常生理功能不同程度損害的一種病理狀態(tài)。其病因復雜，認為與環(huán)境、遺傳、生理、代謝、行為及心理等諸多因素有關，通常以體重指數(shù)(body mass index，BMI)來確診肥胖。肥胖嚴重影響人類的身心健康，是許多2型糖尿病等代謝性疾病、心腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病以及惡性腫瘤等慢性非傳染性疾病的危險因素，被世界衛(wèi)生組織認定為影響健康的主要危險因素之一。隨著全球經濟飛速發(fā)展以及生活方式的變化，世界肥胖問題日益嚴重。全球目前有超過15億的超重和肥胖人口，預計到2030年超重人群將增加到21.6億，肥胖人群將增加到11.2億。因此，肥胖相關并發(fā)癥的發(fā)病率及病死率將不斷增加，肥胖的防治日趨嚴峻，如何安全有效地治療肥胖成為迫切需要解決的問題。
目前，肥胖的治療主要包括改變生活方式、手術治療和藥物治療3種方法:(1)改變生活方式，包括飲食療法和參加有氧運動，但生活方式的干預往往讓人難以堅持，大多只能取得短暫的成功；(2)手術治療，主要包括Bariatric手術、去脂整形術和胃內水球療法，雖然手術是目前最有效的治療方法，但其存在很大的風險；(3)目前可選的減肥藥物非常有限，如化學藥物利莫那班(rimonabant)和西布曲明(sibutramine)已退出歐洲聯(lián)盟的市場。因此，目前可用于減肥的有效措施非常少，迫切需要有新的減肥方法出現(xiàn)。
哺乳動物體內主要存在2種類型的脂肪組織，即白色脂肪組織(white adipose tissue，WAT)和棕色脂肪組織(brown adipose tissue，BAT)。其中，白色脂肪組織占正常健康成人體質量的10％，主要功能是儲存脂肪以作為人體能源庫和皮下隔熱墊；棕色脂肪負責分解引發(fā)肥胖的白色脂肪，將白色脂肪轉化成二氧化碳、水和熱量,它可以加快人體新陳代謝，促進白色脂肪消耗，防止肥胖的發(fā)生。棕色脂肪組織產生熱量主要依賴于解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)的活化，UCP1是特異性存在于棕色脂肪細胞中的一種線粒體蛋白，能將線粒體氧化磷酸化脫偶聯(lián)后，代謝脂肪酸，產生能量，這對機體維持體溫非常重要。有關嚙齒類動物的實驗研究發(fā)現(xiàn)，誘導白色脂肪組織向棕色脂肪組織轉化(白色脂肪組織“棕色化”)可以減輕該動物體質量、提高該動物機體的血糖穩(wěn)態(tài)。另有研究表明，在超重和肥胖人群中棕色脂肪組織的數(shù)量明顯減少，棕色脂肪組織的數(shù)量與BMI、脂肪含量呈反比，棕色脂肪組織確實存在于成人體內并發(fā)揮作用，并且肥胖的發(fā)生也與棕色脂肪組織數(shù)量的減少有著密切聯(lián)系。棕色脂肪組織的存在及生理功能提示了一種控制肥胖癥的新策略。通過調控棕色脂肪的分化通路，使棕色脂肪增加或促使白色脂肪向棕色脂肪轉化可能成為治療肥胖的有效方法，已成為肥胖研究的熱點。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種促進棕色脂肪組織生成并提高其功能以預防和治療肥胖的中藥組合物及其制備方法。
所述的中藥組合物按重量份計，由以下原料制成：沙棘3～50份、山銀花3～30份、薤白3～50份、牡蠣10～50份、郁李仁3～30份、雞內金10～30份、酸棗仁3～30份、丁香3～30份、昆布3～30份、榧子3～20份、代代花3～10份、干蘆根3～30份、覆盆子3～20重份、黃芥子3～20份、青果3～30份、菊苣3～20份。
優(yōu)選配比為：沙棘20份、山銀花20份、薤白20份、牡蠣15份、郁李仁15份、雞內金15份、酸棗仁15份、丁香15份、昆布15份、榧子10份、代代花10份、干蘆根10份、覆盆子10份、黃芥子10份、青果10份、菊苣5份。
所述的中藥組合物可用于防治肥胖癥的藥物、保健品或食品中。
所述的中藥組合物的制備方法包括以下步驟：
(1)取所述原料粉碎，混勻，得混合物；
(2)所述混合物用5～100％的乙醇提取1～3次，料液比為3～30，每次提取0.5～3小時，提取液濾過后合并；
(3)將合并的提取液濃縮成原料含量0.5～3g/ml的浸膏，加上食品或藥學上常用的輔料或輔助性成分，浸膏烘干，粉碎，制成食品或適合于口服的制劑形式。
本發(fā)明的組合物可制成果凍、茶劑、飲料、沖劑、膠囊、顆粒、咀嚼片、片劑或口服液體制劑。也可作為食物的輔料或佐料等添加到食物中從而達到減肥效果。
經過大量的藥理學研究證明本發(fā)明組合物能促進棕色脂肪組織生成、提高棕色脂肪組織UCP1蛋白的表達以增強肥胖模型小鼠棕色脂肪組織分解白色脂肪組織和產熱功能，可明顯抑制肥胖模型小鼠的體重異常增長，可用于制備促進棕色脂肪組織生成、增強棕色脂肪組織功能以預防和治療肥胖的食品、保健食品或藥物，用于臨床中肥胖的預防和治療。原料均為既是食品又是中藥材的物質，具有安全易得、制備方法簡單和價格低廉等優(yōu)點。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的說明。
各實施例中所涉及的固體混合物中之固體，液體中之液體，以及液體中之固體的百分比分別是以wt/wt、vol/vol、wt/vol計算，除非另有說明。
實施例1：本發(fā)明中藥組合物的制備方法1
取沙棘20g、山銀花20g、薤白20g、牡蠣15g、郁李仁15g、雞內金15g、酸棗仁15g、丁香15g、昆布15g、榧子10g、代代花10g、干蘆根10g、覆盆子10g、黃芥子10g、青果10g、菊苣5g，經初步剪碎后，再用粉碎機粉碎，混勻。將混勻的組合物藥材用15倍量的50％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，第二次加入10倍量的50％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，將兩次提取液合并，濃縮成原料含量2g/ml的浸膏，浸膏烘干，粉碎。
實施例2：本發(fā)明中藥組合物的制備方法2
取沙棘10g、山銀花10g、薤白10g、牡蠣5g、郁李仁5g、雞內金5g、酸棗仁5g、丁香5g、昆布10g、榧子5g、代代花5g、干蘆根10g、覆盆子10g、黃芥子3g、青果10g、菊苣5g，經初步剪碎后，再用粉碎機粉碎，混勻。將混勻的組合物藥材用15倍量的30％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，第二次加入10倍量的30％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，將兩次提取液合并，濃縮成原料含量1.5g/ml的浸膏，加入食品添加劑，兌入適量純凈水中，即得本發(fā)明中藥組合物的飲料。
實施例3：本發(fā)明中藥組合物的制備方法3
取沙棘20g、山銀花20g、薤白10g、牡蠣10g、郁李仁10g、雞內金10g、酸棗仁15g、丁香10g、昆布10g、榧子10g、代代花5g、干蘆根15g、覆盆子10g、黃芥子5g、青果10g、菊苣20g，經初步剪碎后，再用粉碎機粉碎，混勻。將混勻的組合物藥材用15倍量的60％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，第二次加入10倍量的40％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，將兩次提取液合并，濃縮成原料含量2g/ml的浸膏，加入適量淀粉，干燥，粉碎，加入適量微晶纖維素，混合均勻，制備成本發(fā)明中藥組合物的膠囊劑。
實施例4：本發(fā)明中藥組合物對肥胖模型小鼠的體重、棕色脂肪生成及其UCP1蛋白表達的影響
1、實驗動物：
4-5周齡C57BL/6J雄性小鼠，SPF級，平均體質量(14.9±0.8)g，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK(粵)2013-0002。
2、實驗方法：
2.1本發(fā)明中藥組合物的制備
取沙棘200g、山銀花200g、薤白200g、牡蠣150g、郁李仁150g、雞內金150g、酸棗仁150g、丁香150g、昆布150g、榧子100g、代代花100g、干蘆根100g、覆盆子100g、黃芥子100g、青果100g、菊苣50g，經初步剪碎后，再用粉碎機粉碎，混勻。將混勻的組合物藥材用15倍量的50％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，第二次加入10倍量的50％的乙醇提取1小時，過濾收集提取液，將兩次提取液合并，濃縮成浸膏，供本藥理研究使用。
2.2動物模型建立及分組
將60只小鼠隨機分為正常對照組(n＝10)和肥胖造模組(n＝60)，正常對照組以普通飼料喂養(yǎng)，肥胖造模組喂飼高脂飼料(含基礎飼料79％、豬油10％、蛋黃粉10％、膽固醇1％)。喂飼10周后，選擇體質量高于正常對照組小鼠平均體質量20％的個體為肥胖模型動物。本實驗成功誘導肥胖模型小鼠46只(成功率為76.7％)，將肥胖模型小鼠按照隨機數(shù)字表法分為肥胖模型對照組(12只)、本發(fā)明組合物低劑量組(12只)、本發(fā)明組合物中劑量組(12只)、本發(fā)明組合物高劑量組(10只)。除正常對照組喂飼普通飼料外，其他各組繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料，同時，本發(fā)明組合物低劑量組、本發(fā)明組合物中劑量組、本發(fā)明組合物高劑量組分別按0.1ml/10g灌胃給予濃度為0.7g生藥/ml、1.4g生藥/ml、2.8g生藥/ml的本發(fā)明組合物混懸液，正常對照組和肥胖模型對照組灌胃給予等體積蒸餾水，1次/天，連續(xù)6周。
2.3指標監(jiān)測
最后一次給藥后，動物禁食不禁水過夜，于第2天清晨進行空腹體質量稱量并記錄，隨后將動物麻醉，斷頭處死，迅速取肩胛間區(qū)棕色脂肪組織，除去附著的肌肉及白色脂肪組織，稱重并記錄。隨后，將取出的棕色脂肪組織于10％福爾馬林溶液中固定，按免疫組化染色試劑盒說明書采用ABC法進行免疫組織化學染色。將染色的切片于200倍顯微鏡下觀察，每張切片隨機攝取10個視野，用Image-Pro Plus 6.0軟件分析UCP1陽性表達的光密度值(IOD)。
3、實驗結果：
由表1可見，與正常對照組比較，肥胖模型對照組小鼠的體質量顯著增加(P<0.01)，棕色脂肪重量明顯減少(P<0.05)，棕色脂肪重量/體重顯著降低(P<0.01)，UCP1蛋白表達明顯減少(P<0.01)。提示該高脂飼料喂養(yǎng)所致的肥胖模型小鼠的體質量異常增長、棕色脂肪組織生成減少、棕色脂肪組織的分解和產熱功能減弱。與肥胖模型組比較，本發(fā)明組合物低、中、高劑量組小鼠的體質量顯著降低(P<0.05或0.01)，棕色脂肪重量顯著增加(P<0.05或0.01)，棕色脂肪重量/體重顯著(P<0.05或0.01)，UCP1蛋白表達明顯增加(P<0.05或0.01)。提示本發(fā)明組合物可以促進肥胖模型小鼠棕色脂肪的生成，提高棕色脂肪組織UCP1蛋白的表達以增強肥胖模型小鼠棕色脂肪組織分解白色脂肪組織和產熱功能，明顯抑制肥胖模型小鼠的體重異常增長。
表1本發(fā)明組合物對小鼠體質量、棕色脂肪組織重量及UCP1蛋白表達的影響
注：與正常對照組比較：##P＜0.01；與模型對照組比較：*P＜0.05 **P＜0.01
根據中醫(yī)組方理論，在本發(fā)明組方基礎上進行變化，具有同樣或類似作用的組合物均屬本發(fā)明所保護范圍。