本發(fā)明涉及一種川射干總黃酮苷元提取物，屬藥物領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

川射干為鳶尾科植物鳶尾iristectorummaxim.的干燥根莖，為藥典收載品種，具有清熱解毒，祛痰，利咽。用于熱毒痰火郁結(jié)，咽喉腫痛，痰涎壅盛，咳嗽氣喘，其主要藥效成分為其中的異黃酮成分。近年來(lái)，有報(bào)道川射干中異黃酮有抗病毒作用，如申請(qǐng)?zhí)枮?0051002635.9的專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了川射干總黃酮提取物在細(xì)胞水平下具有抗病毒的作用，并具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛、止咳等作用。以川射干總黃酮提取物制備的川射干黃酮膠囊已獲新藥證書(shū)(國(guó)藥證字z20140006)，功能主治為清熱解毒，消腫利咽。用于治療輕中度急性單純性咽炎及輕度急性單純性喉炎所致的咽喉腫痛、聲音嘶啞、咳嗽等。川射干總黃酮提取物為川射干經(jīng)乙醇提取，上d101大孔吸附樹(shù)脂，乙醇洗脫而得到的川射干總黃酮部分，其總黃酮含量以射干苷(c22h22o11)計(jì)為55.0～65.0％，射干苷含量以干燥品計(jì)算，含射干苷(c22h22o11)不得少于20％。

射干苷元為射干苷的苷元，比射干苷更具廣泛的藥理作用?，F(xiàn)代藥理研究表明，射干苷元具有清除自由基、抗脂質(zhì)過(guò)氧化損傷和降低血脂、防治動(dòng)脈粥樣硬化以及防治血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷作用，亦有對(duì)心肌梗死小鼠心肌有保護(hù)作用，還有抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、雌激素樣作用等。

文獻(xiàn)“川射干總異黃酮苷元有效部位的制備工藝研究”中對(duì)川射干的總黃酮苷元制備方法作了一些研究，其中基本流程為：取川射干飲片，加水20倍(第一次22倍)水煮提取3次，每次1h，合并濾液作為樹(shù)脂上柱液。采用ab-8大孔吸附樹(shù)脂富集總異黃酮，上柱吸附后依次用30％、40％、95％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，合并30％、40％的乙醇洗脫液，調(diào)整乙醇濃度為40％，加濃鹽酸成2％鹽酸溶液，水浴回流水解10～12h，回收乙醇，上ab-8大孔吸附樹(shù)脂除酸，其水解物與95％乙醇苷元洗脫物合并，回收乙醇，濃縮，減壓真空干燥，即得。按上述的生產(chǎn)工藝制備川射干總異黃酮有效部位，各樣品經(jīng)tlc色譜鑒定，各樣品均以苷元為主，僅40％乙醇洗脫物回收乙醇后的析出物中含有的苷稍多，但由于其總量并不大，因此不影響總異黃酮苷元的含量。其產(chǎn)品得率為3.59％，且本工藝最終所得產(chǎn)品不易干燥。其產(chǎn)品并非總黃酮苷元(還含有苷)，產(chǎn)品收率低(最大原因是飲片水煮，未提盡射干苷等成分)，產(chǎn)品不易干燥，且工藝非常復(fù)雜。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種川射干總黃酮苷元提取物。本發(fā)明的另一技術(shù)方案是提供了該提取物的制備方法和用途。

本發(fā)明提供了一種川射干總黃酮苷元提取物，總黃酮苷元含量>50％w/w，射干苷元含量>18％w/w；其中射干苷的含量不超過(guò)2％w/w。

進(jìn)一步優(yōu)選，所述的總黃酮苷元含量>60％w/w，射干苷元含量>25％w/w。

其中，提取物中含有射干苷元、鳶尾甲黃素b、鳶尾甲黃素a，其重量比為：射干苷元:鳶尾甲黃素b:鳶尾甲黃素a為10:0.8～1.2:1.6～2.5。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的射干苷元、鳶尾甲黃素b、鳶尾甲黃素a的重量比為：10:1:2。

本發(fā)明還提供了一種制備所述的提取物的制備工藝，它包括下述步驟：

a、取川射干原生藥粗粉，在強(qiáng)酸ph<1條件下，通過(guò)自然發(fā)酵或加熱水解得到總黃酮苷元；

b、將a步驟制備的總黃酮苷元加入稀醇，醇濃度<50％；沉淀析出，即得本發(fā)明的川射干總黃酮苷元提取物。

本發(fā)明還提供了所述的提取物的制備工藝，它包括如下步驟：

a、取川射干原生藥粗粉用50～80％乙醇提取，提取物進(jìn)行酸水解；

b、將水解后的提取物溶于熱的50％乙醇，冷卻后析出總黃酮苷元沉淀，即得本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物。

本發(fā)明還提供了所述的提取物的制備工藝，它包括如下步驟：

a、取川射干原生藥粗粉用50～80％乙醇提取，提取物進(jìn)行酸水解；酸水解的ph值<1；

b、水解液上d101大孔吸附樹(shù)脂柱或聚酰胺樹(shù)脂柱，通過(guò)柱層析吸附川射干總黃酮苷元，然后乙醇洗脫得到總黃酮苷元提取物。

本發(fā)明還提供了所述的提取物的制備工藝，它包括如下步驟：

a、將川射干原生藥粗粉用50～80％乙醇提取，提取液上d101大孔吸附樹(shù)脂柱或聚酰胺樹(shù)脂柱，通過(guò)柱層析吸附川射干總黃酮成分，然后乙醇洗脫得到總黃酮提取物；

b、提取物用含5％鹽酸的50％乙醇酸水解，放置析出川射干總黃酮苷元，過(guò)濾，水洗至中性，干燥，得總黃酮苷元提取物。

本發(fā)明還提供了所述的提取物的制備工藝，它包括如下步驟：

a、將川射干總黃酮提取物用含5％hcl的50％乙醇進(jìn)行酸水解，水解液放冷后析出川射干總黃酮苷元，過(guò)濾，水洗至中性，干燥，得總黃酮苷元提取物。

本發(fā)明還提供了川射干總黃酮苷元提取物在制備抗炎、鎮(zhèn)痛的藥物中的用途。

本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物制備工藝簡(jiǎn)單，制備的苷元提取物純度高，藥效試驗(yàn)證明，本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物有明顯抗炎、鎮(zhèn)痛作用，效果優(yōu)于川射干總黃酮提取物。

附圖說(shuō)明

圖1本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物紫外圖

圖2川射干總黃酮苷元提取物色譜圖

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，加入5％hcl水溶液10l，拌勻，密封，室溫放置15天，置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，用95％乙醇40l加熱回流提取2次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至10l，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性。沉淀加熱回流溶于5l95％乙醇中，沖入5l沸水中，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率6％，射干苷元含量20.56％，總黃酮苷元含量51.42％。

實(shí)施例2本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，加入5％hcl水溶液10l，拌勻，密封，45℃條件下放置5天，置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，用95％乙醇40l加熱回流提取2次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至10l，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性。沉淀加熱回流溶于5l95％乙醇中，沖入5l沸水中，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率7％，射干苷元含量21.25％，總黃酮苷元含量57.91％。

實(shí)施例3本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，加入5％hcl水溶液40l，加熱回流水解10小時(shí)，過(guò)濾，藥渣用95％乙醇40l加熱回流提取2次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至10l，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性。沉淀加熱回流溶于5l95％乙醇中，沖入5l沸水中，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率7.5％，射干苷元含量22.12％，總黃酮苷元含量53.38％。

實(shí)施例4本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，加入含5％hcl的80％乙醇40l，加熱回流水解6小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至10l，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性。沉淀加熱回流溶于5l95％乙醇中，沖入5l沸水中，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率8％，射干苷元含量22.51％，總黃酮苷元含量54.78％。

實(shí)施例5本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，用50～80％乙醇加熱回流提取3次，每次1.5小時(shí)，每次溶媒用量為40l，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得浸膏。將浸膏置于搪瓷反應(yīng)釜中，用含5％hcl的50％乙醇20l，加熱回流水解6小時(shí)，趁熱過(guò)濾，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率9.5％，射干苷元含量24.34％，總黃酮苷元含量55.12％。

實(shí)施例6本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，用50～80％乙醇加熱回流提取3次，每次1.5小時(shí)，每次溶媒用量為40l，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得浸膏。將浸膏置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，用含5％hcl的50％乙醇20l，加熱回流水解6小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液沖入80l沸水中，攪勻，用1mol/lnaoh水溶液調(diào)節(jié)ph值7～8，待水溶液溫度降至約50℃時(shí)，上已處理好的d101型大孔吸附樹(shù)脂柱(樹(shù)脂用量為15kg)，先用水洗至中性，再用80％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收得浸膏，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率10％，射干苷元含量25.15％，總黃酮苷元含量62.51％。實(shí)施例7本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，用50～80％乙醇加熱回流提取3次，每次1.5小時(shí)，每次溶媒用量為40l，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得浸膏。將浸膏置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，用含5％hcl的50％乙醇20l，加熱回流水解6小時(shí)，趁熱過(guò)濾，濾液沖入80l沸水中，攪勻，用1mol/lnaoh水溶液調(diào)節(jié)ph值7～8，待水溶液溫度降至約50℃時(shí)，上已處理好的聚酰胺樹(shù)脂柱(60～100目，樹(shù)脂用量為15kg)，先用水洗至中性，再用80％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收得浸膏，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率9.5％，射干苷元含量24.78％，總黃酮苷元含量61.56％。實(shí)施例8本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，用50～80％乙醇加熱回流提取3次，每次1.5小時(shí)，每次溶媒用量為40l，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得浸膏。用200l沸水溶解浸膏，待水溶液溫度降至約50℃時(shí)，上已處理好的d101型大孔吸附樹(shù)脂柱(樹(shù)脂用量為30kg)，用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收得浸膏。將浸膏置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，用含5％hcl的50％乙醇20l，加熱回流水解6小時(shí)，趁熱過(guò)濾，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率10.5％，射干苷元含量25.48％，總黃酮苷元含量63.45％。

實(shí)施例9本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干原生藥粗粉10kg，用50～80％乙醇加熱回流提取3次，每次1.5小時(shí)，每次溶媒用量為40l，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得浸膏。用200l沸水溶解浸膏，待水溶液溫度降至約50℃時(shí)，上已處理好的聚酰胺樹(shù)脂柱(60～100目，樹(shù)脂用量為30kg)，用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收得浸膏。將浸膏置于100l搪瓷反應(yīng)釜中，用含5％hcl的50％乙醇20l，加熱回流水解6小時(shí)，趁熱過(guò)濾，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率10％，射干苷元含量25.37％，總黃酮苷元含量62.60％。

實(shí)施例10本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物的制備

取川射干總黃酮提取物1.5kg，用含5％hcl的50％乙醇20l，加熱回流水解6小時(shí)，趁熱過(guò)濾，放置過(guò)夜，析出沉淀，過(guò)濾，水洗至中性，60℃減壓干燥，得棕黃色干燥疏松粉末，即川射干總黃酮苷元提取物，收率55％，射干苷元含量25.57％，總黃酮苷元含量63.17％。

其中，所述的川射干總黃酮提取物的制備方法為：取川射干飲片最粗粉300kg，用4倍于藥材量的70％乙醇加熱回流提取3次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.2(50℃)的浸膏，以20倍于藥材量的沸水溶解浸膏，待其水溫降至約50℃時(shí)，通過(guò)已處理好的d101型大孔吸附樹(shù)脂柱，用水洗滌大孔樹(shù)脂柱至糖檢查為負(fù)反應(yīng)，再用4倍于樹(shù)脂量的80％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液至黃酮檢查為負(fù)反應(yīng)，濾過(guò)，60℃減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.2(50℃)的浸膏，60℃減壓干燥，粉碎，過(guò)60目篩，即得川射干總黃酮(約36～45kg)提取物。

實(shí)施例11各種劑型藥物的制備

1、川射干總黃酮苷元注射液的制備

川射干總黃酮苷元在水中溶解度極小，故不能只用水作為溶媒，應(yīng)添加增溶劑、助溶劑。通過(guò)比較聚乙二醇200、聚乙二醇400、甘油、丙二醇、吐溫80、司盤(pán)等溶媒，優(yōu)選聚乙二醇400作為助溶劑，通過(guò)試驗(yàn)，聚乙二醇400的體積濃度為50％。

注射液：稱(chēng)取川射干總黃酮苷元25g，加入500ml聚乙二醇400，加熱溶解，待溶解完全后加入注射用水至1000ml，用g4垂熔玻沙漏斗過(guò)濾后，濾液以常規(guī)方式封裝于安瓿中(2ml/支)，并按常規(guī)方式作滅菌處理。所得注射液為黃色的澄明液體。

2、川射干總黃酮苷元凍干粉針的制備

川射干總黃酮苷元凍干粉針的制備：應(yīng)優(yōu)選良好的增溶劑、助溶劑及填充劑。通過(guò)比較聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、甘露醇、山梨醇，優(yōu)選甘露醇、山梨醇作為助溶劑和填充劑，甘露醇、山梨醇的重量濃度各為25％。

凍干粉針：稱(chēng)取川射干總黃酮苷元25g、甘露醇12.5g、山梨醇12.5g，加熱溶于注射用水800ml中，待溶解完全后，放冷至室溫，加注射用水至1000ml，用g4垂熔玻沙漏斗過(guò)濾后，濾液以常規(guī)方式分裝于安瓿中，低溫冷凍干燥約26小時(shí)后無(wú)菌熔封即得。

3、口服制劑的制備

包括:片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、滴丸和微丸、各種溶液劑等。

散劑的制備：作為固體口服制劑散劑是各種劑型的基礎(chǔ)，稱(chēng)取川射干總黃酮苷元，粉碎成細(xì)粉(指全部能通過(guò)五號(hào)篩，含有能通過(guò)六號(hào)篩不少于95％的粉末)，過(guò)篩，加入適量輔料如硬脂酸鎂等增加其流動(dòng)性，分裝，即得。

顆粒劑的制備：把藥物與輔料粉碎后進(jìn)行充分的混合，然后加入適當(dāng)?shù)恼澈蟿┻M(jìn)行制粒，干燥，整粒，分裝，即可。

膠囊劑的制備：膠囊劑分為軟膠囊和硬膠囊，硬膠囊是采用藥物的粉末或者是顆粒進(jìn)行裝膠囊制得，軟膠囊是把藥液密封于球形或軟質(zhì)膠囊材料中。采用合適的材料干明膠：甘油：水＝＝1:0.4:1混合均勻，調(diào)配好作為軟膠囊的囊壁，川射干總黃酮苷元加聚乙二醇400和聚乙二醇4000各適量，加熱熔化，攪拌均勻，然后采用滴制法或壓制法制備軟膠囊。另外，可以制成腸溶膠囊。另外，按照常規(guī)制劑的程序，選用不同的輔料如：乙烯-醋酸乙烯共聚物(eva)、聚丙烯等，作為緩控釋可以制成緩釋、控釋的制劑骨架。如將川射干總黃酮苷元制成微囊，然后裝入普通空膠囊中，可以成為按照需要進(jìn)行藥物釋放的產(chǎn)品。

滴丸、含化滴丸、微丸：滴丸的優(yōu)點(diǎn)是發(fā)揮藥效迅速，生物利用度高，副作用小，增加藥物穩(wěn)定性，生產(chǎn)設(shè)備簡(jiǎn)單，操作容易，重量差異小，成本低無(wú)粉塵，根據(jù)需要可以制成內(nèi)服、外用、緩釋、控釋或局部治療等多種類(lèi)型的滴丸劑。取藥物基質(zhì)，如：聚乙二醇類(lèi)、硬脂酸加熱后，將藥物與基質(zhì)混合均勻，置于滴丸機(jī)中保溫，然后滴制到適當(dāng)?shù)睦淠齽┲惺⑼?，洗除冷凝劑干燥整理，?jīng)過(guò)質(zhì)檢后包裝。

片劑：包括普通壓制片、咀嚼片、泡騰片、多層片、緩釋片、控釋片，包衣片(糖衣片、薄膜衣片、腸溶衣片)、分散片、口含片、舌下片等。

川射干總黃酮苷元50g，淀粉、糖粉950g，將以上原輔料進(jìn)行粉碎、過(guò)篩、混合均勻，加入適量的粘合劑形成軟材，過(guò)篩，成為顆粒，干燥整粒，加入崩解劑、潤(rùn)滑劑充分混合，然后壓片，包衣，質(zhì)檢，包裝。

緩釋片控釋片：將川射干總黃酮苷元50g，加入骨架劑聚乙烯、聚丙烯混合均勻，壓片，按照普通的制劑方法，制成緩釋片1000片。藥物緩緩釋放，在藥物釋放完后，骨架隨著糞便排出體外。

口服溶液：稱(chēng)取川射干總黃酮苷元、聚乙二醇400、水、糖精鈉各適量，加熱溶解，過(guò)濾，分裝于10ml口服液瓶中，封蓋，滅菌，即得

4、外用制劑的制備：

包括有：外用散劑、噴霧劑、滴鼻劑、滴耳劑、軟膏劑、搽劑、凝膠劑、栓劑等。

外用散劑的原輔料粉碎成最細(xì)粉(指全部能通過(guò)六號(hào)篩，含有能通過(guò)七號(hào)篩不少于95％的粉末)。

噴霧劑、滴鼻劑、滴耳劑：將川射干總黃酮苷元20g，聚乙二醇400、水各適量，加熱溶解，過(guò)濾，將濾液滅菌后無(wú)菌操作分裝入瓶即可。噴霧劑按常規(guī)制備方法制備。

軟膏劑、搽劑：把川射干總黃酮苷元40g粉碎成最細(xì)粉，采用水溶性基質(zhì)聚乙二醇600和聚乙二醇2000為基質(zhì)960g(配比為4:6)加熱混合均勻后，質(zhì)檢分裝，可以得到有一定稠度的半固體外用制劑。

凝膠劑：把川射干總黃酮苷元40g粉碎，溶解在水中，把水溶性基質(zhì)卡波姆制成水凝膠基質(zhì)，然后與藥物混合加水到1000mi，質(zhì)檢分裝，可以得到透明或半透明的凝膠劑。

栓劑：把川射干總黃酮苷元40g粉碎成最細(xì)粉，采用水溶性基質(zhì)聚乙二醇400和聚乙二醇4000為基質(zhì)960g(配比為4:6)加熱混合均勻后，倒入涂有液體石蠟的模具中，冷卻成型，質(zhì)檢包裝，可以得到符合規(guī)定的融變時(shí)限的固體外用制劑。

實(shí)施例12本發(fā)明川射干總黃酮苷元提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【性狀】本品為棕黃色至棕褐色粉末；氣微辛，味苦。

本品溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷，不溶于水。

【鑒別】(1)取本品約20mg，置于50ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為a液。精密吸取a液1ml于50ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋并定容至刻度搖勻，作為b液。b液照紫外-可見(jiàn)分光光度法(中國(guó)藥典2015版四部0401)，以無(wú)水乙醇為空白，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，記錄光譜圖，在267±2nm波長(zhǎng)處應(yīng)有最大吸收。

(2)取(1)項(xiàng)下的a液，另取射干苷元對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含0.25mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層層析法(中國(guó)藥典2015版四部0502)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠gf254薄層板上，以石油醚(沸程60～90℃)—丙酮(2：1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

【檢查】熾灼殘?jiān)”酒?g，依法檢查(中國(guó)藥典2015版四部0841)，熾灼殘?jiān)坏眠^(guò)2％。

重金屬取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留殘?jiān)?，依法檢查(中國(guó)藥典2015版四部0821)，含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之二十。

射干苷取本品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含10mg的溶液，作為供試品溶液。另取射干苷對(duì)照品適量，加70％乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2015版四部0502)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl,，分別點(diǎn)于同一硅膠gf254薄層板上，以三氯甲烷—甲醇—甲酸(10：1：0.1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，不顯相同顏色的斑點(diǎn)。

【干燥失重】取本品，在105℃干燥至恒重，減少重量不得超過(guò)2％(中國(guó)藥典2015版四部0831)。

【含量測(cè)定】總黃酮苷元

對(duì)照品溶液的制備：精密稱(chēng)定在105℃干燥至恒重的射干苷元對(duì)照品12.5mg，置于50ml容量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得。每1ml含射干苷元0.25mg。

供試品溶液的制備：精密稱(chēng)取105℃干燥至恒重的本品約20mg，置于50ml容量瓶中，加入無(wú)水乙醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得。每1ml含本品0.4mg。

測(cè)定法精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液1ml，分別置于50ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋并定容至刻度，搖勻。按紫外-可見(jiàn)分光光度法(中國(guó)藥典2015版四部0401)，在267nm波長(zhǎng)處，以無(wú)水乙醇為空白，分別測(cè)定對(duì)照品與供試品溶液的吸收度，計(jì)算，即得。

本品按干燥品計(jì)算含總黃酮苷元以射干苷元(c16h12o6)計(jì)算，不得少于50％。見(jiàn)圖1

射干苷元照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0512)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.2mol/l磷酸二氫鈉水溶液(42:58)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm。理論板數(shù)按射干苷元峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000。

對(duì)照品溶液的制備取在105℃干燥至恒重的射干苷元對(duì)照品適量，加70％甲醇制成每1ml含0.025mg的溶液，即得。

供試品溶液的制備取本品約25mg，精密稱(chēng)定，置25ml量瓶中，加無(wú)水乙醇適量，超聲處理(功率250w，頻率50khz)10分鐘，放冷，加入無(wú)水乙醇至刻度，搖勻，精密量取1ml溶液于10ml容量瓶中，加70％的甲醇溶液至刻度，搖勻，即得。

測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

本品按干燥品計(jì)算含射干苷元(c16h12o6)不得少于18％。見(jiàn)圖2，圖2為供試品1(川射干總黃酮苷元提取物)的色譜圖，目的是測(cè)定樣品中射干苷元含量，并未對(duì)鳶尾甲黃素b、鳶尾甲黃素a含量單獨(dú)進(jìn)行測(cè)定(上述專(zhuān)利內(nèi)容中涉及射干苷元、鳶尾甲黃素b、鳶尾甲黃素a三者量的比值是由面積歸一化法，按峰面積計(jì)算得到)。

【貯藏】密封，置干燥陰涼處。

以下通過(guò)具體藥效試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。

試驗(yàn)例1本發(fā)明藥物抗炎作用——對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高的影響

取小鼠80只，隨機(jī)分為8組，分別灌胃本發(fā)明藥物(由實(shí)施例9制備)0.125、0.25、0.5g/kg，川射干黃酮提取物0.25g、0.5、1.0g/kg，醋酸潑尼松0.02g/kg及空白對(duì)照組灌胃等體積的1％西黃蓍膠溶液，以上各組均在給藥1小時(shí)后，分別給每只小鼠尾靜脈iv1％伊文思藍(lán)溶液0.1ml/10g·bow，同時(shí)ip0.5％冰醋酸0.4ml/只，20分鐘后處死動(dòng)物，剪開(kāi)腹部皮膚肌肉，用5ml生理鹽水沖洗腹腔，收集洗脫液，加生理鹽水至10ml。以生理鹽水為空白，在580nm處測(cè)定吸收度，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1本發(fā)明藥物對(duì)小鼠腹腔通透性的影響(n＝10)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：本發(fā)明藥物對(duì)腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高有非常顯著的抑制作用，與對(duì)照組相比較有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.001)，表明本發(fā)明藥物有非常顯著的抑制此種炎癥的作用，其作用比川射干總黃酮提取物強(qiáng)。

試驗(yàn)例2本發(fā)明藥物抗炎作用——對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

取小鼠80只，隨機(jī)分為8組，分別灌胃給本發(fā)明藥物0.125、0.25、0.5g/kg，川射干黃酮提取物0.25g、0.5、1.0g/kg，醋酸潑尼松0.02g/kg及空白對(duì)照組灌胃等體積的1％西黃蓍膠溶液，以上各組均在給藥30分鐘后，每只鼠左耳涂布二甲苯0.05ml致炎劑，隔4小時(shí)后，將小鼠處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm打孔器分別在同一部位打下圓形耳片，稱(chēng)重，以每鼠左耳片減去右耳片重量為腫脹度，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2本發(fā)明藥物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(n＝10)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：本發(fā)明藥物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹有顯著的抑制作用，與對(duì)照組比較有顯著差異(p＜0.01)，表明有顯著的抗炎消腫作用，其作用明顯強(qiáng)于川射干總黃酮提取物。

試?yán)?本發(fā)明藥物抗炎作用——對(duì)角叉菜膠致大鼠腳腫脹的影響

取雄性大鼠80只，隨機(jī)分為8組，測(cè)定每鼠右后足體積作為基數(shù)，分別灌胃給本發(fā)明藥物0.0625、0.125、0.25g/kg，川射干黃酮提取物0.125g、0.25、0.5g/kg，醋酸潑尼松0.02g/kg及等體積生理鹽水，以上各組均在給藥60分鐘后，每只大鼠右后足sc1％角叉菜膠溶液0.2ml，分別于1、2、4、6小時(shí)測(cè)定各大鼠右后足體積1次，計(jì)算鼠足腫脹百分率[(給藥后值-給藥前值)/給藥前值]。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3本發(fā)明藥物對(duì)大鼠腳腫脹的影響(n＝10)

注：*：p＜0.05**：p＜0.01***：p＜0.001與對(duì)照組比較

從表3中可以看出本發(fā)明藥物對(duì)角叉菜膠致大鼠腳腫脹有抑制作用，與對(duì)照組比較有顯著差異(p＜0.01)，表明有顯著的抗炎消腫作用，其作用比川射干總黃酮提取物強(qiáng)。

試?yán)?本發(fā)明藥物抗炎作用——對(duì)小鼠棉球肉芽組織增生的影響

取小鼠80只，隨機(jī)分為8組，在消毒情況下，在每鼠胸部切一小口，將5mg高壓滅菌棉球從切口處植入皮下腋窩部，隨即縫合皮膚。從手術(shù)當(dāng)日開(kāi)始給藥，8個(gè)給藥組分別ig本發(fā)明藥物0.125、0.25、0.5g/kg，川射干黃酮提取物0.25g、0.5、1.0g/kg，醋酸潑尼松0.02g/kg及等體積生理鹽水，每日給藥一次，連續(xù)給藥6天，第7天試驗(yàn)結(jié)束處死動(dòng)物，剝離肉芽組織，用濾紙吸干，放入小瓶中，置干燥箱干燥后稱(chēng)重。所得結(jié)果以埋入前棉球重量為基準(zhǔn)，以實(shí)驗(yàn)結(jié)束后干燥棉球重量的增加來(lái)表示(mg/10g·bw計(jì)算)。結(jié)果如表4。

表4本發(fā)明藥物對(duì)小鼠棉球肉芽腫的影響(n＝10)

注：*：p＜0.05，**：p＜0.01，***：p＜0.001與對(duì)照組比較

從表4中可以看出本發(fā)明藥物對(duì)小鼠棉球肉芽腫有抑制作用，與對(duì)照組比較有顯著差異(p＜0.01)，表明有顯著的抗炎消腫作用，其作用比川射干總黃酮提取物強(qiáng)。

試?yán)?本發(fā)明藥物鎮(zhèn)痛作用——對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)

取雄性大鼠80只，隨機(jī)分為8組，分別灌胃給本發(fā)明藥物0.125、0.25、0.5g/kg，川射干黃酮提取物0.25g、0.5、1.0g/kg，醋酸潑尼松0.02g/kg及等體積生理鹽水，給藥60分鐘后每鼠ip0.5％hac0.2ml/只，記錄10分鐘內(nèi)扭體次數(shù)。將結(jié)果進(jìn)行比較統(tǒng)計(jì)。結(jié)果如表5。

表5本發(fā)明藥物對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用(扭體法，n＝10)

注：*：p＜0.05**：p＜0.01***：p＜0.001(與對(duì)照組相比較)

從表5中可以看出本發(fā)明藥物對(duì)醋酸致小鼠疼痛的扭體次數(shù)有抑制作用，與對(duì)照組比較有顯著差異(p＜0.01)，表明有顯著的鎮(zhèn)痛作用。其作用比川射干總黃酮提取物強(qiáng)。

試?yán)?本發(fā)明藥物鎮(zhèn)痛作用——對(duì)熱板致小鼠疼痛作用

取小鼠80只，隨機(jī)分為8組。分別灌胃給本發(fā)明藥物0.125、0.25、0.5g/kg，川射干黃酮提取物0.25g、0.5、1.0g/kg，醋酸潑尼松0.02g/kg及等體積生理鹽水，給藥30分鐘后將小鼠放入預(yù)先加熱至55℃的金屬板上，記錄自小鼠投入熱板至出現(xiàn)舔后足的反應(yīng)時(shí)間作為痛閾值，結(jié)果見(jiàn)表6

表6本發(fā)明藥物對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法，n＝10)

從表6中可以看出本發(fā)明藥物對(duì)熱板法致小鼠疼痛的痛閾值均有提高與對(duì)照組比較有顯著差異(p＜0.01)，表明有顯著的鎮(zhèn)痛作用，其作用比川射干總黃酮提取物強(qiáng)。