本發(fā)明屬于藥物制劑領域,公開了一種尼莫地平脂質(zhì)納米粒及其制備工藝。
背景技術:
尼莫地平為第二代1,4-二氫吡啶類鈣離子拮抗劑,極難溶于水,脂溶性很強。臨床上主要應用于治療缺血性腦血管疾病、蛛網(wǎng)膜下腔出血引起的腦血管痙攣、突發(fā)性耳聾、偏頭痛等癥。此外,尼莫地平對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的保護作用已有不少的研究報道,如有促進記憶的作用,能用于防治老年性癡呆癥(ad)。
尼莫地平臨床應用廣泛,但其為水難溶性藥物,溶解度小和較強的肝首過作用使其生物利用度很低(僅為2.7%~27.9%),且其生物半衰期(0.5~1.0h)短,需頻繁用藥,不僅使用不方便,而且可使血藥濃度出現(xiàn)“峰谷”現(xiàn)象,引起毒副作用。這些缺陷也使尼莫地平的給藥面臨很多問題,因此提高尼莫地平的溶出度,制備具有較高生物利用度的尼莫地平制劑具有一定的臨床意義。
由于尼莫地平為難溶性藥物,臨床上所用的尼莫地平注射液(商品名為尼膜同)均使用較高濃度的乙醇以增加藥物的溶解度達到藥用濃度,因此導致尼莫地平注射液臨床使用時具有較大的局限性:首先,給藥時需要使用特殊的三通輸液器與葡萄糖或生理鹽水同時滴注;其次,尼莫地平注射液必須以1~2mg/h的速度慢速滴注,否則病人無法耐受其副作用,即10mg藥物所需滴注時間一般需至少5h;再次,尼莫地平注射液在與葡萄糖或生理鹽水混合滴注過程中易出現(xiàn)析晶現(xiàn)象,導致用藥安全性降低且長期使用該制劑會對病人血管產(chǎn)生嚴重的刺激作用并增加靜脈炎癥的風險。
鑒于尼莫地平注射液上述局限性,為使尼莫地平更好地發(fā)揮臨床療效,降低藥物的副作用,將其包載進脂質(zhì)制備成脂質(zhì)納米粒是一種很可行的解決方案。脂質(zhì)納米粒是采用天然或合成的類脂作為載體材料制成的,藥物被包裹或鑲嵌在脂質(zhì)基質(zhì)當中,主要包括固體脂質(zhì)納米粒和納米結構脂質(zhì)載體。納米結構脂質(zhì)載體(nanostructuredlipidcarriers,nlc)是在固體脂質(zhì)納米粒(solidlipidnanoparticles,sln)的基礎上發(fā)展的第二代脂質(zhì)納米粒子,nlc是以一定比例的液態(tài)脂質(zhì)或液態(tài)混合脂質(zhì)代替了sln中的固體脂質(zhì)而制備的新型固體脂質(zhì)納米粒。脂質(zhì)納米粒作為新型給藥系統(tǒng)具有以下優(yōu)點:脂質(zhì)載體材料生物可降解,無生物毒性,具有良好的生物相容性;制備工藝簡單易行,適用于工業(yè)化生產(chǎn);制備過程中不使用有毒聚合物、單體等,無有毒殘留物;藥物釋放可以達到緩釋、控釋目的。
cn1418626a公開的尼莫地平納米脂質(zhì)體制備技術所制備的脂質(zhì)體,盡管有著較好的安全性、生物相容性及跨膜性,但其穩(wěn)定性不是很好,藥物易泄漏,用該方法制備的脂質(zhì)體的粒徑也偏大。cn102552156b公開的尼莫地平固體脂質(zhì)納米粒具有高效、低毒、穩(wěn)定等優(yōu)點,但其含藥量較低,導致給藥劑量和給藥次數(shù)增加,而且產(chǎn)品的制備流程繁復,不利于工業(yè)化生產(chǎn)。cn100486577c公開的尼莫地平脂質(zhì)納米粒組合物具有長效、低毒、穩(wěn)定等優(yōu)點,但僅僅選用磷脂作為載體成分,導致載藥量較低,而且水化時間較長,降低了生產(chǎn)效率。cn103494820a公開的一種尼莫地平納米粒實現(xiàn)了多種藥物的共載,一定程度上提高了尼莫地平的血藥濃度,但高分子材料載體不容易實現(xiàn)擴大生產(chǎn),且容易產(chǎn)生一定的生物毒性。
技術實現(xiàn)要素:
發(fā)明目的:為了克服現(xiàn)有技術的不足,本發(fā)明的目的在于研制和提供一種可以采用工業(yè)化生產(chǎn)的尼莫地平脂質(zhì)納米粒制劑。該制劑粒徑小且可控,分布均一,包封率高,穩(wěn)定性好,控釋和長效地釋放藥物,安全性高,毒副作用小,制備工藝簡單,易實現(xiàn)擴大生產(chǎn)。
技術方案:為了達到上述目的,針對藥物的理化性質(zhì)和生物膜透過性,選擇合適的脂質(zhì)材料和乳化劑,研究固態(tài)脂質(zhì)與液態(tài)脂質(zhì)之間、藥物與脂質(zhì)材料/乳化劑之間的最佳配比和最佳用量,采用合理的方法將藥物包裹于脂質(zhì)核中。
本發(fā)明的技術方案中提供了一種尼莫地平脂質(zhì)納米粒的組分配比:尼莫地平為0.5mg/ml~5mg/ml,固態(tài)脂質(zhì)為0.5%~10%(w/v),液態(tài)脂質(zhì)為0.5%~5%(w/v),固液脂質(zhì)比例為50~100∶0~50,乳化劑為1%~10%(w/v),純水適量。
其中所述固態(tài)脂質(zhì)材料為硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、雙硬脂酸甘油酯、山崳酸甘油酯、棕櫚酸、棕櫚酸甘油酯、十六烷基棕櫚酸酯、鯨蠟醇十六酸酯、三月桂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三油酸甘油酯中的一種或幾種。
其中所述液態(tài)脂質(zhì)材料為油酸、油酸乙酯、中鏈甘油三酯、雙癸酸丙二醇酯、肉豆蔻酸異丙酯、辛酸三甘油酯、辛酸癸酸三甘油酯、辛酸癸酸亞油酸三甘酯中的一種或幾種。
其中所述乳化劑為聚乙二醇15羥基硬脂酸酯、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、聚乙二醇1000維生素e琥珀酸酯、天然大豆卵磷脂、吐溫80、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油中的一種或幾種。
作為優(yōu)選,本發(fā)明的技術方案中提供了一種尼莫地平脂質(zhì)納米粒的組分配比:尼莫地平為0.5mg/ml~5mg/ml,雙硬脂酸甘油酯為0.5%~10%(w/v),雙癸酸丙二醇酯為0.5%~5%(w/v),雙硬脂酸甘油酯:雙癸酸丙二醇酯為50~100∶0~50,吐溫80為1%~10%(w/v),純水適量。
作為進一步優(yōu)選,本發(fā)明的技術方案中提供了一種尼莫地平脂質(zhì)納米粒的組分配比:尼莫地平為2.7mg/ml,雙硬脂酸甘油酯為7%(w/v),雙癸酸丙二醇酯為3%(w/v),雙硬脂酸甘油酯:雙癸酸丙二醇酯為7∶3,吐溫80為4.5%(w/v),純水為30ml。
本發(fā)明技術方案中所述制備方法為乳化蒸發(fā)-高壓均質(zhì)法,具體包括以下步驟:
(1)取處方量的尼莫地平溶于適量有機溶劑,再與處方量的固液混合脂質(zhì)混合,加熱至70~90℃,攪拌至熔融狀態(tài),待有機溶劑完全揮發(fā),形成油相備用;
(2)將處方量的乳化劑溶于適量純水中,加熱至70~90℃,攪拌均勻,形成水相備用;
(3)將熔融態(tài)的油相緩慢滴加至同溫度的水相中,在10000~15000r/min高速下剪切,剪切乳化5~10min,得到初乳;
(4)將初乳迅速轉(zhuǎn)移至用熱水浴預熱過的高壓均質(zhì)機料斗中,在800~1200bar的壓力下乳勻6~10次后,將其室溫冷卻,即得粒徑在50~100nm的尼莫地平脂質(zhì)納米粒。
另一方面,本發(fā)明技術方案中所述的尼莫地平脂質(zhì)納米粒在制備用于治療蛛網(wǎng)膜下腔出血后引發(fā)腦血管痙攣、缺血性神經(jīng)障礙高血壓、偏頭痛等病癥的藥物組合物中的用途。
另一方面,本發(fā)明技術方案中所述的尼莫地平脂質(zhì)納米粒適用于口服給藥、靜脈注射、透皮給藥等多種給藥途徑。
本發(fā)明提供的一種尼莫地平脂質(zhì)納米粒采用具有生理相容性和生物可降解性的脂質(zhì)作為載體材料,且避免了有機溶劑殘留,不會引起細胞毒性問題,具有可靠的安全性;尼莫地平均勻分布在脂質(zhì)納米粒中,通過脂質(zhì)材料的溶蝕緩慢釋放藥物,避免了藥物突釋現(xiàn)象;同時藥物通過脂質(zhì)納米粒包裹,不僅提高了藥物的穩(wěn)定性,而且避免了與血管直接接觸,降低了毒副作用;采用上述方法制得的尼莫地平脂質(zhì)納米粒,活性成分分布均勻,具有良好的均一性,有助于實現(xiàn)藥物的長效和控釋。
附圖說明
圖1為尼莫地平脂質(zhì)納米粒的tem電鏡圖
圖2為尼莫地平脂質(zhì)納米粒的dsc分析圖
圖3為尼莫地平脂質(zhì)納米粒的體外釋放曲線圖
具體實施方式
下面的實施例可以幫助本領域的技術人員更全面地理解本發(fā)明,但不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例1
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒的粒徑為79.8nm,尼莫地平濃度為2.7mg/ml,包封率為90.8%。在tem電鏡下觀察到類球形或球狀納米粒,粒子之間無粘連聚集,粒徑大小與激光粒徑儀測定的結果相一致,如圖1。
實施例2
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的固態(tài)脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為210.7nm,尼莫地平濃度為1mg/ml,包封率為33.8%。
實施例3
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的單硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為120.4nm,尼莫地平濃度為1.8mg/ml,包封率為60.4%。
實施例4
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的單硬脂酸甘油酯與中鏈甘油三酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為140.8nm,尼莫地平濃度為1.2mg/ml,包封率為40.3%。
實施例5
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為76.6nm,尼莫地平濃度為1.8mg/ml,包封率為89.8%。
實施例6
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為68.9nm,尼莫地平濃度為1.6mg/ml,包封率為53.4%。
實施例7
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為93.2nm,尼莫地平濃度為2.2mg/ml,包封率為73.3%。
實施例8
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為88.7nm,尼莫地平濃度為2.4mg/ml,包封率為80.1%。
實施例9
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于70℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在70℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在70℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為99.8nm,尼莫地平濃度為2.1mg/ml,包封率為70.0%。
實施例10
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時在12000rpm高速下剪切5min形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒的粒徑為120.4nm,尼莫地平濃度為1.8mg/ml,包封率為60.3%。
實施例11
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時在15000rpm高速下剪切3min形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機循環(huán)若干次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒的粒徑為87.4nm,尼莫地平濃度為2.6mg/ml,包封率為86.7%。
實施例12
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機中,在800bar壓力下循環(huán)6次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為110.4nm,尼莫地平濃度為2mg/ml,包封率為66.7%。
實施例13
處方組成:
制備工藝:
(1)將處方量的雙硬脂酸甘油酯與雙癸酸丙二醇酯混合脂質(zhì)按照一定質(zhì)量比例置于80℃水浴條件下熔融,備用;
(2)在80℃水浴條件下,將處方量的尼莫地平溶于適量乙醇,再緩慢加到熔融好的混合脂質(zhì)中,然后加熱揮干溶劑形成油相,備用;
(3)將處方量的吐溫80在80℃水浴條件下均勻分散于適量純水中,形成水相,備用;
(4)將步驟(2)中的油相加入到步驟(3)中的水相中,同時高速剪切一段時間形成初乳;
(5)將步驟(4)中得到的初乳迅速加入高壓均質(zhì)機中,在1000bar壓力下循環(huán)4次,冷卻至室溫,即得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液。
所得尼莫地平脂質(zhì)納米粒膠體分散液的粒徑為84.2nm,尼莫地平濃度為2.5mg/ml,包封率為83.2%。
實施例14
采用差示掃描量熱分析法(dsc法)對實施例1中的尼莫地平脂質(zhì)納米粒晶型與原料藥尼莫地平及其物理混合物的晶型進行對比。其中,物理混合物的制備:稱取處方量的原料藥尼莫地平和空白脂質(zhì)載體凍干粉末置于研缽中研磨混勻即得。分別取3mg尼莫地平原料藥、物理混合物、尼莫地平脂質(zhì)納米粒凍干粉末于坩堝中,以10℃/min的速度升溫,升溫范圍:40~200℃,并以空白鋁坩堝作為空白對照,于氮氣流保護下測定dsc曲線。其中,圖2中的(a)、(b)、(c)分別為原料藥尼莫地平、物理混合物與尼莫地平脂質(zhì)納米粒的dsc曲線。結果表明,(a)中出現(xiàn)了124.9℃的尼莫地平特征吸收峰,與文獻報道結果一致;(b)中出現(xiàn)了123.8℃的尼莫地平特征吸收峰和50.9℃的混合脂質(zhì)吸收峰,說明藥物與脂質(zhì)并未相互作用,保持了各自的晶型結構;而(c)中尼莫地平的特征吸收峰完全消失,僅出現(xiàn)40.3℃和54.7℃兩個吸收峰,推測為脂質(zhì)完全包載藥物時其吸收峰發(fā)生了分離,說明脂質(zhì)納米粒中固液脂質(zhì)形成的晶格不完整,產(chǎn)生晶格缺陷或者以無定型存在,使得藥物以結晶或不定型分散于混合脂質(zhì)中,即藥物已被脂質(zhì)成功包載。
實施例15
體外釋放介質(zhì)選擇:
取過量尼莫地平置于西林瓶中,分別加入純水及不同濃度的吐溫80溶液(濃度為0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%)中,密封后置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱中,37℃恒溫下以100rpm勻速振蕩48h,取樣品液10000rpm離心5min,吸取上清液適量,按照hplc法進行檢測。一般釋放介質(zhì)的體積為藥物飽和溶液所需介質(zhì)體積的3~7倍,從而達到漏槽條件。根據(jù)平衡溶解度實驗結果表1可知,0.5%吐溫80即可滿足漏槽條件,故選擇0.5%吐溫80作為體外釋放介質(zhì)。
表1在不同溶出介質(zhì)中尼莫地平的溶解度
體外釋放研究方法:
取實施例1中的尼莫地平脂質(zhì)納米粒(相當于3mg尼莫地平)密封于透析袋(相對分子質(zhì)量8000~14000)中,量取適量ph7.4、6.8、5.5pbs(含0.5%吐溫80)溶出介質(zhì)各3份,置于恒溫(37±0.5)℃的溶出介質(zhì)中,轉(zhuǎn)速100r/min,于0.5、1、1.5、2、4、6、8、10、12h取樣3ml,同時迅速補充等量同溫的新鮮介質(zhì)。樣品經(jīng)0.22μm的有機微孔濾膜過濾,續(xù)濾液經(jīng)hplc法測定,通過標準曲線計算藥物的累計釋放百分數(shù),結果如圖3。尼莫地平脂質(zhì)納米粒在不同ph環(huán)境下釋放出來的游離藥物都非常有限,24h內(nèi)僅釋放15%的藥物,可以起到良好的緩釋作用。