本發(fā)明屬于復(fù)合生物材料領(lǐng)域，尤其涉及一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料及其制備方法。

背景技術(shù)：

當(dāng)皮膚損傷后，需要使用皮膚修復(fù)材料作為受損皮膚的臨時(shí)替代物來保護(hù)傷口，防止傷口感染和重度脫水，為傷口愈合提供相對濕潤的環(huán)境，促進(jìn)組織再生和創(chuàng)面愈合。在眾多皮膚修復(fù)材料中，自體皮是一種最佳的修復(fù)材料，因其不會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)且含有各種促進(jìn)修復(fù)愈合的組織細(xì)胞和活性生長因子。由于自體皮的來源有限，只能用作小范圍的皮膚損傷，所以當(dāng)大面積皮膚損傷時(shí)，需要借助其他皮膚修復(fù)材料，如醫(yī)用傷口敷料、皮膚支架材料、人工皮膚等作為損傷皮膚的臨時(shí)替代物來實(shí)現(xiàn)損傷修復(fù)，促進(jìn)新生組織的再生和傷口的快速愈合。

隨著組織工程學(xué)的發(fā)展，皮膚修復(fù)材料經(jīng)歷了從傳統(tǒng)敷料到新型敷料再到皮膚組織工程支架材料的發(fā)展歷程，利用天然活性高分子或人工合成高分子制成的皮膚組織工程支架材料已在臨床上得到廣泛的應(yīng)用。盡管各種傷口敷料以其不同的特點(diǎn)被應(yīng)用于臨床不同的創(chuàng)面，至今為止還沒有一種理想的敷料能夠滿足各種創(chuàng)面修復(fù)愈合的要求，現(xiàn)有技術(shù)中的傷口敷料的組織修復(fù)能力還有待進(jìn)一步提升。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種可以用于各種創(chuàng)面修復(fù)愈合的、具有優(yōu)良的組織修復(fù)能力的木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料，包括以下重量份數(shù)的原料：棉短絨60-70份、木棉纖維20-30份、纖維化膠原蛋白溶液10-20份、蠶絲蛋白溶液5-10份；

優(yōu)選的，所述的纖維化膠原蛋白溶液采用以下方法制備：將3mg/ml的膠原蛋白溶液與10×pbs以4:1的體積比在4℃下充分混勻，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph至8，向溶液中加入nah2po4及nacl，并使膠原蛋白溶液的終濃度為2mg/ml，nah2po4的終濃度為10mm，nacl的終濃度為100mm，然后將溶液轉(zhuǎn)置35℃水浴反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，離心除去上清液，并將沉淀溶于蒸餾水中，透析除鹽，即得纖維化的膠原蛋白溶液。

優(yōu)選的，所述的蠶絲蛋白溶液采用以下方法制備：將2l去離子水燒熱至沸騰，加入4g碳酸鈉及5g家蠶生絲，煮沸30min后，用去離子水清洗干凈并烘干，再用500ml、9.3mol/l的libr溶液溶解，待完全溶解后將溶液裝入透析袋，去離子水透析72h，9000r/min離心20min，重復(fù)兩次，得蠶絲蛋白溶液。

優(yōu)選的，所述的一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料，還包括中藥提取物3-5份。

優(yōu)選的，所述的中藥提取物為淫羊藿提取物、骨碎補(bǔ)提取物、川芎提取物、巴戟天提取物、土鱉蟲提取物、丹參提取物中的一種或一種以上的組合。

優(yōu)選的，所述的中藥提取物采用以下方法制備：稱取中藥20-25g，粉碎成粗粉，加入其重量10-15倍的蒸餾水浸泡1-2h，回流提取1-1.5h，抽濾得濾液1；向?yàn)V渣中加入8-10倍濾渣重量的蒸餾水，回流提取1-1.5h，抽濾得濾液2；再向?yàn)V渣中加入8-10倍濾渣重量的蒸餾水，回流提取1-1.5h，抽濾得濾液3；將濾液1、濾液2、濾液3合并，在溫度為40-50℃、真空度為0.05-0.08pa條件下減壓濃縮至中藥重量的4-6倍，用三層紗布過濾，即得中藥提取液。

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：稱取棉短絨、木棉纖維，將其溶解在氫氧化鋰/尿素水溶液中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液，所述的氫氧化鋰/尿素水溶液采用氫氧化鋰8.76g、尿素12g及水79.24g配制而成，充分?jǐn)嚢杈鶆颉⑦^濾、靜置24h，于20kv條件下靜電紡絲得纖維膜；

步驟二：將纖維化膠原蛋白溶液、蠶絲蛋白溶液混合均勻，涂抹于纖維膜表面，即得敷料。

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：稱取棉短絨、木棉纖維，將其溶解在氫氧化鋰/尿素水溶液中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液，所述的氫氧化鋰/尿素水溶液采用氫氧化鋰8.76g、尿素12g及水79.24g配制而成，充分?jǐn)嚢杈鶆?、過濾、靜置24h，于20kv條件下靜電紡絲得纖維膜；

步驟二：將纖維化膠原蛋白溶液、蠶絲蛋白溶液及中藥提取物混合均勻，涂抹于纖維膜表面，即得敷料。

本發(fā)明的有益效果在于：

1)纖維素作為一種生物材料，具有良好的生物適應(yīng)性和生物活性，能作用于創(chuàng)面修復(fù)的多個(gè)環(huán)節(jié)，促進(jìn)創(chuàng)面的快速愈合。以纖維素為原料制成的傷口敷料柔軟透明、舒適；有良好的通透性，能為創(chuàng)面提供濕潤、微酸的修復(fù)環(huán)境；能調(diào)節(jié)創(chuàng)面氧張力，促進(jìn)毛細(xì)血管形成，從而加速傷口的愈合。

2)膠原蛋白本身就是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，膠原蛋白能與細(xì)胞或周圍基質(zhì)相互作用，表現(xiàn)出良好的協(xié)調(diào)性；膠原蛋白分子內(nèi)和分子間的共價(jià)交聯(lián)賦予了膠原蛋白較高強(qiáng)度的機(jī)械性能；膠原蛋白可以和血小板粘合，凝聚形成血栓而阻止血流，從而起到止血的效果；膠原蛋白的網(wǎng)絡(luò)骨架結(jié)構(gòu)對細(xì)胞起錨定、支持作用，能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和遷移。

3)蠶絲蛋白生物相容性良好，降解速度緩慢、且降解產(chǎn)物對組織具有低免疫原性，對皮膚、牙周等組織有營養(yǎng)和修復(fù)能力，在體內(nèi)或體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，多孔結(jié)構(gòu)的絲素蛋白能適應(yīng)細(xì)胞的黏附、鋪展和增殖，對組織的修復(fù)和重建極為有利，是一種性能優(yōu)異的生物材料。

4)本發(fā)明制得的木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料可以用于各種創(chuàng)面的修復(fù)愈合、且具有優(yōu)良的組織修復(fù)能力。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料，包括以下重量份數(shù)的原料：棉短絨60份、木棉纖維20份、蠶絲蛋白溶液10份、纖維化膠原蛋白溶液5份。

所述的纖維化膠原蛋白溶液采用以下方法制備：將3mg/ml的膠原蛋白溶液與10×pbs以4:1的體積比在4℃下充分混勻，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph至8，向溶液中加入nah2po4及nacl，并使膠原蛋白溶液的終濃度為2mg/ml，nah2po4的終濃度為10mm，nacl的終濃度為100mm，然后將溶液轉(zhuǎn)置35℃水浴反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，離心除去上清液，并將沉淀溶于蒸餾水中，透析除鹽，即得纖維化的膠原蛋白溶液。

所述的蠶絲蛋白溶液采用以下方法制備：將2l去離子水燒熱至沸騰，加入4g碳酸鈉及5g家蠶生絲，煮沸30min后，用去離子水清洗干凈并烘干，再用500ml、9.3mol/l的libr溶液溶解，待完全溶解后將溶液裝入透析袋，去離子水透析72h，9000r/min離心20min，重復(fù)兩次，得蠶絲蛋白溶液。

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：稱取棉短絨、木棉纖維，將其溶解在氫氧化鋰/尿素水溶液中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液，所述的氫氧化鋰/尿素水溶液采用氫氧化鋰8.76g、尿素12g及水79.24g配制而成，充分?jǐn)嚢杈鶆颉⑦^濾、靜置24h，于20kv條件下靜電紡絲得纖維膜；

步驟二：將纖維化膠原蛋白溶液、蠶絲蛋白溶液混合均勻，涂抹于纖維膜表面，即得敷料。

實(shí)施例2

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料，包括以下重量份數(shù)的原料：棉短絨70份、木棉纖維30份、纖維化膠原蛋白溶液20份、蠶絲蛋白溶液10份、中藥提取物3份。

所述的纖維化膠原蛋白溶液采用以下方法制備：將3mg/ml的膠原蛋白溶液與10×pbs以4:1的體積比在4℃下充分混勻，用0.1mnaoh調(diào)節(jié)ph至8，向溶液中加入nah2po4及nacl，并使膠原蛋白溶液的終濃度為2mg/ml，nah2po4的終濃度為10mm，nacl的終濃度為100mm，然后將溶液轉(zhuǎn)置35℃水浴反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，離心除去上清液，并將沉淀溶于蒸餾水中，透析除鹽，即得纖維化的膠原蛋白溶液。

所述的蠶絲蛋白溶液采用以下方法制備：將2l去離子水燒熱至沸騰，加入4g碳酸鈉及5g家蠶生絲，煮沸30min后，用去離子水清洗干凈并烘干，再用500ml、9.3mol/l的libr溶液溶解，待完全溶解后將溶液裝入透析袋，去離子水透析72h，9000r/min離心20min，重復(fù)兩次，得蠶絲蛋白溶液。

所述的中藥提取物為淫羊藿提取物、骨碎補(bǔ)提取物、川芎提取物、巴戟天提取物、土鱉蟲提取物、丹參提取物按重量比1:1:1:1:1:1的混合物。

所述的中藥提取物采用以下方法制備：稱取中藥20-25g，粉碎成粗粉，加入其重量10-15倍的蒸餾水浸泡1-2h，回流提取1-1.5h，抽濾得濾液1；向?yàn)V渣中加入8-10倍濾渣重量的蒸餾水，回流提取1-1.5h，抽濾得濾液2；再向?yàn)V渣中加入8-10倍濾渣重量的蒸餾水，回流提取1-1.5h，抽濾得濾液3；將濾液1、濾液2、濾液3合并，在溫度為40-50℃、真空度為0.05-0.08pa條件下減壓濃縮至中藥重量的4-6倍，用三層紗布過濾，即得中藥提取液。

一種木棉復(fù)合再生纖維素傷口敷料的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：稱取棉短絨、木棉纖維，將其溶解在氫氧化鋰/尿素水溶液中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液，所述的氫氧化鋰/尿素水溶液采用氫氧化鋰8.76g、尿素12g及水79.24g配制而成，充分?jǐn)嚢杈鶆?、過濾、靜置24h，于20kv條件下靜電紡絲得纖維膜；

步驟二：將纖維化膠原蛋白溶液、蠶絲蛋白溶液及中藥提取物混合均勻，涂抹于纖維膜表面，即得敷料。

選擇12只小白鼠，隨機(jī)分成3組，每組4只，在每只白鼠的脊柱上制造出1個(gè)2×2cm的全層皮膚缺損的創(chuàng)面模型，又分成空白對照組和兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組(實(shí)施例1、實(shí)施例2)。在試驗(yàn)后每天觀察創(chuàng)面愈合的大體情況和愈合時(shí)間；同時(shí)在創(chuàng)面中心取創(chuàng)面組織，福爾馬林溶液固定，石蠟包埋，軟組織切片，行he染色，在顯微鏡下觀察空白對照組和實(shí)驗(yàn)組皮膚全層缺損創(chuàng)面的愈合情況。第7、14、21、28、35天分別對實(shí)驗(yàn)組和空白對照組的創(chuàng)面照相采圖，用計(jì)算機(jī)圖像分析軟件計(jì)算各組的創(chuàng)面愈合面積，測定各組的創(chuàng)面愈合百分率，按公式創(chuàng)面愈合率(％)＝[(創(chuàng)面原始面積-創(chuàng)面未愈合面積)/創(chuàng)面原始面積]×100％，結(jié)果見下表1。

表1各組創(chuàng)面愈合率比較

結(jié)果：在對比空白對照組和敷用敷料的實(shí)驗(yàn)組的愈合時(shí)間及創(chuàng)面愈合率可知：創(chuàng)面一般情況實(shí)驗(yàn)組明顯好于空白對照組，實(shí)驗(yàn)組所用的敷料對皮膚缺損具有良好的促愈合作用。