本發(fā)明屬于保健藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有抑制腸炎藥用的通體香提取物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

隨著人們飲食結(jié)構(gòu)、生活習(xí)慣的改變，潰瘍性結(jié)腸炎等炎癥性腸病極為普遍，2011年1月《胃腸病學(xué)》雜志文章指出，炎癥性腸病(ibd)發(fā)病率在全球均呈上升趨勢，據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，全球每年發(fā)病約30～50億人次，其中我國達(dá)7.48億。潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerativecolitis，uc)是一種病因病機(jī)尚未明確的慢性炎癥性腸病。目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的治療尚未取得實(shí)質(zhì)性進(jìn)展，其中約50％患者靠服用抗生素治療。面對如此嚴(yán)峻的胃腸道炎癥發(fā)病趨勢，尋找可治療消化道炎癥的新型藥物是目前全球藥物研究人員面對的最緊急問題。

潰瘍性結(jié)腸炎(uc)為一種非特異性炎癥，病因尚不明確，主要與遺傳、環(huán)境、微生物感染、菌群失調(diào)及免疫等多個生理系統(tǒng)有關(guān)。因此，成分和治療靶點(diǎn)較單一的西藥(如氨基水楊酸制劑、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、抗生素等)，雖能在很大程度上改善腸炎的癥狀，但卻無法實(shí)現(xiàn)根治，還存在停藥復(fù)發(fā)、依賴性、明顯的造血系統(tǒng)、肝腎等不良反應(yīng)。與西藥相比，中藥鑒于其多成分、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，加之祖國醫(yī)學(xué)從整體觀念、辨證論治的治則，通過藥物的配伍應(yīng)用才有可能對腸炎患者的多個系統(tǒng)進(jìn)行全面調(diào)理，從更廣泛的角度對慢性、復(fù)發(fā)性腸炎進(jìn)行治療。這不僅有助于腸炎患者病癥的全身性改善，更為徹底根治腸炎疾病帶來一線希望。

目前市售的治療結(jié)腸炎的復(fù)方制劑或中成藥有，補(bǔ)脾益腸丸、固腸止瀉丸、固本益腸丸、腸胃寧片、結(jié)腸寧、參苓白術(shù)散等。目前據(jù)已有研究，治療腸炎的中藥和民族藥較多，如黨參、白術(shù)、甘草、茯苓、白芍、黃芪、穿心蓮、黃連、蒲公英等。經(jīng)這些研究發(fā)現(xiàn)，皂苷類、黃酮類、多糖類等成分具有顯著抗炎活性，并對抗炎作用機(jī)制做了大量的研究，主要包括腸黏膜保護(hù)、抗氧化、抑制炎癥細(xì)胞因子分泌、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抑制炎癥相關(guān)信號通路的激活、平衡腸道菌群失調(diào)等，這些無疑都為今后抗炎藥用植物或民族藥的研發(fā)奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。

沉香為瑞香科(thymelaeaceae)植物白木香aquilariasinensis(lour.)gilg.含有樹脂的木材。我國沉香主產(chǎn)于海南、廣東、廣西、云南、臺灣等地，為名貴南藥，其味辛苦，性微溫；歸脾、胃、腎經(jīng)；具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效。中醫(yī)臨床主要用于胸腹脹悶疼痛，胃寒呃逆嘔吐，腎虛氣逆喘急等病證。沉香藥用非常廣泛，2015版《中國藥典》中有38個復(fù)方制劑含有沉香，在中國以沉香組方配伍的中成藥有160多種，《中醫(yī)方劑大辭典》中有414個含有沉香的方劑。一直以來，沉香藥用資源匱乏，我們課題組發(fā)明的“通體結(jié)香技術(shù)”高效、穩(wěn)定結(jié)香，解決了藥用原料問題，并實(shí)現(xiàn)了規(guī)?；a(chǎn)。本發(fā)明主要解決了該通體香醇提取物的制備、抑制腸炎作用研究及其在預(yù)防和治療炎性腸道疾病藥物和保健食品中的應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)的問題，本發(fā)明提供了一種具有抑制腸炎藥用的通體香提取物及其制備方法和應(yīng)用。

第一方面，本發(fā)明提供了一種具有抑制腸炎藥用的通體香提取物的制備方法，包括如下步驟：

采用醇溶液對通體香進(jìn)行浸提，經(jīng)冷卻、過濾，得到濾液；再將所述濾液濃縮、干燥得到具有抑制腸炎藥用的通體香醇提取物，其中，所述通體香的質(zhì)量與醇溶劑的體積的比為1:3～20。

優(yōu)選地，所述通體香為將白木香樹采用人工結(jié)香方法取得的。

可以理解的是，本發(fā)明所述的人工結(jié)香方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的結(jié)香方法，所述人工結(jié)香方法包括但不限于輸液法、砍傷法、半斷桿法、鑿洞法、人工接菌結(jié)香法。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述人工結(jié)香方法為輸液法。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述的通體香為通過如專利zl201010104119.5所述的方法所生產(chǎn)的通體香為原料，經(jīng)干燥、粉碎制得的。

進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明所述的通體香的大小為100～300目。

優(yōu)選地，所述的采用醇溶液對通體香進(jìn)行浸提，經(jīng)冷卻、過濾，得到濾液的步驟，具體包括：將通體香浸泡在醇溶劑中1～4h后，加熱至沸騰，并保持微沸0.5～3h，停止加熱，經(jīng)過濾分離出藥渣和濾液，過濾后的藥渣按照以上操作重復(fù)不少于2次，再合并濾液。

可以理解的是，本發(fā)明所述通體香的質(zhì)量與醇溶劑的體積為1:3～20范圍內(nèi)任意一取值，均可通過本發(fā)明第一方面所述的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物的制備方法制得通體香醇提取物。

優(yōu)選地，所述醇溶液中的醇包括但不限于甲醇、乙醇、正丁醇、丙醇、異丙醇中的一種或多種。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述醇溶液為乙醇溶液，其中，乙醇溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)不大于95％。

第二方面，本發(fā)明還提供了一種具有抑制腸炎藥用的通體香提取物為采用如第一方面所述的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物的制備方法制得。

第三方面，本發(fā)明還提供了一種如第二方面所述的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物在制備用于抑制腸炎的藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述用于抑制腸炎的藥物為將如第二方面所述的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物與藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑混合制得。

優(yōu)選地，所述用于抑制腸炎的藥物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、凍干粉針、水針、口服液中的任意一種。

第四方面，本發(fā)明還提供了一種如第二方面所述的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物在制備抑制腸炎的保健品中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述用于抑制腸炎的保健品為將如第二方面所述的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物與水混合制得。

優(yōu)選地，所述抑制腸炎的保健品還包括甜味添加劑。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果在于：本發(fā)明中的具有抑制腸炎藥用的通體香提取物是以“通體結(jié)香技術(shù)”所產(chǎn)沉香為原料，經(jīng)提取、濃縮、純化而得；我們研究發(fā)現(xiàn)，通體香提物具有顯著抑制結(jié)腸炎的作用，可被用于制備治療腸炎的有效藥物和保健品；不僅藥用價值高，取得的經(jīng)濟(jì)效益高，而且對整個沉香產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重大意義。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例所提供的同一生藥量的不同提取物對腸炎小鼠腸推進(jìn)作用的影響；

圖2是本發(fā)明實(shí)施例所提供的不同生藥量的提取物對腸炎小鼠腸推進(jìn)作用的影響；

圖3是本發(fā)明實(shí)施例所提供的不同生藥量的提取物對結(jié)腸組織病理損傷的影響。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)描述，給出的實(shí)施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。

下述實(shí)施例中的實(shí)驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的藥材原料、試劑材料等，如無特殊說明，均可自常規(guī)生化試劑商店或藥品經(jīng)營企業(yè)購買得到。

可以理解的是，本發(fā)明實(shí)施例所述的通體香為通過如專利zl201010104119.5所述的方法所生產(chǎn)的通體香為原料，經(jīng)干燥、粉碎制得的。

可以理解的是，本發(fā)明實(shí)施例所述的野生沉香購買自廣東省茂名市化州沉香研發(fā)有限公司。

實(shí)施例1

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種具有抑制腸炎藥用的通體香提取物的制備方法，包括如下步驟：

將通體香粉碎至200目后，置于圓底燒瓶容器中，按照通體香的質(zhì)量與95％乙醇的體積的比為1:5的比例，向所述圓底燒瓶中加入95％乙醇，浸泡2h后，將電熱套緩緩加熱至溶液沸騰，并保持微沸1h，停止加熱，自然冷卻至室溫后，用濾紙過濾，得到濾液；過濾后的藥渣按照以上操作重復(fù)3次，最后合并濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀加熱，旋蒸濃縮得浸膏，繼續(xù)蒸干4h，至無醇味即可得到黑褐色固體的通體香醇提取物，其中通體香醇提取物浸出率為14％，計算公式為：浸出率(％)＝所得通體香醇提取物的質(zhì)量/所稱取通體香的質(zhì)量*100％。

實(shí)施例2

為了進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果，重復(fù)本發(fā)明實(shí)施例1的步驟，將本發(fā)明實(shí)施例1中的“通體香”替換成“野生沉香”，制得野生沉香醇提取物，其中野生沉香醇提物浸出率為10.5％。

效果實(shí)施例1同一生藥量的不同提取物對腸炎小鼠腸推進(jìn)作用的影響

(1)試驗材料：實(shí)施例1所得的通體香醇提取物、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物、美沙拉秦、刻度尺；

(2)試驗動物：icr雄性小鼠(18～22g)；

(3)試驗方法：雄性icr小鼠隨機(jī)分為正常組、腸炎模型組、美沙拉秦組(200mg/kg)、實(shí)施例1所得的通體香醇提取物(劑量為400mg/kg，分別相當(dāng)于生藥量2.84g/kg)、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物(劑量300mg/kg，相當(dāng)于生藥量2.84g/kg)，每組10只。正常組和腸炎模型組灌胃給予相應(yīng)體積蒸餾水，受試藥物組每天灌胃給予相應(yīng)藥物，連續(xù)給藥7d；除正常組外，其它各組小鼠分別隔天腹腔注射5-fu(25mg/kg)，10ml/kg，制備結(jié)腸炎模型。末次給藥后，各組小鼠禁食不禁水16h，分別灌胃炭末混懸液(5％炭粉和10％阿拉伯膠)，20min后摘眼球取血處死，剖腹取腸，從胃幽門到盲腸上端截取小腸，分別測量小腸總長度(所截取的小腸全長)和炭末推進(jìn)長度(靠近胃幽門端到炭末前端的推進(jìn)長度)，計數(shù)腸推進(jìn)率，計算公式為：腸推進(jìn)率＝炭末推進(jìn)長度/小腸總長度*100％。

(4)實(shí)驗結(jié)果：

結(jié)果如圖1所示，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比正常組，模型小鼠腸推進(jìn)率顯著下降(^*p<0.05)，灌胃實(shí)施例1所得的通體香醇提取物、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物后，腸炎小鼠腸推進(jìn)率出現(xiàn)回升，且通體沉香醇提取物組腸推進(jìn)率顯著升高(^#p<0.05)。

效果實(shí)施例2不同生藥量的提取物對腸炎小鼠腸推進(jìn)作用的影響

(1)試驗材料：實(shí)施例1所得的通體香醇提取物、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物、美沙拉秦、刻度尺；

(2)試驗動物：icr雄性小鼠(18～22g)；

(3)試驗方法：健康icr雄性小鼠，體重18～22g，隨機(jī)分成正常組、模型組、美沙拉秦組(200mg/kg)、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物組(300mg/kg，相當(dāng)于生藥量2.84g/kg)，實(shí)施例1所得的通體沉香醇提取物3個劑量組(劑量分別為100mg/kg，200mg/kg，400mg/kg，分別相當(dāng)于生藥量0.71，1.42，2.84g/kg，簡稱通低、通中、通高三組)，12只/組；除正常組外，受試藥物組每天灌胃給予相應(yīng)藥物，20ml/kg，連續(xù)給藥7d；除正常組外，其它各組小鼠分別隔天腹腔注射5-fu(25mg/kg)，10ml/kg，制備結(jié)腸炎模型。末次給藥后，各組小鼠禁食不禁水16h，分別灌胃炭末混懸液(5％炭粉和10％阿拉伯膠)，20min后摘眼球取血處死，剖腹取腸，從胃幽門到盲腸上端截取小腸，分別測量小腸總長度(所截取的小腸全長)和炭末推進(jìn)長度(靠近胃幽門端到炭末前端的推進(jìn)長度)，計數(shù)腸推進(jìn)率，計算公式為：腸推進(jìn)率＝炭末推進(jìn)長度/小腸總長度*100％。

(4)實(shí)驗結(jié)果：

用野生沉香和通體香醇提物處理5-fu所致腸炎小鼠7d后，進(jìn)行腸推進(jìn)測定，以美沙拉秦為陽性對照藥，不同生藥量的提取物對腸炎小鼠腸推進(jìn)作用的影響的檢測結(jié)果如圖2所示，相比正常組，模型小鼠腸推進(jìn)率顯著下降(^*p<0.05)，各組灌胃不同提取物后，腸炎小鼠腸推進(jìn)率出現(xiàn)回升，且通體沉香醇提物中劑量和高劑量組腸推進(jìn)率顯著升高(^#p<0.05)。

效果實(shí)施例3對結(jié)腸組織病理損傷的影響

(1)試驗材料：實(shí)施例1所得的通體香醇提取物、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物、美沙拉秦、4％多聚甲醛溶液、伊紅-蘇木素染液；

(2)試驗動物：icr雄性小鼠(18～22g)；

(3)試驗方法：按照效果實(shí)施例2的方法對動物進(jìn)行分組和處理，末次給藥后，各組小鼠禁食不禁水16h，摘眼球取血，小心剪取小鼠結(jié)腸組織1-2cm左右，置于4％多聚甲醛溶液中固定，將固定好的組織進(jìn)行流水沖洗、梯度酒精脫水，浸蠟，包埋，6μm切片，烤干，脫蠟，he染色后鏡下觀察組織病理損傷情況。

(4)實(shí)驗結(jié)果：

用實(shí)施例1所得的通體香醇提取物、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物處理5-fu所致腸炎小鼠7d后，進(jìn)行結(jié)腸病理切片觀察，以美沙拉秦為陽性對照藥。結(jié)腸病理切片結(jié)果如圖3顯示，正常小鼠腸粘膜絨毛表面完整，固有層可見小血管、毛細(xì)血管、淋巴管；粘膜下層疏松結(jié)締組織，富有血管、淋巴管，肌層和漿膜層次清晰；隱窩正常，無杯狀細(xì)胞減少，個別有輕度炎性細(xì)胞浸潤。相比正常組，模型組小鼠結(jié)腸腸粘膜表面不完整，上皮杯狀細(xì)胞丟失嚴(yán)重，炎癥細(xì)胞浸潤達(dá)粘膜肌層。而給予實(shí)施例1所得的通體香醇提取物、實(shí)施例2所得的野生沉香醇提取物處理后結(jié)腸粘膜組織病變、上皮杯狀細(xì)胞丟失、炎癥細(xì)胞浸潤及細(xì)胞損傷等均不同程度減輕，結(jié)腸粘膜表面相對完整；其中野生沉香醇提物組結(jié)腸粘膜部分脫落、杯狀細(xì)胞部分丟失，少量炎癥細(xì)胞浸潤，損傷程度明顯減輕；而通體沉香醇提物隨著劑量增加結(jié)腸組織損傷程度逐漸減輕，高劑量組效果最好且優(yōu)于野生沉香醇提物。

應(yīng)用實(shí)施例1

將實(shí)施例1所制得的通體香醇提取物研成細(xì)粉、過篩，取已過篩的該通體香醇提取物細(xì)粉1份，加入淀粉3.5份、乳糖6.5份按等量遞加混合法混合均勻，按容量法分劑量制得散劑。

應(yīng)用實(shí)施例2

將實(shí)施例1所制得的通體香醇提取物粉碎，過60-100目篩，取已過篩的該通體香醇提取物細(xì)粉1份，加入干淀粉1.1份作為填充劑，加入1-3％滑石粉作助流劑，混勻后用空心膠囊充填制得硬膠囊劑。

應(yīng)用實(shí)施例3

將實(shí)施例1所制得的通體香醇提取物粉碎過60-100目篩，取已過篩的該通體香醇提取物細(xì)粉1份，加入羥丙基纖維素1.1份做崩解劑，加入藥用糊精0.4份作粘合劑，加入適量50-95％的乙醇做潤滑劑，濕法制粒、干燥、整粒，后加入1-3％的潤滑劑混合均勻，壓制成片劑。

應(yīng)用實(shí)施例4

將實(shí)施例1制得的通體香醇提取物1份和載體材料4份共同溶于50-95％的乙醇中，用噴霧干燥法干燥后，過篩，加入2.0份的微晶纖維素做崩解劑，加入適量微粉硅膠做助流劑，混合均勻后將粉末直接壓制成片劑，即得分散片。

應(yīng)用實(shí)施例5

將實(shí)施例1所制得的通體香醇提取物一份和無糖甜味劑0.001份共同溶解于食用級水中，加入調(diào)味劑制備成各種口味的飲料，灌裝后即得保健飲料。

以上對本發(fā)明具體實(shí)施方式的描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變或變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的范圍。