本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種殺菌消炎外用藥劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

慢性皮炎-濕疹是一種常見的表皮及真皮淺層炎癥性皮膚病，其病因及發(fā)病機制相當復(fù)雜，是發(fā)生在皮膚的遲發(fā)性超敏反應(yīng)(dth)，涉及體內(nèi)、外多種因素，可發(fā)生于一年四季，不論年齡和身體的各個部位，臨床表現(xiàn)具有對稱性、滲出性、瘙癢性皮膚病、多形性和復(fù)發(fā)性等特點，通常在冬季易復(fù)發(fā)或病情加劇，該病發(fā)病率高、病因復(fù)雜、病程漫長，難以根治，嚴重降低患者的生活質(zhì)量。

對皮炎-濕疹患者皮膚菌群的測定發(fā)現(xiàn)，微生物因素如金黃色葡萄球菌等在皮炎-濕疹發(fā)病及治療中加重及維持皮損中起主要作用。目前西醫(yī)對濕疹尚無特效療法，通常以內(nèi)服抗組胺類藥物治療為主，如苯海拉明、非那根、撲爾敏、賽庚啶等，此類藥物雖有一定療效，但副作用大，如易出現(xiàn)嗜睡、口干、乏力、頭暈、惡心等副作用，長期用藥對菌種產(chǎn)生耐藥性。如糖皮質(zhì)激素可抑制dth，是治療皮炎、亞急性和慢性濕疹的常用藥物，有一定的臨床效果，但無論是局部還是全身用藥，均表現(xiàn)出明顯的不良反應(yīng)，如滿月臉、水牛背、肌肉萎縮、降低胃粘膜的抵抗力等，此外，在臨床治療時，經(jīng)常出現(xiàn)停藥后皮損加重或激素依賴性皮炎，上述藥物由于其副作用在治療慢性皮炎-濕疹時受到極大限制。因此，急需開發(fā)新的安全有效的治療慢性皮炎-濕疹的藥物。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的在于提供一種殺菌消炎外用藥劑，同時提供其相應(yīng)的制備方法是本發(fā)明的另一發(fā)明目的。

基于上述目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：

一種殺菌消炎外用藥劑，主要包括以下重量份的原料：改性納米碳晶素1-10份、苦參50-150份、地膚子30-100份、蛇床子30-90份、生地30-90份。

所述改性納米碳晶素由以下方法制得：1）酸洗：將納米碳晶素置于混合酸溶液中酸洗，混合酸溶液由h2so4:hno3按體積比為9:1組成；2）分散：將酸洗后的納米碳晶素分散到去離子水中超聲30-40min，制得納米鉆石烯分散液，納米碳晶素與去離子水的用量比例為（1-10）g︰50ml；3）于65-70℃下，添加質(zhì)量分數(shù)為20%的聚乙烯吡咯烷酮，攪拌條件下，反應(yīng)2-4h，冷卻、離心，取其沉淀物離心洗滌、烘干，即得。

殺菌消炎外用藥劑的制備方法，包括以下步驟：

1）將苦參和地膚子加入質(zhì)量濃度為50-90%乙醇中回流提取，提取液過濾后，將濾液溶解于水中，靜置、過濾，取濾液干燥得藥物浸膏??；苦參和地膚子的質(zhì)量之和與乙醇的質(zhì)量比為1:（6-10），提取液與水的體積比為1:（2-4）；

2）將蛇床子和生地加入水中回流提取，提取液過濾后，向濾液中添加質(zhì)量濃度為50-90%的乙醇，靜置、過濾，取濾液干燥得藥物浸膏ⅱ；蛇床子和生地的質(zhì)量之和與乙醇的質(zhì)量比為1:（6-10），乙醇的體積與提取液與乙醇的混合液體積比為（60-90）:100；

3）將步驟1）的藥物浸膏ⅰ和步驟2）的藥物浸膏ⅱ混合，再添加改性納米碳晶素，加去離子水或乙醇定容，混合、靜置、精濾，收集濾液，即得外用藥劑。該藥劑為膏狀時，加少量水定容即可，為液體藥劑時，制成的藥劑中含有體積濃度為5%-30%的乙醇。

步驟1）和步驟2）回流提取，分別提取2-3次，每次提取時間為1-2h。

根據(jù)實際需要，可在藥劑中添加輔料，輔料具體優(yōu)選為干油、1，2-丙二醇、羧甲基纖維素鈉、泊洛沙姆188、吐溫80、聚乙二醇、甘露醇或山梨醇。

苦參，性味：苦、寒；歸經(jīng)：心、肝、腸、膀胱經(jīng)；功能：清熱燥濕，殺蟲，利尿；主治：濕熱瀉痢，便血，黃疸閉尿，帶下，陰癢，疥癬；麻風，皮膚瘙癢，濕毒瘡瘍。

地膚子，性味：寒，辛、苦；歸經(jīng)：腎、膀胱經(jīng)；功能：清熱離濕，祛風止癢；主治：小便不利，淋病，帶下，疝氣，風疹，瘡毒，疥癬，陰部濕癢。

蛇床子，性味：辛、苦，溫；歸經(jīng)：歸腎經(jīng)；功能：解毒殺蟲，燥濕祛風；主治：外治外陰濕疹，婦人陰道炎，濕疹疥癬，寒濕帶下，濕痹腰痛，腎虛陽痿。

生地，性味：甘、苦，微寒；歸經(jīng)：心、肝、腎經(jīng)；功能：清熱涼血，質(zhì)潤降泄，養(yǎng)陰生津；主治：陰虛發(fā)熱，血熱的各種出血癥，消渴，發(fā)斑發(fā)疹，月經(jīng)不調(diào)，胎動不安，陰傷便秘。

納米碳晶素（納米碳晶素為平均粒度小于等于20nm的納米碳晶），具有高的表面活性，對致病的病毒、微生物和細菌有非常高的活性，表現(xiàn)出超強的殺菌特性；無毒副作用，可增強藥物的療效。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

1）組方中苦參具有清熱解毒、清熱燥濕之功效；地膚子清熱祛濕；蛇床子和生地性辛溫，改性納米碳晶素復(fù)配，具有清熱解毒、利濕止癢、殺菌消炎的功效，經(jīng)實驗其對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌、綠膿桿菌殺菌率可達99.8%以上，具有明顯的治療慢性皮炎-濕疹的作用，且成本低廉、安全、無毒、無副作用，動物實驗療效確切、藥物質(zhì)量穩(wěn)定、質(zhì)量標準可靠；

2）工藝簡單，成本低。

具體實施方式

實施例1

一種殺菌消炎外用藥劑，主要包括以下重量份的原料：改性納米碳晶素6份、苦參110份、地膚子80份、蛇床子50份、生地60份。

所述改性納米碳晶素由以下方法制得：1）酸洗：將納米碳晶素置于混合酸溶液中酸洗，混合酸溶液由h2so4:hno3按體積比為9:1組成；2）分散：將酸洗后的納米碳晶素分散到去離子水中超聲40min，制得納米鉆石烯分散液，納米碳晶素與去離子水的用量比例為1g︰50ml；3）于70℃下，添加質(zhì)量分數(shù)為20%的聚乙烯吡咯烷酮，攪拌條件下，反應(yīng)2h，冷卻、離心，取其沉淀物離心洗滌、烘干，即得。

殺菌消炎外用藥劑的制備方法，包括以下步驟：

1）將苦參和地膚子加入質(zhì)量濃度為50%乙醇中回流提取，提取3次，每次提取時間為2h，提取液過濾后，將濾液溶解于水中，靜置、過濾，取濾液干燥得藥物浸膏??；苦參和地膚子的質(zhì)量之和與乙醇的質(zhì)量比為1:6，提取液與水的體積比為1:2；

2）將蛇床子和生地加入水中回流提取，提取3次，每次提取時間為2h，提取液過濾后，向濾液中添加質(zhì)量濃度為50的乙醇，靜置、過濾，取濾液干燥得藥物浸膏ⅱ；蛇床子和生地的質(zhì)量之和與乙醇的質(zhì)量比為1:6，乙醇的體積與提取液與乙醇的混合液體積比為90:100；

3）將步驟1）的藥物浸膏ⅰ和步驟2）的藥物浸膏ⅱ混合，再添加改性納米碳晶素，加去離子水定容，混合、靜置、精濾，收集濾液，即得外用藥劑。

實施例2

一種殺菌消炎外用藥劑，主要包括以下重量份的原料：改性納米碳晶素10份、苦參50份、地膚子100份、蛇床子90份、生地30份。

所述改性納米碳晶素由以下方法制得：1）酸洗：將納米碳晶素置于混合酸溶液中酸洗，混合酸溶液由h2so4:hno3按體積比為9:1組成；2）分散：將酸洗后的納米碳晶素分散到去離子水中超聲30min，制得納米鉆石烯分散液，納米碳晶素與去離子水的用量比例為10g︰50ml；3）于65℃下，添加質(zhì)量分數(shù)為20%的聚乙烯吡咯烷酮，攪拌條件下，反應(yīng)4h，冷卻、離心，取其沉淀物離心洗滌、烘干，即得。

殺菌消炎外用藥劑的制備方法，包括以下步驟：

1）將苦參和地膚子加入質(zhì)量濃度為90%乙醇中回流提取，提取3次，每次提取時間為1h，提取液過濾后，將濾液溶解于水中，靜置、過濾，取濾液干燥得藥物浸膏ⅰ；苦參和地膚子的質(zhì)量之和與乙醇的質(zhì)量比為1:10，提取液與水的體積比為1:4；

2）將蛇床子和生地加入水中回流提取，提取3次，每次提取時間為1h，提取液過濾后，向濾液中添加質(zhì)量濃度為50-90%的乙醇，靜置、過濾，取濾液干燥得藥物浸膏ⅱ；蛇床子和生地的質(zhì)量之和與乙醇的質(zhì)量比為1:10，乙醇的體積與提取液與乙醇的混合液體積比為60:100；

3）將步驟1）的藥物浸膏ⅰ和步驟2）的藥物浸膏ⅱ混合，再添加改性納米碳晶素，加去離子水定容，混合、靜置、精濾，收集濾液，即得外用藥劑。液體制劑可加乙醇定容。

實施例3

一種殺菌消炎外用藥劑，主要包括以下重量份的原料：改性納米碳晶素1份、苦參150份、地膚子30份、蛇床子30份、生地90份。

改性納米碳晶素的改性方法和外用藥劑的制備方法參照實施例1。

實施例4

一種殺菌消炎外用藥劑，主要包括以下重量份的原料：改性納米碳晶素4份、苦參80份、地膚子45份、蛇床子70份、生地70份。

改性納米碳晶素的改性方法和外用藥劑的制備方法參照實施例4。

實施例5

5.1殺菌效果實驗

試驗菌種金黃色葡萄球菌(atcc25923)、大腸桿菌(atcc25922)、白色念珠菌(atcc10231)和綠膿桿菌(atcc27853)由美國典型菌種保藏中心提供；消毒劑為按實施例1配制的藥劑；培養(yǎng)基為營養(yǎng)肉湯，營養(yǎng)瓊脂；稀釋液為pbs磷酸緩沖鹽溶液。根據(jù)由中華人民共和國衛(wèi)生部頒布的《消毒技術(shù)規(guī)范》2002版2.1.11.3.2項，復(fù)方制劑為本發(fā)明實施例1制成的樣品，實驗溫度為19-22℃，實驗重復(fù)3次。實驗結(jié)果如表1所示。

由表1可知，根據(jù)《一次性使用衛(wèi)生標準》(gb15979-2002)，藥劑在試驗條件下，本發(fā)明制成的樣品作用2min，對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌和綠膿桿菌殺菌率均大于99.8%，說明本發(fā)明的外用藥劑具有殺菌作用。因此，本發(fā)明的外用藥劑具有快速殺菌、高效抑菌的作用，能將引起皮炎-濕疹的常見菌完全殺死，從而治愈皮炎-濕疹。

5.2小鼠急性經(jīng)口毒性實驗

取18-22g昆明小鼠40只，雌雄各半，隨機分組，每組5只。本發(fā)明實施例2的藥劑稀釋后經(jīng)口灌胃，藥劑稀釋比例分別為2.30、4.72、10.04和21.82g/kg。觀察15天，觀察期每天觀察和記錄各組小鼠的中毒表現(xiàn)和死亡率，統(tǒng)計其死亡率。小鼠經(jīng)藥劑灌胃后，觀察期內(nèi)，低劑量組未出現(xiàn)明顯中毒癥狀，飲食、運動無明顯異常。高劑量組小鼠開始出現(xiàn)運動增多，隨后減少的現(xiàn)象，最后出現(xiàn)靜臥和拒食現(xiàn)象，最終死亡。小鼠死亡情況見表2。

由表2可知，供試藥劑樣品對雌、雄昆明鼠的經(jīng)口毒性ldso均為13.21g/kg，表明本發(fā)明的外用藥劑為無毒性、安全的、可靠的。

5.3急性皮膚刺激實驗

取2.0-2.5kg重的新西蘭兔10只，剪掉脊柱兩側(cè)皮毛，各暴露3cm×3cm的皮膚，采用自身對照法。將本發(fā)明的實施例3制得的樣品涂在右側(cè)皮膚暴露處，用一層油紙覆蓋，再覆蓋2.5cm×2.5cm的紗布，用無刺激性膠布和繃帶固定，左側(cè)暴露皮膚作為對照。4h后去除受試物，并用溫水清洗涂藥部位的皮膚，然后分別在1h、24h和48h后，觀察并記錄涂藥部位的皮膚反應(yīng)，按皮膚刺激反應(yīng)評分標準進行皮膚反應(yīng)積分和刺激強度評價。

結(jié)果表明，急性皮膚刺激實驗去除受試物后，48h內(nèi)所有動物涂藥部位無紅斑和水腫現(xiàn)象，因此，本發(fā)明的外用藥劑對動物皮膚無刺激性，屬于無刺激性藥物。

5.4對慢性皮炎-濕疹的治療效果試驗

將30只昆明小鼠隨機分為5組，即正常對照組、給藥治療組、模型組和陽性對照組(提前給藥10mg/kg)，每組6只。每組小鼠在實驗前1天于腹部去毛，面積約2cm×2cm，實驗當天以濃度為7%的二硝基氯苯丙酮溶液100μl涂于小鼠腹部致敏。5天后在小鼠右耳內(nèi)側(cè)外涂1%的二硝基氯苯丙酮溶液5μl激發(fā)，同時左耳涂丙酮作對照。每隔3天激發(fā)1次，每組共計激發(fā)4次。各用藥組于致敏當天給予涂藥劑于耳雙面，每天1次，正常對照組和模型組灌以等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉；給藥治療組外用本發(fā)明實施例4的樣品（給藥量為30和60mg/kg）；陽性對照組在試驗致敏之前，提前外用本發(fā)明實施例4的樣品（給藥量為10mg/kg）。末次激發(fā)后24h處死小鼠，檢測各項指標。

于誘導(dǎo)前及每次激發(fā)后24h用千分卡尺單盲法測量右耳中部厚度，計算激發(fā)前后右耳厚度差。以耳腫脹作為皮炎指標。藥劑治療給藥對小鼠耳腫脹度的影響如下表3所示。

由表3可知，與正常組相比，模型組小鼠右耳明顯腫脹，外用藥劑治療給藥和陽性對照組能明顯改善慢性接觸性皮炎小鼠右耳腫脹情況，給藥各劑量組之間效果無差異，給藥各劑量組與陽性對照組無差異。

末次激發(fā)后24h處死實驗動物，用直徑0.9cm的金屬打孔器在耳中部打孔，用電子天平稱得每個組織塊重量，計算左右耳重量差。藥劑治療給藥對小鼠左右耳重量差的影響，如下表4所示。

與正常組相比，模型組小鼠右耳明顯腫脹，重量比左耳明顯增加，給藥組(60mg/kg)能改善右耳腫脹情況，給藥劑量組60mg/kg與30mg/kg有差異，給藥劑量組(60mg/kg)與陽性對照組無差異。

將右耳片制成石蠟塊備用，將石蠟塊切成5μm后的切片，蘇木精-伊紅(he)染色，在光鏡下觀察炎癥細胞浸潤情況。結(jié)果表明，與正常組相比，模型組小鼠耳片表皮角質(zhì)化過厚、增厚，真皮以單核細胞浸潤為主，血管擴張。給藥組和陽性對照組能減輕炎性細胞的浸潤，改善耳片病理改變。

小鼠經(jīng)眼球摘除取血1ml，1500r/min離心20min，取出血清置于微量離心管內(nèi)，-80℃下冷藏備用，采用放射免疫測定法測定血清il-2和il-4值，步驟按il-2和il-4試劑盒說明進行。結(jié)果表明，與正常組相比，模型組小鼠血清il-2水平明顯降低，il-4水平明顯升高，給藥組和陽性對照組能升高小鼠降低的il-2水平，降低小鼠升高的il-4水平，給藥不同劑量組之間及陽性對照組有差異，給藥組(60mg/kg)和陽性對照組無差異。

本發(fā)明的外用藥劑給藥治療能明顯減輕模型小鼠耳組織腫脹，修復(fù)皮損，改善耳組織病理變化，減少耳組織炎性細胞浸潤，減輕炎癥反應(yīng)；給藥組能升高模型小鼠降低的il-2水平，降低模型小鼠升高的il-4水平。實驗結(jié)果表明本發(fā)明的中藥復(fù)方藥劑對小鼠慢性皮炎-濕疹有治療作用，主要作用機制可能是通過調(diào)節(jié)t細胞分泌的il-2和il-4之間的平衡。