本發(fā)明涉及一種骨創(chuàng)面止血組合物及其制備方法和應(yīng)用，具體涉及一種可塑性強、粘附性好、可吸收、不影響創(chuàng)面愈合的骨創(chuàng)面止血組合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于骨止血
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：臨床上，松質(zhì)骨結(jié)構(gòu)松散、血運豐富，創(chuàng)面出血多為滲血，松質(zhì)骨創(chuàng)面出血不止或難以徹底止血，是因為骨創(chuàng)面組織結(jié)構(gòu)松散，血運豐富形成密布的血竇，組織中血管收縮性差，血小板聚集，血凝塊難以粘附于骨創(chuàng)面。骨創(chuàng)面出血難以靠血管收縮自行止血，術(shù)中亦難以靠電凝、鉗夾、止血紗布、明膠海綿填塞等常規(guī)方法止血。臨床常用骨蠟進行松質(zhì)骨創(chuàng)面止血。骨蠟的主要成分為蜂蠟、麻油等，骨蠟是經(jīng)消毒的蜂蠟和凡士林的混合物，具有良好的軟化性能，用手搓揉變軟后能塑型，無毒。骨蠟的作用原理是用物理方法堵住骨髓部毛細血管滲血，可用于各種急救病人骨滲血時止血。目前臨床常用的骨蠟正是通過封閉骨間的出血通路，控制骨損傷出血這一機械填塞的原理進行止血，其止血作用快速、有效，但其生物相容性差且難以被機體降解、吸收，應(yīng)用后將作為異物長期存留體內(nèi)，一方面降低了組織的抗感染能力，使術(shù)后感染發(fā)生的風(fēng)險增加；另一方面也阻礙骨創(chuàng)面的修復(fù)，形成異物肉芽腫引起局部疼痛、滲液等癥狀。國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)從人工合成高分子材料、生物制劑等方面進行了骨蠟替代產(chǎn)品的研究工作，如膠原纖維，明膠海綿，氧化纖維素、聚乳酸和多聚糖等。動物實驗和臨床應(yīng)用表明：雖然這些物質(zhì)生物相容性較好、具有可降解性，但大多數(shù)為粉狀、膠狀，與創(chuàng)面黏合性較差，術(shù)中不易操作，易被血流沖走。此外，此類高分子替代物質(zhì)還存在原料昂貴、物理性狀不易改性、材料安全性等尚未解決的實際問題，因此，目前尚未能將其轉(zhuǎn)變?yōu)檫m宜于骨創(chuàng)面止血的理想材料，仍需進一步深入研究和改進。目前，還有一些關(guān)于此類產(chǎn)品的專利公開，如下：申請?zhí)?01210067344.5的專利公開了一種在人體或動物體內(nèi)完全降解、可替代骨蠟、不改變醫(yī)生使用習(xí)慣的骨創(chuàng)面止血和促進骨組織愈合的材料，該材料包括低聚糖、多聚糖或低聚糖與多聚糖的混合物，賦形劑為多羥基醇中的一種或多種，植物油中的一種或多種，乳化劑中的一種或多種。該材料糖類基質(zhì)含量大，親水性的糖類和多羥基醇與疏水性的植物油組成的膏體穩(wěn)定性欠佳，若開發(fā)成上市產(chǎn)品則存在有效期較短、穩(wěn)定性較差、吸水性較低的缺陷。并且，該產(chǎn)品制備過程需要在真空條件下共混后立即放入0-4℃條件下冷卻后制得。該專利公開的止血材料是目前可降解材料中性能較為優(yōu)良一種骨止血劑，但該止血劑的制備工藝較為復(fù)雜，工藝中既涉及高溫制備，還涉及真空反應(yīng)，還涉及低溫冷卻，且親水性和疏水性介質(zhì)組成的膏體穩(wěn)定性欠佳，若開發(fā)成上市產(chǎn)品則效期較短。同時，考慮生產(chǎn)批量生產(chǎn)難度較大，生產(chǎn)成本較高，恐難以實現(xiàn)批量生產(chǎn)，不能較好的解決骨蠟市場目前存在的問題。申請?zhí)?00410040076.3的專利公開了一種外科或骨科手術(shù)中用的可吸收骨止血劑，其材料包括殼聚糖或改性殼聚糖及其他物質(zhì)，殼聚糖為止血材料中較為常見的材料，其止血原理主要是利用其本身所帶的正電荷，能夠加快凝血，富集血小板從而達到止血效果，再就是此材料為生物材料可降解可吸收。但是殼聚糖類材料屬于動物源性材料，對人體有一定的潛在危害。以殼聚糖為主要成分形成的膠泥作為骨止血劑，其吸水性、粘附力、生物相容性等其他性能均未見報道。一般殼聚糖類材料的皮內(nèi)刺激較高，處理不好則具有較大的生物刺激。再就是該材料受熱、輻照易變質(zhì)，滅菌、儲存和運輸都需要特殊設(shè)計，從而材料成本會大大增加。申請?zhí)?00910076033.3的專利公開了一種可降解型骨腔隙內(nèi)止血材料及其制備方法，包括海藻酸鈉、醫(yī)用淀粉和無機粒子，海藻酸鈉水凝膠的粘附力較差。該材料吸水性、粘附力、生物相容性、可塑性、止血效果、降解特性等其他性能均未見報道。申請?zhí)?01410780581.5的專利公開了一種殼聚糖止血紗布及其制備方法，該止血紗布含有殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羥乙基淀粉、角鯊?fù)?、中藥成分、水，采用靜電紡絲法紡織成纖維。該發(fā)明中，首先殼聚糖為動物源性材料，對人體有一定的潛在危害。以殼聚糖為主要成分形成的紗布作為骨創(chuàng)面的止血材料，其吸水性、粘附力、生物相容性等其他性能均未見報道。一般殼聚糖類材料的皮內(nèi)刺激較高，處理不好則具有較大的生物刺激，再就是紗布形態(tài)的止血材料一般很難在出血骨創(chuàng)面粘附牢固。再就是該材料受熱、輻照易變質(zhì)，滅菌、儲存和運輸都需要特殊設(shè)計，從而材料成本會大大增加。申請?zhí)?00510117740.4的專利公開了一種可生物降解及吸收的聚合物納米纖維膜材料及其制備方法和用途，該產(chǎn)品為納米纖維膜，含有明膠，透明質(zhì)酸、殼聚糖、膠原蛋白、肝素、聚乙交酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、纖維素類、淀粉類等高分子材料中的一種或多種，碳酸鈣、鉻酸鉀、磷酸氫該等無機增強劑成分。該發(fā)明用作止血材料時骨創(chuàng)面血竇；其次，塑性較差，對于不同形狀的骨創(chuàng)面無法差異性填塞和涂抹；另外，該發(fā)明中很多成分如明膠、殼聚糖、膠原蛋白為動物源性材料，有潛在生物危害；最后，該發(fā)明中很多高分子成分，用于骨創(chuàng)面止血時，降解時間較長，阻礙骨組織愈合。另外很多報道中公開了利用聚合物如聚氧乙烯、聚氧丙烯、聚乳酸等聚合物制備骨止血劑，該類材料是具有一定分子量的高分子聚合物，雖能降解吸收，但降解速度慢，降解周期比較長，阻礙骨愈合；另外，吸水性較差，不能較好的吸收血液，粘附力和可塑性較差，臨床操作不方便。理想的骨止血材料應(yīng)具有如下優(yōu)點：①質(zhì)地柔軟、可塑性強，能迅速填充創(chuàng)面的裂隙及血竇；②具有骨粘附性，能夠牢固黏附創(chuàng)面，一定時間內(nèi)不脫落；③生物相容性好、無毒副作用、組織反應(yīng)小；④止血作用完成后可逐漸降解、被機體組織吸收，不影響創(chuàng)面愈合。從上面現(xiàn)有技術(shù)的了解看，目前還沒有很好的能滿足理想的骨止血材料出現(xiàn)，需要進一步研究和改進。技術(shù)實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有骨止血材料存在的不足，本發(fā)明提供了一種骨創(chuàng)面止血組合物，該止血組合物骨粘附性良好、可塑性好，能機械填塞骨創(chuàng)面裂隙和血竇，還能加速自然凝血過程，止血效果好。組合物在人體或動物體內(nèi)易降解，可被吸收代謝，生物相容性好、對機體無刺激、無毒副作用、安全性高，不影響創(chuàng)面愈合。本發(fā)明還提供了上述骨創(chuàng)面止血組合物的制備方法，該方法制備簡單，易于實施，成本低，所得產(chǎn)品具有理想的硬度、韌性及粘度，可塑形可涂抹好、止血效果好，無毒副作用、組織反應(yīng)小，不影響創(chuàng)面愈合，臨床使用方便。本發(fā)明還提供了上述骨創(chuàng)面止血組合物在制備人或動物骨創(chuàng)面止血制品中的應(yīng)用，該產(chǎn)品可以用于在手術(shù)操作中人或動物的所有骨創(chuàng)面出血的止血。進一步的，本發(fā)明提供的骨創(chuàng)面止血組合物，由溶劑基質(zhì)、增稠劑、賦形劑和離子鹽組成，所述溶劑基質(zhì)為多羥基醇，所述離子鹽為無機鈣鹽和無機鐵鹽中的一種或多種。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，所述溶劑基質(zhì)為多羥基醇，該溶劑基質(zhì)的作用是為增稠劑和賦形劑提供一個基礎(chǔ)環(huán)境，可是使粉料或液體形成一種粘附力較強、可塑性較好的膏劑或膠劑。此外，溶劑基質(zhì)含量的變化會引起可塑性、粘附力、吸水特性和降解時間等性能的變化。所述多羥基醇為丙三醇、聚乙二醇-400、聚乙二醇-300和丙二醇中的一種或兩種，優(yōu)選為丙三醇和聚乙二醇-400中的一種或兩種。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，溶劑基質(zhì)在骨創(chuàng)面止血組合物中的重量百分含量為30％～80％，優(yōu)選為50-70％。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，所述增稠劑的作用是提高組合物的粘附力和可塑性，所述增稠劑為羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、卡拉膠和卡波姆中的一種或兩種。當增稠劑選擇特殊的粘度時，所得產(chǎn)品性能更優(yōu)。羧甲基纖維素鈉按黏度分為：超高黏羧甲基纖維素鈉、高黏羧甲基纖維素鈉、中黏羧甲基纖維素鈉、低黏羧甲基纖維素鈉，本發(fā)明優(yōu)選醫(yī)用級的高黏羧甲基纖維素鈉、中黏羧甲基纖維素鈉或低黏羧甲基纖維素鈉。羥丙基甲基纖維素優(yōu)先選用標稱黏度為6～15000cps的羥丙基甲基纖維素，更優(yōu)選選用50～1500cps的羥丙基甲基纖維素。羥乙基纖維素優(yōu)先選用標稱黏度為250-400cps、1500-2500cps、3500-5500cps或4500-6500cps的羥乙基纖維素，更優(yōu)選選用標稱黏度為1500-2500cps和3500-5500cps的羥乙基纖維素中的一種；卡拉膠優(yōu)先選用醫(yī)用級別?？ú穬?yōu)先選用卡波姆910、卡波姆934、卡波姆940或卡波姆941，更優(yōu)選選用卡波姆934和卡波姆940中的一種。所述標稱黏度為采用旋轉(zhuǎn)粘度計測得到的黏度。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，增稠劑在骨創(chuàng)面止血組合物中的重量百分含量為0.5％～10％，優(yōu)選為5-7％。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，所述賦形劑的作用是提高產(chǎn)品的可塑性、粘附力和吸水性，賦形劑為羧甲基淀粉鈉、馬鈴薯淀粉、可溶性淀粉、海藻酸鈉、糊精和糊精衍生物中的一種或多種。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，賦形劑在骨創(chuàng)面止血組合物中的重量百分含量為10％～55％，優(yōu)選為20-45％。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，所述離子鹽的作用是作為凝血劑，加速和輔助止血。離子鹽為無機鈣鹽、無機鐵鹽，或者為無機鈣鹽和無機鐵鹽的混合物。所述無機鈣鹽為硫酸鈣、氯化鈣、硝酸鈣，所述無機鐵鹽為氯化鐵、硝酸鐵、硫酸鐵，所述離子鹽可以從這些無機鈣鹽和無機鐵鹽中進行選擇，例如可以選擇無機鈣鹽中的一種或多種，可以選擇無機鐵鹽中的一種或多種，可以無機鈣鹽和無機鐵鹽各選一種，可以無機鈣鹽和無機鐵鹽各選多種，可以無機鈣鹽選擇一種無機鐵鹽選擇多種，也可以無機鐵鹽選擇一種無機鈣鹽選擇多種。上述骨創(chuàng)面止血組合物中，離子鹽在骨創(chuàng)面止血組合物中的重量百分含量為0.05％～5％，優(yōu)選為1-3％。本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物的制備方法包括以下步驟：a.將溶劑基質(zhì)和增稠劑混合，在20℃～75℃下攪拌，直至形成粘稠的溶劑基質(zhì)，溶脹過夜；b.在攪拌、共混或捏合條件下將賦形劑緩慢加入到溶脹完全的粘稠的溶劑基質(zhì)中，加完后繼續(xù)攪拌、共混或捏合，直至形成均一膏體或膠劑；c.在攪拌、共混或捏合下將離子鹽緩慢加入膏體或膠劑中，加完后繼續(xù)攪拌、共混或捏合，直至形成均一膏體或膠劑，即為骨創(chuàng)面止血組合物。本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物為一種均一的粘稠膏體或膠劑，其同時具有優(yōu)良的涂抹操作性、可塑性、粘附性和優(yōu)異的吸血特性，可吸收降解，不會影響創(chuàng)面愈合，對機體也無毒副刺激，可以制成膏劑或涂抹劑等劑型。在實際使用時，為了適用于不同的創(chuàng)面形狀、部位，可以將該均一膏體或膠劑制成不同的形狀，例如可以將該均一膏體直接放入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。也可以將其用不同的模具制成片狀、柱狀或其他形狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。也可以將其裝于各種醫(yī)用操作工具中，例如醫(yī)用涂抹器、醫(yī)用軟管、醫(yī)用注射器等中，然后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。但無論該膏體或膠劑制成何種形狀、保存于何種容器中，均具有很好的可塑性。上述步驟a中，升溫至20℃～75℃繼續(xù)攪拌，直至形成粘稠的溶劑基質(zhì)。大約需30min左右。上述步驟b和c中，通過攪拌、共混或捏合的方式進行混合，這些操作可以在帶有攪拌裝置的容器、乳化攪拌機、共混機或捏合機中完成。上述步驟b中，形成均一膏體的時間約為1-2h；步驟c中，形成均一膏體的時間約為0.5-1h。本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物具有良好的任意塑形特點，可根據(jù)骨創(chuàng)面的特點由臨床醫(yī)生按需塑形，可涂抹、可填塞，因此可以用于各種骨創(chuàng)面出血的止血，臨床應(yīng)用效果好?；诖?，本發(fā)明還提供了上述骨創(chuàng)面止血組合物在制備人或動物骨創(chuàng)面止血制品中的應(yīng)用。其中，所述骨創(chuàng)面可以是各種原因造成的骨創(chuàng)傷所形成的創(chuàng)面。本發(fā)明具有以下有益效果：1、本組合物具有良好的任意塑形特點，可根據(jù)骨創(chuàng)面的特點由臨床醫(yī)生按需塑形，可涂抹、可填塞，同時該組合物具有良好的骨粘附性，依靠其特有的粘結(jié)強度可牢固地粘附于骨創(chuàng)面，可填塞骨創(chuàng)面的出血部位(血竇和裂隙)，起到很好的止血效果。此外，該組合物具有較高的吸水特性，液體吸收性不小于30倍，與血液接觸后，可以吸收骨創(chuàng)面滲出的血液中的水分、濃縮血液，聚集血液中的血小板、紅細胞、凝血蛋白，加速自然凝血過程，從而提高骨創(chuàng)面止血效果。2、本發(fā)明組合物ph為中性，各項指標控制嚴格，所采用的溶劑基質(zhì)、增稠劑和賦形劑在人體或動物體內(nèi)易降解，降解后可被機體吸收代謝，在人體內(nèi)或動物體內(nèi)無殘留，對機體無任何刺激，無毒副作用，安全性高，生物相容性好，避免了使用者異物反應(yīng)和組織炎癥等并發(fā)癥的出現(xiàn)，不影響創(chuàng)面愈合。3、本發(fā)明組合物制備方法簡單，使用方便，具有理想的硬度、韌性及粘度，可塑形可涂抹，可降解可吸收，止血效果好，臨床使用方便，在人或動物的骨創(chuàng)面止血方面有很好的應(yīng)用前景。4、本發(fā)明的組合物添加生長因子、磷酸鈣、羥基磷灰石、碳酸鈣、硫酸鈣、生物活性玻璃及其他促進骨生長的物質(zhì)后可被開發(fā)為具有促進骨愈合的骨止血劑；本發(fā)明的組合物添加抗生素或其他有治療性功能的藥物后可被開發(fā)成為具有抗感染或其他治療效用的骨止血劑。具體實施方式下面結(jié)合具體實施實例對本發(fā)明作進一步詳細說明。實施例1本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表1所示：表1.實施例1配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取丙三醇、醫(yī)用級的高黏羧甲基纖維素鈉，攪拌條件下得到均一的溶液。對該溶液緩慢升溫，在30℃溫度下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。2.按配方表稱取羧甲基淀粉鈉，慢慢加入到溶脹完全的粘稠溶劑基質(zhì)中，邊加入邊強力攪拌，直至形成均一膏體，約2h；3.按配方表稱取硫酸鈣，緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)攪拌，直至形成均一膏體，約1h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。實施例2本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表2所示：表2.實施例2配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取丙三醇、聚乙二醇-400、標稱黏度為50～1500cps的羥丙基甲基纖維素和標稱黏度為1500-2500cps的羥乙基纖維素，攪拌條件下得到的均一溶液。對該溶液緩慢升溫，在75℃溫度下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。2.將得到的粘稠溶劑基質(zhì)放入捏合機中，開動捏合機攪拌，按配方表稱取海藻酸鈉、糊精，將這兩者混勻，然后慢慢加入到捏合機中，邊加入邊捏合直至形成均一膏體，約1h；3.按配方表稱取氯化鈣、硫酸鐵，依次緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)捏合，直至形成均一膏體，約0.5h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。實施例3本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表3所示：表3.實施例3配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取丙二醇、聚乙二醇-300、醫(yī)用級別卡拉膠、標稱黏度為250-400cps的羥乙基纖維素和標稱黏度為4000～9000cps的羥丙基甲基纖維素，攪拌條件下得到的均一溶液。對該溶液緩慢升溫，在50℃溫度下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。2.將得到的粘稠溶劑基質(zhì)放入捏合機中，開動捏合機攪拌，按配方表稱取馬鈴薯淀粉、羧甲基淀粉鈉，將這兩者混勻，然后慢慢加入到捏合機中，邊加入邊捏合，直至形成均一膏體，約1h；3.按配方表稱取硝酸鐵，緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)捏合，直至形成均一膏體，約0.5h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。實施例4本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表4所示：表4.實施例4配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取聚乙二醇-400和卡波姆934，放入乳化攪拌機中，在室溫下充分攪拌，直至形成粘稠溶劑基質(zhì)，溶脹過夜。2.將得到的粘稠溶劑基質(zhì)放入捏合機中，開動捏合機攪拌，按配方表稱取可溶性淀粉、羧甲基淀粉鈉和糊精，將這三者混勻，然后慢慢加入到捏合機中，邊加入邊捏合，直至形成均一膏體，約1.5h；3.按配方表稱取硝酸鈣，緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)捏合，直至形成均一膏體，約0.5h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。實施例5本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表5所示：表5.實施例5配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取丙二醇、丙二醇和標稱黏度為4500-6500cps的羥乙基纖維素，攪拌條件下得到的均一溶液。對該溶液緩慢升溫，在40℃溫度下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。2.將得到的粘稠溶劑基質(zhì)放入捏合機中，開動捏合機攪拌，按配方表稱取糊精，慢慢加入到捏合機中，邊加入邊捏合，直至形成均一膏體，約1.5h；3、按配方表稱取氯化鐵，緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)捏合，直至形成均一膏體，約0.5h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。實施例6本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表6所示：表6.實施例6配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取丙三醇、卡波姆934、醫(yī)用級的低黏羧甲基纖維素鈉和標稱黏度為3500-5500cps的羥乙基纖維素，攪拌條件下得到的均一溶液。室溫下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。2.將得到的粘稠溶劑基質(zhì)放入捏合機中，開動捏合機攪拌，按配方表稱取糊精和羧甲基淀粉鈉，將這兩者混勻，然后慢慢加入到捏合機中，邊加入邊捏合，直至形成均一膏體，約1h；3.按配方表稱取氯化鐵，緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)捏合，直至形成均一膏體，約1h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。實施例7本發(fā)明骨創(chuàng)面止血組合物配方如下表7所示：表7.實施例7配方表該骨創(chuàng)面止血組合物制備方法如下：1.按配方表稱取丙三醇、標稱黏度為10000-15000的羥丙基甲基纖維素和卡波姆910，攪拌條件下得到的均一溶液。對該溶液緩慢升溫，在30℃溫度下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。2.按配方表稱取羧甲基淀粉鈉、馬鈴薯淀粉和糊精，在強力攪拌下依次慢慢加入到溶脹完全的粘稠溶劑基質(zhì)中，邊加入邊攪拌，直至形成均一膏體，約2h；3.按配方表稱取氯化鐵、氯化鈣，緩慢加入到上述膏體中，繼續(xù)攪拌，直至形成均一膏體，約1h。4.將步驟3得到的膏體裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或利用壓片機制成片狀和柱狀，然后用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于醫(yī)用注射器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或裝于給凝膠器中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。對比例1配方為(％w/w)：溶劑基質(zhì)：丙三醇35％、甘露醇30％，增稠劑：pvp5.5％、黃原膠1.5％，賦形劑：可溶性淀粉26％，離子鹽：磷酸二氫鈣2％。按照實施例2的方法，將丙三醇、甘露醇、pvp、黃原膠混合，攪拌條件下得到的均一溶液。對該溶液緩慢升溫，在75℃溫度下攪拌30min，使均一溶液變?yōu)檎吵砣軇┗|(zhì)，溶脹過夜。將得到的粘稠溶劑基質(zhì)放入捏合機中，開動捏合機攪拌，緩慢加入可溶性淀粉，邊加入邊捏合直至混合均勻，然后緩慢加入磷酸二氫鈣，繼續(xù)捏合，直至混合均勻。將所得混合物裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或加工成片狀、柱狀或其他形狀，用淋膜紙包裝后真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存。對比例2配方為(％w/w)：麥芽糖10％，羧甲基纖維素20％，羥丙基淀粉15％，殼聚糖10％，明膠10％，丙三醇30％，吐溫5％。將丙三醇和吐溫混合，升溫至40℃，密封攪拌1h，然后加入麥芽糖、羧甲基纖維素、羥丙基淀粉、殼聚糖和明膠，在60℃下真空攪拌4-5h。將所得混合物裝入封閉膏劑盒中，真空密封于鋁箔袋中，滅菌后常溫保存；或用淋膜紙包裝后真空密封于鋁塑袋中，滅菌后常溫保存。本發(fā)明產(chǎn)品的有效性、穩(wěn)定性、安全性、生物相容性、止血性等優(yōu)良性能可通過以下試驗對本發(fā)明優(yōu)點進行證明。驗證實例1：有效性和穩(wěn)定性試驗根據(jù)yy/t0681.1-2009《無菌醫(yī)療器械包裝試驗方法第1部分：加速老化試驗指南》中規(guī)定的方法，我們對滅菌后的樣品進行了加速老化試驗，觀察加速老化后的樣品的性能是否穩(wěn)定，性能是否良好，以評價樣品的穩(wěn)定性。加速老化試驗評價指標主要有：1.酸堿度：滅菌后的樣品放于60℃恒溫恒濕箱中，分別于0個月、3個月后取出，按一定比例與純化水混合，攪拌均勻，浸提24h后所得的酸堿度；2.涂抹操作性：滅菌后的樣品放于60℃恒溫恒濕箱中，分別于0個月、3個月后取出，將樣品拿在手中涂抹在預(yù)先被水浸泡過的樣板上，觀察是否容易涂抹均勻，樣品是否能牢固的粘附在樣板上；3.塑形性：滅菌后的樣品放于60℃恒溫恒濕箱中，分別于0個月、3個月后取出，用手任意揉捏塑形，評價塑形過程中的難易程度，觀察塑形后狀態(tài)是否良好；4.吸水性：滅菌后的樣品放于60℃恒溫恒濕箱中，分別于0個月、3個月后取出，浸泡于足量的水中，樣品完全分散均勻后，分離出水分，計算樣品吸收的水分是樣品重量的多少倍。5.強度：滅菌后的樣品放于60℃恒溫恒濕箱中，分別于0個月、3個月后取出，按照行業(yè)標準bs757:1975規(guī)定，利用質(zhì)構(gòu)儀的bloom系統(tǒng)，測試樣品具有的強度，此指標影響產(chǎn)品的涂抹操作性、塑形性，也是樣品性能穩(wěn)定的主要參數(shù)。將上述實施例和對比例產(chǎn)品分別進行加速老化試驗，結(jié)果如下表8和9所示：表8.加速老化試驗前即0個月樣品性能表從上述結(jié)果可以看出，本發(fā)明配方和工藝制備出的樣品性能優(yōu)良，可根據(jù)需要任意塑形，進行骨創(chuàng)面止血時容易涂抹，且黏附牢固，因具有優(yōu)良的液體吸收性，止血效果良好，非常適合臨床醫(yī)生的臨床操作。表9.加速老化試驗3個月后樣品性能表從上述結(jié)果可以看出，經(jīng)過老化試驗后，樣品性能穩(wěn)定，仍具備臨床醫(yī)生進行骨創(chuàng)面止血時的要求。按標準規(guī)定，60℃加速老化3個月，相當于室溫存放約兩年的時間，此實驗結(jié)果表明，本發(fā)明工藝配方所得到的樣品不僅批量生產(chǎn)容易實現(xiàn)、滿足臨床的操作要求，而且滿足一般上市產(chǎn)品24個月有效期內(nèi)仍性能優(yōu)良的要求，具有比較大的實際意義。驗證實例2：安全性和生物相容性試驗為保證用于臨床時的安全性，對樣品進行了生物相容性的評價。評價方法如下：1.細胞毒性試驗1.1供試液制備：取樣品在含血清細胞培養(yǎng)基浸提，浸提條件為37±1℃、24±2h。1.2細胞懸液制備將已培養(yǎng)48h～72h生長旺盛的細胞用消化液消化后加入細胞培養(yǎng)液，吸管吹打混勻后用血球計數(shù)板在顯微鏡下計數(shù)，按下式計算細胞密度：c＝104×n/4式中：c----細胞密度，單位為個每毫升(個/ml)；n----計數(shù)板四角四大格內(nèi)細胞總數(shù)，單位為個。根據(jù)實測細胞密度，加入適量細胞培養(yǎng)液配制成試驗要求密度的細胞懸液備用。1.3將配制好的1×104/ml細胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板，設(shè)空白對照、陰性對照、陽性對照和供試品組，每組各設(shè)至少6孔，每孔接種100μl細胞懸液。置二氧化碳培養(yǎng)箱(含體積分數(shù)5％的二氧化碳氣體)37℃培養(yǎng)24h后，棄去原培養(yǎng)液。空白對照組加入新鮮細胞培養(yǎng)液，陰性對照組加入陰性對照品浸提液，陽性對照組加入陽性對照溶液或陽性對照品浸提液，供試品組加入試驗樣品浸提液，每孔100μl，置二氧化碳氣體培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)72h。于更換培養(yǎng)液后的72h，置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)。每孔加入20μl質(zhì)量濃度為5g/l的四唑鹽溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h后棄去孔內(nèi)液體，加入150μldmso,置振蕩器上震蕩10min，在酶標儀570nm和630nm波長下測定吸光度，按下式計算相對增值率(rgr)。rgr＝a/a0×100％式中：rgr----相對增值率，％；a----供試品組(陰性、陽性組)吸光度；a0---空白對照組吸光度。根據(jù)rgr按下表分級標準判定。陰性對照組的反應(yīng)應(yīng)不大于1級，陽性對照組至少為3級反應(yīng)。如陰性對照組合陽性對照組反應(yīng)不成立時應(yīng)重新試驗。細胞毒性反應(yīng)分級表級別相對增值率/％0≥100180～99250～79330～4940～29結(jié)果判定：在陰性對照和陽性對照產(chǎn)生預(yù)期反應(yīng)的情況下，分析判定供試品細胞毒性反應(yīng)程度。2.皮內(nèi)反應(yīng)2.1供試液制備：取樣品在含血清細胞培養(yǎng)基浸提，浸提條件為37±1℃、24±2h。2.2試驗步驟試驗前4～18h，徹底除去動物背部脊柱兩側(cè)被毛，以備注射浸提液。在每只兔脊柱一側(cè)的5個點皮內(nèi)注射0.2ml用極性溶劑制備的浸提液。同樣在每只兔脊柱同一側(cè)的后五個點皮內(nèi)注射0.2ml極性溶劑対照液。在每只兔的脊柱另一側(cè)注射用非極性溶劑制備的浸提液和非極性溶劑對照組，操作步驟同上。注射后即刻并在24h、48h和72h觀察記錄各注射部位的狀況。按下表中的評分系統(tǒng)進行組織反應(yīng)評分，并記錄試驗結(jié)果。3.溶血試驗取樣品在37±1℃、72±2h下浸提，浸提介質(zhì)為生理鹽水，以生理鹽水作為陰性對照，滅菌蒸餾水為陽性對照。各加稀釋后的新鮮兔血，取上清液，用紫外分光光度計在545nm波長下，測定各自的光密度值(od)值。溶血率按下式計算：溶血率(％)＝(dt-dnc)/(dpc-dnc)式中，dt為供試品吸光度；dnc為陰性對照吸光度；dpc為陽性對照吸光度。供試品的溶血率在5％以內(nèi)為符合規(guī)定。4.熱原試驗取樣品在含血清細胞培養(yǎng)基浸提，浸提條件為37±1℃、72±2h，得供試品溶液。取適用的家兔3只測定其正常體溫后15分鐘以內(nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫熱至約38℃的供試品溶液，然后每隔30分鐘按前法測量其體溫1次，共測6次，以6次體溫中最高的一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高溫度。在3只家兔中，體溫升高均低于0.6℃，并且3只家兔體溫升高總和低于1.3℃。判定供試品的熱原檢查符合規(guī)定。5.急性全身毒性試驗取樣品在含血清細胞培養(yǎng)基浸提，浸提條件為37±1℃、72±2h，得供試液。選用健康檢疫合格的小鼠，每組5只，經(jīng)尾靜脈/腹腔注射供試液，給樣劑量為50ml/kg。注射后觀察小鼠即時反應(yīng)，并于給樣后4h、24h，48h，72h觀察和記錄各組動物的體重增長狀況及一般狀態(tài)、毒性表現(xiàn)和死亡動物數(shù)。體重明顯增長，無死亡、一般行為檢查及剖解無異常、無毒性反應(yīng)即為合格。6.骨植入試驗試驗樣品原樣，骨植入1周、4周、12周，組織學(xué)觀察應(yīng)良好。按照gb/t16886.6—1997規(guī)定的骨植入方法將滅菌后的樣品制備成直徑為2cm，長6cm的圓柱，填入兔股骨鉆出的骨腔中。上述實施例和對比例產(chǎn)品分別進行安全性和生物相容性試驗，實驗結(jié)果如下表10所示：表10.安全性和生物相容性評價結(jié)果經(jīng)過重復(fù)的生物學(xué)評價試驗，每次嚴格操作，最后結(jié)果表明，本發(fā)明工藝配方得到的樣品安全無刺激，且性能穩(wěn)定，可安全用于臨床應(yīng)用。驗證實例3：止血試驗選用健康成年普通級新西蘭白兔，雌雄不限，體重2.5～3.0kg。飼養(yǎng)溫度：20～26℃；相對濕度：40～70％；光照：15～20lx；飼喂全價顆粒兔飼料，自由飲水。1.髂骨止血髂骨松質(zhì)骨面積較大，骨孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)豐富，且孔徑較大，是生物體骨骼骨創(chuàng)面出血最多的部位，在此部位觀察骨止血組合物的止血效果比較具有代表性。取實驗動物5只，用2％戊巴比妥鈉經(jīng)耳靜脈注射麻醉，脫毛備皮，術(shù)區(qū)消毒，鋪好無菌手術(shù)洞巾，分別做雙側(cè)髂嵴外側(cè)切口，剝離骨膜，漏出髂骨外板，利用直徑2.5mm的骨鉆鉆出約4mm深的創(chuàng)面，創(chuàng)面出血后，利用本發(fā)明實施例2的樣品進行涂抹止血，觀察止血效果。創(chuàng)面涂抹上本發(fā)明樣品后，本發(fā)明樣品能牢固粘附于骨創(chuàng)面上，周圍無滲血，樣品涂抹完畢后滲血被止住，止血迅速。另利用骨鉗咬斷髂骨外板約1mm厚度的表面骨部分，顯露髂骨表面直徑約1cm的創(chuàng)面，表面出血迅速且出血量較大，利用本發(fā)明實施例7樣品進行涂抹止血，觀察止血效果。因為骨創(chuàng)面面積較大，涂抹一層本發(fā)明樣品后稍有滲血，再補加樣品涂抹量后，無滲血。兩個部位的止血時間均未超過5min。整個過程操作方便，涂抹簡單，止血效果良好。取實驗動物3只，按照上面同樣的方法在髂骨外板上鉆出約4mm深的創(chuàng)面，創(chuàng)面出血后用對比例1的樣品進行涂抹止血，觀察止血效果。創(chuàng)面涂抹上對比例1樣品后，樣品無法粘附于滲血骨創(chuàng)面，未有效止血。同時，采用同樣的方法利用骨鉗咬斷髂骨外板約1mm厚度的表面骨部分，顯露髂骨表面，用對比例1的樣品進行涂抹止血，觀察止血效果。創(chuàng)面涂抹上對比例1樣品后，樣品無法粘附于滲血滲血骨創(chuàng)面，未有效止血。2.顱骨止血顱骨部位因具有較高的顱內(nèi)壓，顱骨部位若有骨缺損而出血時，一般因壓強太大出血量較大較急促比較難止血。取實驗動物5只，用2％戊巴比妥鈉經(jīng)耳靜脈注射麻醉，脫毛備皮，術(shù)區(qū)消毒，鋪好無菌手術(shù)洞巾，行頭部正中長約3cm切口，剝離骨膜，漏出頭部頂骨，利用骨鉆和咬骨鉗將頂骨撬開不規(guī)則形狀的創(chuàng)面，創(chuàng)面出血后，利用本發(fā)明實施例4的樣品進行涂抹止血，觀察止血效果。創(chuàng)面涂抹上本發(fā)明樣品后，本發(fā)明樣品能牢固粘附于骨創(chuàng)面上，樣品被血液浸入后由白色變成紅色，周圍微量滲血，五分鐘內(nèi)未見滲血量增加，樣品止血迅速。對于不規(guī)則骨創(chuàng)面，本組合物同樣操作方便，止血效果良好。取實驗動物3只，采用同樣的方法在頂骨處開出不規(guī)則形狀的創(chuàng)面，利用對比例1的樣品進行涂抹止血，觀察止血效果。創(chuàng)面涂抹上對比例1的樣品后，樣品無法粘附于骨創(chuàng)面，未有效止血。驗證實例4：降解試驗選用健康成年普通級新西蘭白兔，雌雄不限，體重2.5～3.0kg。飼養(yǎng)溫度：20～26℃；相對濕度：40～70％；光照：15～20lx；飼喂全價顆粒兔飼料，自由飲水。取實驗動物24只，分為4組，用2％戊巴比妥鈉經(jīng)耳靜脈注射麻醉，脫毛備皮，術(shù)區(qū)消毒，鋪好無菌手術(shù)洞巾，于股骨處切口，剝離骨膜，顯露股骨，用低轉(zhuǎn)速間歇地在骨上鉆孔，鉆頭直徑為2mm，操作時用生理鹽水充分灌洗，以免局部組織過熱。每根股骨鉆出3個孔，每組分別將實施例3、6、7和對比例2的樣品植入于組內(nèi)新西蘭兔的左腿骨孔中，右腿骨孔空白。術(shù)后分別于1周、4周、12周分別隨機抽取2只動物并處死，以相同方式顯露術(shù)區(qū)，觀察新西蘭兔左腿植入部位愈合情況和樣品殘留情況，并與同一只兔子的右腿作比較。截取股骨植入部分，去除肌肉組織，用福爾馬林溶液浸泡固定，送病理觀察。試驗中觀察到，1周時實施例3、6、7在骨孔中已經(jīng)消失，4周后實施例3、6、7所植入的骨孔與右腿骨痂生長情況無較大差異，已掩蓋了骨孔大部分，12周后左右腿無差異，骨痂將骨孔全部掩蓋，骨愈合良好。對比例2的樣品1周時在骨孔處明顯可見，4周后樣品肉眼隱約可見，骨孔處有約四分之一至二分之一的部分被骨痂掩蓋，但同一只兔的右腿骨痂已將骨孔大部分掩蓋。12周后對比例2植入部位無肉眼可見樣品，骨痂將骨孔大部分掩蓋，同一只兔子右腿骨痂已將骨孔全部掩蓋。當前第1頁12