本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體凝膠制劑，特別是一種咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑，本發(fā)明還提供了所述制劑的制備方法及其用途，屬于醫(yī)學(xué)制藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

增生性瘢痕(hypertrophicscars,hs)是一種漸進(jìn)性、病理性并難以逆轉(zhuǎn)的皮膚疾病，常發(fā)生在深度創(chuàng)傷（如手術(shù)、燒燙傷）修復(fù)過程中，由大量微細(xì)血管生成、成纖維細(xì)胞增殖、膠原過度沉積導(dǎo)致真皮過度纖維化引起。在增生性瘢痕的治療方案中，目前臨床常用手術(shù)切除和藥物治療手段。手術(shù)治療通常需要進(jìn)行植皮和放射線或激光照射輔助治療，且平均復(fù)發(fā)率達(dá)50%以上。治療藥物主要有類固醇類激素（局部注射或涂抹）、抗代謝藥物（局部注射或口服)）和硅制劑（涂抹或噴霧），其中激素類藥物顯效快，但長期應(yīng)用會(huì)出現(xiàn)局部副作用和全身反應(yīng)，如皮膚萎縮、局部毛細(xì)血管擴(kuò)張及色素沉著等；抗代謝藥物一般為抗癌制劑，毒副作用突出，影響正常皮膚組織細(xì)胞的代謝和活性；硅制劑無副作用且病人順從性好，但只對(duì)保持壓力的部位（如四肢）有效。

咪喹莫特(imiquimod)是咪唑喹啉類藥物，是人工合成小分子化合物中唯一的干擾素誘導(dǎo)免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，具有抗病毒、抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用。咪喹莫特作用獨(dú)特，不具有直接抗病毒活性，也不會(huì)引起直接的、非特異性細(xì)胞溶解破壞作用，而是通過降低toll樣受體tlr7和tlr8的競爭抑制作用，刺激多種免疫細(xì)胞產(chǎn)生一系列細(xì)胞素，誘導(dǎo)生成多種細(xì)胞因子，從而增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)作用。咪喹莫特臨床主要用于治療瘢痕疙瘩、尖銳濕疣、生殖器疣等。由于咪喹莫特溶解性能差，可供制成的劑型有限，目前市售的產(chǎn)品僅有霜?jiǎng)?、乳膏?/p>

脂質(zhì)體具有降低藥物毒性、靶向定位、粒徑小、與生物膜具有很好的相容性等特性，將藥物制備成脂質(zhì)體，增加了藥物的穩(wěn)定性及在器官中的滯留量，使藥物療效更顯著。凝膠劑是一類含有溶解、混懸或乳液狀態(tài)藥物的半固體制劑，能在較長時(shí)間內(nèi)與作用部位緊密豁附，具有較好的生物豁附性，并且制備簡單、使用舒適。凝膠劑系指藥物與能形成凝膠的輔料制成均一、混懸或乳狀液型的稠厚液體或半固體制劑。其具有透氣性佳、生物利用度高、穩(wěn)定性好、不良反應(yīng)少和使用方便等特點(diǎn)。脂質(zhì)體凝膠將脂質(zhì)體與凝膠基質(zhì)混合，從而增加脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，提高脂質(zhì)體作為外用劑型的適用性，并且能夠提供包裹藥物的緩釋和控釋。脂質(zhì)體作為常見納米給藥載體，脂質(zhì)體皮膚給藥具有獨(dú)特的優(yōu)勢，可促進(jìn)瘢痕異質(zhì)化表皮的藥物滲透能力，增強(qiáng)藥物真皮滯留性能，水性給藥環(huán)境滿足傷口愈合對(duì)o2的需求。本研究將咪喹莫特制備成脂質(zhì)體凝膠劑，一方面增加了咪喹莫特的溶解性能，另一方面增加咪喹莫特在真皮層中的滯留量，更好地發(fā)揮咪喹莫特抑制瘢痕的作用。目前尚無有關(guān)咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑的文獻(xiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的之一在于提供一種用于抑制瘢痕增生的脂質(zhì)體凝膠制劑，其中所述脂質(zhì)體凝膠制劑包括脂質(zhì)體、凝膠材料和甘油，所述脂質(zhì)體包封有咪喹莫特原料藥，所述脂質(zhì)體包括磷脂、膽固醇和維生素e。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述磷脂是由選自蛋黃卵磷脂、腦磷脂?肌醇磷脂、絲氨酸磷脂、核苷酸磷脂、大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰甘油、氫化大豆卵磷脂、十六烷基磷脂酰膽堿中的一種或多種磷脂組成的。優(yōu)選地，所述磷脂是由蛋黃卵磷脂和氫化大豆卵磷脂中的一種或兩者的混合物組成的。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，各種磷脂材料的相變溫度不同，制備溫度需高于相變溫度。實(shí)驗(yàn)優(yōu)選使用蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂中的一種或兩者的混合物。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述凝膠材料選自泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、卡波姆934和卡波姆980中的一種或多種。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述脂質(zhì)體微粒的粒徑為100至1000nm。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，膽固醇和磷脂重量份數(shù)比為1~3:2~6，咪喹莫特原料藥和脂質(zhì)體質(zhì)量份數(shù)比（藥脂比）為1:10~60，維生素e用量占總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2~7%。

本發(fā)明另一方面提供一種用于抑制增生性瘢痕的咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑的制備方法。

本發(fā)明人先測定咪喹莫特的透皮吸收性能，并探討咪喹莫特的油水分配系數(shù)與其透皮吸收速率間的關(guān)系，再以包封率、粒徑和形態(tài)為考察指標(biāo)，篩選出合理的處方工藝以及投料比，優(yōu)選出包封率較高的咪喹莫特脂質(zhì)體，最后將其制備成脂質(zhì)體凝膠。

本發(fā)明人前期從注入法、薄膜分散法、ph梯度法、超聲注入法-ph梯度法和薄膜分散法-ph梯度法等方法中進(jìn)行篩選脂質(zhì)體制備方法，發(fā)現(xiàn)其中薄膜分散法-ph梯度法最為適宜工業(yè)化生產(chǎn)，且制成的脂質(zhì)體溶液粒徑適宜（100～1000nm），包封率較高（>80％）。

本發(fā)明提供的方法包括以下步驟：

(a)精密稱取一定量的咪喹莫特原料藥、磷脂材料、膽固醇和維生素e，加入三氯甲烷，攪拌使各成分溶解，得到澄清透明溶液；

(b)將步驟(a)得到的澄清透明溶液置于容器中，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)出溶劑，使磷脂在容器壁上形成一層均勻薄膜，加入磷酸鹽緩沖液，水化過夜，呈乳白色混懸液后，以堿性溶液調(diào)整ph值形成ph梯度差，孵育，冰浴下超聲，得到咪喹莫特脂質(zhì)體；

(c)將步驟（b）得到的脂質(zhì)體過濾（先過0.8μm微孔濾膜濾，濾液再過0.45μm微孔濾膜，重復(fù)3次）得到脂質(zhì)體溶液；

(d)將高分子凝膠材料加入所述脂質(zhì)體溶液中，溶脹完全后，加入甘油，研磨均勻即得。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在上述方法步驟（b）中，溫度50℃，轉(zhuǎn)速30r·min^-1進(jìn)行所述減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，所述旋轉(zhuǎn)的時(shí)間為15~45分鐘，放置2小時(shí)使使膽固醇充分溶脹水合，所述磷酸鹽緩沖液ph為6.0-7.0，所述堿性溶液為1mol/lnaoh，冰浴下超聲的時(shí)間為15~45分鐘，得到咪喹莫特脂質(zhì)體。更優(yōu)選地，在上述方法步驟（b）中，溫度50℃，轉(zhuǎn)速30r·min^-1進(jìn)行所述減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，所述旋轉(zhuǎn)的時(shí)間為30分鐘，放置2小時(shí)使使膽固醇充分溶脹水合，冰浴下超聲的時(shí)間為30分鐘，得到咪喹莫特脂質(zhì)體。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在上述方法中，膽固醇和磷脂重量份數(shù)比為1~3:2~6，咪喹莫特原料藥和脂質(zhì)體質(zhì)量份數(shù)比（藥脂比）為1:10~60，維生素e用量占總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2~7%，孵育溫度為30~70℃，孵育時(shí)間為20~100分鐘，ph梯度差為1~5，凝膠材料和甘油質(zhì)量比為1～50：1~5；優(yōu)選地，膽固醇和磷脂質(zhì)量比為1:3~5，藥脂比為1:20~40，維生素e用量為4~6%，孵育溫度為40~60℃，孵育時(shí)間為50~90分鐘，ph梯度差為1~3，凝膠材料和甘油質(zhì)量比為1～20：1~2；最優(yōu)選地，膽固醇和磷脂質(zhì)量比為1:5，藥脂比為1:20，維生素e用量為6%，孵育溫度為50℃，孵育時(shí)間為70分鐘，ph梯度差為3，凝膠材料和甘油質(zhì)量比3:1。

本發(fā)明再一方面提供本發(fā)明的脂質(zhì)體凝膠制劑在制備抑制增生性瘢痕的藥物中的用途。

本發(fā)明的脂質(zhì)體凝膠制劑臨床應(yīng)用時(shí)直接貼敷在瘢痕增生部位，尤其是手術(shù)、燒燙傷后、沒有或兼有炎癥的深度創(chuàng)傷部位。由于該咪喹莫特透皮凝膠制劑應(yīng)用人體生理相容性好的磷脂等材料包封藥物，能有效地改善咪喹莫特的溶解度，增加咪喹莫特在真皮層中的滯留量，更好地發(fā)揮咪喹莫特抑制瘢痕的作用，與報(bào)道的其他抗瘢痕增生藥物制劑或治療方案相比，復(fù)發(fā)率低，降低毒副作用發(fā)生率，并可應(yīng)用于身體任何瘢痕增生的部位。

此外，本發(fā)明提供的用于抑制增生性瘢痕的脂質(zhì)體凝膠制劑的制備方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：1）制劑無有毒溶劑殘留，不含可能引起皮膚刺激性或其他不良反應(yīng)的輔料；2）與市場上現(xiàn)售的抗瘢痕增生藥物相比，毒副作用小，病人順應(yīng)性好，透皮速率理想，有效調(diào)節(jié)皮膚免疫細(xì)胞因子；3）制備技術(shù)可工業(yè)化實(shí)施，制成的脂質(zhì)體凝膠粘度適宜，穩(wěn)定性好，符合藥典要求。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中透皮速率常數(shù)和lgp擬合曲線示意圖，p為咪喹莫特的油水分配系數(shù)，在ph4.5~7.4溶劑介質(zhì)下，咪喹莫特的透皮性能和其油水分配系數(shù)密切相關(guān)，可以通過測定藥物的油水分配系數(shù)預(yù)測藥物的透皮性能。

圖2是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中脂質(zhì)體凝膠制劑形成過程中脂質(zhì)體微粒的透射電鏡圖，從圖中可看出微粒大小均一，外緣呈圓形，形態(tài)規(guī)整。

圖3是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中脂質(zhì)體凝膠制劑形成過程中脂質(zhì)體粒徑分布圖，可見平均粒徑為約335nm，符合正態(tài)分布。

圖4是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中脂質(zhì)體凝膠制劑與常規(guī)咪喹莫特凝膠的經(jīng)皮滲透動(dòng)力學(xué)曲線，其中◇代表本發(fā)明的脂質(zhì)體凝膠制劑；□代表常規(guī)凝膠，可見本發(fā)明的脂質(zhì)體凝膠制劑的釋藥曲線明顯優(yōu)于常規(guī)的咪喹莫特凝膠。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明提供的脂質(zhì)體凝膠制劑包括脂質(zhì)體、凝膠材料和甘油等，該脂質(zhì)體包封有以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。

本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得或可按文獻(xiàn)方法制備。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)按重量計(jì)算。

實(shí)施例1：咪喹莫特表觀油水分配系數(shù)及其與透皮吸收速率常數(shù)的相關(guān)性研究

正辛醇置于具塞錐形瓶中，分別用ph4.5,5.0,5.8,6.5,7.4的緩沖鹽飽和，33±0.5℃震搖24h，3500r·min^-1離心20min，分離正辛醇與緩沖液。精密稱取咪喹莫特1.5mg，用不同ph的緩沖液預(yù)飽和過的正辛醇溶解，置于25ml的容量瓶中，定容，得系列濃度為60μg·ml^-1。取被正辛醇飽和過的緩沖溶液和咪喹莫特正辛醇溶液，按1:1比例體積，置于錐形瓶中，封口。將一部分錐形瓶內(nèi)的溶液置于33±0.5℃恒溫?fù)u床內(nèi)搖晃72h，另一部分錐形瓶渦旋40min，然后置于33±0.5℃恒溫水浴中靜置72h，取出，以3500r·min^-1離心20min，取緩沖鹽層，定容。用高效液相測定測定緩沖鹽相的濃度，計(jì)算油水分配系數(shù)，結(jié)果見表1。

p=(c-cw)/cw公式1

其中，p為咪喹莫特的表觀油水分配系數(shù)；c為緩沖溶液飽和正辛醇中初始藥物的濃度，cw為平衡后緩沖溶液中藥物的濃度。

使用tp-6透皮擴(kuò)散儀，將鼠皮放在兩個(gè)半池中間，皮膚角質(zhì)層朝上，夾緊，防止液體漏出，有效滲透面積為2.25cm²，接收池體積為15ml，溫度為33±0.5℃，攪拌速度350r·min^-1，在1,2,4,6,8,12,24h取樣，每次取樣量1ml，同時(shí)補(bǔ)足1ml，以ph=6.5的緩沖鹽為接受液。計(jì)算得qn，繪制qn-t方程，結(jié)果見表2。

公式2

其中，qn：第n小時(shí)單位面積累積透過藥量；cn：第n小時(shí)取樣的濃度；v：接收液體積；a：擴(kuò)散池有效擴(kuò)散面積。

表1咪喹莫特在正辛醇-不同ph緩沖溶液的油水分配系數(shù)的測定結(jié)果

p為咪喹莫特的表觀油水分配系數(shù)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，咪喹莫特在ph5.8~7.3范圍內(nèi)，1﹤lgp﹤3，表明該藥物親脂性較好，水溶性較差，且搖床法和渦旋法所測得的lgp差異不明顯，當(dāng)溶劑介質(zhì)ph在4.5~7.4之間時(shí)，lgp隨ph值增大而增大。

表2透皮吸收速率常數(shù)的測定結(jié)果，斜率為透皮速率常數(shù)（j）

由表2可得，在ph5.8附近，咪喹莫特的透皮吸收速率常數(shù)最大。

咪喹莫特油水分配系數(shù)與透皮速率常數(shù)相關(guān)性研究，結(jié)果見圖3，本發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在ph4.5~7.4溶劑介質(zhì)下，咪喹莫特的透皮性能和其油水分配系數(shù)密切相關(guān)，可以通過測定藥物的油水分配系數(shù)預(yù)測藥物的透皮性能。

實(shí)施例2：咪喹莫特脂質(zhì)體的處方篩選

以脂質(zhì)體包封率為考察指標(biāo)，選用l9(3⁴)因素水平正交設(shè)計(jì)進(jìn)行脂質(zhì)體處方優(yōu)化，制備工藝為孵育溫度40℃，孵育時(shí)間50min，ph梯度差為3，考察磷脂/膽固醇質(zhì)量比（a）、藥脂比(b)、以及ve用量（%）（c），采用薄膜分散-ph梯度法制備咪喹莫特脂質(zhì)體，進(jìn)行正交試驗(yàn)從而確定各組分的最佳投料比，處方因素水平表見表3。

表3：處方因素水平

精密稱取一定量的咪喹莫特原料藥、磷脂材料、膽固醇和維生素e，加入適量三氯甲烷，攪拌使各成分溶解，得到澄清透明溶液；將溶液置于500ml茄形瓶中，溫度50℃，轉(zhuǎn)速30r·min^-1，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)出溶劑，使磷脂在容器壁上形成一層均勻薄膜，加入ph為6.5的磷酸鹽緩沖液旋轉(zhuǎn)30分鐘，水化過夜，呈乳白色混懸液后，以1mol/lnaoh溶液調(diào)整ph值形成ph梯度差，孵育，冰浴下超聲，得到咪喹莫特脂質(zhì)體，將得到的脂質(zhì)體先過0.8μm微孔濾膜濾，濾液再過0.45μm微孔濾膜，重復(fù)3次，得到脂質(zhì)體溶液。正交試驗(yàn)及結(jié)果見表4，方差分析結(jié)果見表5。

表4：正交試驗(yàn)及結(jié)果

表5：方差分析結(jié)果

由表4和表5實(shí)驗(yàn)結(jié)果得，咪喹莫特制備脂質(zhì)體時(shí)，處方中a和b因素對(duì)其有顯著性影響，可知b>a>c，最優(yōu)組合為a3b1c3，即磷脂:膽固醇為5:1，藥脂比為20:1，ve用量為6%。

實(shí)施例3：制備工藝的優(yōu)選

在磷脂:膽固醇為5:1，藥脂比為20:1，ve用量為6%的條件下，選用l9(3⁴)因素水平正交設(shè)計(jì)對(duì)處方工藝進(jìn)行篩選，工藝因素主要有孵育溫度(a)、孵育時(shí)間(b)、ph梯度差（c），因素水平表見表6。

表6：制備工藝的正交因素水平

表7：方差分析結(jié)果

表8：制備工藝的正交試驗(yàn)及結(jié)果

由表7和表8實(shí)驗(yàn)結(jié)果得，a與b因素對(duì)制備工藝具有顯著性影響，按偏差平方和排序的a>b>c，最優(yōu)組合為a2b2c3，即溫度為50℃，孵育時(shí)間為70min，ph梯度差為3。

最佳工藝驗(yàn)證：按照優(yōu)選處方進(jìn)行了5次重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)，制備了5批脂質(zhì)體。精密稱取膽固醇50mg、磷脂（s100）200mg，ve用量為6%，咪喹莫特10mg，加入20ml三氯甲烷，攪拌使各成分溶解，得到澄清透明溶液；將溶液置于500ml茄形瓶中，溫度50℃，轉(zhuǎn)速30r·min-1，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)出溶劑，使磷脂在容器壁上形成一層均勻薄膜，加入ph為6.5的磷酸鹽緩沖液旋轉(zhuǎn)30分鐘，放置2小時(shí)使膽固醇充分溶脹水合，以1mol/lnaoh溶液調(diào)整ph值形成ph梯度差為3，50℃孵育70min，冰浴下超聲30分鐘，得到咪喹莫特脂質(zhì)體，將得到的脂質(zhì)體先過0.8μm微孔濾膜濾，濾液再過0.45μm微孔濾膜，重復(fù)3次，得到脂質(zhì)體溶液。所得的咪喹莫特脂質(zhì)體溶液呈乳白色半透明狀，色澤均勻，略帶乳光，流動(dòng)性好。結(jié)果表明制得的5批脂質(zhì)體粒徑呈正態(tài)分布，平均粒徑355nm，包封率(87.86±0.0153)%，其rsd為0.96%。

實(shí)施例4：咪喹莫特脂質(zhì)體的滲漏率考察

在最優(yōu)制備工藝下，將制備好的咪喹莫特脂質(zhì)體分別放置于4℃冰箱、25℃室溫保存，并分別于0d,30d,60d取樣測定脂質(zhì)體的含量，并按下式計(jì)算貯存過程中的滲漏率p。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，求其平均值。其中，w1、w2分別為制備時(shí)的包封量和貯存一定時(shí)間后的包封量。結(jié)果見表9。

表9：咪喹莫特脂質(zhì)體滲漏率

實(shí)施例5：咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑的含量測定及穩(wěn)定性初步考察

咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠劑及普通凝膠制劑的制備：稱取卡波姆9400.3g、尼泊金乙酯0.002g，加入上述制備好的脂質(zhì)體溶液中，溶脹完全后，加入甘油0.1g，研磨均勻，即得咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑。稱取咪喹莫特10mg，加入ph6.5緩沖溶液使溶解，并定容至10ml；加入卡波姆0.3g、尼泊金乙酯0.002g，溶脹完全后，加入甘油0.1g，研磨均勻，即得咪喹莫特普通凝膠劑。

咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑的含量測定：精密稱取咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑及普通凝膠制劑各0.3g，置于25ml容量瓶中，加入10ml甲醇溶液，溶解后超聲5min，蒸餾水定容至刻度。濾過，精密吸取濾液，于高效液相色譜儀上進(jìn)行含量測定。測定結(jié)果表明，咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑含量(3.03±0.25)mg·g^-1(n=3)，平均加樣回收率96.54%(n=9,rsd值4.91%)。穩(wěn)定性試驗(yàn)rsd值為3.85%，重現(xiàn)性試驗(yàn)rsd值為2.16%。

咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑穩(wěn)定性初步考察:

性狀：本凝膠劑呈淺白色、均勻、細(xì)膩半透明狀，無黏性塊狀物，常溫保持膠狀，不干涸或液化，涂展性能好。

粘度：本凝膠劑粘度適中。

ph值：取本品3g，加10ml蒸餾水稀釋，攪拌均勻，ph值測定值在6.0～7.0之間。

離心試驗(yàn)：取3批樣品各5g，4500r·min^-1離心30min，均勻，無凝聚、分層現(xiàn)象發(fā)生。

上述一項(xiàng)或多項(xiàng)驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑制備工藝條件穩(wěn)定可靠。

實(shí)施例6:咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑體外經(jīng)皮滲透動(dòng)力學(xué)考察

離體皮膚制備:雄性昆明種小鼠(18～22g)斷頸處死后，剝?nèi)「共科つw，刮凈腹部鼠毛，剔除多余的脂肪、結(jié)締組織，用生理鹽水洗凈，濾紙吸干，將皮膚鋪平，-20℃冰箱保存，一周內(nèi)用完。

透皮吸收實(shí)驗(yàn)：將離體鼠皮恢復(fù)至室溫，用生理鹽水沖洗后，用濾紙吸干表面液體，置于franz擴(kuò)散池(有效釋藥面積為1.766cm²，接收池體積為15ml)的供給室與接收室之間，角質(zhì)層朝向供給室。擴(kuò)散池的，接收室中加滿含30%乙醇的ph值為6.5磷酸鹽緩沖液，排盡氣泡，使接收介質(zhì)與皮膚緊密接觸。接收介質(zhì)溫度為(33±0.5)℃，磁力攪拌速度350r·min^-1。各組在供給室中分別加入0.3g咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑和咪喹莫特凝膠，分別于試驗(yàn)后1,2,4,6,8,10,12,24h從接收室取樣管精密吸取1ml接受液(同時(shí)補(bǔ)充等量等溫接受液)，接受液經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾后，取20μl濾液進(jìn)樣測定。將峰面積帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藥物濃度，按式(2)計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的單位面積累積透過量(qn,μg·cm^-2)，繪制qn-t方程，平行實(shí)驗(yàn)6次，取平均值。結(jié)果見圖4。

(2)

其中，qn第n小時(shí)單位面積累積透過藥量；cn第n小時(shí)取樣的濃度；a擴(kuò)散池有效擴(kuò)散面積。

實(shí)施例7：咪喹莫特脂質(zhì)體透皮凝膠制劑

配方：膽固醇50mg、蛋黃卵磷脂（s100）200mg，維生素e16mg，咪喹莫特10mg，磷酸鹽緩沖液10ml(ph=6.5)，卡波姆9400.3g、尼泊金乙酯0.002g，甘油0.1g。

制備方法：精密稱取膽固醇50mg、蛋黃卵磷脂（s100）200mg，維生素e16mg，咪喹莫特10mg，加入20ml三氯甲烷，攪拌使各成分溶解，得到澄清透明溶液；將溶液置于500ml茄形瓶中，溫度50℃，轉(zhuǎn)速30r·min-1，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)出溶劑，使磷脂在容器壁上形成一層均勻薄膜，加入ph為6.5的磷酸鹽緩沖液旋轉(zhuǎn)30分鐘，水化過夜，呈乳白色混懸液后，以1mol/lnaoh溶液調(diào)整ph值至10，40℃孵育30分鐘，冰浴下超聲，得到咪喹莫特脂質(zhì)體得到咪喹莫特脂質(zhì)體，將得到的脂質(zhì)體先過0.8μm微孔濾膜濾，濾液再過0.45μm微孔濾膜，重復(fù)3次，得到脂質(zhì)體溶液。稱取卡波姆9400.3g、尼泊金乙酯0.002g，加入制備好的脂質(zhì)體溶液中，溶脹完全后，加入甘油0.1g，研磨均勻，分裝，涂于裱褙材料上，滅菌，即得咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑。

實(shí)施例8：咪喹莫特脂質(zhì)體透皮凝膠制劑

配方：膽固醇50mg、氫化大豆卵磷脂（s100）200mg，維生素e16g，咪喹莫特10mg，磷酸鹽緩沖液10ml(ph=6.5)，卡波姆9400.3g、尼泊金乙酯0.002g，甘油0.1g。

制備方法：精密稱取膽固醇50mg、氫化大豆卵磷脂（s100）200mg，維生素e16g，咪喹莫特10mg，加入20ml三氯甲烷，攪拌使各成分溶解，得到澄清透明溶液；將溶液置于500ml茄形瓶中，溫度50℃，轉(zhuǎn)速30r·min^-1，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)出溶劑，使磷脂在容器壁上形成一層均勻薄膜，加入ph為6的磷酸鹽緩沖液旋轉(zhuǎn)30分鐘，水化過夜，呈乳白色混懸液后，以1mol/lnaoh溶液調(diào)整ph值至9，50℃孵育45分鐘，冰浴下超聲，得到咪喹莫特脂質(zhì)體得到咪喹莫特脂質(zhì)體，將得到的脂質(zhì)體先過0.8μm微孔濾膜濾，濾液再過0.45μm微孔濾膜，重復(fù)3次，得到脂質(zhì)體溶液。稱取卡波姆9400.3g、尼泊金乙酯0.002g，加入制備好的脂質(zhì)體溶液中，溶脹完全后，加入甘油0.1g，研磨均勻，分裝，涂于裱褙材料上，滅菌，即得咪喹莫特脂質(zhì)體凝膠制劑。

以上已對(duì)本發(fā)明創(chuàng)造的較佳實(shí)施例進(jìn)行了具體說明，但本發(fā)明創(chuàng)造并不限于所述實(shí)施例，熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不違背本發(fā)明創(chuàng)造精神的前提下還可作出種種的等同的變型或替換，這些等同的變型或替換均包含在本申請(qǐng)權(quán)利要求所限定的范圍內(nèi)。