本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥材料領(lǐng)域,尤其涉及一種地膚子復(fù)合生物玻璃中藥修復(fù)材料的制備方法。
背景技術(shù):
自發(fā)現(xiàn)生物玻璃至今,人們更多關(guān)注的是生物玻璃組份對(duì)生物活性的影響。納米技術(shù)的興起,使人們開(kāi)始認(rèn)識(shí)到結(jié)構(gòu)對(duì)生物活性也有重要影響,更加注重于尺寸效應(yīng)、微觀精細(xì)結(jié)構(gòu)對(duì)材料結(jié)構(gòu)和性能的影響。從納米尺寸出發(fā)研發(fā)設(shè)計(jì)的納米生物玻璃、介孔生物玻璃更是備受國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。生物玻璃能激活細(xì)胞基因,有利于增強(qiáng)細(xì)胞的增殖與分化,具有骨誘導(dǎo)和骨傳導(dǎo)的作用。但鑒于其無(wú)定形硅骨架的存在,生物玻璃仍呈現(xiàn)為無(wú)定形態(tài),機(jī)械性能差,且藥物附著性差,其在生物醫(yī)藥材料上的應(yīng)用還有待進(jìn)一步開(kāi)發(fā)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題,本發(fā)明提供了一種機(jī)械性能好,且具有優(yōu)良的藥物附著性的地膚子復(fù)合生物玻璃中藥修復(fù)材料的制備方法。
本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種地膚子復(fù)合生物玻璃中藥修復(fù)材料的制備方法,包括以下步驟:
步驟一:洗凈新鮮的地膚子,將水分晾干后放入粉碎機(jī)中粉碎,粉碎后過(guò)200目篩,得地膚子粉末;
步驟二:稱取地膚子粉末20g,放入容器中,并加入400g蒸餾水,再加入沸石,置于電熱套中,于120℃下沸騰2h后,第一次煎煮提取結(jié)束,將容器中的物質(zhì)全部取出,降溫至室溫,用低溫冷凍離心機(jī)過(guò)濾,轉(zhuǎn)速為3000r/min,離心時(shí)間5min,收集上清液,下層地膚子再放入容器中,并加入300g的蒸餾水,進(jìn)行第二次提取,于120℃下沸騰1.5h后,第二次煎煮提取結(jié)束,將容器中的物質(zhì)全部取出,降溫至室溫,用低溫冷凍離心機(jī)過(guò)濾,轉(zhuǎn)速為3000r/min,離心時(shí)間5min,收集上清液,下層地膚子再放入容器中,并加入200g的蒸餾水,進(jìn)行第三次提取,于120℃下沸騰1h后,第三次煎煮提取結(jié)束,將容器中的物質(zhì)全部取出,降溫至室溫,用低溫冷凍離心機(jī)過(guò)濾,轉(zhuǎn)速為3000r/min,離心時(shí)間5min,收集上清液,合并三次上清液,混合,過(guò)濾得地膚子提取液;
步驟三:100g褐藻加入1000ml去離子水中,洗凈后切成1cm×1cm的方塊,以質(zhì)量百分比10%加入到120ml質(zhì)量濃度為1.5%的na2co3水溶液中,消化3h,再中和至ph為中性,以10倍體積水稀釋消化液,攪拌后離心得到上清液,將上清液中加入5mg纖維素酶進(jìn)行酶解反應(yīng)1h,經(jīng)檸檬酸緩沖液中和至中性,再加入125ml質(zhì)量濃度為10%的cacl2水溶液進(jìn)行鈣析,再加入質(zhì)量濃度為3%的hcl酸化30min,生成褐藻酸凝塊,濾去hcl后水洗至ph中性,加入褐藻酸凝塊6倍體積的質(zhì)量濃度為15%的nacl進(jìn)行離子交換脫鈣,再加入體積濃度95%的乙醇析出絮狀沉淀,經(jīng)離心、烘干后即得海藻酸鈉;
步驟四:將500mg海藻酸鈉溶于100ml去離子水中,60℃水浴中溶解1h,磁力攪拌1000r/min,溶解1h,制成質(zhì)量濃度0.5%的海藻酸鈉溶液;
步驟五:將5g聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物溶于62g體積濃度為70%的乙醇溶液中,充分?jǐn)嚢韬?,依次加?g硅酸乙酯、0.7g磷酸三乙酯、1.5gca(no3)2·4h2o、1g0.5m鹽酸溶液,得混合液;
步驟六:將混合液在室溫下攪拌24h后靜置,當(dāng)溶液呈粘稠狀溶液時(shí),即制得生物玻璃溶液;
步驟七:將海藻酸鈉溶液、地膚子提取液、生物玻璃溶液按質(zhì)量比50:3:10混合均勻,使用超聲波震蕩對(duì)其進(jìn)行分散,50℃條件下磁力攪拌1h,再在室溫下繼續(xù)攪拌8h,得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中,通過(guò)靜電紡絲制得修復(fù)材料,高壓裝置電壓為20kv,將制得的材料在40℃下真空干燥。
優(yōu)選的,步驟七中所述的醫(yī)用針管的容量為20ml。
優(yōu)選的,步驟七中所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處。
本發(fā)明的有益效果在于:
1)海藻酸鈉具有優(yōu)良的生物相容性及機(jī)械性能,可降解性好,是很好的組織工程支架材料,此外海藻酸鈉含有游離的羧基和羥基,性質(zhì)活潑,容易與其他高分子物質(zhì)相結(jié)合形成良好的復(fù)合材料。
2)生物玻璃具有良好的生物相容性,且具有組織修復(fù)的功能,能激活細(xì)胞基因,有利于增強(qiáng)細(xì)胞的增殖與分化,具有骨誘導(dǎo)和骨傳導(dǎo)的作用。
3)海藻酸鈉可以改善材料的機(jī)械性能,生物玻璃可以改善材料的醫(yī)藥性能。
4)地膚子具有清熱利濕,祛風(fēng)止癢,消炎止疼的功效,可用于各種過(guò)敏性皮膚問(wèn)題。
5)采用靜電紡絲技術(shù)制備的材料,具有良好的孔隙率,有利于藥物的附著。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述。
實(shí)施例1
一種地膚子復(fù)合生物玻璃中藥修復(fù)材料的制備方法,包括以下步驟:
步驟一:洗凈新鮮的地膚子,將水分晾干后放入粉碎機(jī)中粉碎,粉碎后過(guò)200目篩,得地膚子粉末;
步驟二:稱取地膚子粉末20g,放入容器中,并加入400g蒸餾水,再加入沸石,置于電熱套中,于120℃下沸騰2h后,第一次煎煮提取結(jié)束,將容器中的物質(zhì)全部取出,降溫至室溫,用低溫冷凍離心機(jī)過(guò)濾,轉(zhuǎn)速為3000r/min,離心時(shí)間5min,收集上清液,下層地膚子再放入容器中,并加入300g的蒸餾水,進(jìn)行第二次提取,于120℃下沸騰1.5h后,第二次煎煮提取結(jié)束,將容器中的物質(zhì)全部取出,降溫至室溫,用低溫冷凍離心機(jī)過(guò)濾,轉(zhuǎn)速為3000r/min,離心時(shí)間5min,收集上清液,下層地膚子再放入容器中,并加入200g的蒸餾水,進(jìn)行第三次提取,于120℃下沸騰1h后,第三次煎煮提取結(jié)束,將容器中的物質(zhì)全部取出,降溫至室溫,用低溫冷凍離心機(jī)過(guò)濾,轉(zhuǎn)速為3000r/min,離心時(shí)間5min,收集上清液,合并三次上清液,混合,過(guò)濾得地膚子提取液;
步驟三:100g褐藻加入1000ml去離子水中,洗凈后切成1cm×1cm的方塊,以質(zhì)量百分比10%加入到120ml質(zhì)量濃度為1.5%的na2co3水溶液中,消化3h,再中和至ph為中性,以10倍體積水稀釋消化液,攪拌后離心得到上清液,將上清液中加入5mg纖維素酶進(jìn)行酶解反應(yīng)1h,經(jīng)檸檬酸緩沖液中和至中性,再加入125ml質(zhì)量濃度為10%的cacl2水溶液進(jìn)行鈣析,再加入質(zhì)量濃度為3%的hcl酸化30min,生成褐藻酸凝塊,濾去hcl后水洗至ph中性,加入褐藻酸凝塊6倍體積的質(zhì)量濃度為15%的nacl進(jìn)行離子交換脫鈣,再加入體積濃度95%的乙醇析出絮狀沉淀,經(jīng)離心、烘干后即得海藻酸鈉;
步驟四:將500mg海藻酸鈉溶于100ml去離子水中,60℃水浴中溶解1h,磁力攪拌1000r/min,溶解1h,制成質(zhì)量濃度0.5%的海藻酸鈉溶液;
步驟五:將5g聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物溶于62g體積濃度為70%的乙醇溶液中,充分?jǐn)嚢韬?,依次加?g硅酸乙酯、0.7g磷酸三乙酯、1.5gca(no3)2·4h2o、1g0.5m鹽酸溶液,得混合液;
步驟六:將混合液在室溫下攪拌24h后靜置,當(dāng)溶液呈粘稠狀溶液時(shí),即制得生物玻璃溶液;
步驟七:將海藻酸鈉溶液、地膚子提取液、生物玻璃溶液按質(zhì)量比50:3:10混合均勻,使用超聲波震蕩對(duì)其進(jìn)行分散,50℃條件下磁力攪拌1h,再在室溫下繼續(xù)攪拌8h,得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中,通過(guò)靜電紡絲制得修復(fù)材料,高壓裝置電壓為20kv,將制得的材料在40℃下真空干燥。
步驟七中所述的醫(yī)用針管的容量為20ml,步驟七中所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處。