本發(fā)明屬于醫(yī)療
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：齲齒被世界衛(wèi)生組織(who)列為危害人類健康的三大慢性非傳染性疾病之一，也是兒童的常見(jiàn)病、多發(fā)病。細(xì)菌感染是牙髓病和根尖周病的主要發(fā)病病因，其中以革蘭氏厭氧菌為主要致病菌群，檢出率高達(dá)98.33％。目前，齲齒的治療主要通過(guò)祛腐、殺菌、填充等幾步完成，其中祛腐的方法有車針祛腐和化學(xué)機(jī)械祛腐兩種?，F(xiàn)在化學(xué)機(jī)械法使用的試劑主要由次氯酸鈉溶液和氨基酸凝膠兩部分組成，臨用前混合后使用。但是，上述試劑在保存過(guò)程中存在穩(wěn)定性較差的問(wèn)題，不能滿足治療的要求。另外，由于口腔內(nèi)細(xì)菌的作用，特別是長(zhǎng)期吸煙、喝茶、喝咖啡等，易使污漬附著在牙齒表面，形成牙漬。牙漬不僅影響美容、美觀，而且利于細(xì)菌進(jìn)一步的生成繁殖，產(chǎn)生破壞牙本質(zhì)的酸性物質(zhì)，形成蛀牙，最終可使牙整體壞死，嚴(yán)重影響人們的牙齒健康。木瓜蛋白酶是一種含疏基的肽鏈內(nèi)切酶，具有蛋白酶和酯酶活性，在酸性、中性、堿性環(huán)境下均能分解蛋白質(zhì)，有較廣泛的特異性，在醫(yī)藥、食品、化妝品等多個(gè)領(lǐng)域均已有應(yīng)用，是一種安全有效的食物蛋白酶。專利文獻(xiàn)cn103800210a公開(kāi)了一種含蛋白酶的牙科、口腔科制劑及其制備方法，所述制劑主要由氯胺-t和蛋白酶組成，該制劑可用于牙根管沖洗或齲齒祛腐，以及齒科美白、治療小的口腔潰瘍等。專利文獻(xiàn)wo2005020946a1公開(kāi)了一種化學(xué)組合物及其用于去除齲齒組織的方法，所述組合物由木瓜蛋白酶、氯胺-t、羧甲基纖維素、氯化鈉、羥苯甲酯、氫氧化鈉等組分組成，該化學(xué)組合物將木瓜蛋白酶與氯胺-t聯(lián)合使用可以用于齲齒的治療。然而，目前的去除齲齒的制劑均含有氯胺-t成分，該成分在使用的過(guò)程中會(huì)接觸皮膚，經(jīng)皮吸收后對(duì)人體具有較大的危害性，例如：會(huì)產(chǎn)生皮膚過(guò)敏，發(fā)紅，水皰，在吸入呼吸道后易產(chǎn)生哮喘、呼吸困難等癥狀，會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。同時(shí)，l.e.bertassoniandg.w.marshall在威利期刊公司(wileyperiodicals,inc.)發(fā)表了一篇題目為“papain-geldegradesintactnonmineralizedtypeicollagenfibrils(木瓜蛋白酶凝膠可降解完整的非礦化i型膠元纖維)”的文章(scanningvol.31,253–258(2009))，該文章表明：牙本質(zhì)的微觀基本結(jié)構(gòu)是i型膠元纖維，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)木瓜蛋白酶凝膠可部分降解完整的i型膠元纖維，即木瓜蛋白酶對(duì)牙i型膠元仍有一定的“傷害”作用。因此，研究和開(kāi)發(fā)一種可以用于齲齒祛腐，齒科美白，而且對(duì)牙齒沒(méi)傷害的口腔制劑仍是目前亟需解決的難題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有技術(shù)中去除齲齒口腔制劑存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑及其制備方法。本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑具有顯著殺菌、祛腐、美白的作用，對(duì)齲齒具有顯著的治療效果。本發(fā)明提供了一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑，包括以下組分及其重量百分比：改性木瓜蛋白酶4～14％、檸檬酸8～12％、卡波姆1～4％和蒸餾水70～87％。進(jìn)一步地，所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑，包括以下組分及其重量百分比：改性木瓜蛋白酶8％、檸檬酸10％、卡波姆2％和蒸餾水80％。進(jìn)一步地，所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為90～100μmol/l的二酰胺溶液，靜置10～15min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.02～0.06mol/l，ph值為7～8的tris-鹽酸緩沖液，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置25～35min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10～20％的聚乙二醇400溶液，于4℃條件下交聯(lián)10～14h，即得。進(jìn)一步地，所述步驟s1中木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：8～12ml。進(jìn)一步地，所述步驟s2中修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1～2ml。進(jìn)一步地，所述步驟s3中修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：3～5ml。進(jìn)一步地，所述卡波姆為卡波姆940，所述卡波姆940為口服級(jí)別和醫(yī)藥級(jí)別卡波姆。進(jìn)一步地，所述卡波姆為成凝膠物質(zhì)，但不僅限卡波姆，亦可選用其它成凝膠物質(zhì)，如羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基纖維素、透明質(zhì)酸鈉、殼聚糖等成分；優(yōu)選為羧甲基纖維素鈉和羥丙甲基纖維素。另外，本發(fā)明還提供了一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法，包括以下步驟：將改性木瓜蛋白酶溶于蒸餾水中，接著加入檸檬酸和卡波姆攪拌溶解后，加入ph值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ph值至4～8，即得。進(jìn)一步地，所述ph值調(diào)節(jié)劑為10％(w/v)氫氧化鈉溶液。本發(fā)明采用二酰胺溶液對(duì)木瓜蛋白酶進(jìn)行處理，將木瓜蛋白酶的巰基(-sh)氧化為二硫鍵(-s-s-)形式，接著將上述氧化后的木瓜蛋白酶加入聚乙二醇400溶液進(jìn)行交聯(lián)，從而改變木瓜蛋白酶的活性和穩(wěn)定性，同時(shí)，該改性木瓜蛋白酶還可以降低木瓜蛋白酶對(duì)膠元纖維表層的降解作用。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的改性木瓜蛋白酶的制備方法制備得到的改性木瓜蛋白酶的酶活力大于11840μ/g，具有較高的酶活性，可以有效的提高木瓜蛋白酶的殺菌、祛腐、美白的作用，對(duì)齲齒具有顯著的治療效果。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑對(duì)正常牙本質(zhì)涂布3次后，其牙本質(zhì)的組織彈性模量(e)和硬度(h)基本無(wú)變化，說(shuō)明本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑不會(huì)影響牙本質(zhì)的機(jī)械性能，是一種安全，高效的治療齲齒口腔凝膠劑。進(jìn)一步地，本發(fā)明采用檸檬酸與卡波姆聯(lián)合使用，不僅可以提高凝膠劑的抑菌能力，延長(zhǎng)含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的保護(hù)期限，同時(shí)，該檸檬酸還可以降低卡波姆的吸濕性，解決卡波姆吸濕后易于結(jié)塊導(dǎo)致溶解困難的缺陷。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑在溫度為25±2℃，相對(duì)濕度為60％±10％的條件下保存6個(gè)月，其外觀、重量差異、微生物限度均符合規(guī)定，具有較高的穩(wěn)定性。另外，本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的劑成分簡(jiǎn)單，美白去腐作用顯著，生產(chǎn)成本低，是一種適合規(guī)模化生產(chǎn)的口腔凝膠劑，為廣大齲齒患者帶來(lái)福音。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑具有以下優(yōu)勢(shì)：(1)本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑具有顯著殺菌、祛腐、美白、治療小的口腔潰瘍等作用，對(duì)齲齒具有顯著的治療效果；(2)本發(fā)明提供的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑不會(huì)影響牙本質(zhì)的機(jī)械性能，是一種安全，高效的治療齲齒口腔凝膠劑。具體實(shí)施方式：以下通過(guò)具體實(shí)施方式的描述對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但這并非是對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本發(fā)明的組分為常規(guī)的市售組分，而且都是食品級(jí)組分，對(duì)人體無(wú)毒副作用。實(shí)施例1、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑由以下組分及其重量百分比組成：改性木瓜蛋白酶4％、檸檬酸12％、卡波姆9404％和蒸餾水80％；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為90μmol/l的二酰胺溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：8ml；靜置10min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.02mol/l，ph值為7的tris-鹽酸緩沖液，上述修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置25min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的聚乙二醇400溶液，上述修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：3ml；于4℃條件下交聯(lián)10h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法：將改性木瓜蛋白酶溶于蒸餾水中，接著加入檸檬酸和卡波姆940攪拌溶解后，加入ph值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ph值至6，所述ph值調(diào)節(jié)劑為10％(w/v)氫氧化鈉溶液，即得。實(shí)施例2、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑由以下組分及其重量百分比組成：改性木瓜蛋白酶8％、檸檬酸10％、卡波姆9402％和蒸餾水80％；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為95μmol/l的二酰胺溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：10ml；靜置12min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.04mol/l，ph值為7.5的tris-鹽酸緩沖液，上述修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置30min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的聚乙二醇400溶液，上述修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：4ml；于4℃條件下交聯(lián)12h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。實(shí)施例3、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑由以下組分及其重量百分比組成：改性木瓜蛋白酶14％、檸檬酸8％、卡波姆9401％和蒸餾水77％；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為100μmol/l的二酰胺溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：12ml；靜置15min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.06mol/l，ph值為8的tris-鹽酸緩沖液，上述修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：2ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置35min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20％的聚乙二醇400溶液，上述修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：5ml；于4℃條件下交聯(lián)14h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。實(shí)施例4、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑由以下組分及其重量百分比組成：改性木瓜蛋白酶8％、檸檬酸10％、羧甲基纖維素鈉2％和蒸餾水80％；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為95μmol/l的二酰胺溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：10ml；靜置12min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.04mol/l，ph值為7.5的tris-鹽酸緩沖液，上述修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置30min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的聚乙二醇400溶液，上述修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：4ml；于4℃條件下交聯(lián)12h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法：將改性木瓜蛋白酶溶于蒸餾水中，接著加入檸檬酸和羧甲基纖維素鈉攪拌溶解后，加入ph值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ph值至6，所述ph值調(diào)節(jié)劑為10％(w/v)氫氧化鈉溶液，即得。對(duì)比例1、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的組分及其重量百分比如實(shí)施例2；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為95μmol/l的5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：10ml；靜置12min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.04mol/l，ph值為7.5的tris-鹽酸緩沖液，上述修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置30min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的聚乙二醇400溶液，上述修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：4ml；于4℃條件下交聯(lián)12h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述步驟s1中將二酰胺溶液替換為5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)溶液。對(duì)比例2、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的組分及其重量百分比如實(shí)施例2；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1將木瓜蛋白酶，加入濃度為0.04mol/l，ph值為7.5的tris-鹽酸緩沖液，上述木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置30min后，離心，取沉淀物，得木瓜蛋白酶聚體；s2取步驟s1得到的木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的聚乙二醇400溶液，上述木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：4ml；于4℃條件下交聯(lián)12h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，沒(méi)有對(duì)木瓜蛋白酶進(jìn)行二酰胺溶液處理。對(duì)比例3、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的組分及其重量百分比如實(shí)施例2；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為95μmol/l的二酰胺溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：10ml；靜置12min，得修飾木瓜蛋白酶；s2將步驟s1得到的修飾木瓜蛋白酶，加入濃度為0.04mol/l，ph值為7.5的tris-鹽酸緩沖液，上述修飾木瓜蛋白酶與tris-鹽酸緩沖液的固液比為1mg：1ml，于室溫下邊攪拌邊加入氯化鈉至飽和狀態(tài)使游離酶沉淀，靜置30min后，離心，取沉淀物，得修飾木瓜蛋白酶聚體；s3取步驟s2得到的修飾木瓜蛋白酶聚體加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的戊二醇溶液，上述修飾木瓜蛋白酶聚體與聚乙二醇400溶液的固液比為1mg：4ml；于4℃條件下交聯(lián)12h，即得。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述步驟s3中將聚乙二醇400溶液替換為戊二醇溶液。對(duì)比例4、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的組分及其重量百分比如實(shí)施例2；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法為：s1取木瓜蛋白酶，加入濃度為95μmol/l的二酰胺溶液，上述木瓜蛋白酶與二酰胺溶液的固液比為1mg：10ml；靜置12min，得修飾木瓜蛋白酶。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，沒(méi)有對(duì)木瓜蛋白酶進(jìn)行交聯(lián)處理。對(duì)比例5、一種含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑由以下組分及其重量百分比組成：改性木瓜蛋白酶10％、卡波姆9404％和蒸餾水86％；所述改性木瓜蛋白酶的制備方法與實(shí)施例2類似。所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的制備方法與實(shí)施例1類似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑不含有檸檬酸。試驗(yàn)例一、改性木瓜蛋白酶的活性測(cè)試試驗(yàn)1、試驗(yàn)材料：采用實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、對(duì)比例1、對(duì)比例2、對(duì)比例3和對(duì)比例4的改性木瓜蛋白酶的制備方法制備得到的改性木瓜蛋白酶，ultrospec2100型紫外分光光度計(jì)。2、試驗(yàn)方法：采用國(guó)際gb/t23527-2009規(guī)定的方法進(jìn)行測(cè)定，其中是以酪蛋白為底物，測(cè)定改性木瓜蛋白酶的酶活性，酶活力單位定義為：在測(cè)定條件下每分鐘水解酪蛋白釋放出的三氯乙酸可溶物在280nm處的消光值相當(dāng)于濃度為1μg/ml酪氨酸消光時(shí)所需的酶量，為一個(gè)酶活力單位(u)。稱取采用實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、對(duì)比例1、對(duì)比例2、對(duì)比例3和對(duì)比例4的改性木瓜蛋白酶的制備方法制備得到的改性木瓜蛋白酶1.0005g，稀釋倍數(shù)為250，計(jì)算改性木瓜蛋白酶的酶活力。3、試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。表1改性木瓜蛋白酶的活性測(cè)試試驗(yàn)數(shù)據(jù)組別吸光度酶活力(μ/g)實(shí)施例1組0.70811560實(shí)施例2組0.73513035實(shí)施例3組0.69910840實(shí)施例4組0.67110345對(duì)比例1組0.6208207對(duì)比例2組0.5997351對(duì)比例3組0.6448524對(duì)比例4組0.6018036由表1可知，采用本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3的改性木瓜蛋白酶的制備方法制備得到的改性木瓜蛋白酶的酶活力大于11840μ/g，而對(duì)比例1-4組制備得到的改性木瓜蛋白酶的酶活力與本發(fā)明實(shí)施例1-3相比，至少降低了32％。說(shuō)明本發(fā)明將木瓜蛋白酶先進(jìn)行二酰胺溶液處理，接著進(jìn)行聚乙二醇400溶液交聯(lián)，可以有效的提高木瓜蛋白酶的酶活性。試驗(yàn)例二、含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑對(duì)牙齒的影響試驗(yàn)1、試驗(yàn)材料：實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、對(duì)比例1、對(duì)比例2、對(duì)比例3和對(duì)比例4制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑。2、試驗(yàn)方法：參考l.e.bertassoniandg.w.marshall在威利期刊公司(wileyperiodicals,inc.)發(fā)表的題目為“papain-geldegradesintactnonmineralizedtypeicollagenfibrils(木瓜蛋白酶凝膠可降解完整的非礦化i型膠元纖維)”的文章(scanningvol.31,253–258(2009))中的方法對(duì)健康牙本質(zhì)進(jìn)行機(jī)械性能測(cè)試，檢測(cè)并記錄第3次涂布凝膠后的牙本質(zhì)的組織彈性模量(e)和硬度(h)。3、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。表2含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑對(duì)牙齒的影響試驗(yàn)組別eh(gpa)正常牙本質(zhì)組19.8±2.10.8±0.09實(shí)施例1組18.4±2.20.72±0.08實(shí)施例2組19.6±1.90.76±0.1實(shí)施例3組18.1±2.30.71±0.09實(shí)施例4組17.4±2.20.65±0.13對(duì)比例1組11.9±1.9**0.31±0.12**對(duì)比例2組10.2±2.4**0.45±0.2**對(duì)比例3組13.7±2.5**0.28±0.1**對(duì)比例4組10.9±2.3**0.36±0.2**注：與正常牙本質(zhì)組相比**p＜0.01。由表2可知，本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑對(duì)正常牙本質(zhì)涂布3次后，其牙本質(zhì)的機(jī)械性能基本無(wú)變化，而對(duì)比例1-4制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑對(duì)正常牙本質(zhì)涂布3次后，與正常牙本質(zhì)組相比，其牙本質(zhì)的組織彈性模量(e)和硬度(h)極顯著(p＜0.01)的降低，說(shuō)明本發(fā)明提供的改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑對(duì)牙齒沒(méi)有傷害作用，具有較高的安全性，適合長(zhǎng)期使用。試驗(yàn)例三、含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)1、試驗(yàn)材料：實(shí)施例2和對(duì)比例5制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑。2、試驗(yàn)方法：將實(shí)施例2和對(duì)比例5制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑采用鋁箔袋+紙盒包裝，在溫度為25±2℃，相對(duì)濕度為60％±10％，進(jìn)行6個(gè)月溫室留樣試驗(yàn)，對(duì)樣品的外觀、重量差異、微生物限度進(jìn)行考察測(cè)定。3、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如表3和表4所示。表3實(shí)施例2制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)表4對(duì)比例5制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)由表3和表4可知，本發(fā)明制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑在溫度為25±2℃，相對(duì)濕度為60％±10％的條件下保存6個(gè)月，其外觀、重量差異、微生物限度均符合規(guī)定，具有較高的穩(wěn)定性。而沒(méi)有添加檸檬酸的對(duì)比例5制備得到的含改性木瓜蛋白酶的口腔凝膠劑在溫度為25±2℃，相對(duì)濕度為60％±10％的條件下保存6個(gè)月后開(kāi)始出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題，嚴(yán)重影響口腔凝膠劑的功效。當(dāng)前第1頁(yè)12