本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體。
背景技術(shù)：
肺癌是目前常見的惡性腫瘤之一，在全球范圍內(nèi)，肺癌的發(fā)病率和死亡率都呈上升態(tài)勢(shì)，這種趨勢(shì)在中國(guó)等發(fā)展中國(guó)家尤為顯著。在我國(guó)，肺癌的發(fā)病率和死亡率已居所有惡性腫瘤之首，其中男性發(fā)病率和死亡率均居第一位，女性發(fā)病率居第二位，僅次于乳腺癌，死亡率則居第一位。為了控制肺癌發(fā)病率和死亡率的增長(zhǎng)，我國(guó)衛(wèi)生部已經(jīng)將肺癌列為癌癥防治的非重點(diǎn)。
靶向給藥系統(tǒng)是指將藥物最大限度地輸送至靶器官或者靶細(xì)胞，從而減小對(duì)非靶器官、非靶單位的影響，達(dá)到降低全身毒副作用，提高療效的目的。目前現(xiàn)有技術(shù)中靶向給藥系統(tǒng)包括物理化學(xué)靶向制劑、被動(dòng)靶向制劑、主動(dòng)靶向制劑以及雙重和多重靶向制劑。
其中主動(dòng)靶向給藥系統(tǒng)相較于物理化學(xué)靶向制劑和被動(dòng)靶向制劑具有更為廣泛的應(yīng)用。主動(dòng)靶向給藥系統(tǒng)主要是指利用細(xì)胞特異性配體作為導(dǎo)向物質(zhì)，或者是利用細(xì)胞表面抗原與特異性抗體結(jié)合力，以癌表皮細(xì)胞為免疫原，通過對(duì)特異性受體或者特異性抗原的結(jié)合，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向作用。
脂質(zhì)體是一種類似生物膜結(jié)構(gòu)的雙分子囊泡。子20世界60年代應(yīng)該學(xué)著首次報(bào)道脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)一來，脂質(zhì)體得到了越來越多的重視。1971年英國(guó)科學(xué)家rymen等人開始將脂質(zhì)體作為藥物載體，使其在姚旭額領(lǐng)域中得到了廣泛應(yīng)用，迅速發(fā)展為新型藥物輸送系統(tǒng)。脂質(zhì)體具有長(zhǎng)效、降低毒性及保護(hù)包封藥物的優(yōu)點(diǎn)。
多西紫杉醇（docetaxe1dtx）是繼紫杉醇后有一種抗癌藥物。該藥物的作用機(jī)制是提高加強(qiáng)微管蛋白聚合作用和抑制微管散聚作用，組織細(xì)胞于g和m期，從而抑制癌細(xì)胞的有絲分裂和增殖（f.v.fossellaetal.,phaseⅱstudyofdocetaxelforadvancedormetastaticplatinum-refractorynon-small-celllungcancer.journalofclinicaloncology,1995,13,645-651）。于紫杉醇相比，在體外抗癌活性試驗(yàn)中，已證實(shí)多西紫杉醇的活性是紫杉醇的1.3~12倍（s.noguchi,predictivefactorsforresponsetodocetaxelinhumanbreastcancers.cancerscience,2006,97,813-820）。
目前多西紫杉醇已獲得fda批準(zhǔn)用于臨床上治療乳腺癌、卵巢癌、肺小細(xì)胞癌和前列腺癌等。但是，多西紫杉醇在水中的溶解性較差（小于1μg/ml），極大的影響了藥效的發(fā)揮。目前現(xiàn)有技術(shù)中大部分是通過吐溫-80增溶，經(jīng)13%的乙醇稀釋后注射使用。但是吐溫-80具有溶血性且粘度較大，在臨床應(yīng)用中，這種制劑具有外周神經(jīng)毒性和肌肉骨骼毒性，且容易引起過敏反應(yīng)。
同時(shí)，該類抗癌藥物靶向性不強(qiáng)，在體內(nèi)正常器官和組織中有較多的分布，副作用大。因此，開發(fā)靶向性強(qiáng)的多西紫杉醇制劑對(duì)于提高這類抗癌藥物的應(yīng)用來說具有重要意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對(duì)目前多西紫杉醇水溶性差，在臨床應(yīng)用中毒副作用大的問題，提供了一種抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體是以多西紫杉醇為主藥，通過復(fù)配增溶劑增溶，并結(jié)合脂質(zhì)體輔材制備得到的具有靶向性的脂質(zhì)體組合物；；其中復(fù)配增溶劑是由聚乙二醇400、三氯叔丁醇、叔丁醇按照5-10:100-500:200-500的混合比例制備得到。
該脂質(zhì)體的制備方法如下：
（1）依次將氫化大豆磷脂、膽固醇、多西紫杉醇、賦形劑溶于復(fù)配增溶劑中，每次添加前都要保證上一種化合物已經(jīng)完全溶解；
（2）將步驟（1）中獲得的溶液溶解于乙醚中，加入一定體積的pbs，冰水浴中超聲攪拌，形成乳劑，然后采用旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)的方式在75℃的條件下去除乙醚溶劑，形成懸液；
（3）分裝在西林瓶中，冷凍干燥，西林瓶中通入氬氣，壓蓋密封。
優(yōu)選地，步驟（1）中，賦形劑為聚乙烯吡咯酮與聚乙二醇2000按照重量比4:1混合形成的混合物。
更為優(yōu)選地，步驟（1）中，化合物是在攪拌條件下加入，攪拌速率為20~40r/min。
更為優(yōu)選地，氫化大豆磷脂、膽固醇、多西紫杉醇、賦形劑、復(fù)配增溶劑的重量比為10:3:1:40：500。
同時(shí)，更為優(yōu)選地，步驟（2）中pbs的加入量為乙醚溶液的15倍體積。
與原料藥相比，本發(fā)明公開的抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體可以顯著提高多西紫杉醇的溶解度，同時(shí)利用脂質(zhì)體的給藥方式可以改善多西紫杉醇的藥效，提高其對(duì)腫瘤的抑制作用。
附圖說明
圖1為實(shí)施例4的結(jié)果示意圖。
具體實(shí)施方式
為了更好的理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述。
要聲明的是，除非有特殊說明，否則本發(fā)明實(shí)施例中所用的試劑、設(shè)備等均為市售產(chǎn)品。
實(shí)施例1
按照如下方法制備抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體：
（1）依次將氫化大豆磷脂10g、膽固醇3g、多西紫杉醇1g、賦形劑40g溶于復(fù)配增溶劑500g中，每次添加前都要保證上一種化合物已經(jīng)完全溶解；
其中賦形劑包括32g聚乙烯吡咯酮與8g聚乙二醇2000，復(fù)配增溶劑包括聚乙二醇4007g、三氯叔丁醇300g、叔丁醇193g；
（2）將步驟（1）中獲得的溶液溶解于乙醚中，加入15000ml的pbs，冰水浴中超聲攪拌，形成乳劑，然后采用旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)的方式在75℃的條件下去除乙醚溶劑，形成懸液；
（3）分裝在西林瓶中，冷凍干燥，西林瓶中通入氬氣，壓蓋密封。
實(shí)施例2
按照如下方法制備抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體：
（1）依次將氫化大豆磷脂10g、膽固醇3g、多西紫杉醇1g、賦形劑40g溶于復(fù)配增溶劑500g中，每次添加前都要保證上一種化合物已經(jīng)完全溶解；
其中賦形劑包括32g聚乙烯吡咯酮與8g聚乙二醇2000，復(fù)配增溶劑包括聚乙二醇40010g、三氯叔丁醇303g、叔丁醇187g；
（2）將步驟（1）中獲得的溶液溶解于乙醚中，加入15000ml的pbs，冰水浴中超聲攪拌，形成乳劑，然后采用旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)的方式在75℃的條件下去除乙醚溶劑，形成懸液；
（3）分裝在西林瓶中，冷凍干燥，西林瓶中通入氬氣，壓蓋密封。
實(shí)施例3
按照如下方法制備抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體：
（1）依次將氫化大豆磷脂10g、膽固醇3g、多西紫杉醇1g、賦形劑40g溶于復(fù)配增溶劑500g中，每次添加前都要保證上一種化合物已經(jīng)完全溶解；
其中賦形劑包括32g聚乙烯吡咯酮與8g聚乙二醇2000，復(fù)配增溶劑包括聚乙二醇4005g、三氯叔丁醇308g、叔丁醇187g；
（2）將步驟（1）中獲得的溶液溶解于乙醚中，加入15000ml的pbs，冰水浴中超聲攪拌，形成乳劑，然后采用旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)的方式在75℃的條件下去除乙醚溶劑，形成懸液；
（3）分裝在西林瓶中，冷凍干燥，西林瓶中通入氬氣，壓蓋密封。
實(shí)施例4
將大鼠分為2組，每組5只，體重在250~260g。實(shí)施例1中的抗肺癌多西紫杉醇主動(dòng)靶向脂質(zhì)體作為實(shí)驗(yàn)組，多西紫杉醇作為對(duì)照組，兩組的給藥劑量均為10mg/kg，每只大鼠注射1ml，給藥方式為尾靜脈注射。
分別于給藥后5min、15min、30min、60min、120min、240min、480min、720min、1440min、2880min，通過眼眶取血的方式取血0.4ml，在離心機(jī)400rpm離心處理10min后，取血漿0.2mnl，采用高效液相色譜測(cè)定其中多西紫杉醇的濃度，結(jié)果如圖1所示，多西紫杉醇的需要濃度變化快，下降速度快，而本發(fā)明公開的脂質(zhì)體較多西紫杉醇單用藥物來說變化速率慢，消除速度慢，說明具有顯著的長(zhǎng)循環(huán)效果。
實(shí)施例5
選用裸鼠（balb/c）30只雌雄各半，每只鼠的重量在28-30g，分為兩組，分別標(biāo)記為多西紫杉醇組和多西紫杉醇脂質(zhì)體組，瘤型為a549。將a549細(xì)胞株接種于裸鼠體內(nèi)，成為裸鼠人體肺癌移植瘤模型。當(dāng)皮下瘤體積為50-100mm3時(shí)，開始尾靜脈給藥，給藥量均為10mg/kg。
將多西紫杉醇脂質(zhì)體組中多西紫杉醇在心、腎、脾、肺、肝中的分布情況與多西紫杉醇組中多西紫杉醇在心、腎、脾、肺、肝中的分布情況進(jìn)行比較，除脾組織中幾乎無變化外，心組織中下降83.15%，肝組織中下降58.96%，腎組織中下降35.19%，而對(duì)于肺靶標(biāo)來說肺組織中增加210.68%，腫瘤組織中增加35.78%，充分顯示了本發(fā)明中公開的脂質(zhì)體對(duì)藥物分布的靶向調(diào)節(jié)作用，預(yù)示這一藥劑將會(huì)提高肺癌的治療效果，并降低毒副作用。