本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種人參皂苷rb1的新用途，具體為人參皂苷rb1在制備治療免疫性復發(fā)性流產(chǎn)藥物中的用途及相關(guān)藥物組合物。

背景技術(shù)：

自然流產(chǎn)通常是指妊娠不足28周、胎兒體重不足1000g而發(fā)生的妊娠失敗。復發(fā)性流產(chǎn)(rsa)一般指與同一配偶發(fā)生連續(xù)2次或2次以上的自然流產(chǎn)。目前已經(jīng)明確的復發(fā)性流產(chǎn)病因包括:患者生殖道畸形等解剖因素(0.5％)、內(nèi)分泌因素(15％)、感染性因素(15％)、自身抗體因素(15％)、染色體因素(1％),其余約50％左右原因不明，其中相當一部分與母胎免疫耐受機制紊亂有關(guān)。目前對于這類復發(fā)性流產(chǎn)的治療主要有應(yīng)用配偶或供者淋巴細胞免疫、靜脈輸注免疫球蛋白及中醫(yī)藥治療等措施,然而不同研究者的結(jié)論不一，療效各異；且治療機制尚未明確，探討在妊娠失敗機制并制定治療措施，具有理論指導意義及臨床應(yīng)用價值。

國內(nèi)外相關(guān)研究表明，妊娠早期th1、th2細胞因子失衡，可誘發(fā)流產(chǎn)。th1型細胞因子(tnf-α，inf-γ等)主要介導細胞免疫和局部炎癥反應(yīng)，參與免疫應(yīng)答，與免疫損傷有關(guān)。th2型細胞因子(il-4、il-10等)主要促進b細胞增殖和抗體生成、介導體液免疫，參與介導免疫耐受的形成。

人參皂苷rb1(grb1)為中藥人參的主要活性成分，具有廣泛的藥理作用。多年研究顯示，人參皂苷rb1可通過調(diào)節(jié)細胞因子tnf-α、inf-γ、il-6等細胞因子水平，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及抗腫瘤、抗肝臟熱缺血再灌注損傷、降血糖等方面均有較好的作用。但目前尚未有將人參皂苷用于治療復發(fā)性流產(chǎn)的。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種人參皂苷rb1的新用途，達到有效治療復發(fā)性流產(chǎn)的目的。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

人參皂苷rb1，英文名稱ginsenosiderb1，縮寫grb1，分子式為c54h92o23，分子量1109.29，為五加科植物人參的干燥根提取得到的一種活性物質(zhì)，屬于四環(huán)三萜皂苷，具有中樞神經(jīng)抑制和安定作用?；瘜W式如下所示：

本發(fā)明提供人參皂苷rb1在治療復發(fā)性流產(chǎn)藥物制備中的用途。

母胎界面來源的炎性細胞因子導致患者的血管內(nèi)皮細胞的損傷,這一結(jié)論已經(jīng)得到公認。目前將th1/th2細胞分泌的細胞因子稱th1/th2細胞因子。th1型細胞因子對著床、滋養(yǎng)細胞生長、胚胎發(fā)育和胎兒生存是有害,而th2型細胞因子則抑制th1型細胞因子,防止對滋養(yǎng)細胞和胎兒的繼發(fā)損傷,使妊娠得以成功進行。

人參皂苷rb1能通過抑制炎性細胞因子tnf-α、il-6等的分泌，調(diào)節(jié)母胎界面免疫平衡狀態(tài)，從而維持妊娠。本發(fā)明通過動物實驗證明人參皂苷rb1對于復發(fā)性流產(chǎn)具有治療效果。

本發(fā)明還提供一種治療復發(fā)性流產(chǎn)藥物組合物，所述藥物組合物中包括人參皂苷rb1和藥學上可接受的載體。

本發(fā)明的治療復發(fā)性流產(chǎn)藥物組合物可制成適用于口服給藥、皮膚給藥、靜脈注射給藥、舌下給藥等各種藥物劑型。

本發(fā)明的藥物組合物將人參皂苷rb1，添加適量賦形劑實現(xiàn)以固體、溶液、乳化液、分散體、膠束、脂質(zhì)體等形式使用，具體使用形式包括片劑、顆粒劑、丸劑、膠囊劑、含片、水懸劑或油懸劑、酊劑、可分散粉劑、溶液劑、乳劑、懸浮劑及其他適宜形式?？捎玫乃帉W上可接受的載體包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、蜂蜜、糊精、微晶纖維素、阿拉伯膠、明膠、甘露糖醇、淀粉糊、硬脂酸鎂、滑石、硅膠、以及其他適用于以固體、半固體或液體形式生產(chǎn)制備的載體。另外可以使用輔助試劑、穩(wěn)定劑、增稠劑，還可以選用一種或多種調(diào)味劑、著色劑、保鮮劑等來提供適口性好的藥物制品。優(yōu)選的，選擇微晶纖維素、糊精、乳糖、硬脂酸鎂等作為藥物輔料。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本技術(shù)方案具有以下優(yōu)點：

本發(fā)明通過取人參皂苷rb1,用生理鹽水稀釋成不同濃度的注射液，對復發(fā)性流產(chǎn)動物模型進行體內(nèi)和體外實驗，結(jié)果證實人參皂苷rb1具有對復發(fā)性流產(chǎn)具有治療作用。人參皂苷rb1作為一種新的可用于制備治療復發(fā)性流產(chǎn)藥物，給復發(fā)性流產(chǎn)病人帶來新的希望。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步說明。

實施例1：

體內(nèi)實驗

本發(fā)明中使用免疫性流產(chǎn)小鼠模型，將cba×dba/2小鼠作為妊娠失敗模型，cba×balb/小鼠作為妊娠成功模型。

將cba×dba/2和cba×bal分別分為生理鹽水對照組和grb1實驗組，其中g(shù)rb1注射液的濃度分別為20mg/kg、40mg/kg和80mg/kg，每組小鼠10只。

于孕第1天注射，連續(xù)注射8天，于孕11天處死小鼠同時收集胚胎、胎盤及蛻膜，計數(shù)其胚胎吸收率，用elisa法分析蛻膜組織勻漿th1/th2細胞因子(tnf-α、ifn-γ、il-4)。結(jié)果顯示：

1、于孕早期注射grb1對正常妊娠模型存活胎鼠及其胎盤重量無顯著影響，相反妊娠失敗模型存活胎鼠及其胎盤重量有增加趨勢。

2、20mg/kg，40mg/kg,80mg/kggrb1可使cba/j×dba/2小鼠自然流產(chǎn)模型妊娠失敗率從29.3％％分別降至12.86％，6.25％及5.14％，差異有顯著性(p＜0.01)，其中40mg/kg、80mg/kggrb1組無顯著性差異。

3、與正常妊娠組蛻膜tnf-α、ifn-γ、il-4(123±12.4、102.6±14.9、6.8±2.4(pg/ml))相比，妊娠失敗模型組tnf-α、ifn-γ(187.5±28.5、143.7±16.4(pg/ml))顯著增加(p<0.05)；il-4(4.5±1.2(pg/ml))顯著降低(p<0.05)，呈明顯th1優(yōu)勢。連續(xù)8天注射grb1不改變正常妊娠模型母-胎界面th2型免疫優(yōu)勢(131.3±26.8、99.8±18.4、7.5±2.7(pg/ml))；相反20mg/kg，40mg/kg,80mg/kggrb1均可使妊娠失敗模型母-胎界面不利于妊娠維持的th1型細胞因子ifn-γ、tnf-α(135.2±23.1、112.4±12.3；122.8±16.7、111.2±10.5；119.6±19.8、109.4±10.9(pg/ml))水平降低(p＜0.05)，而有利于妊娠維持的th2型細胞因子il-4(6.9±1.3、7.5±2.4、7.1±2.1(pg/ml))水平升高(p＜0.05)，三種不同劑量grb1組細胞因子無顯著性差異。

結(jié)果表明本發(fā)明grb1藥物可使小鼠妊娠失敗模型孕早期母-胎界面趨向于正常妊娠所特有地th2型偏倚，差異有顯著性(p＜0.05)。

體外實驗

本發(fā)明中使用計劃生育門診人流產(chǎn)蛻膜組織(經(jīng)倫理委員會討論通過、患者同意)，建立原代蛻膜細胞模型，分為生理鹽水對照組和grb1實驗組，其中g(shù)rb1液的作用濃度分別為25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml，培養(yǎng)48小時，收集上清液，elisa法檢測tnf-α、ifn-γ、il-4濃度。結(jié)果顯示：與對照組tnf-α、ifn-γ、il-4(15.85±2.23、13.69±2.35、1.78±0.48(pg/ml))相比，25、50、100μg/mlgrb1組tnf-α、ifn-γ(9.69±1.98、9.74±1.45；7.78±1.65、8.23±1.76；7.99±2.01、8.78±1.32(pg/ml))顯著下降(p<0.05)，il-4(3.21±0.23、4.35±0.45、4.56±0.19(pg/ml))顯著增加(p<0.05)，中高劑量組無顯著性差異。

本結(jié)果表明本發(fā)明grb1藥物體外可使人母胎界面蛻膜組織細胞因子分泌趨向th2型偏倚，差異有顯著性(p＜0.05)。

本發(fā)明雖然已以較佳實施例公開如上，但其并不是用來限定本發(fā)明，任何本領(lǐng)域技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可以利用上述揭示的方法和技術(shù)內(nèi)容對本發(fā)明技術(shù)方案做出可能的變動和修改，因此，凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化及修飾，均屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護范圍。