本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種金銀花炮制的雷公藤中藥飲片。
背景技術(shù)：
雷公藤為衛(wèi)矛科植物雷公藤(tripterygiumwilfordiihook.f.)的干燥根或根的木質(zhì)部，性寒，味苦、辛，歸肝、腎經(jīng)，功效祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、消腫止痛和殺蟲解毒，具有抗癌、抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、抗糖尿病腎病、免疫抑制等多種生物活性，療效卓著卻毒性甚大，成為近半個世紀以來報道發(fā)生中毒事件最多的中草藥之一，尤其突出表現(xiàn)在肝毒性和腎毒性。
中醫(yī)藥理論及臨床認為，金銀花為清熱解毒良藥，當(dāng)一些藥食中毒事故發(fā)生時，常將金銀花煎湯作為解毒備選藥物使用。
炮制是中醫(yī)重要的用藥特色，通過恰當(dāng)炮制可以起到減毒或(和)增效的效果。以一種藥物恰當(dāng)炮制另一種藥物，以起到炮制減毒或(和)增效的目的，自古有之，如姜半夏、蜜百合、萸黃連等等。本發(fā)明首次選取解毒良藥金銀花為主要輔料藥，旨在開發(fā)低毒高效的雷公藤中藥飲片，為雷公藤臨床安全有效用藥奠定基礎(chǔ)。但至今未見有金銀花炮制雷公藤飲片的公開報導(dǎo)。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種金銀花炮制的雷公藤中藥飲片，可有效解決雷公藤療效卓著卻毒性甚大的用藥安全問題。
本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，該飲片由金銀花和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰3-12作原料制成，首先將金銀花加入金銀花重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.025-0.1g/ml的金銀花水煎液；將雷公藤飲片加入金銀花水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金銀花炮制的雷公藤飲片。
本發(fā)明原料豐富，制備方法簡單，有效降低了雷公藤的毒性，提高了療效和藥用價值，開拓了雷公藤的使用價值，有顯著的經(jīng)濟和社會效益。
具體實施方式
以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的具體實施方式作詳細說明。
實施例1
本發(fā)明在具體實施中，該飲片由金銀花和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰3作原料制成，首先將金銀花加入金銀花重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.1g/ml的金銀花水煎液；將雷公藤飲片加入金銀花水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金銀花炮制的雷公藤飲片。
實施例2
本發(fā)明在具體實施中，該飲片由金銀花和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰6作原料制成，首先將金銀花加入金銀花重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.05g/ml的金銀花水煎液；將雷公藤飲片加入金銀花水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金銀花炮制的雷公藤飲片。
實施例3
本發(fā)明在具體實施中，該飲片由金銀花和雷公藤飲片以質(zhì)量比為1︰12作原料制成，首先將金銀花加入金銀花重量6-8倍的水煎煮兩次，合并兩次煎液，濃縮至濃度為相當(dāng)于含生藥量0.025g/ml的金銀花水煎液；將雷公藤飲片加入金銀花水煎液中，置于不銹鋼鍋內(nèi)，用文火煮至藥透汁盡，取出，置于遠紅外恒溫干燥箱內(nèi)60℃干燥，成金銀花炮制的雷公藤飲片。
本發(fā)明金銀花炮制的雷公藤飲片具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、消腫止痛和殺蟲解毒，具有抗癌、抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、抗糖尿病腎病、免疫抑制等多種生物活性的功效，并經(jīng)實驗取得了非常好的有益技術(shù)效果，有關(guān)實驗資料如下：
1.1實驗材料與方法
1.1.1受試動物
昆明(km)小鼠，雄性，spf級，體質(zhì)量18～22g，由河南省實驗動物中心提供[scxk(豫)2015-0004]。s180荷瘤腹水瘤小鼠，由中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所提供。
1.1.2受試藥物
取雷公藤生品及本發(fā)明金銀花炮制的雷公藤飲片，置于圓底燒瓶中，分別加入10倍量的乙酸乙酯或20％～95％乙醇，浸泡1小時，進行回流提取3次，每次2小時，4000r/min離心分離上清液，合并3次上清液，減壓回收乙酸乙酯至無乙酸乙酯味，或減壓回收乙醇至無醇味，減壓干燥(60℃)，得雷公藤生品及金銀花炮制飲片的乙酸乙酯或20％～95％乙醇的提取物浸膏受試藥物。
1.2實驗方法
1.2.1腫瘤細胞的傳代與接種(s180實體瘤)
s180荷瘤小鼠生長7d，頸椎脫臼處死荷瘤小鼠，用醫(yī)用酒精和碘伏對其腹部進行兩次消毒，無菌抽取s180荷瘤小鼠乳白色腹水至無菌ep管中(放置冰上備用)，立即加入預(yù)冷無菌生理鹽水稀釋2倍，從稀釋過的腫瘤細胞抽取0.2ml快速腹腔注射正常小鼠，常規(guī)飼養(yǎng)，觀察傳代荷瘤小鼠狀況，取9d生長旺盛的荷瘤小鼠，繼續(xù)傳代，根據(jù)實驗所需，決定所傳代數(shù)。
將生長7d旺盛的s180細胞種鼠頸椎脫臼處死，無菌取小鼠乳白色腹水，用無菌生理鹽水稀釋5倍。抽取腫瘤細胞懸液，無菌條件下將s180腫瘤細胞接種于小鼠右前肢腋窩部皮下，0.2ml/只。
1.2.2動物分組與給藥
于瘤細胞接種次日，將小鼠隨機分為7組：模型、模型+陽性藥5-氟尿嘧啶(5-fu，25mg/kg)、模型+雷公藤生品、模型+雷公藤炮制飲片a(金銀花/雷公藤＝1/3)、模型+雷公藤炮制飲片b(金銀花/雷公藤＝1/6)、模型+雷公藤炮制飲片c(金銀花/雷公藤＝1/12)組，另取10只正常動物作為正常對照組。
雷公藤生品及不同炮制品組均灌胃(ig)給藥(0.2ml/10g)，劑量均為60mg/kg(由預(yù)實驗確定)，模型組和正常對照組均ig等體積0.5％cmc-na，每日1次，連續(xù)14d。第15d摘眼球采血，取下瘤塊稱重，按公式計算抑瘤率。
1.2.3樣本的采集與處理
于第14d末次給藥24小時后，對小鼠進行摘眼球取血，取至一ep管中，做好相應(yīng)標記，于4℃冰箱中靜置30min，3000r/min離心15min，分離血清，分裝后于－20℃冰箱中保存?zhèn)溆?，測定血清肝功指標谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alt)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ast)、及腎功指標肌酐(cr)、尿素氮(bun)。
1.2.4實體瘤采集
末次給藥后禁食不禁水，摘眼球取血后，頸椎脫臼處死小鼠，立即剖開小鼠右腋下外皮，剪取實體瘤，用生理鹽水洗去血液與粘液，并用濾紙吸干后迅速稱重。腫瘤生長抑制率(inhibitionrate,ir)＝(1-實驗組平均瘤重/模型對照組平均瘤重)×100％。
1.2.5酶標儀檢測血液生化指標
實驗第15d處死小鼠后，取小鼠眼眶血清，測血清指標alt、ast、cr、bun，具體按南京建成生物工程研究所各類指標試劑盒說明書進行。
1.2.6統(tǒng)計學(xué)處理方法
數(shù)據(jù)分析用spss17.0醫(yī)用統(tǒng)計包進行數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料用平均數(shù)±標準差
1.3實驗結(jié)果
1.3.1本發(fā)明中藥飲片對腫瘤小鼠瘤重的影響
如表1所示，與模型組比較，陽性藥5-fu及本發(fā)明中藥飲片均可使腫瘤小鼠瘤重極顯著降低(p<0.01)，提示陽性藥及本發(fā)明中藥飲片在小鼠s180實體瘤實驗中均表現(xiàn)出了顯著抗腫瘤的作用；與雷公藤生品組比較，經(jīng)金銀花按照質(zhì)量比1:3～1:12炮制后，雷公藤各炮制飲片組小鼠瘤重均顯著降低(p<0.05或p<0.01)，腫瘤抑制率升高了13.80％～17.93％，其中以金銀花與雷公藤質(zhì)量比為1/12時抑瘤率升高最多，說明經(jīng)金銀花炮制后的產(chǎn)生的雷公藤飲片(金銀花/雷公藤＝1/3～1/12)抗腫瘤活性顯著升高了。進一步與陽性藥5-fu組比較后發(fā)現(xiàn)，質(zhì)量比在1/3～1/12時，與5-fu無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)，提示本發(fā)明炮制后飲片，抗腫瘤作用與5-fu相當(dāng)。
表1本發(fā)明中藥飲片對腫瘤小鼠瘤重的影響(n＝10，x±s)
與模型組比較，#p<0.01；與雷公藤生品比較，*p<0.05，**p<0.01
1.3.2本發(fā)明中藥飲片對腫瘤小鼠肝功、腎功的影響
如表2所示，與正常組比較，陽性藥5-fu及雷公藤生品飲片均可使s180實體瘤小鼠血清肝功指標alt和ast、腎功指標cr和bun顯著升高(p<0.05)，提示陽性藥5-fu及雷公藤生品飲片引起了腫瘤小鼠的肝毒性和腎毒性；與雷公藤生品組比較，經(jīng)金銀花按照質(zhì)量比1:3～1:12炮制后，雷公藤各炮制飲片組小鼠血清肝功指標alt和ast、腎功指標cr和bun均顯著降低(p<0.05或p<0.01)，說明經(jīng)金銀花炮制后的產(chǎn)生的雷公藤飲片(金銀花/雷公藤＝1/3～1/12)降低了雷公藤所致的肝毒和腎毒。
表2本發(fā)明中藥飲片對腫瘤小鼠肝功、腎功的影響(n＝10，
與正常組比較，&p<0.05；與模型組比較，#p<0.05；
與雷公藤生品組比較，*p<0.05，**p<0.01
上述試驗可以清楚的表明，以雷公藤生品飲片相比，經(jīng)金銀花炮制后的雷公藤飲片，不僅抗腫瘤作用提高了，而且肝毒和腎毒也降低了；該飲片作用與陽性藥5-fu相當(dāng)，而且避免了5-fu引起的肝毒和腎毒性。說明本發(fā)明中藥雷公藤飲片具有抗腫瘤低毒高效作用，開拓了雷公藤的安全高效用藥的藥用價值，為中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展做出創(chuàng)造性貢獻，有顯著的經(jīng)濟和社會效益。