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      一種具有雌激素樣作用的覆盆子黃酮類成分提取方法與流程

      文檔序號:11749256閱讀:487來源:國知局

      技術(shù)領(lǐng)域
      :本發(fā)明涉及中藥提取
      技術(shù)領(lǐng)域
      ,具體涉及一種具有雌激素樣作用的覆盆子黃酮類成分提取方法。
      背景技術(shù)
      ::覆盆子,又稱樹莓,薔薇科懸鉤子屬漿果植物。覆盆子屬于藥食兩用果實,富含氨基酸、礦質(zhì)元素、有機(jī)酸和維生素e等人體必需的營養(yǎng)物質(zhì),還含有黃酮、多糖、粗三萜等功能性物質(zhì),因此,覆盆子具有抗衰老、調(diào)節(jié)生殖系統(tǒng)、促進(jìn)細(xì)胞免疫功能以及減肥之功效,并具有優(yōu)異的抑菌和提高免疫力作用。黃酮類化合物是覆盆子代謝過程中產(chǎn)生的重要天然有機(jī)化合物,是覆盆子中主要活性成分之一,具有抗氧化、抑菌消炎、消除自由基、抗過敏、抗感染、抗突變、抗腫瘤等生理活性,且毒性極低,因此可用作食品、化妝品的天然添加劑或作為藥物藥效成分。要想從覆盆子中高效提取出高含量的黃酮類化合物需要借助適宜的提取方法,同時還需依靠合適的分離純化方法才能獲得高提取得率和高純度的覆盆子黃酮類成分。技術(shù)實現(xiàn)要素::本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種提取得率和純度高、分離純化操作簡便易行的具有雌激素樣作用的覆盆子黃酮類成分提取方法。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題采用以下的技術(shù)方案來實現(xiàn):一種具有雌激素樣作用的覆盆子黃酮類成分提取方法,包括如下步驟:(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡5-10min,并用3-5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5-10min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5-8倍的無水乙醇提取1-3h,并加入覆盆子干重0.5-1%的促提劑,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。所述促提劑由如下重量份數(shù)的原料制成:田菁膠/多聚谷氨酸3-5份、糯米粉2-3份、泊洛沙姆0.5-1份、羥乙基纖維素0.5-1份、聚乙二醇40000.1-0.3份、甘草酸二鉀0.05-0.1份、小蘇打粉0.05-0.1份,其制備方法為:向糯米粉中加入泊洛沙姆和甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入聚乙二醇4000和小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入田菁膠/多聚谷氨酸和羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過300目篩,即得促提劑。所述田菁膠/多聚谷氨酸由田菁膠和多聚谷氨酸復(fù)合而成,其制備方法為:將田菁膠和藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入多聚谷氨酸和橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機(jī)中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。所述田菁膠、藻酸丙二醇酯、多聚谷氨酸、橄欖油和水的重量比為3-5:0.5-1:2-3:0.1-0.3:25-30。所述聚酰胺柱由聚酰胺填充而成,所用聚酰胺是由己二酸和己二胺經(jīng)聚合反應(yīng)后再經(jīng)改性處理而制得,其具體制備方法為:將己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,然后加入n-羥甲基丙烯酰胺、雙季戊四醇和六羥甲基三聚氰胺六甲醚,升溫至125-130℃保溫研磨30min,所得混合物經(jīng)真空壓縮成塊,并于10-15℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。所述己二酸、己二胺、n-羥甲基丙烯酰胺、雙季戊四醇和六羥甲基三聚氰胺六甲醚的140-150:125-130:15-20:5-10:5-10。本發(fā)明的有益效果是:(1)利用醇提水沉法提高黃酮類成分的提取得率以及對雜質(zhì)起到粗分離的目的,同時促提劑的添加顯著提高黃酮類成分的提取得率,使提取得率達(dá)到25mg/g;(2)利用聚酰胺柱和葡聚糖凝膠柱進(jìn)行兩次純化,有效提高黃酮類成分的純度,使純度達(dá)到80%以上;(3)聚酰胺柱填充用聚酰胺經(jīng)上述改性處理后,在保留其對黃酮類化合物優(yōu)異吸附作用的同時改善其解吸能力,避免使用常規(guī)聚酰胺存在的解吸難致使黃酮類成分損失率高的問題;(4)通過上述提取方法提取所得覆盆子黃酮類成分具有植物雌激素的選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑作用,對雌激素具有雙向調(diào)節(jié)作用,不同于化學(xué)合成的雌激素藥物,不會增加乳腺癌、子宮癌的副作用。具體實施方式:為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解,下面結(jié)合具體實施例,進(jìn)一步闡述本發(fā)明。實施例1(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡10min,并用5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5倍的無水乙醇提取1.5h,并加入覆盆子干重0.5%的促提劑,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。促提劑的制備:向20g糯米粉中加入5g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入1g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入30g田菁膠/多聚谷氨酸和5g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過300目篩,即得促提劑。田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將50g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入30g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機(jī)中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。聚酰胺的制備:將150g己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加130g己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,然后加入20gn-羥甲基丙烯酰胺、5g雙季戊四醇和5g六羥甲基三聚氰胺六甲醚,升溫至125-130℃保溫研磨30min,所得混合物經(jīng)真空壓縮成塊,并于10-15℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。實施例2(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡10min,并用5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5倍的無水乙醇提取1.5h,并加入覆盆子干重0.5%的促提劑,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過300目篩,即得促提劑。田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機(jī)中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。聚酰胺的制備:將140g己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加125g己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,然后加入15gn-羥甲基丙烯酰胺、5g雙季戊四醇和5g六羥甲基三聚氰胺六甲醚,升溫至125-130℃保溫研磨30min,所得混合物經(jīng)真空壓縮成塊,并于10-15℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。對照例1(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡10min,并用5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5倍的無水乙醇提取1.5h,并加入覆盆子干重0.5%的促提劑,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。促提劑的制備:向30g糯米粉中加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過300目篩,即得促提劑。田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機(jī)中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。聚酰胺的制備:將140g己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加125g己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,然后加入15gn-羥甲基丙烯酰胺、5g雙季戊四醇和5g六羥甲基三聚氰胺六甲醚,升溫至125-130℃保溫研磨30min,所得混合物經(jīng)真空壓縮成塊,并于10-15℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。對照例2(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡10min,并用5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5倍的無水乙醇提取1.5h,并加入覆盆子干重0.5%的促提劑,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過300目篩,即得促提劑。田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機(jī)中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。聚酰胺的制備:將140g己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加125g己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,然后加入15gn-羥甲基丙烯酰胺、5g雙季戊四醇和5g六羥甲基三聚氰胺六甲醚,升溫至125-130℃保溫研磨30min,所得混合物經(jīng)真空壓縮成塊,并于10-15℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。對照例3(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡10min,并用5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5倍的無水乙醇提取1.5h,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。聚酰胺的制備:將140g己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加125g己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,然后加入15gn-羥甲基丙烯酰胺、5g雙季戊四醇和5g六羥甲基三聚氰胺六甲醚,升溫至125-130℃保溫研磨30min,所得混合物經(jīng)真空壓縮成塊,并于10-15℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。對照例4(1)清洗:將覆盆子放入清水中浸泡10min,并用5倍覆盆子干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;(2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的覆盆子用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,再利用粉碎機(jī)粉碎成粉末,過100目篩,即得覆盆子粉末;(3)醇提水沉:利用無水乙醇對上述所制覆盆子粉末回流提取三次,每次使用重量為覆盆子干重5倍的無水乙醇提取1.5h,并加入覆盆子干重0.5%的促提劑,合并濾液,將所得提取液減壓濃縮至比重達(dá)到1.15-1.18,再在攪拌下加入蒸餾水,直至沉淀不再增加,然后于0-5℃環(huán)境中密封靜置12h,過濾,即得水沉液;(4)一次純化:將所得水沉液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用蒸餾水沖洗至無色,控制出液速度在2ml/min;然后用70%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次純化液;(5)二次純化:將所得一次純化液經(jīng)濃縮后上葡聚糖凝膠柱,控制出液速度在0.5ml/min;再用10%乙醇沖洗雜質(zhì),控制出液速度在2ml/min;然后用85%乙醇洗脫,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次純化液;(6)濃縮干燥:將上述所得二次純化液減壓濃縮,并經(jīng)真空干燥后粉碎成粉末。促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過300目篩,即得促提劑。田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機(jī)中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機(jī)制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。聚酰胺的制備:將140g己二酸溶解于乙醇中,升溫至65℃后滴加125g己二胺的乙醇溶液,繼續(xù)升溫至回流狀態(tài)保溫反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻,過濾,所得濾渣用乙醇洗滌,烘干最后經(jīng)粉碎機(jī)制成顆粒狀。實施例3分別利用實施例1、實施例2、對照例1、對照例2、對照例3和對照例4所述方法對同批等量覆盆子進(jìn)行黃酮類成分進(jìn)行提取,測定其黃酮類成分的提取得率和純度,結(jié)果如表1所示。表1本發(fā)明黃酮類成分提取得率和純度項目實施例1實施例2對照例1對照例2對照例3對照例4提取得率25.8mg/g26.1mg/g24.2mg/g21.4mg/g17.8mg/g14.3mg/g純度83.5%82.4%80.3%76.5%73.1%71.6%實施例4測定實施例1、實施例2提取所得覆盆子黃酮類成分的雌激素樣作用。采用動物模型:未成熟小鼠、去卵巢小鼠、衰老大鼠模型分別模擬女性一生雌激素低下的三個生理階段??瞻讓φ战M(灌喂蒸餾水)、實施例1試驗組(灌喂實施例1所制黃酮類成分)、實施例2試驗組(灌喂實施例2所制黃酮類成分)、陽性對照組(灌喂尼爾雌醇),結(jié)果如表2、3、4所示。表2對未成熟小鼠靶器官的雌激素樣作用項目空白對照組實施例1實施例2陽性對照組劑量-5mg/kg5mg/kg0.5mg/kgn10101010動情期1101010動情期百分比10%100%100%100%子宮重量百分率0.936.086.135.25水?dāng)z取增加百分率2.615.875.985.76表3對成熟去卵巢小鼠靶器官的雌激素樣作用表4對衰老大鼠靶器官的雌激素樣作用項目空白對照組實施例1實施例2雌二醇劑量-5mg/kg5mg/kg0.5mg/kgn10101010子宮重量百分率0.490.530.510.61e2(pmol/l)21.6421.8322.0823.15以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解,本發(fā)明不受上述實施例的限制,上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理,在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下,本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn),這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。當(dāng)前第1頁12
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